Способ дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи по относительному объему эпидермиса и митотическому индексу эпидермальных клеток

Авторы патента:

ТУХВАТУЛЛИНА ЗУЛЬФИЯ ГАБИДУЛЛАЕВНА (UZ)

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

G01N33/483 - физический анализ биологических материалов

Владельцы патента RU 2526180:

ГАРИФУЛЛИНА ЭЛЬМИРА ФАНИСОВНА (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи. Для этого проводят гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата, дополнительные морфометрические исследования базальных кератиноцитов в гистологических препаратах биоптатов пораженной кожи. При этом при схожей гистологической картине, описываемой при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи как акантоз, гиперкератоз, паракератоз, отек и расширение сосудов дермы, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы, одинаковом иммунофенотипе клеток инфильтрата при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи, представленном CD2+, CD3+, CD4+, CD5+, CD43+, CD45RO+ лимфоцитами, проводят дополнительно морфометрические исследования всех клеток эпидермиса. Далее рассчитывают относительный объем эпидермиса и митотический индекс эпидермальных клеток. При увеличении относительного объема эпидермиса в 2,2 и более раза по сравнению с нормальной кожей и увеличении митотического индекса эпидермальных клеток в 2,7 и более раза по сравнению с нормальной кожей диагностируют эритродермическую форму грибовидного микоза, а при неизмененных по сравнению с нормальной кожей относительном объеме эпидермиса и митотическом индексе эпидермальных клеток диагностируют синдром псевдолимфомы кожи. Изобретение обеспечивает ускорение и точность дифференциальной диагностики указанных видов лимфом кожи, что позволяет выбрать тактику раннего адекватного рационального лечения пациента. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи.

Грибовидный микоз относят к T-клеточному типу лимфом кожи (Robert Schwartz Skin cancer: recognition and management // 2008 by Blackwell Publishing - first published 2008 - P.242). Одним из вариантов разновидности грибовидного микоза является эритродермическая форма грибовидного микоза, которую трудно дифференцировать от синдрома псевдолимфомы кожи, клинически также проявляющегося эритродермией, морфологически оба заболевания на ранних стадиях имеют черты неспецифического хронического воспаления. Значительная сложность дифференциальной диагностики и принципиальные различия в подходах к лечению выдвигают на первый план проблему верификации диагноза при эритродермической форме грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы.

Известен способ гистологической диагностики различных клинических типов грибовидного микоза путем микроскопического исследования биоптатов пораженной кожи [Ламоткин И.А., Бурлаченко О.В., Тарасенко Ю.Г. Результаты гистологических исследований биоптатов кожи различных клинических типов грибовидного микоза // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2006, №1, стр.4-6]. Авторы проводят гистологическую диагностику различных форм грибовидного микоза на светооптическом уровне, основываясь на следующих основных морфологических критериях: 1) изменение структуры эпидермиса в виде наличия акантоза, гиперкератоза в первой и второй стадиях и атрофии эпидермиса в опухолевой стадии; 2) изменение в дерме, где на всех стадиях болезни авторы выявляли диффузный инфильтрат сосочкового слоя, представленный как моно-, так и полиморфноклеточным пролифератом; 3) наличие в дерме полиморфноклеточного инфильтрата, включающего атипичные лимфоциты; наличие диффузного или очагового (абсцессы Потрие) проникновения лимфоцитов в эпидермис. Данный способ визуально учитывает морфологические изменения, происходящие в коже при различных стадиях грибовидного микоза, но не проводит их количественной оценки, не включает иммунофенотипирования клеток инфильтрата, не позволяет объективизировать и дифференцировать наблюдаемые в коже изменения, не позволяет провести дифференциальную диагностику эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы на ранних стадиях заболевания, в отличие от предлагаемого способа.

