Синергетическое взаимодействие абакавира и аловудина

Изобретение относится к фармакологии. Фармацевтическая композиция включает абакавир и аловудин в соотношении 1-10:200-800 и фармацевтический носитель для них. Упаковка, предназначенная для пациента для лечения полирезистентного ВИЧ, включает аловудин и абакавир и информационный вкладыш, содержащий указания по применению как аловудина, так и абакавира вместе в комбинации. Применение абакавира вместе с аловудином для лечения полирезистентного ВИЧ, где применение включает одновременное, комбинированное или последовательное введение аловудина и абакавира. Изобретение обеспечивает более полное подавление вируса, супрессию вируса в течение более длительного периода, ограничение опасности возникновения мутаций и развития полирезистентного ВИЧ, снижение токсичности лекарственных препаратов. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 1 табл., 3 ил.

 

Область техники

Настоящее изобретение относится к неожиданному уровню синергизма, проявляемого противовирусными препаратами против ВИЧ (HIV) и ВГВ (HBV) аловудином и абакавиром в отношении полирезистентного ВИЧ. Изобретение предлагает новые фармацевтические препараты, включающие два агента в смеси или отдельно для совместного или последовательного введения и способы лечения, включающие их.

Предпосылки изобретения

Аловудин (3'-дезокси-3'-фтортимидин, ФТ (FLT)) описан в WO 88/00088 как обладающий противовирусной активностью в отношении ВИЧ и ВГВ. Аловудин представляет собой пролекарство, которое преобразуется in vivo в активный трифосфат.

Абакавир ((1R,4S)-9-[4-(гидроксиметил)-2-циклопентен-1-ил]гуанин, карбовир) описан в ЕР 0434450 как обладающий выраженной активностью в отношении ВИЧ и ВГВ. Абакавир также является пролекарством, которое преобразуется in vivo в активный трифосфат.

Аловудин и абакавир каждый проявляет умеренный синергизм с некоторыми выбранными нуклеозидами, особенно в исследованиях in vitro (см., например, US 5571798 и WO 00/16779). Однако в настоящее время авторы обнаружили в клиническом контексте, что особенная комбинация аловудина и абакавира обеспечивает степень противовирусного синергизма, которая является значительно большей, чем обычный уровень синергизма, показываемый соответствующим активным веществом.

Краткое описание изобретения

Первый аспект изобретения предлагает фармацевтический препарат, включающий синергетическую комбинацию абакавира и аловудина и фармацевтический носитель для них.

Следующий аспект изобретения предлагает применение абакавира и аловудина вместе для лечения ВИЧ и особенно полирезистентного ВИЧ, где применение включает комбинированное, совместное или последовательное введение аловудина и абакавира.

Изобретение, кроме того, предлагает упаковку, предназначенную для пациента, включающую аловудин и/или абакавир и информационный вкладыш, содержащий указания по применению как аловудина, так и абакавира вместе в комбинации.

Неожиданно выраженная степень противовирусного синергизма изобретения обеспечивает такие преимущества, как более полное подавление (супрессия) вируса, супрессия вируса в течение более длительного периода, ограничивает опасность возникновения мутаций, неподдающихся воздействию лекарственных препаратов, и, следовательно, развития полирезистентного ВИЧ и ВГВ и позволяет лучше бороться с токсичностью лекарственных препаратов. Применение такой комбинации лекарственных средств может в некоторых обстоятельствах снижать количество таблеток, принимаемых пациентом, и таким образом обеспечивая большую приемлемость лечения.

Необходимо принимать во внимание, что комбинацию аловудина и абакавира по изобретению можно вводить одновременно, в одной и той же или в различных фармацевтических композициях, или последовательно. В случае последовательного введения задержка перед введением второго активного ингредиента должна быть такой, чтобы синергетическое преимущество изобретения не было утеряно. Как правило, последовательное введение не включает задержки более чем 12 часов, предпочтительно менее чем 1 час, например, до и после еды.

Из-за хорошей переносимости, дозирования один раз в день и очень небольшой дозы/день аловудин может быть выгодным образом введен в качестве дополнения к существующим схемам HAART, таким как терапия, включающая один или два аналога нуклеозидов и ингибитор протеаз и/или один или более NNRTI. Такие перестановки могут быть выбраны из обычных противовирусных препаратов против ВИЧ, таких как 3ЕС, ddI (2',3'-дидезоксиинозин), невирапин, делавирдин, эфавиренц, ритонавир, калетра, саквинавир, ампренавир, фосфат ампренавира, индинавир и др. Предпочтительно исходно существующая схема или сопутствующие противовирусные препараты не включают d4T.

