Дифармакофорные соединения ноотропно-анальгетического действия и способ их получения

Изобретение относится к дифармакофорным соединениям ноотропно–анальгетического действия формулы (1), где R-радикалы кислотных НПВС, таких как ибупрофен, диклофенак, индометацин, нифлумовая кислота, мефенамовая кислота, кетопрофен, декскетопрофен, напроксен, дифлунисал, кеторолак, сулиндак, фенопрофен, флурбипрофен, толметин, этодолак, флуфенамовая кислота, меклофенамовая кислота, толфенамовая кислота, дексиндопрофен. Технический результат: получены новые дифармакофорные соединения, которые проявляют одновременно анальгизирующее и ноотропное действие, что позволяет использовать предложенные соединения с обезболивающим эффектом одновременно для усиления когнитивных действий человека в условиях осложненной деятельности человека. 22 пр., 11 ил.

(1)

 

Группа изобретений относится к одному из перспективных направлений фармацевтической химии – созданию дифармакофорных веществ, имеющих в своем составе молекулярные фрагменты различной терапевтической направленности, и склонных к проявлению заданного эффекта с возможными элементами синергизма, а именно к дифармакофорным молекулам, проявляющим одновременно анальгизирующее и ноотропное действие. Такие соединения могут быть использованы для профилактики и лечения нейродегенеративных заболеваний, а также как обезболивающие одновременно усиливающие когнитивные способности людей, работающих в осложненных условиях профессиональной деятельности.

Фармакофорным называют такой структурный элемент или фрагмент молекулы, который обеспечивает фармакологическую активность. (https://chem21.info/info/319185/)

Термин «дифармакофор» означает соединение, включающее как минимум два функциональных фрагмента, оказывающих одновременно различное терапевтическое воздействие на организм, обеспечивая синергизм.

Например, известно соединение TD-1792, являющееся новым гликопептид-цефалоспориновым антибиотиком, и обладающее значительным действием против клинически резистентных грамм-позитивных бактерий. В антибиотике сочетаются, взаимно усиливая антибактериальное действие, гликопептидные и цефалоспориновые фармкофоры. (Hegde S.S. Pharmacodynamics of TD-1792, a Novel Glycopeptide-Cephalosporin Heterodimer Antibiotic Used against Gram-Positive Bacteria, in a Neutropenic Murine Thigh Model / Sharath S. Hegde, Olanrewaju O. Okusanya, Robert Skinner, Jeng-Pyng Shaw, Glenmar Obedencio, Paul G. Ambrose, Johanne Blais, Sujata M. Bhavnani. / Antimicrob Agents Chemother. 2012; 56(3); 1578–1583. интернет -ссылка: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3294954/)

Так же известен препарат KFU-01, созданный в Казанском Федеральном Университете, и предназначенный для лечения хронических заболеваний опорно-двигательного аппарата, который является примером пролекарственного дифармакофора, так как при попадании в организм человека высвобождает два активных компонента, начинающих действовать синергетически. По ключевым параметрам эффективности и безопасности препарат KFU-01 существенно превосходит все мировые аналоги в этой терапевтической группе. (интернет-ссылка: https://media.kpfu.ru/news/uchenye-kfu-sozdali-preparat-povyshayuschiy-effektivnost-terapii-onkozabolevaniy)

Известны обезболивающие и ноотропные препараты, например, описанные в патенте IT1255323(B) опубликован 1995-10-31. Указанное изобретение представляет новые химические структуры, способные повысить физиологическое функционирование центральной и периферической холинергической системы и, следовательно, посредством указанного селективного механизма действия, способного облегчить обучение, улучшить память, а также повысить порог боли. Однако, соединения, описываемые в изобретении, не относятся к дифармакофорам.

Задачей изобретения является разработка способа получения дифармокофорных соединений, проявляющих одновременно анальгизирующее и ноотропное действие на основе соединений с доказанной терапевтической активностью, а именно нестероидного противовоспалительного соединения (далее НПВС) и соединения из группы рацетамов.

Технический результат:

— получены новые дифармокофорные соединения, общей формулы

(I)

где R – радикалы кислотных НПВС, например, таких как ибупрофен, диклофенак, индометацин, нифлумовая кислота, мефенамовая кислота, кетопрофен, декскетопрофен, напроксен, дифлунисал, кеторолак, сулиндак, фенопрофен, флурбипрофен, толметин, этодолак, флуфенамовая кислота, меклофенамовая кислота, толфенамовая кислота, дексибупрофен, дексиндопрофен и т.п.;

- указанные дифармокофорные соединения проявляют одновременно анальгизирующее и ноотропное действие, что позволяет использовать предложенные соединения с обезболивающим эффектом одновременно для усиления когнитивных действий человека в условиях осложненной деятельности человека, например, в критических ситуациях, таких как: стихийные бедствия, боевые действия, работы с повышенной опасностью.

- устранение таких побочных эффектов, как потенциальный гастрит, энтерит, язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки, возникающих обычно при длительном приеме НПВС из-за наличия карбоксильной группы, которая закрывается посредством образования амидной связи между первичным амином небрацетама и карбоксильной группы кислотных НПВС при реализации заявленного изобретения.

НПВС широко применяются в медикаментозной терапии различных заболеваний, сопровождающихся болью или воспалением. Их широкую распространённость обеспечило и отсутствие побочных эффектов, присущих опиатам: седации, угнетения дыхания и привыкания. НПВС способны подавлять воспаление, снижать температуру тела и уменьшать интенсивность боли. По масштабам и частоте применения НПВС занимают 1-е место в мире. Они являются самыми популярными препаратами среди населения при лечении боли, воспаления и гипертермии. Классификация приведена в Таблице 1 (фиг.1). Для структурной модификации более всего подходят кислотные НПВС с карбоксильной группой.

