Композиция клобетазола в виде наноэмульсии масло в воде

Группа изобретений относится к области химии и фармацевтики. 1 объект представляет собой наноэмульсионную композицию масло в воде для применения в профилактике и/или лечении воспалительного заболевания или состояния, выбранного из офтальмологического, ушного, назального и ротоглоточного воспалительного заболевания или состояния, имеющую непрерывную водную фазу и диспергированные масляные капли и содержащую клобетазол или его фармацевтически приемлемую соль или сложный эфир, один или более масляных компонентов и одно или более поверхностно-активных веществ вместе с фармацевтически приемлемыми эксципиентами или носителями, причем осмоляльность композиции составляет от 100 до 500 мОсм/кг; средний размер капель составляет от 1 до 500 нм; массовое отношение между масляными компонентами и суммой масляных компонентов и поверхностно-активных веществ составляет от 0,001 до 0,5; массовое отношение между масляным компонентом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 1:1 до 200:1; и массовое отношение между поверхностно-активным веществом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 2:1 до 200:1. 2 объект – способ получения наноэмульсионной композиции масло в воде. Технический результат заключается в стабильности активного ингредиента и содержащей его композиции, применимой для профилактики и/или лечения офтальмологического, ушного, назального и ротоглоточного воспалительных заболеваний или состояний. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 1 ил., 10 табл., 3 пр.

 

Данное изобретение относится к области фармацевтики. В частности, оно относится к композициям, содержащим клобетазол. Более конкретно, данное изобретение относится к композициям клобетазола в виде наноэмульсии масло в воде, способам их получения, а также их применению в качестве лекарственного средства и, в частности, для профилактики и/или лечения воспалительных заболеваний или состояний.

Уровень техники

Пропионат клобетазола является международным непатентованным названием (МНМ) пропаноата [17–(2–хлорацетил)–9–фтор–11–гидрокси–10,13,16–триметил–3–оксо–6,7,8,11,12,14,15,16–октагидроциклопента[a]фенантрен–17–ила], имеющего номер CAS 25122–46–7. Структура пропионата клобетазола соответствует формуле (I):

(I)

Пропионат клобетазола является кортикостероидом класса гилюкокортикоидов, применяемым для лечения различных воспалительных заболеваний.

С одной стороны, пропионат клобетазола применяют для лечения расстройств кожи, включая экзему, губной герпес, псориаз и каплевидную склеродермию. Его также применяют для лечения некоторых аутоиммунных заболеваний, включая гнездную алопецию, витилиго, красный плоский лишай (аутоиммунные кожные узелки) и грибовидный микоз (T–клеточную лимфому кожи). Он обладает высокой эффективностью и обычно не предназначен для применения с герметичными повязками или для длительного непрерывного применения. Он может быть в форме местных составов, таких как шампунь, мусс, мазь и смягчающий крем.

С другой стороны, также было описано, что пропионат клобетазола демонстрирует сильное противовоспалительное действие, и поэтому полезен в форме глазных капель для лечения различных глазных болезней, например, воспалительных болезней внешних и передних частей глаза, таких как блефарит, конъюнктивит, кератит, склерит, эписклерит, ирит, иридоциклит и увеит, а также воспалительных болезней, возникающих после операции на глазе.

Однако, из–за низкой растворимости в воде пропионата клобетазола, трудно приготовить стабильные композиции, содержащие пропионат клобетазола без ущерба для фармакокинетических и фармакодинамических свойств.

Несмотря на такие сложности с получением составов пропионата клобетазола, в данной области техники существует несколько составов, содержащих пропионат клобетазола. В частности, в европейском патенте № EP0844001 описана эмульсия пропионата клобетазола типа масло в воде, содержащая вазелиновое масло и фосфолипид, для закапывания в глаз. Эмульсии имеют хорошо известные ограничения для глазного введения, такие как расфокусированное зрение или отсутствие удобства для пациента из–за вязкости составов. В частности, эти эмульсии имеют ограниченную биодоступность и проницаемость. Таким образом, глазная биодоступность после местного введения эмульсий в глаз остается проблемой, которая до сих пор не решена удовлетворительно.

Кроме того, дополнительным ограничением для глазных композиций является их стерилизация. В данном уровне техники раскрыто несколько методик стерилизации глазных композиций, которые включают термические или радиационные процедуры, которые могут влиять на стабильность клобетазола. В частности, композиции, раскрытые в европейском патенте № EP0844001, требуют сложного производственного процесса для получения равномерного распределения активного ингредиента, который может нарушить стабильность лекарственного вещества, даже в большей степени для высокочувствительной молекулы, такой как клобетазол.

Кроме того, в заявке на патент PCT WO2017037663 описана местная наноэмульсия масло в воде пропионата клобетазола для лечения псориаза, где композиция содержит высокое количество спиртов, масляных компонентов и поверхностно–активных веществ. Композиции, описанные в этой заявке на патент, все еще имеют проблемы неподходящей переносимости в глазных или слизистых мембранах из–за высокой доли растворителей или неподходящих компонентов для их путей введения. Более того, способ получения таких композиций требует высокоэнергетических способов, которые ухудшают стабильность лекарственного средства. Наконец, в заявке на патент PCT WO2017037663 ничего не сказано о выделении активного ингредиента из композиции и не продемонстрирована связанная активность.

Таким образом, из того, что известно в данной области, все еще остается пространство для нахождения стабильных композиций, содержащих пропионат клобетазола, имеющих соответствующие фармакокинетические и фармакодинамические свойства, а также подходящую переносимость после их применения.

Сущность изобретения

Авторы данного изобретения обнаружили стабильную наноэмульсионную композицию масло в воде, содержащую клобетазол и имеющую низкое содержание масляных компонентов и поверхностно–активных веществ, а также определенное массовое соотношение между масляным компонентом или поверхностно–активным веществом и количеством активного ингредиента и удельное массовое соотношение между количеством масел и суммой масляных компонентов и поверхностно–активных веществ, которые позволяют получить хорошее ощущение после нанесения, а также подходящие фармакокинетические и фармакодинамические свойства для профилактики и/или лечения воспалительных заболеваний или состояний.

С одной стороны, наноэмульсионная композиция в соответствии с данным изобретением обладает хорошей стабильностью, даже хорошей стабильностью активного ингредиента или конечной композиции. С другой стороны, наноэмульсионная композиция в соответствии с данным изобретением также обеспечивает хорошее высвобождение и абсорбцию эффективного количества клобетазола в область обработки с меньшими побочными эффектами, связанными с ненадлежащим распределением клобетазола. И, наконец, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением также дает комфортное ощущение и переносимость после введения.

Таким образом, первый аспект изобретения относится к наноэмульсионной композиции масло в воде, имеющей постоянную водную фазу и диспергированные масляные капли, где наноэмульсия содержит: (a) терапевтически эффективное количество клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира; (b) один или более масляных компонентов; и (c) одно или более поверхностно–активных веществ; вместе с одним или более фармацевтически приемлемых эксципиентов или носителей

где: осмоляльность наноэмульсионной композиции составляет от 100 мОсм/кг до 500 мОсм/кг; средний размер капель, измеренный динамическим светорассеянием, составляет от 1 нм до 500 нм; массовое отношение между масляными компонентами и суммой масляных компонентов и одним или более поверхностно–активных веществ составляет от 0,001 до 0,5; массовое отношение между масляным компонентом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 1:1 до 200:1; и массовое соотношение между поверхностно–активным веществом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 2:1 до 200:1.

Второй аспект данного изобретения относится к способу получения наноэмульсионной композиции масло в воде, определенной в первом аспекте данного изобретения, который включает: (a) получение масляной фазы смешиванием клобетазола с масляными компонентами и поверхностно–активными веществами; (b) получением водной фазы; (c) эмульгирование масляной фазы, полученной на стадии (a) в водной фазе, полученной на стадии (b); (d) необязательно, корректировка pH; осмоляльности; pH и осмоляльности после стадии (a), стадии (b) или стадии (c); и (e) необязательно, добавление одного или более фармацевтически приемлемых эксципиентов или носителей на стадии (a), стадии (b) или стадии (c).

Третий аспект изобретения относится к наноэмульсионной композиции масло в воде, определенной в первом аспекте изобретения, для применения в качестве лекарственного средства.

И четвертый аспект изобретения относится к наноэмульсионной композиции масло в воде, определенной в первом аспекте изобретения, для применения для профилактики и/или лечения воспалительных заболеваний или состояний.

Краткое описание чертежей

На фиг. 1 показаны изображения, полученные после проведения исследования раздражения слизистой оболочки глаза HET–Cam для композиции 11 в соответствии с данным изобретением (A) и сравнительной композиции 34 вне объема данного изобретения (B). Изображения были сделаны в начале анализа (1) и в конце анализа (2) (5 минут).

Подробное описание изобретения

Все термины, используемые в настоящей заявке, если не указано иное, следует понимать в их обычном значении, известном в данной области техники. Другие более конкретные определения для определенных терминов, которые используются в настоящей заявке, являются такими, как изложенные ниже, и предназначены для применения единообразно по всему описанию и формуле изобретения, если иное прямо изложенное определение не обеспечивает более широкое определение.

Для целей настоящего изобретения любые приведенные интервалы включают как нижнюю, так и верхнюю конечные точки интервала.

Термин “клобетазол”, применяемый в заявке, относится к соединению формулы (II).

(II)

Клобетазол может быть в форме соли или в форме сложного эфира. В частности, клобетазол может быть в форме сложного эфира пропионата, соответствующего соединению формулы (I), определенному выше.

Термин “наноэмульсия” относится к коллоидной диспергированной системе, содержащей, по крайней мере, две несмешиваемых фазы, где одна фаза диспергирована в другой фазе в виде капель, имеющий средний размер, измеренный динамическим светорассеянием, от 1 нм до 500 нм.

Термины “средний размер” и “средний размер” имеют одинаковое значение и применяются взаимозаменяемо. Они относятся к среднему диаметру капель. Средний размер этих систем может быть измерен стандартными способами, известными специалистам в данной области техники. Под “средним размером” и “средним размером” понимают D(n,50) средний размер капли числом. D(n,50) средний размер капли является средним диаметром, где 50% капель состоят из капель больше контрольного значения, и 50% капель состоят из капель меньше контрольного значения. В соответствии с данным изобретением, измерение среднего размера капель проводят динамическим светорассеянием (ДСР). ДСР использует две общие характеристики коллоидов, эффект Тиндаля (рассеяние) и Броуновское движение, которое заставляет свет рассеиваться с разной интенсивностью. Анализ времени зависит от интенсивности колебаний с применением математических моделей, и позволяет определять средний размер (см. Hassan, P. et al, “Making sense of Brownian motion: colloid characterization by dynamic light scattering”, Langmuir, 2015, vol. 31, pp.3–12). Капли постоянно двигаются из–за Броуновского движения, и отношение между размером капель и их скоростью из–за Броуновского движения определяется уравнением Стокса–Эйнштейна. По мере движения капель рассеянный свет будет вызывать колебания интенсивности. Кроме того, интенсивность сигнала сравнивается в разное время с самой собой, чтобы получить корреляционную функцию. Эта информация затем может быть использована для расчета распределения размера по интенсивности, и она может быть преобразована в объем или распределение размера по числам.

В частности, диаметр капель (т.е. средний размер капель) определяют с применением Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments). В данном изобретении измерение среднего размера (D(n,50)) капель измеряется прямо (без разбавления) динамическим светорассеянием (ДСР) на Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments), проводя расчеты, описанные выше в данной заявке.

Наноэмульсионная композиция в соответствии с данным изобретением является наноэмульсией масло в воде. Термины “масло в воде” и “М/В” имеют одинаковое значение и их применяют взаимозаменяемо. Они относятся к наноэмульсии, в которой масло диспергировано в виде капель в водной фазе.

