Пероральная форма бигормональной композиции для регуляции половой охоты у мелких домашних животных (варианты)

Группа изобретений относится к области фармацевтики и может быть использована в ветеринарии для регуляции половой охоты у мелких домашних животных, преимущественно у кошек и собак. Предлагаются две пероральные формы (жидкая и таблетированная) средства для угнетения признаков половой охоты, действующим началом которого является комбинация ацетата мегестрола (МА) с эстрогеном, предпочтительно этинилэстрадиолом. Композиция по изобретению характеризуется определенным содержанием МА (0,1-2,5%) и соотношением действующих веществ (5-500:1). Группа изобретений обеспечивает получение высокоэффективного средства данного назначения с повышенным уровнем безопасности в сравнении с аналогами для топикального способа применения. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 9 табл., 7 пр.

 

Изобретение относится к области фармацевтики и может быть использовано в ветеринарии для подавления признаков половой охоты у мелких домашних животных, преимущественно у кошек и собак. Предлагается ветеринарная композиция на основе комбинации ацетата мегестрола (МА) с эстрогеном (Э), представленная в таблетированной форме или в виде суспензии для приема per os, которая характеризуется содержанием МА от 0,1 до 2,5% и соотношением МА/Э от 5:1 до 500:1 и является высоко эффективным средством данного назначения с повышенным уровнем безопасности в сравнении с аналогами для топикального способа применения.

Введение

В последние годы проблема контрацепции у мелких домашних животных стала одной из важнейших в ветеринарной практике. Очевидно, что каждый из двух основных подходов к ее решению, хирургический и консервативный, имеет как свои положительные, так и свои отрицательные стороны.

Известными недостатками оперативного способа контрацепции являются его инвазивный характер, необратимый результат хирургического вмешательства, риск осложнений и летального исхода, а также необходимость особого ухода, затрат времени и финансов в послеоперационный период. Что касается консервативных способов контрацепции, которые предполагают использование фармакологических средств, представленных, главным образом, гестаген-содержащими гормональными препаратами, то основные претензии противников этого направления в области регулирования половой функции у домашних животных относятся к последствиям сдвига гормонального статуса, выражающимся в возникновении характерных для прогестинов побочных эффектов.

Необходимо, однако, отметить, что значительный рост объема знаний о репродуктивной биологии мелких домашних животных, с одной стороны, и активно ведущиеся разработки по созданию новых гормональных препаратов с другой - создают благоприятные условия для усовершенствования методик консервативной контрацепции как в плане повышения эффективности, так и в плане повышения их безопасности. Так, существенным шагом вперед в решении проблемы гормональной регуляции половой охоты мелких домашних животных стало предложение использовать для этой цели бигормональные композиции, а именно препараты, представляющие собой комбинацию гестагенного и эстрогенного гормонов.

Уровень техники

Моногормональные контрацептивные препараты в ветеринарии мелких домашних животных применяются уже более 50 лет. Наиболее изученным действующим веществом (ДВ) таких препаратов, получившим широкое применение в ветеринарии для предотвращения течки или ее прерывания, является мегестрола ацетат (МА). В частности, в российской ветеринарной практике используются такие контрацептивные препараты на основе МА, как таблетки «СексКонтроль К» и «СексКонтроль капли» («НПФ «Экопром»), суспензия «Овостоп» ("АВЗ С-П"), капли и таблетки для кошек «Стоп-Интим» (НПО "Апи-Сан"), брикет (в форме сахарного кубика) «Пиллкан 5», таблетки «ЭКС-5Т», суспензии «ЭКС-5» и «ЭКС-7,5», таблетки и капли (эмульсия) «Четыре с хвостиком» ("НВЦ Агроветзащита С-П.") (Государственный реестр лекарственных средств для ветеринарного применения. https://galen.vetrf.ru/#/registry/pharm/registry?page=1).

Мегестрола ацетат является производным природного метаболита прогестерона -17α-гидроксипрогестерона. Он обладает высоким уровнем гестагенной активности и относится к числу наиболее изученных в физиологическом отношении прогестинов, в том числе в плане возможных побочных эффектов. Установлено, что при пероральном применении МА в рекомендуемых дозах не оказывает мутагенного, тератогенного, сенсибилизирующего и гепатотоксического действия (Инструкции по применению препарата «СексКонтроль К», «Стоп-Интим» и др.), а риск развития побочных явлений оценивается специалистами как незначительный (Симпсон Дж. и др., Руководство по репродукции и неотологии собак и кошек». 2005, М.: Софинон, 229-230).