Ноотропы (нейрометаболические стимуляторы) - это лекарственные средства, предназначенные для оказания специфического воздействия на высшие психические функции. Считается, что ноотропы способны стимулировать умственную деятельность, активизировать когнитивные функции, улучшать память и увеличивать способность к обучению. Предполагается, что ноотропы увеличивают устойчивость мозга к разнообразным вредным воздействиям, таким как чрезмерные нагрузки или гипоксия.

В качестве ноотропного фрагмента дифармакофора был рассмотрен ряд перспективных соединений, среди которых: производные пирролидона, производные диафенилпирролидона, производные диметиламиноэтанола (предшественники ацетилхолина), производные пиридоксина, производные и аналоги гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК), нейропептиды и их аналоги, вещества других фармакологических групп с компонентом ноотропного действия. В итоге, исходя из предполагаемого дополняющего механизма действия, наличия линкера для образования дифармакофора и отсутствия стерических затруднений при предполагаемом органическом синтезе оптимально соединение группы рацетамов. Группа рацетамов представлена пирацетамом, анирацетамом, оксирацетом, прамирацетамом, небрацетамом и другими соединениями.

Из уровня техники неизвестны дифармокофорные соединения ноотропно – анальгетического действия на основе соединений с доказанной терапевтической активностью, а именно нестероидного противовоспалительного соединения (далее НПВС) и соединения из группы рацетамов и способ их получения, следовательно группа изобретений соответствует условию новизна. Условию изобретательский уровень группа изобретений соответствует, т.к. сохранение, а в ряде случаев и усиление ноотропно-анальгетического действия при образовании дифармокофорного соединения заявленным способом из НПВС и соединения из группы рацетомов для специалистов не является очевидным. Подтверждением соответствия группы изобретений условию промышленной применимости являются приведенные далее примеры дифармокофорных соединений на основе небрацетама и производных уксусной и пропионовой кислот, как веществ, имеющих карбоксильную группу с незатрудненной стереометрией, без перекрывания с другими функциональными группами.

Небрацетам имеет ядро производного пирролидина – 2-пирролидона, и является перспективной ноотропной молекулой, находящейся на стадии доклинических испытаний. проявляет ноотропную, нейропротекторную и антидепрессивную активности (Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Колясникова К. Н. «Изучение механизма действия нейропептида цикло-пролилглицина и возможность создания на этой основе новых ноотропных соединений, 2018).

Структура небрацетама

(2)

Способ получения заявленных дифармокофорных соединений ноотропно – анальгетического действия формулы (1) осуществляют следующим образом.

К 30% раствору в диоксане кислотных НПВС прибавляют карбонилдиимидазол (1.12 экв.). Реакционную смесь перемешивают 3 часа при комнатной температуре и прибавляют 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он (1.08 экв.) в виде 50% раствора в диоксане. Продолжают перемешивание в течение 12 часов, затем диоксан отгоняют на роторном испарителе, остаток растворяют в этилацетате и промывают 0.1 М раствором соляной кислоты, а затем насыщенным раствором хлорида натрия в воде. Органический слой сушат над сульфатом натрия при комнатной температуре в течении 15 мин, концентрируют органический слой на роторном испарителе при 25 - 30ºС и давлении 50 миллибар, после чего полученный высушенный продукт очищают путем хроматографической очистки на колонке с силикагелем, элюэнт — этилацетат-изопропанол в соотношении 9:1. Полученные на выходе из колонки фракции объединяют и упаривают на роторном испарителе при 25 - 30ºС и давлении 50 миллибар, получая продукт в виде белых кристаллов.

Заявленным способом была синтезирована библиотека новых химических дифармакофорных соединений, состоящая из ноотропа небрацетама и различных НПВС, синтезированные структуры которых показаны в Таблице 2 (фиг.2).

Изобретение характеризуют фигуры.

Фиг.1 таблица 1 «Классификация кислотных НПВС по химической структуре – АТХ код М01А.»

Фиг.2 Таблица 2 «Структуры библиотеки синтезированных дифармакофоров».

Фиг. 3. Таблица 3. Влияние дифармакофорных соединений по примерам 1-20 на общую выживаемость в экспериментальных группах после моделирования геморрагического инсульта.

Фиг.4 Таблица 4 Влияние дифармакофорных соединений по примерам 1-20 на показатели неврологического статуса по шкале McGrow в экспериментальных группах после моделирования геморрагического инсульта (баллы, M±m, N=10).

Фиг.5 Таблица 5 Влияние дифармакофорных соединений по примерам 1-20 на показатели силы хвата в экспериментальных группах после моделирования геморрагического инсульта (усл.ед., M±m, N=10).

Фиг.6 Таблица 6 Латентный период наступления болевых симптомов в тесте «Горячая пластина» до введения препаратов и через 5 дней введения, сек (М ± m).

Фиг.7. Изменение латентного периода проявления болевых ощущений в тесте «Горячая пластина» в пятый день введения по сравнению с фоновыми значениями, где * - p<0,05 по сравнению с группой «Контроль» (критерий Краскалла-Уоллиса, постанализ Данна).

Фиг.8. Таблица 7 Латентный период наступления болевых ощущений в тесте «Отдергивание хвоста» до введения препаратов и через 5 дней введения, сек (М ± m)

Фиг.9. Изменение латентного периода проявления болевых ощущений в тесте «Отдергивание хвоста» в пятый день введения по сравнению с фоновыми значениями.

Фиг.10. Таблица 8 Время удержания животных на вращающемся стержне (сек) и количество животных, продержавшихся в тесте более 60 секунд (%), (М ± m).

