Способ подготовки компонентов для проведения экспресс-теста на токсоплазмоз животных и экспресс-тест на токсоплазмоз

Группа изобретений относится к области ветеринарии, а именно к диагностике, и может быть использована для выявления антигенов Toxoplasma gondii или антител к ним в сыворотке или плазме крови животных, а также в материале, полученном от животных методом биопсии, и в тканях и органах животных после убоя. Способ подготовки токсоплазменного антигена для проведения экспресс-теста на токсоплазмоз иммунохроматографическим методом с использованием тест-полосок заключается в том, что полученный растворимый антиген разводят фосфатно-солевым буферным (ФСБ) раствором в соотношении 1:10. Затем добавляют к полученному раствору равный объем метиленового синего, также предварительно разведенного ФСБ в соотношении 1:500. Полученную смесь токсоплазменного антигена и метиленового синего наносят на тест-полоски и конъюгируют токсоплазменный антиген и метиленовый синий путем нагревания при температуре 37°С в течение 7-10 мин. Группа изобретений относится также к способу подготовки иммунной сыворотки для проведения экспресс-теста на токсоплазмоз, в котором в качестве иммунной сыворотки используют кроличью токсоплазменную иммунную сыворотку, которую разводят ФСБ в соотношении 1:5, и к экспресс-тесту на токсоплазмоз иммунохроматографическим методом с использованием токсоплазменного антигена или иммунной сыворотки, подготовленных указанными способами. Группа изобретений позволяет: быстро и с большой точностью диагностировать токсоплазмоз, снизить затраты на материалы и реактивы при проведении диагностики, предупредить заражение людей токсоплазмами через мясо и мясные продукты. 3 н.п. ф-лы, 6 ил., 3 пр.

 

Группа изобретений относится к области ветеринарии, а именно к методам диагностики болезней, и может применяться для выявления антигенов Toxoplasma gondii или антител к ним в сыворотке или плазме крови животных, а также в материале, полученном от животных методом биопсии (ликвор, лимфатические узлы), и в тканях и органах животных после убоя.

Токсоплазмоз - эндемическое заболевание, распространенное по всему миру - инфицированность в мире составляет 20-90%. Возбудитель заболевания - Toxoplasma gondii - распространен повсеместно, является облигатным внутриклеточным паразитом, который способен поражать широкий спектр теплокровных животных, включая человека. Домашние кошки и дикие животные из семейства кошачьих играют важную роль в эпидемиологии этого заболевания, так как являются дефинитивными хозяевами, которые выделяют с фекалиями устойчивые в окружающей среде ооцисты. Спорулированные ооцисты от инфицированных кошек и брадизоиты в пораженных тканях промежуточных хозяев вирулентны для всех теплокровных животных и человека. В почве ооцисты сохраняются до двух лет. Путь заражения - пероральный. Ооцисты попадают в организм с загрязненными почвой, зеленью, овощами, ягодами. Также источником инфицирования может быть плохо приготовленное или сырое мясо, а также загрязненная вода, не пастеризованное молоко.

Токсоплазмоз характеризуется большим разнообразием клинических проявлений - от бессимптомного носительства до летальных форм, и поражает главным образом нервную систему, мышцы, лимфатические узлы, миокард, глаза, печень и селезенку, и поэтому диагностика данного паразитарного заболевания представляет определенную сложность.

Токсоплазмоз очень опасен для плодов или новорожденных детей, которые могут заразиться от инфицированных матерей.

Быстро выявить возбудителя и начать адекватную терапию - залог успеха при лечении токсоплазмоза, и поэтому создание способов, которые позволили бы в короткие сроки и с высокой степенью достоверности диагностировать данное заболевание, является актуальной задачей.

В настоящее время передним краем научного поиска новых, простых и экономичных методов детекции самых различных антител, антигенов и других аналитов являются экспресс-тесты.

Экспресс-тесты позволяют быстро и с высокой степенью достоверности диагностировать инфекционные заболевания животных непосредственно в присутствии пациента.

