Способ лечения педиатрических расстройств/заболеваний

Изобретение к способу лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента. Способ предусматривает внутривенное введение педиатрическому пациенту весом менее 30 кг с воспалительным заболеванием кишечника (ВЗК) первой дозы 200 мг ведолизумаба, второй дозы 200 мг через две недели после первой дозы и третьей дозы 200 мг через шесть недель после первой дозы. Введение фиксированной дозы 200 мг педиатрическому пациенту менее 30 кг является безопасным. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения педиатрического пациента весом менее 30 кг, не приводящее к развитию наблюдаемых нежелательных эффектов, и предотвратить возможность просчетов при расчете дозы на основе веса. 10 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 3 пр.

 

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Данная заявка заявляет приоритет по предварительной заявке США №62/492031, поданной 28 апреля 2017 года. Указанная выше заявка включена в данный документ посредством ссылки в полном объеме.

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

Данная заявка содержит список последовательностей, который представлен в электронном виде в формате ASCII и включен в данный документ посредством ссылки в полном объеме. Указанная копия ASCII, созданная 25 апреля 2018 года, имеет имя 079259-0839_SL.txt и имеет размер 12,557 байт.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Заболеваемость педиатрическим воспалительным заболеванием кишечника (ВЗК - IBD - inflammatory bowel disease) возрастает. По данным Американского Фонда борьбы с болезнью Крона и Колитом, около 1 миллиона американцев страдают язвенным колитом или болезнью Крона, из которых около 100000 моложе 21 года.

ВЗК, такое как язвенный колит и болезнь Крона, например, может представлять собой изнурительное и прогрессирующее заболевание, включающее воспаление желудочно-кишечного тракта. Хотя симптомы язвенного колита одинаковы как в детской, так и во взрослой группе, у больных детей обычно наблюдается более обширное заболевание. У около 25% пациентов с ВЗК заболевание наступает в детском или подростковом возрасте.

Лечение ВЗК включает применение противовоспалительных препаратов (таких как кортикостероиды и сульфасалазин), иммунодепрессантов (таких как 6-меркаптопурин, циклоспорин и азатиоприн) и хирургического вмешательства (такого как колэктомия). Podolsky, New Engl. J. Med., 325:928-937 (1991) и Podolsky, New Engl. J. Med., 325:1008-1016 (1991). По мере прогрессирования заболевания лечение переходит в такие схемы лечения, которые подвергают пациентов прогрессирующему риску побочных эффектов и потери качества жизни.

Рецепторы интегрина важны для регуляции как рециркуляции лимфоцитов, так и рекрутирования лимфоцитов в места воспаления (Carlos, T.M. and Harlan, J.M., Blood, 84:2068- 2101 (1994)). Интегрин человека α4β7 имеет несколько лигандов, один из которых представляет собой белок слизистой оболочки стенки сосудов, участвующий в миграции и хоминге лимфоцитов MAdCAM-1 (Berlin, C., et al., Cell 74: 185-195 (1993); Erle, D.J., et al., J. Immunol. 153:517-528 (1994)), который экспрессируется в наружных эндотелиальных венулах в брыжеечных лимфатических узлах и бляшках Пейера (Streeter, P.R., et al., Nature 331:41-46 (1998)). Как таковой, интегрин α4β7 действует как рецептор хоминга, который обеспечивает миграцию лимфоцитов в лимфоидную ткань слизистой оболочки кишечника (Schweighoffer, T., et al., J. Immunol. 151: 717-729 (1993)).

Антитела против интегрина человека α4β7, такие как мышиное моноклональное антитело Act-1 (mAb Act-1), взаимодействует с интегрином α4β7, который связывается с молекулой-1 адрессина клеточной адгезии слизистой оболочки (MAdCAM-1), присутствующей в наружных эндотелиальных венулах в слизистых оболочках лимфатических узлов. Act-1 был первоначально выделен Lazarovits, A.I., et al., J. Immunol. 133:1857-1862 (1984), из мышей, иммунизированных T-лимфоцитами, специфичными к столбнячному анатоксину человека, и, как сообщалось, представлял собой антитело IgG1/K мыши. Последующие анализы антитела согласно Schweighoffer, T., et al., J. Immunol. 151:717-729 (1993) продемонстрировали, что оно может связываться с подмножеством CD4+ T-лимфоцитов памяти человека, которые избирательно экспрессируют интегрин α4β7. Ведолизумаб Entyvio™, моноклональное антитело (mAb) против интегринов α₄β₇ со структурными особенностями, полученными от Act-1, показан для лечения язвенного колита (ЯК) и болезни Крона (БК). Исследования, сообщающие об активности ведолизумаба при лечении этих расстройств (Feagen et al. NEJM 369:699-710 (2013) и Sandborn et al. NEJM 369:711-721 (2013)), продемонстрировали различные уровни успеха в зависимости от расстройства и характера предшествующей терапии.

Хотя нарушение роста является распространенным проявлением язвенного колита и болезни Крона в популяции детей, у детей с болезнью Крона риск нарушений роста вдвое выше, чем у пациентов с язвенным колитом (Motil et al., Gastroenterology 105:681-691 (1993)). Было показано, что диетотерапия и хирургическая резекция увеличивают рост, но остается очевидной необходимость в более эффективных и менее болезненных вариантах лечения для группы пациентов-детей.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к лечению педиатрических пациентов, страдающих воспалительным заболеванием кишечника (ВЗК), например болезнью Крона (БК) или язвенным колитом (ЯК), и использующих антагонист α4β7-интегрина для облегчения симптомов детского ВЗК. В одном аспекте педиатрический пациент имеет ЯК или БК умеренной или тяжелой формы. В одном аспекте способы включают введение антитела против интегрина, такого как антитело против α4β7, такого как ведолизумаб.

В одном аспекте педиатрический пациент, имеющий воспалительное заболевание кишечника, имеет неадекватный ответ, потерю ответа или непереносимость по меньшей мере одного из следующих агентов: кортикостероидов, иммуномодуляторов и/или фактора некроза опухоли альфа (TNF-α) антагонистической терапии.

В одном аспекте изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту с ВЗК: первой дозы 100 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 100 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 100 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи аминокислот от 20 до 140 SEQ ID NO: 1 и последовательность вариабельной области легкой цепи аминокислот от 20 до 131 SEQ ID NO: 2. Способ может дополнительно включать четвертую дозу 100 мг через 14 недель после первой дозы. Способ может дополнительно включать четвертую дозу 200 мг через 14 недель после первой дозы. Способ может дополнительно включать пятую и последующую дозу 100 мг каждые восемь недель после четвертой дозы. Способ может дополнительно включать пятую и последующую дозу 200 мг каждые восемь недель после четвертой дозы. Тяжелая цепь антитела может содержать аминокислоты с 20 по 470 SEQ ID NO: 1, а легкая цепь антитела может содержать аминокислоты с 20 по 238 SEQ ID NO: 2. Каждая доза может вводиться внутривенно в виде инфузии в течение около 120 минут. Педиатрический пациент может весить менее 30 кг. Воспалительное заболевание кишечника может представлять собой умеренную или тяжелую форму болезни Крона. Воспалительное заболевание кишечника может представлять собой умеренную или тяжелую форму язвенного колита. Педиатрический пациент может иметь недостаток адекватного ответа, потерю ответа или имел непереносимость антагониста TNFα. У педиатрического пациента может быть неадекватный ответ или потеря ответа на кортикостероид. У педиатрического пациента может быть неадекватный ответ или потеря ответа на иммуномодулятор. Клинический ответ может быть достигнут на 14 неделе. Педиатрический пациент может достичь ремиссии воспалительного заболевания кишечника.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту с ВЗК: первой дозы 200 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 200 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 200 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи аминокислот от 20 до 140 SEQ ID NO: 1 и последовательность вариабельной области легкой цепи аминокислот от 20 до 131 SEQ ID NO: 2. Способ может дополнительно включать четвертую дозу 200 мг через 14 недель после первой дозы. Способ может дополнительно включать пятую и последующую дозу 200 мг каждые восемь недель после четвертой дозы. Тяжелая цепь антитела может содержать аминокислоты с 20 по 470 SEQ ID NO: 1, а легкая цепь антитела может содержать аминокислоты с 20 по 238 SEQ ID NO: 2. Каждая доза может вводиться внутривенно в виде инфузии в течение около 120 минут. Педиатрический пациент может весить менее 30 кг. Воспалительное заболевание кишечника может представлять собой умеренную или тяжелую форму болезни Крона. Воспалительное заболевание кишечника может представлять собой умеренную или тяжелую форму язвенного колита. Педиатрический пациент может иметь недостаток адекватного ответа, потерю ответа или имел непереносимость антагониста TNFα. У педиатрического пациента может быть неадекватный ответ или потеря ответа на кортикостероид. У педиатрического пациента может быть неадекватный ответ или потеря ответа на иммуномодулятор. Клинический ответ может быть достигнут на 14 неделе. Педиатрический пациент может достичь ремиссии воспалительного заболевания кишечника.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту с ВЗК: первой дозы 150 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 150 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 150 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи аминокислот от 20 до 140 SEQ ID NO: 1 и последовательность вариабельной области легкой цепи аминокислот от 20 до 131 SEQ ID NO: 2. Способ может дополнительно включать четвертую дозу 150 мг через 14 недель после первой дозы. Способ может дополнительно включать четвертую дозу 300 мг через 14 недель после первой дозы. Способ может дополнительно включать пятую и последующую дозу 150 мг каждые восемь недель после четвертой дозы. Способ может дополнительно включать пятую и последующую дозу 300 мг каждые восемь недель после четвертой дозы. Тяжелая цепь антитела может содержать аминокислоты с 20 по 470 SEQ ID NO: 1, а легкая цепь антитела может содержать аминокислоты с 20 по 238 SEQ ID NO: 2. Каждая доза может вводиться внутривенно в виде инфузии в течение около 30 минут. Педиатрический пациент может весить 30 кг и более. Воспалительное заболевание кишечника может представлять собой умеренную или тяжелую форму болезни Крона. Воспалительное заболевание кишечника может представлять собой умеренную или тяжелую форму язвенного колита. Педиатрический пациент может иметь недостаток адекватного ответа, потерю ответа или имел непереносимость антагониста TNFα. У педиатрического пациента может быть неадекватный ответ или потеря ответа на кортикостероид. У педиатрического пациента может быть неадекватный ответ или потеря ответа на иммуномодулятор. Клинический ответ может быть достигнут на 14 неделе. Педиатрический пациент может достичь ремиссии воспалительного заболевания кишечника.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту с ВЗК: первой дозы 300 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 300 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 300 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело содержит последовательность вариабельной области тяжелой цепи аминокислот от 20 до 140 SEQ ID NO: 1 и последовательность вариабельной области легкой цепи аминокислот от 20 до 131 SEQ ID NO: 2. Способ может дополнительно включать четвертую дозу 300 мг через 14 недель после первой дозы. Способ может дополнительно включать пятую и последующую дозу 300 мг каждые восемь недель после четвертой дозы. Тяжелая цепь антитела может содержать аминокислоты с 20 по 470 SEQ ID NO: 1, а легкая цепь антитела может содержать аминокислоты с 20 по 238 SEQ ID NO: 2. Каждая доза может вводиться внутривенно в виде инфузии в течение около 30 минут. Педиатрический пациент может весить 30 кг и более. Воспалительное заболевание кишечника может представлять собой умеренную или тяжелую форму болезни Крона. Воспалительное заболевание кишечника может представлять собой умеренную или тяжелую форму язвенного колита. Педиатрический пациент может иметь недостаток адекватного ответа, потерю ответа или имел непереносимость антагониста TNFα. У педиатрического пациента может быть неадекватный ответ или потеря ответа на кортикостероид. У педиатрического пациента может быть неадекватный ответ или потеря ответа на иммуномодулятор. Клинический ответ может быть достигнут на 14 неделе. Педиатрический пациент может достичь ремиссии воспалительного заболевания кишечника.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту с ВЗК: первой дозы 100 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 100 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 100 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело содержит антигенсвязывающую область нечеловеческого происхождения и по меньшей мере часть антитела человеческого происхождения, при этом антитело обладает специфичностью связывания комплекса α4β7, при этом антигенсвязывающая область содержит CDR: Легкая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 7, CDR2 SEQ ID NO: 8 и CDR3 SEQ ID NO: 9; и Тяжелая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 4, CDR2 SEQ ID NO: 5 и CDR3 SEQ ID NO: 6.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту с ВЗК: первой дозы 200 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 200 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 200 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело содержит антигенсвязывающую область нечеловеческого происхождения и по меньшей мере часть антитела человеческого происхождения, при этом антитело обладает специфичностью связывания комплекса α4β7, при этом антигенсвязывающая область содержит CDR: Легкая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 7, CDR2 SEQ ID NO: 8 и CDR3 SEQ ID NO: 9; и Тяжелая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 4, CDR2 SEQ ID NO: 5 и CDR3 SEQ ID NO: 6.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту с ВЗК: первой дозы 150 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 150 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 150 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело содержит антигенсвязывающую область нечеловеческого происхождения и по меньшей мере часть антитела человеческого происхождения, при этом антитело обладает специфичностью связывания комплекса α4β7, при этом антигенсвязывающая область содержит CDR: Легкая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 7, CDR2 SEQ ID NO: 8 и CDR3 SEQ ID NO: 9; и Тяжелая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 4, CDR2 SEQ ID NO: 5 и CDR3 SEQ ID NO: 6.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту с ВЗК: первой дозы 300 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 300 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 300 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело содержит антигенсвязывающую область нечеловеческого происхождения и по меньшей мере часть антитела человеческого происхождения, при этом антитело обладает специфичностью связывания комплекса α4β7, при этом антигенсвязывающая область содержит CDR: Легкая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 7, CDR2 SEQ ID NO: 8 и CDR3 SEQ ID NO: 9; и Тяжелая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 4, CDR2 SEQ ID NO: 5 и CDR3 SEQ ID NO: 6. Последующие дозы антитела можно вводить подкожно. Каждая подкожная доза может составлять 108 мг антитела. Подкожную дозу можно вводить каждые две или четыре недели педиатрическому пациенту, который весит 30 кг или более. Подкожную дозу можно вводить каждые три недели, каждые четыре недели, каждые пять недель, каждые шесть недель, каждые семь недель, каждые восемь недель, каждые девять недель или каждые десять недель пациенту, имеющему вес от 10 кг до 30 кг.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания кишечника (ВЗК) у педиатрического пациента, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту с ВЗК: первой дозы 200 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 200 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей подкожно вводимой дозы 108 мг антитела через шесть недель после первой дозы и последующих доз 108 мг антитела через каждые две, три или четыре недели, при этом антитело содержит антигенсвязывающую область нечеловеческого происхождения и, по меньшей мере, часть антитела человеческого происхождения, при этом антитело обладает специфичностью связывания комплекса α4β7, при этом антигенсвязывающая область содержит CDR: Легкая цепь: CDR SEQ ID NO: 7, CDR2 SEQ ID NO: 8 и CDR3 SEQ ID NO: 9; и Тяжелая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 4, CDR2 SEQ ID NO: 5 и CDR3 SEQ ID NO: 6.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения больного раком педиатрического пациента, которому проводят аллогенную трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток (алло-HSCT), включающую внутривенное введение педиатрическому пациенту за день до алло-HSCT первой дозы 200 мг антитела, которое имеет специфичность к интегрину α4β7 человека, второй дозы 200 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей подкожно вводимой дозы 108 мг антитела через шесть недель после первой дозы и последующих доз 108 мг антитела через каждые две, три или четыре недели, при этом антитело содержит антигенсвязывающую область нечеловеческого происхождения и, по меньшей мере, часть антитела человеческого происхождения, при этом антитело обладает специфичностью связывания комплекса α4β7, при этом антигенсвязывающая область содержит CDR: Легкая цепь: CDR SEQ ID NO: 7, CDR2 SEQ ID NO: 8 и CDR3 SEQ ID NO: 9; и Тяжелая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 4, CDR2 SEQ ID NO: 5 и CDR3 SEQ ID NO: 6.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения педиатрического пациента с моногенным дефектом с ВЗК-подобной патологией, включающему внутривенное введение педиатрическому пациенту: первой дозы 200 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 200 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 200 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело содержит антигенсвязывающую область нечеловеческого происхождения и по меньшей мере часть антитела человеческого происхождения, при этом антитело обладает специфичностью связывания комплекса α4β7, при этом антигенсвязывающая область содержит CDR: Легкая цепь: CDR SEQ ID NO: 7, CDR2 SEQ ID NO: 8 и CDR3 SEQ ID NO: 9; и Тяжелая цепь: CDR1 SEQ ID NO: 4, CDR2 SEQ ID NO: 5 и CDR3 SEQ ID NO: 6. Моногенный дефект с ВЗК-подобной патологией может представлять собой болезнь накопления гликогена типа 1b, потерю функции IL10 и мутации в рецепторах IL10 или IL10, X-сцепленный лимфопролиферативный синдром 2, синдром IPEX, вызванный мутациями в факторе транскрипции FOXP3, или хроническую гранулематозную болезнь. Способ может дополнительно в дальнейшем включать последующую дозу 200 мг каждые восемь недель. Способ может дополнительно включать последующую дозу 200 мг если педиатрический пациент не имеет 30 кг или более.