Известно, что МА легко адсорбируется в кишечнике, биотрансформируется в печени и виде метаболитов полностью выводится из организма с мочой и фекалиями. Гормон действует на гипоталамо-гипофизарную систему, блокируя секрецию гонадотропных гормонов (ФСГ и ЛГ). При использовании до начала течки он предотвращает овуляцию, а при применении в начале фолликулярной фазы приводит к ее прекращению. Существенно, что снижение половой активности сопровождается устранением и связанных с ней поведенческих проблем, включающих мечение территории, возбужденное поведение, агрессивность и т.п.

Сравнительно недавно было показано, что МА, наряду с некоторыми эфирами ацетата мепрегенола (АМОЛА), демонстрирует многократное повышение контрацептивной активности в случае использования его в комбинации с эстрогенами, в частности с этинилэстрадиолом. (Зейналов О.А. и др., 2012, Химико-фармацевтический журнал, 46, №4, 7-10). Установление данной закономерности объясняет возможность существенного снижения содержания гестагена в составе бигормонального препарата без потери его эффективности. Данный феномен лежит в основе большого числа практических разработок последних лет, связанных с получением оральных бигормональных препаратов для подавления половой охоты у кошек и собак на основе эфиров АМОЛА (патенты РФ №№2455005, 10.07.2012; 2455006, 10.07.2012; 2456991, 10.07.2012; 2456992, 10.07.2012; 2295345, 20.03.2007), отличающихся от их моногормональных аналогов значительно более низким содержанием ДВ. К бигормоальным композициям этого назначения относится и средство, описанное в патенте РФ №2545745 C1 (10.04.2015) и получившее название СексКонтроль (spot on), которое указывает на отличительную особенность предлагаемого препарата, заключающуюся в топикальном способе его нанесения. Данная разработка может рассматриваться как ближайший аналог (прототип) настоящего изобретения, поскольку в состав композиции СексКонтроль (spot on) входит та же комбинация ДВ, что и в настоящем изобретении, - «мегестрола ацетат/этинилэстрадиол».

Прототип настоящего изобретения представляет средство для регуляции половой охоты у кошек и собак, содержащее мегестрола ацетат в концентрации 0,5-2,5%, этинилэстрадиол в концентрации 0,01-0,02%, D,L-α-токоферол в концентрации 0,005% и ментол в концентрации 0,01%. Предлагаемое средство представлено в форме капель для нанесения на холку, где растворителем (массовая доля в составе более 97%) является моноэтиловый эфир диэтиленгликоля (ДЭМЭ). Согласно предлагаемой схеме обработки кошек весом до 5 кг для задержки течки препарат наносят в течение 3-х месяцев 1 раз в неделю по 0,1 мл/гол, для прерывания течки - в течение недели 1 раз в сутки по 0,2 мл/гол; у сук для задержки течки препарат используют до 15 дней ежедневно по 0,1 мл, а для ее прерывания - в течение 3 дней по 0,2 мл и последующих 7 дней - по 0,1 мл/гол; для снижения полового возбуждения котам и кобелям в течение 7 дней наносят препарат по 0,2 мл /гол, а в последующие 14 дней - снижают дозу до 0,1 мл, если на первой неделе проявлялся положительный результат. При этом сообщается, что в результате применения препарата течка не наступала ни у одной из кошек, прерывание течки наблюдалось у всех экспериментальных животных в сроки от 3 до 6 дней, а нормальный половой цикл восстанавливался через 2,5-3 месяца после прекращения его использования. К сожалению, в названной работе отсутствуют экспериментальные данные, определяющие зависимость эффективности действия препарата от дозы ДВ, которая в рамках названного интервала изменяется по МА в 5 раз (от 5 до 25 мг/мл). Однако, исходя из формулы изобретения (зависимый п. 2), предпочтительными признаются составы с максимальным содержанием мегестрола ацетата (2,5%).