Наборы современных быстрых тестов характеризуются:

- получением результатов в максимально короткие сроки (минуты);

- простотой выполнения анализа и учета результатов (визуально, без приборов);

- тем, что их комплектации не требуют дополнительных принадлежностей; т.к. все необходимое уже включено в наборы тестов;

- возможностью проведения анализа нативного биоматериала без выделения возбудителя в чистой культуре;

- небольшим объемом пробы для исследования;

- минимальными трудозатратами и требованиями к квалификации персонала.

Таким образом, экспресс-тесты обеспечивают возможность проведения анализа ветеринарным врачом там, где это необходимо, т.е. без отправки биоматериала в лабораторию, что очень важно для оперативной оценки состояния животного и принятия решения о начале терапии практически в течение врачебного приема.

Одним из быстро развивающихся и востребованных методов лабораторной диагностики является иммунохроматографический (ИХА) анализ. Принцип действия иммунохроматографического теста состоит в том, что при погружении теста в физиологическую жидкость она начинает мигрировать вдоль тест-полоски по принципу тонкослойной хроматографии. Подвижной фазой в данном случае является физиологическая жидкость.

Вместе с жидкостью движутся и помеченные красителем антитела. В ИХА в качестве красителя используется коллоидное золото, которым и метят антитела к искомым антигенам. Если в исследуемой физиологической жидкости присутствует искомый антиген, то происходит его связывание, как с первым, так и со вторым типом антител, что является уже иммунологическим методом анализа. При этом происходит накопление антител с красителем вокруг антител, жестко иммобилизованных в тест-зоне ИХА-полоски, что проявляется в виде яркой темной полосы. Не связавшиеся антитела с красителем мигрируют далее вдоль полоски и неизбежно взаимодействуют с вторичными антителами в контрольной зоне, где и наблюдается вторая темная полоса. Взаимодействие и темная полоса в контрольной зоне должны проявляться всегда (если анализ проведен правильно), независимо от присутствия исследуемого антигена в физиологической жидкости. Результаты определяются визуально или компьютерной обработкой отсканированного изображения (см., например, Соколов Д.М. и Соколов М.С., Иммунохроматографический анализ, Экспресс - тесты Singlepath и Duopath для выявления патогенных микроорганизмов и токсинов в пищевых продуктах, Молочная промышленность, 2015, №1, с. 4-6).

Таким образом, компонентами для проведения экспресс-теста для диагностики токсоплазмоза животных являются токсоплазменный антиген, иммунная сыворотка и исследуемый материал.

Известен способ получения токсоплазменного антигена для диагностики токсоплазмоза, включающий извлечение и отмывку токсоплазм от клеточных элементов исходного сырья, дезинтеграцию токсоплазм обработкой ультразвуком и выделение антигенной фракции изоионным фракционированием (см., например, SU 533376, 30.10.76).

Приготовленный по известному способу токсоплазменный антиген показал высокую специфичность при серологической диагностике токсоплазмоза в реакции связывания комплемента, реакции непрямой гемагглютинации и реакции иммунодиффузии в агаровом геле.

Однако в иммунохроматографическом анализе приготовленный по известному способу токсоплазменный антиген не используется.

Задачей изобретения в части способа подготовки токсоплазменного антигена является получение высокоспецифичного антигена, пригодного для использования в иммунохроматографическом анализе.

Поставленная задача решается тем, что, согласно изобретению, способ подготовки токсоплазменного антигена для проведения экспресс-теста диагностики токсоплазмоза иммунохроматографическим методом с использованием тест-полосок включает извлечение и отмывку токсоплазм от клеточных элементов исходного сырья, дезинтеграцию токсоплазм обработкой ультразвуком и выделение антигенной фракции изоионным фракционированием, разведение полученного растворимого токсоплазменного антигена фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:10, добавление к полученному раствору равного объема метиленового синего, также предварительно разведенного фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:500, нанесение смеси токсоплазменного антигена и метиленового синего на тест-полоски и конъюгацию токсоплазменного антигена и метиленового синего путем нагревания при температуре 37°С в течение 7-10 мин.