Фиг.11. Количество животных, удержавшихся на вращающемся стержне более 60 секунд, % от общего числа.

Примеры осуществления заявленного изобретения.

Пример 1. Получение N-[(1-бензил-5-оксопирролидин-3-ил)метил]-2-(4-изобутилфенил)пропанамид на основе Ибупрофена и небрацетама , Табл. 2.

К 30% раствору (RS)-2-(4-(2-Метилпропил)фенил)пропановой кислоты в диоксане прибавляют карбонилдиимидазол (1.12 экв.). Реакционную смесь перемешивают 3 часа при комнатной температуре и прибавляют 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он (1.08 экв.) в виде 50% раствора в диоксане. Смесь перемешивают 12 часов, диоксан отгоняют на роторном испарителе, остаток растворяют в этилацетате и промывают 0.1 М раствором соляной кислоты, а затем насыщенным раствором хлорида натрия в воде. Органический слой сушат над сульфатом натрия при комнатной температуре в течении 15 мин, концентрируют органический слой на роторном испарителе при 25 - 30ºС и давлении 50 миллибар, после чего полученный продукт очищают путем хроматографической очистки на колонке с силикагелем, элюэнт — этилацетат-изопропанол в соотношении 9:1. Полученные на выходе из колонки фракции объединяют и упаривают на роторном испарителе при 25 - 30ºС и давлении 50 миллибар, получая продукт в виде белых кристаллов с выходом 80%.

Химическая схема получения (2S)-N-[(1-бензил-5-оксопирролидин-3-ил)метил]-2-(4-изобутилфенил)пропанамид:

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.42 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 7.36 – 7.30 (m, 1H), 7.33 – 7.21 (m, 6H), 7.06 (dq, J = 7.0, 0.9 Hz, 2H), 4.48 (dt, J = 12.4, 1.0 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.65 – 3.53 (m, 3H), 3.36 – 3.21 (m, 2H), 2.64 – 2.52 (m, 1H), 2.55 – 2.40 (m, 4H), 1.84 (dp, J = 13.7, 6.8 Hz, 1H), 1.36 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.86 (dd, J = 20.0, 6.8 Hz, 5H).

Пример 2. Получение N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(2-((2,6-дихлорфенил)амино)фенил)ацетамид на основе Диклофенака и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из 2-(2-(2,6-Дихлорфениламинo)фенил)уксусной кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(2-((2,6-дихлорфенил)амино)фенил)ацетамид с выходом 81%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(2-((2,6-дихлорфенил)амино)фенил)ацетамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (s, 1H), 7.62 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.36 – 7.21 (m, 6H), 7.18 – 7.07 (m, 2H), 6.97 (td, J = 7.4, 1.5 Hz, 1H), 6.20 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 4.47 – 4.34 (m, 2H), 3.67 – 3.57 (m, 4H), 3.33 – 3.21 (m, 2H), 2.61 – 2.43 (m, 3H).

Пример 3. Получение N-((1-бензил-5-оксопирроллидин-3-ил)метил)-2-(1-(4-хлорбензоил)-5-метокси-2-метил-1H-индол-3-ил)ацетамид на основе Индометацина и небрацетама, Табл. 2..

Аналогично примеру 1, из 1-(4-Хлорбензоил)-5-метокси-2-метил-1H-индол-3-уксусной кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензил-5-оксопирроллидин-3-ил)метил)-2-(1-(4-хлорбензоил)-5-метокси-2-метил-1H-индол-3-ил)ацетамид с выходом 82%.

Химическая схема получения соединения N-((1-бензил-5-оксопирроллидин-3-ил)метил)-2-(1-(4-хлорбензоил)-5-метокси-2-метил-1H-индол-3-ил)ацетамида

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.66 – 7.57 (m, 3H), 7.50 – 7.43 (m, 2H), 7.36 – 7.21 (m, 5H), 6.99 (dd, J = 7.6, 0.5 Hz, 1H), 6.94 – 6.90 (m, 1H), 6.68 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 4.46 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 4.34 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.75 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.69 – 3.59 (m, 3H), 3.33 – 3.23 (m, 1H), 3.27 – 3.17 (m, 1H), 2.63 – 2.43 (m, 3H), 2.43 (s, 3H).

Пример 4. Получение N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((3-(трифторметил)фенил)амино)никотинамид на основе Нифлумовой кислоты и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из Нифлумовой кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((3-(трифторметил)фенил)амино)никотин амида с выходом 80%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((3-(трифторметил)фенил)амино)никотинамида

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.32 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 8.10 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 8.06 – 7.99 (m, 2H), 7.56 – 7.42 (m, 3H), 7.36 – 7.21 (m, 6H), 4.48 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 1H), 4.39 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 1H), 3.66 – 3.54 (m, 4H), 2.62 – 2.39 (m, 3H).

Пример 5. Получение N-((1-бензил-5-оксопирролидин-3-ил)метил)-2-((2,3-диметилфенил)амино)бензамид на основе Мефенамовой кислоты и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из Мефенамовой кислоты и амина (4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он) получают N-((1-бензил-5-оксопирролидин-3-ил)метил)-2-((2,3-диметилфенил)амино)бензамид с выходом 85%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксопирролидин-3-ил)метил)-2-((2,3-диметилфенил)амино)бензамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.59 (s, 1H), 8.14 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.50 (td, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.36 – 7.21 (m, 5H), 7.18 – 7.07 (m, 2H), 7.05 (dd, J = 7.4, 1.7 Hz, 1H), 6.90 (ddq, J = 7.5, 1.6, 0.8 Hz, 1H), 4.48 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.69 – 3.59 (m, 1H), 3.63 – 3.56 (m, 2H), 3.42 (ddd, J = 12.3, 7.6, 6.7 Hz, 1H), 2.61 – 2.52 (m, 1H), 2.56 – 2.48 (m, 1H), 2.51 – 2.38 (m, 1H), 2.26 (d, J = 0.7 Hz, 3H), 2.15 (s, 3H).