В другом аспекте изобретение относится к флакону, изготовленному для введения 200 мг антитела против α4β7 для лечения педиатрического пациента.

Любой из способов, описанных в данном документе, включающий дозу 100, 200 или 150 мг, может дополнительно включать повышение дозы до 300 мг после того, как пациенты детского возраста будет иметь вес 30 кг или более.

Антитело, используемое в описанных в данном документе способах, может представлять собой гуманизированное антитело. Гуманизированное антитело может содержать последовательность вариабельной области тяжелой цепи из аминокислот 20-140 последовательности SEQ ID NO: 1 и последовательность вариабельной области легкой цепи из аминокислот 20-131 последовательности SEQ ID NO: 2.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На Фиг. 1 изображена схема исследования. Исследование включает четырехнедельный период скрининга, 22-недельный период двойного слепого исследования с лечением (с последней дозой на 14-й неделе для всех субъектов). После четырехнедельного периода скрининга субъектам с массой тела, превышающей или равной 30 кг, в течение 0, 2, 6 и 14 недель внутривенно вводили 300 мг или 150 мг ведолизумаба. Субъектам с массой тела менее 30 кг в течение 0, 2, 6 и 14 недель внутривенно вводили 200 мг или 100 мг ведолизумаба. Посещение без дозирования может быть назначено в любое время между днями 16 и 42 для сбора фармакокинетических образцов. Субъекты, которые согласились участвовать в открытом продолжении исследования (OLE), могут получать дозирование исследования OLE после завершения процедур на 22 неделе (посещение 9). Субъекты, которые не участвуют в исследовании OLE или не покинули его до 22-й недели, также проходят процедуры посещения EP (22-я неделя) и заключительное посещения для оценки безопасности через 18 недель после введения последней дозы исследуемого препарата. Субъекты, которые покинули исследование до 22 недели, также будут участвовать в долгосрочном исследовании безопасности в телефонном режиме через шесть месяцев после последней дозы исследуемого препарата. Субъекты будут предоставлять информированное согласие/согласие родителей на участие в исследовании OLE во время или после завершения 14-й недели исследования. Субъекты, которые не участвуют в исследовании OLE, завершат окончательное посещение для оценки безопасности через 18 недель после введения последней дозы исследуемого препарата и примут участие в долгосрочном последующем исследовании безопасности в телефонном режиме через шесть месяцев после последней дозы исследуемого препарата.

На Фиг. 2 изображена схема второго исследования. Это исследование начнется после посещения недели 22 исследования, представленного в Примере 1 и на Фиг. 1. Субъекты, получающие низкую дозу (150 мг для субъектов 30 кг или более; 100 мг для субъектов менее 30 кг) ведолизумаба IV, могут получать высокую дозу (300 мг для субъектов 30 кг или более; 200 мг для субъектов менее чем 30 кг) по усмотрению исследователя, если субъект проявляет ухудшение заболевания согласно PUCAI/PCDAI при двух последовательных посещениях. Субъектам, чья доза увеличена на основании отсутствия ответа, следует вводить дозу, скорректированную по весу во время отсутствия ответа в исследовании Примера 1, Фиг. 1.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к способам лечения антагонистом α4β7-интегрина, таким как анти- α4β7 антитело, например, ведолизумаб, педиатрического пациента с воспалительным заболеванием кишечника (ВЗК), и способам поддержания ремиссии ВЗК у педиатрического пациента. Данное изобретение также относится к способам лечения антагонистом интегрина α4β7, таким как антитело против α4β7, например, ведолизумаб, педиатрического пациента с реакцией или риском реакции «трансплантат против хозяина » (GvHD), педиатрического пациента с моногенным дефектом с ВЗК-подобной патологией, педиатрического пациента, имеющего заболевание накопления гликогена типа 1b, педиатрического пациента, имеющего колит, связанный с потерей функции IL10 и мутациями в рецепторах IL10 или IL10, педиатрического пациента, имеющего X-сцепленный лимфопролиферативный синдром 2 (дефект в гене XIAP), педиатрического пациента с синдромом IPEX, вызванным мутациями в факторе транскрипции FOXP3, педиатрического пациента с очень ранним началом воспалительного заболевания кишечника (начало <6 лет), педиатрического пациента с неуточненным колитом (НК) и педиатрического пациента с хроническим гранулематозным заболеванием, связанным с колитом.

Данное изобретение также относится к способам лечения антагонистом интегрина α4β7, таким как антитело против α4β7, например, ведолизумаб, педиатрического пациента, имеющего моногенный дефект с ВЗК-подобной патологией. Моногенный дефект может представлять собой любой дефект или комбинацию дефектов эпителиального барьера и эпителиального ответа (например, дистрофический эпидермолизный буллезный синдром, синдром Киндлера, Х-сцепленную эктодермальную дисплазияю и иммунодефицит, дефицит ADAM-17, семейная диарея); нейтропению и дефекты уничтожения бактерий фагоцитами (например, хроническая гранулематозная болезнь, болезнь накопления гликогена типа 1b, врожденная нейтропения, дефицит адгезии лейкоцитов 1); гипер- и ауто-воспалительные расстройства (например, дефицит мевалонат-киназы, дефекты фосфолипазы Cγ2, семейная средиземноморская лихорадка, семейный гемофагоцитарный лимфогистиоцитоз типа 5, X-сцепленный лимфопролиферативный синдром 2, X-сцепленный лимфопролиферативный синдром 1, синдром Херманского-Пудлака); иммунные дефекты, которые включают дефекты селекции и активации Т и В-клеток, дефекты В-клеток и антител (например, вариабельный неклассифицируемый иммунодефицит типа 1, вариабельный неклассифицируемый иммунодефицит типа 8, агаммаглобулинемия, синдром гипер-IgM, синдром Вискотта-Олдрича, синдром Оменна, синдром гипер-IgE трихогепатоэнтерический синдром; синдром множественной гамартомы и неоплазии PTEN, синдром Хойераала Хрейдарссона); дефекты регуляции Т-клеток и иммунной регуляции (например, Х-сцепленная иммунная дисрегуляция, полиэндокринопатия, энтеропатия, дефекты передачи сигналов IL10); и дефекты кишечной иннервации (например, болезнь Гиршпринга).

Ведолизумаб, гуманизированное моноклональное антитело, которое специфически связывается с интегрином α₄β₇, показано для лечения пациентов с язвенным колитом от средней до тяжелой степени (ЯК) и болезнью Крона (БК). Ведолизумаб обладает новым механизмом действия, селективным для кишечника, который отличается от других биологических агентов, поступающих в продажу в настоящее время для лечения воспалительных заболеваний кишечника (ВЗК), включая натализумаб и антагонисты фактора некроза опухоли (TNF-α). Связываясь с интегрином α₄β₇, экспрессируемым на клеточной поверхности, ведолизумаб блокирует взаимодействие подмножества Т-лимфоцитов памяти, обитающих в кишечнике, с молекулой-1 адгезии клеток слизистой оболочки (MAdCAM-1), экспрессируемой на эндотелиальных клетках. Следовательно, миграция этих клеток в воспаленную ткань кишечника ингибируется.

Эффективность и безопасность индукционной и поддерживающей терапии с помощью ведолизумаба были продемонстрированы у взрослых пациентов с ЯК в исследовании GEMINI 1 (номер ClinicalTrials.gov, NCT00783718) и у пациентов с БК в исследовании GEMINI 2 (номер ClinicalTrials.gov, NCT00783692) и в исследовании GEMINI 3 (номер ClinicalTrials.gov, NCT01224171).

Совсем недавно в различных учреждениях по всему миру были проведены исследования с использованием ведолизумаба для лечения педиатрических пациентов. В одном исследовании пациенты получали ведолизумаб внутривенно в нулевую, вторую и шестую недели, а затем приблизительно каждые восемь недель. Доза ведолизумаба представляла собой фиксированную дозу 300 мг для 75% пациентов, но для остальных пациентов меньшего веса применялась доза, скорректированная по массе. Singh, et al., Inflamm. Bowel Dis., 22(9):2121-2126 (2016). В другом исследовании воспаление заболевание кишечника детей лечили в исследовании, включавшем детей в возрасте от 13 до 21 года. Лишь для взрослых была введена доза 300 мг в 0, 2 и 6 неделю с последующей поддерживающей фазой с интервалами в 8 недель. Пациенты весом менее 40 кг были исключены из исследования. Conrad, et al., Inflamm Bowel Dis., 22:2425-2431 (2016). В другом исследовании вводили взрослую дозу 300 мг 81% детей, принявшим участие в исследовании, тогда как другим детям (весом 28,5-48 кг) вводили уменьшенную дозу (3,6-10,3 мг/кг). Ledder et al., J. of Crohn’s and Colitis, 1230-1237 (2017). Таким образом, очевидно, что существует желание расширить применение ведолизумаба для лечения педиатрических пациентов. Однако существует потребность в разработке фиксированной дозы, которая подходит для меньших педиатрических пациентов. Многочисленные корректировки дозировки для маленького пациента, особенно очень молодого пациента в фазе жизни, известной быстрым ростом, представляют собой ненужное бремя и возможностью для ошибок. Фиксированная педиатрическая доза для маленьких пациентов имеет решающее значение для упрощения лечения этой группы пациентов и предотвращения возможности просчетов при расчете на основе веса.

Определения

Термин «педиатрический пациент/педиатрический пациент», используемый в данном документе, относится к пациенту-человеку в возрасте до 18 лет.

Используемый в контексте данного документа термин «остаточная» сывороточная концентрация антитела относится к концентрации непосредственно перед следующей дозой.

Используемый в контексте данного документа термин «клиническая ремиссия» или «ремиссия» применительно к субъектам, страдающим язвенным колитом, относится к общему баллу по шкале Мейо, меньшему или равному 2 баллам, при этом ни один из отдельных баллов по шкале не превышает 1 балла. «Клиническая ремиссия» при болезни Крона означает, что показатель индекса активности болезни Крона (CDAI), равный 150 баллам или менее, или показатель HBI, равный 4 или менее. Оценка CDAI учитывает такие факторы, как частота жидкого или очень мягкого стула, тяжесть боли в животе, общее самочувствие, внекишечные проявления заболевания, такие как артрит, ирит, эритремия, свищ или абсцесс или лихорадка, независимо от объемного образования брюшной полости, гематокрита и массы тела, а также того, принимает ли пациент противодиарейные препараты. «Индекс Харви-Брэдшоу» (HBI) является более простой версией CDAI для целей сбора данных. Он учитывает только клинические параметры, включая общее самочувствие, боль в животе, частота жидкого стула в день, объемное образование брюшной полости, гематокрит, массу тела, лекарства для контроля диареи и наличие осложнений, и для него требуется только одна запись в день в дневнике.

Магнитно-резонансная энтерография (MREn) рассматривается как способ измерения ремиссии.

«Эндоскопическая ремиссия» в контексте данного документа относится к состоянию с низким эндоскопическим показателем. Примером способа оценки эндоскопического показателя при язвенном колите является гибкая сигмоидоскопия. Эндоскопический показатель при язвенном колите может представлять собою частичный показатель Мейо. Примером способа оценки эндоскопического показателя при болезни Крона является илеоколоноскопия. Эндоскопическая оценка при болезни Крона может представлять собой простую эндоскопическую оценку при болезни Крона (SES-CD). SES-CD может включать такие измерения, как размер язвы, размер изъязвленной поверхности, размер пораженной поверхности, а также сужение и степень сужения пищеварительного канала.

Термин «клинический ответ» при использовании в контексте данного документа в отношении субъектов, страдающих язвенным колитом, относится к снижению полного показателя Мейо на 3 или более баллов и на 30% или более относительно исходного уровня (или частичного показателя Мейо на 2 или более баллов и 25% или больше относительно исходного уровня, если полный показатель Мейо не был получен при посещении) с сопутствующим уменьшением показателя ректального кровотечения на 1 или более баллов (≥1) или абсолютного показателя ректального кровотечения на 1 или менее балла (≤1). Термин «клинический ответ» при использовании в контексте данного документа применительно к субъектам, страдающим болезнью Крона, означает снижение показателя CDAI на 70 или более баллов по сравнению с исходным уровнем (неделя 0), снижение показателя SES-CD на 50% или более относительно исходного уровня или представляет собой показатель SES-CD от 0 до 2 сопровождающийся уменьшением боли в животе или снижением на 3 балла или более по сравнению с исходным показателем HBI. Термины «клинический ответ» и «ответ», например, отдельно без какого-либо прилагательного, используются в данном документе взаимозаменяемо.

«Эндоскопический ответ» при использовании в контексте данного документа относится к процентному снижению эндоскопического показателя по сравнению с исходным уровнем (например, при скрининге или непосредственно перед начальной дозой). При болезни Крона эндоскопический ответ можно оценить с помощью простого эндоскопического показателя для болезни Крона (SES-CD).

При использовании в контексте данного документа «базовый уровень» описывает значение параметра, которое измеряется до начальной дозы лечения. Он может относиться к измерению образца, полученного в тот же день, накануне, в течение недели до начального лечения, то есть в период времени до первой дозы, когда ожидается небольшое изменение до первой дозы, и значения измерения полученные после первой дозы можно сравнить с этим базовым значением, чтобы определить изменение, вызванное дозой.

При использовании в контексте данного документа, «заживление слизистой оболочки» в отношении пациентов с язвенным колитом, относится к эндоскопическому показателю Мейо, меньшему или равному 1. Что касается болезни Крона, заживление слизистой оболочки относится к улучшению относительно количества или тяжести ран на слизистых оболочках, например, пищеварительном тракте. Например, заживление слизистой оболочки может означать уменьшение количества, размера или тяжести одной или более язв в пищеварительном тракте. В другом примере заживление слизистой оболочки относится к уменьшению одного или более параметров, выбранных из группы, состоящей из толщины стенки, усиленного контраста стенки кишечника, отека стенок, изъязвления и периентериальной васкуляризации. Такое заживление слизистой оболочки может быть выражено в виде показателя SES-CD или показателя магнитно-резонансного индекса активности (MaRIA). Полное заживление слизистой оболочки при болезни Крона включает отсутствие изъязвления.

«PUCAI» или «Индекс активности язвенного колита у детей» в контексте данного документа относится к совокупности 6 клинических элементов, включая боль в животе, ректальное кровотечение, консистенцию стула в большинстве случаев, частота стула в течение 24 часов, стул в ночное время (любой эпизод, вызывающий пробуждение) и уровень активности. Показатель PUCAI варьирует от 0 до 85; оценка менее десяти означает ремиссию, от 10 до 34 легкое заболевание, от 35 до 64 умеренное заболевание и от 65 до 85 тяжелое заболевание. Клинически значимый ответ определен как изменение PUCAI, большее или равное 20.

Термин «клинический ответ на основе PUCAI» при использовании в контексте данного документа относится к снижению на двадцать и более баллов по сравнению с исходным показателем индекса активности язвенного колита у детей (PUCAI). Термин «клиническая ремиссия на основе PUCAI» при использовании в контексте данного документа относится к баллу PUCAI менее 10.

«Ухудшение заболевания» при использовании в контексте данного документа относится к увеличению PUCAI более чем на 20 баллов при двух последовательных посещениях с интервалом не менее семи дней, или PUCAI превышал 35 баллов при любом запланированном или внеплановом посещении (для субъектов с язвенным колитом); или увеличение PCDAI более чем на 15 баллов при двух последовательных посещениях с интервалом не менее семи дней, либо PCDAI превышал 30 баллов при любом запланированном или незапланированном посещении.

«PCDAI» при использовании в контексте данного документа относится к оценке, специально предназначенной для использования у детей. PCDAI включает специфичный для ребенка элемент: переменная скорости роста, а также 3 лабораторных параметра: гематокрит (с учетом возраста и пола), СОЭ и уровень альбумина. Показатель PCDAI может варьировать от 0 до 100, причем более высокие показатели означают более активное заболевание. Оценка менее десяти соответствует неактивному заболеванию, 11-30 соответствует легкому заболеванию, а более 30 соответствует заболеванию от умеренного до тяжелого. Снижение на 12,5 балла рассматривается как свидетельство улучшения. Клиническая ремиссия, основанная на PDCAI, представляет собой оценку PDCAI, меньшую или равную 10.