Вторым компонентом экспресс-теста для диагностики токсоплазмоза является иммунная сыворотка.

Известен способ получения иммунной сыворотки к токсоплазмам, заключающийся в том, что сыворотку с определенным титром антител получают от больных хронической формой токсоплазмоза, после чего выделяют фракцию иммуноглобулинов, которые затем метят флуоресцеин-5-изотиоцианатом. Получают иммунофлуоресцирующие антитела к токсоплазмам с высокой активностью и специфичностью (см., например, RU 2174233 С1, 27.09.2001).

Однако полученные иммунофлуоресцирующие антитела к токсоплазмам не используются в иммунохроматографическом анализе.

Задачей изобретения в части способа подготовки иммунной сыворотки является получение иммунной сыворотки, содержащей высокоспецифичные антитела, пригодные для использования в иммунохроматографическом анализе.

Поставленная задача решается тем, что, согласно изобретению, способ подготовки иммунной сыворотки для проведения экспресс-теста диагностики токсоплазмоза иммунохроматографическим методом с использованием тест-полосок заключается в том, что в качестве иммунной сыворотки используют кроличью токсоплазменную иммунную сыворотку, которую разводят фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:10 и смешивают с равным объемом метиленового синего, предварительно также разведенного фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:500, после чего наносят полученную смесь на тест-полоски и конъюгируют иммунную сыворотку и метиленовый синий путем нагревания при температуре 37°С в течение 7-10 мин.

Известен иммунохроматографический тест на основе конъюгатов наночастиц коллоидного золота или люминисцентных микрочастиц со специфическими антителами для быстрого выявления сальмонелл различных групп (см., например, Шиленко И.В. и др., Разработка иммунохроматографических тестов с визуальной и приборной регистрацией для быстрого выявления сальмонелл, Биологические науки, октябрь 2015).

Наиболее близким является способ диагностики токсоплазмоза, который позволяет легко и быстро обнаружить антитела к T.gondii в сыворотке, плазме и цельной крови кошек и свиней при первичном скриннинговом исследовании. В известном способе в качестве красителя также используют коллоидное золото, а в качестве антигена или иммунной сыворотки используют антиген или иммунную сыворотку, предварительно конъюгированные с коллоидным золотом (см., например, Информационный буклет на экспресс-тесты ASAN Pharm.(Корея) с перечнем наборов и описанием процедур постановки анализов, 13.09.16).

Однако известный тест в качестве красителя использует дорогое коллоидное золото, а сама методика проведения диагностики довольно сложная, т.к. основана на соединении моноклональных токсоплазменных антител со специфическими антигенами и идиотипическими антителами, присутствующими в исследуемых образцах тканей. Таким образом, происходит двойное наслоение антител и контроль во всех случаях в виде темной полоски, а тестовая зона при отсутствии антигена в исследуемом образце светлого цвета.

Задачей изобретения является разработка более простого в исполнении экспресс-теста для диагностики токсоплазмоза, который использовал бы более дешевый, по сравнению с известным тестом, краситель, но не уступал бы известному тесту по специфичности и надежности.

Поставленная задача решается тем, что, в экспресс-тесте для диагностики токсоплазмоза, включающем нанесение на диагностические полоски конъюгированных с красителем токсоплазменного антигена или иммунной сыворотки и исследуемого образца сыворотки крови, или плазмы крови, или тканевой суспензии, и диагностику наличия или отсутствия возбудителя токсоплазмоза по изменению окраски диагностической полоски, согласно изобретению, в качестве красителя используют метиленовый синий.

Техническим результатом заявленной группы изобретений является удешевление иммунохроматографических диагностических экспресс-тестов на токсоплазмоз при сохранении их высокой специфичности.

Группа изобретений иллюстрируется следующими примерами, которые, однако, не охватывают все формы ее выполнения.