Пример 6. Получение 2-(3-бензоилфенил)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)пропанамида на основе Кетопрофена и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из 3-бензоил-альфа-метилбензилуксусной кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают 2-(3-бензоилфенил)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)пропанамид с выходом 79%.

Химическая схема получения 2-(3-бензоилфенил)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)пропанамида

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.84 – 7.74 (m, 3H), 7.71 (dt, J = 7.4, 1.5 Hz, 1H), 7.65 – 7.56 (m, 1H), 7.55 – 7.36 (m, 5H), 7.36 – 7.21 (m, 5H), 4.48 (dt, J = 12.3, 0.9 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.77 – 3.67 (m, 1H), 3.67 – 3.55 (m, 2H), 3.34 – 3.20 (m, 2H), 2.61 – 2.43 (m, 3H), 1.37 (d, J = 6.7 Hz, 2H).

Пример 7. Получение (2S)-2-(-(3-бензоилфенил)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)пропанамид на основе Декскетопрофена и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из (S)-(+)-3-Бензоил-альфа-метилбензолуксусной кислоты и амина (4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он) получают (2S)-2-(-(3-бензоилфенил)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)пропанамида с выходом 80%.

Химическая схема получения (2S)-2-(-(3-бензоилфенил)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)пропанамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.84 – 7.74 (m, 3H), 7.71 (dt, J = 7.4, 1.5 Hz, 1H), 7.65 – 7.56 (m, 1H), 7.55 – 7.36 (m, 5H), 7.36 – 7.21 (m, 5H), 4.48 (dt, J = 12.3, 0.9 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.77 – 3.67 (m, 1H), 3.67 – 3.55 (m, 2H), 3.34 – 3.20 (m, 2H), 2.61 – 2.43 (m, 3H), 1.37 (d, J = 6.7 Hz, 2H).

Пример 8. Получение (2S)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(6-метоксинафталин-2-ил)пропанамидана основе Напроксена и небрацетама, Табл. 2 .

Аналогично примеру 1, из (S)-6-Метокси-альфа-метил-2-нафталинуксусной кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают (2S)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(6-метоксинафталин-2-ил)пропанамида с выходом 86%.

Химическая схема получения (2S)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(6-метоксинафталин-2-ил)пропанамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.82 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.73 – 7.65 (m, 2H), 7.41 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.36 – 7.21 (m, 7H), 7.09 (ddd, J = 7.5, 1.5, 0.5 Hz, 1H), 4.48 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.73 – 3.63 (m, 1H), 3.68 – 3.58 (m, 2H), 3.60 – 3.49 (m, 1H), 3.41 – 3.30 (m, 1H), 2.61 – 2.50 (m, 2H), 2.53 – 2.43 (m, 1H), 1.41 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Пример 9. Получение N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2',4'-дифторо-3-гидрокси-[1,1'-бифенил]-4-карбоксамида на основе Дифлунисала и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из 2',4'-Дифтор-4-гидрокси[1,1'-бифенил]-3-карбоновой кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2',4'-дифторо-3-гидрокси-[1,1'-бифенил]-4-карбоксамида с выходом 75%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2',4'-дифторо-3-гидрокси-[1,1'-бифенил]-4-карбоксамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 – 8.04 (m, 1H), 7.85 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.73 (dt, J = 7.5, 5.0 Hz, 1H), 7.42 (ddd, J = 7.6, 2.0, 1.5 Hz, 1H), 7.36 – 7.22 (m, 5H), 7.20 (dd, J = 1.9, 1.5 Hz, 1H), 7.16 – 7.08 (m, 1H), 7.04 (td, J = 7.9, 1.5 Hz, 1H), 4.46 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 1H), 4.39 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 1H), 3.66 – 3.57 (m, 2H), 3.47 – 3.32 (m, 2H), 2.61 – 2.39 (m, 3H).

Пример 10. Получение 5-бензоил-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2,3-дигидро-1H-пирролизин-1-карбоксамид на основе Кеторолака и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из (±)-5-Бензоил-2,3-дигидро-1H-пирролизин-1-карбоновой кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают 5-бензоил-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2,3-дигидро-1H-пирролизин-1-карбоксамид с выходом 82%.

Химическая схема получения 5-бензоил-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2,3-дигидро-1H-пирролизин-1-карбоксамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.85 – 7.77 (m, 2H), 7.66 – 7.57 (m, 1H), 7.55 – 7.46 (m, 3H), 7.39 – 7.21 (m, 6H), 6.13 (dd, J = 7.5, 0.7 Hz, 1H), 4.48 (dt, J = 12.3, 0.9 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.3, 0.9 Hz, 1H), 4.25 (dt, J = 12.3, 7.1 Hz, 1H), 4.12 (td, J = 7.0, 0.6 Hz, 1H), 3.86 (dt, J = 12.4, 7.1 Hz, 1H), 3.67 – 3.57 (m, 2H), 3.32 – 3.18 (m, 2H), 2.59 – 2.51 (m, 1H), 2.56 – 2.45 (m, 2H), 2.48 – 2.29 (m, 2H).

Пример 11. Получение N-((1-бензилl-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(5-фторо-2-метил-1-(4-(метилсульфенил)бинзилиден)-1H-инден-3-ил)ацетамида на основе Сулиндака и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из (Z)-5-Фтор-2-метил-1-[[4-(метилсульфинил)фенил]метилен]-1H-инден-3-уксусной кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензилl-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(5-фторо-2-метил-1-(4-(метилсульфенил) бинзилиден)-1H-инден-3-ил)ацетамид с выходом 87%.

