Амид 8-амино-[1.2.4]триазоло-[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты и содержащее его лекарственное средство

Описываются амид 8-амино-[1,2,4]триазоло-[1,5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты общей формулы

где R¹ означает -NR'R", где R' и R" независимо друг от друга представляют собой низший алкил, -(CH₂)_n-С(O)NR^aR^b, -(СН₂)_n-пиридинил, -(СН₂)_n-фенил, -(CH₂)_n-CN, -(СН₂)_n-O-низший алкил или -(СН₂)_n-С₃-С₈циклоалкил, или R' и R" образуют вместе с атомом N пяти- или шестичленную неароматическую кольцевую систему, последняя может дополнительно содержать один гетероатом - О или S, и указанная кольцевая система может быть незамещенной или замещенной одним или двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, -C(O)NR^aR^b или группы -(СН₂)_n-О-низший алкил, и R^a и R^b каждый независимо представляет собой водород или низший алкил; R² - фенил или гетероарил, представляющий собой пиридинил, фуранил, возможно замещенный галоидом или низшим алкилом, тиофенил, возможно замещенный низшим алкилом, или тиазолилрадикал; n означает 0, 1, 2 или 3; а также его фармацевтически приемлемые соли. Соединения могут быть использованы для лечения заболевания, ассоциированного с А2 рецептором аденозина. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 1 табл.

 

Настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы

в которой

R¹ означает группу -NR'R", в которой R' и R" независимо друг от друга представляют собой низший алкил, -(CH₂)_n-C(O)NR^aR^b, -(СН₂)_n-гетероарил, -(СН₂)_n-арил, -(CH₂)_n-CN, -(СН₂)_n-O-низший алкил или -(CH₂)_n-циклоалкил, или R' и R" образуют вместе с атомом N пяти- или шестичленную неароматическую кольцевую систему, последняя может дополнительно содержать один гетероатом О или S, и указанная кольцевая система может быть незамещенной или замещенной одним или двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, -C(O)NR^aR^b или -(СН₂)_n-O-низшего алкила, и

R^aR^b независимо друг от друга представляют собой водород или низший алкил;

R² представляет собой арил или гетероарил, представляющий собой пиридинил, фуранил, возможно замещенный низшим алкилом или галогеном, тиофенил, возможно замещенный низшим алкилом, или тиазолилрадикал;

n равно 0, 1, 2 или 3;

а также к их фармацевтически приемлемым солям.

Неожиданно было обнаружено, что соединения общей формулы I являются лигандами рецептора аденозина.

Аденозин является модулятором множества физиологических функций посредством взаимодействия со специфическими рецепторами поверхности клетки. Обзор возможного использования рецепторов аденозина в качестве мишеней для лекарственных средств впервые был сделан в 1982 году. Как по своей структуре, так и по метаболизму аденозин близок к биологически активным нуклеотидам аденозинтрифосфату (АТФ), аденозиндифосфату (АДФ), аденозинмонофосфату (АМФ) и циклическому аденозинмонофосфату (цАМФ); к биохимическому метилирующему агенту S-аденозил-L-метионину (S-AM); и структурно - к коферментам NAD, FAD и коферменту А; а также к РНК (рибонуклеиновой кислоте). Как аденозин, так и указанные его производные играют важную роль в регулировании многих аспектов метаболизма клеток, а также в модулировании различных видов активности центральной нервной системы.

Рецепторы аденозина классифицируют как A₁, А_2A, А_2B и А₃ рецепторы, относящиеся к семейству ассоциированных с G-белком рецепторов. Активация аденозином рецепторов аденозина инициирует механизмы передачи сигнала. Эти механизмы зависят от вида рецептора, ассоциированного с G-белком. Каждый из подтипов рецептора аденозина традиционно характеризуется посредством аденилатциклазной эффекторной системы, в которой цАМФ используется в качестве вторичного мессенджера. A₁ и А₃ рецепторы, ассоциированные с G_i-белками, ингибируют аденилатциклазу, что приводит к снижению содержания цАМФ в клетках, в то время как A_2A и A_2B рецепторы взаимодействуют с G_S-белками и активируют аденилатциклазу, что приводит к повышению содержания цАМФ в клетках. Известно, что система A₁ рецептора включает активацию фосфолипазы С и модулирование как калиевых, так кальциевых ионных каналов. Подтип A₃, в дополнение к его ассоциации с аденилатциклазой, также стимулирует фосфолипазу С и таким образом активирует кальциевые ионные каналы.

A₁ рецептор (326-328 аминокислот) клонируют из различных биологических видов (таких как псовые, человек, крыса, собака, курица, бык, морская свинка) с 90-95% идентичностью последовательности среди видов млекопитающих. A_2A рецептор (409-412 аминокислот) клонируют из псовых, крыс, человека, морской свинки и мыши. А_2B рецептор (332 аминокислоты) клонируют из человека и мыши с 45%-ной гомологичностью А_2B рецептора человека по отношению к A₁ и A_2A рецепторам человека. A₃ рецептор (317-320 аминокислот) клонируют из человека, крысы, собаки, кролика и овцы.