При очевидном преимуществе, состоящем в простоте нанесения препарата, нельзя не обратить внимания на то, что, несмотря на достаточно длительный период ведения разработок, относящихся к контрацептивам на основе гестагенов, лекарственная форма spot on для них никем из производителей до настоящего времени не использовалась. Это обстоятельство представляется не случайным, если принять во внимание большое число недостатков, связанных с данной лекарственной формой, которые хорошо известны специалистам. К основным недостаткам средств, представленных в виде капель на холку, в том числе и прототипа, следует отнести следующие.

а) Топикальный способ нанесения препарата в расчете на потери во внешней среде и при проникновении через кожный покров, обычно предполагает использование составов с более высокими концентрациями ДВ, чем в аналогах, предназначенных для орального применения (так, например, в препарате Празицид для орального применения концентрация ДВ (празиквантела) составляет 15 мг/мл, а в его аналоге для нанесения на холку - в 7 раз больше, в препарате «Гельминтал» эта разница 17-кратная: 5 мг/мл против 85 мг/мл)

б) Применение препаратов в форме «капель на холку» из-за невозможности оценить в каждом отдельном случае величину потерь ДВ значительно повышает вероятность ошибок в плане достижения, поддержания и воспроизведения необходимых терапевтических доз (точности дозирования) в сравнении с пероральными аналогами.

в) После нанесения препарата типа spot on часто возникает необходимость во временном изолировании животного, т.к. без этого велика возможность переноса части средства на кожу людей (в том числе детей) либо непосредственно, либо через загрязненные в результате контакта с ними животного предметы обихода.

г) В результате необходимости ограничения контактов с владельцами после обработки животное на тот или иной, часто достаточно длительный, срок лишается необходимого ухода (расчесывания, мытья и т.п) и привычного для него общения с хозяевами.

д) Как правило, рассматриваемая форма препарата включает значительные количества органических растворителей, большинство из которых являются токсичными соединениями, и может оказывать неблагоприятное воздействие на волосяной покров и кожу животного, а при случайном попадании в рот - вызывать симптомы отравления.

Конкретно в случае прототипа в качестве растворителя используется ДЭМЭ, который является токсичным соединением (http://chemindustry.ru/rus/chemicals/Ethyl_Carbitol.php), представляющим опасность для здоровья животного в результате быстрого воздействия на легкие и отдаленного - на кожу (Документ из ИПС «Кодекс». Гликолевые эфиры. Табл. 104.74; https://base.safework.ru/iloenc?print@nd=857300046).

С учетом вышеизложенного, задачей настоящего изобретения было создание пероральной формы бигормонального препарата на основе комбинации мегестрола ацетата/эстрогена, предназначенной для подавления признаков половой охоты у мелких домашних животных, которая демонстрировала бы высокую эффективность при существенно более низких, чем в прототипе, терапевтически эффективных дозах МА, обеспечивала отсутствующие у препарата СексКонтроль (spot on) возможности точного дозирования и была бы более безопасной для здоровья животного за счет снижения (в сравнении с прототипом) терапевтически эффективной дозы гестагена и исключения из состава препарата органических растворителей, а также и для окружающей среды благодаря отказу от наружного применения препарата (технические результаты).

Раскрытие изобретения

Сведений о пероральных формах бигормональных препаратов, основанных на комбинации мегестрола ацетата с эстрогеном и предназначенных для регуляции половой охоты у кошек и собак, в общедоступных источниках на сегодняшний день не имеется. Первым указанием на принципиальную возможность повышения эффективности ацетата мегестрола как контрацептивного агента в присутствии эстрогена, конкретно этиленэстрадиола (ЭЭ), были проведенные авторами настоящего изобретения эксперименты на крысах, в которых при ежедневном энтеральном применении комбинации МА/ЭЭ в течение 14 дней в разовых дозах, соответственно, 0,8 мг и 0,04 мг на кг веса животного достигался 100%-ный контрацептивный эффект (Зейналов О.А. и др., 2012), тогда как при использовании в тех же условиях только МА его контрацептивная активность составляла лишь 23%. Это позволило авторам высказать предположение о возможной перспективе снижения дозы гестагена в составе оральных контрацептивных препаратов при использовании его в комбинации с эстрогеном. Следует, однако, отметить, что эксперименты проводилась на модельной системе (лабораторные крысы, энтеральный способ введения) и имели отношение исключительно к процессу контрацепции. В связи с этим, перспектива успешной разработки на этой основе низкодозированных оральных форм (капельных и/или таблетированных) препаратов, имеющих основным назначением регуляцию половой охоты и эффективных в отношении кошек и собак, половые циклы которых подчиняются иным, чем у грызунов, закономерностям, не следовала с очевидностью из полученных в этой работе данных.