Термины “процент (%) массовый”, “% масса/массе” и “% масс./масс.” имеют одинаковое значение и их применяют взаимозаменяемо. Они относятся к массе каждого ингредиента композиции относительно общей массы композиции.

Термины “процент (%) объемный”, “% объем/объем” и “% об./об.” имеют одинаковое значение и их применяют взаимозаменяемо. Они относятся к объему каждого ингредиента композиции относительно общего объема композиции.

Термины “% (масс./об.)” и “концентрация по массе” имеют одинаковое значение и их применяют взаимозаменяемо. Они относятся к массе ингредиента, деленной на объем композиции.

Термин “массовое отношение” относится к массовому соотношению данного соединения к другому данному соединению, например, между масляным компонентом и клобетазолом.

Термин “объемное отношение” относится к объемному соотношению данного соединения к другому данному соединению, например, между ацетонитрилом и водой в сравнительных образцах буферированного раствора.

Термин “осмоляльность” относится к молям растворенного вещества, которые обеспечивают осмотическое давление раствора (или осмолям) на килограмм растворителя. Осмоляльность определяется измерением понижения точки замерзания образца с применением осмометра.

Термин “pH“ определен как значение, данное подходящим, должным образом стандартизированным, потенциометрическим сенсором и измерительной системой. Измерительная система традиционно обозначается как “pH метр”. pH наноэмульсий измеряют нормативными традиционными способами.

Как указано выше, первый аспект изобретения относится к наноэмульсии масло в воде, содержащей терапевтически эффективное количество клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира. Выражение "терапевтически эффективное количество" в данном описании относится к количеству клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира которое, при введении, является достаточным для предотвращения развития или облегчения до некоторой степени одного или более симптомов заболевания или состояния, которое рассматривается. Конкретная доза клобетазола, водимая в соответствии с данным изобретением, конечно, будет определена конкретными обстоятельствами случая, включая вводимый активный клобетазол, способ введения, конкретное лечимое состояние и подобные рассматриваемые факторы.

В одном варианте, клобетазол имеет форму фармацевтически приемлемой соли. Термин “фармацевтически приемлемая соль” в данном описании включает соль, полученную из фармацевтически приемлемых не токсичных кислот, включая неорганические и органические кислоты. Нет никаких ограничений в отношении солей, за исключением того, что если они используются в терапевтических целях, они должны быть фармацевтически приемлемыми. Соли клобетазола могут быть получены из фармацевтически приемлемых нетоксичных кислот, включая неорганические и органические кислоты. Такие кислоты включают, среди прочих, уксусную, бензолсульфоновую, бензойную, камфорсульфоновую, лимонную, этансульфоновую, фумаровую, глюконовую, глутаминовую, бромистоводородную, хлористоводородную, молочную, малеиновую, яблочную, миндальную, метансульфоновую, фосфорную, янтарную, серную, винную и п–толуолсульфоновую кислоту.

В одном варианте, клобетазол имеет форму фармацевтически приемлемого сложного эфира. Термин “фармацевтически приемлемый сложный эфир” в данном описании охватывает сложный эфир, полученный из фармацевтически приемлемых не токсичных кислот, включая неорганические и органические кислоты. Нет никаких ограничений в отношении сложного эфира, за исключением того, что если они используются в терапевтических целях, они должны быть фармацевтически приемлемыми. Сложные эфиры клобетазола могут быть получены из фармацевтически приемлемых нетоксичных кислот, в том числе неорганических и органических кислот. Такие кислоты включают, среди прочих, уксусную, масляную, пропионовую, бензолсульфоновую, бензойную, камфорсульфоновую, лимонную, этансульфоновую, фумаровую, глюконовую, глутаминовую, бромистоводородную, хлористоводородную, молочную, малеиновую, яблочную, миндальную, метансульфоновую, фосфорную, янтарную, серную, винную и п–толуолсульфоновую кислоту. В одном варианте, клобетазол находится в форме сложного эфира, выбранного из группы, состоящей из бутирата клобетазола и пропионата клобетазола; предпочтительно, пропионата клобетазола формулы (I).

В одном варианте, композицией в соответствии с данным изобретением является такая, где эффективное количество клобетазола составляет от 0,001% до 0,1% массовых, предпочтительно, составляет от 0,01% до 0,05% массовых; более предпочтительно, 0,05% массовых. В одном варианте, композицией является такая, которая содержит от 0,001% до 0,1% массовых пропионата клобетазола; предпочтительно, содержит от 0,01% до 0,05% массовых пропионата клобетазола.

Термин "масло" применяют здесь в общем смысле для идентификации широкого класса веществ, обычно жирного, вязкого и жидкого при комнатной температуре. Определенное здесь масло может быть животного, минерального, растительного или синтетического происхождения. Термин "масляный компонент" относится к маслу или сочетанию множества масел в коллоидной дисперсии. Термин “комнатная температуре” относится к температуре окружающей среды, без нагревания или охлаждения, и обычно составляет от 20°C до 25°C.

В одном варианте, масляным компонентом наноэмульсии в соответствии с данным изобретением является (C₄–C₂₀) алкиловый эфир моноглицерида, диглицерида или триглицерида и их смесь. В одном варианте, (C₄–C₂₀) алкиловый эфир моноглицерида, дигдицерида или триглицерида является триглицеридами со средней длиной цепи. Термин "триглицериды со средней длиной цепи" и “ТСЦ” имеют одинаковое значение и их применяют взаимозаменяемо, и относятся к триэфирам глицерина и (C₆–C₁₂) жирных кислот. Примеры ТСЦ включают капроновую кислоту (C₆), каприловую кислоту (C₈), каприновую кислоту (C₁₀) и лауриновую кислоту (C₁₂). Три остатка жирной кислоты ТСЦ могут быть одинаковыми или разными, предпочтительно, имеются два разных остатка жирной кислоты. В одном варианте, маслом является триглицерид со средней длиной цепи, выбранный из капроновой кислоты, каприловой кислоты, каприновой кислоты, лауриновой кислоты и их смеси; предпочтительно, маслом является триглицерид каприловой/каприновой кислоты. Наноэмульсионные композиции в соответствии с данным изобретением, которые содержат ТСЦ в качестве масляного компонента, особенно предпочтительны, так как растворимость клобетазола в ТСЦ очень высока, и применение ТСЦ позволяет снизить содержание масла в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением.

В альтернативном варианте, масляный компонент наноэмульсии в соответствии с данным изобретением отличный от сложных эфиров моноглицерида, диглицерида и триглицерида выбирают из группы, состоящей из этилолеата, децилолеата, изопропилмиристата, изопропилпальмитата, изопропилизостеарата, изостеарилизостеарата, глицерилмоностерата, миристиллактата, этилгексилгидроксистеарата, этилгексилпеларгоната, триэтилгексаноина, изогексадекана, легкого минерального масла, минерального масла, растительного масла, триизононаноина, (C₁₂–C₁₅) алкилбензоата и их смесей; предпочтительно, выбирают из группы, состоящей из этилолеата, изопропилмиристата, изопропилпальмитата, изопропилизостеарата, изостеарилизостеарата, децилолеата, касторового масла, арганового масла, триизононаноина, (C₁₂–C₁₅) алкилбензоата и их смесей.

Термин “алкил” относится к насыщенной, разветвленной или линейной алкильной цепи, которая содержит количество атомов углерода, указанное в описании или формуле изобретения.

Термин “растительное масло” относится к триглицериду, экстрагированному из растения. Примерами растительных масел являются аргановое масло, кукурузное масло, пальмовое масло, кокосовое масло, хлопковое масло, оливковое масло, арахисовое масло, рапсовое масло, подсолнечное масло, кунжутное масло, соевое масло, сафлоровое масло, касторовое масло, оливковое масло и их смеси.

В одном варианте, масляным компонентом является смесь (C₆–C₁₂) алкилового эфира моноглицерида, диглицерида или триглицерида и масло, отличное от сложных эфиров моноглицерида, диглицерида или триглицерида, как определено выше. В одном варианте, маслом является смесь ТСЦ и касторового масла.

Как указано выше, массовое отношение масляного компонента и клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира составляет от 1:1 до 200:1. В одном варианте, массовое отношение масляного компонента и клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира составляет от 1:1 до 100:1; предпочтительно, составляет от 1:1 до 90:1.

Термин “поверхностно–активное вещество” в данном описании относится к соединению, которое снижает поверхностное натяжение или межфазное натяжение между двумя жидкостями или между жидкостью и твердым веществом. Поверхностно–активные вещества имеют гидрофобную часть и гидрофильную часть. В зависимости от природы гидрофильной части поверхностно–активные вещества классифицируют как неионные (поверхностно–активные вещества с не заряженной, но полярной гидрофильной частью), анионные (когда гидрофильная часть содержит отрицательно заряженную группу), катионные (когда гидрофильная часть содержит положительно заряженную группу) или амфотерные (когда гидрофильная часть содержит обе катионные и анионные группы).

В одном варианте, одно или более поверхностно–активных веществ наноэмульсии в соответствии с данным изобретением являются неионные поверхностно–активные вещества. Примеры неионных поверхностно–активных веществ включают, но не ограничены ими, (C₃₀–C₄₀)алкилполи(этиленоксид), блоксополимеры поли(этиленоксида) и поли(пропиленоксида) (коммерчески названные Полоксамеры или Полоксамины), (C₈–C₁₄)алкилполиглюкозиды, включая октилглюкозид и децилмальтозид, жирные спирты, включая цетиловй спирт и олеиловый спирт, кокамид МЭА, кокамид ДЭА, сложные эфиры сорбитана и их производные или этоксилат сложных эфиров сорбитана и их производные.

В одном варианте, одним или более поверхностно–активным веществом наноэмульсии в соответствии с данным изобретением является неионное поверхностно–активное вещество, выбранное из группы, состоящей из полиоксила касторового масла с 30–40 оксиэтиленовыми единицами, в частности, полиоксила 35 касторового масла (также известного как полиэтиленгликоля 35 касторовое масло; продаваемое как Kolliphor® EL, Cremophor® EL), полиоксила гидрированного касторового масла с 40–60 оксиэтиленовыми единицами, в частности, полиоксила 40 гидрированного касторового масла (также известного как полиэтиленгликоль 40 гидрированное касторовое масло; продаваемое как Cremophor® RH40), полиоксиэтилена 20 сорбитанмоноолеата (также известного как полисорбат 80 и продаваемого как Tween® 80), полиоксиэтилена 20 сорбитанмоностеарата (также известного как полисорбат 60 и продаваемого как Tween® 60), полиоксиэтилена 20 сорбитантриолеата (также известного как полисорбат 85, продаваемого как Tween® 85), полиоксиэтилена 20 сорбитантристеарата (также известного как полисорбат 65, продаваемого как Tween® 65), полиоксиэтилена 20 сорбитанмонолаурата (также известного как полисорбат 20), полиоксиэтилена 20 сорбитанмонопальмитата (также известного как полисорбат 40), полиоксиэтилена 4 сорбитанмонолаурата (также известного как полисорбат 21 и продаваемого как Tween® 21), сорбитантриолеата (продаваемого как Span®85), сорбитантристеарата, сорбитансесквиолеата, сорбитанолеата (продаваемого как Span®80), сорбитанстеарата, сорбитанизостеарата, сорбитанпальмитата, сорбитанлаурата (продаваемого как Span®20), полиэтиленгликоля гексадецилового эфира (продаваемого как Brij® C10), глицерилстеарата (продаваемого как Cithrol® GMS40), глицерилмоноолеата, гликольстеарата, гликольдистеарата, D–α–токоферол полиэтиленгликоля 1000 сукцината (ТПГС), полиоксила стеарилового эфира с 2 оксиэтиленовыми единицами, полиоксила касторового масла с 2–20 оксиэтиленовыми единицами, цетостеарилового спирта, стеарилового спирта, олета–2, ноноксинола, октоксинола, октилфенола полиметилена, полиоксила 40 стеарата, сополимеров поли(этиленоксида)–поли(пропиленоксида) (в частности, полоксамера 188 и полоксамера 407) и их смесей.