Как полагают, подтипы - A₁ и A_2A рецепторы - выполняют комплементарную функцию в регулируемой с участием аденозина передаче энергии. Аденозин, который представляет собой продукт метаболизма АТФ, диффундирует из клетки и действует локально, активируя рецепторы аденозина, с понижением при этом потребления кислорода (A₁) или повышением подачи кислорода (А_2A), и таким образом восстанавливает равновесие между подачей энергии и ее потреблением в тканях. Действие и того, и другого подтипов заключается в повышении количества доступного тканям кислорода и защите клеток от повреждения, вызываемого кратковременным нарушением кислородного баланса. Одной из важных функций эндогенного аденозина является предотвращение повреждений при травмах, таких как гипоксия, ишемия, гипотензия, и в состояниях при приступе.

Кроме того, известно, что связывание агониста рецептора аденозина тучными клетками, экспрессирующими аз рецептор крысы, приводит к повышению содержания инозитолтрифосфата и повышению концентрации кальция внутри клетки, что усиливает индуцированную антигеном секрецию противовоспалительных медиаторов. Таким образом, А₃ рецептор выполняет роль медиатора при астматических атаках и других аллергических реакциях.

Аденозин также является нейромодулятором, имеющим исключительную важность при модулировании молекулярного механизма, лежащего в основе многих аспектов физиологической функции мозга и осуществляемого при участии аденозина в качестве медиатора ингибирующих эффектов центральной системы. Повышение высвобождения нейротрансмиттеров приводит к травмам, таким как гипоксия, ишемия и приступы. Такие нейротрансмиттеры в основном ответственны за дегенерацию нервной системы и гибель нейронов, которые приводят к повреждению мозга или гибели индивидуума. Агонисты A₁ рецептора аденозина, которые имитируют центральные ингибирующие эффекты аденозина, могут, таким образом, быть полезны в качестве нейропротекторных агентов. Предлагалось использовать аденозин в качестве эндогенного противосудорожного агента, ингибирующего высвобождение глутамата из нейронов-возбудителей и ингибирующего запуск нейронов. Агонисты аденозина, таким образом, могут быть использованы в качестве противоэпилептических агентов. Антагонисты аденозина стимулируют активность центральной нервной системы (ЦНС) и, как было показано, эффективны в качестве усилителей познавательной способности. Селективные А_2A-антагонисты обладают терапевтическим потенциалом при лечении различных форм деменции, например в случае болезни Альцгеймера, и могут быть полезны в качестве нейропротекторных агентов. Антагонисты А₂ рецептора аденозина ингибируют высвобождение допамина из центральных синаптических терминалов и снижают локомоторную активность, в результате снижается проявление симптомов при болезни Паркинсона. Активность аденозина в отношении центральной нервной системы также связана с молекулярными механизмами, лежащими в основе успокоения, гипноза, шизофрении, беспокойства, боли, дыхания, депрессии и наступления приступов. Следовательно, лекарственные средства, воздействующие на рецепторы аденозина, обладают терапевтическим потенциалом как седативные средства, миорелаксанты, агенты, снимающие или предотвращающие приступы психоза, анксиолитические агенты, анальгетики, стимуляторы дыхания и антидепрессанты.

Аденозин играет важную роль в кардиоваскулярной системе, являясь кардиопротекторным агентом. Содержание эндогенного аденозина повышается при реакции на ишемию и гипоксию, что защищает ткани сердца во время и после травмы (стабилизация). Следовательно, агонисты аденозина являются потенциальными кардиопротекторными агентами.

Аденозин является модулятором многих аспектов функционирования почек, включая высвобождение ренина, воздействие на скорость гломерулярной фильтрации и почечный кровоток. Соединения, которые препятствуют вредному воздействию аденозина на почки, являются потенциальными агентами для защиты почек. Кроме того, антагонисты аденозина A₃ и/или A_2B могут быть полезны для лечения астмы и других аллергических реакций.

Современное состояние исследований в области рецепторов аденозина представлено в большом числе документов, например, в следующих публикациях:

Bioorganic & Medicinal Chemistry, 6, (1998), 619-641,

Bioorganic & Medicinal Chemistry, 6, (1998), 707-719,

J. Med. Chem., (1998), 41, 2835-2845,

J. Med. Chem., (1998), 41, 3186-3201,

J. Med. Chem., (1998), 41, 2126-2133,

J. Med. Chem., (1999), 42, 706-721,

J. Med. Chem., (1996), 39, 1164-1171,

Arch. Pharm. Med. Chem., (1999), 332, 39-41.

Целью настоящего изобретения являются соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли как сами по себе, так и в качестве фармацевтически активных соединений, их изготовление, лекарственные средства на основе соединений согласно настоящему изобретению и их изготовление, и также применение соединений формулы I для контроля или предотвращения заболеваний, в основе которых лежит модулирование аденозиновой системы, например таких, как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, нейропротекция, шизофрения, беспокойство, боль, недостаточность дыхания, депрессия, астма, аллергические реакции, гипоксия, ишемия, припадки и приступы. Кроме того, соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, могут быть использованы как седативные агенты, миорелаксанты, агенты, снимающие или предотвращающие приступы психоза, противоэпилептические агенты, противосудорожные агенты и кардиопротекторные агенты. Наиболее предпочтительными направлениями использования в соответствии с настоящим изобретением являются такие, которые базируются на антагонистической активности в отношении A_2A рецептора и которые включают нарушения и расстройства центральной нервной системы, например, лечение и профилактику некоторых депрессивных состояний, нейропротекторное действие и болезнь Паркинсона.