Используемая в контексте данного документа «Европейская визуальная аналоговая шкала (VAS) качества жизни по 5 показателям (EQ-5D)» относится к вопроснику, который является утвержденным инструментом (ahrq.gov/rice/eq5dproj.htm, “U.S. Valuation of the EuroQol EQ-5D™ Health States”, доступ к которому предоставлен 8 августа 2012 г., Bastida et al. BMC Gastroenterology 10:26- (2010), Konig et al. European Journal of Gastroenterology & Hepatology 14:1205-1215 (2002)), используемый для измерения общего связанного со здоровьем качества жизни (HRQOL) у пациентов и включает пять областей: мобильность, самообслуживание, обычные занятия, боль/дискомфорт и тревога/депрессия. Пациенты выбирают уровень проблем со здоровьем, которые у них есть в настоящее время по каждому пункту, как «Нет», «Умеренный» или «Экстремальный» и оценивают как 1, 2 или 3 балла соответственно. Составной балл EQ-5D можно рассчитать по отдельным баллам для общей оценки HRQOL. Показатель визуальной аналоговой шкалы (VAS) EQ-5D представляет собой самостоятельно поставленную оценку общего состояния здоровья с использованием визуальной вертикальной шкалы 20 см с оценкой 0 как наихудшее и 100 как наилучшее возможное состояние здоровья. Во многих исследованиях было показано, что EQ-5D и EQ-5D VAS являются подходящими и надежными инструментами для измерения HRQOL у пациентов с заболеваниями ЖКТ. Снижение на ≥0,3 балла оценки EQ-5D соответствует клинически значимому улучшению HRQOL у пациентов. Увеличение значения VAS EQ-5D на 7 баллов или более соответствует клинически значимому улучшению HRQOL у пациентов.

«Опросник для оценки воспалительных заболеваний кишечника» ((IBDQ)» (Irvine Journal of Pediatric Gastroenterology & Nutrition 28:S23-27 (1999)) используется для оценки качества жизни у взрослых пациентов с воспалительными заболеваниями кишечника, язвенным колитом или Болезнью Крона и включает в себя 32 вопроса по четырем направлениям HRQOL: Системы Кишечника (10 вопросов), Эмоциональная Функция (12 вопросов), Социальная Функция (5 вопросов) и Системная Функция (5 вопросов). Пациентов просят вспомнить симптомы и качество жизни за последние 2 недели и оценить каждый элемент по 7-балльной шкале Лайкерта (более высокие баллы соответствуют более высокому качеству жизни). Общий балл IBDQ рассчитывается путем суммирования баллов по каждой области; общий балл IBDQ варьируется от 32 до 224. Общий балл IBDQ, превышающий 170, характерен для качества жизни, связанного со здоровьем (HRQoL) пациентов с ремиссией.

Используемый в данном документе термин «индукционная терапия» представляет собой начальную стадию терапии, при которой пациенту вводят относительно интенсивный режим дозирования терапевтического агента. Терапевтический агент, например антитело, вводят таким образом, который быстро обеспечивает эффективное количество агента, подходящего для определенных целей, таких как индукция иммунной толерантности к агенту или для индукции клинического ответа и ослабления симптомов заболевания (см. WO 2012/151247 и WO 2012/151248, включенных в данный документ посредством ссылки).

При использовании в контексте данного документа, «поддерживающая терапия» применяется после индукционной терапии и вводится таким образом, чтобы продолжать ответ, достигнутый индукционной терапией со стабильным уровнем терапевтического агента, например антитела. Режим поддерживающей терапии может предотвратить возвращение симптомов или рецидив заболевания, например IBD (см. WO 2012/151247 и WO 2012/151248, включенных в данный документ посредством ссылки). Режим поддерживающей терапии может обеспечить пациенту удобство, например, представлять собой простой режимом дозирования или требовать нечастых поездок для лечения.

Молекула клеточной поверхности, «α4β7 интегрин» или «α4β7», представляет собой гетеродимер с α₄ цепью (CD49D, ITGA4) и β₇ цепью (ITGB7). Каждая цепь может образовывать гетеродимер с альтернативной цепью интегрина, чтобы образовать α₄β₁ или α_Eβ₇. Человеческие α₄ и β₇ гены (GenBank (National Center for Biotechnology Information, Bethesda, MD) RefSeq регистрационные номера NM_000885 и NM_000889, соответственно) экспрессируются В- и Т-лимфоцитами, в частности, CD4+ лимфоцитами памяти. Для многих интегринов характерно, что α4β7 могут существовать в состоянии покоя или в активированном состоянии. Лиганды для α4β7 включают васкулярную молекулу клеточной адгезии (VCAM), фибронектин и молекулу клеточной адгезии типа «аддрессин» в слизистых оболочках (MAdCAM (например, MAdCAM-1)). Интегрин α4β7 опосредует доставку лимфоцитов в слизистую оболочку ЖКТ и лимфоидную ткань, связанную с кишечником (GALT), посредством адгезивного взаимодействия с молекулой клеточной адгезии типа «аддрессин» в слизистых оболочках 1 (MAdCAM-1), которая экспрессируется на эндотелии брыжеечных лимфатических узлов и слизистой оболочки ЖКТ.

Термин «антитело» в данном документе используется в самом широком смысле и конкретно охватывает моноклональные антитела полной длины, иммуноглобулины, поликлональные антитела, полиспецифические антитела (например, биспецифичные антитела), образованные по меньшей мере из двух антител полной длины, например, каждого к отдельному антигену или эпитопу, и отдельные антигенсвязывающие фрагменты, включая dAb, scFv, Fab, F(ab)'₂, Fab', включая человека, гуманизированные и антитела вида, не относящегося к человеку, и рекомбинантные антигенсвязывающие формы, такие как монотела и диатела.

Используемый в данном документе термин «моноклональное антитело» относится к антителу, полученному из популяции в основном гомогенных антител, то есть отдельные антитела, составляющие популяцию, являются идентичными и/или связывают один и тот же эпитоп, за исключением возможных вариантов, которые могут возникать во время продуцирования моноклонального антитела, такие варианты обычно присутствуют в незначительных количествах. В отличие от препаратов поликлональных антител, которые обычно включают разные антитела, направленные против разных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело направлено против одной детерминанты на антигене. Модификатор «моноклональный» указывает на характер антитела, получаемого из в основном гомогенной популяции антител, и его не следует истолковывать как антитело требующее получения каким-либо конкретным способом. Например, моноклональные антитела для использования в соответствии с данным изобретением могут быть получены гибридомным способом, впервые описанным Kohler et al., Nature, 256:495 (1975), или могут быть получены методами рекомбинантной ДНК (см. например, патент США №4,816,567). «Моноклональные антитела» также могут быть выделены из библиотек фаговых антител с использованием методик, описанных в Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991) и Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991), например.

«Антигенсвязывающие фрагменты» антитела включают, по меньшей мере, вариабельные области тяжелой и/или легкой цепей антитела против α4β7. Например, антигенсвязывающий фрагмент ведолизумаба содержит аминокислотные остатки 20-131 гуманизированной последовательности легкой цепи SEQ ID NO: 2. Примеры таких антигенсвязывающих фрагментов включают фрагменты Fab, фрагменты Fab', фрагменты scFv и F(ab')₂ гуманизированного антитела, известные в данной области. Антигенсвязывающие фрагменты гуманизированного антитела по изобретению могут быть получены ферментативным расщеплением или рекомбинантными способами. Например, расщепление папаином или пепсином можно использовать для получения фрагментов Fab или F(ab')₂ соответственно. Антитела также могут быть получены в различных процессированных формах с использованием генов антител, в которых один или более стоп-кодонов были введены выше естественного стоп-сайта. Например, рекомбинантная конструкция, кодирующая тяжелую цепь фрагмента F(ab')₂, может быть сконструирована так, чтобы включать последовательности ДНК, кодирующие домен CH_I и шарнирную область тяжелой цепи. В одном аспекте антигенсвязывающие фрагменты ингибируют связывание интегрина α4β7 с одним или более его лигандами (например, молекулой клеточной адгезии типа «аддрессин» в слизистых оболочках в MAdCAM (например, MAdCAM-1), фибронектином).

Термины «Fc-рецептор» или «FcR» используются для описания рецептора, который связывается с Fc-областью антитела. В одном аспекте FcR представляет собой FcR человека с нативной последовательностью. В другом аспекте FcR представляет собой тот, который связывает антитело IgG (гамма-рецептор) и включает рецепторы подклассов FcγRI, FcγRII, и FcγRIII, включая аллельные варианты и альтернативно сплайсированные формы этих рецепторов. Рецепторы FcγRII включают FcγRIIA («активирующий рецептор») и FcγRIIB («ингибирующий рецептор»), которые имеют сходные аминокислотные последовательности, которые отличаются, главным образом, их цитоплазматическими доменами. Активирующий рецептор FcγRIIA содержит иммунорецепторный мотив активации на основе тирозина (ITAM) в своем цитоплазматическом домене. Ингибирующий рецептор FcγRIIB содержит иммунорецепторный мотив ингибирования на основе тирозина (ITIM) в своем цитоплазматическом домене. (См. обзор в M. Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997)). FcR рассматриваются в Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol 9:457-92 (1991); Capel et al., Immunomethods 4:25-34 (1994); и de Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126:33-41 (1995). Другие FcR, включая те, которые будут определены в будущем, охватываются термином «FcR» в данном документе. Термин также включает неонатальный рецептор FcRn, который отвечает за перенос материнских IgG к плоду (Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976) and Kim et al., J. Immunol. 24: 249 (1994)) и за регуляцию персистенции иммуноглобулина G (IgG) и альбумина в сыворотке (обзор Rath et al., J. Clin. Immunol. 33 Suppl 1:S9-17 (2013)).

Термин «гипервариабельная область» при использовании в данном документе относится к аминокислотным остаткам антитела, которые ответственны за связывание антигена и находятся в «вариабельном домене» каждой цепи. Гипервариабельная область обычно содержит аминокислотные остатки из «области, определяющей комплементарность» или «CDR» (например, остатки 24-34 (L1), 50-56 (L2) и 89-97 (L3) в вариабельном домене легкой цепи и 31-35 (H1), 50-65 (H2) и 95-102 (H3) в вариабельном домене тяжелой цепи; Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5^th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)) и/или эти остатки из «гипервариабельной петли» (например, остатки 26-32 (L1), 50-52 (L2) и 91-96 (L3) в вариабельном домене легкой цепи и 26-32 (H1)), 53-55 (H2) и 96-101 (H3) в вариабельном домене тяжелой цепи; Chothia and Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Остатки «Каркасной Области» или «FR» представляют собой остатки вариабельного домена, отличные от остатков гипервариабельной области, как определено в данном документе. Гипервариабельная область или ее CDR могут быть перенесены из одной цепи антитела в другую или в другой белок для придания антигенсвязывающей специфичности полученному (составному) антителу или связывающему белку.

«Выделенное» антитело представляет собой антитело, которое было идентифицировано и отделено и/или извлечено из компонента его естественной среды. В некоторых вариантах реализации изобретения, антитело будет очищено (1) до содержания белка более 95% массы как определено способом Лоури, и, альтернативно, до значения более 99% массы, (2) до степени достаточной для получения по меньшей мере 15 остатков N-концевой или внутренней аминокислотной последовательности с использованием секвенатора с вращающимся стаканом, или (3) до гомогенности с помощью ДНС-ПААГ при восстанавливающих и невосстанавливающих условиях с использованием кумасси синего или серебряного красителя. Выделенное антитело включает антитело in situ в рекомбинантных клетках, поскольку по меньшей мере один компонент природной среды антитела не будет присутствовать. Обычно, однако, выделенное антитело получают по меньшей мере с помощью одной стадии очистки.

«Лечение» относится как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или предупредительным мерам. К числу тех, кто нуждается в лечении, относятся те, у кого уже есть заболевание, а также те, у кого необходимо предотвратить заболевание или его рецидив. Следовательно, пациент, которого лечат в данном документе, может быть диагностирован как имеющий заболевание или может быть предрасположенным или восприимчивым к заболеванию. Термины «пациент» и «субъект» используются в данном документе взаимозаменяемо.

Термин «около» относится к следующему значению, которое может быть центральной точкой диапазона, например, это +/- 5% от значения. Если значение является относительным значением, приведенным в процентах, термин «около» также обозначает, что последующее значение может быть неточным, но является центральной точкой диапазона, который составляет +/- 5% от значения, при условии что верхнее значение предела диапазона не может превышать значение 100%.

Лечение Воспалительных Заболеваний Кишечника у Педиатрических Субъектов антителами против α4β7

В одном аспекте изобретение относится к способам лечения ВЗК (например, язвенного колита (ЯК), болезни Крона (БК)) у педиатрического субъекта, включающих в себя введение педиатрическому субъекту антитела против α4β7, описанного в данном документе, в количестве, эффективном для лечения ВЗК, например, у ребенка или подростка. Пациентом или педиатрическим субъектом может быть подросток или ребенок (например, от 2 до 17 лет включительно). Фармацевтическую композицию, содержащую антитело против α4β7, можно использовать, как описано в данном документе, для лечения ВЗК у педиатрического пациента, страдающего от него. Педиатрический пациент может иметь умеренной или выраженной активности ЯК или БК. Например, педиатрический пациент может иметь полный балл по шкале Мейо от 6 до 12 и общий показатель по подшкале Майо по частоте стула и ректальному кровотечению ≥4 и по эндоскопической части ≥2, или иметь БК умеренной или выраженной активности, определяемую как простой эндоскопический индекс активности болезни Крона (SES-CD) ≥7, и компоненты Индекса Активности Болезни Крона (CDAI) средней суточной оценки боли в животе >1 за 7 дней до, и общее количество жидкого/очень мягкого стула >10 за 7 дней до первой дозы лечения, описанного в данном документе. В некоторых вариантах реализации изобретения, ЯК, которым страдает педиатрический пациент, является проксимальным к прямой кишке, например панколит, не ограничиваясь проктитом. В некоторых вариантах реализации изобретения, БК, которой страдает педиатрический пациент, затрагивает подвздошную кишку и/или толстую кишку. В некоторых вариантах реализации изобретения педиатрический пациент также страдает от структурирования и проникновения заболевания в слизистые оболочки. Педиатрический пациент, страдающий ЯК или БК, может иметь нарушение роста.

В некоторых вариантах реализации изобретения у педиатрического пациента, страдающего БК, имеется мутация в гене 2, содержащем нуклеотидсвязывающий домен олигомеризации (NOD2/CARD15) (NCBI GeneID №64127, номер доступа в GenBank более длинной изоформы NM_022162, и более короткой изоформой NM_01293557). В некоторых вариантах реализации изобретения у пациента, страдающего БК, в циркуляции находится антинейтрофильное цитоплазматическое антитело или антитело против Saccharomyces cerevisiae.

В одном аспекте педиатрический пациент представляет собой пациента в возрасте 18 лет или моложе. В некоторых вариантах реализации изобретения педиатрический пациент представляет собой пациента в возрасте от около 2 до около 17 лет, от около 2 до около 14 лет, от около 2 до около 10 лет, от около 2 до около 8 лет, от около 10 до около 18 лет, от около 8 до около 14 лет, от около 11 до около 15 лет или от около 13 до около 17 лет.

Антитело против α4β7 для использования в способах или применениях, представленных в данном документе, может связываться с эпитопом в цепи a4 (например, гуманизированное MAb 21,6 (Bendig et al., Патент США №5,840,299), в цепи β7 (например, FIB504 или гуманизированное производное (например, Fong et al., патент США №7,528,236)) или комбинаторным эпитопом, образованным в результате ассоциации цепи α4 с цепью β7. В одном аспекте антитело является специфичным для комплекса интегрина α4β7, например, связывает комбинаторный эпитоп на комплексе α4β7, но не связывает эпитоп на цепи α4 или цепи β7, если цепи не ассоциированы друг с другом. Ассоциация интегрина α4 с интегрином β7 может формировать комбинаторный эпитоп, например, путем сближения остатков, присутствующих на обеих цепях, которые вместе составляют эпитоп, или путем конформационного размещения на одной цепи, например, цепи интегрина α4 или цепи интегрина β7, эпитопного сайта связывания, который недоступен для связывания антитела в отсутствие подходящего партнера интегрина или в отсутствие активации интегрина. В другом аспекте антитело против α4β7 связывает как цепь интегрина α4, так и цепь интегрина β7 и, таким образом, является специфичным для комплекса интегринов α4β7. Комбинаторные эпитопные антитела против α4β7 могут, например, связывать α4β7, но не связывать a4β1 и/или не связывать α_Eβ7. В другом аспекте антитело против α4β7 связывается с тем же или по существу тем же эпитопом, что и антитело Act-1 (Lazarovits, A. I. et al., J. Immunol., 133(4): 1857-1862 (1984), Schweighoffer et al., J. Immunol., 151(2): 717-729, 1993; Bednarczyk et al., J. Biol. Chem., 269(11): 8348-8354, 1994). Мышиная гибридомная клеточная линия ACT-1, которая продуцирует мышиное моноклональное антитело Act-1, была депонирована в соответствии с положениями Будапештского договора 22 августа 2001 года от имени Millennium Pharmaceuticals, Inc., 40 Landsdowne Street, Cambridge, Mass, 02139, США, в Американской коллекции типовых культур, 10801 University Boulevard, Manassas, Va. 20110-2209, США, под номером доступа PTA-3663. В другом аспекте антитело против α4β7 представляет собой антитело человека или белок, связывающий α4β7, с использованием CDR, предоставленных в публикации заявки на патент США №2010/0254975.