Что касается прототипа, где был получен эффект подавления признаков половой охоты у кошек и собак при использовании состава на основе МА/ЭЭ, наносимого на холку животного, то терапевтически эффективные (курсовые) дозы МА сохраняли в целом высокие значения (от 6,5-14 мг/гол при минимальной концентрации МА до 32,5-70 мг/гол при максимальной концентрации МА), которые с высокой степенью вероятности можно было отнести к топикальному способу применения, обычно требующему «излишков» ДВ в связи с неизбежными потерями во внешней среде и при транспортировке в кровоток.

Поскольку пероральные контрацептивные препараты на основе комбинации МА/ЭЭ из уровня техники неизвестны, для того, чтобы получить предварительную оценку возможности дополнительного снижения указанных доз при переходе от топикальной к оральной форме применения, нами был проведен анализ концентраций ДВ, схем применения, разовых, суточных и курсовых доз положительно зарекомендовавших себя в ветеринарной практике бигормональных препаратов СексБарьер и КонтСекс Neo (ООО "НВП "Астрафарм", РФ), предлагаемых в виде растворов (капель) или твердых форм (таблеток) для орального применения. Названные препараты содержат в качестве ДВ, соответственно, гемисукцинат и бутират мепрегенола, которые по уровню контрацептивной активности в присутствии ЭЭ сравнимы с МА (Зейналов О.А., 2012).

Результаты анализа капельных форм коммерческих бигормональных препаратов для перорального применения приведены в таблице 1.

Из сравнения показателей для пероральных капельных форм известных бигормональных композиции и капельных форм spot on по прототипу (таблица 2) с очевидностью следует, что исходные концентрации (0,1-0,6%) и суточные дозы гестагена (0,1-0,6 мг/гол) для препаратов «СексБарьер» и «КонтрСекс Neo» располагаются в области существенно меньших значений в сравнении с используемыми в прототипе, где концентрации гестагена составляют 0,5-2,5%, а суточные дозы 0,5-1,0 мг/гол при минимальной и 2,5-5,0 мг/гол при максимальной концентрации. Терапевтически эффективная (курсовая) доза коммерческих пероральных препаратов во всех случаях также многократно ниже, чем в средстве-аналоге: для самок 0,5-1,4 мг/гол против 6,5-7,5 мг/гол (при концентрации МА 0,5%) и против 32,5-37,5 мг /гол (при концентрации 2,5%); для самцов 2-4,2 мг/гол против 14 мг/гол (при концентрации 0,5%) и против 70 мг/гол (при концентрации 2,5%).

Анализ этих показателей для таблетированных препаратов «КонтрСекс Neo» и «СексБарьер» дал аналогичные результаты.

В процессе создания настоящего изобретения описанные выше теоретические предпосылки принципиальной возможности снижения (в сравнении с прототипом) терапевтически эффективных доз средства для регуляции половой охоты за счет применения препарата в оральной форме были полностью подтверждены данными экспериментальных исследований (см. примеры осуществления).

В результате предложены 2 варианта состава для приема per os (в виде суспензии и в виде таблеток), обеспечивающие полное подавление признаков половой охоты у кошек и собак в широком интервале исходных концентраций гестагена (от 0,1 до 2,5%), включающем область значительно меньших, чем в прототипе, но при этом достаточных для достижения эффективной дозы концентраций (0,1-0,49%). Очевидно, что при условии одинаковой эффективности использование препарата с меньшими количествами МА, как с точки зрения снижения опасности возникновения побочных явлений, так и в плане уменьшения расхода ДВ и, следовательно, стоимости лекарственного средства, является предпочтительным. Новые жидкая и твердая пероральные формы бигормональной композиции для регуляции половой охоты у кошек и собак характеризуются (одинаковым) интервалом концентраций МА (от 0,1 до 2,5%) и соотношением эстроген/МА, составляющим 1:5-500, и различаются только характером вспомогательного вещества (в жидкой композиции - это растительное масло или вода, предпочтительно в комбинации со стабилизатором, а в таблетках - традиционно используемые наполнители для таблетирования или их комбинация). В функциональном отношении разработанные препараты демонстрируют следующие свойства.