При использовании в тексте заявки термин «низший алкил» означает насыщенную алкильную группу с линейной или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, например метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, 2-бутил, трет-бутил и подобные им группы. Предпочтительными являются группы «низший алкил», содержащие 1-4 атома углерода.

Термин «циклоалкил» означает насыщенную карбоциклическую группу, содержащую 3-8 атомов углерода. Предпочтительно, циклоалкильная группа представляет собой циклогексил.

Термин «галоген» означает хлор, иод, фтор и бром.

Термин «низший алкокси» означает группу, в которой алкильный остаток является таким, как определено выше, и присоединен через атом кислорода.

Термин «арил» означает фенил или нафтил. Предпочтительно, арильная группа представляет собой фенил.

Термин «гетероарил» означает 5- или 6-членную кольцевую систему с гетероатомами, такими как О, N или S, например, пиридинил, тиофенил, фуранил или тиазолил.

Термин «5- или 6-членная неароматическая кольцевая система» означает кольцевую систему, которая может содержать один дополнительный гетероатом, такой как О или S, в дополнение к атому N, например, такую как морфолинил, тиоморфолинил, пиперидинил, пирролидинил или 3,6-дигидро-2Н-пиридин-1-ил.

Термин «фармацевтически приемлемые соли - продукты присоединения кислоты» означает соли, образованные с неорганическими и органическими кислотами, например, такими как хлороводородная кислота, азотная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, лимонная кислота, муравьиная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, уксусная кислота, янтарная кислота, винная кислота, метансульфоновая кислота, и-толуолсульфоновая кислота и им подобные кислоты.

Соединения формулы I согласно настоящему изобретению, в которых R² представляет собой гетероарил, такой как фуран-2-ил, замещенный радикалом бром, являются предпочтительными. Например, это следующие соединения:

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]пиперидин-1-ил-метанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]пирролидин-1-ил-метанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(2-метил-пирролидин-1-ил)метанон,

диэтиламид 1-[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбонил]пиперидин-3-карбоновой кислоты, [8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(3,5-диметил-пиперидин-1-ил)метанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(2-метил-пиперидин-1-ил)метанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(2-метоксиметил-пирролидин-1-ил)метанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-((S)-2-метоксиметил-пирролидин-1-ил)метанон,

(S)-диметиламид 1-[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбонил]пирролидин-2-карбоновой кислоты, диметилкарбамоилметилметиламид 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло [1.5-а] пиридин-6-ил]-(3-метил-пиперидин-1-ил)метанон,

метилпропиламид 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]-пиридин-6-карбоновой кислоты,

этил-(2-пиридин-2-илэтил)амид 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]тиоморфолин-4-илметанон или

метилфенэтиламид 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты.

Также предпочтительными являются соединения, в которых R² представляет собой незамещенный гетероарил, такой как фуран-2-ил. Примеры соединений такой группы включают следующие соединения:

(8-амино-2-фуран-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил)пирролидин-1-илметанон,

(8-амино-2-фуран-2-ил-[1.2.4]триазоло [1.5-а]пиридин-6-ил)-(2-R-метоксиметилпирролидин-1-ил)метанон,

(8-амино-2-фуран-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил)-(2-S-метоксиметилпирролидин-1-ил)метанон или

дибензиламид 8-амино-2-фуран-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты.

Также предпочтительны соединения формулы I согласно настоящему изобретению, в которых R² представляет собой гетероарил, такой как тиофен-2-ил, например, следующее соединение:

дибензиламид 8-амино-2-тиофен-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты.

Также предпочтительными являются соединения, в которых R² представляет собой гетероарил, например, такой как фуран-2-ил, замещенный метилом. Примерами соединений этой группы служат следующие соединения:

[8-амино-2-(5-метил-фуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1,5-а]пиридин-6-ил]пирролидин-1-илметанон,

[8-амино-2-(5-метил-фуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]пиперидин-1-илметанон,

[8-амино-2-(5-метил-фуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(2-метил-пирролидин-1-ил)метанон или

метилпропиламид 8-амино-2-(5-метил-фуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты.

Соединения формулы I, являющиеся предметом настоящего изобретения, и их фармацевтически приемлемые соли могут быть получены в соответствии с методиками, известными из уровня техники, например, при использовании способа, описанного ниже, указанный способ включает

взаимодействие соединения формулы

с амином формулы

с получением при этом соединения формулы

в котором R', R" и R² имеют значения, приведенные выше, и,

если необходимо, превращения полученных соединений в фармацевтически приемлемые соли - продукты присоединения кислоты.

