Способ прогнозирования высокой скорости деградации гемоглобина у плодов с гемолитической болезнью после внутриутробного внутрисосудистого переливания крови

Авторы патента:

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

A61B5/145 - Измерение для диагностических целей (радиодиагностика A61B 6/00; диагностика с помощью ультразвуковых, инфразвуковых и звуковых волн A61B 8/00); опознание личности

Владельцы патента RU 2778601:

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НИИ ОММ» Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования скорости деградации гемоглобина у плода с гемолитической болезнью после внутриутробного внутрисосудистого переливания крови. Для этого определяют парциальное давление углекислого газа, уровень лактата, С3 компонент комплемента в пуповинной крови плода, взятой во время кордоцентеза, предшествующего внутриутробному внутрисосудистому переливанию крови. Далее вычисляют прогностический индекс D по оригинальной математической формуле. При значении D≤-0,18 - прогнозируют высокую скорость деградации гемоглобина у плода. При значении D>-0,18 - делают вывод, что нет риска высокой скорости деградации гемоглобина у плода. Способ позволяет прогнозировать высокую скорость деградации гемоглобина путем вычисления прогностического индекса, что оптимизирует сроки повторных внутриутробных гемотрансфузий. 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, предназначено для врачей акушеров-гинекологов, перинатологов и репродуктологов акушерских стационаров, перинатальных центров.

В сложившейся демографической ситуации одной из приоритетных задач системы здравоохранения является сохранение жизни и здоровья каждого потенциального новорожденного. Несмотря на широкое внедрение комплексных профилактических мер, гемолитическая болезнь плода и новорожденного по-прежнему диагностируется у 0,6%-1% новорожденных и не имеет тенденции к снижению. Перинатальная смертность при гемолитической болезни плода и новорожденного (ГБПиН) составляет 0,037‰ [Антонов А.Г., Дегтярев Д.Н., Нароган М.В., Карпова А.Л., Сенькевич О.А., Сафаров А.А., Сон Е.Д., Малютина Л.В. Гемолитическая болезнь новорожденных. В кн.: Неонатология. Клинические рекомендации / под ред. Н.Н. Володин, Д.Н. Дегтярев, Д.С. Крючко. М., ГЭОТАР-Медиа 2019, c. 19 - 35].

В основе патогенеза ГБПиН лежит разрушение эритроцитов плода аллогенными антителами матери, направленными против антигенов, отсутствующих в материнском организме и представленными на мембране эритроцитов плода. В 95% случаев конфликт развивается относительно антигенов системы Резус [Мамедалиева Н.М., Шарипбаева Н.Т., Данияров Н.Н., Джиджилава Г.М. Особенности течения беременности, родов и перинатальные исходы у пациенток с резус-сенсибилизацией. Вестник Казахского национального медицинского университета. 2015. №1, с. 18-21]. Формирующийся тяжелый анемический синдром, запускает каскад патологических изменений, приводящих к внутриутробной гибели плода или рождению антенатально поврежденного ребенка, требующего длительного и дорогостоящего лечения и реабилитации и имеющего риск ранней детской инвалидизации.

Общепризнанным способом лечения тяжелых форм внутриутробной анемии в антенатальном периоде является внутриутробное внутрисосудистое переливании крови. Данная манипуляция относится к фетальным хирургическим вмешательствам и носит симптоматический характер [Смирнова А.А., Коноплянников А.Г., Караганова Е.Я. Многократные внутриутробные переливания крови при резус-сенсибилизации и тяжелых формах гемолитической болезни плода. Российский вестник акушера-гинеколога. 2021; 21(1), с.61-68]. Показания для проведения данной операции выносятся в результате антенатальной диагностики гипердинамического типа кровообращения и анемии плода, основанной на допплерометрическом исследование максимальной систолической скорости кровотока в средней мозговой артерии (МССК СМА) плода. Авторы данной методики предложили пороговое значение 1,5 МоМ для МССК СМА, поскольку при этом выявлялись все случаи тяжелой и умеренной анемии плода с 12% ложноположительной частотой (100% чувствительность и 88% специфичность) [Mari G, Deter RL, Carpenter RL, Rahman F, Zimmerman R, Moise KJ, Jr, Dorman KF, Ludomirsky A, Gonzalez R, Gomez R, Oz U, Detti L, Copel JA, Bahado-Singh R, Berry S, Martinez-Poyer J, Blackwell SC. Noninvasive diagnosis by Doppler ultrasonography of fetal anemia due to maternal red-cell alloimmunization. Collaborative Group for Doppler Assessment of the Blood Velocity in Anemic Fetuses. N Engl J Med 2000; 342: 9–14].

