Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции эксайтотоксического повреждения сетчатки. Способ коррекции эксайтотоксического повреждения сетчатки включает внутрижелудочное введение бис-(-2-гидроксиэтил-N-диметиламиния) 2[(2.6-дихлорфенил)амино]-фенилэтаноата - DMAE 10-19 однократно в дозе 13,8 мг/кг белым крысам линии Wistar за 40 минут до моделирования эксайтотоксического повреждения сетчатки. Изобретение обеспечивает эффективный способ коррекции эксайтотоксического повреждения сетчатки. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии.

Из научных источников известно, что в условиях повышенного глазного давления, возрастает концентрация глутама, что приводит к эксайтотоксичности. Одним из путей коррекции такого патогенетического пути является увеличение нейротрофических факторов.

Известно новое соединение – магния бис-(2-аминоэтансульфокислоты)-бутандиоат, обладающий антигипоксической, нейропротекторной и гипокоагуляционной активностью (RU 2671982, публ. 08.11.2018) и может также препятствовать эксайтотоксическому повреждению.

Основным недостатком решения является выявление нейропротекторных свойств только центральной нервной системы, а также отсутствие экспериментальных данных о влиянии соединения на процессы эксайтотоксичности в сетчатке.

Известен способ фармакологической коррекции ишемической нейропатии зрительного нерва производным диметиламиноэтанола 7-16 в эксперименте (RU 2663643, публ. 07.08.2018), который заключается в том, что моделирование патологии осуществляют путем ежедневного внутрибрюшинного введения лабораторным крысам-самцам линии Wistar неселективного ингибитора NO-синтаз N-нитро-L-аргинин-метилового эфира в дозе 12,5 мг/кг массы крысы в течение 28 суток. На 26 сутки эксперимента дополнительно проводят однократное повышение внутриглазного давления до 110 мм рт.ст. в течение 5 мин путем применения механического давления на переднюю камеру глаза. Коррекцию индуцированной таким образом патологии зрительного нерва проводят раствором 2-диметиламиноэтанола L-2-аминопентандиовоата с 29 дня эксперимента в течение 28 дней путем его ежедневного внутрижелудочного введения в дозе 25 мг/кг/сутки. Способ обеспечивает выраженную коррекцию ишемической нейропатии зрительного нерва, в т.ч. за счет улучшения ретинальной микроциркуляции и восстановления электрофизиологической активности сетчатки.

Основным недостатком способа является то, что данный способ фармакологической коррекции ишемии имеет свои ограничения, так как предложен только для коррекции нейропатии зрительного нерва.

Задачей предлагаемого изобретения является создание эффективного способа коррекции эксайтотоксического повреждения сетчатки с использованием нового производного диметиламиноэтанола – бис-(-2- гидроксиэтил-N-диметиламиния) 2[(2.6-дихлорфенил)амино]-фенилэтаноата, под лабораторным шифром DMAE 10-19 в эксперименте, подтверждаемого результатами гистологического исследования.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является эффективный способ коррекции эксайтотоксического повреждения сетчатки с использованием нового производного диметиламиноэтанола – бис-(-2- гидроксиэтил-N-диметиламиния) 2[(2.6-дихлорфенил)амино]-фенилэтаноата, под лабораторным шифром DMAE 10-19 в эксперименте, подтвержденный результатами гистологического исследования.

Поставленная задача достигается тем, что предложен способ коррекции эксайтотоксического повреждения сетчатки производным диметиламиноэтанола под лабораторным шифром DMAE 10-19 в эксперименте, включающий моделирование патологии путём однократного интровитриального введения крысам линии Wistar раствора NMDA (N-метил-D-аспартат) объемом 2 мкл в дозе 160 нмоль, а бис-(-2- гидроксиэтил-N-диметиламиния) 2[(2.6-дихлорфенил)амино]-фенилэтаноата (DMAE 10-19), вводят внутрижелудочно в дозе 13,8 мг/кг за 40 минут перед введением NMDA, подтверждаемый результатами морфологического исследования.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНОГО DMAE 10-19

Синтез нового соединения осуществляли путем взаимодействия 2-х молей 2-гидроксиэтил-N-диметиламина с 1-м молем 2[(2.6-дихлорфенил)амино]-фенилэтановой кислоты.