В соответствии с указанным выше вариантом способа получения соединения I (8-амино-2-(арил или гетероарил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]пиперидин-1-илметанон), раствор амина формулы III (HNR'R") в диоксане обрабатывают триметилалюминием в толуоле и перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Добавляют метиловый эфир 8-амино-2-(арил или гетероарил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты (II) в 1 мл диоксана и полученную смесь нагревают до 90°С в течение 72 часов. Добавляют водный раствор HCl и удаляют летучие. Полученный остаток помещают в 1 муравьиной кислоты и метанол и очищают обращенно-фазовой препаративной ЖХВР (жидкостная хроматография высокого разрешения), элюируя с использованием градиента ацетонитрила и воды.

Получение соли осуществляют при комнатной температуре согласно методикам, которые сами по себе известны и которые хорошо знакомы специалисту в данной области техники. Рассматриваются не только соли, образованные с неорганическими кислотами, но во внимание принимаются также и соли, образованные с органическими кислотами. Примерами таких солей являются гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, нитраты, цитраты, ацетаты, малеинаты, сукцинаты, метансульфонаты, n-толуолсульфонаты и подобные им соли.

В примерах 9-108 и на приведенной ниже схеме 1 получение соединений формулы I проиллюстрировано более подробно.

В соответствии со схемой 1 соединение формулы V (6-гидрокси-5-нитро-никотиновая кислота) получают следующим образом. К раствору соединения формулы IV (6-гидроксиникотиновая кислота) в концентрированной серной кислоте добавляют смесь концентрированной серной кислоты и концентрированной азотной кислоты при температуре ниже 20°С и перемешивают в течение 1 час при комнатной температуре, после чего раствор нагревают до 80°С в течение 4 час. Затем смесь выливают на лед, а осадок собирают и высушивают. Полученное соединение формулы V затем смешивают с POCl₃ и нагревают до 130°С в течение 5 час, после чего избыток POCl₃ отгоняют при пониженном давлении. Полученный остаток охлаждают до 0°С и медленно добавляют 150 мл метанола. Смесь перемешивают в течение 2 час при 0°С. После добавления 25%-ного водного раствора NH₃ смесь перемешивают в течение 4 час при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают, один раз промывают диэтиловым эфиром и высушивают под вакуумом с получением при этом метилового эфира 6-амино-5-нитроникотиновой кислоты (VI). Затем добавляют суспензию метилового эфира 6-амино-5-нитроникотиновой кислоты в метаноле и катализатор Pd/C (10%), после чего проводят гидрирование при комнатной температуре в течение 14 час. Катализатор отфильтровывают и концентрируют раствор с получением при этом метилового эфира 5,6-диамино-никотиновой кислоты (VII). Смесь соединения (VII) в диоксане обрабатывают O-мезитиленсульфонилгидроксиламином (получен из этил-O-мезитиленсульфонилацетогидроксамата и HClO₄) в течение 1 час при комнатной температуре. К тиофен-2-карбоксальдегиду или другому альдегиду формулы R²СНО, в которой R² представляет собой арил или гетероарил, как указано в описании настоящего изобретения, добавляют молекулярные сита 4А и нагревают до 100°С в течение 4 час перед тем, как добавить КОН в метаноле. Полученную смесь нагревают до 70°С в течение 2 час и перемешивают при комнатной температуре в течение 14 час. Летучие удаляют при пониженном давлении, а полученный остаток очищают колоночной экспресс-хроматографией, получая при этом сложный метиловый эфир 8-амино-2-(арил или гетероарил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты (II). Для того чтобы получить соединение формулы I (8-амино-2-(арил или гетероарил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-пиперидин-1-ил-метанон), раствор амина формулы III (HNR'R") в диоксане обрабатывают триметилалюминием в толуоле и перемешивают в течение 1 час при комнатной температуре. Добавляют метиловый эфир 8-амино-2-(арил или гетероарил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты (II) в 1 мл диоксана и нагревают смесь до 90°С в течение 72 час. Добавляют водный раствор HCl и удаляют летучие. Полученный остаток помещают в 1 мл муравьиной кислоты и метанола и очищают обращенно-фазовой препаративной ЖХВР, элюируя градиентом ацетонитрила и воды.

Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли - продукты присоединения кислоты обладают ценными фармакологическими свойствами. В частности, было обнаружено, что соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, являются лигандами рецептора аденозина.

Полученные соединения были исследованы в соответствии с приведенными ниже методиками испытаний.

А_2A рецептор аденозина человека

Рецептор аденозина A_2A человека рекомбинантно экспрессируют в овариальных клетках китайского хомяка (СНО-клетках), используя систему экспрессии с вирусом «semliki forest». Клетки собирают, дважды промывают с использованием цетрифугирования, гомогенизируют и опять промывают с использованием цетрифугирования. Полностью промытые частички мембран суспендируют в трис-буфере (50 мМ), содержащем 120 мМ NaCl, 5 мМ KCl, 2 мМ CaCl₂ и 10 mM MgCl₂ (pH 7,4) (буфер А). Исследование связывания [³H]-SCH-582бl (Dionisotti et al., Br. J. Pharmacol. 1997, v. 121, p.353) проводят в 96-луночных планшетах в присутствии 2,5 мкг мембранного белка, 0,5 мг Ysi-поли-1-лизин SPA-гранул и 0,1 Ед аденозиндеаминазы в конечном объеме, составляющем 200 мкл буфера А. Неспецифическое связывание определяют, используя ксантинаминный конгенер (ХАС; 2 мкМ). Соединения тестируют при 10 концентрациях, от 10 мкМ до 0,3 нМ. Все исследования осуществляют параллельно в двух сериях и каждый анализ повторяют по меньшей мере два раза. Перед центрифугированием планшеты, используемые для проведения исследования, инкубируют в течение 1 часа при комнатной температуре, после чего количество связанного лиганда определяют с использованием сцинтилляционного счетчика «Packard Topcount». Значения IC₅₀ вычисляют, используя программу нелинейной аппроксимации, а величины Ki вычисляют, используя уравнение Ченга-Прусоффа (Cheng-Prussoff).