В одном варианте, одним или более поверхностно–активным веществом наноэмульсии в соответствии с данным изобретением является неионное поверхностно–активное вещество, выбранное из группы, состоящей из полиоксила 35 касторового масла, полиоксила 40 гидрированного касторового масла, полиоксиэтилена 20 сорбитанмоноолеата, полиоксиэтилена 20 сорбитанмоностеарата, полиоксиэтилена 20 сорбитантриолеата, полиоксиэтилена 20 сорбитанмонолаурата, полиоксиэтилена 20 сорбитантристеарата, полиоксиэтилена 20 сорбитанмонопальмитата, полиэтиленгликоля гексадецилового эфира, глицерилстеарата, D–α–токоферол полиэтиленгликоля 1000 сукцината (ТПГС), полоксамера 188, полоксамера 407, полиоксила 40 стеарата, сорбитана монолаурата, октоксинола 40 и их смесей. В одном варианте, одним или более поверхностно–активным веществом наноэмульсии в соответствии с данным изобретением является неионное поверхностно–активное вещество, выбранное из группы, состоящей из полиоксиэтилена 20 сорбитанмоноолеата и полиоксила 35 касторового масла.

В одном варианте, одним или более поверхностно–активным веществом наноэмульсии в соответствии с данным изобретением является неионное поверхностно–активное вещество, выбранное из группы, состоящей из производных этоксилатов сорбитановых эфиров, производных сорбитановых эфиров, сополимеров поли(этиленоксида)–поли(пропиленоксида), полиоксила 35 касторового масла, полиоксила 40 гидрированного касторового масла, полиоксила 40 стеарата, октоксинола 40, D–α–токоферол полиэтиленгликоля 1000 сукцината (ТПГС) и их смесей.

Как указано выше, массовое отношение между поверхностно–активным веществом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 2:1 до 200:1. В одном варианте, массовое отношение между поверхностно–активным веществом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 2:1 до 190:1; предпочтительно, составляет от 2:1 до 180:1.

Как также указано выше, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением имеет массовое отношение между масляными компонентами и суммой масляных компонентов и одного или более поверхностно–активных веществ составляет от 0,001 до 0,5. В одном варианте, массовое отношение между масляными компонентами и суммой масляных компонентов и одного или более поверхностно–активных веществ составляет от 0,001 до 0,4; предпочтительно, от 0,005 до 0,4; более предпочтительно, составляет от 0,005 до 0,3.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением имеет осмоляльность, составляющую от 100 мОсм/кг до 500 мОсм/кг; предпочтительно, составляющую от 150 мОсм/кг до 400 мОсм/кг. В одном варианте, если наноэмульсия в соответствии с данным изобретением является офтальмологической композицией, то осмоляльность составляет от 120 мОсм/кг до 380 мОсм/кг. Это предпочтительно, так как эти композиции являются изотоническими и, следовательно, подходят для глазного введения.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением имеет средний размер капель, составляющий от 1 нм до 500 нм; предпочтительно, составляющий от 1 нм до 250 нм. В одном варианте, если наноэмульсия в соответствии с данным изобретением является офтальмологической композицией, то средний размер капель, измеренный динамическим светорассеянием, составляет от 1 нм до 250 нм. Это предпочтительно, так как наноэмульсионная композиция является прозрачной и позволяет избежать дискомфортного ощущения расплывчатого зрения.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением имеет pH, составляющий от 4,0 до 8,0; предпочтительно, составляющий от 4,5 до 7,4. В одном варианте, если наноэмульсия в соответствии с данным изобретением является офтальмологической композицией, то pH композиции составляет от 4,5 до 7,4 как и pH слезной жидкости.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением содержит количество этанола от 0% до 3% массовых; предпочтительно, количество этанола составляет от 0% до 2% массовых. Это предпочтительно, так как пониженное количество этанола позволяет снизить дискомфортное ощущение от применения офтальмологическим, назальным или буккальным способами введения.

Как указано выше, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением также содержит один или более фармацевтически приемлемых эксципиентов или носителей. Термины “приемлемые эксципиенты или носители” относятся к приемлемому материалу, композиции или носителю, который включает, без ограничений, pH корректоры, консерванты, антиоксиданты, хелатирующие агенты, стабилизаторы, загустители, адгезивные полимеры, усилители проникновения и регуляторы тоничности. Каждый компонент может быть приемлем с точки зрения совместимости с другими ингредиентами композиции. Они также должны подходить для применения в контакте с тканью или органом человека и животных, не вызывая избыточной токсичности, раздражения, аллергической реакции, иммуногенности или других проблем или осложнений соразмерно с разумным соотношением польза/риск.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением содержит один или более pH корректоров. Термин “pH корректор” относится к кислотам или основаниям или их смесям, которые могут применяться для корректировки pH законченного продукта до желаемого уровня, не влияя на стабильность эмульсии. В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением содержит pH корректор, выбранный из группы, состоящей из молочной кислоты и ее солей (таких как лактат натрия, лактат калия и лактат кальция), лимонной кислоты и ее солей (таких как цитрат натрия, цитрат калия, цитрат кальция, цитрат лития, цитрат тринатрия и гидроцитрат динатрия), винной кислоты и ее солей (таких как тартрат натрия, тартрат калия, тартрат кальция и тартрат лития), уксусной кислоты и ее солей (таких как ацетат натрия, ацетат калия и ацетат кальция), хлористоводородной кислоты, борной кислоты и ее солей (борат натрия), серной кислоты и ее солей (таких как сульфат натрия и сульфат калия), азотной кислоты, хлористоводородной кислоты, фосфорной кислоты и ее солей (таких как дигидрофосфат натрия, моногидрофосфат натрия, дигидрофосфат калия, фосфат лития, фосфат калия и фосфат кальция), карбоновой кислоты и ее солей (таких как карбонат натрия, гидрокарбонат натрия и гидрокарбонат калия), малеиновой кислоты и ее солей (малеат лития, малеат натрия, малеат калия и малеат кальция), янтарной кислоты и ее солей (сукцинат лития, сукцинат натрия, сукцинат калия и сукцинат кальция), гидроксида натрия, гидроксида калия, триэтаноламина, диизопропаноламина, аммиака, трис(гидроксиметил)аминометана, гидрохлорида трис(гидроксиметил)аминометана и их смесей. В одном варианте, pH корректор выбирают из группы, состоящей из трис(гидроксиметил)аминометана, гидрохлорида трис(гидроксиметил)аминометана, дигидрофосфата калия, гидрофосфата динатрия и их смесей.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением дополнительно содержит pH корректор, выбранный из группы, состоящей из уксусной кислоты, борной кислоты, сорбиновой кислоты, лимонной кислоты, фосфорной кислоты, фосфата натрия, двухосновного фосфата натрия, одноосновного фосфата натрия, дигидрофосфата калия и его солей, хлористоводородной кислоты, гидроксида натрия, тиосульфата натрия, сульфита натрия, сульфат натрия, трис(гидроксиметил)аминометана, гидрохлорида трис(гидроксиметил)аминометана, гидрокарбоната натрия, бората натрия, ацетата натрия, бисульфата натрия, бензоата натрия, цитрата натрия и их смесей.

В предпочтительном варианте, pH корректором является трис(гидроксиметил)аминометан и его соли. Количество pH корректора в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением составляет от 0,01% до 3% массовых.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением дополнительно содержит один или более стабилизаторов. Термин “стабилизатор” относится к соединению, который улучшает стабильность наноэмульсии и/или активного ингредиента. В одном варианте, стабилизатором является водорастворимый полимер, например, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, их соли и их смеси; предпочтительно, поливинилпирролидон. В одном варианте, стабилизатором является трис(гидроксиметил)аминометан и/или гидрохлорид трис(гидроксиметил)аминометана. Применение трис(гидроксиметил)аминометана и его солей особенно предпочтительно, так как позволяет снижать общее количество продуктов разложения, что означает, что стабильность активного ингредиента в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением выше, чем у эмульсий известного уровня техники. Количество стабилизатора в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением составляет от 0,01% до 15% массовых.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением содержит один или более биоадгезивных полимеров. Термин “биоадгезивные полимеры” относится к веществу, которое может повышать время удержания композиций в соответствии с данным изобретением. Примеры биоадгезивных полимеров, подходящих в соответствии с данным изобретением, включают поливинилпирролидоны, такие как Повидон K 17, Повидон K25, Повидон K 30 и Повидон K 90F; поливиниловый спирт; ксантановая камедь; гуаровая камедь; велановая камедь; геллановая камедь; трагакантовая камедь; камедь рожкового дерева; агар; метилцеллюлоза; этилцеллюлоза; гидроксиэтилцеллюлоза; гидроксиэтилметилцеллюлоза; гидроксипропилцеллюлоза; гидроксипропилметилцеллюлоза; фталат гидроксипропилметилцеллюлозы; сукцинат ацетата гидроксипропилметилцеллюлозы; карбоксиметилцеллюлоза натрия; карбоксиметилцеллюлоза кальция; полиэтиленгликоль; глицерин; каррагинан; альгиновая кислота; альгинат натрия; альгинат калия; альгинат пропиленгликоля; гиалуроновая кислота; гиалуронат натрия; производные поли(акриловой кислоты), такие как карбомер и поликарбол; полоксамеры; хитозан и производные хитозана; сополимеры винилметилового эфира/малеинового ангидрида; мальтодекстрин; и их смеси. В одном варианте, композиции в соответствии с данным изобретением содержат поливинилпирролидон в качестве биоадгезивного полимера. В одном варианте, биоадгезивный полимер присутствует в количестве от 0,01% до 15% массовых по отношению к общей массе композиций.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением дополнительно содержит один или более консервантов. Термин “консервант” относится к соединению, которое сохраняет от микробных и/или грибковых загрязнений. Примеры консервантов, подходящих в соответствии с данным изобретением, включают, но не ограничены ими, хлорид бензалкония, хлорид цеталкония, хлорид безетония, хлоргексидин, бензиловый спирт, хлорбутанол, 2–фенилэтанол, пропилпарабен, метилпарабен, ацетат фенилртути, борат фенилртути, дегидроацетат натрия, сорбиновая кислота, нитрат фенилртути, хлорид цетилпиридиния, бромид цетримония, бензилбромид, перборат натрия, тимеросал и их смесь. Количество консерванта в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением составляет от 0% до 1% массовых.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением дополнительно содержит один или более регулятор тоничности. Термин “регулятор тоничности” относится к соединению, которое применяют для корректировки осмоляльности наноэмульсии. В одном варианте, регулятор тоничности выбирают из группы, состоящей из хлорида натрия, хлорида калия, хлорида кальция, фосфата натрия, фосфата калия, гидрокарбоната натрия, карбоната кальция, лактата натрия, сорбита, маннита, ксилита, декстрозы, полиэтиленгликоля, пропиленгликоля, декстрана и их смесей; предпочтительно, глицерина. Количество регулятора тоничности в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением составляет от 0% до 15% массовых.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением дополнительно содержит один или более хелатирующий агент. Термин “хелатирующий агент” и “хелатор” имеют одинаковое значение и применяются взаимозаменяемо. Они относится к соединению, которое способно образовывать ионные комплексы. Примеры хелатирующих агентов включают лимонную кислоту, в частности, моногидрат лимонной кислоты, ЭДТК (этилендиаминтетрауксусную кислоту) и ее соли, такие как дикалий ЭДТК, динатрий ЭДТК, кальций динатрий ЭДТК, натрий ЭДТК и тринатрий ЭДТК, фумаровую кислоту, яблочную кислоту и мальтол. В одном варианте, хелатирующий агент выбирают из группы, состоящей из эдетата натрия, лимонной кислоты и их соли и смеси. Количество хелатирующего агента в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением составляет от 0% до 2% массовых.