В трехгорлую колбу загружают 50 мл сухого ацетона, 1,78 г (0,022 м) 2-гидроксиэтил-N-диметиламина, массу тщательно перемешивают и постепенно добавляют 2,96 г (0,01 м) 2[(2.6-дихлорфенил)амино]-фенилэтановой кислоты. Полученный раствор нагревают до 40°С и перемешивают в течение 1,0 часа. Полученный раствор фильтруют, отгоняют ацетон. Осадок перекристаллизовывают, сушат. Получают 3,46 г (73,1%) белых с желтоватым оттенком кристаллов с Т плав. = 101-103°С.

Найдено,%: С 55,62; Н 7,08; Cl 14,91; N 8,79

C22H34Cl2N3O4 м.м. 474,35

Вычислено,%:С 55,67; Н 7,02; Cl 14,97; N 8,85; О 13,49

ИК, ν, см^-1: 3430 (OH), 3320, 3310 (NH). 2380 (N+), 1620 (С=С), 1560 (COО-)

УФ: 0,002% раствор в спирте этиловом максимум поглощения при 263±2 нм.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Фармакологические свойства заявленного соединения

Эксперименты проведены на самцах крыс линии Wistar массой 200-250 г. Для исследования взяты крысы без внешних признаков заболевания, прошедшие карантинный режим. Моделирование патологии осуществляли под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг). Раствор NMDA вводили интровитриально однократно в дозе 160 нмоль в 2 мкл (Lambuk L, Jafri AJA, Iezhitsa I, et al. Dose-dependent effects of NMDA on retinal and optic nerve morphology in rats. Int J Ophthalmol. 2019;12(5):746-753. Published 2019 May 18. doi:10.18240/ijo.2019.05.08). За 40 минут до моделирования патологии внутрижелудочно вводили DMAE 10-19 однократно в дозе 13,8 мг/кг.

Каждая группа включала 10 крыс. Первая группа – группа интактных животных, вторая группа – с моделью эксайтотоксического повреждения сетчатки (контроль), третья группа – с коррекцией патологии производным DMAE 10-19; четвертая группа – с коррекцией патологии диметиламиноэтанолом («DMAE», Maxler, США) (препарат сравнения).

Оценку эффективности коррекции осуществляли, по морфологической оценке, слоя ганглионарных клеток сетчатки (ГКС) используя для этого «коэффициент измененности».

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Через 7 дней после моделирования патологии животных выводили из эксперимента, путем эвтаназии в СО₂-камере. После чего проводили забор глазных яблок с прилегающими тканями с последующей фиксацией в 10% растворе формалина. После фиксации глаза разрезали на две части в меридианном направлении, после чего образцы заливали в парафин по стандартной методике. Срезы изготавливали толщиной 5-7 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином. Этапы гистологической обработки выполнены с использованием оборудования фирмы «Leica» (Германия). Для микроскопического исследования, морфометрии и архивирования готовые микропрепараты сканировали с помощью компьютерной системы архивирования и анализа изображений «Mirax Desk». Анализ изображений и морфометрия выполнены с помощью программы «Pannoramic Viewer» 1.15.4. Количественные данные регистрировали в электронных таблицах MS Excel.

С целью объективизации оценки выявляемых качественных изменений сетчатки степень изменений регистрировали условными баллами: 0 баллов – без изменений, 1 балл – минимальные изменения, 2 балла – умеренно выраженные, 3 балла – выраженные изменения нейрональных структур. «коэффициент измененности», который рассчитывали по формуле 1:

КИ = (1 х n + 2 x n + 3 x n) / N,

где КИ – «коэффициент измененности»; n – количество участков с соответствующей (0; 1; 2; 3) степенью изменений; N – общее количество исследованных участков.

По результатам исследования установлено, что КИ ганглионарных клеток сетчатки в группе интактных составил 0,1±0,1. В группе с моделью эксайтотоксического повреждения сетчатки 2,9±0,1. В группе с коррекцией DMAE 10-19 в дозе 13,8 мг/кг, КИ составил 1,8±0,2 (р<0,05 в сравнении с моделью патологии).

Таким образом, применение бис-(-2- гидроксиэтил-N-диметиламиния) 2[(2.6-дихлорфенил)амино]-фенилэтаноата (лабораторный шифр DMAE 10-19) в дозе 13,8 мг/кг внутрижелудочно за 40 минут до моделирования эксайтотоксического повреждения сетчатки, предотвращает развитие структурных повреждений ГКС. Эффективность способа подтверждается предотвращением развития морфологических нарушений в сравнении с группой с моделью патологии.