В соответствии с настоящим изобретением было обнаружено, что соединения формулы I обладают высоким сродством к A_2A рецептору. В приведенной ниже таблице приведены конкретные значения для синтезированных соединений. Предпочтительными являются такие соединения, которые характеризуются величиной К_i для чА_2A (A_2A человека), которая составляет менее чем 100 нМ, например, следующие:

Пример №	чА2А Кi (нМ)
11	35,2
12	26,8
13	40,5
14	37,2
15	62,4
16	16,4
17	61,2
18	67,0
19	23,2
20	15,5
21	44,6
22	76,2
25	50,0
34	56,8
37	34,9
41	77,6

Пример №	чА2А Кi (нМ)
42	69,4
64	83,0
83	75,6
84	56,8
85	75,2
88	56,2

Соединения формулы I и фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I могут быть использованы в качестве лекарственных средств, например, в виде фармацевтических препаратов. Фармацевтические препараты могут быть введены перорально, например, в виде таблеток, таблеток с покрытием, драже, мягких и твердых желатиновых капсул, растворов, эмульсий или суспензий. Однако введение также может быть эффективно осуществлено ректально, например, в виде суппозиториев, парентерально, например, в виде растворов для инъекций.

Соединения формулы I могут быть использованы вместе с фармацевтически инертными, неорганическими или органическими носителями для изготовления фармацевтических препаратов. Могут быть использованы лактоза, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновые кислоты или их соли и подобные им вещества, например, в качестве носителей для таблеток, таблеток с покрытием, драже и твердых желатиновых капсул. Подходящие носители для мягких желатиновых капсул представляют собой, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы и подобные им вещества. Учитывая природу активного вещества, в случае мягких желатиновых капсул носитель обычно не требуется. Подходящие носители для изготовления растворов и сиропов представляют собой, например, воду, полиолы, глицерин, растительное масло и подобные им вещества. Подходящие носители для суппозиториев представляют собой, например, натуральные или гидрированные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы и подобные им вещества.

Кроме того, фармацевтические препараты могут содержать консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, увлажняющие средства, эмульгаторы, подсластители, подкрашивающие вещества, а также вещества, улучшающие вкус и запах, соли для варьирования осмотического давления, буферы, маскирующие агенты или антиоксиданты. Фармацевтические препараты также могут содержать другие терапевтически значимые вещества.

Лекарственные средства, содержащие соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и терапевтически инертный носитель, также являются объектами настоящего изобретения, как и способ их получения, который включает объединение одного или более соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемой соли - продукта присоединения кислоты и, если необходимо, одного или более другого терапевтически значимого вещества с получением лекарственной формы для введения вместе с одним или более терапевтически инертным агентом.

В соответствии с изобретением соединения формулы I, а также их фармацевтически приемлемые соли пригодны для регулирования протекания или профилактики заболевания, связанного с антагонистической активностью в отношении рецепторов аденозина, например, такого как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, нейропротекторное действие, шизофрения, беспокойство, боль, затрудненность дыхания, депрессия, астма, аллергические реакции, гипоксия, ишемия, припадки и приступы. Кроме того, соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, могут быть полезны в качестве седативных агентов, миорелаксантов, агентов, снимающих или предотвращающих приступы психоза, противоэлептических агентов, противосудорожных средств и кардиопротекторных агентов, а также для изготовления соответствующих лекарственных средств.

Наиболее предпочтительными показаниями согласно настоящему изобретению являются такие, которые включают нарушения или расстройства центральной нервной системы, например, такие как лечение или профилактика некоторых депрессивных расстройств, купирование или предотвращение приступов психоза и болезнь Паркинсона.

Дозировка может варьироваться в широких пределах и, конечно, ее следует регулировать в зависимости от индивидуальных потребностей в каждом конкретном случае. В случае перорального введения дозировка для взрослых может варьироваться от приблизительно 0,01 мг до приблизительно 1000 мг в день соединения общей формулы I или соответствующего количества его фармацевтически приемлемой соли. Дневная доза может быть введена в виде одной дозы или разделена на несколько доз, и в дополнение, верхний предел может быть превышен в том случае, когда для этого есть показания.

Промежуточные соединения

Пример 1

Сложный метиловый эфир 8-амино-2-тиофен-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]-пиридин-6-карбоновой кислоты

а) 6-Гидрокси-5-нитроникотиновая кислота

К раствору 30 г (0,217 моль) 6-гидроксиникотиновой кислоты в 50 мл концентрированной серной кислоты добавляют 60 мл смеси в соотношении 1:1 концентрированной серной кислоты и концентрированной азотной кислоты при температуре ниже 20°С и перемешивают в течение 1 час при комнатной температуре, затем нагревают до 80°С в течение 4 час. Полученную смесь выливают на лед, собирают образовавшийся осадок и высушивают, получая при этом 14,2 г (36%) указанного в заголовке соединения в виде аморфного твердого желтого вещества.

