Лабораторный экспресс-метод, позволяющий дифференцировать сорта озимых зерновых культур по устойчивости к возбудителю розовой снежной плесни (возбудитель гриб microdochium nivale (fr.)samuels & c.i. hallet)

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой лабораторный экспресс-метод, позволяющий дифференцировать сорта озимых зерновых культур по устойчивости к возбудителю розовой снежной плесни (возбудитель гриб Microdochium nivale (Fr.)Samuels&C.I. Hallet), где в чашку Петри на фильтровальную бумагу, смоченную дистиллированной водой, равноудаленно помещают фрагменты листовых пластинок озимой зерновой культуры, вырезанные из средней части листа растения размером 0,07-0,08 м одинаковой ширины, затем на листовые пластинки растений равноудалено наносятся по 2 капли споровой суспензии гриба Microdochium nivale (Fr.) Samuels&C.I. Hallet одинаковой концентрации с известным высоким уровнем патогенности, затем на 2-3 сутки отмечается площадь очага поражения листовой пластинки растения и реакция сорта на указанный патоген, при этом высокоустойчивыми считаются сорта, площадь очага поражения которых составляла 5% от площади фрагмента листовой пластинки, зараженная часть листа остается светло-зеленой; среднеустойчивыми - площадь очага поражения составляет 15-25%, зараженная часть листа становиться светло-желтой; восприимчивыми - пораженная часть листа составляет 25-50% и становится от светло- до темно-коричневого цвета, сильновосприимчивыми считаются растения, у которых площадь поражения листовой пластинки более 50%, листья темно-бурые, с элементами некротического разложения. Предложенный лабораторный экспресс-метод позволяет дифференцировать сорта озимых зерновых культур по устойчивости к возбудителю розовой снежной плесни устойчивых к возбудителю розовой снежной плесни генотипов. 1ил., 1 пр.

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к селекции озимых зерновых культур, и может быть применено при лабораторном скрининге устойчивых к возбудителю розовой снежной плесни генотипов с целью дальнейшего использования их в качестве исходного селекционного материала для создания новых сортов.

За последние десятилетия значительно возросла вредоносность таких болезней как снежная плесень, корневая гниль, фузариоз колоса, вызываемых фузариозными грибами. Ежегодные потери урожая от данных заболеваний составляют 20-30%.

Наиболее практичным и экономичным подходом в борьбе с грибных болезней растений является использование сортов, устойчивых к болезни. Определение устойчивости растений к патогену базируется на создании жесткого инфекционного фона при возделывании культуры. Гарантированную оценку болезнеустойчивости обеспечивает искусственное заражение растений. Изучение иммунологических свойств исходного и селекционного материала при искусственном заражении растений позволяет выявлять потенциальную и стабильную устойчивость сортообразцов, проводить своевременную браковку и отбор невосприимчивых форм на всех этапах селекции, что значительно ускоряет селекционный процесс.

Для оценки устойчивости к возбудителю грибных болезней растений в лабораторных условиях известны различные методы: анализ растений в чашках Петри, в бумажных рулонах (Пересыпкин В.Ф. Сельскохозяйственная фитопатология. - Москва: Агропромиздат, 1989. - 479 с.) [1]. Все эти методы громоздки, продолжительны во времени, требуют большого количества исходного материала, что не дает возможности проводить оценку в большом объеме. Кроме того, использование данных методов предполагает наличие дорогостоящих реактивов и оборудования.

Наиболее близким к заявляемому решению является точечный метод локализованной количественной инокуляции суспензией гриба с использованием отдельных листьев риса и последующей оценки симптомов заболевания и размера поражения для определения тяжести заболевания растения (Jia Y., Valent В., Lee F.N. Determination of Host Responses to Magnaporthe grisea on Detached Rice Leaves Using a Spot Inoculation Method // Plant Dis. - 2003. - Vol. 87. - No. 2. - P. 129-133) [2].

Недостатком известного способа является невозможность использования описанных симптомов заболевания и размеров поражения для определения тяжести заболевания озимых зерновых культур, пораженных розовой снежной плеснью (грибом Microdochium nivale (Fr.)Samuels&C.I. Hallet).

Задачей данного изобретения является разработка критериев оценки и отбора сортообразцов озимых зерновых культур устойчивых к поражению розовой снежной плесенью.

Техническим результатом изобретения является лабораторный экспресс-метод оценки генотипов озимых зерновых культур, заключающийся в описании симптомов заболевания и размеров поражения листа для определения устойчивых к поражению розовой снежной плесенью озимых зерновых культур.