Способ коррекции эксайтотоксического повреждения сетчатки производным диметиламиноэтанола в эксперименте, включающий внутрижелудочное введение бис-(-2-гидроксиэтил-N-диметиламиния) 2[(2.6-дихлорфенил)амино]-фенилэтаноата - DMAE 10-19 однократно в дозе 13,8 мг/кг белым крысам линии Wistar за 40 минут до моделирования эксайтотоксического повреждения сетчатки.

Изобретение относится к области медицины, к методам экспериментального моделирования патологических процессов, протекающих в мочевой системе. Раскрыт способ моделирования процесса образования фосфатного мочевого камня, основанный на выращивании камня в искусственно созданной модельной среде мочи человека, при этом готовят раствор, где в качестве исходных компонентов выступают дистиллированная вода и соли: CaCl2⋅2H2O - 7 ммоль/л, MgSO4⋅7H2O - 4 ммоль/л, NH4Cl - 8 ммоль/л, K2SO4 - 6 ммоль/л, (NH4)2С2О4⋅Н2О - 1 ммоль/л, (NH4)3PO4 - 10 ммоль/л, K2CO3 - 7 ммоль/л, KCl - 24 ммоль/л, NaCl - 140 ммоль/л, синтез проводят при значениях pH 6,45÷7,45 в течение 24 часов при температуре 37,0 °С.

Симулятор для пункции желудка и передней брюшной стенки при наложении чрескожной эндоскопической гастростомы // 2765110

Изобретение относится к медицинской технике и предназначено для обучения выполнению пункции желудка и передней брюшной стенки при наложении чрескожной эндоскопической гастростомы. Симулятор представляет собой имитатор головы и верхней части туловища, включающий имитаторы рта, глотки, пищевода, желудка и брюшной стенки.

Способ изолированной левосторонней долевой артерио-умбиликальной перфузии печени в эксперименте // 2765017

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, онкологии, трансплантологии. Выполняют эксплантацию трупной печени.

Способ моделирования закрытой травмы глаза // 2764369

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине. Для моделирования закрытой травмы глаза используют снаряд типа «шарик стальной омедненный Borner» для пневматической винтовки диаметром 0,45 см.

Способ моделирования прободного ранения глазного яблока // 2764368

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине. Используют снаряд типа «шарик стальной омедненный Borner» или снаряд-дротик для винтовки диаметром 0,45 см, при моделировании проникающего ранения с внутриглазным инородным телом (ВГИТ) выстрел производят с расстояния 25 см до глаза.

Способ моделирования закрытой травмы селезенки в эксперименте на крупных лабораторных животных // 2764361

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к патологической физиологии. Выполняют мобилизацию селезенки.

Способ экспериментального моделирования бактериального кератита // 2764121

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной офтальмологии. Выполняют местную анестезию, после чего осуществляют биомикроскопический контроль микроманипуляций при помощи операционного микроскопа или щелевой лампы.

Способ моделирования иммунопатологической плацентарной недостаточности // 2763837

Изобретение относится к экспериментальной медицине в области акушерства-гинекологии, репродуктологии, иммунологии, гистологии. Способ моделирования иммунопатологической плацентарной недостаточности заключается в том, что аутбредным мышам ICR вводят антитела IgG, выделенные из анти-ТПО-положительных сывороток крови с титром более 1000 ед., полученных от пациенток с диагностированным аутоиммунным тиреоидитом, имеющих потерю плода и невынашивание беременности в анамнезе.

Способ коррекции поведенческого статуса 2-амино-5-этил-1,3,4-тиодиазолия-n-ацетил-аминоэтаноатом при повреждении головного мозга // 2763012

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии. Способ коррекции поведенческого статуса при травматическом повреждении головного мозга включает моделирование черепно-мозговой травмы у крыс свободным падением груза массой 155 грамм с высоты 0,6 м.

Способ дифференцированного лечения эрозий и язв роговицы // 2765601

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для дифференцированного лечения эрозий и язв роговицы. Для этого используют продукт богатой тромбоцитами аутоплазмы (БоТП).