Масс-спектр: m/е (%): 184 (MH⁺, 100)

¹Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ=13,3 (s, шир, 2Н, СООН/ОН), 8,65 (d, J=2,5 Гц, 1H, H-4), 8,38 (d, J=2,5 Гц, 1Н, Н-2).

б) Сложный метиловый эфир 6-амино-5-нитроникотиновой кислоты

Смесь 14,2 г (78 ммоль) 6-гидрокси-5-нитроникотиновой кислоты в 50 мл POCl₃ нагревают до 130°С в течение 5 час, после чего избыток POCl₃ удаляют при пониженном давлении. Полученный остаток охлаждают до 0°С и медленно добавляют 150 мл метанола. Смесь перемешивают в течение 2 час при 0°С. После добавления 300 мл 25%-ного водного раствора NH₃ смесь перемешивают в течение 4 час при комнатной температуре. Осадок один раз промывают диэтиловым эфиром и высушивают под вакуумом с получением при этом 5,97 г (39%) указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

Масс-спектр: m/е (%): 197 (МН⁺, 100)

¹Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ=8,83 (d, J=2,1 Гц, 1H, H-4), 8.72 (d, J=2,1 Гц, 1H, Н-2), 8,38 (s, шир, 2Н, NH₂), 3,85 (s, 3Н, ОСН₃).

в) Сложный метиловый эфир 5,6-диаминоникотиновой кислоты

К суспензии 5,97 г (30 ммоль) сложного метилового эфира 6-амино-5-нитроникотиновой кислоты в 30 мл метанола добавляют 600 мг катализатора Pd/C (10%) и проводят гидрирование при комнатной температуре в течение 14 час. Катализатор отфильтровывают и концентрируют раствор, получая при этом 4,74 г (94%) указанного в заголовке соединения в виде белого аморфного твердого вещества.

Масс-спектр: m/е (%): 167 (МН⁺, 100)

¹H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ=7,95 (d, J=1,5 Гц, 1Н, Н-4), 7,16 (d, J=1,5 Гц, 1H, H-2), 6,25 (s, шир, 2Н, NH₂), 4,91 (s, шир, 2Н, NH₂), 3.74 (s, 3H, ОСН₃).

г) Сложный метиловый эфир 8-амино-2-тиофен-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]-пиридин-6-карбоновой кислоты

Смесь 1,114 г (6,66 ммоль) сложного метилового эфира 5,6-диаминоникотиновой кислоты в 40 мл диоксана обрабатывают 1,578 г (7,33 ммоль) O-мезитиленсульфонилгидроксиламина (получен из этил-O-мезитиленсульфонилацетогидроксамата и HClO₄ (70%)) в течение 1 часа при комнатной температуре. Добавляют 0,897 г (8 ммоль) тиофен-2-карбоксальдегида и молекулярные сита 4 Å, затем нагревают до 100°С в течение 4 час перед добавлением 1,6 мл 5 М КОН в метаноле. Смесь нагревают до 70°С в течение 2 час и перемешивают при комнатной температуре в течение 14 час. Летучие удаляют при пониженном давлении и очищают полученный остаток колоночной экспресс-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и н-гексана с получением при этом после выпаривания 0,88 г (48%) указанного в заголовке соединения.

Масс-спектр: m/е (%): 275,3 (МН⁺, 100)

¹H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ=8,65 (d, J=1,4 Гц, 1H, Н-5), 7,81 (dd, J₁=3,5 Гц, J₂=1 Гц, 1H, таофен H-2), 7.76 (dd, J₁=4,8 Гц, J₂=1 Гц, 1H, тиофен Н-4), 7,24 (dd, J₁=4,8 Гц, J₂=3,5 Гц, 1H, тиофен Н-3), 7,09 (d, J=1,4 Гц, 1H, Н-7), 6,31 (s, шир, 2Н, NH₂), 3,88 (s, 3H, ОСН₃).

Пример 2

Сложный метиловый эфир 8-амино-2-фенил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты

Указанное в заголовке соединение, масс-спектр: m/е (%): 269 (М⁺, 100), получают в соответствии с общей методикой, описанной в примере 1, из сложного метилового эфира 5,6-диаминоникотиновой кислоты, O-мезитилен-сульфонилгидроксиламина и бензальдегида. Очистку проводят колоночной экспресс-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и н-гексана.

Пример 3

Сложный метиловый эфир 8-амино-2-тиазол-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]-пиридин-6-карбоновой кислоты

Указанное в заголовке соединение, масс-спектр: m/е (%): 276,1 (М⁺, 100), получают в соответствии с общей методикой, описанной в примере 1, исходя из сложного метилового эфира 5,6-диамино-никотиновой кислоты, O-мезитилен-сульфонилгидроксиламина и тиазол-2-карбоксальдегида. Очистку проводят колоночной экспресс-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и н-гексана.