а) Курс обработки, необходимый для подавления поведенческих признаков половой, охоты у собак и кошек обоих полов, в зависимости от дозы составляет от 3 до 7 дней.

б) При использовании минимальных из предлагаемых концентраций (0,1% в изобретении и 0,5% в прототипе) терапевтически эффективные дозы (по гестагену) препаратов по изобретению для животных одной и той же весовой категории в 7-28 раз меньше, чем в прототипе. И даже при использовании одинаковой (максимальной в обоих случаях) концентрации 2,5% терапевтическая доза для предлагаемых оральных форм, тем не менее, в 1,5-3 раза ниже.

в) Для восстановления половой функции после отмены препарата требуется 1-3 месяца (для подавляющего большинства животных - 2-2,5 мес.).

Предложенное в настоящем изобретении эффективное средство для регуляции половой охоты лишено таких существенных недостатков прототипа (формы spot on), как необходимость включения в препарат (в расчете на неизбежные потери) заведомо больших количеств гестагена, чем требуется для достижения минимальной эффективной дозы; невозможность точного дозирования ДВ; необходимость ограничения контактов животного с окружающими людьми и предметами обихода и/или постоянного контроля за поведением питомца после применения препарата и повышенная опасность для здоровья животного. Перечисленное подтверждает достижение всех технических результатов, запланированных при постановке задачи (см. выше).

Осуществление изобретения

Ниже приведены примеры, подтверждающие возможность реализации настоящего изобретения с достижением указанных технических результатов, но не ограничивающие его объем.

Пример 1. Получение составов

Жидкие формы (суспензии) предлагаемого средства получали следующим образом. МА и ЭЭ предварительно микронизировали и из измельченных субстанций готовили навески, необходимые для получения нужной концентрации ДВ в изготавливаемом объеме препарата.

Вариант 1. Требуемое количество оливкового (или соевого) масла помещали в стакан, нагревали до t≈40°C и перемешивали при этой температуре 5 минут, после чего нагревание прекращали. К нагретому маслу прибавляли расчетные количества предварительно микронизированного мегестрола ацетата и ЭЭ и интенсивно полученную суспензию еще в течение 30 минут.

Вариант 2. В стакан наливали смесь воды с глицерином (в соотношении примерно 1:1). При постоянном перемешивании к смеси прибавляли расчетные количества предварительно микронизированного мегестрола ацетата и этинилэстрадиола, после чего суспензию гомогенизировали в течение 30 минут.

Таким образом, получали препараты в 3 жидких фазах для суспендирования: ЖФ1 (оливковое масло), ЖФ2 (соевое масло) и ЖФ3 (вода + глицерин). В последующих экспериментах использовали в основном масляные формы (ЖФ1 и ЖФ2), а ЖФ3 использовали далее, главным образом, для проведения сравнительных экспериментов.

С целью повышения устойчивости получаемых суспензий при изготовлении лекарственных препаратов предпочтительно включать в их состав фармацевтически приемлемый стабилизирующий агент, например, аэросил, Униконс, пектинол, ПЭГ и др.

Твердые формы (таблетки) предлагаемого средства получали двумя способами. Основную часть таблетированных форм получали методом влажного гранулирования, описанным в патенте РФ 2456992, за исключением того, что при этом не применяли красителя (тропеолина O). Для формования части таблеток использовали микроцеллюлозу для прямого прессования. В экспериментах на животных применяли, главным образом, таблетки, приготовленные методом влажного гранулирования, в которых вспомогательные вещества были представлены комбинацией лактоза + крахмал + стеарат кальция (наполнитель для таблетирования 1 - H1), тогда как таблетки, полученные прямым прессованием с микроцеллюлозой (наполнитель для таблетирования 2 - H2), использовали для оценки влияния состава вспомогательных веществ на активность препарата. Вес полученных таблеток в обоих случаях составлял 100 мг.

Пример 2. Условия проведения испытаний.

Животные. Испытания проводили в двух частных питомниках под наблюдением ветеринарных врачей, которым были переданы подлежащие исследованию препараты и Наставление по их применению. Для испытаний отбирали половозрелых, клинически здоровых, близких по весу (4-5 кг) и возрасту (с разницей в пределах 2 лет) кошек и собак. Из отобранных таким образом животных формировали опытные группы. В состав каждой группы включали по 6 животных из обоих питомников.