Термин “усилитель проникновения” в данном описании относится к веществу, которое улучшает проникновение лекарственного средства. Примеры усилителей проникновения включают поверхностно–активные вещества, такие как сорбитан монолаурат, сорбитан монопальмитат, сорбитан триолеат, полиоксиэтилена 20 сорбитан монолаурат, полиоксиэтилена 20 сорбитан монопальмитат, полиоксиэтилена 5 сорбитан моноолеат, полиоксиэтилена 20 сорбитан триолеат, полиоксиэтилена 9 лауриловый эфир, полиоксиэтилена 23 лауриловый эфир, полиоксиэтилена 20 цетиловый эфир, полиоксиэтилена 20 олеиловый эфир, полиэтиленгликоль, октадециловый эфир, полиоксиэтилена 40 стеарат, полиоксиэтилена 50 стеарат, пальмитоил карнитин, капрат натрия, додецилсульфат натрия, желчные кислоты, такие как дезоксихолевая кислота, таурохолевая кислота, тауродезоксихолевая кислота, уродезоксихолевая кислота и тауроурсодехоксихолевая кислота, жирные кислоты, такие как каприновая кислота, каприловая кислота и олеиновая кислота, хлорид лауралкония, хлорид бензалкония, бромид цетримония, диглюконат хлоргексидина, бензиловый спирт, хлорбутанол, 2–фенилэтанол, парабен, пропилпарабен и метилпарабен, ЭДТК, 1–додецилазациклогептан–2–он (Азон), лаурамид гексаметилена, октанамид гексаметилена, децилметилсульфоксид, сапонин, циклодекстрины, pz–пептид, α–аминокислоту, хлорид цетилпиридиния, цитохалазины, ионофоры или их смеси. Количество усилителя проникновения в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением составляет от 0,01% до 10% массовых.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением содержит: от 0,001% до 0,1% массовых клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира; предпочтительно, пропионата клобетазола; от 0,001% до 20% массовых одного или более масляных компонентов; от 0,002% до 20% массовых одного или более поверхностно–активных веществ; воду в достаточном количестве для 100%; и, необязательно, pH корректор в достаточном количестве для получения pH от 4,0 до 8,0; и, необязательно, регулятор тоничности в достаточном количестве для получения осмоляльности от 100 мОсм/кг до 500 мОсм/кг.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением содержит: от 0,01% до 0,05% массовых клобетазола, его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира; пропионата клобетазола; от 0,01% до 10% массовых одного или более масляных компонентов; от 0,02% до 10% массовых одного или более поверхностно–активных веществ; воду в достаточном количестве для 100%; и, необязательно, pH корректор в достаточном количестве для получения pH от 4,0 до 8,0; и, необязательно, регулятор тоничности в достаточном количестве для получения осмоляльности от 100 мОсм/кг до 500 мОсм/кг.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением содержит: от 0,001% до 0,1% массовых клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира; предпочтительно, пропионата клобетазола; от 0,001% до 20% массовых триглицерида жирной кислоты со средней цепью; от 0,002% до 20% массовых полиоксиэтилена 20 сорбитан моноолеата; воду в достаточном количестве для 100 мл; необязательно, трис(гидроксиметил)аминометан в достаточном количестве для получения pH от 4,0 до 8,0; и, необязательно, глицерин в достаточном количестве для получения осмоляльности от 100 мОсм/кг до 500 мОсм/кг.

В одном варианте, наноэмульсия в соответствии с данным изобретением содержит: от 0,01% до 0,05% массовых клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира; предпочтительно, пропионата клобетазола; от 0,01% до 10% массовых триглицерида жирной кислоты со средней цепью; от 0,02% до 10% массовых полиоксиэтилена 20 сорбитан моноолеата; воду в достаточном количестве для 100 мл; необязательно, трис(гидроксиметил)аминометан в достаточном количестве для получения pH от 4,0 до 8,0; и, необязательно, глицерин в достаточном количестве для получения осмоляльности от 100 мОсм/кг до 500 мОсм/кг.

В одном варианте, наноэмульсионной композицией в соответствии с данным изобретением является офтальмологическая композиция, ушная композиция, назальная композиция или буккальная композиция. В одном варианте, наноэмульсионная композиция в соответствии с данным изобретением имеет форму глазных капель, ушных капель, капель в нос или перорального спрея.

В одном варианте, наноэмульсионная композиция является офтальмологической композиции, которая имеет форму глазных капель. Это предпочтительно, так как наноэмульсия в соответствии с данным изобретением является прозрачной и позволяет избежать дискомфортного ощущения после применения, такого как помутнение зрения и жжение. Если наноэмульсия является офтальмологической композицией, она должна быть стерильной. Термин “стерильная” относится к наноэмульсионной композиции, которая асептически обработана и лишена живых бактерий, грибов или других микроорганизмов. В одном варианте, наноэмульсионная композиция является стерильной офтальмологической композицией.

В одном варианте, наноэмульсионная композиция является многодозовой офтальмологической композицией, и композиция дополнительно содержит консервант, как определено выше. В одном варианте, наноэмульсионная композиция является однодозовой офтальмологической композицией. Это предпочтительно, так как эти наноэмульсии не требуют включения в композицию консервантов.

Второй аспект изобретения относится к способу получения наноэмульсии, такой как описана выше. Наноэмульсионные композиции в соответствии с данным изобретением могут быть получены способами, хорошо известными в данной области техники для получения наноэмульсии, в частности, наноэмульсии масло в воде. Подходящие эксципиенты и/или носители и их количества могут быть легко определены специалистом в данной области техники в соответствии с типом получаемого состава.

В одном варианте, способ получения наноэмульсий в соответствии с данным изобретением проводят изменением фаз композиции (ИФК). В одном варианте, способ получения наноэмульсионной композиции масло в воде, определенной выше, включает: (a) получение масляной фазы смешиванием клобетазола с масляными компонентами и поверхностно–активными веществами; (b) получение водной фазы; (c) эмульгирование масляной фазы, полученной на стадии (a), в водной фазе, полученной на стадии (b); (d) необязательно, корректировку pH; осмоляльности; pH и осмоляльности после стадии (a), стадии (b) или стадии (c); и (e) необязательно, добавление одного или более дополнительных фармацевтически приемлемых эксципиентов или носителей на стадии (a), стадии (b) или стадии (c).

В одном варианте, стадию (a) проводят смешиванием в подходящем контейнере до получения гомогенной смеси.

В одном варианте, стадию (b) проводят растворением или диспергированием компонентов водной фазы. В одном варианте, стадию (b) проводят в течение подходящего периода времени для получения гомогенной смеси.

В одном варианте, стадию (c) проводят эмульгированием масляной фазы с водной фазой, сохраняя непрерывное перемешивание при температурах от 10°C до 60°C. В одном варианте, стадию (c) проводят, когда температура масляной фазы, полученной на стадии (a), будет близка к температуре водной фазы, полученной на стадии (b). Выражение “температура масляной фазы близка к температуре водной фазы” означает, что значение температуры является “приблизительным” из–за температурной ошибки. Должно быть понятно, что “близка” соответствует данному температурному значению ± 10°C. Вариабельность значений возникает из–за присущей способу чувствительности.

Наноэмульсия в соответствии с данным изобретением может быть получена простым способом в умеренных условиях и без необходимости проведения гомогенизации под высоким давлением. Способы, связанные и высокоэнергетическими методами (например, высокое давление и ультразвук) могут отрицательно повлиять на срок годности активного ингредиента и стабильность конечной дозированной формы. Поэтому способ получения наноэмульсии в соответствии с данным изобретением является предпочтительным для стабильности активного ингредиента.

В одном варианте, если наноэмульсионная композиция является стерильной композицией, то способ, определенный выше, дополнительно содержит стадию стерилизации. В одном варианте, стерилизацию проводят после стадии (a); стадии (b); стадии (c); стадии (d) или стадии (e). В одном варианте, процесс стерилизации проводят после стадии (e). Стадия стерилизации может проводиться способами, хорошо известными в данной области техники. В одном варианте, стадия стерилизации проводится способом, выбранным из группы, состоящей из фильтрации, автоклавирования, нагревания, облучения и их сочетания; предпочтительно, стадия стерилизации проводится фильтрацией. В одном варианте, способ в соответствии с данным изобретением дополнительно включает стерилизацию фильтрацией. Из–за среднего размера капель и их гибкости, наноэмульсия может быть стерилизована фильтрацией, что предпочтительно из–за применения мягких условий и без необходимости высоких температур или применения методов облучения, которые могут отрицательно повлиять на стабильность активного ингредиента. Поэтому способ получения наноэмульсии в соответствии с данным изобретением, который включает стерилизацию фильтрацией, является предпочтительным для стабильности активного ингредиента и наноэмульсии.

Все варианты, описанные выше для наноэмульсионной композиции в соответствии с данным изобретением, также применимы к способу ее получения.

Наноэмульсионная композиция в соответствии с данным изобретением может быть определена способом ее получения, как определено выше, и поэтому наноэмульсионная композиция в соответствии с данным изобретением, получаемая способом в соответствии с данным изобретением, считается частью изобретения. Для целей данного изобретения выражение "получаемая", "полученная" и эквивалентные выражения применяют взаимозаменяемо, и в любом случае, выражение "получаемая" включает выражение "полученная".

Все варианты, описанные выше для наноэмульсионной композиции в соответствии с данным изобретением, а также для способа ее получения, также применимы к наноэмульсии, получаемой способом получения.

Третий аспект изобретения относится к наноэмульсионной композиции, такой как определена выше, для применения в качестве лекарственного средства.

Как указано выше, четвертый аспект изобретения относится к наноэмульсионной композиции, определенной выше, для применения для профилактики и/или лечения воспалительного заболевания или состояния. Этот аспект также может быть сформулирован как применение наноэмульсионной композиции, определенной выше, для получения лекарственного средства для профилактики и/или лечения воспалительного заболевания или состояния. Он также относится к способу профилактики и/или лечения млекопитающего, страдающего или подверженного воспалительному заболеванию или состоянию, где способ включает введение указанному млекопитающему наноэмульсионной композиции, определенной выше, которая содержит терапевтически эффективное количество клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми эксципиентами или носителями.

В одном варианте, воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, состоящей из офтальмологического воспалительного заболевания или состояния, ушного воспалительного заболевания или состояния, и ротоглоточного воспалительного заболевания или состояния.

В одном варианте, воспалительным заболеванием или состоянием является офтальмологическое заболевание или состояние. В одном варианте, офтальмологическое воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, состоящей из воспаления и боли, связанных с состоянием после офтальмологической операции; увеита, например переднего увеита (ирита и иридоциклита) или среднего увеита (циклита); токсического синдрома переднего сегмента глаза; глаукоматоциклического кризиса или гипертонического переднего увеита, например синдрома Познера–Шлоссмана; симпатической офтальмии, например двустороннего гранулематозного панувеита, вторичного по отношению к внутриглазной хирургии или проникающим ранам; аутоиммунного заболевания с поражением глаз, например синдрома Когана или синдрома Рейтера; аллергического конъюнктивита, например сезонного аллергического конъюнктивита, многолетнего аллергического конъюнктивита, весеннего кератоконъюнктивита и атопического кератоконъюнктивита; блефарита; интерстициального кератита; краевого кератита (катаральной язвы); бактериального, вирусного или грибкового конъюнктивита; и тяжелого сухого кератита.

В одном варианте, воспалительным заболеванием или состоянием является ушное воспалительное заболевание или состояние. В одном варианте, ушное воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, состоящей из внешнего отита, например, диффузного, локализованного или экзематозного отита; среднего отита, например, острого или хронического; атопического дерматита с вовлечением ушного канала.

В одном варианте, воспалительным заболеванием или состоянием является ротоглоточное воспалительное заболевание или состояние. В одном варианте, ротоглоточное воспалительное заболевание или состояние выбирают из группы, состоящей из фарингита; острого эпиглоттита; аллергического ларингита; не инфекционного острого ларингита; красного плоского лишая; язвенного стоматита и пемфигоида.