Пример 1. Получение токсоплазменного антигена и подготовка его для использования в иммунохроматографическом экспресс-тесте.

Лабораторным белым мышам интраперитонально вводят 100 пролиферативных форм токсоплазм в поле зрения микроскопа при увеличении ок. 10 х об. 40 в дозе 0,2 мл. Через 4 дня после заражения с помощью стерильного шприца от мышей получают брюшной экссудат, содержащий суспензию трофозоитов Т.gondii. Полученную суспензию токсоплазм отмывают центрифугированием при 1,5 тыс. об./мин. в течение 10 мин. от клеток брюшного экссудата в фосфатно-солевом буферном растворе (далее - ФСБ) с рН=7,3 и концентрируют до 280 трофозоитов Т. gondii в 1 мл. Для получения растворимого антигена концентрированную суспензию токсоплазм подвергают воздействию ультразвука при 19 кГц и силе тока 5 А. Обработанный ультразвуком материал центрифугируют при 9 тыс. об./ мин. 38 мин. В качестве растворимого антигена используют надосадочную фракцию. Полученный растворимый токсоплазменный антиген разводят ФСБ в соотношении 1:10. Метиленовый синий разводят ФСБ в соотношении 1:500.

Носителем для компонентов иммунохроматографического метода является нитроцеллюлозная мембрана (тест-полоска) на основе сополимера дивинилбензен/стирена (Danger CAS№9004 -70-0, Германия).

Смешивают разведенные ФСБ токсоплазменный антиген и метиленовый синий в равных объемах и наносят на диагностические тест-полоски.

Тест-полоски сушат при температуре 37°С в течение 8 мин.

В процессе сушки происходит конъюгация токсоплазменного антигена с красителем - метиленовым синим.

Пример 2.

Получение токсоплазменной иммунной сыворотки и подготовка ее для использования в иммунохроматографическом экспресс-тесте.

Полученный по примеру 1 растворимый токсоплазменный антиген с концентрацией белка 130 мкг/мл в дозе 0,1 мл разводят в соотношении 1:5 неполным адъювантом Фрейда и вводят кроликам подкожно в область регионарных лимфатических узлов с двух сторон, а также в область нижней брюшной стенки на уровне расположения мезентериальных лимфатических узлов.

На одиннадцатый день кроликам дополнительно вводят по 0,6 мл растворимого токсоплазменного антигена внутримышечно в области лопатки, поясницы и бедра с двух сторон.

На четырнадцатый день и на двадцатый день у кроликов берут кровь из ушной вены в количестве до 10 мл и отделяют сыворотку.

У полученных сывороток с помощью РИГА определяют титр антител.

Для последующего использования в иммунохроматографическом методе отбирают иммунные сыворотки без признаков гемолиза и с титром антител не менее 1:200.

Полученную иммунную кроличью сыворотку разводят ФСБ в соотношении 1:5 (для сыворотки с титром 1:800).

Метиленовый синий разводят ФСБ в соотношении 1:500. Разведенные кроличью сыворотку и метиленовый синий смешивают в равных объемах, наносят на тест-полоски нитроцеллюлозной мембраны и сушат при температуре 37°С в течение 8 мин.

В процессе сушки происходит конъюгация содержащихся в иммунной кроличьей сыворотке токсоплазменных антител с красителем -метиленовым синим.

Пример 3. Проведение экспресс-теста на токсоплазмоз иммунохроматографическим методом.

В предложенном экспресс- тесте ИХА с метиленовым синим все иммунореагенты в опытной и контрольной зонах готовят на основе фосфатно-солевого буферного раствора, рН=7,2-7,4, включающего двузамещенный фосфорнокислый натрий и однозамещенный фосфорнокислый калий (см., например, Приготовление буферных растворов, адрес в Интернете - http://agro-archive.ru/metody-issledovaniya/951-prigotovlenie-bufernyh-rastvorov.html, 03.02.14.