Известен способ клинико-лабораторной диагностики лимфом от псевдолимфом кожи, основанный на иммунофенотипировании клеток инфильтрата [Клинико-лабораторная диагностика лимфом кожи. Медицинская технология № ФС-2006/299-У от 26 октября 2006 года. ФГУ «Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунологии» г. Екатеринбург // «Вестник дерматологии и венерологии». - 2009. №4. С.27-34]. Авторы разделяют обследование пациентов на два этапа, на первом этапе предлагают провести изучение анамнеза, особенностей клинических проявлений, общеклинические методы исследования. Результатом первого этапа обследования, по заключению авторов, является предварительный диагноз доброкачественного дерматоза, псевдолимфомы, первично злокачественной лимфомы кожи. На втором этапе авторами проводится патоморфологическое исследование биоптата пораженной кожи, лимфоузла, костного мозга в светооптическом микроскопе, иммунофенотипирование клеток инфильтрата с использованием моноклональных антител: CD 45(LCA), CD45RO, CD45RA, CD3, CD8, CD20, CD30(ki1), ki 67 (фирмы Becton Dickinson), после чего устанавливается окончательный нозологический диагноз псевдолимфомы или злокачественной лимфомы кожи. Однако следует учитывать, что клетки лимфоидного инфильтрата проходят дифференцировку в эпидермисе, меняя при этом свой иммунофенотип как при лимфомах, так и при псевдолимфомах кожи [Burg G., Zwingers T., Staegemeiz E. Et al. Intrarater variabilities in the evolution of cutaneous lymphoma project group // Derm. http://Clin.-1994.-Vol.12-p 311-314]. Следовательно, иммунофенотипирование клеток инфильтрата позволяет оценить природу клеток T и B линий, позволяет диагностировать лимфомы кожи на поздних стадиях заболевания, когда сформировался иммунофенотип клеток инфильтрата, но этот способ не позволяет решить проблему ранней дифференциальной диагностики начальных клинических проявлений эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи, количественно не учитывает отличительные морфологические изменения, проходящие в коже, в частности в эпидермисе, при этих заболеваниях, в отличие от предлагаемого способа. Наши контраргументы согласуются с данными других авторов [Молочков В.А., Лезвинская Е.М., Молочков А.В. Псевдолимфомы-прелимфомы-лимфомы кожи // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2004. №5. С.4-7].

Наиболее близким аналогом изобретения является способ дифференциальной диагностики лимфопролиферативных заболеваний кожи по морфометрическому профилю базальных кератиноцитов, включающий гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата, и при схожей гистологической картине при лимфомах и псевдолимфомах, описываемой как выраженный акантоз, гиперкератоз, наличие в дерме расширения сосудов, переваскулярных лимфогистиоцитарных инфильтратов с проникновением лимфоцитов в эпидермис, а также одинаковом имунофенотипе клеток инфильтрата, а именно CD3⁺, CD4⁺, CD43⁺, CD45RQ⁺, дополнительно проводят морфометрию базальных кератиноцитов в гистологических препаратах биоптатов пораженной кожи, измеряют их площадь и ядерно-цитоплазматическое соотношение и при увеличении площади базальных кератиноцитов в 1,5 и более раза по сравнению с нормой, ядерно-цитоплазматического соотношения базальных кератиноцитов в 2 и более раза по сравнению с нормой диагностируют лимфомы кожи, а при неизмененных морфометрических показателях базальных кератиноцитов - псевдолимфомы кожи» [патент РФ №2476879 от 27.02.2013 г., авторы: Гарифуллина Э.Ф. (Ru), Хисматуллина З.Р. (Ru), Тухватуллина З.Г (Uz)].

В прототипе авторы проводят дифференциальную диагностику лимфом кожи и псевдолимфом кожи, не уточняя критериальные оценки каких-либо видов лимфом. При этом из уровня техники (Burg G. Atlas of cancer of the skin, - New York. - 2006. - 368 p.) известно о существовании различных видов лимфом и псевдолимфом кожи.

Задачей изобретения является разработка способа дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи.

Технический результат - повышение точности дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи за счет объективизации, количественного учета наблюдаемых в коже изменений при этих заболеваниях, путем включения в обследование пациентов не только гистологических, иммунофенотипических, но и морфометрических исследований всех клеток эпидермиса, для обоснования выбора тактики раннего адекватного рационального лечения.