Химическая схема получения N-((1-бензилl-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(5-фторо-2-метил-1-(4-(метилсульфенил)бинзилиден)-1H-инден-3-ил)ацетамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.76 – 7.69 (m, 2H), 7.72 – 7.61 (m, 2H), 7.61 – 7.54 (m, 2H), 7.44 (ddd, J = 8.1, 1.5, 0.5 Hz, 1H), 7.36 – 7.16 (m, 6H), 6.73 (s, 1H), 4.43 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 1H), 4.38 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 1H), 3.94 (s, 2H), 3.67 – 3.59 (m, 2H), 3.33 – 3.23 (m, 1H), 3.27 – 3.17 (m, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.63 – 2.43 (m, 3H), 2.30 (s, 3H).

Пример 12. Получение N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(3-феноксифенил)пропанамида на основе Фенопрофена и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из (+-)-альфа-Метил-3-феноксибензолуксусной кислоты и амина (4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он) получают N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(3-феноксифенил)пропанамид с выходом 77%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(3-феноксифенил)пропанамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.42 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.41 – 7.30 (m, 3H), 7.34 – 7.23 (m, 5H), 7.27 – 7.15 (m, 1H), 7.15 – 7.07 (m, 1H), 7.02 – 6.94 (m, 2H), 6.93 (dt, J = 7.4, 1.5 Hz, 1H), 6.80 (td, J = 1.5, 0.6 Hz, 1H), 4.48 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.74 – 3.65 (m, 1H), 3.65 – 3.56 (m, 2H), 3.60 – 3.50 (m, 1H), 3.11 – 2.99 (m, 1H), 2.61 – 2.50 (m, 2H), 2.54 – 2.42 (m, 1H), 1.36 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Пример 13. Получение N-((1-бензил-5-оксипиролидин-3-ил)метил)-2-(2-фторо-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропанамида на основе Флурбипрофена и небрацетама, Табл. 2 .

Аналогично примеру 1, из 2-Фтор-альфа-метил[1,1'-бифенил]-4-уксусной кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензил-5-оксипиролидин-3-ил)метил)-2-(2-фторо-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропанамид с выходом 76%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксипиролидин-3-ил)метил)-2-(2-фторо-[1,1'-бифенил]-4-ил)пропанамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.65 (dd, J = 7.4, 5.0 Hz, 1H), 7.55 – 7.21 (m, 14H), 4.48 (dt, J = 12.5, 0.9 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.73 – 3.62 (m, 1H), 3.65 – 3.56 (m, 2H), 3.60 – 3.50 (m, 1H), 3.11 – 2.99 (m, 1H), 2.61 – 2.50 (m, 2H), 2.54 – 2.44 (m, 1H), 1.40 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Пример 14. Получение N-((1-бензилl-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(1-метил-5-(4-метоксибензоил)-1H-пиррол-2-yl)ацетамида на основе Толметина и небрацетама, Табл. 2 .

Аналогично примеру 1, из 1-Метил-5-(4-метилбензоил)-1Н-пиррол-2-уксусной кислоты и амина (4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он) получают N-((1-бензилl-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(1-метил-5-(4-метоксибензоил)-1H-пиррол-2-yl)ацетамид с выходом 82%.

Химическая схема получения N-((1-бензилl-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(1-метил-5-(4-метоксибензоил)-1H-пиррол-2-yl)ацетамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.63 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.53 – 7.46 (m, 2H), 7.42 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.36 – 7.21 (m, 7H), 6.00 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.46 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 1H), 4.39 (dt, J = 12.7, 0.9 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.63 (s, 2H), 3.60 (ddt, J = 5.3, 1.6, 1.0 Hz, 2H), 3.31 – 3.20 (m, 2H), 2.59 – 2.43 (m, 3H), 2.39 (d, J = 0.7 Hz, 3H).

Пример 15. Получение N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(1,8-диэтил-1,3,4,9-тетрагидропирано[3,4-b]индол-1-ил)ацетамида на основе Этодолака и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из 1,8-Диэтил-1,3,4,9-тетрагидропирано[3,4-b]индол-1-уксусной кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(1,8-диэтил-1,3,4,9-тетрагидропирано[3,4-b]индол-1-ил)ацетамид с выходом 81%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(1,8-диэтил-1,3,4,9-тетрагидропирано[3,4-b]индол-1-ил)ацетамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.66 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 7.39 – 7.21 (m, 6H), 7.21 – 7.13 (m, 1H), 7.10 (dd, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 4.46 (dt, J = 12.3, 0.9 Hz, 1H), 4.34 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.99 (qt, J = 12.5, 7.1 Hz, 2H), 3.63 – 3.56 (m, 2H), 3.52 – 3.41 (m, 1H), 3.19 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.03 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.02 – 2.91 (m, 1H), 2.91 – 2.82 (m, 1H), 2.85 – 2.75 (m, 1H), 2.67 – 2.41 (m, 5H), 2.28 (dq, J = 12.3, 8.0 Hz, 1H), 2.17 (dq, J = 12.5, 8.0 Hz, 1H), 1.24 – 1.16 (m, 3H), 1.05 (t, J = 8.0 Hz, 3H).