Поставленная задача и указанный технический результат достигаются благодаря тому, что в известном экспресс-методе, позволяющем дифференцировать сорта озимых зерновых культур по устойчивости к возбудителю розовой снежной плесни (возбудитель гриб Microdochium nivale (Fr.)Samuels&C.I. Hallet), согласно изобретению в чашку Петри на фильтровальную бумагу, смоченную дистиллированной водой, равноудаленно помещают фрагменты листовых пластинок озимой зерновой культуры, вырезанные из средней части листа растения размером 0,07-0,08 м одинаковой ширины, затем на листовые пластинки растений равноудалено наносится по 2 капли споровой суспензии гриба Microdochium nivale (Fr.) Samuels&C.I. Hallet одинаковой концентрации с известным высоким уровнем патогенности, затем на 2-3 сутки отмечается площадь очага поражения листовой пластинки растения и реакция сорта на указанный патоген, при этом высокоустойчивыми считаются сорта, площадь очага поражения которых составляла 5% от площади фрагмента листовой пластинки, зараженная часть листа остается светло-зеленой; среднеустойчивыми - площадь очага поражения составляет 15-25%, зараженная часть листа становиться светло-желтой; восприимчивыми - пораженная часть листа составляет 25-50% и становиться от светло до темно-коричневого цвета, сильновосприимчивыми считаются растения, у которых площадь поражения листовой пластинки более 50%, листья темно-бурые, с элементами некротического разложения.

Сущность предлагаемого решения поясняется чертежом, где на фиг. представлена оценка сортообразцов по устойчивости к возбудителю розовой снежной плесени.

Способ осуществляется следующим образом.

Работы по выделению возбудителей снежной плесени из пораженных тканей растений проводят в стер ильных условиях. Гриб Microdochium nivale(Fr.) Samuels&C.I. Hallet выделяют в чистую культуру на питательную среду - картофельно-декстрозный агар (КДА). С этой целью пораженные части растений, тщательно промывают в водопроводной и стерильной воде, разрезают на мелкие кусочки, длиной 2-3 мм, дезинфицируют в 70% растворе спирта 20-30 секунд, промывают в дистиллированной воде и над пламенем горелки раскладывают пинцетом фрагменты ткани на питательную среду в чашки Петри. С каждого сорта закладывают по 100-150 фрагментов пораженных тканей. Культивирование изолятов проводят на КДА в течение двух недель при температуре 18-22°С. Регулярно ведутся наблюдения за ростом и формированием колоний гриба на питательной среде. Изоляты, с характерными признаками загрязнения (бактерии и другие виды грибов) отбраковывают. Через 12-14 дней отдельные колонии или сектор а повтор но отсевают на питательную среду. Для очистки изолятов от бактерий в ср еду добавляют лимонную кислоту или антибиотики широкого действия (биомицин, стрептомицин).

Для идентификации видового состава используют справочники и определители (Билай В.И. Фузарии. - Киев, 1977. - 442 с. [3] и др.). Для поддержания жизнеспособности изолятов, возбудителей корневых гнилей в чистой культуре проводят регулярные пересевы на картофельно-декстрозную среду. Коллекция грибов хранится в биологических пробирках на косяках агаризованной среды при температуре +2-7°С.

Для проведения экспресс-метода из средней части листа озимой зерновой культуры вырезают фрагменты размером 0,07-0,08 м одинаковой ширины и помещают в чашку Петри на фильтр овальную бумагу, смоченную дистиллированной водой, на одинаковом расстоянии друг от друга.

Затем на листовые пластинки растений равноудалено наносится по 2 капли споровой суспензии гриба Microdochium nivale (Fr.) Samuels&C.I. Hallet одинаковой концентрации с известным высоким уровнем патогенности. Концентрация конидий составляла 15-20 спор в поле зрения микроскопа при увеличении 100-120×10-6. На 2-3 сутки после начала опыта отмечается площадь очага поражения листовой пластинки растения и реакция сорта на указанный патоген. Высокоустойчивыми считаются сорта, площадь очага поражения которых составляла 5% от площади фрагмента листовой пластинки, зараженная часть листа остается светло-зеленой, среднеустойчивыми - площадь очага поражения составляет 15-25%, зараженная часть листа становиться светло-желтой; восприимчивыми - пораженная часть листа составляет 25-50% и становиться от светло до темно-коричневого цвета, сильновосприимчивыми считаются растения, у которых площадь поражения листовой пластинки более 50%, листья темно-бурые, с элементами некротического разложения.

Пример (фиг.) оценки сортообразцов по устойчивости к возбудителю розовой снежной плесени:

1, 3 - высокоустойчивые сорта (площадь очага поражения составляла 5% от площади фрагмента листовой пластинки, зараженная часть листа остается светло-зеленой);

5, 7, 16, 17, 18 - среднеустойчивые (площадь очага поражения составляет 15-25%, зараженная часть листа становиться светло-желтой);

2, 6, 10, 12, 13 - восприимчивые (пораженная часть листа составляет 25-50% и становиться от светло - до темно-коричневого цвета);

4, 8, 9, 11, 14, 15, 19, 20 - сильновосприимчивые (растения, у которых площадь поражения листовой пластинки более 50%, листья темно-бурые, с элементами некротического разложения).

Использование стабильных патогенных штаммов гриба позволяет получить четкие характеристики ответной реакции конкретных сортов на влияние этих патогенных штаммов.

Предложенный лабораторный экспресс-метод позволяет дифференцировать сорта озимых зерновых культур по устойчивости к возбудителю розовой снежной плесни устойчивых к возбудителю розовой снежной плесни генотипов с целью дальнейшего использования их в качестве исходного селекционного материала для создания новых сортов.