Схема применения препаратов.

До введения препаратов животные содержались в вольерах на обычном рационе. Препараты задавали животным при появлении первых признаков половой охоты, но не позднее 2-х дней с момента их начала. У собак половое возбуждение внешне проявлялось беспокойством, у сук частым мочеиспусканием, облизыванием вульвы, выделениями из петли; кошки издавали пронзительные крики, катались по полу, изгибали спину, терлись головой и шеей о вольер; коты также издавали пронзительные крики и метили вольер.

Капельные формы применяли путем закапывания в рот по 4 капли 1 раз в день для кошек и 2 раза в день для собак. Таблетированные составы задавали принудительно на корень языка по 1 таблетке 1 раз в день для кошек и 2 раза в день для собак. Прием препарата продолжали до исчезновения признаков половой охоты, фиксируя число дней, необходимых для полного успокоения животного. Весь этот период вели наблюдение за состоянием и поведением животных. В случае наличия в группе отдельных особей, которые

в течение более, чем 7 дней, не давали адекватной реакции на препарат, их рассматривали как отрицательный результат, определяющий снижение общего показателя эффективности.

Пример 3. Оценка эффективности действия препарата у кошек

В эксперимент было включено 10 групп кошек (5 групп самцов и 5 групп самок), отбор и содержание которых проводились так, как это описано в примере 2. Животным обоих полов задавали препараты per os (см. пример 2) 1 раз в день, суспензии - по 4 капли (0,1 мл), таблетированные формы - по 1 таблетке.

Для оценки влияния концентрации ДВ на эффект подавления признаков половой охоты с помощью жидких форм использовали составы с различными концентрациями МА и ЭЭ (в масс %) и постоянным соотношением активных компонентов (50:1):

№1 МА - 0,1; ЭЭ - 0,002; жидкая фаза ЖФ1 до 100

№2 МА - 0,4; ЭЭ - 0,008; ЖФ2 до 100

№3 МА - 1,0; ЭЭ - 0,02; ЖФ2 до 100

№4 МА - 2,5; ЭЭ - 0,05; ЖФ2 до 100

№5* МА - 0,4; ЭЭ - 0,008; ЖФЗ до 100

Для исследования эффекта композиции МА+ЭЭ в таблетированной форме использовали составы (№6-№10), по содержанию МА (0,1-2,5%) и соотношению ДВ (50:1) аналогичные жидким формам. В качестве вспомогательных веществ применялись традиционно используемые для таблетирования наполнители (H1 или H2, см. выше)

№6 МА - 0,1; ЭЭ - 0,002; наполнитель H1 до 100

№7 МА - 0, 4; ЭЭ - 0,008; H1 до 100

№8 МА - 1,0; ЭЭ - 0,02; H1 до 100

№9 МА - 2,5; ЭЭ - 0,05; H1 до 100

№10* МА - 0,4; ЭЭ - 0,008; Н2 до 100

Результаты испытаний представлены в таблицах 4 (суспензии) и 5 (таблетки).

По результатам проведенных исследований были сделаны следующие выводы:

1. При всех использованных дозах препарата в сроки от 3 до 7 дней у всех опытных животных (кошек и котов) полностью исчезали признаки половой охоты. При этом отмечалась четкая дозозависимость, выражающаяся в увеличении времени, за которое в соответствующей опытной группе достигалось полное успокоение животных: при минимальной суточной дозе (0,1 мг/гол) оно составляло примерно 5-7 дней, при максимальных (1,0 и 2,5 мг/гол) - примерно 3-5 дней.

2. При сравнении курсовых доз установлено, что минимальные терапевтически эффективные дозы (0,5-0,7 мг МА/гол) для кошек примерно в 10 раз, а для котов примерно в 20 раз ниже, чем в прототипе.

3. Составы с одинаковыми концентрациями и соотношениями ДВ (№2 и №5*, а также №7 и №10*) и различными вспомогательными веществами (жидкими фазами для суспендирования или наполнителями для таблетирования) демонстрировали сопоставимую эффективность, что свидетельствует о возможности выбора и применения различных вспомогательных компонентов из числа используемых в данной области средств этого назначения без негативного влияния на активность препарата.