Все варианты, описанные выше для наноэмульсионной композиции в соответствии с данным изобретением, также применимы к наноэмульсионной композиции, ограниченной ее применением.

Во всем описании и формуле изобретения слово «содержит» и варианты этого слова не предназначены для исключения других технических характеристик, добавок, компонентов или стадий. Кроме того, слово «содержит» охватывает случай «состоящий из». Дополнительные объекты, преимущества и характеристики изобретения станут очевидными для специалистов в данной области техники после изучения описания, или могут быть изучены при практическом применении изобретения. Следующие примеры представлены в качестве иллюстрации, и они не предназначены для ограничения настоящего изобретения. Кроме того, настоящее изобретение охватывает все возможные комбинации конкретных и предпочтительных вариантов, описанных здесь.

Примеры

Наноэмульсии масло в воде

Композиции

A. Композиции в соответствии с данным изобретением

Примеры 1–22 иллюстрируют наноэмульсии в соответствии с данным изобретением, которые содержат пропионат клобетазола формулы (I).

Таблицы 1A–1C иллюстрируют количественную композицию наноэмульсии из примеров 1–22 в соответствии с объемом данного изобретения, где количество компонентов выражено в процентах (%) массовых каждого ингредиента в отношении общей массы композиции. Кроме того, осмоляльность наноэмульсий из примеров 1–22 составляет от 100 мОсм/кг до 500 мОсм/кг, средний размер частиц, измеренный динамическим светорассеянием, составляет от 1 нм до 500 нм и pH составляет от 4,0 до 8,0.

Таблица 1A

Пример	1	2	3	4	5	6	7
Пропионат клобетазола	0,010	0,101	0,050	0,050	0,051	0,050	0,050
Полисорбат 80	–	–	–	–	–	5,000	–
Cremophor® EL	2,053	5,040	2,000	5,000	5,008	–	5,010
Касторовое масло	2,017	0,501	–	–	–	–	1,008
Триглицериды со средней цепью	–	1,514	–	–	–	0,500	–
Триизононаноин	–	–	0,104	–	–	–	–
Изопропилизостеарат	–	–	–	0,411	–	–	–
Изопропилмиристат	–	–	–	–	0,516	–	–
Хлорид бензалкония	–	–	0,020	–	–	0,010	0,010
ЭДТК	–	–	0,103	–	–	0,100	0,100
Повидон	–	–	–	–	–	5,002	5,010
Гидроксид натрия 1N	–	0,338	–	–	–	0,312	–
Гидрохлорид трис(гидроксиметил) аминометана	0,839	–	–	0,860	–	–	0,661
Трис(гидроксиметил) аминометан	0,053	–	–	0,118	–	–	0,154
Дигидрат цитрата тринатрия	–	0,821	–	–	–	0,822	–
Сесквигидрат гидроцитрата динатрия	–	0,252	–	–	–	0,250	–
Глицерин	0,950	–	2,079	–	8,009	0,735	1,083
Вода	д.к* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%

“д.к.” означает достаточное количество

Таблица 1B

Пример	8	9	10	11	12	13	14
Пропионат клобетазола	0,027	0,053	0,049	0,050	0,049	0,050	0,050
Полисорбат80	4,507	5,035	5,034	5,002	4,942	–	–
Span® 85	0,507	–	–	–	–	–	–
Cremophor® EL	–	–	–	–	2,000	5,001	5,010
Касторовое масло	–	–	–	–	1,028	1,031	1,268
Триглицериды со средней цепью	0,505	0,503	0,509	0,502	0,548	–	1,270
Хлорид бензалкония	0,020	–	0,012	0,010	–	0,010	–
ЭДТК	–	–	0,100	0,100	–	–	0,052
Повидон	–	–	5,016	5,004	–	–	–
Гидроксид натрия 1N	4,901	–	–	–	–	–	5,131
Лимонная кислота	0,500	–	–	–	–	–	0,502
Гидрохлорид трис(гидроксиметил) аминометана	–	–	0,666	0,838	–	0,860	–
Трис(гидроксиметил) аминометан	–	–	0,147	0,053	–	0,116	–
Маннит	0,182	–	–	–	–	–	–
Хлорид натрия	0,545	–	–	–	–	–	0,607
Глицерин	–	–	0,648	0,884	–	1,109	–
Вода	д.к* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%

“д.к.” означает достаточное количество

Таблица 1С

Пример	15	16	17	18	19	20	21	22
Пропионат клобетазола	0,102	0,050	0,050	0,050	0,030	0,010	0,050	0,050
Полисорбат80	2,075	2,030	2,000	5,003	3,505	1,503	7,013	6,997
Span® 20	–	–	–	–	0,499	–	–	–
Cremophor® EL	5,035	5,027	8,050	–	–	–	–	–
Cremophor® RH40	–	–	–	–	–	0,502	–	–
Касторовое масло	1,279	2,509	4,002	–	–	0,262	–	–
Триглицериды со средней цепью	1,302	2,498	4,038	0,500	0,401	0,256	0,501	0,501
Хлорид бензалкония	–	–	–	0,011	0,010	0,010	0,020	0,050
ЭДТК	–	0,050	–	–	0,010	0,010	0,101	0,202
Повидон	5,001	–	–	–	2,005	2,003	2,010	2,005
Гидроксид натрия 1N	–	5,064	–	–	6,175	4,791	–	–
Лимонная кислота	–	0,500	–	–	0,501	0,402	–	–
Гидрохлорид трис(гидроксиметил) аминометана	–	–	–	0,861	–	–	0,666	0,836
Трис(гидроксиметил) аминометан	–	–	–	0,119	–	–	0,150	0,054
Маннит	–	0,203	–	–	0,202	0,501	–	–
Хлорид натрия	–	0,500	–	–	0,500	0,654	–	–
Глицерин	–	–	–	1,097	–	–	0,678	1,000
Вода	д.к* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%

“д.к.” означает достаточное количество

B. Сравнительные композиции

Примеры 23–33 иллюстрируют композиция, не попадающие в объем данного изобретения, которые содержат пропионат клобетазола формулы (I).

Таблицы 1D–1E иллюстрируют количественную композицию сравнительных композиций из примеров 23–33, где количество компонентов выражено в процентах (%) массовых каждого ингредиента в отношении общей массы композиции.

В частности, сравнительные композиции 24, 25, 26 и 29 не попадают в объем данного изобретения из–за того, что массовое отношение между масляными компонентами и суммой масляных компонентов и поверхностно–активного вещества, составляющее 0,7, превышает предложенный предел 0,5. Более того, процент масел и поверхностно–активных веществ выше, чем соответствующий наноэмульсиям в соответствии с данным изобретением. Сравнительные композиции 30 и 31 являются наноэмульсиями, имеющими массовые отношения между поверхностно–активным веществом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром выше 200:1. Сравнительные композиции 23 и 27 не попадают в объем данного изобретения, так как не являются наноэмульсиями. Композиции 23 и 27 являются мицеллярными растворами без положительной активности масляных компонентов, и композиция 23 к тому же содержит высокий процент спирта, как описано в известном уровне составов клобетазола. Композиция 28 является суспензия, таким образом пропионат клобетазола не растворен должным образом. Композиции 32 и 33 являются плацебо для фармакологических исследований.

Таблица 1D

Пример	23	24	25	26	27
Пропионат клобетазола	0,522	0,050	0,036	0,029	0,050
Полисорбат21	–	20,997	15,000	12,351	–
D–α–токоферил полиэтиленгликоль сукцинат (ТПГС)					5,000
Изопропилмиристат	–	48,963	35,000	28,802	–
Этанол	9,533	–	–	–	–
Привитой сополимер на основе полиэтиленгликоля, поливинилацетата и поливинилкапролактама (ПВАц–ПВКап–ПЭГ)	4,510	–	–	–	–
Гелламовая камедь	–	–	–	–	0,350
Глицерин	–	–	–	–	2,100
Вода	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%

“д.к.” означает достаточное количество

Таблица 1E

Пример	28	29	30	31	32	33
Пропионат клобетазола	0,100	0,052	0,050	0,050	–	–
Полисорбат80	–	–	7,512	–	5,000	5,008
Полисорбат21	–	12,756	29,988	40,022	–	–
Cremophor® RH40	–	–	–	–	–	–
Минеральное масло	–	–	12,501	–	–	–
Изопропилмиристат	–	29,045	–	–	–	–
Изопропилпальмитат	–	–	–	10,024	–	–
Триглицериды со средней цепью	–				0,504	0,522
Вазелин	д.к. *100%	–	–	–	–	–
Хлорид бензалкония	–	–	–	–	0,010	0,010
ЭДТК	–	–	–	–	0,100	0,100
Повидон	–	–	–	–	5,000	5,009
Гидрохлорид трис(гидроксиметил) аминометана	–	–	–	–	0,839	0,661
Трис(гидроксиметил) аминометан	–	–	–	–	0,052	0,148
Глицерин	–	–	–	–	0,958	1,062
Вода	–	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%	д.к.* 100%

“д.к.” означает достаточное количество

C. Сравнительные буферные растворы

Сравнительные буферные растворы иллюстрируют композиции, не попадающие в объем данного изобретения, которые содержат пропионат клобетазола формулы (I). Эти сравнительные буферные растворы применяют для тестирования стабильности (см. раздел 1.3.)

Таблица 2 иллюстрирует количественную композицию сравнительных буферных растворов при pH 6,0, pH 6,8 и pH 7,4, где количество компонентов выражено в граммах относительно конечного объема раствора.

Таблица 2

Сравнительные буферированные растворы	pH
Компоненты	единицы	pH 6,0	pH 6,8	pH 7,4
Пропионат клобетазола	г	0,05	0,05	0,05
Моногидрат дигидрофосфата натрия	г	1,30	0,98	0,53
Дигидрат гидрофосфата динатрия	г	0,11	0,51	1,10
Ацетонитрил/вода (объемное отношение 1:1)	мл	д.к* 100	д.к* 100	д.к* 100

“д.к.” означает достаточное количество

1.2. Способ получения

A. Композиции в соответствии с данным изобретением

Композиции из примеров 1–22 данного изобретения получают способом, описанным ниже:

Стадия 1 (масляная фаза): в подходящем реакторе смешивают пропионат клобетазола, масла и поверхностно–активные вещества для получения гомогенной смеси.

Стадия 2 (водная фаза): В отдельный реактор помещают воду.

Стадия 3: Водную фазу постепенно добавляют в масляную фазу при перемешивании до получения наноэмульсии. Температуру водной и масляной фаз поддерживают постоянной около 25°C.

Стадия 4: Другие эксципиенты или носители добавляют в водную фазу, масляную фазу или наноэмульсию, в зависимости от их растворимости.

B. Сравнительные композиции

Сравнительную композицию из примера 23 в соответствии с данным изобретением получают способом, описанным ниже:

Стадия 1. В подходящем реакторе клобетазол и этанол перемешивают до полного растворения.

Стадия 2. В подходящем контейнере ПВАц–ПВКап–ПЭГ растворяют в воде.

Стадия 3. Раствор клобетазола добавляют постепенно в полимерный раствор при непрерывном перемешивании до получения гомогенной композиции.

Сравнительные композиции примеров 24–26 и 29–33 в соответствии с данным изобретением получают способом, описанным здесь:

Стадия 1 (масляная фаза): В подходящем реакторе смешивают пропионат клобетазола, масла и поверхностно–активные вещества для получения гомогенной фазы.

Стадия 2 (водная фаза): Эксципиенты, не включенные в масляную фазу, растворяют в воде.

Стадия 3: Водную фазу добавляют постепенно в масляную фазу при перемешивании до получения наноэмульсии.

Сравнительную композицию из примера 27 в соответствии с данным изобретением получают способом, описанным ниже:

Стадия 1. В подходящем реакторе клобетазол и D–α–токоферол полиэтиленгликоля 1000 сукцинат (ТПГС) перемешивают до получения гомогенной смеси.