Предлагаемый способ дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи осуществляется следующим образом. Проводят гистологические исследования биоптатов пораженной кожи, иммунофенотипирование клеток инфильтрата по общепринятым методикам [Цветкова Г.М., Мордовцев В.В. Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи. - Москва. Изд-во Медицина. - 1996. - 263 с.; Кунгуров Н.В., Кохан М.М., Сазонов С.В. и др. Алгоритмы клинико-лабораторной диагностики злокачественных лимфом кожи // Клиническая дерматология и венерология. - 2002. №6. С.16-19]. Для проведения световой микроскопии биоптаты кожи фиксируют в 10% растворе нейтрального формалина (pH 7,3). После обезвоживания в спиртах восходящей концентрации биоптаты кожи заливают в парафиновые блоки, срезы толщиной 4 мкм, полученные с блоков, окрашивают гематоксилином и эозином, просматривают в световом микроскопе, описывают морфологические изменения. Для иммуногистохимического исследования повторные срезы с парафиновых блоков предварительно обрабатывают на водяной бане, высушивают и наносят антитела [Izban K.F., Hsi E.D., Ackan S. Immunohistochemical analysis of mycosis fungoides on paraffin - embedded tissue sections. // Mod. Pathol. - 2008. - V.11. p.978-982]. В работе используют панель моноклональных антител CD2, CD3, CD4, CD5, CD45RO, CD43, набора «Fast immune», фирмы «Becton Dickinson», США. Результаты иммуногистохимических реакций визуализируют с помощью системы "Enviston (Dako)". Полученные результаты интерпретируют согласно классификации ВОЗ/EORTC [Молочков В.А., Ковригина A.M., Овсянникова Г.В. Т-клеточные лимфомы кожи: современные подходы к клинико-морфологической диагностике (согласно классификации ВОЗ/EORTC) и лечению // Росс. журн. кож. вен. болезней. - 2009. - №2. - С.4-15.; Белоусова, И.Э., Казаков Д.В., Криволапое Ю.А. Современные подходы к диагностике и лечению первичных лимфом кожи на основе новой ВОЗ-EORTC классификации B-клеточных лимфом кожи. // Архив патологии. - 2007. - №6 - С.48-50]. Микрофотографирование проводят с помощью камеры «Leica DFS 420» и обрабатывают с помощью пакета компьютерного анализа изображения Leica Qwin standart v3.1.0. Статистическую обработку данных проводят с помощью Statistica 7.0 с применением методов непараметрической статистики. При схожей гистологической картине, описываемой при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы как акантоз, гиперкератоз, паракератоз, в дерме отек, расширение сосудов, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы, одинаковом иммунофенотипе клеток инфильтрата при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы, представленном CD2⁺, CD3⁺, CD4⁺, CD5⁺, CD43⁺, CD45RO⁺ лимфоцитами, дополнительно проводят морфометрические исследования клеток эпидермиса в гистологических препаратах биоптатов пораженной кожи с помощью компьютера, совмещенного со световым микроскопом «Leica» фирмы «Leitz Biomed» (Германия), используя окуляр-микрометр и окулярную сетку на 100 точек пересечения [Автандилов Г.Г. Компьютерная морфометрия. - Москва. Изд-во Медицина. - 1999. 320 с.]. Определяют процентное соотношение эпидермиса и дермы в общем объеме микропрепарата, рассчитывают относительный объем эпидермиса; считают митотический индекс эпидермальных клеток путем подсчета количества митозов в эпидермисе, приходящихся на 100 эпидермальных клеток. При увеличении относительного объема эпидермиса в 2,2 и более раза по сравнению с нормальной кожей и увеличении митотического индекса эпидермальных клеток в 2,7 и более раза по сравнению с нормальной кожей диагностируют эритродермическую форму грибовидного микоза. При неизмененном по сравнению с нормой относительном объеме эпидермиса и неизмененном по сравнению с нормой митотическом индексе эпидермальных клеток диагностируют синдром псевдолимфомы кожи (табл.1). Полученные результаты можно объяснить повышением по сравнению с нормой пролиферативной активности эпидермальных клеток при эритродермической форме грибовидного микоза и, напротив, интактностью эпидермиса при синдроме псевдолимфомы.

Таким образом, в предлагаемом способе проводится конкретная дифференциальная морфометрическая диагностика одного из вариантов T-клеточных лимфом кожи - эритродермической формы грибовидного микоза и одного из вариантов разнообразной группы псевдолимфом кожи - синдрома псевдолимфомы кожи. Для этого дополнительно используют при иммунофенотипировании клеток инфильтрата CD2⁺, CD5⁺ моноклональные антитела. В прототипе проводят морфометрические исследования только базальных кератиноцитов, измеряя их площадь и ядерно-цитоплазматическое соотношение. Тогда как в предлагаемом способе дополнительно рассчитывают относительный объем эпидермиса, включая измерения всех клеток эпидермиса, и дополнительно рассчитывают митотический индекс всех клеток эпидермиса.

В доступной научно-медицинской и патентной литературе не было обнаружено сведений об использовании морфометрических исследований клеток эпидермиса с расчетом относительного объема эпидермиса и подсчетом митотического индекса эпидермальных клеток для морфометрической дифференциальной диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию патентоспособности «новизна».