Пример 4. Оценка эффективности действия препарата у собак

Испытания проводили на 10 группах собак (5 групп самцов и 5 групп самок по 6 особей в каждой), отбор и содержание которых проводились так, как это описано в примере 2. Препараты животным задавали (см. пример 2) 2 раза в день, суспензии - но 4 капли (0,1 мл), таблетированные формы - по 1 таблетке. Результаты испытаний представлены в таблицах 6 (суспензии) и 7 (таблетки).

По результатам проведенных исследований были сделаны следующие выводы:

1. Признаки половой охоты полностью исчезали у всех опытных животных (сук и кобелей) в течение 3-7 дней. При этом наблюдалась выраженная зависимость времени, за которое в соответствующей опытной группе достигалось полное успокоение, от дозы ДВ: при минимальной суточной (МА 0,2 мг/гол) оно составляло примерно 5-7 дней, при максимальной (МА 5,0 мг/гол) - примерно 3-5 дней.

2. Расчет минимальных терапевтически эффективных (курсовых) доз по гестагену показал, что они (1,0-1,4 мг МА/гол) для сук примерно в 6 раз, а для кобелей примерно в 10 раз ниже, чем в прототипе.

3. Как жидкие, так и твердые формы препаратов с одинаковыми концентрациями и соотношением ДВ (№№2 и 5*; №№7 и 10*), несмотря на различия в использованных вспомогательных веществах, обладали одинаковой эффективностью.

Пример 5. Определение зависимости эффекта препарата от соотношения МА/ЭЭ

Исследования проводились на 5 группах кошек (самок), которых отбирали, обрабатывали и содержали согласно описанию, приведенному в примере 2. Для проведения испытаний использовали 5 жидких составов на соевом масле с одной и той же концентрацией МА (1%) и различным соотношением ДВ (МА/ЭЭ от 5:1 до 500:1).

Результаты наблюдений приведены в таблице 8а.

Полученные данные свидетельствуют о том, что предлагаемая бигормональная композиция МА/ЭЭ обладает 100%-ной эффективностью при всех использованных соотношениях ДВ. При этом минимальное время достижения состояния полного успокоения наблюдалось при соотношениях 20-250:1 и было равно 5 и менее дням, однако увеличение этого времени при сдвиге соотношения как в большую (500:1), так и в меньшую (5:1) сторону составляло не более одного дня. Это означает, что в рамках указанного интервала соотношение концентраций ДВ существенного влияния на эффективность действия препарата не оказывает, однако наилучшие результаты по срокам отмечаются при соотношении 20-250:1.

Это в целом согласуется с литературными данными по различным бигормональным композициям, свидетельствующих о том, что эффективность контрацептивных препаратов обычно не претерпевает существенных изменений в достаточно широком интервале соотношений ДВ при различных концентрациях гестагена. Однако принимая во внимание то, что в бигормональных композициях данного назначения, предназначенных для перорального применения, МА используется впервые, а в прототипе («спот-он») интервал соотношения ДВ представлен в более узких границах (20:250 при 50-кратном изменении концентрации МА), нами были проведены дополнительные эксперименты по изучению зависимости эффективности препаратов от соотношения ДВ не только в оптимальном режиме концентраций гестагена (например, для 1%-ного МА), но и в «крайних» по концентрации МА условиях (0,1% и 2,5%). В испытаниях использовали 6 групп собак по 6 животных (без разделения по полу), три из которых получали таблетированные препараты с концентрацией МА 0,1% и соотношением МА/ЭЭ, равным 5:1, 100:1 и 500:1, а три другие - с теми же соотношениями МА/ЭЭ при концентрации МА 2,5%.

Результаты представлены в таблице 8б.

Полученные данные позволяют заключить, что как при минимальной (0,1%), так и при максимальной (2,5%) концентрации гестагена препараты демонстрируют высокий уровень эффективности препаратов во всем интервале соотношений ДВ, где некоторое уменьшение его (до 85%) наблюдается только при минимальном значении МА/ЭЭ (5:1). При этом как в случае составов с концентрацией МА 2,5%, так и для составов с концентрацией МА 0,1% разница между оптимальным сроком успокоения (при соотношении 100:1 это в среднем 4 и 4,5 дней, соответственно) и сроками для препаратов с максимальным и минимальным соотношением МА/ ЭЭ составляет всего 1-1,5 дня. Это подтверждает сделанный нами ранее вывод о том, что заявленный интервал соотношений ДВ (от 5:1 до 500:1) не является критичным показателем для сохранения необходимой эффективности препаратов при всех используемых в изобретении концентрациях МА (0,1-2,5%).