Стадия 2. В подходящем контейнере геллановую камедь растворяют в воде.

Стадия 3. Водный раствор добавляют постепенно к смеси поверхностно–активного вещества и клобетазола при непрерывном перемешивании до получения гомогенной композиции.

Стадия 4. Добавляют глицерин, и состав перемешивают до гомогенности.

Сравнительную композицию из примера 28 в соответствии с данным изобретением получают способом, описанным здесь:

Стадия 1. В подходящем реакторе клобетазол и вазелин смешивают до получения гомогенной смеси.

C. Сравнительные буферные растворы

Сравнительные буферные растворы получают описанным способом :

Моногидрат дигидрофосфата натрия и дигидрат гидрофосфата динатрия растворяют в ацетонитриле/воде (объемное соотношение 1:1) и сразу же в полученной среде растворяют пропионат клобетазола.

1.3. Тестирование стабильности

Химическую стабильность пропионата клобетазола в наноэмульсионных композициях сравнивают с буферированными растворами при тех же pH для оценки защитного эффекта наноэмульсии.

A. Образцы

Тестируемые образцы: наноэмульсионную композицию в соответствии с данным изобретением из примера 11 доводят до pH 6,0, 6,8 и 7,4.

Образцы сравнительного буферного раствора описаны в разделе 1.2.

B. Способ

Образцы, упомянутые в разделе A, анализируют по отдельности, следуя аналитическому способу для органических примесей, описанному в USP <18334> монографии Пропионат клобетазола, доступной на интернет–портале фармакопеи http://www.pharmacopeia.cn/v29240/usp29nf24s0_m18334.html#usp29nf24s0_m18334 в июле 2017).

Применяемая система хроматографии состоит из Agilent 1290 высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым определением при 240 нм. Колонку Kromasil C₁₈ (150×4,6 мм, 5 мкм) применяют для отделения примесей.

Образцы готовят разведением приблизительно 1 г каждой композиции водой/ацетонитрилом (1:1) объем:объему до конечного объема 5 мл.

C. Условия

Образцы выдерживают при 70°C в течение 24 часов при pH 6,0, 6,8 и 7,4, соответственно. После этого образцы анализируют.

D. Результаты

В таблице 3 показан процент общего количества продуктов разложения и каждого отдельного продукта разложения после выдерживания образцов в условиях, указанных в разделе B. В частности, количество любого отдельного продукта разложения, а также общее количество продуктов разложения, выраженное в массовых процентах (%) показано в таблице ниже.

Таблица 3

Продукты разложения (%)	pH	тестируемый образец: наноэмульсия из примера 11 доведенная до разных pH	Сравнительные буферные растворы из раздела 1.1.C
Любой отдельный продукт разложения	6,0	0,29	1,0
	6,8	0,26	3,2
7,4	0,34	15,8
Общее количество продуктов разложения	6,0	0,49	3,4
	6,8	0,47	6,8
7,4	1,0	53,5

Как показано в результатах из таблицы 3, пропионат клобетазола, присутствующий в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением, намного более стабилен при всех тестированных pH по сравнению с пропионатом клобетазола, содержащемся в сравнительном буферированном растворе.

В частности, при pH 6,0 обнаружено в 7 раз больше продуктов разложения в сравнительном растворе, чем в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением. Кроме того, при pH 6,8 обнаружено в 14 раз больше продуктов разложения в сравнительном растворе, и при pH 7,4 обнаружено в 53 раза больше продуктов разложения, чем в наноэмульсии в соответствии с данным изобретением.

Поэтому наноэмульсионные композиции в соответствии с данным изобретением улучшают стабильность пропионата клобетазола по сравнению с растворами, более того, композиции в соответствии с данным изобретением также соответствуют строгим нормативным требованиям, изложенным в спецификации ICH Harmonised Tripartite Guideline Impurities в New Drug Products Q3B(R2).

1.4. Тестирование эффективности выделения лекарственного средства in vitro

Целью тестирования эффективности для местных композиций является измерение выделения лекарственного средства из дозированной формы. Система вертикальной диффузионной ячейки (ВДЯ или диффузионной ячейки Франца) является простым, надежным и воспроизводимым средством измерения выделения лекарственного средства из коллоидных дозированных форм.

Выделение лекарственного средства может быть описано математическими моделями на основе диффузионных уравнений, таких как модель, опубликованная Хигучи, которую часто применяют. Эта модель описывает выделение лекарственного средства как функцию квадратного корня времени (наклон мкг/ч^1/2) при поддерживании условий достаточного разбавления. Наклон может считаться как скорость выделения активного ингредиента из тестируемой композиции.

A. Образцы

Тестируемые образцы: Наноэмульсионные композиции в соответствии с данным изобретением из примеров 7, 11 и 22.

Сравнительные примеры: Сравнительные композиции из примеров 26, 28 и 29.

B. Способ

Диффузная связь между системой доставки и резервуаром происходит через инертную мембрану с высокопроницаемой подложкой (полисульфановая мембрана Tuffryn 0,45 мкм). Мембрана удерживает продукт и среду рецептора раздельно и на расстоянии. Мембрану выбирают так, чтобы обеспечить минимально возможное диффузионное сопротивление и не осуществлять контроль скорости.

C. Условия

Эксперимент со скоростью выделения проводят при 32°C±1°C. Для достижения условий достаточного разбавления, средой для рецептора является 5% водный раствор ТПГС. Тестируемые и сравнительные образцы помещают на мембрану, расположенную в отверстии диффузионной ячейки Франца диаметром 15 мм. Отбор образцов проводят в течение 4 ч, и изъятый объем заменяют свежей рецепторной средой. Количество пропионата клобетазола в акцепторе определяют для каждой выделенной ячейки в каждый момент отбора следуя аналитическому методу для органических примесей, описанному в монографии USP Пропионат клобетазола, доступной на интернет–портале фармакопеи http://www.pharmacopeia.cn/v29240/usp29nf24s0_m18334.html#usp29nf24s0_m18334 в июне 2017).

Среднее суммарное выделенное количество (мкг) рассчитывают для различных тестируемых составов, и устанавливают линейную функцию с применением квадратного корня времени как независимой переменной. Наклон является основным фактором для оценки скорости выделения лекарственного средства из различных композиций.

D. Результаты

Выделение пропионата клобетазола из композиций в соответствии с данным изобретением, а также из сравнительных композиций, описанных в данном изобретении, показало хорошую адаптацию к линейной математической диффузионной модели. Это продемонстрировано для значения коэффициента (R²), который близок к 1, как изображено в таблице 4 ниже.

В таблице 4 показано значение наклона в мкг/ч^1/2 и значение коэффициента R².

Таблица 4

Пример	Наклон (мкг/ч1/2)	Коэффициент R2
Пример 7	38,3	0,9973
Пример 11	42,1	0,9945
Сравнительный пример 28	0,7	0,9924
Сравнительный пример 29	6,5	0,9977
Пример 22	29,1	0,9916
Сравнительный пример 26	4,8	0,9973

Однако, только композиции в соответствии с данным изобретением показывают быструю доставку активного ингредиента, в то время как сравнительные композиции показывают неполную и низкую доставку клобетазола из композиции. Высокие значения наклона подтверждают быструю доставку клобетазола в композициях в соответствии с данным изобретением (см. примеры 7, 11 и 22), в то время как сравнительные композиции (примеры 26, 28 и 29) показывают низкий наклон, который коррелирует с низкой и неполной доставкой.

В частности, активный ингредиент, содержащийся в наноэмульсиях в соответствии с данным изобретением, выделяется в рецепторную среду в большем количестве и с большей скоростью по сравнению со сравнительными образцами. Однако эффективность сравнительных композиций снижена, так как клобетазол имеет ограниченный доступ к целевым биологическим тканям, в то время как наноэмульсии позволяют правильное выделение активного ингредиента. Это поведение особенно подходит для офтальмологического, назального или буккального введений, где ограниченное время пребывания является проблемой и активный ингредиент должен быть доставлен быстро и эффективно.

Исследование фармакологической эффективности

A. Переносимость

A.1. Переносимость in vitro

A.1.1. Исследование переносимости клетками роговицы in vitro (метод STE)

Образцы

Тестируемые образцы: Наноэмульсии из примеров 2, 4, 8, 11, 14, 16, 19 и 20.

Сравнительные образцы: Наноэмульсии из сравнительных примеров 24, 25, 26, 30 и 31.

Материал и способ

Способ тестирования STE (OECD TG 491) является in vitro способом, в котором оценивают потенциал повреждения глаза тестируемым химикатом (веществами и смесями) на основе их способности вызывать цитотоксичность. Целью этого эксперимента является характеризация цитотоксического эффекта пропионата клобетазола в офтальмологических наноэмульсиях.

Клетки SIRC (Statens Serum Institut Rabbit Cornea) высевают в стерильные 96–луночные титровальные микропланшеты и выдерживают в культуре до конфлюэнтности. Тестируемые составы разводят в физиологическом растворе (ФРФБ) в определенной концентрации, и культуральную среду заменяют на наноэмульсии клобетазола в течение 5 минут. После этого жизнеспособность клеток определяют анализом MTT. Смертность клеток выражают как процент и рассчитывают для каждой тестируемой концентрации по отношению к контрольному физиологическому раствору.

Результаты

Тестируемые наноэмульсии в соответствии с данным изобретением не показали цитотоксичность в тестируемых концентрациях и поэтому они классифицированы как минимально раздражающие согласно оценке STE, что означает отсутствие потенциального повреждения глаз. Однако инкубирование композиций сравнительных примеров, указанных выше, показало цитотоксическое действие.

Поэтому наноэмульсии в соответствии с данным изобретением не представляют потенциальную опасность для глаз и должны считаться хорошо переносимыми на глазном уровне, в то время как сравнительные композиции будут раздражать и не подходят для офтальмологического пути введения.

A.1.2. Исследование переносимости клетками внутреннего уха in vitro

Образцы

Тестируемые образцы: Наноэмульсии из примеров 2, 4, 8, 11, 14, 16 и 20.

Сравнительные образцы: Наноэмульсии из сравнительных примеров 24, 30 и 31.

Материал и способ

Колония клеток HEI–OC1 (House Ear Institute–Organ of Corti–1) является одной из наиболее применяемых колоний ушных клеток, доступных для исследовательских целей. Клетки HEI–OC1 экспрессируют несколько характеристических молекулярных маркеров органа волосковых сенсорных клеток (см. Kalinec GM, et al., “A cochlear cell line as an in vitro system for drug ototoxicity screening”. Audiol. Neurootol. 2003; vol. 8, pp. 177–89).

Целью этого исследования является тестирование ототоксического потенциала наноэмульсий пропионата клобетазола для ушного введения.

Клетки HEI–OC1 помещают в стерильные 96–луночные титровальные микропланшеты и через 24 часа обрабатывают наноэмульсиями клобетазола, разведенными в физиологическом растворе (ФРФБ) в дозе 5% и 0,05% в течение 5 минут. После этого жизнеспособность клеток определяют анализом MTT. Смертность клеток выражают как процент и рассчитывают для каждой тестируемой концентрации по отношению к контрольному физиологическому раствору.

Результаты

Для протестированных наноэмульсий в соответствии с данным изобретением цитотоксичность не наблюдалась. Однако инкубирование сравнительных композиций показала высокую смертность клеток при концентрации 5%.

Поэтому наноэмульсии в соответствии с данным изобретением показывают низкий потенциал раздражения уха, в то время как сравнительные составы не подходят для ушного введения.

A.2. Исследование глазной переносимости in vivo

Образцы

Тестируемый образец: Наноэмульсия из примера 11 в соответствии с данным изобретением.

Сравнительный образец: Сравнительная композиция из примера 27.

Контрольные образцы: носитель из примера 32.