Пример 4

Сложный метиловый эфир 8-амино-2-(5-метилтиофен-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты

Указанное в заголовке соединение, масс-спектр: m/е (%): 289,2 (М⁺, 100), получают в соответствии с общей методикой, описанной в примере 1, из сложного метилового эфира 5,6-диаминоникотиновой кислоты, O-мезитилен-сульфонилгидроксиламина и 5-метилтиофен-2-карбоксальдегида. Очистку проводят колоночной экспресс-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и н-гексана.

Пример 5

Сложный метиловый эфир 8-амино-2-фуран-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты

Указанное в заголовке соединение, масс-спектр: m/е (%): 259,1 (М⁺, 100), получают в соответствии с общей методикой, описанной в примере 1, из сложного метилового эфира 5,6-диамино-никотиновой кислоты, O-мезитилен-сульфонилгидроксиламина и фуран-2-карбоксальдегида. Очистку проводят колоночной экспресс-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и н-гексана.

¹Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ=8,65 (d, J=1,5 Гц, 1Н, Н-5), 7,92 (dd, J₁=1.7 Гц, J₂=0,8 Гц, 1H, фуран Н-5), 7,16 (dd, J₁=3,4 Гц, J₂=0,8 Гц, 1Н, фуран Н-3), 7,08 (d, J=1,5 Гц, 1H, Н-7), 6.73 (dd, J₁=3,4 Гц, J₂=1.7 Гц, 1H, фуран Н-4), 6,35 (s, шир, 2Н, NH₂), 3,89 (s, 3H, ОСН₃).

Пример 6

Сложный метиловый эфир 8-амино-2-(5-метил-фуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло-[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты

Указанное в заголовке соединение, масс-спектр: m/е (%): 273,2 (М⁺, 100), получают в соответствии с общей методикой, описанной в примере 1, исходя из сложного метилового эфира 5,6-диаминоникотиновой кислоты, O-мезитилен-сульфонилгидроксиламина и 5-метилфуран-2-карбоксальдегида. Очистку проводят колоночной экспресс-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и н-гексана.

Пример 7

Сложный метиловый эфир 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты

Указанное в заголовке соединение, масс-спектр: m/е (%): 338,2 (М⁺, 100), получают в соответствии с общей методикой, описанной в примере 1, из сложного метилового эфира 5,6-диаминоникотиновой кислоты, 0-мезитилен-сульфонилгидроксиламина и 5-бромфуран-2-карбоксальдегида. Очистку проводят колоночной экспресс-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и н-гексана.

Пример 8

Сложный метиловый эфир 8-амино-2-пиридин-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты

Указанное в заголовке соединение, масс-спектр: m/е (%): 270,3 (М⁺, 100), получают в соответствии с общей методикой, описанной в примере 1, из сложного метилового эфира 5,6-диаминоникотиновой кислоты, O-мезитилен-сульфонилгидроксиламина и пиридин-2-карбоксальдегида. Очистку проводят колоночной экспресс-хроматографией на силикагеле, элюируя смесью этилацетата и н-гексана.

¹Н-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ=8.75 (dd, J₁=2 Гц, J₂=0,6 Гц, 1Н, пиридин Н-6), 8.70 (d, J=1,5 Гц, 1H, H-5), 8,25 (dd, J₁=7,8 Гц, J₂=0,6 Гц, 1Н, пиридин Н-3), 8,00 (dd, J₁=7,8 Гц, J₂=2 Гц, 1H, пиридин Н-4), 7,54 (dd, J₁=7,8 Гц, J₂=1,2 Гц, 1H, пиридин H-5), 7,09 (d, J=1,5 Гц, 1H, Н-7), 6,41 (s, шир, 2Н, NH₂), 3,89 (s, 3Н, ОСН₃).

Фармацевтически активные соединения

Пример 9

[8-Амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]пиперидин-1-илметанон

Раствор 20 мг (0,24 ммоль) пиперидина в 1 мл диоксана обрабатывают 0,24 мл (0,24 ммоль) триметилалюминия в толуоле и перемешивают в течение 1 час при комнатной температуре. Добавляют 20 мг (0,06 ммоль) метилового эфира 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты в 1 мл диоксана и нагревают смесь до 90°С в течение 72 час. Добавляют 0,5 мл водного 1 Н раствора HCl и отгоняют летучие. Полученный остаток помещают в 1,5 мл муравьиной кислоты и 0,5 мл метанола и очищают обращенно-фазовой препаративной ЖХВР, элюируя с использованием градиента ацетонитрила и воды. Растворители, использованные для элюирования, выпаривают, получая при этом 7 мг (29%) указанного в заголовке соединения.

Масс-спектр: m/е (%): 391,3 (MH⁺, 100)

1Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО): δ=8,21 (s, 1H, H-5), 7,14 (dd, J₁=3,5 Гц, 1H, фуран Н-4), 6,82 (d, J=3,5 Гц, 1H, фуран Н-3), 6,56 (s, 1H, Н-7), 6,26 (s, шир, 2Н, NH₂), 1,62 (т, 4Н, NCH₂), 1,52 (m, 6Н, СН₂).