Лабораторный экспресс-метод, позволяющий дифференцировать сорта озимых зерновых культур по устойчивости к возбудителю розовой снежной плесни (возбудитель гриб Microdochium nivale (Fr.)Samuels&C.I. Hallet), отличающийся тем, что в чашку Петри на фильтровальную бумагу, смоченную дистиллированной водой, равноудаленно помещают фрагменты листовых пластинок озимой зерновой культуры, вырезанные из средней части листа растения размером 0,07-0,08 м одинаковой ширины, затем на листовые пластинки растений равноудалено наносятся по 2 капли споровой суспензии гриба Microdochium nivale (Fr.) Samuels&C.I. Hallet одинаковой концентрации с известным высоким уровнем патогенности, затем на 2-3 сутки отмечается площадь очага поражения листовой пластинки растения и реакция сорта на указанный патоген, при этом высокоустойчивыми считаются сорта, площадь очага поражения которых составляла 5% от площади фрагмента листовой пластинки, зараженная часть листа остается светло-зеленой; среднеустойчивыми - площадь очага поражения составляет 15-25%, зараженная часть листа становиться светло-желтой; восприимчивыми - пораженная часть листа составляет 25-50% и становиться от светло- до темно-коричневого цвета, сильновосприимчивыми считаются растения, у которых площадь поражения листовой пластинки более 50%, листья темно-бурые, с элементами некротического разложения.



 

Похожие патенты:

Изобретение предназначено для использования в сельском хозяйстве в селекции устойчивых сортов картофеля к колорадскому жуку. Способ заключается в выявлении в гибридной популяции растений, несущих гены устойчивости к данному насекомому, для чего на листовую пластинку производится нанесение небольшой капли смыва 40%-ным спиртовым раствором с кладки яиц колорадского жука.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения удвоенных гаплоидов моркови в культуре изолированных микроспор in vitro.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к культивированному растению Cucumis sativus var. sativus, содержащему фрагмент интрогрессии из дикого родственника огурца на хромосоме 2 в гомозиготной или гетерозиготной форме.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу селекции укороченных растения кукурузы, включающему проведение маркерного анализа для обнаружения в популяции растений кукурузы растения кукурузы, содержащего аллель укороченности в одном или более полиморфных локусах. Также раскрыт способ создания популяции растений кукурузы, содержащих по меньшей мере один аллель укороченности.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к селекции и может найти применение при создании сортов с высокой азотфиксирующей способностью. Способ включает отбор по количеству азотфиксирующих клубеньков бактерий путем их подсчета.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к культивированному растению Cucumis sativus var. sativus, обладающему увеличенным урожаем плодов, к его части, семени, плоду, а также к его клетке.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ отбора селекционных образцов озимой тритикале, включающий определение отрастаемости растений, включающий скашивание исследуемых образцов в фазу стеблевания на высоте 5-7 см и определение их зерновой продуктивности после отрастания.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к селекции картофеля, и может быть использовано при отборе исходного материала по признаку потемнения мякоти клубня. Способ отбора включает проведение оценки степени потемнения сырой мякоти клубней картофеля по девятибалльной шкале через шесть часов после выдерживания образцов в 6%-ном водном растворе поваренной соли.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ отбора генотипов гречихи и сои, отзывчивых на повышенное содержание углекислого газа в воздухе, заключающийся в измерении интенсивности фотосинтеза листьев, при этом измерения проводят с 9:00 до 11:00 часов дня с помощью переносного газоанализатора марки LI-6400 XT или аналога, измерительную камеру которого прикрепляют к листу растения, для измерения выбирают листья первого плодоносящего узла в фазу плодообразования, согласно изобретению, в измерительной камере переносного газоанализатора устанавливают поочередно нормальную концентрацию углекислого газа, соответствующую среднегодовому значению в земной атмосфере, и повышенную в 4 раза концентрацию углекислого газа, при этом отзывчивыми признают генотипы гречихи и сои, у которых при повышенной в 4 раза концентрации углекислого газа интенсивность фотосинтеза увеличивается не менее чем в 2,3 раза.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к растению Lactuca sativa, содержащему фрагмент интрогрессии из Lactuca virosa на хромосоме 6 и на хромосоме 7, которое обладает большей резистентностью против Nasonovia ribisnigri биотипа 1 (Nr:1) по сравнению с растением, не содержащим указанные фрагменты интрогрессии, а также к его семени, листку, части и головке.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу закрепления гетерозиса гибридов риса в последующих поколениях, включающему удаление полулетальных генов из генотипа гетерозисных гибридов и гибридизацию контрастных образцов одной гибридной комбинации. Указанный способ предусматривает удаление полулетальных генов из генотипа гетерозисных гибридов при воздействии высоких температур в фазе цветения риса, действие которых приводит к элиминации из популяции гамет, снижающих жизнеспособность. Изобретение позволяет эффективно осуществлять закрепление гетерозиса гибридов в последующих поколениях. 2 ил., 7 табл.
Наркология
Наверх