Исследованиями авторов была впервые доказана возможность дифференциальной диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи путем морфометрических исследований эпидермальных клеток с расчетом относительного объема эпидермиса и подсчетом митотического индекса эпидермальных клеток. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».

Предлагаемое изобретение поясняется следующими примерами.

Пример №1. Больной К., 60 лет, водитель горюче-смазочных материалов, поступил в клинику ГАУЗ Республиканского кожно-венерологического диспансера №1 (ГАУЗ РКВД №1) на стационарное лечение с жалобами на высыпания по всему кожному покрову, нестерпимый зуд. Считал себя больным в течение 10 лет. Первые высыпания появились на коже рук, был диагностирован контактный дерматит от горюче-смазочных материалов. Наружная мазевая терапия приводила к временному регрессу заболевания. После переохлаждения, перенесенного ОРВИ высыпания стали распространяться по всему кожному покрову, сливаясь, образовали сплошную эритродермию. Неоднократно обращался в КВД по месту жительства, где назначалась десенсибилизирующая, симптоматическая терапия, не приводящая к клиническому улучшению. Для уточнения диагноза направлен в ГАУЗ РКВД №1 с направительными диагнозами: эритродермическая форма грибовидного микоза? синдром псевдолимфомы кожи? При поступлении кожно-патологический процесс носил распространенный характер, в виде пятен розово-красной окраски, различных размеров и форм, сливающихся в сплошной очаг гиперемии, инфильтрации, лихенификации. Кожные покровы на нижней трети живота и ногах были инфильтрированы, утолщены, застойно гиперемированны, с буровато-синюшным оттенком. Поверхность кожного покрова была горячая на ощупь, с мелко пластинчатым шелушением. Отмечались ладонно-подошвенный гиперкератоз, диффузная алопеция. Периферические лимфоузлы были увеличены до величины крупной фасоли, неспаяны с окружающими тканями. Гистологически в биоптатах пораженной кожи отмечался акантоз, гиперкератоз, паракератоз. В дерме имелись расширенные сосуды, отек дермы, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы. Иммунофенотип клеток инфильтрата был представлен: CD2⁺, CD3⁺, CD4⁺, CD5⁺, CD43⁺, CD45RO⁺ лимфоцитами, что не позволило установить диагноз, выбрав из двух направительных диагнозов (эритродермическая форма грибовидного микоза? синдром псевдолимфомы кожи?) один окончательный. Для уточнения диагноза и морфологической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи было проведено морфометрическое исследование эпидермальных клеток. Относительный объем эпидермиса у данного больного составил 27,98%, митотический индекс 15,83, что превышало аналогичные показатели нормы в 2,2 и 3,14 раза соответственно и соответствовало морфометрическим параметрам эпидермальных клеток при эритродермической форме грибовидного микоза (табл.1). На основании комплексных клинико-лабораторного, гистологического, иммунофенотипического, морфометрического исследований у данного пациента установлен диагноз эритродермическая форма грибовидного микоза. Это позволило обосновать выбор тактики специфической цитостатической терапии (проспидин). После получения 3-х курсов специфической проспидинотерапии совместно с кортикостероидами, препаратами кальция, аевитом и наружной терапии целестодермом элементы регрессировали. В течение года рецидив заболевания не наблюдался. Больной находится на активном диспансерном наблюдении.