Пример 16. Получение N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((3-(трифторметил)фенил)амино)бензамида на основе Флуфенамовой кислоты и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из Флуфенамовой кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((3-(трифторметил)фенил)амино)бензамид с выходом 74%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((3-(трифторметил)фенил)амино)бензамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.19 – 8.10 (m, 4H), 8.02 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 4H), 7.74 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 4H), 7.54 (s, 1H), 7.54 – 7.43 (m, 11H), 7.42 – 7.21 (m, 28H), 7.11 (td, J = 7.5, 1.5 Hz, 4H), 4.48 (dt, J = 12.6, 1.0 Hz, 4H), 4.39 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 4H), 3.76 – 3.65 (m, 4H), 3.65 – 3.57 (m, 8H), 3.44 – 3.32 (m, 4H), 2.62 – 2.39 (m, 12H).

Пример 17. Получение N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((2,6-дихлоро-3-метилфенил)амино)бензамида на основе Меклофенамовой кислоты и небрацетама,Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из Меклофенамовой кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил) метил)-2-((2,6-дихлоро -3-метилфенил)амино) бензамид с выходом 76%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((2,6-дихлоро-3-метилфенил)амино)бензамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.67 (s, 1H), 8.20 – 8.12 (m, 1H), 7.88 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 7.5, 1.6 Hz, 1H), 7.49 (td, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.36 – 7.21 (m, 6H), 7.12 (td, J = 7.4, 1.5 Hz, 1H), 7.01 (dq, J = 7.5, 1.0 Hz, 1H), 4.47 – 4.34 (m, 2H), 3.70 (ddd, J = 12.9, 7.7, 6.7 Hz, 1H), 3.65 – 3.55 (m, 2H), 3.44 – 3.33 (m, 1H), 2.62 – 2.39 (m, 3H), 2.31 (d, J = 1.0 Hz, 2H).

Пример 18. Получение N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((3-хлоро-2-метилфенил)амино)бензамида на основе Толфенамовой кислоты и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из Толфенамовой кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((3-хлоро-2-метилфенил)амино)бензамид с выходом 84%.

Химическая схема получения N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-((3-хлоро-2-метилфенил)амино)бензамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.59 (s, 1H), 8.14 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.51 (td, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.36 – 7.21 (m, 6H), 7.13 (ddd, J = 14.5, 7.5, 1.5 Hz, 2H), 4.46 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 1H), 4.39 (dt, J = 12.6, 0.9 Hz, 1H), 3.68 (ddd, J = 13.0, 7.7, 6.7 Hz, 1H), 3.67 – 3.55 (m, 2H), 3.47 – 3.36 (m, 1H), 2.61 – 2.52 (m, 1H), 2.56 – 2.48 (m, 1H), 2.52 – 2.41 (m, 1H), 2.28 (s, 3H).

Пример 19. Получение (2S)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(4-изобутилфенил)пропанамида на основе Дексибупрофена и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из (S)-2-(4-изобутилфенил)-пропионовой кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают (2S)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(4-изобутилфенил)пропанамид с выходом 80%.

Химическая схема получения (2S)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(4-изобутилфенил)пропанамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.42 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 7.36 – 7.28 (m, 2H), 7.32 – 7.21 (m, 5H), 7.06 (dq, J = 7.0, 0.9 Hz, 2H), 4.48 (dt, J = 12.4, 1.0 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.65 – 3.53 (m, 3H), 3.36 – 3.21 (m, 2H), 2.64 – 2.52 (m, 1H), 2.55 – 2.40 (m, 4H), 1.84 (dp, J = 13.7, 6.8 Hz, 1H), 1.36 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.86 (dd, J = 20.0, 6.8 Hz, 5H).

Пример 20. Получение (2S)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(4-(1-оксоизоиндолин-2-ил)фенил)пропанамида на основе Дексиндопрофена и небрацетама, Табл. 2.

Аналогично примеру 1, из соответствующей кислоты и 4-(аминометил)-1-бензилпирролиддон-2-он получают (2S)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(4-(1-оксоизоиндолин-2-ил)фенил) пропанамид с выходом 83%.

Химическая схема получения (2S)-N-((1-бензил-5-оксипирролидин-3-ил)метил)-2-(4-(1-оксоизоиндолин-2-ил)фенил) пропанамида.

1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.14 – 8.04 (m, 1H), 7.55 – 7.45 (m, 2H), 7.44 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 7.37 – 7.21 (m, 10H), 4.74 (d, J = 1.0 Hz, 2H), 4.50 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 4.36 (dt, J = 12.4, 0.9 Hz, 1H), 3.66 – 3.55 (m, 3H), 3.34 – 3.19 (m, 2H), 2.59 – 2.40 (m, 3H), 1.36 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

Пример 21

Исследование фармакологической активности дифармакофорных соединений ноотропно – анальгетического действия полученных по примерам 1-20, проведено на модели геморрагического инсульта.

Острый аутогеморрагический инсульт был смоделирован в области внутренней капсулы правого полушария у группы лабораторных крыс. Операцию выполняли в условиях общей анестезии путем внутрибрюшинного введения «Xyla» в дозе 0,1 мл для премедикации, после лёгкой седации крысам в качестве базисного наркоза внутрибрюшинно вводили хлоралгидрат в дозе 300 мг/кг. По достижению глубокого наркоза с помощью шприца проводили забор крови из хвостовой вены крысы. Затем проводили обработку операционного поля, линейный разрез кожи головы в теменной области. Разрез длиной 1,0 см выполняли во фронтальной плоскости, с последующим проведением гемостаза. В дальнейшем было выполнено скелетирование кости, отделение надкостницы. С помощью стоматологического бора наложено трепанационное отверстие диаметром 2 см в правой теменной области. С помощью смоделированного устройства для стереотаксического введения, вводили пункционную иглу в области внутренней капсулы (координаты H=4 мм, L=3.0 мм, А=1.5 мм от брегмы по атласу G. Paxinos) на глубину 3 мм. Затем устройство фиксировали, и внутрь иглы вводили мандрен-нож, осуществляя деструкцию мозговой ткани путем поворота мандрен-ножа в три оборота по часовой и в три оборота против часовой стрелки. После извлечения мандрен-ножа в стерильных условиях струйно крысе вводили аутокровь, взятую из хвостовой вены животного, в объеме 0,11 мл/100 гр веса. Эффективность введения определяли по наличию стволовых судорог. После чего пункционную иглу извлекали, рану осушали и производили послойное ушивание раны и контроль гемостаза.