В одном аспекте антитело против α4β7 ингибирует связывание α4β7 с одним или более его лигандами (например, слизистым адресином, например, MAdCAM (например, MAdCAM-1), фибронектином и/или сосудистым адресином (VCAM)). MAdCAM приматов описаны в публикации РСТ WO 96/24673, полное описание которой включено в данный документ посредством ссылки. В другом аспекте антитело против α4β7 ингибирует связывание α4β7 с MAdCAM (например, MAdCAM-1) и/или фибронектином без ингибирования связывания VCAM. В одном аспекте анти-интегрин, например, антитело против α4β7, имеет специфичность связывания, например, содержит определяющие комплементарность области мышиного антитела Act-1. Например, антитело против α4β7 содержит тяжелую цепь, которая содержит 3 области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (CDR, CDR1, SEQ ID NO: 4, CDR2, SEQ ID NO: 5 и CDR3, SEQ ID NO: 6) мышиного антитела Act-1 и подходящие каркасные области тяжелой цепи человека; и также содержит легкую цепь, которая содержит 3 CDR легкой цепи (CDR1, SEQ ID NO: 7, CDR2, SEQ ID NO: 8 и CDR3, SEQ ID NO: 9) мышиного антитела Act-1 и подходящую каркасные области легкой цепи человека. В некоторых вариантах реализации изобретения антитело против α4β7 представляет собой изотип IgG1. В других вариантах реализации изобретения антитело против α4β7 представляет собой изотип IgG2, IgG3 или IgG4.

В одном аспекте антитела против α4β7 для применения в лечении представляют собой гуманизированные версии мышиного антитела Act-1. Подходящие способы получения гуманизированных антител хорошо известны в данной области техники. Как правило, гуманизированное антитело против α4β7 будет содержать тяжелую цепь, которая содержит 3 области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (CDR, CDR1, SEQ ID NO: 4, CDR2, SEQ ID NO: 5 и CDR3, SEQ ID NO: 6) мышиного антитела против Act-1 и подходящие каркасные области тяжелой цепи человека; и также содержать легкую цепь, которая содержит 3 CDR легкой цепи (CDR1, SEQ ID NO: 7, CDR2, SEQ ID NO: 8 и CDR3, SEQ ID NO: 9) мышиного антитела Act-1 и подходящие каркасные области легкой цепи человека. Гуманизированное антитело Act-1 может содержать любые подходящие каркасные области человека, включая консенсусные каркасные области, с аминокислотными заменами или без них. Например, одну или более каркасных аминокислот можно заменить другой аминокислотой, такой как аминокислота в соответствующем положении в мышином антителе Act-1. Константная область человека или ее часть, если она присутствует, может быть получена из легких цепей κ или λ и/или тяжелых цепей γ (например, γ1, γ2, γ3, γ4), μ, α (например, α1, α2), δ или ε антител человека, включая аллельные варианты. Конкретная константная область (например, IgG1), ее вариант или части могут быть выбраны для того, чтобы адаптировать эффекторную функцию. Например, мутированная константная область (вариант) может быть включена в слитый белок для минимизации связывания с Fc-рецепторами и/или способности фиксировать комплемент (см., например, Winter et al., GB 2,209,757 B; Morrison et al., WO 89/07142; Morgan et al., WO 94/29351, 22 декабря, 1994). Гуманизированные версии антитела Act-1 описаны в публикациях PCT № WO 98/06248 и WO 07/61679, полное содержание каждой из которых включены в данный документ посредством этой ссылки.

В одном аспекте антитело против α4β7 представляет собой ведолизумаб. Ведолизумаб (также называемый MLN0002, ENTYVIO™ или KYNTELES™) представляет собой гуманизированное mAb иммуноглобулина (Ig) G1, нацеленное против интегрина α4β7 лимфоцитов человека. Ведолизумаб связывает интегрин α4β7, противодействует его присоединению к MAdCAM-1 и, как таковой, ухудшает миграцию таргетирующих кишечник лейкоцитов в слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта. Ведолизумаб является антагонистом рецептора интегрина, показанным для взрослых пациентов с умеренно-тяжелой активностью ЯК или БК, которые имели неадекватный ответ, потерю ответа или имели непереносимость относительно блокатора фактора некроза опухоли (TNF) или иммуномодулятора, или имели неадекватный ответ, имели непереносимость или продемонстрировали зависимость относительно кортикостероидов. В случае ЯК ведолизумаб предназначен для индукции и поддержания клинического ответа, индукции и поддержания клинической ремиссии, улучшения результата эндоскопического исследования слизистой оболочки и/или достижения ремиссии без кортикостероидов. В случае БК ведолизумаб предназначен для достижения клинического ответа, достижения клинической ремиссии и/или достижения ремиссии без кортикостероидов. В некоторых вариантах реализации изобретения ремиссия без кортикостероидов достигается посредством режима с постепенным снижением дозы при продолжении лечения ведолизумабом.

В другом аспекте гуманизированное антитело против α4β7 для применения в лечении содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислоты с 20 по 140 SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислоты с 20 по 131 SEQ ID NO: 2 или аминокислоты с 21 по 132 SEQ ID NO: 3. При желании может присутствовать подходящая человеческая константная область(и). Например, гуманизированное антитело против α4β7 может содержать тяжелую цепь, которая содержит аминокислоты с 20 по 470 SEQ ID NO: 1, и легкую цепь, содержащую аминокислоты с 21 по 239 SEQ ID NO: 3. В другом примере гуманизированное антитело против α4β7 может содержать тяжелую цепь, которая содержит аминокислоты с 20 по 470 SEQ ID NO: 1, и легкую цепь, содержащую аминокислоты с 20 по 238 SEQ ID NO: 2. Гуманизированная легкая цепь ведолизумаба (например, Chemical Abstract Service (CAS, American Chemical Society), регистрационный номер 943609-66-3) с двумя мышиными остатками, замененными на человеческие остатки, является более гуманизированной, чем легкая цепь LDP-02, другого гуманизированного антитела против α4β7. Кроме того, LDP-02 имеет несколько гидрофобный, гибкий аланин 114 и гидрофильный участок (аспартат 115), который заменен в ведолизумабе на слегка гидрофильный гидроксилсодержащий треонин 114 и гидрофобный, потенциально обращенный внутрь остаток валина 115.

Дальнейшими заменами последовательности гуманизированного антитела против α4β7 могут быть, например, мутации в каркасных областях тяжелой и легкой цепей, такие как мутация изолейцина в валин в остатке 2 SEQ ID NO: 10; мутация метионина в валин в остатке 4 SEQ ID NO: 10; мутация аланина в глицин в остатке 24 SEQ ID NO: 11; мутация аргинина в лизин в остатке 38 SEQ ID NO: 11; мутация аланина в аргинин в остатке 40 SEQ ID NO: 11; мутация метионина в изолейцин в остатке 48 SEQ ID NO: 11; мутация изолейцина в лейцин в остатке 69 SEQ ID NO: 11; мутация аргинина в валин в остатке 71 SEQ ID NO: 11; мутация треонина в изолейцин в остатке 73 SEQ ID NO: 11; или любая их комбинация; и замена CDR тяжелой цепи на CDR (CDR1, SEQ ID NO: 4, CDR2, SEQ ID NO: 5 и CDR3, SEQ ID NO: 6) мышиного антитела Act-1; и замена CDR легкой цепи на CDR легкой цепи (CDR1, SEQ ID NO: 7, CDR2, SEQ ID NO: 8 и CDR3, SEQ ID NO: 9) мышиного антитела Act-1.

В одном аспекте гуманизированное антитело против α4β7 для применения при лечении педиатрического пациента-человека входит в состав стабильного препарата, содержащего смесь невосстанавливающего сахара, антитела против α4β7 и, по меньшей мере, одной свободной аминокислоты (т.е. не присоединенной к белку), и имеющего молярное соотношение невосстанавливающего сахара к антителу против α4β7 (моль: моль) превышает 650:1. Препарат может представлять собой жидкий препарат или сухой препарат (например, лиофилизированный). Препарат также может содержать буферный агент. В некоторых вариантах реализации изобретения невосстанавливающий сахар представляет собой маннит, сорбит, сахарозу, трегалозу или любую их комбинацию.

В некоторых вариантах реализации изобретения свободная аминокислота в препарате представляет собой гистидин, аланин, аргинин, глицин, глутаминовую кислоту или любую их комбинацию. Препарат может содержать от около 50 мМ до около 175 мМ свободной аминокислоты. Препарат может содержать от около 100 мМ до около 175 мМ свободной аминокислоты. Молярное соотношение свободной аминокислоты к антителу может составлять, по меньшей мере, 250:1, или от 200:1 до 500:1, или от 250:1 до 400:1.

Препарат также может содержать поверхностно-активное вещество. Поверхностно-активное вещество может представлять собой полисорбат 20, полисорбат 80, полоксамер или любую их комбинацию. Поверхностно-активное вещество может иметь концентрацию от около 0,2 мг/мл до 2,5 мг/мл, от около 0,4 мг/мл до 0,9 мг/мл, то около 0,5 мг/мл до 0,8 мг/мл, от около 1,8 мг/мл до 2,2 мг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация поверхностно-активного вещества составляет около 0,6 мг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация поверхностно-активного вещества составляет около 0,75 мг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация поверхностно-активного вещества составляет около 2,0 мг/мл.

В некоторых аспектах препарат может минимизировать иммуногенность антитела против α4β7.

Препарат, например, в высушенном состоянии, может быть стабильным в течение по меньшей мере трех месяцев при температуре 40°C, относительной влажности 75% (RH). В высушенном состоянии лиофилизированный препарат имеет от около 0,5% до 10%, от около 0,8% до 7,5%, от около 1% до 5%, ≤5%, ≤4%, ≤3% или ≤2,5% влаги, например, при определении с помощью анализа Карла Фишера. При восстановлении, например, после хранения при температуре 25°C, 30°C или 2-8°C, стабильный лиофилизированный препарат содержит около 0% -10% агрегированного антитела против α4β7 (например, димеры, тримеры или мультимерные формы антител и/или продукты разложения антител, при измерении способом эксклюзионной хроматографии). В некоторых вариантах реализации изобретения хранящийся восстановленный лиофилизированный препарат антитела против α4β7 содержит от около 0% до 5,0%, от 0% до 2%, ≤2%, ≤1% или ≤0,5% агрегатов.

В другом аспекте препарат является лиофилизированным и содержит, по меньшей мере, от около 5% до около 10% мас./об. антитела против α4β7 перед лиофилизацией. Препарат может содержать по меньшей мере около 6% мас./об. антитела против α4β7 перед лиофилизацией. Препарат может быть восстановлен из лиофилизированного препарата (например, восстановлен для получения стабильного жидкого препарата). Высушенный препарат антитела против α4β7 содержит от около 25% до 35% мас./мас. или от около 29% до 32% мас./мас. антитела против α4β7. Высушенный препарат антитела против α4β7 может дополнительно содержать от около 30% до 65% мас./мас., от около 40% до 60%, от около 45% до 55% или от 50% до 52% мас/мас восстанавливающего сахара, такого как сахароза или трегалоза. Высушенный препарат антитела против α4β7 может дополнительно содержать от 5% до 20% мас./мас. или от 10% до 15% мас./мас. соли аминокислоты, такой как гидрохлорид аргинина. Высушенный препарат может дополнительно содержать от около 1% до 10% мас./мас., от около 2% до 7% мас./мас. или от около 4% до 6% мас./мас. буфера, например гистидинового. В некоторых вариантах реализации изобретения высушенный препарат содержит от около 30% до 31% мас./мас. антитела против α4β7, например, ведолизумаба, от около 50% до 52% мас./мас. сахарозы и от около 12% до 14% мас/мас гидрохлорида аргинина. Вышеуказанные высушенные препараты могут дополнительно содержать от около 0,25% до 0,4% мас./мас. или от около 0,9% до 1,2% мас./мас. полисорбата 80.

В другом аспекте изобретение относится к лечению педиатрического пациента стабильным препаратом, содержащим смесь невосстанавливающего сахара, антитела против α4β7 и, по меньшей мере, одной свободной аминокислоты, а также иметь молярное соотношение невосстанавливающего сахара к антителу против α4β7 (моль : моль) превышает 650:1, а соотношение свободной аминокислоты к антителу против α4β7 (моль : моль) превышает 250:1.

В другом аспекте изобретение относится к лечению педиатрического пациента стабильным препаратом, содержащим смесь невосстанавливающего сахара, антитела против α4β7 и, по меньшей мере, одной свободной аминокислоты, а также иметь молярное соотношение невосстанавливающего сахара к антителу против α4β7 (моль : моль) превышает 650:1, а соотношение свободной аминокислоты к антителу против α4β7 (моль : моль) превышает 250:1.

В другом аспекте изобретение относится к лечению педиатрического пациента стабильным жидким препаратом, например, перед лиофилизацией или после восстановления растворителем, содержащим в водном растворе невосстанавливающий сахар, антитело против α4β7 и, по меньшей мере, одну свободную аминокислоту, при этом молярное отношение невосстанавливающего сахара к антителу против α4β7 (моль : моль) превышает 650:1. В еще одном дополнительном аспекте изобретение относится к жидкому препарату, содержащему, по меньшей мере, от около 40 мг/мл до около 80 мг/мл антитела против α4β7, по меньшей мере, около 50-175 мМ одной или более аминокислот и, по меньшей мере, от около 6% до около 11% (мас./об.) сахара. Жидкий препарат также может содержать буферный агент. Буферный агент может представлять собой гистидин, сукцинат, фосфат, глицин или цитрат. В некоторых вариантах реализации изобретения жидкий препарат также содержит хелатор металла. В некоторых вариантах реализации изобретения жидкий препарат также содержит антиоксидант, такой как цитрат. В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация цитрата составляет от около 5 мМ до 40 мМ, от около 7 мМ до 10 мМ или от около 20 мМ до 30 мМ. В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация цитрата составляет 25 мМ. В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация цитрата составляет 9,4 мМ.

В другом аспекте изобретение относится к лечению педиатрического пациента жидким препаратом, содержащим, по меньшей мере, около 60 мг/мл антитела против α4β7, по меньшей мере, около 10% (мас./об.) невосстанавливающего сахара и, по меньшей мере, около 125 мМ одной или более свободных аминокислот. В некоторых вариантах реализации изобретения жидкий препарат содержит около 60 мг/мл антитела против α4β7.

В другом аспекте изобретение относится к лечению педиатрического пациента жидким препаратом, содержащим, по меньшей мере, около 60 мг/мл антитела против α4β7, по меньшей мере, около 10% (мас./об.) невосстанавливающего сахара и, по меньшей мере, около 175 мМ одной или более свободных аминокислот.

В еще одном дополнительном аспекте изобретение также относится к лечению педиатрического пациента сухим, например, лиофилизированным препаратом, содержащим смесь невосстанавливающего сахара, антитела против α4β7, гистидина, аргинина и полисорбата 80, и имеющим молярное соотношение невосстанавливающего сахара к антителу против α4β7 (моль : моль), превышающее 650:1.

В еще одном дополнительном аспекте изобретение относится к лечению педиатрического пациента лиофилизированным препаратом, содержащим смесь невосстанавливающего сахара, антитела против α4β7, гистидина, аргинина и полисорбата 80. В этом аспекте молярное соотношение невосстанавливающего сахара к антителу против α4β7 (моль : моль) превышает 650:1.

Кроме того, молярное соотношение аргинина к антителу против α4β7 (моль : моль) в препарате превышает 250:1, или мольное соотношение гистидина и аргинина к антителу (моль : моль) составляет от около 200:1 до около 500:1.

В другом аспекте изобретение относится к лечению педиатрического пациента стабильным жидким фармацевтическим препаратом, содержащим смесь антитела против α4β7, цитрата, гистидина, аргинина и полисорбата 80. Препарат может содержаться в емкости, такой как флакон, картридж, шприц или автоинъектор. В некоторых вариантах реализации изобретения жидкий препарат содержит, по меньшей мере, около 120 мг/мл антитела против α4β7, по меньшей мере, около 140 мг/мл антитела против α4β7, от 140 мг/мл до 250 мг/мл антитела против α4β7, от 140 мг/мл до 175 мг/мл антитела против α4β7 или от 150 мг/мл до 170 мг/мл антитела против α4β7. В других вариантах реализации изобретения жидкий препарат содержит около 160 мг/мл антитела против α4β7.