Пример 6. Сравнение эффекта различных эстрогенов.

Для изучения влияния вида используемого в бигормональной композиции эстрогена на ее эффективность в состав испытуемых препаратов (конкретно в суспензию с составом №3: МА 1%; ЭЭ 0,02%; МА/ЭЭ = 50:1) вместо этинилэстрадиола включали (в тех же количествах и соотношениях с МА) валерат эстрадиола или бензоат эстрадиола. Испытания проводили на трех группах кошек, отобранных и обработанных так, как описано в примере 2. При этом были получены следующие результаты.

Из полученных данных может быть сделан вывод о том, что все три вида эстрогенов эффективны в качестве компонента бигормональной композиции с МА. Вместе с тем, очевидно, что действие валерата и бензоата эстрадиола оказывается менее выраженным, чем у этинилэстрадиола: при той же концентрации, в которой МА/ЭЭ демонстрирует 100%-ную эффективность и время успокоения 3-5 дней, эффективность комбинации МА/эстрадиола бензоат или валерат составляет 85%, а время подавления признаков половой охоты и для бензоата, и для валерата - более 5 дней. Таким образом, можно заключить, что предпочтительным видом эстрогена в предлагаемом препарате следует считать этинилэстрадиол.

Пример 7. Определение периода восстановления половой функции

16 кошек из числа получавших препараты по изобретению (8 после применения жидких составов №№1-4 и 8 после применения таблетированных форм №№6-9) после окончания курса были оставлены для определения срока, необходимого животным для восстановления репродуктивной функции. Оценку нормализации половой активности кошек проводили по признакам (см. пример 2) возобновления половой охоты. В результате было установлено, что у 15 из 16 кошек для восстановления репродуктивной функции потребовалось 2,5 месяца или менее: у 2 - один месяц, у 3 - 1,5 месяца, у 5 - 2 месяца, у 5 - 2,5 месяца. Только у одной кошки он составлял 3 месяца. При этом явной корреляции между введенной дозой препарата и сроком восстановления репродуктивной функции отмечено не было.

1. Пероральная форма бигормональной композиции для регуляции половой охоты у мелких домашних животных, включающая комбинацию мегестрола ацетата (МА) с эстрогеном (Э) в качестве действующего начала и вспомогательный компонент, где МА представлен в концентрации 0,1-2,5%, весовое соотношение МА/Э составляет 5-500:1, а вспомогательный компонент является пригодной для применения per os жидкой фазой для суспендирования ДВ.

2. Пероральная форма бигормональной композиции по п. 1, отличающаяся тем, что в качестве эстрогена содержит этинилэстрадиол.

3. Пероральная форма бигормональной композиции по п. 1, отличающаяся тем, что применяется для регуляции половой охоты у кошек и собак.

4. Пероральная форма бигормональной композиции по п. 1, отличающаяся тем, что жидкая фаза представлена растительным маслом или водой, предпочтительно в смеси со стабилизатором.

5. Пероральная форма бигормональной композиции по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что содержит МА в концентрации 0,1-0,49%, а весовое соотношение МА/Э составляет 20-250:1.

6. Пероральная форма бигормональной композиции для регуляции половой охоты у мелких домашних животных, включающая комбинацию мегестрола ацетата с эстрогеном в качестве действующего начала и вспомогательный компонент, где МА представлен в концентрации 0,1-2,5%, весовое соотношение МА/Э составляет 5-500:1, а вспомогательный компонент является подходящим наполнителем для таблетирования.

7. Пероральная форма бигормональной композиции по п. 6, отличающаяся тем, что в качестве эстрогена содержит этинилэстрадиол.

8. Пероральная форма бигормональной композиции по п. 6, отличающаяся тем, что применяется для регуляции половой охоты у кошек и собак.

9. Пероральная форма бигормональной композиции по п. 6, отличающаяся тем, что наполнитель для таблетирования выбран из группы, включающей лактозу, крахмал, микроцеллюлозу или их смесь.

10. Пероральная форма бигормональной композиции по любому из пп. 6-9, отличающаяся тем, что содержит МА в концентрации 0,1-0,49%, а весовое соотношение МА/Э составляет 20-250:1.