Наблюдения проводили в течение 14 суток после операции, регистрируя особенности поведения и состояния животных на 1, 7 и 14-е сутки. Для оценки нарушения поведения и состояния животных после геморрагического инсульта был использован комплекс методов, традиционно применяемых для этих целей в эксперименте. Для оценки неврологического статуса использовался метод оценки неврологического дефицита по шкале оценки инсульта McGrow в модификации И.В. Ганнушкиной (1996) и метод оценки мышечного тонуса путём измерения силы хвата конечностей животных посредством динамометра.

Исследуемые дифармакофорные соединения вводили животным внутрибрюшинно однократно за 1 час до операции в дозе 18 мг/кг. В качестве препарата сравнения был выбран мексидол в дозе 50 мг/кг согласно межвидовому коэффициенту пересчёта средне-терапевтической дозы человека, используемый в клинической практике в терапии цереброваскулярных заболеваний. Контрольным животным вводили физиологический раствор в эквивалентном объеме.

Авторы данного изобретения обнаружили, что неизвестные ранее дифармакофорные соединения обладают в разной степени выраженной церебропротективной активностью. Влияние исследуемых дифармакофорных соединений на выживаемость животных на модели геморрагического инсульта представлены в таблице 3 на фиг.3.

Из таблицы следует, что наибольшее число выживших животных было в группе, получавшей дифармакофорное соединение Дексибупрофен – небрацетам, где к 14 суткам после моделирования геморрагического инсульта выжило 7 из 10 животных. Кетопрофен, Декскетопрофен, Напроксен, Кеторолак, Флурбипрофен, Флуфенамовая и Меклофенамовая кислота в соединении с небрацетамом показали близкое к препарату сравнения мексидолу число выживших животных к 14 суткам после моделирования патологии. В группе животных, получавших препарат сравнения мексидол, число выживших животных составило 6 из 10 взятых в эксперимент.

В первые сутки после операции при оценке неврологических нарушений практически у всех крыс с моделированной интрацеребральной гематомой наблюдались неврологические нарушения в виде вялости и замедленности движений. Выраженный неврологический дефицит, проявляющийся в виде манежных движений по кругу и параличей конечностей у животных с геморрагическим инсультом, был отмечен в 100% случаев. При оценке церебропротективного действия установлено, что наиболее выраженной активностью, превосходящей таковую для препарата сравнения Мексидол, обладает дифармакофорное соединение Дексибупрофен – небрацетам, который в дозе 18 мг/кг статистически значимо снижает количество баллов неврологического дефицита уже на первые сутки после моделирования патологии до 6,2±0,39 (в контроле 8,6±0,52). К 7 и 14 суткам также обнаружено максимально выраженное, в сравнении с другими исследованными соединениями, статистически значимое снижение баллов неврологического дефицита у соединений небрацетама с Фенопрофеном, Флурбипрофеном, Флуфенамовой и Меклофенамовой кислотой, Дексиндопрофеном (таблица 4).

Регистрация силы хвата у крыс с геморрагическим инсультом показала, что на первые сутки после инсульта ослабление мышечного тонуса в контрольной группе статистически значимо снизилось в среднем на 61%. На 7 и 14 сутки в контрольной группе отмечался прирост мышечной силы в среднем на 50% и на 64% относительно первых суток после моделирования патологии. При оценке силы хвата в экспериментальных группах установлено, что наиболее выраженной активностью, сопоставимой с таковой для препарата сравнения Мексидол, обладает дифармакофорное соединение Дексибупрофен – небрацетам. Дексибупрофен-небрацетам в дозе 18 мг/кг статистически значимо повышает силу мышечного хвата уже на первые сутки после моделирования патологии до 4,2±0,2 усл.ед (в контроле 2,8±0,25). К 7 и 14 суткам в данной группе также обнаружено максимально выраженное, в сравнении с другими исследованными соединениями, и сопоставимое с препаратом сравнения статистически значимое повышение силы мышечного хвата. Учитывая дозу введения 18 мг/кг, неплохие результаты показали соединения небрацетама с Меклофенамовой кислотой, Толметином, Флурбипрофеном, Кеторолаком, Дифлунисалом, Декскетопрофеном, Кетопрофеном, Индометацином (таблица 5 на Фиг. 5).

Пример 22.

В ходе исследования специфической активности изучен анальгетический эффект полученных соединений и их влияние на выносливость мышей. Анальгетическое действие было изучено путем исследования специфической активности опытных образцов дифармакофорной молекулы на модели in vivo на 90 самцах мышей. В экспериментальные группы были отобраны животные, ранее не участвовавшие в каких-либо экспериментах, без внешних отклонений от нормы. Использовали по 10 животных в каждой группе. Группы были сформированы методом случайного отбора с использованием массы тела в качестве ведущего признака: разброс по исходной массе между и внутри групп не должен превышать ± 20 %.