Экспресс-тест проводят следующим образом:

а) Проведение экспресс-теста на выявление антител к возбудителю токсоплазмоза.

Исследовали крупный рогатый скот голштинской породы. Было исследовано 20 коров 3-7 лет. Животные были взяты из двух хозяйств, при этом одно из хозяйств использует пастбищное содержание, а другое хозяйство пастбищное содержание не использует.

В качестве образцов использовали сыворотку крови (от 10 животных) и плазму крови (от 10 животных).

Высушенные по примеру 1 тест-полоски размером 5 мм х 2 мм прикрепляют к основной полоске нитроцеллюлозной мембраны с помощью раствора желатина.

Исследуемые образцы разводят ФСБ (рН=7,2) в соотношении 1:5 и наносят с помощью микротитровальной пипетки на диагностические тест-полоски.

Образцы сыворотки крови или различных тканей наносят в две зоны: I вариант - зона с антигеном Т.gondii + краситель (тестовая) и зона ФСБ + краситель (контрольная); II вариант - зона с кроличьими антителами против Т.gondii + краситель и зона ФСБ + краситель (контрольная). Контрольная зона не содержит специфических антител.

Токсоплазмоз в заявленном экспресс-тесте диагностируют на основании того,что:

- до нанесения образцов тест-полоска нитроцеллюлозной мембраны имеет темно-синий цвет;

- каждая тест-полоска нитроцеллюлозной мембраны имеет поперечно расположенные зоны индикации антител (I), антигена (II) и контрольную (К) - фиг. 1;

- при индикации антител (I) или антигена (II) Toxoplasma gondii цвет диагностических зон тест-полоски изменяется и становится темно-зеленым (I) или светло-зеленым (II). Интенсивность окрашивания в зеленый цвет может различаться в зависимости от количества токсоплазменных антител или антигенов в образцах сыворотки крови, тканей;

- в контрольной зоне (ФСБ + краситель - метиленовый синий) после нанесения исследуемых образцов окраска не изменяется, цвет остается темно-синим.

В двух образцах проб крови и в одном образце пробы плазмы крови окраска тест-полоски изменилась с синей на темно-зеленую, т.е. тест на токсоплазмоз оказался положительным (фиг. 2). Все положительно отреагировавшие на токсоплазмоз животные были из хозяйства, использующего пастбищное содержание.

Во всех остальных исследованных образцах тест-полоски сохранили синий цвет (фиг. 3), т.е. результат считают отрицательным.

Контрольные тест-полоски также не поменяли цвет (фиг. 4).

Животные, у которых экспресс-тест на токсоплазмоз оказался положительным, исследованы и другим методом - в реакции непрямой гемагглютинации (РИГА). Во всех случаях диагноз на токсоплазмоз подтвердился.

б) Проведение экспресс-теста на выявление антигена возбудителя токсоплазмоза в исследуемом образце иммунохроматографическим методом.

Высушенные по примеру 2 диагностические тест-полоски размером 5 мм х 3 мм прикрепляют к основной полоске нитроцеллюлозной мембраны с помощью раствора желатина. В качестве образцов исследовали образцы тканевой суспензии головного мозга и селезенки, полученные от полевых мышей. Всего было исследовано 96 мышей.

Исследуемые образцы развели ФСБ (рН=7,2) в соотношении от 1:10 и нанесли с помощью микротитровальной пипетки на диагностические тест-полоски. По изменению окраски в темно-зеленый (фиг. 5) и светло-зеленый цвет (фиг. 6) диагностировали токсоплазмоз.

Если после нанесения исследуемого образца тест-полоска сохраняет синий цвет (фиг. 3), как в контроле (фиг. 4), то результат считают отрицательным.

Общее количество положительно отреагировавших на экспресс-тест на токсоплазмоз мышей - 23 или 24%.

И в данном случае токсоплазмоз был подтвержден другим методом исследования, а именно, с помощью реакции торможения гемагглютинации.