Пример №2. Больная А., 45 лет, строитель-маляр, поступила в клинику ГАУЗ РКВД №1 с предположительными диагнозами эритродермическая форма грибовидного микоза? синдром псевдолимфомы кожи? При поступлении предъявляла жалобы на сильный постоянный зуд, всего тела, озноб, повышение температуры тела до 39°C, общее недомогание, слабость, покраснение всего кожного покрова, отслойку рогового слоя эпидермиса. Считала себя больной в течение месяца, когда после лечения противосудорожными средствами, которые получала по поводу эпилепсии, появилось покраснение кожи туловища, отслойка рогового слоя эпидермиса. Объективно при поступлении: кожно-патологический процесс универсального характера, по типу эритродермии. Кожные покровы ярко-красного цвета с ливидным оттенком, были инфильтрированы, лихенифицированны в области кожных складок, обильно покрыты крупнопластинчатыми чешуйками. Подчелюстные, заднешейные, подмышечные, кубитальные, паховые лимфоузлы были увеличены до 2 см в диаметре, плотноэластической консистенции при пальпации, подвижные, безболезненные, неспаянные с окружающей тканью. При гистологическом исследовании пораженной кожи было обнаружено: акантоз, гиперкератоз, паракератоз, в дерме сосуды расширены, отек дермы, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы. Иммунофенотип клеток инфильтрата был представлен CD2⁺, CD3⁺, CD4⁺, CD5⁺, CD43⁺, CD45RO⁺ лимфоцитами, что не позволило установить диагноз, выбрав из двух направительных диагнозов (эритродермическая форма грибовидного микоза? синдром псевдолимфомы?) один окончательный. Для уточнения диагноза и дифференциальной морфологической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы было проведено морфометрическое исследование эпидермальных клеток. Морфометрические исследования эпидермальных клеток отклонений их параметров от нормы не выявили: относительный объем эпидермиса составил 12,46%, митотический индекс 4,2, что соответствовало морфометрическому профилю эпидермальных клеток при псевдолимфомах кожи (табл.1) С учетом анамнестических данных, клинико-гистологической картины, иммунофенотипирования клеток инфильтрата, морфометрических исследований клеток эпидермиса был установлен диагноз синдрома псевдолимфомы. Это позволило обосновать выбор тактики детоксикационной терапии, включающий курс плазмофереза в сочетании с энтеросорбентами и антигистаминными препаратами. В результате проведенного лечения гиперемия, инфильтрация стали менее выраженными, шелушение отсутствовало, появились участки здоровой кожи, лимфатические узлы уменьшились, температура нормализовалась. После однократной инъекции дипроспана удалось добиться клинического излечения. В дальнейшем пациентка к дерматологу не обращалась.

Как видно из приведенных примеров, диагностика эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи сложна, необходимы комплексные клинико-лабораторные методы исследования. Проведение гистологических исследований, иммунофенотипирование клеток дермального инфильтрата показало схожую гистологическую картину, описываемую как акантоз, гиперкератоз, паракератоз, в дерме отек, расширение сосудов, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней части дермы, схожий иммунофенотип клеток инфильтрата, представленный CD2⁺, CD3⁺, CD4⁺, CD5⁺, CD43⁺, CD45RO⁺ лимфоцитами, как при эритродермической форме грибовидного микоза, так и при псевдолимфомах кожи. Применение морфометрических исследований эпидермальных клеток позволило отдифференцировать эритродермическую форму грибовидного микоза и синдром псевдолимфомы кожи, что в свою очередь, позволило обосновать выбор тактики раннего адекватного рационального лечения, приведшего к полному регрессу заболевания. Количественная оценка морфологических изменений в коже при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи по относительному объему эпидермиса и митотическому индексу эпидермальных клеток полностью совпали с клинической оценкой заболевания во всех наблюдаемых случаях. Следовательно, на наш взгляд, диагностика эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи должна осуществляться с использованием мультиспектра диагностических методов: клинических, гистологических, иммунофенотипических и морфометрических.

Заявленным способом была проведена дифференциальная диагностика у 15 больных с эритродермической формой грибовидного микоза и 18 с синдромом псевдолимфомы кожи, и во всех случаях был достигнут указанный технический результат. Способ воспроизводим в условиях гистологической лаборатории стационара, следовательно, заявляемое изобретение соответствует критерию патентоспособности «промышленная применимость».

Таким образом, отличие от прототипа (табл.2) заявленного нами способа дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи по относительному объему эпидермиса и митотическому индексу эпидермальных клеток заключается в следующем:

1) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ конкретизирует вид лимфомы кожи, в частности эритродермическую форму грибовидного микоза и вид псевдолимфомы кожи, в частности синдрома псевдолимфомы и проводит дифференциальную морфометрическую диагностику между этими двумя конкретными нозологическими формами;

2) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ дополнительно использует при иммунофенотипировании клеток инфильтрата CD2, CD5 моноклональные антитела;

3) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ рассчитывает относительный объем эпидермиса и митотический индекс всех эпидермальных клеток;

4) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ объективизирует, количественно учитывает наблюдаемые в коже изменения при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи путем морфометрических исследований эпидермальных клеток;

5) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ проводит дифференциальную морфологическую диагностику начальных клинических проявлений эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи путем измерения относительного объема эпидермиса и подсчета митотического индекса эпидермальных клеток;

6) заявленный нами способ обосновывает выбор тактики раннего адекватного рационального лечения, в зависимости от установленного диагноза;

7) заявленный нами способ ускоряет диагностику эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи более чем в 2 раза путем включения в обследование пациентов не только гистологических, иммунофенотипических, но и морфометрических исследований всех клеток эпидермиса на более ранних стадиях заболеваний.