Для простоты введения аловудин и абакавир обычно представлены в одной и той же стандартной лекарственной форме, такой как капсула или таблетка, или в жидкости, содержащей соответствующие концентрации двух активных агентов.

Количество аловудина и абакавира, необходимое для супрессии ВИЧ или ВГВ, разумеется, варьируется от пациента к пациенту и, в конечном счете, определяется на усмотрение лечащего врача, принимающего во внимание такие хорошо известные факторы, как масса тела, путь введения, сопутствующая терапия, возраст, пол и общее состояние, природа и тяжесть заболевания.

Обычно абакавир дозируют в диапазоне от около 3 до около 120 мг/кг/день, например, 1-90 мг/кг/день, предпочтительно 5-60 мг/кг/день. Предпочтительно абакавир присутствует в количестве 200-800 мг на стандартную дозу, более предпочтительно 300-500 мг на стандартную дозу.

В общем аловудин дозируют в диапазоне от около 0,001 до около 0,5 мг/кг/день, предпочтительно 0,005-0,15 мг/кг/день. Следовательно, предпочтительные схемы включают 0,01-0,5 мг/кг/день, например, 0,05-0,12 мг/кг/день. Предпочтительно аловудин присутствует в количестве 0,1-20 мг на стандартную дозу, например, 0,5-10 мг на стандартную дозу, особенно 0,5-5 мг на стандартную дозу, например, 2-5 мг на стандартную дозу.

Аловудин и абакавир обычно вводят один или два раза в день, особенно один раз в день.

Аловудин и абакавир обычно вводятся и/или присутствуют в массовом соотношении, соответствующем их ED₅₀ соответственно, например, в соотношении 1-10:200-800.

Абакавир является коммерчески доступным, и его получение широко описано в патентной и научной литературе. Аловудин обычно получают, как описано в ЕР 495225 и ЕР 470355.

Абакавир и аловудин, особенно в дозовых соотношениях, описанных в данном описании, уже сформулированы в обычных фармацевтических носителях и с обычными вспомогательными веществами. Соединения по изобретению обычно приспособлены для перорального введения, но также могут быть введены ректально, вагинально, назально, местно, трансдермально или парентерально, например, внутримышечно, внутривенно или эпидурально. Соединения могут быть введены отдельно, например, в капсуле, но обычно их вводят с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем. Изобретение распространяется на способы получения фармацевтической композиции, включающей введение аловудина и абакавира вместе с или связанными с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем.

Пероральные композиции обычно получают в стандартных лекарственных формах, таких как капсулы или таблетки, включая обычные носители или связующие вещества, такие как стеарат магния, мел, крахмал, лактоза, воск, камедь или желатин. Липосомы или синтетические или натуральные полимеры, такие как ГПМЦ или ПВП, могут быть использованы для получения композиции замедленного высвобождения. В качестве альтернативы композиция может быть представлена в виде назальных или глазных капель, сиропа, геля или крема, содержащего раствор, суспензию, эмульсию, композиции масло-в-воде или вода-в-масле в обычных растворителях, таких как вода, физиологический раствор, этанол, растительное масло или глицерин, необязательно, вместе с ароматизатором, и/или консервантом, и/или эмульгирующим агентом.

Краткое описание чертежей

Вариант воплощения изобретения будет проиллюстрирован с помощью примера только со ссылкой на чертежи, в которых:

фиг.1 изображает среднее снижение вирусной нагрузки у пациентов, леченных синергетической комбинацией по изобретению, включающей аловудин, добавленный к абакавирвключающей схеме; по сравнению с пациентами, леченными аловудином и схемой, не содержащей абакавир.

Фиг.2 изображает снижение вирусной нагрузки в сравнительном эксперименте, в котором схему, включающую аловудин/ddI, наносили на диаграмму рядом со схемой с аловудином без ddI.

Фиг.3 изображает супрессию ВИЧ как функцию противовирусной концентрации для аловудина, абакавира или комбинации 1:200.