На основании изложенного выше можно сделать вывод о том, что заявленная группа изобретений позволяет:

- быстро и с большой точностью диагностировать токсоплазмоз, т.к. при сопоставлении результатов РНГА и предложенного экспресс-теста установлена 97, 5% корреляция, а серо- эпизоотологический мониторинг по токсоплазмозу крупного рогатого скота и свиней в Центральном регионе РФ показал соответствие полученных результатов известным среднестатистическим показателям за последние 3-5 лет;

- снизить затраты на материалы и реактивы при проведении иммунохроматографического метода диагностики, т.к. в заявленном тесте не используется коллоидное золото, а на одну тест-полоску затрачивается всего 0,05-0,1 мл подготовленных иммунореагентов;

- отказаться от дорогостоящего оборудования, т.к. в заявленном тесте не используются моноклональные антитела;

- предупредить заражение людей токсоплазмами через мясо и мясные продукты, т.к. заявленный экспресс-тест доступен для применения в условиях мясоперерабатывающих предприятий, боен и лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы рынков.

1. Способ подготовки токсоплазменного антигена для проведения экспресс-теста на токсоплазмоз иммунохроматографическим методом с использованием тест-полосок, отличающийся тем, что включает извлечение и отмывку токсоплазм от клеточных элементов исходного сырья, дезинтеграцию токсоплазм обработкой ультразвуком и выделение антигенной фракции центрифугированием, разведение полученного растворимого токсоплазменного антигена фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:10, добавление к полученному раствору равного объема метиленового синего, также предварительно разведенного фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:500, нанесение смеси токсоплазменного антигена и метиленового синего на тест-полоски и конъюгацию токсоплазменного антигена и метиленового синего путем нагревания при температуре 37°C в течение 7-10 мин.

2. Способ подготовки иммунной сыворотки для проведения экспресс-теста на токсоплазмоз иммунохроматографическим методом с использованием тест-полосок, отличающийся тем, что в качестве иммунной сыворотки используют кроличью токсоплазменную иммунную сыворотку, которую разводят фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:5 и смешивают с равным объемом метиленового синего, предварительно также разведенного фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:500, после чего наносят полученную смесь на тест-полоски и конъюгируют иммунную сыворотку и метиленовый синий путем нагревания при температуре 37°C в течение 7-10 мин.

3. Экспресс-тест на токсоплазмоз иммунохроматографическим методом, включающий нанесение на диагностические полоски конъюгированных с красителем токсоплазменного антигена или иммунной сыворотки и исследуемого образца сыворотки крови, или плазмы крови, или тканевой суспензии, и диагностику наличия или отсутствия возбудителя токсоплазмоза по изменению окраски диагностической полоски, отличающийся тем, что в качестве красителя в тесте используют метиленовый синий, при этом в качестве токсоплазменного антигена, конъюгированного с красителем, на диагностическую полоску наносят токсоплазменный антиген, подготовленный по п. 1, а в качестве иммунной сыворотки, конъюгированной с красителем, используют иммунную кроличью сыворотку, подготовленную по п. 2.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к ускоренному и высокочувствительному способу обнаружения бактериальных патогенов. Раскрыт способ обнаружения бактерий, включающий обеспечение одной или более чем одной суспензии, причем каждая содержит по меньшей мере один вид меченых тестируемых бактериофагов, которые специфично связываются с видом бактерий, подлежащим обнаружению; добавление образца, подлежащего проверке на наличие по меньшей мере одного вида бактерий; фильтрацию полученной реакционной смеси; обнаружение комплексов бактерии-бактериофаги в концентрате; обнаружение несвязанных бактериофагов в фильтрате; обработку полученных сигналов, сгенерированных в результате обнаружения, и вывод результатов обнаружения пользователю.