В одном аспекте гуманизированное антитело против α4β7 для применения в лечении педиатрического пациента является лиофилизированым и хранится в виде однократной дозы в одной емкости, например, во флаконе. Емкость, например флакон, хранится в холодильнике, например, при температуре около 2-8°C или при комнатной температуре, например, при температуре от около 20°C до 35°C, около 25°C или около 30°C, до тех пор, пока ее содержимое не будет введено субъекту, нуждающемуся в этом. Флакон может, например, представлять собой флакон объемом 10, 20 или 50 см³ (например, для дозы 60 мг/мл). Емкость, например флакон, может содержать от около 90 до 115 мг, от около 95 до 105 мг, по меньшей мере, около 100 мг, от около 135 до 160 мг, от около 145 до 155 мг, по меньшей мере, около 150 мг, от около 180 до 220 мг, от около 190 до 210 мг, от около 195 до 205 мг, по меньшей мере, около 200 мг, от около 280 до 320 мг, от около 290 до 310 мг, по меньшей мере, около 300 мг, от около 380 до 420 мг, от около 390 до 410 мг, по меньшей мере, около 400 мг, от около 580 до 620 мг, от около 590 до 610 мг или, по меньшей мере, около 600 мг антитела против α4β7. В одном аспекте флакон содержит около 200 мг антитела против α4β7. Флакон может содержать достаточное количество антитела против α4β7, например, ведолизумаба, для обеспечения возможности доставки, например, сконструирован для доставки, около 100 мг, около 150 мг, около 200 мг, около 300 мг, около 400 мг или около 600 мг антитела против α4β7. Например, флакон может содержать на около 15%, на около 12%, на около 10% или на около 8% больше антитела против α4β7, чем количество дозы.

В другом аспекте антитело против α4β7, например, ведолизумаб, для применения при лечении педиатрического пациента находится в стабильном жидком фармацевтическом препарате, хранящемся в контейнере, например, флаконе, шприце или картридже, при температуре около 2-8°С, пока он не будет введен субъекту, нуждающемуся в этом. Шприц или картридж может иметь объем 1 мл или 2 мл (например, для дозы 160 мг/мл) или более 2 мл, например, для более высокой дозы (по меньшей мере, 320 мг или 400 мг или более). Шприц или картридж может содержать, по меньшей мере, около 20 мг, по меньшей мере, около 50 мг, по меньшей мере, около 70 мг, по меньшей мере, около 80 мг, по меньшей мере, около 100 мг, по меньшей мере, около 108 мг, по меньшей мере, около 120 мг, по меньшей мере, около 155 мг, по меньшей мере, около 180 мг, по меньшей мере, около 200 мг, по меньшей мере, около 240 мг, по меньшей мере, около 300 мг, по меньшей мере, около 360 мг, по меньшей мере, около 400 мг или, по меньшей мере, около 500 мг антитела против α4β7. В некоторых вариантах реализации изобретения емкость, например шприц или картридж, может быть изготовлен для доставки от около 20 мг до 120 мг, от около 40 мг до 70 мг, от около 45 мг до 65 мг, от около 50 мг до 57 мг или около 54 мг антитела против α4β7, например, ведолизумаба. В других вариантах реализации изобретения шприц или картридж могут быть изготовлены для доставки от около 90 до 120 мг, от около 95 до 115 мг, от около 100 до 112 мг или около 108 мг антитела против α4β7, например, ведолизумаба. В других вариантах реализации изобретения шприц или картридж могут быть изготовлены для доставки от около 140 до 250 мг, от около 150 до 200 мг, от около 160 до 170 мг, от около 160 до 250 мг, от около 175 мг до 210 мг или около 160 мг, около 165 мг, около 180 мг или около 200 мг антитела против α4β7, например, ведолизумаба.

В данном изобретении в одном аспекте предложен способ лечения педиатрического пациента с воспалительным заболеванием кишечника (ВЗК) с помощью антитела против α4β7, например, ведолизумаба. В этом аспекте способ включает введение внутривенной дозы ведолизумаба. Доза может составлять 100 мг, 150 мг, 200 мг или 300 мг антитела против α4β7. В некоторых вариантах реализации изобретения доза будет подобрана исходя из веса пациента. В одном аспекте педиатрический пациент весит 30 кг или более. В другом аспекте педиатрический пациент весит менее 30 кг. В некоторых вариантах реализации изобретения педиатрический пациент, который весит 30 кг или более, весит от около 30 до 35 кг, от около 30 до 40 кг, от около 35 до 45 кг, от около 40 до 45 кг, от около 30 до 50 кг или от около 40 до 50 кг. В других вариантах реализации изобретения педиатрический пациент, который весит менее 30 кг, весит от около 5 кг до 30 кг, от около 10 кг до 15 кг, от около 15 кг до 20 кг, от около 10 кг до 20 кг, от около 12 кг до 22 кг, от около 10 до 25 кг, от около 15 до 30 кг или от около 10 кг до 30 кг.

В некоторых вариантах реализации изобретения педиатрический пациент весом менее 30 кг можно вводить дозу 100 мг или 200 мг антитела против α4β7. В некоторых вариантах реализации изобретения педиатрический пациент весом 30 кг или более можно вводить дозу 150 мг или 300 мг антитела против α4β7.

Антитело против α4β7 вводят в эффективном количестве, которое ингибирует связывание интегрина α4β7 с его лигандом. Для терапии эффективное количество будет достаточным для достижения желаемого эффекта в виде ответа или ремиссии (например, как определено в данном документе). Антагонист α4β7, такой как антитело против α4β7, можно вводить в виде единичной дозы или нескольких доз. Примеры способов введения включают местные пути введения, такие как назальное или ингаляционное или трансдермальное введение, энтеральные пути, такие как введение с помощью питательной трубки или суппозитория, и парентеральные пути, такие как внутривенное, внутримышечное, подкожное, внутриартериальное, внутрибрюшинное или внутривитреальное введение. Подходящие дозировки для антител могут составлять от около 0,1 мг/кг массы тела до около 10,0 мг/кг массы тела, от около 1 мг/кг до около 60 мг/кг массы тела, от около 5 мг/кг до около 30 мг/кг массы тела, от около 6,5 мг/кг до около 20 мг/кг массы тела, или, по меньшей мере, 15 мг/кг или, по меньшей мере, 20 мг/кг массы тела при лечении.

Удивительно, что введение фиксированной дозы 100 мг, 150 мг или 200 мг, например, из лекарственной формы, например флакона, изготовленного для доставки от около 95 до 110 мг, 100 мг, 108 мг, 145 мг, 155 мг, 150 мг, от 155 мг до 170 мг, от 190 до 210 мг или 200 мг антитела против α4β7, например, ведолизумаба, маленькому педиатрическому пациенту, например, от 5 кг до 35 кг, от 10 кг до 30 кг, или менее 30 кг, является безопасным. В этих вариантах реализации изобретения самым маленьким пациентам можно вводить по меньшей мере 20 мг/кг антитела против α4β7, причем уровень дозы беспрецедентен при терапевтическом использовании антитела против α4β7, например, ведолизумаба, при этом самым маленьким взрослым вводят от 5 до 7 мг/кг антитела против α4β7, используя лекарственную форму 300 мг. Тем не менее, исследование на ювенильных обезьянах показало безопасность антитела против α4β7, например, ведолизумаба, в дозах до 100 мг/кг.

В некоторых вариантах реализации изобретения антитело против α4β7, такое как ведолизумаб, предоставляется в виде сухого лиофилизированного препарата, который для введения может быть восстановлен с помощью жидкости, такой как стерильная вода. Введение восстановленного препарата может представлять собой парентеральную инъекцию одним из способов, описанных выше. Внутривенная инъекция может представлять собой инфузию, например, с помощью дальнейшего разбавления стерильным изотоническим солевым раствором, буфером, например, фосфатным солевым буферным раствором или раствором Рингера (с лактатом или декстрозой). В некоторых вариантах реализации изобретения антитело против α4β7 вводят с помощью подкожной инъекции, например, в дозе около 54 мг, 108 мг, или около 165 мг, или около 216 мг, примерно каждые две, три или четыре недели после начала терапии или после третьей последовательной дозы.

В некоторых вариантах реализации изобретения ведолизумаб вводят с помощью одной или более внутривенных инъекций, подкожных инъекций или инфузий. В некоторых вариантах реализации изобретения ведолизумаб вводят в дозе 40 мг, 50 мг, 60 мг, 70 мг, 75 мг, 80 мг, 90 мг, 100 мг, 120 мг, 125 мг, 150 мг, 200 мг, 300 мг, 450 мг, 600 мг, 45-125 мг, 80-120 мг, 125-250 мг или 90-210 мг. В некоторых вариантах реализации изобретения ведолизумаб вводят, например, подкожно, в дозе 0,5 мг/кг, 1,0 мг/кг, 1,5 мг/кг, 2,0 мг/кг, 2,5 мг/кг, 3,0 мг/кг, 4,0 мг/кг или 5,0 мг/кг в дозе 54 мг, 108 мг, 216 мг, 160 мг, 165 мг, 320 мг или 480 мг. Ведолизумаб можно вводить один раз в день, один раз в неделю, один раз в месяц или один раз в год. Режим дозирования ведолизумаба может иметь начальную или индукционную фазу и поддерживающую фазу. Индукционная фаза может представлять собой одну или более чем одну, например две, три или четыре дозы, в больших количествах или без длительных периодов времени, например, лишь одна неделя, две недели, три недели или четыре недели между каждой дозой. Например, режим индукции может включать две дозы, одну в день (неделю) ноль и одну в неделю 2 (день 14). Поддерживающая фаза, например, для поддержания ремиссии ВЗК, может включать более низкие дозы или дозы с более длительным интервалом, чем в фазе индукции. В некоторых вариантах реализации изобретения поддерживающее дозирование представляет собой дозирование каждые 4 недели, каждые 6 недель, каждые 8 недель, каждые 10 недель или каждые 12 недель. В некоторых вариантах реализации изобретения ведолизумаб вводят в недели ноль, два и шесть (индукция), а затем каждые четыре недели или каждые восемь недель (поддержание). Педиатрическим пациентам с ВЗК, невосприимчивым к другим способам лечения, могут потребоваться более длительные индукционные периоды, например, 8, 10, 12 или 14 недель, до начала поддерживающей терапии.

В одном варианте реализации изобретения ведолизумаб вводят внутривенно в недели ноль, два и шесть, и затем субъекты, которые не достигают клинического ответа (на основе PUCAI/PCDAI) на неделе 14, получат двойную дозу на неделе 14 (например, пациент, получающий дозы 100 мг в недели 0, 2 и 6, который не достиг клинического ответа на неделе 14, будет получать дозу 200 мг на неделе 14, пациент, получающий дозы 150 мг на недели 0, 2 и 6, который не достиг клинического ответа на неделе 14, будет получать дозу 300 мг на 14 неделе).

В одном варианте реализации изобретения ведолизумаб вводят внутривенно в недели ноль, два, шесть и 14. В некоторых вариантах реализации изобретения ведолизумаб вводят внутривенно в недели ноль, два, шесть и 14, затем каждые четыре или восемь недель. В некоторых вариантах реализации изобретения ведолизумаб вводят внутривенно в недели ноль, два, шесть, десять и 14, затем каждые четыре или восемь недель. В некоторых вариантах реализации изобретения ведолизумаб вводят один или более раз, а затем, спустя, по меньшей мере, один месяц, по меньшей мере, шесть месяцев или, по меньшей мере, один год, ведолизумаб снова вводят один или более раз.

В некоторых вариантах реализации изобретения 100 или 150 мг ведолизумаба могут быть введены путем внутривенной инфузии в недели ноль, два, шесть, четырнадцать, а затем с интервалом в восемь недель, 200 или 300 мг, соответственно (т.е. вдвое больше предыдущей дозы), ведолизумаба могут быть введены внутривенно. В некоторых вариантах реализации изобретения 100 или 150 мг ведолизумаба могут быть введены путем внутривенной инфузии в недели ноль, два и шесть, а затем с интервалом в четыре недели, 200 или 300 мг, соответственно (т.е. вдвое больше предыдущей дозы), ведолизумаба могут быть введены внутривенно. В некоторых вариантах реализации изобретения 100 или 150 мг ведолизумаба могут быть введены путем внутривенной инфузии в недели ноль и два, а затем на неделе шесть, 200 или 300 мг соответственно (т.е. вдвое больше предыдущей дозы), ведолизумаба могут быть введены путем внутривенной инфузии, и затем с интервалами в четыре или восемь недель могуть быть введены 200 или 300 мг ведолизумаба внутривенно. В некоторых вариантах реализации изобретения, если педиатрический пациент проходит лечение с помощью ведолизумаба в недели ноль, 2, 6 и 14 с использованием дозы, подобранной с учетом веса менее 30 кг, и во время лечения вес возрастает до 30 кг или более, тогда педиатрический пациент может проходить лечение с использованием дозы, подобранной для более высокого веса.

В некоторых вариантах реализации изобретения у педиатрического пациента, который проходит лечение низкой, подобранной с учетом веса (150 мг для субъектов 30 кг или более; 100 мг для субъектов менее 30 кг) дозой антитела против α4β7, доза может быть увеличена для получения более высокой дозы относительной веса (300 мг для субъектов 30 кг и более; 200 мг для субъектов менее 30 кг), если у пациента наблюдается ухудшение заболевания.

В некоторых вариантах реализации изобретения 200 или 300 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии в недели ноль и два, 200 или 300 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии на неделе шесть, а затем с интервалами две, три или четыре недели ведолизумаб можно вводить подкожно, например, в дозе 54, 108, 165 или 216 мг. В некоторых вариантах реализации изобретения 100 или 150 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии в недели ноль и два, 200 или 300 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии в недели шесть и 14, а затем с интервалами две, три или четыре недели ведолизумаб можно вводить подкожно, например, в дозе 54, 108, 165 или 216 мг. В некоторых вариантах реализации изобретения 100 или 150 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии в недели ноль и два, 200 или 300 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии в неделю шесть, а затем с интервалами две, три или четыре недели ведолизумаб можно вводить подкожно, например, в дозе 54, 108, 165 или 216 мг.

В некоторых вариантах реализации изобретения 100 или 200 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии пациенту весом менее 30 кг или от 10 кг до менее 30 кг в недели ноль и два, 100 или 200 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии в неделю шесть, а затем с интервалами одна, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять или десять недель ведолизумаб можно вводить подкожно, например, в дозе 54, 108, 165 или 216 мг. В некоторых вариантах реализации изобретения подкожная доза составляет 54 мг. В других вариантах реализации изобретения подкожная доза составляет 108 мг.

В некоторых вариантах реализации изобретения 100 или 200 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии пациенту весом менее 30 кг или от 10 кг до менее 30 кг в недели ноль и два, 54, 108, 165 или 216 мг ведолизумаба можно вводить подкожно в неделю шесть, а затем с интервалами одна, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять или десять недель ведолизумаб можно вводить подкожно, например, в дозе 54, 108, 165 или 216 мг. В некоторых вариантах реализации изобретения подкожная доза составляет 54 мг. В других вариантах реализации изобретения подкожная доза составляет 108 мг.

В некоторых вариантах реализации изобретения 300 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии педиатрическому пациенту весом 30 кг или более в недели ноль, два и шесть, а затем с интервалами одна, две, три или четыре недели ведолизумаб можно вводить подкожно, например, в дозе 108 мг или 216 мг.

В некоторых вариантах реализации изобретения 300 мг ведолизумаба можно вводить путем внутривенной инфузии педиатрическому пациенту весом 30 кг или более в недели ноль и два, а затем в неделю 6, после этого с интервалами одна, две, три или четыре недели ведолизумаб можно вводить подкожно, например, в дозе 108 мг или 216 мг.

Интервал между подкожными дозами может быть короче для более крупных педиатрических пациентов, например, с весом 30 кг или более, таким образом они получают подкожную дозу с интервалами от 1 до 6 недель, и больше для более мелких педиатрических пациентов, например, с весом менее 30 кг или от 10 кг до менее 30 кг, таким образом они получают подкожную дозу с интервалом от 3 до 10 недель.

В некоторых вариантах реализации изобретения способ лечения, доза или режим дозирования снижает вероятность того, что у пациента разовьется ответ HAHA на антитело против α4β7. Развитие HAHA, например, при измерении с помощью антител, реагирующих на антитело против α4β7, может увеличить клиренс антитела против α4β7, например, снизить концентрацию антитела против α4β7 в сыворотке, например, снизить количество антитела против α4β7, связанного с интегрином α4β7, что делает лечение менее эффективным. В некоторых вариантах реализации изобретения для предотвращения HAHA пациент может проходить лечение в индукционном режиме, а затем в поддерживающим режиме. В некоторых вариантах реализации изобретения отсутствует перерыва между режимом индукции и режимом поддержания. В некоторых вариантах реализации изобретения режим индукции включает введение пациенту множества доз антитела против α4β7. Для предотвращения HAHA пациент может проходить лечение с высокой начальной дозой, например, по меньшей мере, 1,5 мг/кг, по меньшей мере, 2 мг/кг, по меньшей мере, 2,5 мг/кг, по меньшей мере, 3 мг/кг, по меньшей мере, 5 мг/кг, по меньшей мере, 8 мг/кг, по меньшей мере, 10 мг/кг, от около 5 до 25 мг/кг, от около 6 до 20 мг/кг или от около 2 до около 6 мг/кг, или частыми начальными введениями, например, около одного раза в неделю, около раза в две недели или около раза в три недели стандартной дозы при начале терапии с помощью антитела против α4β7. В некоторых вариантах реализации изобретения способ лечения поддерживает статус HAHA-отрицательных для по меньшей мере 30%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90% или по меньшей мере 95% пациентов. В других вариантах реализации изобретения способ лечения поддерживает статус пациентов как HAHA-отрицательных в течение, по меньшей мере, 6 недель, по меньшей мере, 10 недель, по меньшей мере, 15 недель, по меньшей мере, шести месяцев, по меньшей мере, 1 года, по меньшей мере, 2 лет или в течение продолжительности терапии. В некоторых вариантах реализации изобретения пациенты или, по меньшей мере, 30%, по меньшей мере, 40%, по меньшей мере, 50% или, по меньшей мере, 60% пациентов, у которых развивается HAHA, поддерживают низкий титр, например, ≤125, антитела против α4β7. В одном варианте реализации изобретения способ лечения поддерживает статус, по меньшей мере, 70% пациентов как HAHA-отрицательных в течение, по меньшей мере, 12 недель после начала терапии с помощью антитела против α4β7.