Для примера приведено исследование влияния соединения Дексибупрофен с небрацетомом (далее препарат Дексибунеб), как анальгетика и как препарата, повышающего выносливость. В качестве препаратов сравнения использованы препараты Ибупрофен и пирацетам. Введение исследуемого препарата и препаратов сравнения проводили перорально в объеме 10 мл/кг. Дозы для исследуемого препарата Дексибунеб и препарата сравнения Пирацетам составляли 125, 250 и 500 мг/кг, для препарата сравнения Ибупрофен – 125 и 250 мг/кг. Исследуемые препараты вводили ежедневно перорально в объеме 10 мл/кг на протяжение 7 дней. В качестве растворителя использован 0,5% раствор TWEEN 80 в воде для инъекций. Тестирование животных проводили после 1-го, 5-го и 7-го введений. Проведены тесты «Горячая пластина» и «Отдергивание хвоста» для изучения анальгезивных свойств, тест «Вращающийся стержень» - для проверки изменения выносливости.

Для тестов «Горячая пластина» и «Отдергивание хвоста» измерения проводили до начала введения и через час после 5-го введения. Тест «Вращающийся стержень» - через час после 7-го введения.

Для проведения теста «Горячая пластина» использовали оборудование производства Panlab – установку Hot Plate модель LE 7406. Пластину нагревали до температуры +50°С. Животное помещали на пластину и измеряли время от момента помещения до момента проявления болевых ощущений - облизывания лапок или подпрыгивания. Максимальное время составляло 90 сек, в случае, если животное не выдавало нужную реакцию, тест останавливали (по гуманным соображениям). Поскольку болевой порог у разных животных может достаточно сильно отличаться, индивидуально для каждого оценивали изменение латентного периода наступления болевых ощущений до введения исследуемых веществ и через 5 дней введения. Результаты, полученные при проведении теста «Горячая пластина» представлены в таблице 6 на фиг.6 и на фиг.7. Показано, что у животных, получавших препарат Дексибунеб в дозе 125 - 500 мг/кг происходит достоверное дозозависимое увеличение латентного периода наступления болевых ощущений, примерно на 18,9 с при максимальной дозировке 500 мг/мл. Для препаратов сравнения Пирацетам и Ибупрофен так же были достигнуто увеличение латентного периода, но менее длительное чем у препарата Дексибунеб.

Для проведения теста «Отдергивание хвоста» использовали оборудование производства Panlab – установку Tail Flick модель LE 7106. Животное в рестрейнере располагали так, чтобы хвост находился в предполагаемом фокусе светового пучка и закрывал фотоэлемент. Включали световой пучок и измеряли время от включения до попадания света на фотоэлемент (происходит после отдергивания хвоста в ответ на нагревание). Максимальное время составляло 20 сек, в случае, если животное не выдавало нужную реакцию, тест останавливали по гуманным соображениям. Поскольку болевой порог у разных животных может достаточно сильно отличаться, индивидуально для каждого оценивали изменение латентного периода наступления болевых ощущений до введения исследуемых веществ и через 5 дней введения. Результаты, полученные при проведении теста «отдергивание хвоста», представлены в таблице 7 на Фиг 8 и на Фиг. 9

При проведении данного теста выявлено различие в изменении латентного периода отдергивания хвоста у животных, получавших исследуемый препарат Дексибунеб и препараты сравнения Ибупрофен и Пирацетам во всех исследованных дозах с контрольными животными. Препарат Дексибунеб показал наиболее высокую, дозозависимую эффективность.

Для проведения теста «Вращающийся стержень» использовали оборудование производства Calambus Instruments – установку Rota Rod модель Rotamex. Животное помещали на вращающийся стержень. Скорость вращения соответствовала скорости бега животного 10 метров/в минуту. Засекали время от момента помещения животного на стержень до падения с него. В случае, если животное не упало на протяжении 600 сек, тест останавливали. Кроме этого, при обработке результатов определяли количество животных, которые смогли удержаться на вращающемся стержне более 60 секунд в каждой из групп.

Результаты, полученные при исследовании выносливости в тесте «Вращающийся стержень» представлены в таблице 8 на Фиг.10 и фиг.11.

Показано, что введение исследуемого препарата Дексибунеб, как и препаратов сравнения во всех исследованных дозах увеличивает среднее время удержания на вращающемся стержне и количество животных, продержавшихся на нем более 60 секунд. Стоит отметить, что препарат Дексибунеб, в дозировке 250 мг/кг показал наивысшее значение удержания на стержне 238,16 ± 81,24 сек с долей животных, продержавшихся более 60 сек - 60 %.

Для всех данных была применена описательная статистика: подсчитаны среднее значение и стандартная ошибка среднего, которые вместе со значением N представлены в итоговых таблицах. Различия определены при 0,05 уровне значимости и обозначены «*».

При исследовании специфической активности в тестах «Горячая пластина» и «Отдергивание хвоста» показана дозозависимая анальгетическая активность опытных образцов более высокая при сопоставлении с препаратами сравнения. В тесте «Вращающийся стержень» препарат Дексибунеб показал самые высокие результаты в сравнении с препаратами сравнения.

Таким образом, поставленная задача достигнута. Новые дифармакофорные соединения проявляют ноотропно – анальгетическое действие с сохранением, а в ряде случаев и усилением ноотропно-анальгетического действия по сравнению с препаратами сравнения, при образовании дифармокофорный соединений формулы (1) заявленным способом из НПВС и соединения небрацетам из группы рацетомов.

Дифармакофорные соединения ноотропно–анальгетического действия, общей формулы

(1),

где R-радикалы кислотных НПВС, таких как ибупрофен, диклофенак, индометацин, нифлумовая кислота, мефенамовая кислота, кетопрофен, декскетопрофен, напроксен, дифлунисал, кеторолак, сулиндак, фенопрофен, флурбипрофен, толметин, этодолак, флуфенамовая кислота, меклофенамовая кислота, толфенамовая кислота, дексиндопрофен.