Материал и способ

– Целью этого исследования является оценка потенциала повреждения глаза различных составов пропионата клобетазола.

– Для теста применяют самцов новозеландских кроликов.

– Применяемый протокол основан на TG405: OCDE Guideline for testing of chemicals: Acute Eye Irritation/Corrosion (2012).

– Кроликов делят на разные группы, включающие контрольную группу и тестируемую группу. Обработка включает введение в оба глаза каждого животного 7 раз в сутки контрольного образца, тестируемого образца и сравнительного образца, как определено выше. Поэтому каждый образец помещают в субконъюнктивальный мешок после осторожного оттягивания нижнего века от глазного яблока. После нанесения веки закрывают и осторожно держат вместе для предотвращения потери материала. Конъюнктиву, роговицу, веки и радужную оболочку исследуют с применением щелевой лампы согласно ранжированию глазных повреждений из TG405: OCDE Guideline for testing of chemicals: Acute Eye Irritation/Corrosion (2012) каждый день до введения и через 30 минут после последнего введения. Контрольных не обработанных животных используют как референс.

Результаты

Никаких глазных аномалий (непрозрачность, краснота или опухание) не наблюдалось в роговице, веках, радужной оболочке или конъюнктиве глаз животных после введения наноэмульсии в соответствии с данным изобретением. Поэтому наноэмульсии в соответствии с данным изобретением должны считаться не раздражающими на глазном уровне. Однако результаты, полученные для сравнительного образца, как указано выше, показали, что они являются раздражающими и не подходят для офтальмологического введения.

B. Исследование действия на внутриглазное давление (ВГД)

Образцы

Тестируемые образцы: Наноэмульсии из примеров 7 и 10.

Контрольные образцы:

Положительный контроль: дексаметазон 0,1%.

Отрицательный контроль: 0,9% физиологический раствор хлорида натрия

Материал и способ

– Применяемыми лабораторными животными являются нормотензивные новозеландские кролики–альбиносы. Кроликов адаптируют к периодам свет/темнота (12/12 часов), что необходимо для достижения и сохранения стабильного суточного цикла внутриглазного давления (ВГД).

– Кроликов распределяют на разные группы: группа положительного контроля (образец положительного контроля), группа отрицательного контроля (образец отрицательного контроля) и две тестируемые группы (два тестируемых образца).

– Обработка включает инъекцию дексаметазона в переднюю камеру глаза, вместе с тем остальным группам; каждому животному местно вливают в каждый глаз контрольный образец или тестируемую композицию 4 раза в сутки в течение 15 дней.

– Измерение ВГД в группах проводят дважды в сутки. После закапывания каждому животному наблюдают возможность побочных эффектов соответствующего соединения на поверхности глаза.

Результаты

Тестирование наноэмульсий в соответствии с данным изобретением (примеры 7 и 10) не показало значительных изменений во внутриглазном давлении во время интервального 15–дневного теста. В частности, после введения наноэмульсии из примера 7 не наблюдалось никакого статистически значимого повышения внутриглазного давления. В то же время, никаких изменений не наблюдалось при введении наноэмульсии из примера 10.

С другой стороны, животные, обработанные внутрикамеральным введением дексаметазона (группа положительного контроля) показали статистически значимое повышение уровней внутриглазного давления.

Кроме того, никаких отрицательных воздействий на поверхность глаза, показывающих небольшие изменения или наблюдения, достойные упоминания, не наблюдалось ни в одном из офтальмологических исследований для тестируемых образцов.

Поэтому наноэмульсии в соответствии с данным изобретением должны считаться безопасными во время лечения (то есть во время периода закапывания 15 дней). Сравнительные примеры не подходили для тестирования на животной модели из–за отрицательных результатов, полученных при тестировании переносимости in vitro.

C. Исследование противовоспалительной эффективности

C.1. Исследование противовоспалительной эффективности in vitro

Образец

тестируемые образцы: Наноэмульсии из примеров 2, 6, 7, 10, 11, 16, 21 и 22.

Материал и способ

Колония клеток THP–1 представляет собой колонию человеческих моноцитов, способных к неограниченной пролиферации, полученную у пациента с острым моноцитарным лейкозом. Клетки THP–1 помещают в планшет, воспаление вызывают LPS и IFNγ, и клетки инкубируют в течение 24 часов. После этого клетки обрабатывают тестируемыми образцами. Тестируемые составы разводят культуральной средой и культивируют в течение еще 24 часов. Концентрацию белка измеряют ELISA, с применением BDOptEIA Human TNFα Elisa Set согласно (BD 555212). Процент ингибирования уровней цитокина рассчитывают в отношении стимулированной группы, для которой был установлен уровень экспрессии 100%.

Результаты

Наноэмульсионные композиции в соответствии с данным изобретением показали противовоспалительное действие, снижающее экспрессию белка TNFα, с процентом ингибирования близким к 100%. Эти результаты подтверждают выделение активного ингредиента в культуральную среду и правильное противовоспалительное действие.

C.2. Исследование противовоспалительной эффективности in vivo

C.2.1.i) Кроличья модель послеоперационного воспаления (парацентез)

Образцы

Тестируемые образцы: Примеры 10 и 18

Сравнительный пример: Пример 23

Контрольные образцы:

Отрицательный контроль 1: физиологический раствор

Отрицательный контроль 2: носитель из примера 33

Материал и способ

Тестирование противовоспалительной эффективности проводят на кроличьей острой модели послеоперационного воспаления, созданного парацентезом передней камеры.

Животных, подвергнутых парацентезу, делят на разные группы: группа отрицательного контроля (образцы отрицательного контроля), сравнительная тестируемая группа (сравнительный образец) и две тестируемые группы (тестируемые образцы). Парацентез передней камеры проводят иглой, присоединенной к шприцу, и берут образец внутриглазной жидкости. Через 2 часа от первого парацентеза проводят второй парацентез для сбора внутриглазной жидкости для биохимической оценки. Уровни простагландина E2 (PGE2) во внутриглазной жидкости оценивают ELISA (R&D Systems SKGE004B).

Результаты

Целью этого исследования является оценка противовоспалительной эффективности пропионата клобетазола из наноэмульсии в соответствии с данным изобретением.

Наноэмульсии в соответствии с данным изобретением значительно снижают концентрацию PGE₂ во внутриглазной жидкости по сравнению с контролем. Однако введение сравнительной композиции не показывает никакого действия на биомаркер PGE₂, демонстрируя полное отсутствие эффективности.

Поэтому наноэмульсия в соответствии с данным изобретением должна считаться эффективной для лечения глазных воспалительных болезней или состояний.

3. Сравнительные примеры

Сравнительные композиции 34 и 35, описанные ниже, являются воспроизведением эмульсий пропионата клобетазола, описанных у Mohammad Sajid Ali et al (см. “mohammad Sajid Ali et al. “accelerated Stability Testing of a Clobetasol propionate Loaded nanoemulsion as per ICH guideline”. Scientia Pharmaceutica, 2013, vol. 81, no.4, pp. 1089–1100).

3.1. Сравнительные композиции

В таблице 5 показана количественная композиция сравнительных композиций из примеров 34 и 35, где количество пропионата клобетазолаа выражено в массовой концентрации относительно общего объема композиции (масс./об.); в то же время количество оставшихся ингредиентов композиции выражено в процентах (%) объемных относительно общего объема композиции (об./об.).

Таблица 5

Сравнительный пример	Сравн. пр. 34	Сравн. пр. 35
Пропионат клобетазола	0,05% (масс./об.)	0,05% (масс./об.)
Эвкалиптовое масло	15% (об./об.)	15% (об./об.)
Tween 20:этиловый спирт (1:1)	35% (об./об.)	–
Tween 20:этиловый спирт (1:2)	–	35% (об./об.)
Вода	д.к.* 100,0% (об./об.)	д.к.* 100,0% (об./об.)

“д.к.” означает достаточное количество

3.2. Способ получения

3.2.1. Сравнительный пример 34

Сравнительный пример клобетазола 34, имеющий отношение Smix 1:1 между tween 20 и этиловым спиртом, получают способом, описанным у Mohamed Sajid Ali на странице 1092, раздел “preparation of clobetasol propionate nanoemulsion”. Этот раздел включен сюда ниже:

“[…] Оптимизированную наноэмульсию готовят растворением 0,05% (масс./об.) пропионата клобетазола (ПК) в 15% (об./об.) эвкалиптового масла, затем 35% (об./об.) смесь Tween 20 и этилового спирта (1:1 об./об.) медленно добавляют к масляной фазе. Затем оставшееся количество дистиллированной воды медленно добавляют с получением конечного препарата 100% (об./об.). Вихревую мешалку применяют для энергичного встряхивания смеси (масло, Smix и вода) […]”

3.2.2. Сравнительный пример 35

Сравнительный пример клобетазола 35, имеющий отношение Smix 1:2 между tween 20 и этиловым спиртом (см. страницу 1092, строку 16) готовят способом, описанным у Mohamed Sajid на странице 1092, раздел “preparation of clobetasol propionate nanoemulsion”, описанный выше, но заменяя соотношение tween 20 и этилового спирта с 1:1 на 1:2.

3.3. Внешний вид и измерение среднего размера капель

3.3.1. Оценка невооруженным глазом

После осмотра сравнительных примеров 34 и 35 (сразу после их получения) невооруженным глазом был сделан вывод, что эти композиции являются матовыми (не прозрачными) жидкими композициями, имеющими низкую вязкость.

3.3.2. Измерение среднего размера капель динамическим светорассеянием (ДСР)

Средний размер капель сравнительного примера 34 и 35 анализируют динамическим светорассеянием (ДСР). Оборудование определило высокую полидисперсность образца, подтверждающую значения среднего размера капель выше 6000 нм.

3.3.3. Вывод

Отсутствие прозрачности в сравнительных примерах 34 и 35 указывает на то, что размеры капель сравнительных композиций 34 и 35, описанных у Mohammad Sajid Ali et al, были намного больше, чем в наноэмульсии (полупрозрачной). Более того, так как размер капель, измеренный ДСР, показал высокую дисперсность и значения размера капель больше 6000 нм, это означает, что размер капель сравнительных композиций не соответствует интервалу размера капель наноэмульсии (1–500 нм).

Поэтому из всего описанного выше понятно, что размер капель в сравнительных примерах 34 и 35 был выше 6000 нм (что является высокой точкой обнаружения ДСР), находясь вне заявленного интервала, и что они должны считаться эмульсиями, а не наноэмульсиями.

3.4. Тестирование стабильности

Сравнительные композиции 34 и 35 были дестабилизированы и превратились в три дифференцированных фазы вместо того, чтобы оставаться гомогенными и однородными по внешнему виду. Исследования проводят при 25±2°C/60±5% относительной влажности (ОВ), и изменения наблюдают меньше чем за 1 неделю хранения.

Поэтому сравнительные композиции 34 и 35 не обладают коллоидной стабильностью.

3.5. Тестирование осмоляльности

3.5.1. Образцы

Тестируемый образец: сравнительные композиции 34 и 35

3.5.2. Материал и способ

Осмоляльность определяют измерением понижением температуры замерзания образца с применением осмометра.

3.5.3. Результаты

Осмоляльность сравнительных композиций 34 и 35 была выше, чем заявленный интервал данного изобретения (т.е. 100 мОсм/кг –500 мОсм/кг). В частности, обе сравнительные композиции имеют осмоляльность выше, чем 2500 мОсм/кг. Особенно примечательно, что сравнительная композиция 34 имеет осмоляльность 2716 мОсм/кг. (общая статья USP <771> Офтальмологические продукты, см. осмоляльность и осмолярность <785>: офтальмологические продукты могут переноситься при от 171 мОсм/кг до около 1711 мОсм/кг). Значение осмоляльности сравнительных композиций намного выше, чем переносимая осмоляльность для офтальмологического применения, которая составляет от 171 мОсм/кг до 1711 мОсм/кг.