Доза антитела против α4β7 может быть введена индивидууму (например, человеку) отдельно или в сочетании с другим агентом. Дозу можно вводить до, вместе с или после введения дополнительного агента. В одном варианте реализации изобретения вводят более чем один препарат, который ингибирует связывание интегрина α4β7 с его лигандами. В таком варианте реализации изобретения может быть введен агент, например моноклональное антитело, такое как моноклональное антитело против MAdCAM (например, против MAdCAM-1) или против VCAM-1. В другом варианте реализации изобретения дополнительный агент ингибирует связывание лейкоцитов с эндотелиальным лигандом по пути, отличному от пути α4β7. Такой агент может ингибировать связывание, например, лимфоцитов, экспрессирующих рецептор 9 хемокинов (C-C мотив) (CCR9) с экспрессируемым тимусом хемокином (TECK или CCL25), или агент предотвращает связывание LFA-1 с молекулой межклеточной адгезии (ICAM). Например, антитело против TECK или против CCR9 или низкомолекулярный ингибитор CCR9, такой как ингибиторы, раскрытые в публикации РСТ WO 03/099773 или WO 04/046092, или антитело против ICAM-1 или олигонуклеотид, который предотвращает экспрессию ICAM, вводится в дополнение к препарату согласно данному изобретению. В еще одном варианте реализации изобретения дополнительный активный ингредиент (например, противовоспалительное соединение, такое как сульфасалазин, азатиоприн, метотрексат, 6-меркаптопурин, противовоспалительные средства, содержащие 5-аминосалициловую кислоту, другое нестероидное противовоспалительное соединение, стероидное противовоспалительное соединение или антибиотики, обычно вводимые для контроля ВЗК (например, ципрофлоксацин, метронидазол), пробиотики или другой биологический агент (например, антагонисты TNF альфа), можно вводить в сочетании с препаратом согласно данному изобретению.

В одном варианте реализации изобретения доза лекарственного средства, вводимого совместно, может быть уменьшена в течение периода лечения с помощью антитела против α4β7. Например, пациент, который проходит лечение с помощью стероида (например, преднизон, преднизолон, будесонид) в начале или перед лечением с помощью антитела против α4β7, будет проходить лечение в режиме снижения дозы стероида, начиная с 2 недель или 6 недель лечения препаратом антитела против α4β7. Доза стероида будет снижена на около 25% в течение 4-8 недель после начального снижения дозы, на 50% через около 8-12 недель и на 75% спустя около 12-16 недель после снижения дозы во время лечения препаратом антитела против α4β7. В одном аспекте через около 16-24 недель лечения с помощью антитела против α4β7 дозу стероида можно устранить. В другом примере пациент, который проходит лечение с помощью противовоспалительного соединения, такого как 6-меркаптопурин, в начале или перед лечением препаратом антитела против α4β7, будет проходить лечение в режиме снижения дозы противовоспалительного соединения, аналогичном режиму снижения дозы стероидов, как описано выше. В других вариантах реализации изобретения доза кортикостероида >20 мг/день может быть уменьшена со скоростью 5 мг/неделю до 20 мг/день для педиатрических пациентов весом 40 кг или более или до 0,5 мг/день для педиатрических пациентов весом менее 40 кг. В других вариантах реализации изобретения доза кортикостероида <20 мг/день может быть снижена со скоростью 5 мг/неделю до 10 мг/день для педиатрических пациентов весом 40 кг или более или снижена до 0,25 мг/день для педиатрических пациентов весом менее 40 кг. В некоторых вариантах реализации изобретения между 6 до 14 неделями лечения с помощью антитела против α4β7 доза кортикостероида может быть дополнительно уменьшена со скоростью 5 мг/неделю до 10 мг/день, затем со скоростью 2,5 мг/неделю до полного устранения кортикостероида.

Доза антитела против α4β7, например, путем внутривенной инфузии, может быть введена педиатрическому пациенту в течение около 20 минут, около 25 минут, около 30 минут, около 35 минут, около 40 минут, около 60 минут, около 90 минут, или около 120 минут. В некоторых вариантах реализации изобретения для педиатрического пациента весом 20 кг или более время инфузии составляет от около 30 до 60 минут. Введение может быть более медленным для педиатрического пациента, имеющего низкий вес (например, менее 20 кг). В некоторых вариантах реализации изобретения для педиатрического пациента весом менее 20 кг, время инфузии составляет около 2 часов.

Режим дозирования может быть оптимизирован, чтобы вызвать клинический ответ и клиническую ремиссию при воспалительном заболевании кишечника у пациента. В некоторых вариантах реализации изобретения у педиатрического пациента, страдающего ЯК, достигается клинический ответ, основанный на полном показателе Мейо, к 6 неделе, 8 неделе, 10 неделе, 12 неделе, 14 неделе или 22 неделе после начала лечения с помощью антитела против α4β7. В некоторых вариантах реализации изобретения у педиатрического пациента, страдающего БК, достигается клинический ответ, основанный на показателе CDAI, к 6 неделе, 8 неделе, 10 неделе, 12 неделе, 14 неделе или 22 неделе после начала лечения с помощью антитела против α4β7. В некоторых вариантах реализации изобретения у педиатрического пациента с ЯК достигается клинический ответ с уменьшением на 20 баллов или более от исходного уровня показателя PUCAI и/или клиническая ремиссия при показателе PUCAI менее чем 10 к неделе 6, неделе 8, неделе 10, неделе 12, неделе 14 или неделе 22 после начала лечения с помощью антитела против α4β7. В некоторых вариантах реализации изобретения педиатрический пациент с БК достигает клинического ответа при снижении на 15 или более баллов по сравнению с исходным уровнем показателя PCDAI с общим PCDAI 30 или менее и/или клинической ремиссии при показателе PCDAI 10 или менее к неделе 6, неделе 8, неделе 10, неделе 12, неделе 14 или неделе 22 после начала лечения с помощью антитела против α4β7. В некоторых вариантах реализации изобретения уровень ремиссии для педиатрических пациентов с БК основан на таких компонентах CDAI как боль в животе, например, 1 балл или менее в течение предыдущих 7 дней, частота стула, например, десять или менее стулов в течение предыдущих 7 дней, и показателе SES-CD при эндоскопии, например, менее 4, по меньшей мере, снижение на 2 балла по сравнению с исходным уровнем и отсутствие оценки выше 1 для любого отдельного значения.

В некоторых вариантах реализации изобретения применение антитела против α4β7 для лечения педиатрического пациента, страдающего ВЗК, увеличивает рост пациента. Например, пациент может иметь увеличение по сравнению с исходным уровнем роста, веса и индекса массы тела. В другом примере, при определении с помощью шкалы Таннера, показателем клинической реакции педиатрического пациента на лечение с помощью антитела против α4β7 может быть достижение стадии V по шкале Таннера (Marshall and Tanner, Arch. Dis. Child. 44:291-303 (1969) Marshall and Tanner, Arch. Dis. Child. 45:13-23 (1970)) до 16 лет (у пациентов женского пола) или до 17 лет (у пациентов мужского пола). В некоторых вариантах реализации изобретения применение антитела против α4β7 для лечения педиатрического пациента, страдающего ВЗК, приводит к заживлению слизистой оболочки. В некоторых вариантах реализации изобретения применение антитела против α4β7 для лечения педиатрического пациента, страдающего ВЗК, уменьшает или устраняет необходимость в госпитализации и/или хирургической резекции пораженной ткани слизистой оболочки, такой как ткань толстой кишки или прямой кишка. В некоторых вариантах реализации изобретения применение кортикостероидов при лечении педиатрического пациента, страдающего ВЗК, с помощью антитела против α4β7, снижается до прекращения к 48 неделе лечения, описанного в данном документе. В некоторых вариантах реализации изобретения применение антитела против α4β7 для лечения педиатрического пациента, страдающего БК, обеспечивает заживление фистулы. В некоторых вариантах реализации изобретения режим дозирования не изменяет соотношение CD4 к CD8 в спинномозговой жидкости пациентов, проходящих лечение.

В некоторых аспектах может быть достигнута длительная клиническая ремиссия, например, клиническая ремиссия, которая сохраняется по меньшей мере в течение двух, по меньшей мере трех, по меньшей мере четырех посещений лечащего врача в течение шести месяцев или одного года после начала лечения с оптимизированным режимом дозирования.

В некоторых аспектах длительный клинический ответ, например клинический ответ, который сохраняется в течение, по меньшей мере, 6 месяцев, по меньшей мере, 9 месяцев, по меньшей мере, года после начала лечения, может быть достигнут с оптимизированным режимом дозирования.

Способ может дополнительно включать измерение массы тела пациента. Вес тела может быть определен до лечения антителом против α4β7, например, ведолизумабом, то есть на исходном уровне, или может быть измерен в другое время во время лечения, например, при мониторинге реакции пациента. В одном аспекте данное изобретение относится к способу лечения ВЗК, например язвенного колита или болезни Крона, у педиатрического пациента с высоким весом с применением более высокой дозы (например, 150 мг, 300 мг) антитела против α4β7, например, ведолизумаба. В одном аспекте данное изобретение относится к способу лечения ВЗК, например язвенного колита или болезни Крона, у педиатрического пациента с низким весом с применением более низкой дозы (например, 100 мг, 200 мг) антитела против α4β7, например, ведолизумаба.

У педиатрического пациента может отсутствовать адекватный ответ, утрачиваться ответ или быть непереносимость лечения с помощью 5-аминосалициловой кислоты или ее производного, иммуномодулятора, антагониста TNF-α, кортикостероида или их комбинациями. Педиатрический пациент мог не проходить лечение с помощью антагониста TNF-α до лечения, описанного в данном документе, например, с помощью антитела против α4β7. Педиатрический пациент ранее мог проходить лечение воспалительного заболевания кишечника и имел неадекватный ответ или потерю ответа по меньшей мере на один кортикостероид (например, преднизон или будесонид). Неадекватный ответ на кортикостероиды относится к признакам и симптомам постоянно активного заболевания, несмотря на наличие в анамнезе по меньшей мере одного 4-недельного индукционного режима, который включал дозу, эквивалентную 30 мг преднизона ежедневно перорально в течение 2 недель или внутривенно в течение 1 недели. Потеря ответа на кортикостероиды относится к двум неудачным попыткам снизить дозу кортикостероидов ниже, чем 10 мг преднизона ежедневно перорально. Непереносимость кортикостероидов включает наличие в анамнезе синдрома Кушинга, остеопении/остеопороза, гипергликемии, бессонницы и/или инфекции.

Педиатрический пациент мог испытывать недостаток адекватного ответа, потерю ответа или непереносимость лечения с помощью иммуномодулятора. Иммуномодулятор может представлять собой, например, пероральный азатиоприн, 6-меркаптопурин или метотрексат. Неадекватный ответ на иммуномодулятор относится к признакам и симптомам стойко активного заболевания, несмотря на наличие в анамнезе по меньшей мере одного 8-недельного режима перорального приема азатиоприна (≥1,5 мг/кг), 6-меркаптопурина (≥0,75 мг/кг) или метотрексата (≥12,5 мг/неделя). Непереносимость иммуномодулятора включает, но не ограничивается этим, тошноту/рвоту, боль в животе, панкреатит, аномалии LFT, лимфопению, генетическую мутацию TPMT и/или инфекцию.

В одном аспекте у субъекта может отсутствовать адекватный ответ, утрачиваться ответа или быть непереносимость лечения с помощью антагониста TNF-α. Антагонист TNF-α представляет собой, например, агент, который ингибирует биологическую активность TNF-α и, предпочтительно, связывает TNF-α, такой как моноклональное антитело, например, REMICADE (инфликсимаб), HUMIRA (адалимумаб), CIMZIA (цертолизумаб пегол), SIMPONI (голимумаб) или циркулирующий слитый белок с рецептором, такой как ENBREL (этанерцепт). Неадекватный ответ на антагонист TNF-α относится к признакам и симптомам постоянно активного заболевания, несмотря на наличие в анамнезе по меньшей мере одного 4-недельного режима индукции инфликсимабом 5 мг/кг в/в, 2 дозы с интервалом не менее 2 недель; одной подкожной дозы 80 мг адалимумаба, затем одной дозы 40 мг с интервалом не менее двух недель; или 400 мг подкожно цертолизумаба пегола, 2 дозы с интервалом не менее 2 недель. Потеря ответа на антагонист TNF-α относится к рецидиву симптомов во время поддерживающего дозирования после предшествующего клинического эффекта. Непереносимость антагониста TNF-α включает, но не ограничивается этим, реакцию, связанную с инфузией, демиелинизацию, застойную сердечную недостаточность и/или инфекцию.

Потеря поддержания ремиссии, при использовании в контексте данного документа, у пациентов с язвенным колитом, относится к увеличению показателя Мейо, по меньшей мере, на 3 балла и модифицированного показателя Барона, по меньшей мере, на 2.

Способы, описанные выше в отношении лечения педиатрического субъекта, страдающего ВЗК, также применяются к способам лечения антагонистом α4β7-интегрина, таким как антитело против α4β7, например, ведолизумаб, педиатрического пациента с риском развития GvHD, педиатрического пациента, имеющего GvHD, педиатрического пациента с моногенным дефектом с ВЗК-подобной патологией, педиатрического пациента с болезнью накопления гликогена типа 1b, педиатрического пациента страдающего колитом, связанным с потерей функции IL10 и мутациями в рецепторах IL10 или IL10, педиатрического пациента, имеющего X-сцепленный лимфопролиферативный синдром 2 (дефект в гене XIAP), педиатрического пациента с синдромом IPEX, вызванным мутациями в факторе транскрипции FOXP3, педиатрического пациента с очень ранним началом воспалительного заболевания кишечника (начало <6 лет), педиатрического пациента с неуточненным колитом (НК) и педиатрического пациента с хроническим гранулематозным колитом.

Изменения в способе лечения педиатрических пациентов с GvHD подробно описаны ниже.

Лечение педиатрических пациентов с заболеванием трансплантат против хозяина (GvHD) с использованием антитела против α 4 β 7

В одном аспекте изобретение относится к способу лечения педиатрического пациента с риском развития GvHD, включающему стадии a. кондиционирование иммунной системы пациента для трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, b. введение антитела против α4β7, например гуманизированного антитела, обладающего специфичностью связывания с интегрином α4β7 человека, например, в дозе 100 мг или 200 мг педиатрическим пациентам весом менее 30 кг или в дозе 150 мг или 300 мг педиатрическим пациентам весом от 30 кг и более, с. ожидание не менее 12 часов, d. введение аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, e. ожидание тринадцать дней, затем введение второю дозы антитела против α4β7 и f. ожидание четыре недели, затем введение третьей дозы антитела против α4β7.

В другом аспекте изобретение относится к способу подавления иммунного ответа у педиатрического пациента больного раком, при этом способ включает стадии: введения пациенту-человеку, подвергающемуся аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (алло-HSCT), антитела против α4β7, например гуманизированного антитела, обладающего специфичностью связывания с интегрином α4β7 человека, при этом антитело вводят пациенту в соответствии со следующим режимом дозирования: а. начальная доза 100 или 200 мг для педиатрических пациентов весом менее 30 кг или доза 150 мг или 300 мг антитела для педиатрических пациентов весом 30 кг или более в виде внутривенной инфузии за день до алло-HSCT; b. последующая вторая доза 100 или 200 мг для педиатрических пациентов весом менее 30 кг или доза 150 мг или 300 мг антитела для педиатрических пациентов весом 30 кг или более в виде внутривенной инфузии через около две недели после первоначальной дозы; с. последующая третья доза 100 или 200 мг для педиатрических пациентов весом менее 30 кг или в дозе 150 мг или 300 мг антитела для педиатрических пациентов весом 30 кг или более в виде внутривенной инфузии примерно через шесть недель после начальной дозы. В другом аспекте изобретение относится к способу лечения педиатрического пациента, страдающего GvHD, например, острой GvHD, возникающей после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, с использованием антагониста интегрина α4β7, такого как антитело против α4β7, например, ведолизумаб. В некоторых вариантах реализации изобретения педиатрическому пациенту вводят антитело против α4β7, например гуманизированное антитело, обладающее специфичностью связывания в отношении интегрина α4β7 человека, при этом антитело вводят пациенту в соответствии со следующим режимом дозирования: a. начальная доза 100 или 200 мг для педиатрических пациентов весом менее 30 кг или доза 150 мг или 300 мг для педиатрических пациентов весом 30 кг или более, с последующей дозой через две недели, третьей дозой через шесть недель после начальной дозы, четвертой дозой через десять недель после начальной дозы и пятой дозой через четырнадцать недель после начальной дозы.