Подробное описание изобретения

Пример 1. Клиническое исследование

Исследование IIa фазы проводили у 15 пациентов, текущие схемы лечения которых, содержащие NRTI, потерпели неудачу. Каждый пациент имел ВИЧ РНК > 1000 cp/ml с, по меньшей мере, 2 мутациями в вирусной RT, индуцированными предшествующей антивирусной терапией, что установлено генотипическим анализом. Пациенты имели исходную вирусную нагрузку 3,93 log₁₀ cp/ml.

Пациентам вводили в день 7,5 мг аловудина в обычном носителе в добавление к их текущей схеме в течение четырех недель. Текущие схемы включали различные варианты 3-5 противовирусных препаратов против ВИЧ, выбираемых из 3ТС, ddI, D4T, невирапина, DMP, ритонавира, калетры, саквинавира, ампренавира и индинавира, вводимых в их обычных лекарственных формах и схемах. Исследование противовирусной нагрузки проводили еженедельно и затем через четыре недели после прекращения приема аловудина. Добавление аловудина обычно хорошо переносилось, и не было отказов от лечения и серьезных побочных эффектов. Обнаружили временное повышение количества CD4 до +52 ед/мм³.

Результаты нанесены на диаграммы на фиг.1 и 2. При обращении сначала к фиг.1 становится очевидным, что схема, содержащая аловудин/абакавир, приводит к достоверно более низким средним вирусным нагрузкам по сравнению с пациентами, которым вводили аловудин, но чья схема сопутствующей терапии не включала абакавир. Это значительное уменьшение вирусной нагрузки аловудином/абакавиром по изобретению является неожиданным, при сопоставлении с применением схем аловудина и ddI (диданозин) на фиг.2, нанесенных на диаграмму по сравнению со схемами, не содержащими ddI. Аловудин и ddI показали явный синергизм в тестах in vitro (Cox et al. AIDS Res Hum Retrovir. 1994 (12): 1275-9). Как видно на фиг.2, данный известный синергизм преобразуется в клинических условиях до снижения в 0,2-0,3 log. Напротив, комбинация по изобретению стойко приводила к снижению в 1-1,5 log, что является значительным скачком в синергизме, принимая во внимание используемую логарифмическую шкалу.

Так как данное клиническое исследование проводили как дополнительную терапию пациентам с предшествующей схемой лечения, необходимо обратить внимание, что аловудин один раз в день вводили в отдельной лекарственной форме к абакавиру (как правило, два раза в день) и другим противовирусным препаратам (как правило, вводимым 2-4 раза в день).

Пример 2. Эксперименты на культуре клеток

Противовирусное влияние MIV-310 в комбинации с другими NRTI на репликацию ВИЧ-1 в клетках МТ4 исследовали методом среднего эффекта (Chao and Talalay 1983). Анализ проводили в пластинах микротитратора, каждая ячейка которых содержала 10⁵ клеток и 20-50 инфекционных доз для культуры ткани ВИЧ-1, IIIb. Каждый лекарственный препарат отдельно и смесь лекарственных препаратов в постоянном соотношении последовательно разводили 2-кратным шагом и добавляли в ячейки в четырех экземплярах. Постоянное соотношение было выбрано для отражения относительной эффективности лекарственных препаратов. Например, эффективность абакавира в клеточной культуре в 200 раз меньше, чем эффективность аловудина. Соответственно, в смеси относительный вклад абакавира пересиливается эффективностью аловудина, если смесь является эквимолярной. При соотношении 1:200 абакавир:аловудин, относительные вклады двух лекарственных средств становятся видимыми, и дополнительная активность из-за синергизма становится заметной. Противовирусный эффект измеряли на 5 день с использованием колориметрического метода XTT.

Фиг.3 отображает диаграмму противовирусной активности по отношению к концентрации для аловудина (сокращенно ФТ на данном графике) и абакавира (сокращенно АБК на данном графике) и смеси обоих при 1:200. При анализе точки кривой аловудин:абакавир 1:200, особенно таковых вокруг ED₅₀ становится очевидным, что противовирусная активность смеси больше, чем сумма вкладов соответствующих частей. Например, треугольник при 65% ингибировании при 0,63 мкМ отражает смесь, где компонент абакавира является 0,63 микромолярным и компонент аловудина составляет 1/200 такового, т.е. 0,003 микромолярный. Однако только абакавир (ромбы) при 0,63 мкМ способствует ингибированию только 10%, тогда как только аловудин (квадраты) при 0,003 мкМ способствует ингибированию 27%. Следовательно, сумма компонентов составляет 37%. При сравнении смесь в тех же самых концентрациях дает 60% ингибирование.