Поэтому сравнительная композиция 34 и 35 не подходит для офтальмологического применения. Назальные и ушные композиции также должны быть изотоническими или слегка гипертоническими или слегка гипотоническими композициями из–за чувствительности тканей носа и уха. Следовательно, композиции 34 и 35 не подходят для назального или ушного путей доставки или введения.

3.6. Исследование переносимости клетками роговицы in vitro (способ STE)

3.6.1. Образцы, материал и способ

Этот анализ проводят как описано в разделе A.1.1. выше, но с применением сравнительных композиций 34 и 35 в качестве тестируемых образцов.

3.6.2. Результаты

Тестируемые сравнительные композиции 34 и 35 показали цитотоксичность в тестируемых концентрациях и поэтому классифицированы как токсичные по оценке STE.

Поэтому сравнительные композиции 34 и 35 не подходят для офтальмологического введения.

3.7. Исследование переносимости клетками внутреннего уха in vitro

3.7.1. Образцы, материал и способ

Этот анализ проводят как описано в разделе A.1.2. выше, но с применением сравнительных композиций 34 и 35 в качестве тестируемых образцов.

3.7.2. Результаты

Цитотоксичность наблюдается для тестируемых сравнительных композиций 34 и 35. В частности, инкубирование сравнительных композиций 34 и 35 показало высокую смертность клеток в тестируемой концентрации 5%.

Поэтому сравнительные композиции 34 и 35 не подходят для ушного введения.

3.8. Анализ раздражения глаза (HET–CAM)

3.8.1. Материал и способ

HET–CAM является способом, который имитирует сосудистые изменения в хорионаллантоисной мембране, аналоге конъюнктивы глаза, который может применяться для определения потенциальной раздражающей способности тестируемого вещества. Этот способ основан на том, который описан в ICCVAM–Recommended Test Method Protocol: Hen’s Egg Test – Chorioallantoic Membrane (HET–CAM) Test Method. NIH Publication No. 10–7533– Published 2010.

Оплодотворенные белые БСП (без специального патогена) яйца кур породы Белый Леггорн инкубируют при 37°C и 60% влажности вплоть до 10 дня. После определения жизнеспособности эмбриона, прямоугольное окно удаляют из скорлупы непосредственно над воздушной камерой, и мембрану яйца осторожно увлажняют 2–3 мл 0,9% физиологического раствора. После возврата в инкубатор на 30 минут внутреннюю мембрану удаляют, и тестируемое вещество наносят на CAM мембрану пипеткой. Яйца наблюдают непрерывно в течение 5 минут для определения лизиса, кровотечения и/или коагулирования, и оценку раздражимости (ОР) определяют согласно инструкциям ICCVAM–Recommended Test Method Protocol (NIH Publication No. 10–7553–Published 2010.

Оценка раздражимости (ОР) была следующей:

– не раздражающая: 0≥ОР≥0,9

– незначительно раздражающая: 1≥ОР≥4,9

– умеренно раздражающая: 5≥ОР≥9,9

– сильно раздражающая: 10≥ОР≥21

3.8.2. Результаты

Проводят HET–CAM анализ раздражения глаза, описанный выше, и делают соответствующие типовые изображения тестируемых образцов (см. фиг. 1).

В частности, типовые изображения показывают, что наноэмульсии в соответствии с данным изобретением не запускают процессы лизиса, кровотечения или коагулирования, в то время как типовые изображения показывают, что сравнительная композиция 34 является раздражающей.

Более того, также определяют оценку раздражимости (ОР) композиции из примера 7 и 11 и сравнительной композиции 34. Значения ОР даны в таблице ниже:

Номер примера	ОР
Примеры 7 и 11	0,07	не раздражает
Сравнительная композиция 34	14,46	сильно раздражает

Таким образом, из указанных выше результатов понятно, что композиции в соответствии с данным изобретением являются не раздражающими, в то время как сравнительные композиции, описанные у Mohammad Sajid Ali et al, считаются раздражающими и поэтому не подходят для применения в качестве лекарственного средства в соответствии с предложенным применением в соответствии с данным изобретением.

3.9. Выводы

Композиции, описанные у Mohammad Sajid Ali et al., являются не прозрачными эмульсиями, имеющими средний размер частиц выше 6000 нм и осмоляльность выше 2500 мОсм/кг. Более того, соотношение масло/клобетазол составляет 272, и соотношение поверхностно–активное вещество/клобетазол составляет 385, оба выше, чем заявленный интервал в композициях в соответствии с данным изобретением.

Кроме того, композиции, описанные у Mohammad Sajid Ali et al., не имеют коллоидной стабильности, а также эти композиции являются раздражающими и поэтому не подходят для применения в качестве лекарственного средства.

Список цитат

1. 491 OECD Инструкции для тестирования химических веществ. Способ тестирования кратковременным воздействием in vitro для идентификации i) химических веществ, вызывающих серьезное повреждение глаза и ii) химических веществ, не требующих классификации для раздражения глаза или серьезного поражения глаза (2015). Доступна на интернет–портале http://www.oecd–ilibrary.org/docserver/download/9715201e.pdf?expires=1515680383&id=id&accname=guest&checksum=623490053F1D25E26DB7B437B0669A4B в июле 2015.

2. Hassan, P. et al, “Making sense of Brownian motion: colloid characterization by dynamic light scattering”, Langmuir, 2015, vol. 31, pp.3–12.

3. ICH Harmonised Tripartite Guideline Impurities in New Drug Products Q3B(R2). Доступно на интернет–портале http://www.ich.org/products/guidelines/quality/quality–single/article/impurities–in–new–drug–products.html в июне 2017.

4. Kalinec GM, Webster P, Lim DJ, Kalinec F: A cochlear cell line as an in vitro system for drug ototoxicity screening. Audiol. Neurootol. 2003; 8:177–89.

5. TG405: OCDE Guideline for testing of chemicals: Acute Eye Irritation/Corrosion (2012). Доступна на интернет–портале http://www.oecd–ilibrary.org/docserver/download/9712201e.pdf?expires=1515680005&id=id&accname=guest&checksum=E0DCF0095196C8D17EBEBE86CAF3D3DA в октябре 2012.

6. USP <18334> монография Пропионат клобетазола. Доступна на интернет–портале http://www.pharmacopeia.cn/v29240/usp29nf24s0_m18334.html#usp29nf24s0_m18334 в июне 2017.

7. Европейский патент № EP0844001.

8. Заявка на патент PCT WO2017037663.

9. Инструкция ICCVAM–Recommended Test Method Protocol: Hen’s Egg Test – Chorioallantoic Membrane (HET–CAM) Test Method (NIH Publication No. 10–7553–Published 2010). Доступна на интернет–портале https://ntp.niehs.nih.gov/iccvam/docs/protocols/ivocular–hetcam.pdf в декабре 2017.

10. Mohammad Sajid Ali et al. “Accelerated Stability Testing of a Clobetasol propionate Loaded nanoemulsion as per ICH guideline”. Scientia Pharmaceutica, 2013, vol. 81, no.4, pp. 1089–1100).

1. Наноэмульсионная композиция масло в воде для применения в профилактике и/или лечении воспалительного заболевания или состояния, выбранного из группы, состоящей из офтальмологического воспалительного заболевания или состояния, ушного воспалительного заболевания или состояния, назального воспалительного заболевания или состояния и ротоглоточного воспалительного заболевания или состояния, имеющая непрерывную водную фазу и диспергированные масляные капли, где наноэмульсия содержит:

(a) терапевтически эффективное количество клобетазола или его фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира;

(b) один или более масляных компонентов; и

(c) одно или более поверхностно-активных веществ;

вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми эксципиентами или носителями,

где

осмоляльность наноэмульсионной композиции составляет от 100 мОсм/кг до 500 мОсм/кг;

средний размер капель составляет от 1 нм до 500 нм, измеренный динамическим светорассеянием;

массовое отношение между масляными компонентами и суммой масляных компонентов и одного или более поверхностно-активных веществ составляет от 0,001 до 0,5;

массовое отношение между масляным компонентом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 1:1 до 200:1; и

массовое отношение между поверхностно-активным веществом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 2:1 до 200:1.

2. Наноэмульсионная композиция масло в воде по п. 1, которая содержит от 0,001% до 0,1% массовых пропионата клобетазола.

3. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1, 2, где pH составляет от 4,0 до 8,0.

4. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1-3, где массовое отношение между масляным компонентом и суммой масляных компонентов и одного или более поверхностно-активных веществ составляет от 0,001 до 0,4.

5. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1-4, где массовое отношение между масляным компонентом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 1:1 до 100:1.

6. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1-5, где массовое отношение между поверхностно-активным веществом и клобетазолом или его фармацевтически приемлемой солью или сложным эфиром составляет от 2:1 до 190:1.

7. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1-6, где композиция дополнительно содержит этанол в количестве не более чем 3% по массе.

8. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1-7, где масляный компонент выбирают из группы, состоящей из касторового масла; глицерилмоностеарата; этилолеата; децилолеата; изопропилмиристата; изопропилпальмитата; изопропилизостеарата; изостеарилизостеарата; миристиллактата; минерального масла; легкого минерального масла; растительных масел; сложного моноэфира, диэфира или триэфира глицерина и C₆–C₁₂ алкила жирной кислоты; и их смеси.

9. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1-8, где поверхностно-активным веществом является неионное поверхностно-активное вещество, выбранное из группы, состоящей из производных этоксилатов сложных эфиров сорбитана, производных сложных эфиров сорбитана, сополимеров полиэтиленоксида–полипропиленоксида, полиоксила 35 касторового масла, полиоксила 40 гидрированного касторового масла, полиоксила 40 стеарата, октоксинола 40, D-α-токоферол полиэтиленгликоля 1000 сукцината (ТПГС) и их смесей.

10. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1-9, где композиция в качестве одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов или носителей содержит агент, регулирующий pH, выбранный из группы, состоящей из уксусной кислоты, борной кислоты, сорбиновой кислоты, лимонной кислоты, фосфорной кислоты, фосфата натрия, двухосновного фосфата натрия, одноосновного фосфата натрия, дигидрофосфата калия, хлористоводородной кислоты, гидроксида натрия, тиосульфата натрия, сульфита натрия, сульфата натрия, трис(гидроксиметил)аминометана, гидрохлорида трис(гидроксиметил)аминометана, гидрокарбоната натрия, бората натрия, ацетата натрия, бисульфата натрия, бензоата натрия, цитрата натрия и их смесей.

11. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1-10, где композиция в качестве одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов или носителей содержит регулятор тоничности, выбранный из группы, состоящей из хлорида натрия, глицерина, глюкозы, маннита, сорбита, пропиленгликоля и их смесей.

12. Наноэмульсионная композиция масло в воде по любому из пп. 1-11, которая имеет форму офтальмологической композиции, назальной композиции, ушной композиции или буккальной композиции.

13. Способ получения наноэмульсионной композиции масло в воде, определенной по любому из пп. 1-12, который включает:

(a) получение масляной фазы смешиванием клобетазола с масляными компонентами и поверхностно-активными веществами;

(b) получение водной фазы;

(c) эмульгирование масляной фазы, полученной на стадии (a), в водной фазе, полученной на стадии (b);

(d) регулирование pH; осмоляльности; pH и осмоляльности после стадии (a), стадии (b) или стадии (c); и

(e) добавление одного или более фармацевтически приемлемых эксципиентов или носителей на стадии (a), стадии (b) или стадии (c).

14. Наноэмульсионная композиция масло в воде, определенная по любому из пп. 1-12, для применения в качестве лекарственного средства.

15. Наноэмульсионная композиция масло в воде, определенная по любому из пп. 1-12, для применения для профилактики и/или лечения воспалительных заболеваний или состояний, выбранных из группы, состоящей из офтальмологического воспалительного заболевания или состояния, ушного воспалительного заболевания или состояния, назального воспалительного заболевания или состояния и ротоглоточного воспалительного заболевания или состояния.