Таблица 1
Морфометрические исследования эпидермальных клеток при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи
Нозология	Относительный объем эпидермиса (М±m) (%)	Митотический индекс эпидермальных клеток (М±m)
Эритродермическая форма грибовидного микоза (n=15)	27,94±1,61**	13,42±1,41***
Синдром псевдолимфомы кожи (n=18)	12,94±1,55	4,7±1,82
Контроль (здоровая кожа) (n=10)	12,88±0,3	5,03±1,11
Примечание: * - достоверность различий показателей с контролем при p<0,05; p<0,01; * p<0,001; в остальных случаях p>0,05

Таблица 2
Сравнительные данные технических результатов прототипа и предлагаемого способа
Результат	Предлагаемый способ (общее количество обследованных - 33)	Наиболее близкий аналог (количество больных - 61)
Конкретизирует вид диагностируемой лимфомы кожи, как эритродермической формы грибовидного микоза и вид псевдолимфомы кожи, как синдрома псевдолимфомы кожи	конкретизирует	не конкретизирует
Дополнительно использует CD2, CD5 моноклональные антитела при иммунофенотипировании клеток инфильтрата	использует	не использует
Проводит морфометрию клеток	всего эпидермиса	только базальных клеток или ангитегенпредставляющих клеток
Морфометрически рассчитывает	относительный объем эпидермиса и	площадь и ядерно-цитоплазматическое соотношение

Продолжение таблицы 2
	митотический индекс всех клеток эпидермиса	только базальных клеток или только ангитегенпредставляющих клеток
Объективизация, количественная оценка, учет изменений в коже, проходящих при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи по относительному объему эпидермиса и митотическому индексу эпидермальных клеток	позволяет	не позволяет
Дифференциальная морфометрическая диагностика эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи путем измерения относительного объема эпидермиса и подсчета митотического индекса эпидермальных клеток	проводит	не проводит
Обоснование выбора тактики раннего адекватного рационального лечения для эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи	обосновывает	не обосновывает
Срок проведения диагностики	первая неделя заболевания	через 3-4 недели от начала заболевания

Способ дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи, включающий гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата, дополнительные морфометрические исследования базальных кератиноцитов в гистологических препаратах биоптатов пораженной кожи при схожей гистологической картине и одинаковом иммунофенотипе клеток инфильтрата, отличающийся тем, что при схожей гистологической картине, описываемой при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи как акантоз, гиперкератоз, паракератоз, отек и расширение сосудов дермы, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы, одинаковом иммунофенотипе клеток инфильтрата при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи, представленном CD2⁺, CD3⁺, CD4⁺, CD5⁺, CD43⁺, CD45RO⁺ лимфоцитами, проводят дополнительно морфометрические исследования всех клеток эпидермиса, причем рассчитывают относительный объем эпидермиса и митотический индекс эпидермальных клеток и при увеличении относительного объема эпидермиса в 2,2 и более раза по сравнению с нормальной кожей и увеличении митотического индекса эпидермальных клеток в 2,7 и более раза по сравнению с нормальной кожей диагностируют эритродермическую форму грибовидного микоза, а при неизмененных по сравнению с нормальной кожей относительном объеме эпидермиса и митотическом индексе эпидермальных клеток диагностируют синдром псевдолимфомы кожи.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования задержки внутриутробного роста плода. Для этого в венозной крови женщины на ранних сроках беременности определяют относительное содержание CD3+CD16+56+-лимфоцитов, уровня С3-компонента комплемента и растворимого рецептора фактора некроза опухоли (sTNF-R).

Способ прогнозирования течения бактериальных гнойных менингитов у детей // 2526177

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования течения и исходов бактериальных гнойных менингитов (БГМ) различной этиологии у детей.