Группа изобретений относится к ускоренному и высокочувствительному способу обнаружения бактериальных патогенов. Раскрыт способ обнаружения бактерий, включающий обеспечение одной или более чем одной суспензии, причем каждая содержит по меньшей мере один вид меченых тестируемых бактериофагов, которые специфично связываются с видом бактерий, подлежащим обнаружению; добавление образца, подлежащего проверке на наличие по меньшей мере одного вида бактерий; фильтрацию полученной реакционной смеси; обнаружение комплексов бактерии-бактериофаги в концентрате; обнаружение несвязанных бактериофагов в фильтрате; обработку полученных сигналов, сгенерированных в результате обнаружения, и вывод результатов обнаружения пользователю.

Изобретение относится к области стоматологии и раскрывает способ определения эффективности лечения субъекта, у которого определено воспаление в полости рта. Способ включает получение тестового образца материала из полости рта, такого как слюна, от указанного субъекта, определение количества полиморфноядерных нейтрофилов или индикаторного вещества полиморфноядерных нейтрофилов в указанном анализируемом образце, сравнение количества полиморфноядерных нейтрофилов или индикаторного вещества полиморфноядерных нейтрофилов в указанном анализируемом образце с контролем и выбор режима лечения.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к антигенной композиции, включающей эффективное количество микобактериального антигенного полипептида Mycobacterium tuberculosis, предназначенной для применения в лечении, подавлении или профилактике микобактериальной инфекции у пациента, а также к способу ее получения.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к антигенной композиции, включающей эффективное количество микобактериального антигенного полипептида Mycobacterium tuberculosis, предназначенной для применения в лечении, подавлении или профилактике микобактериальной инфекции у пациента, а также к способу ее получения.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки сенсибилизирующих свойств микобактерий и микобактериальных антигенов.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа получения высокого титра вируса гепатита E (HEV), включающего a) культивирование клеточной линии in vitro, где клеточная линия представляет собой HepG2 (номер HB-8065 в Американской коллекции типовых культур (ATCC)) или HepG2/C3A (номер CRL-10741 в ATCC), в среде, содержащей полибрен в концентрации от 1 мкг/мл до 5 мкг/мл, и б) инфицирование этой клеточной линии вирусом HEV.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа получения высокого титра вируса гепатита E (HEV), включающего a) культивирование клеточной линии in vitro, где клеточная линия представляет собой HepG2 (номер HB-8065 в Американской коллекции типовых культур (ATCC)) или HepG2/C3A (номер CRL-10741 в ATCC), в среде, содержащей полибрен в концентрации от 1 мкг/мл до 5 мкг/мл, и б) инфицирование этой клеточной линии вирусом HEV.

Изобретение относится к области медицины, в частности к фтизиатрии, и предназначено для детекции штаммов Mycobacterium bovis BCG путем лабораторного выявления геномной делеции RD1.

Изобретение относится к области медицины, в частности к фтизиатрии, и предназначено для детекции штаммов Mycobacterium bovis BCG путем лабораторного выявления геномной делеции RD1.

Изобретение относится к области иммунологии, биотехнологии и клинической лабораторной диагностики и может найти применение для определения индивидуальных рисков возникновения заболеваний, связанных с воздействием химических канцерогенов окружающей среды.

Изобретение относится к области иммунологии, биотехнологии и клинической лабораторной диагностики и может найти применение для определения индивидуальных рисков возникновения заболеваний, связанных с воздействием химических канцерогенов окружающей среды.

Группа изобретений относится к обнаружению присутствия сердечных биологических маркеров в крови. Раскрыт тестовый аппарат, содержащий тестовую полоску, метку радиочастотной идентификации (RFID) и корпус для тестовой полоски.
Изобретение относится к области медицины, в частности к дерматовенерологии, неврологии и психоневрологии. Предложен способ диагностики нейросифилиса.