В некоторых вариантах реализации изобретения, после указанных выше доз, связанных с GvHD, дальнейшее лечение педиатрического пациента, например, в течение от шести месяцев до года, с помощью 100 или 200 мг педиатрических пациентов весом менее 30 кг или дозы 150 мг или 300 мг для педиатрических пациентов весом 30 кг и более, может поддерживать ингибирование GvHD. В некоторых вариантах реализации изобретения для поддержания ингибирования GvHD можно использовать подкожное введение доз педиатрическому пациенту в размере 54 мг, 108 мг, 160 мг, 165 мг, 216 мг или 250 мг антитела против α4β7 каждые 1-10 недель.

Фармакокинетические и Фармакодинамические Анализы

Концентрация антитела против α4β7, например, ведолизумаба, может быть измерена любым подходящим способом, известным специалистам в данной области техники. В одном аспекте концентрацию ведолизумаба измеряют с помощью сэндвич-иммуноферментного анализа (ИФА). В другом аспекте при проведении фармакодинамического анализа, ингибирование связывания MAdCAM-1-Fc с клетками периферической крови, экспрессирующими α₄β₇, с помощью антитела против α4β7, например, ведолизумаба, в крови, используют в качестве меры степени насыщения α₄β₇ антителом против α4β7, например, ведолизумабом.

В одном варианте реализации изобретения количество антитела против α4β7, например, в сыворотке, может быть измерено в фармакокинетическом анализе. Иммобилизованная фаза, такая как микротитровальный планшет, сосуд или бусина, покрыта реагентом, который специфически связывается с антителом против α4β7. Иммобилизованный реагент приводят в контакт с образцом пациента, например сывороткой, которая может содержать или не содержать антитело против α4β7. После инкубации и промывки антитело против α4β7, формирующее комплекс с реагентом для покрытия, контактирует с реагентом, который связывается с захваченным антителом и может быть обнаружен, например, с использованием метки, такой как пероксидаза хрена (HRP). Связывающий реагент может представлять собой античеловеческое антитело, например, поликлональное или моноклональное, которое связывается с Fc-частью антитела против α4β7. Добавление субстрата HRP, такого как 3,3',5,5'-тетраметилбензидин (TMB), может обеспечить накопление сигнала, такого как развитие цвета, который может быть измерен, например, спектрофотографически.

В некоторых вариантах реализации изобретения реагент для покрытия представляет собой антиидиотипическое антитело, которое специфически связывается с антителом против α4β7, например, его вариабельной областью или ее частью, содержащей одну или более CDR, таких как CDR3 тяжелой цепи, SEQ ID NO: 6. Антиидиотипическое антитело против α4β7 для использования в анализе может быть специфичным и, следовательно, связывать интегрин-α4β7-связывающую часть антитела против α4β7, но не специфичным для Fc-части антитела против α4β7 и, таким образом, не связывает Fc-часть антитела против α4β7. Антиидиотипическое антитело против α4β7 для использования в анализе может быть специфичным и, следовательно, связывать вариабельную область тяжелой и/или легкой цепи антитела против α4β7, например, выбранную из группы, состоящей из аминокислот от 20 до 140 SEQ ID NO: 1, аминокислот от 20 до 131 SEQ ID NO: 2 и аминокислот от 21 до 132 SEQ ID NO: 3. Антиидиотипическое антитело против α4β7 для использования в анализе может быть специфичным и, следовательно, связывать антигенсвязывающий фрагмент антитела против α4β7.

Антиидиотипическое антитело может быть выделено при процессе иммунизации с использованием антитела против α4β7 или его интегрин-связывающей части α4β7, такой как фрагмент антитела, содержащий одну или более CDR, и использоваться как выделенное или полученное рекомбинантным способом. В некоторых вариантах реализации изобретения антиидиотипическое антитело против α4β7 продуцируется против иммуногена, содержащего CDR3 тяжелой цепи, SEQ ID NO: 6. В других вариантах реализации изобретения антиидиотипическое антитело против α4β7 продуцируется против иммуногена, содержащего вариабельную область тяжелой и/или легкой цепи антитела против α4β7, например, выбранного из группы, состоящей из аминокислот от 20 до 140 SEQ ID NO: 1, аминокислот от 20 до 131 SEQ ID NO: 2 и аминокислот от 21 до 132 SEQ ID NO: 3. В некоторых вариантах реализации изобретения антиидиотипическое антитело представляет собой моноклональное антитело. В некоторых вариантах реализации изобретения в анализе используется фрагмент scFv антиидиотипического антитела. В других вариантах реализации изобретения интактное антиидиотипическое антитело используется в анализе.

Продуцирование антиидиотипического антитела против α4β7 может происходить следующими общими способами. Иммунизацию подходящего животного (например, мыши, крысы, кролика или овцы) белком, например антителом против α4β7 или его связывающей интегрин α4β7 частью, или слитым белком, содержащим эту часть, можно проводить с помощью иммуногена, приготовленного для инъекции для индукции ответа, например, с адъювантом, например, полным адъювантом Фрейнда. Другие подходящие адъюванты включают адъювант TITERMAX GOLD® (CYTRX Corporation, Los Angeles, CA) и квасцы. Небольшие пептидные иммуногены, такие как фрагмент, содержащий CDR, такой как CDR3 тяжелой цепи, могут быть связаны с более крупной молекулой, такой как гемоцианин лимфы улитки. Мышам можно проводить инъекции различными способами, например, подкожно, внутривенно или внутримышечно в нескольких местах, например в брюшину (в/б), у основания хвоста или в подушечку стопы, или в комбинации мест, например, в/б и в основание хвоста. Бустерные инъекции могут включать один и тот же или другой иммуноген и могут дополнительно содержать адъювант, например неполный адъювант Фрейнда. Обычно, когда желательно получить моноклональное антитело, гибридому получают путем слияния подходящей клетки из иммортализованной линии клеток (например, линии клеток миеломы, такой как SP2/0, P3X63Ag8.653 или гетеромиеломы) с клетками, продуцирующими антитела. Антителопродуцирующие клетки могут быть получены из периферической крови или, предпочтительно, селезенки или лимфатических узлов животных, иммунизированных интересующим антигеном. Клетки, которые продуцируют антитела, могут быть получены с использованием подходящих способов, например, с помощью слияния человеческой антитело-продуцирующей клетки и гетеромиеломы или триомы или с помощью иммортализации активированной человеческой В-клетки посредством инфицирования вирусом Эпштейна-Барра. (См., например, патент США №6,197,582 (Trakht); Niedbala et al., Hybridoma, 17:299-304 (1998); Zanella et al., J Immunol Methods, 156:205-215 (1992); Gustafsson et al., Hum Antibodies Hybridomas, 2:26-32 (1991).) Слитые или иммортализованные клетки, продуцирующие антитела (гибридомы), могут быть выделены с использованием селективных условий культивирования и клонированы путем предельного разведения. Клетки, которые продуцируют антитела с желаемой специфичностью, могут быть идентифицированы с использованием подходящего анализа (например, ИФА (например, с иммуногеном, иммобилизованным в лунке микротитровального планшета).

Антитело против α4β7 или антиидиотипическое антитело против α4β7 может быть получено путем экспрессии последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих каждую цепь в живых клетках, например клетках в культуре. Для экспрессии молекул антител согласно изобретению можно использовать множество векторных систем для экспрессии в хозяине. Такие системы для экспрессии в хозяине представляют собой носители, с помощью которых кодирующие последовательности, представляющие интерес, могут быть получены и впоследствии очищены, но также представляют собой клетки, которые могут при трансформации или трансфекции соответствующими нуклеотидными кодирующими последовательностями экспрессировать антитело против α4β7 in situ. К ним относятся, но не ограничиваются этим, микроорганизмы, такие как бактерии (например, E.coli, B. subtilis), трансформированные рекомбинантными бактериофаговыми ДНК, плазмидными ДНК или космидными ДНК-векторами экспрессии, содержащими кодирующие последовательности антител; дрожжи (например, Saccharomyces, Pichia), трансформированные рекомбинантными дрожжевыми экспрессирующими векторами, содержащими кодирующие последовательности антител; системы клеток насекомых, инфицированные рекомбинантными экспрессирующими вирусными векторами (например, бакуловирусом), содержащими кодирующие последовательности антител; системы растительных клеток, инфицированные рекомбинантными экспрессирующими вирусными векторами (например, вирусом мозаики цветной капусты, CaMV; вирусом табачной мозаики, TMV) или трансформированные рекомбинантными плазмидными экспрессирующими векторами (например, плазмидами Ti), содержащими последовательности, кодирующие антитела; или клеточные системы млекопитающих (например, клетки COS, CHO, BHK, 293, 3T3, NS0), содержащие рекомбинантные экспрессирующие конструкции, содержащие промоторы, полученные из генома клеток млекопитающих (например, промотор металлотионеина) или вирусов млекопитающих (например, поздний промотор аденовируса; промотор вируса осповакцины 7,5К). Например, клетки млекопитающих, такие как клетки яичника китайского хомячка (СНО), в сочетании с вектором, таким как большой промежуточный ранний промоторный элемент гена из цитомегаловируса человека, представляет собой эффективную систему экспрессии для антител (Foecking et al., Gene 45:101 (1986); Cockett et al., Bio/Technology 8:2 (1990)).

В бактериальных системах ряд векторов экспрессии может быть преимущественно выбран в зависимости от применения, предназначенного для экспрессируемой молекулы антитела. Например, когда необходимо получить большое количество такого белка, для создания фармацевтических композиций молекулы антитела могут быть желательны векторы, которые управляют экспрессией высоких уровней продуктов слитого белка, который легко очищаются. Такие векторы включают, но не ограничиваются этим, вектор экспрессии E.coli pUR278 (Ruther et al., EMBO J. 2:1791 (1983)), в котором кодирующая последовательность антитела может быть лигирована индивидуально в вектор в рамке считывания с кодирующей областью lac Z, таким образом, что образуется слитый белок; векторы pIN (Inouye & Inouye, Nucleic Acids Res. 13:3101-3109 (1985); Van Heeke & Schuster, J. Biol. Chem. 24:5503-5509 (1989)); и тому подобное. Векторы pGEX также можно использовать для экспрессии чужеродных полипептидов в виде слитых белков с глутатион-S-трансферазой (GST). Как правило, такие слитые белки растворимы и могут быть легко очищены от лизированных клеток путем адсорбции и связывания с матриксными гранулами глутатион-агарозы с последующим элюированием в присутствии свободного глутатиона. Векторы pGEX конструируют таким образом, чтобы они содержали протеазные сайты расщепления тромбина или фактора Ха, чтобы клонированный продукт целевого гена мог отсоединяться от фрагмента GST. В системе насекомых Autographa californica вирус ядерного полиэдроза (AcNPV) используется в качестве вектора для экспрессии чужеродных генов. Вирус растет в клетках Spodoptera frugiperda. Кодирующая последовательность антитела может быть индивидуально клонирована в несущественные области (например, ген полиэдрина) вируса и помещена под контроль промотора AcNPV (например, промотора полиэдрина).

В других вариантах реализации изобретения реагент для покрытия представляет собой лиганд антитела, такого как MAdCAM или его интегрин-α4β7-связывающий фрагмент, или гибридный белок, содержащий связывающий интегрин α4β7 фрагмент MAdCAM, слитый с белком, не являющимся MAdCAM, таким как константный домен иммуноглобулина G. Примеры реагентов MAdCAM и слитых белков описаны в публикации РСТ WO 9624673 и патенте США №7,803,904, полное описание которых включено в данный документ посредством ссылки.

Исследование HAHA

Активность человеческого анти-антитела против α4β7 (HAHA - human anti- anti-α4β7 antibody activity) можно определить путем обнаружения и/или измерения антител против лекарственных средств (ADA - anti-drug antibodies) или антител, специфичных к антителу против α4β7 (антитела против ведолизумаба). Существует ряд вариантов, например, использование скрининга и анализа с помощью титрования, анализа подтверждения и анализа нейтрализации. Образцы сыворотки можно сначала измерить в исследуемой пробе при разведении, например, 1:5 и 1:50. Положительные образцы могут быть подтверждены на специфичность, титрованы, и исследованы на способность нейтрализовать антитело против α4β7, например активность ведолизумаба.

Для скринингового анализа можно использовать непрямой ИФА, в котором планшет покрыт антителом против α4β7. Иммобилизованное антитело против α4β7 захватывает ADA в тестируемом образце, которое связано антителом против α4β7, конъюгированным с биотином, который мечен стрептавидином, меченным пероксидазой хрена (HRP), а затем детектируется с помощью ферментативного субстрата, такого как TMB. Положительное развитие цвета, например, при измерении в считывающем устройстве для микропланшетов, таком как Spectramax, с аналитическим программным обеспечением, таким как SOFTMAX Pro3.1.2, указывает на присутствие ADA в образце. Критическая точка в анализе, например, в непрямом анализе на основе биотина-авидина-HRP, может быть определена с использованием нормальных образцов человеческой сыворотки в качестве отрицательных контролей. Средние значения абсорбции для 10 отрицательных контрольных сывороток могут быть добавлены к 1,65-кратному стандартному отклонению отрицательных контролей для определения критической точки. Таким образом, критическая точка может допускать приблизительно 5% ложно-положительных результатов. В присутствии ведолизумаба с концентрацией 1 мкг/мл отклики с низким титром накладываются таким образом, что они могут стать недетектируемыми, хотя высокие уровни иммуногенности обнаруживаются при концентрациях ведолизумаба, превышающих 1 мкг/мл. Например, хотя стандартная чувствительность анализа может составлять 0,44 нг/мл, в присутствии ведолизумаба 0,5 мк г/мл чувствительность анализа может составлять 180 нг/мл. По этим причинам образцы сыворотки могут быть взяты более 4 недель, более 8 недель, более 12 недель или более 16 недель после конечной дозы антитела против α4β7. При более длительном периоде времени между предыдущей дозой и отбором проб уровень лекарственного средства в сыворотке обычно может быть ниже уровня помех.

В другом способе анализа используются покрытые стрептавидином планшеты, меченные биотином антитела против α4β7, заякорены на покрытых стрептавидином емкостях, гранулах или планшетах для микротитрования для иммобилизованной стороны мостика и меченное тяжелыми металлами, такими как рутений, осмий или рений (например, через sulfo tag) антитело против α4β7 для другой стороны мостика. Мостиковый комплекс может быть сформирован на планшете путем поэтапного добавления и промывания между или в растворе, причем обе стороны мостика контактируют с разведенным образцом сыворотки, а затем переносятся на планшет. Пример анализа с использованием этого способа имеет чувствительность 3,90 нг/мл анти-антитела против α4β7. Обнаружение меченного тяжелым металлом мостикового комплекса, например, рутениевого комплекса с помощью электрохемилюминесценции (ECL), например, в Meso Scale Discovery Sector Imager 6000 (Rockville, MD), может быть более чувствительным, чем способ HRP и/или имеет более высокую толерантность к количеству антитела против α4β7 в сыворотке. Таким образом, не было бы необходимости ждать отсроченного образца после снижения сывороточного уровня лекарственного средства. В некоторых вариантах реализации изобретения предварительная обработка образца сыворотки кислотой, например уксусной кислотой или глицином с низким pH, для высвобождения антитела против α4β7 от продуцированных пациентом анти-антител против α4β7 перед контактом с мостиковыми антителами против α4β7 может уменьшить уровень помех от препарата в сыворотке. Например, хотя стандартная чувствительность анализа может составлять 3,90 нг/мл, в присутствии ведолизумаба 5 мкг/мл в сыворотке чувствительность анализа может составлять 10 нг/мл.

В одном варианте реализации изобретения анализ для обнаружения антител против ведолизумаба в образце сыворотки от пациента включает разведение сыворотки при стандартном уровне разведения, таком как 1:5, 1:25, 1:50 и/или 1:125; обработку уксусной кислотой; объединение обработанного кислотой разбавленного образца с анализируемой композицией, содержащей реагент с высоким pH, такой как высококонцентрированный буфер TRIS для нейтрализации кислоты, меченный биотином ведолизумаб и меченный рутением ведолизумаб в течение времени, достаточном для образования мостика с сывороточным антителом против ведолизумаба между двумя мечеными версиями ведолизумаба; перенос комплексов на покрытый стрептавидином планшет; промывание планшета таким образом, что присутствует только рутений, образующий комплекс с мостиком антител. Обнаружение связанного меченного рутением комплекса и измерение образца с помощью электрохемилюминесценции в считывающем устройстве для микропланшетов может быть выполнено путем добавления раствора для считывания, такого как трипропиламин, и подачи напряжения для стимуляции метки рутения, образующей комплекс на пластине, через мостик антител.