Эффективную дозу, дающую 50% уменьшение репликации вируса, ED₅₀ (или ED₇₅, ED₉₀) рассчитывали для отдельных лекарственных препаратов и для комбинаций, и индекс комбинации рассчитывали по среднему эффекту (там же) равному

D_A/Dx_A+D_B/Dx_B+α(D_АD_B)/(Dx_ADx_B),

где Dx_A представляет собой концентрацию, которая обеспечивает заданную активность соединения А отдельно, D_A представляет собой концентрацию А в смеси для получения такого же ингибирования, Dx_B и D_B также относятся к соединению В и альфа равна нулю, если соединения являются взаимоисключающими, или 1, если соединения являются не взаимоисключающими.

Индекс комбинации (ИК (CI)) менее чем 1 обозначает синергизм, ИК, равный нулю, показывает суммирование, и ИК более чем 1 показывает антагонизм. Индексы комбинации для комбинации по изобретению в сравнении с комбинациями предшествующего уровня техники представлены в таблице 1 ниже. Опять-таки комбинации тестировали при молярных соотношениях, отражающих их относительные ED₅₀ в культуре клеток.

Таблица 1
Комбинация	Молярное соотношение	Индекс комбинации
		50% ингибирование	75% ингибирование	90% ингибирование
ФТ + ставудин (d4T)	1:40	0,94	0,96	0,99
ФТ + зидовудин (AZT)	1:1	0,70	0,71	0,72
ФТ + диданозин (ddI)	1:250	0,95	0,76	0,61
ФТ + абакавир (АБК)	1:200	0,74	0,57	0,47

Предпочтительной комбинацией аловудина в предшествующем уровне техники (US 5571798) является AZT/аловудин, которая в данном эксперименте давала средний ИК 0,71 по трем тестируемым уровням. Напротив, комбинация по изобретению давала средний ИК 0,59, т.е. достоверно более выраженную степень синергизма, чем демонстрируют комбинации предшествующего уровня техники. Подобным образом другая предпочитаемая комбинация в US 5571798, ddI в сочетании с ФТ давала средний ИК 0,77, еще раз показывая, что комбинация по изобретению способствует синергизму достоверно более интенсивному, чем уровень синергизма, наблюдаемый ранее.

Так как целью большинства противовирусных терапий является поддержание минимального уровня в плазме, соответствующего, по меньшей мере, ED₉₀ для предотвращения развития устойчивых мутантов, синергетическое действие в более высокой части спектра имеет значительное преимущество. Из таблицы 1 очевидно, что относительный ИК между комбинациями по изобретению и комбинациями предшествующего уровня техники является даже лучшим, чем ED₉₀ в сравнении со средними значениями, представленными в предшествующем разделе.

Согласуясь с клиническим исследованием примера 1, таблица 1 показывает, что ставудин (d4T) является менее предпочитаемым компонентом для комбинации с аловудином и не проявляет какой-либо достоверной степени синергизма, измеренной по ИК.

1. Фармацевтическая композиция для лечения ВИЧ, включающая абакавир и аловудин в соотношении 1-10:200-800 и фармацевтический носитель для них.

2. Композиция по п.1, где аловудин присутствует в количестве 1-10 мг на стандартную дозу.

3. Композиция по п.2, где аловудин присутствует в количестве 0,5-7,5 мг на стандартную дозу.

4. Композиция по п.3, где аловудин присутствует в количестве 0,5-5 мг на стандартную дозу.

5. Композиция по п.1, где абакавир присутствует в количестве 200-800 мг на стандартную дозу.

6. Композиция по п.5, где абакавир присутствует в количестве 300-500 мг на стандартную дозу.

7. Композиция по п.1, где аловудин и абакавир присутствуют в массовом соотношении, соответствующем ED₅₀ каждого из них.

8. Упаковка, предназначенная для пациента для лечения ВИЧ, включающая аловудин и абакавир и информационный вкладыш, содержащий указания по применению как аловудина, так и абакавира вместе в комбинации.

9. Применение абакавира вместе с аловудином для лечения полирезистентного ВИЧ, где применение включает одновременное, комбинированное или последовательное введение аловудина и абакавира.

10. Применение по п.9, включающее введение композиции, как определено в любом из пп.1-7, или использование упаковки для пациента по п.8.