В соответствии с методикой, приведенной в примере 9, другие производные [1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоксамида были синтезированы из сложных эфиров, описанных в примерах 1-8, и соответствующего амина. Полученные данные представлены в приведенной ниже таблице и включают данные для примеров от 10 до 108.

Методика изготовления

1. Смешивают компоненты согласно позициям 1, 2, 3 и 4 и гранулируют, используя очищенную воду.

2. Высушивают гранулы при 50°С.

3. Пропускают гранулы через соответствующее оборудование для размалывания.

4. Добавляют компонент согласно позиции 5 и перемешивают в течение трех минут; затем прессуют, используя соответствующий пресс.

Состав капсул

Позиция	Ингредиент	мг/капсула
		5 мг	25 мг	100 мг	500 мг
1.	Соединение формулы I	5	25	100	500
2.	Водная лактоза	159	123	148	-
3.	Кукурузный крахмал	25	35	40	70
4.	Тальк	10	15	10	25
5.	Стеарат магния	1	2	2	5
	Суммарное количество	200	200	300	600

Методика изготовления

1. Смешивают компоненты согласно позициям 1, 2 и 3 в подходящем смесителе в течение 30 минут.

2. Добавляют компоненты согласно позициям 4 и 5 и перемешивают в течение 3 минут.

3. Помещают в подходящие капсулы.

1. Амид 8-амино-[1.2.4]триазоло-[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты общей формулы

в которой R¹ означает -NR'R", где R' и R" независимо друг от друга представляют собой низший алкил, -(CH₂)_n-C(O)NR^aR^b, -(СН₂)_n-пиридинил, -(СН₂)_n-фенил, -(CH₂)_n-CN, -(СН₂)_n-O-низший алкил или -(СН₂)_n-С₃-С₈ циклоалкил или R' и R" образуют вместе с атомом N пяти- или шестичленную неароматическую кольцевую систему, последняя может дополнительно содержать один гетероатом - О или S и указанная кольцевая система может быть незамещенной или замещенной одним или двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, -C(O)NR^aR^b или группы -(СН₂)_n-O-низший алкил, и

R^aR^b каждый независимо друг от друга представляет собой водород или низший алкил;

R² означает фенил или гетероарил, представляющий собой пиридинил, фуранил, возможно замещенный галоидом или низшим алкилом, тиофенил, возможно замещенный низшим алкилом, или тиазолилрадикал;

n означает 0, 1, 2 или 3,

и его фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединение формулы I по п.1, согласно которому R² представляет собой гетероарил.

3. Соединение формулы I по п.2, согласно которому R² представляет собой фуран-2-ил, замещенный бромом.

4. Соединение формулы I по п.3, согласно которому указанное соединение представляет собой

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил] пиперидин-1-илметанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-пирролидин-1-илметанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(2-метилпирролидин-1 -ил)метанон,

диэтиламид 1-[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбонил]-пиперидин-3-карбоновой кислоты,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(3,5-диметил-пиперидин-1-ил)метанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(2-метил-пиперидин-1-ил)метанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(2-метоксиметил-пирролидин-1-ил)метанон,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-((S)-2-метоксиметил-пирролидин-1-ил)метанон,

(S)-диметиламид 1-[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбонил]-пирролидин-2-карбоновой кислоты,

диметилкарбамоилметилметиламид 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(3-метил-пиперидин-1-ил)метанон,

метилпропиламид 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты,

этил-(2-пиридин-2-ил-этил)амид 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты,

[8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил] тиоморфолин-4-ил-метанон или

метилфенэтиламид 8-амино-2-(5-бромфуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты.

5. Соединение формулы I по п.2, согласно которому R² представляет собой незамещенный фуран-2-ил.

6. Соединение формулы I по п.5, согласно которому указанное соединение представляет собой

(8-амино-2-фуран-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил)пирролидин-1 -илметанон,

(8-амино-2-фуран-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил)-(2-R-метоксиметил-пирролидин-1-ил)метанон,

(8-амино-2-фуран-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил)-(2-S-метоксиметил-пирролидин-1-ил)метанон или

дибензиламид 8-амино-2-фуран-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты.

7. Соединение формулы I по п.2, согласно которому R представляет собой тиофен-2-ил.

8. Соединение формулы I по п.7, согласно которому указанное соединение представляет собой

дибензиламид 8-амино-2-тиофен-2-ил-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты.

9. Соединение формулы I по п.2, согласно которому R² представляет собой фуран-2-ил, замещенный метилом.

10. Соединение формулы I по п.9, согласно которому указанное соединение представляет собой

[8-амино-2-(5-метил-фуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]пирролидин-1-илметанон,

[8-амино-2-(5-метил-фуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]пиперидин-1-илметанон,

[8-амино-2-(5-метил-фуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-ил]-(2-метил-пирролидин-1-ил)метанон или

метилпропиламид 8-амино-2-(5-метил-фуран-2-ил)-[1.2.4]триазоло[1.5-а]пиридин-6-карбоновой кислоты.

11. Соединение формулы I по п.1, согласно которому R² представляет собой фенил.

12. Лекарственное средство, обладающее сродством к А_2A рецептору аденозина и содержащее одно или несколько соединений формулы I по любому из пп.1-12 и фармацевтически приемлемые наполнители.