После первоначального скринингового анализа образцы могут быть дополнительно протестированы в подтверждающем анализе, в котором для выявления специфичности используется избыточное немеченое антитело против α4β7. Подтвержденные положительные образцы могут быть дополнительно оценены на способность HAHA нейтрализовать связывание антитела против α4β7, например, ведолизумаба с клетками. Конкурентный анализ на основе проточной цитометрии был разработан для определения способности иммунной сыворотки ингибировать связывание меченого ведолизумаба с клеточной линией, экспрессирующей интегрин α₄β₇, RPMI8866, и обнаружения с помощью проточной цитометрии.

Результаты могут указывать на категории статуса иммуногенности: Отрицательный: нет положительного образца HAHA; Положительный: как минимум 1 положительный образец HAHA; Временно положительный: по крайней мере 1 положительный образец HAHA и без последовательных положительных образцов HAHA; и Постоянно положительный: по крайней мере 2 или более последовательных положительных образца HAHA. Пациенты с отрицательным статусом могут реагировать на антитело против α4β7 и могут продолжать лечение с помощью антитела. Пациенты с постоянно положительным статусом, вероятно, имеют высокий клиренс антитела против α4β7 и могут не проявлять ответ на лечение с помощью антитела против α4β7. Пациенты с положительным статусом могут иметь высокий клиренс антитела против α4β7 и могут не проявлять ответ на антитело против α4β7. В случае пациентов с положительным статусом могут быть взяты дополнительные образцы сыворотки через 2, 3, 4, 5 или 6 недель после очередной дозы антитела против α4β7, чтобы определить, имеют ли они постоянно положительный статус или временно положительный статус. Пациенты с временно положительным статусом могут реагировать на лечение антителом против α4β7, и лечение этих пациентов может быть продолжено.

Также могут быть определены титры уровней иммуногенности. Категории титров включают ≥5 (низкий), ≥50, ≥125, ≥625 и ≥3125 (высокий). Пациент с высоким титром в положительном образце может иметь высокий клиренс антитела против α4β7 и может не проявлять ответ на лечение с помощью антитела против α4β7. Пациент с низким титром в положительном образце может проявлять ответ на лечение с помощью антитела против α4β7.

Данное изобретение будет более полно понято с помощью ссылки на следующие примеры. Однако их не следует рассматривать как ограничивающие объем изобретения. Вся литературные источники и ссылки на патенты включены в данный документ посредством ссылки.

ПРИМЕРЫ

ПРИМЕР 1

Фаза 2 рандомизированного двойного слепого исследования с диапазоном доз с участием педиатрических пациентов (мужского и женского пола, от 2 до 17 лет включительно) с умеренно или сильно активными ЯК или БК будет использоваться для оценки ФК, эффективности, иммуногенности, безопасности и переносимости ведолизумаба в/в. Педиатрические пациенты продемонстрировали неадекватный ответ, потерю ответа или непереносимость по меньшей мере одного из следующих агентов: кортикостероиды, иммуномодуляторы и/или терапия антагонистами TNF-α. Приблизительно 80 педиатрических субъектов будут включены в исследование, чтобы гарантировать, что 40 субъектов весом более или равными 30 кг и 40 субъектов весом менее 30 кг, а также минимум 36 субъектов с ЯК и минимум 36 субъектов с БК примут участие в исследовании.

Это исследование включает 4-недельный период скрининга, 22-недельный период двойного слепого исследования с лечением (с последней дозой на 14-й неделе) для всех субъектов. Подходящие субъекты могут выйти из исследования на 22-й неделе и продолжить получать исследуемое лекарственное средство в открытом исследовании (OLE). Субъекты, которые не участвуют в исследовании OLE, будут участвовать в 18-недельном периоде наблюдения, начиная с последней дозы исследуемого лекарственного средства, и завершат долгосрочное контрольное исследование безопасности в телефонном режиме через шесть месяцев после введения последней дозы исследуемого лекарственного средства. Схема дизайна исследования представлена на Фигуре 1.

ПРИМЕР 2

Будет проведено открытое долгосрочное расширенное исследование фазы 2b, охватывающее педиатрических пациентов мужского и женского пола с ЯК или БК, которые начали лечение ведолизумабом в/в в исследовании фазы 2, описанном в Примере 1. В исследовании будет оцениваться долгосрочная безопасность ведолизумаба, вводимого путем внутривенной инфузии. В исследовании также будут оцениваться влияние долгосрочной терапии с помощью ведолизумаба в/в во время основных событий, связанных с ВЗК (госпитализаций, операций или процедур), показатели качества жизни, связанные со здоровьем, модели роста и развития, а также уровни исследуемой эффективности.

Субъектам будут вводить ведолизумаб в/в один раз каждые восемь недель в дозе, вводимой на 14-й неделе исследования, описанного в Примере 1 (т.е. субъекты, которые весят менее 30 кг, получат 100 или 200 мг; субъекты, которые весят 30 кг или более, получат 150 или 300 мг). У субъектов, которые испытывают ухудшение заболевания при приеме низкой дозы (т.е. 100 или 150 мг), доза может быть увеличена до высокой дозы (например, 200 или 300 мг) по усмотрению исследователя. После завершения исследования в Примере 1 субъектам, чья доза увеличена на основании отсутствия ответа, следует вводить дозу, рассчитанную относительно веса во время отсутствия ответа. Образцы крови будут отбираться каждые 8 недель для оценки фармакокинетики (ФК); присутствие антител против ведолизумаба (AVA) будет оцениваться каждые 16 недель. Исследование будет включать 18-недельный период наблюдения (окончательное посещение с целью исследования безопасности) и долгосрочное контрольное исследование безопасности в телефонном режиме, через 6 месяцев после последней дозы исследуемого лекарственного средства для всех субъектов, включая тех, кто прекратил участие в исследовании.

ПРИМЕР 3

Было проведено исследование с участием молодых обезьян, чтобы подтвердить ожидаемую безопасность у людей. Обезьяны приблизительно соотносятся с педиатрическими пациентами (например, с людьми в возрасте от 2-4 лет до 13 лет), и, таким образом, исходя из этого исследования можно оценить влияние на пациентов <30 кг. Цель исследования состояла в том, чтобы оценить токсичность и токсикокинетический профиль ведолизумаба (также известного как MLN0002) при внутривенном введении ювенильным макакам-крабоедам в течение 13 недель, а также оценить восстановление, персистенцию или прогрессирование любых последствий после 12-недельного периода восстановления.

MLN0002 вводили один раз в неделю внутривенной с помощью инфузии (около 30 минут) молодым макакам-крабоедам (в возрасте от 11 до 15 месяцев и весом от 1,2 до 2,1 кг в начале исследования) в течение 13 недель в стерильной воде для инъекций в качестве раствора в количестве 0 (контроль, 0,9% физиологический раствор), 10, 30 и 100 мг/кг (4/пол/группа). Чтобы оценить разрешение любых эффектов, был проведен 12-недельный период восстановления (2/пол/группа только для 0 [контроль] и 100 мг/кг). Были оценены следующие параметры: выживаемость, клинические наблюдения, вес тела, потребление пищи, офтальмология, электрокардиология, параметры клинической патологии (гематологические показатели, коагуляция, клиническая химия и анализ мочи), токсикокинетические параметры, античеловеческие антитела приматов (PAHA), зависимый от T-клеток ответ антител (TDAR), анализы проточной цитометрии (для подмножеств лимфоцитов в периферической крови, спинномозговой жидкости, маркеров фармакодинамики), результаты общего вскрытия, вес органов и гистопатологические данные.

Не было постоянных гендерных различий в воздействии сыворотки на MLN0002 после введения дозы в день 1 и день 85. MLN0002 определяли количественно в первый момент времени сбора образцов после окончания инфузии (EOI), а медианные значения t_max составляли 0,583 часа после начала инфузии (SOI), то есть через 5 минут после EOI для всех групп как в день 1, так и в 85; однако значения t_max у четырех индивидуумов были 24,5 и 168,5 часов после SOI (24 и 168 часов после EOI), что предполагает возможное внесосудистое дозирование у этих субъектов.

Увеличение дозы MLN0002 с 10 до 30 мг/кг привело к приблизительно пропорциональному увеличению дозы AUC MLN0002 в 1-й день. Пропорциональность дозе увеличения AUC MLN0002 в день 85 при этих дозах не могла быть определена у мужских субъектов из-за присутствия антител против MLN0002 и была больше, чем пропорциональность дозе у женских субъектов (в 11,1 раза, n=1 женский субъект). Все животные (n=4/пол) в группе с дозой 10 мг/кг и 3 животных в группе с дозой 30 мг/кг (n=4/пол) были положительными на антитела против MLN0002 через 168 часов после окончания инфузия (EOI) в день 85. Обнаружение антител у этих животных было связано с заметным снижением воздействия MLN0002 при дозе 10 мг/кг и у двух из трех животных с дозами 30 мг/кг, положительных на антитела против MLN0002; тем не менее, воздействие на третье животное с дозой 30 мг/кг, положительное на антитела, было сходным с воздействием на оставшихся животных в группе, которые были отрицательны на антитела. Увеличение MLN0002 с 30 до 100 мг/кг привело к приблизительно (для мужских субъектов) или больше чем (для женских субъектов) пропорциональному дозе увеличению AUC для MLN0002 в день 1 и день 85 соответственно.

Таблица 1

Сводка Средних Токсикокинетических Параметров MLN002 в Сыворотке после Внутривенной Инфузии Каждой Второй Недели для Ювенильных Яванский Макак в течение 13 Недель (Исключая Животных, Подвергшихся Воздействию Антител Против MLN0002)

Доза (мг/кг)

Tmaxa (ч)

Cmax (мкг/мл)

AUC0–168ч (ч*мкг/мл)

День 1:	Субъект мужского пола	Субъект женского пола	Субъект мужского пола	Субъект женского пола	Субъект мужского пола	Субъект женского пола
0	Н/П	Н/П	<НПКО	<НПКО	<НПКО	<НПКО
10	0,583	0,583	253	286	22,270	22,300
30	0,583	0,583	712	675	66,100	56,600
100	0,583	0,583	2460	3370	209000	259,000
День 85b:	Субъект мужского пола	Субъект женского пола	Субъект мужского пола	Субъект женского пола	Субъект мужского пола	Субъект женского пола
0	Н/П	Н/П	<НПКО	<НПКО	<НПКО	<НПКО
10	0,583	0,583	7,87	41,3	НО	НО
30	0,583	0,583	1090	754	114,000	51,700
100	0,583	0,583	3,030	3,710	311,000	362,000

Н/П = не применимо; <НПКО = ниже предела количественного определения; AUC_{0–168ч =} площадь под кривой зависимости сывороточной концентрации от времени 0 от начала лечения в рамках исследования до 168 часов; C_max = максимальная наблюдаемая концентрация в сыворотке; НО = не определялось; t_max = время достижения C_max.

^a Зависящие от времени параметры рассчитывали с использованием номинального времени после начала инфузии (SOI).

^b Значения исключают животных, которые были положительными в отношении антител против лекарственного средства.

Все животные выжили до конца исследования. Не было никаких клинических наблюдений, связанных с исследуемым препаратом, или влияний на вес тела, потребление пищи, офтальмологические показатели, электрокардиологические показатели, параметры клинической патологии (гематология, коагуляция, клиническая химия и анализ мочи), зависимый от Т-клеток ответ антител (TDAR), анализы проточной цитометрии (периферическая кровь и спинномозговая жидкость), макроскопические и микроскопические данные и вес органов.

При 10, 30 и 100 мг/кг оккупация рецепторов α4β7 на B-лимфоцитах и CD4+T-лимфоцитах памяти в присутствии MLN0002 была продемонстрирована во время фазы дозирования, поскольку наблюдалось снижение средних значений интенсивности флуоресценции меченого MLN0002 по сравнению со значениями группы до введения доз и контрольной группы.

В заключение, введение MLN0002 один раз в неделю с помощью внутривенной инфузии хорошо переносилось у юных макак-крабоедов на уровнях 10, 30 и 100 мг/кг. Не было никаких признаков токсичности при уровнях до 100 мг/кг. Таким образом, 100 мг/кг считалось максимальной дозой препарата, не приводящей к развитию наблюдаемых нежелательных эффектов (NOAEL) в данном исследовании. AUC_0–168ч и C_max в сыворотке, связанные с NOAEL, составляли 311,000 и 362,000 ч*мкг/мл 3030 и 3710 мкг/мл у мужских субъектов и женских субъектов соответственно.

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> MILLENIUM PHARMACEUTICALS, INC.

<120> СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПЕДИАТРИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВ/ЗАБОЛЕВАНИЙ

<130> 079259-0839

<140>

<141>

<150> 62/492,031

<151> 2017-04-28

<160> 11

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 470

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 1

Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly

1 5 10 15

Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys

20 25 30

Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe

35 40 45

Thr Ser Tyr Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu

50 55 60

Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asp Pro Ser Glu Ser Asn Thr Asn Tyr Asn

65 70 75 80

Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Leu Thr Val Asp Ile Ser Ala Ser

85 90 95

Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val

100 105 110

Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Tyr Asp Gly Trp Asp Tyr Ala Ile Asp

115 120 125

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys

130 135 140

Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly

145 150 155 160

Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro

165 170 175

Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr

180 185 190

Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val

195 200 205

Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn

210 215 220

Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro

225 230 235 240

Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu

245 250 255

Leu Ala Gly Ala Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

260 265 270

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

275 280 285

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

290 295 300

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn

305 310 315 320

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp

325 330 335

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

340 345 350

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu

355 360 365

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn

370 375 380

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

385 390 395 400

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

405 410 415

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

420 425 430

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

435 440 445

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

450 455 460

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

465 470

<210> 2

<211> 238

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 2

Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly

1 5 10 15

Val His Ser Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val

20 25 30

Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu

35 40 45

Ala Lys Ser Tyr Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro

50 55 60

Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gly Ile Ser Asn Arg Phe Ser

65 70 75 80

Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

85 90 95

Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys

100 105 110

Leu Gln Gly Thr His Gln Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val

115 120 125

Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro

130 135 140

Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu

145 150 155 160

Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn

165 170 175

Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser

180 185 190

Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala

195 200 205

Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly

210 215 220

Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230 235

<210> 3

<211> 219

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 3

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Ala Lys Ser

20 25 30

Tyr Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Gly Ile Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr His Gln Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Ala Asp Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 4

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 4

Ser Tyr Trp Met His

1 5

<210> 5

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 5

Glu Ile Asp Pro Ser Glu Ser Asn Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 6

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 6

Gly Gly Tyr Asp Gly Trp Asp Tyr Ala Ile Asp Tyr

1 5 10

<210> 7

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 7

Arg Ser Ser Gln Ser Leu Ala Lys Ser Tyr Gly Asn Thr Tyr Leu Ser

1 5 10 15

<210> 8

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический пептид"

<400> 8

Gly Ile Ser Asn Arg Phe Ser

1 5

<210> 9

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

Синтетический пептид"

<400> 9

Leu Gln Gly Thr His Gln Pro Tyr Thr

1 5

<210> 10

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

cинтетический полипептид"

<400> 10

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser

20 25 30

Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala

85 90 95

Leu Gln Thr Pro Gln Thr Phe Gly Gln Gly Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 11

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Описание искусственной последовательности:

синтетический полипептид"

<400> 11

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Ala Gly Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ser Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Arg Asp Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Tyr Tyr Gly Ser Gly Ser Asn Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<---

1. Способ лечения воспалительного заболевания кишечника у педиатрического пациента, включающий внутривенное введение педиатрическому пациенту с воспалительным заболеванием кишечника (ВЗК): первой дозы 200 мг антитела, которое обладает специфичностью связывания интегрина α4β7 человека, второй дозы 200 мг антитела через две недели после первой дозы и третьей дозы 200 мг антитела через шесть недель после первой дозы, при этом антитело представляет собой ведолизумаб, и где педиатрический пациент весит менее 30 кг.

2. Способ по п. 1, дополнительно включающий четвертую дозу 200 мг через 14 недель после первой дозы.

3. Способ по п. 1 или 2, дополнительно включающий последующие дозы 200 мг каждые восемь недель.

4. Способ по любому из предыдущих пунктов, в котором каждую дозу вводят внутривенно в виде инфузии в течение около 120 минут.

5. Способ по любому из пп. 1-4, в котором педиатрический пациент весит от 10 до 30 кг.

6. Способ по любому из предыдущих пунктов, при котором дозу получают из емкости, изготовленной для введения 200 мг антитела.

7. Способ по любому из пп. 1-6, в котором воспалительное заболевание кишечника представляет собой болезнь Крона от умеренной до тяжелой степени активности или язвенный колит от умеренной до тяжелой степени активности.

8. Способ по любому из пп. 1-7, в котором у педиатрического пациента отсутствовал адекватный ответ, был утрачен ответ или была непереносимость антагониста TNFα.

9. Способ по любому из пп. 1-7, в котором педиатрический пациент имел неадекватный ответ или утратил ответ на кортикостероид или иммуномодулятор.

10. Способ по любому из пп. 1-9, в котором клинический ответ достигается, как измерено, на 14 неделе.

11. Способ по любому из пп. 1-10, в котором у педиатрического пациента достигается ремиссия воспалительного заболевания кишечника.