Группа изобретений относится к области аналитической химии. Раскрыт биомедицинский бумажный чувствительный элемент для определения концентрации аналитов в текучих средах, содержащий множество осевых симметричных тестовых зон, которые расходятся лучами по направлению наружу от центральной точки и каждая из которых отделена перегородками из восковой краски и содержит в себе тестовый реагент, и эталонный участок, который окружает указанное множество осевых тестовых зон и который содержит множество подобластей калибровочного цвета, содержащих отдельный предварительно задаваемый цвет для каждой подобласти для сравнения с каждой осевой тестовой зоной из соответствующего множества осевых тестовых зон.

Изобретение относится к области фармакогенетики и персонализированной медицины. Предложен способ анализа полиморфных маркеров в генах SLCO1B1, АРОЕ и АВСВ1 для определения индивидуальной чувствительности к статинам, предусматривающий следующие стадии: амплификацию с помощью мультиплексной одноэтапной ПЦР, обеспечение биочипа, гибридизацию флуоресцентно меченного ПЦР-продукта на биочипе и регистрацию и интерпретацию результатов гибридизации.

Изобретение относится к области медицинской микробиологии, а именно к способам обнаружения и идентификации псевдотуберкулезного микроба. Раскрыт способ иммуноферментного выявления возбудителя псевдотуберкулеза I серотипа, включающий сенсибилизацию лунок микропланшета кроличьими поликлональными антителами против Y.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ герметизации вещества в выполненном на субстрате множестве ячеек.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ герметизации вещества в выполненном на субстрате множестве ячеек.

Предложенная группа изобретений относится к области фармакогенетики и персонализированной медицины. Предложен способ анализа полиморфных маркеров в генах VKORC1, CYP4F2, CYP2C9, CYP2C19, АВСВ1, ITGB3 для определения индивидуальной чувствительности к противосвертывающим препаратам и набор олигонуклеотидных зондов, используемый в данном способе.

Изобретение относится к способу получения производного окисленного декстрана, пригодного для его визуализации в сыворотке крови, включающему проведение реакции окисленного декстрана с меткой для его визуализации при температуре 80-90°С, в качестве метки для визуализации используют гидразид акридонуксусной кислоты; реакцию гидразид акридонуксусной кислоты - окисленный декстран проводят при соотношении компонентов 1:10 соответственно в пересчете на массу сухого вещества в течение 90 минут, фильтруют полученную суспензию, охлаждают ее до комнатной температуры, добавляют липосомообразующий агент, выдерживают полученную липосомальную форму производного окисленного декстрана при температуре 4-6°С в течение не менее 24 часов, затем фильтруют ее с помощью микрофильтра.

Группа изобретений относится к области ветеринарии, а именно к диагностике, и может быть использована для выявления антигенов Toxoplasma gondii или антител к ним в сыворотке или плазме крови животных, а также в материале, полученном от животных методом биопсии, и в тканях и органах животных после убоя. Способ подготовки токсоплазменного антигена для проведения экспресс-теста на токсоплазмоз иммунохроматографическим методом с использованием тест-полосок заключается в том, что полученный растворимый антиген разводят фосфатно-солевым буферным раствором в соотношении 1:10. Затем добавляют к полученному раствору равный объем метиленового синего, также предварительно разведенного ФСБ в соотношении 1:500. Полученную смесь токсоплазменного антигена и метиленового синего наносят на тест-полоски и конъюгируют токсоплазменный антиген и метиленовый синий путем нагревания при температуре 37°С в течение 7-10 мин. Группа изобретений относится также к способу подготовки иммунной сыворотки для проведения экспресс-теста на токсоплазмоз, в котором в качестве иммунной сыворотки используют кроличью токсоплазменную иммунную сыворотку, которую разводят ФСБ в соотношении 1:5, и к экспресс-тесту на токсоплазмоз иммунохроматографическим методом с использованием токсоплазменного антигена или иммунной сыворотки, подготовленных указанными способами. Группа изобретений позволяет: быстро и с большой точностью диагностировать токсоплазмоз, снизить затраты на материалы и реактивы при проведении диагностики, предупредить заражение людей токсоплазмами через мясо и мясные продукты. 3 н.п. ф-лы, 6 ил., 3 пр.

Наверх