Решение вопроса о проведении повторных переливаний крови плоду или родоразрешения пациентки зависит от того как быстро произойдет анемизация плода до средне-тяжелой или тяжелой степени. Количественным выражением этого процесса служит скорость деградации гемоглобина плода в гаммах на литр в сутки.

Согласно данным литературы существует два основных направления исследований предлагающих различные способы повторного прогрессирования анемии у плода. Одни авторы предлагают увеличение порогового значение для МССК СМА после проведения внутриутробного переливания крови плоду, а другие установить фиксированную суточную скорость снижения концентрации гемоглобина у плода после внутриутробного переливания 3 г/л/сутки. [Dodd JM, Andersen C, Dickinson JE, Louise J, Deussen A, Grivell RM, Voto L, Kilby MD, Windrim R, Ryan G; MCA Doppler Study Group. Fetal middle cerebral artery Doppler to time intrauterine transfusion in red-cell alloimmunization: a randomized trial. Ultrasound Obstet Gynecol. 2018 Mar; 51(3):306-312. Martinez-Portilla RJ, Lopez-Felix J, Hawkins-Villareal A, et al. Performance of fetal middle cerebral artery peak systolic velocity for prediction of anemia in untransfused and transfused fetuses: systematic review and meta-analysis. Ultrasound in Obstetrics & Gynecology : the Official Journal of the International Society of Ultrasound in Obstetrics and Gynecology. 2019 Dec;54(6):722-731].

Однако ни одно из указанных направлений не учитывает состояние газового гомеостаза плода и иммунологический аспект процессов, лежащих в основе гемолитической болезни, а также самой операции переливания крови.

При анализе состава пуповинной крови плодов с гемолитической болезнью, нуждающихся в переливании крови найдены прямые корреляционные связи по Spearman формирования высокой скорости деградации гемоглобина у плода с изменениями в кислотно-основном состоянии и гуморальном звене иммунной системы плода.

Таким образом, все вышеизложенное позволяет сделать вывод, что на сегодняшний день отсутствует надежный и доступный для широкого применения способ прогнозирования скорости деградации гемоглобина у плода после проведения внутриутробного переливания крови.

Задача изобретения заключается в разработке способа прогнозирования высокой скорости деградации гемоглобина, у плода с гемолитической болезнью после внутриутробного переливания крови путем вычисления прогностического индекса D, отражающего суммарные особенности кислотно-основного состояния и иммунологический профиль внутриутробного пациента.

Технический результат: позволяет прогнозировать высокую скорость деградации гемоглобина путём вычисления прогностического индекса, что оптимизирует сроки повторных внутриутробных гемотрансфузий.

Заявляется способ прогнозирования высокой скорости деградации гемоглобина у плода с гемолитической болезнью после внутриутробного переливания крови, отличающийся тем, что определяют парциальное давление углекислого газа pCO₂, уровень лактата Lac, и С3 компонент комплемента с последующим вычислением прогностического индекса D по формуле:

D = pCO₂* К1 + Lac* К2 + C3* К3 + константа,

где:

D – прогностический индекс скорости деградации гемоглобина,

pCO₂ – парциальное давление углекислого газа, мм рт.ст.;

Lac – уровень лактата, ммоль/л;

C3 - С3 компонент комплемента, г/л;

К1, К2, К3 – коэффициенты;

К1 = 0,18,

К2 = 0,59,

К3 = 0,03,

константа = -11,25.

При значении D≤-0,18 прогнозируют высокую скорость деградации гемоглобина у плода.