Способ прогнозирования послеоперационной регенерации у пациентов с ложными суставами длинных трубчатых костей // 2526173

Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии и ортопедии, и описывает способ прогнозирования послеоперационной регенерации у пациентов с ложными суставами длинных трубчатых костей, включающий исследования венозной крови пациента, анализ результатов ее исследования с выдачей прогноза послеоперационной регенерации по выбранным показателям, в плазме крови пациента определяют уровень содержания диеновых конъюгатов (ДК) и двойных связей (ДС) в липидах плазмы крови, количество липидов в плазме крови пациента, количество белка «острой фазы» - церулоплазмина, а также определяют процентное содержание высоко стойких эритроцитов в крови пациента, оценивают интегральные показатели изменения состояния молекулярно-биологических процессов в системе равновесия перекисного окисления липидов (ПОЛ) плазмы крови пациента и ее антиоксидантной защиты (АОЗ), при этом критерием возникновения дисбаланса в системе «ПОЛ-АОЗ» плазмы крови пациента выбирают в качестве интегрального показателя произведение содержания диеновых конъюгатов (ДК) и двойных связей (ДС) в липидах плазмы крови пациента, затем в случае, если измеренный показатель содержания двойных связей (ДС) составляет (29,6-37)10-7 М/мг липидов, измеренный показатель содержания диеновых конъюгатов (ДК) составляет (2,34-2,76)10-1 условных единиц, вычисленный по результатам измерений интегральный показатель в виде произведения ДС×ДК составляет (69,3-102,1)10-8 условных единиц, количество липидов в плазме крови пациента составляет 6,2-8,6 мг/мл, количество белка «острой фазы» - церулоплазмина в плазме крови пациента составляет 29,6-36,8 условных единиц, а процентное содержание высоко стойких эритроцитов в популяции эритроцитов в плазме крови пациента составляет (14,3-17,3)%, то прогнозируют прохождение процессов, сопровождающихся нарушением структуры мембран эритроцитов с проявлением замедленной консолидации поврежденного элемента опорно-двигательного аппарата с образованием не осложненного воспалительными процессами ложного сустава, а в случае, если измеренный показатель содержания двойных связей (ДС) составляет (41,6-49,4)10-7 М/мг липидов, измеренный показатель содержания диеновых конъюгатов (ДК) составляет (3,16-3,54)10-1 условных единиц, вычисленный по результатам измерений интегральный показатель в виде произведения ДС×ДК составляет (131,5-174,9)10-8 условных единиц, количество липидов в плазме крови пациента составляет 2,6-5,8 мг/мл, количество белка «острой фазы» - церулоплазмина в плазме крови пациента составляет 41,6-49,4 условных единиц, а процентное содержание высоко стойких эритроцитов в популяции эритроцитов в плазме крови пациента составляет (4,6-6,0)%, то прогнозируют прохождение процесса нарушения структуры мембран эритроцитов с проявлением замедленной консолидации поврежденного элемента опорно-двигательного аппарата с образованием отягощенного нагноением осложненного ложного сустава.

Способ диагностики туберкулеза // 2525428

Изобретение относится к медицине, в частности к области медицинской диагностики, и описывает способ диагностики туберкулеза путем проведения иммуноцитогистохимического исследования и выявления экспрессии антигена микобактерии туберкулеза.

Способ детекции дегенеративных мышечных заболеваний и способ определения терапевтической эффективности при заболеваниях // 2524641

Изобретение относится к способу ранней детекции мышечных дегенеративных заболеваний и к способу прогнозирования и/или определения терапевтической эффективности терапевтического средства и/или способа терапии заболеваний посредством измерения тетранор-PGDM (11,15-диоксо-9α-гидрокси-2,3,4,5-тетранорпростан-1,20-диовой кислоты) в образце мочи субъекта и сравнения его содержания относительно образца, выделенного у здорового индивидуума.

Способ диагностики снижения поствакцинального иммунитета к дифтерии у детей, проживающих в условиях воздействия вредных химических факторов среды обитания // 2524636

Изобретение относится к области медицины, в частности к способам оценки влияния неблагоприятных химических факторов антропогенного происхождения на изменение поствакцинального иммунитета у детей к дифтерии.

Способ оценки чувствительности сосудистого эндотелия к напряжению сдвига // 2524632

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии, и может быть использовано для оценки чувствительности сосудистого эндотелия к напряжению сдвига. Способ заключается в следующем: до и после окклюзионной пробы определяют уровень нитритов и эндотелина в крови.

Способ диагностики ранней стадии ревматоидного артрита // 2524616

Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано для диагностики ранней стадии ревматоидного артрита. Для этого производят забор у пациента одновременно образцов костного мозга и синовиальной оболочки, из которых готовят препараты для иммуногистохимического и иммуноцитохимического исследований.

Вирус диареи крупного рогатого скота с модифицированным белком erns // 2524426

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Описан химерный пестивирус, где указанный химерный пестивирус включает вирус диареи крупного рогатого скота, который не экспрессирует его гомологичный Erns белок.

L-фукоза α1→6 специфичный лектин // 2524425

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен L-фукоза α1→6-специфичный лектин, экстрагируемый из базидиального гриба или сумчатого гриба, характеризующийся пиковым значением молекулярной массы около 4500 m/z, определяемым при масс-спектрометрическом анализе MALDI-TOF.

Способ управления биохимическими реакциями // 2525439

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано для управления биохимическими реакциями in vitro и in vivo. Управление осуществляется посредством воздействия на магнитную наносуспензию, содержащую биоактивную макромолекулу, прикрепленную непосредственно или через лиганд к однодоменным магнитным наночастицам, внешним низкоинтенсивным низкочастотным переменным магнитным полем, обеспечивающим деформацию и/или изменение конформации участвующих в реакции биоактивных макромолекул.

Способ диагностики стеноза артериовенозной фистулы у больных с терминальной стадией хронической болезни почек, находящихся на программном гемодиализе // 2522397

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в нефрологии при заместительной почечной терапии у пациентов с терминальной стадией хронической болезни почек.

Способ прогноза развития бактериальных осложнений на фоне острой респираторной вирусной инфекции // 2522202

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогноза развития бактериальных осложнений у больных с острой респираторной вирусной инфекции до появления их клинической картины.

Способ определения глубины проникновения света в кожу и устройство для его реализации // 2521838

Группа изобретений относится к области медицинского приборостроения. На кожу и калибровочный образец посылают световое излучение не менее чем в Nλ≥3 узких или широких спектральных участках Λk (k=1,…,N).

Способ и прибор для сортировки клеток // 2520848

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой прибор и систему для обнаружения и выборочного изменения нужной субпопуляции клеток в популяции с клеточными образцами.

Способ активизации роста лейкоцитарной массы и комплексной коррекции состава крови в акустическом поле in vitro // 2518534

Изобретение относится к медицине и биологии, касается способа активизации роста лейкоцитарной массы и комплексной коррекции состава крови в акустическом поле in vitro.

Способ определения оптических и биофизических параметров биоткани // 2510506

Изобретение относится к области медицинского приборостроения и применяется для определения оптических и биофизических параметров биоткани. Сущность способа: посылку излучения на ткань в одну или несколько точек осуществляют на длинах волн λ из диапазона 350-1600 нм, измеряют диффузное отражение P(L, λ) на длинах волн посылаемого излучения для каждой из точек освещения, определяют абсолютный R(L, λ) или нормированный r(L, λ) спектрально-пространственный профиль коэффициента диффузного отражения ткани, а оптические и биофизические параметры (X) определяют на основе аналитических выражений, представляющих собой множественные регрессии между Х и R(L, λ) или между Х и r(L, λ), которые получают путем измерения или расчета методом Монте-Карло R(L, λ), r(L, λ) для множества образцов биоткани или моделирующих ее фантомов с известными оптическими и биофизическими параметрами, накопления ансамбля реализации оптических и биофизических параметров биоткани и соответствующих им спектрально-пространственных профилей R(L, λ), r(L, λ) для возможных диапазонов вариаций оптических и биофизических параметров ткани.

Способ дифференциальной диагностики синдрома сезари от эритродермий, возникающих при доброкачественных воспалительных дерматозах, по морфометрическому профилю антигенпредставляющих клеток // 2498301

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики синдрома Сезари от эритродермий. Для этого проводят гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата.

Способ диагностики мужских и женских форм бесплодия // 2485507

Изобретение относится к медицине, в частности к гинекологии, и касается диагностики мужских и женских форм бесплодия путем оценки нарушений микроциркуляции. .

Способ подготовки образцов биопленок микроорганизмов для исследования в сканирующем электронном микроскопе // 2484446

Изобретение относится к способу подготовки образцов биопленок микроорганизмов для исследования в сканирующем электронном микроскопе. .

Способ прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга // 2526796

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга. Для этого в периферической крови больных до лечения и перед каждым последующим курсом химиотерапии определяют объем и электрическую проводимость лимфоцитов, вычисляя коэффициент отношения первого показателя ко второму. При снижении значений коэффициента в сравнении с исходными прогнозируют положительную эффективность лечения и отсутствие симптомов генерализации заболевания. При отсутствии снижения или при повышении значений коэффициента - отсутствие или низкую эффективность лечения и наличие симптомов продолженного роста злокачественного процесса. Использование данного способа позволяет определить чувствительность больных неходжкинскими лимфомами к химиотерапии и осуществлять ближайший и отдаленный прогноз течения заболевания. 1 табл., 3 пр.