При значении D >-0,18 - нет риска высокой скорости деградации гемоглобина у плода.

Способ осуществляют следующим образом:

Для достижения поставленной задачи проводят исследование пуповинной крови плода, взятой во время кордоцентеза с определением уровней парциального давления углекислого газа, лактата, С3 компонента комплемента. Определение кислотно-основного состояния, парциального напряжения газов крови проводится с помощью автоматической системы определения ионного и газового состава крови. Определение C3 компонента комплемента – турбодиметрическим методом. Исследование проводится до проведения операции внутриутробного переливания крови.

При математической обработке данных (логистический регрессионный анализ), было сформировано решающее правило прогноза скорости деградации гемоглобина на основании вычисления интегрального показателя D, имеющего следующий вид:

D = pCO₂* К1 + Lac* К2 + C3* К3 + константа,

где:

D – прогностический индекс скорости деградации гемоглобина,

pCO₂ - парциальное давление углекислого газа в мм рт.ст.,

Lac - уровень лактата в ммоль/л (миллимоль на литр),

C3 - С3 компонент комплемента в г/л (грамм на литр),

К1, К2, К3 - коэффициенты,

при К1 = 0,18, К2 = 0,59, К3 = 0,03,

константа = -11,25.

При значении D≤ -0,18 – прогнозируют высокую скорость деградации гемоглобина у плода.

При значении D >-0,18 – нет риска высокой скорости деградации гемоглобина у плода.

Чувствительность правила составила 100%, специфичность 93,75%, рассчитанные на основании ROC-анализа в рамках программы MedCalc.

Клинический пример 1.

Пациентка М., 30 лет. В анамнезе три прерывания беременности по желанию в сроках 9-10 недель, а также срочные самостоятельные роды. Течение предыдущей беременности осложнилось гемолитической болезнью плода. Данная беременность пятая наступила самостоятельно. При постановке на учет были выявлены антитела к антигенам D и C системы Резус в суммарном титре 1:128.

К сроку гестации 27 недель появились признаки тяжелой анемии у плода. Было проведено внутриутробное внутрисосудистое переливание крови, перед которым взяты образцы пуповинной крови. При исследовании крови плода выявлено: pCO₂ 44,3 мм рт.ст., уровень лактата 2,8 ммоль/л, количество С3 компонента комплемента 27,4 г/л.

По формуле прогноза определен индекс D:

44,3 * 0,18 + 2,8* 0,59 + 27,4* 0,03 – 11,25= - 0,87

Учитывая, что D˂-0,18, в данном случае прогнозировалась высокая скорость деградации гемоглобина у плода после внутриутробного переливания крови.

Операция внутриутробного внутрисосудистого переливания крови плоду проводилась у данной пациентки трижды с интервалом 13-14 дней. Скорость деградации гемоглобина у плода после первого переливания составила 5,3 г/л.

Пациентка была родоразрешена в сроке 34 недели. Родился живой недоношенный мальчик весом 2290 г, длиной 45 см с оценкой по шкале Апгар 6/7 баллов. Уровень гемоглобина при рождении составил 90 г/л. Ребенок переведен в отделение реанимации и интенсивной терапии новорожденных, где ему была проведена гемотрансфузия. В последующей ребенок наблюдался и лечился в отделении ранней реабилитации новорожденных. Ребенок выписан домой на 18-е сутки.

Клинический пример 2.

Пациентка С., 37 лет. От пятой беременности ей предстояли третьи роды. В анамнезе у пациентки двое срочных родов, одни из которых были через естественные родовые пути, а вторые способом операции Кесарева сечения в связи с выявленной гемолитической болезнью плода. Течение настоящей беременности также осложнилось гемолитической болезнью плода с ранних сроков гестации. К сроку 26-27 недель сформировались показания для проведения внутриутробного внутрисосудистого переливания крови плоду, что и было предпринято. При исследовании крови плода, взятой из пуповины перед переливанием выявлено: pCO₂ 36,4 мм рт.ст., уровень лактата 3,85 ммоль/л, количество С3 компонента комплемента 71,1 г/л.

По формуле прогноза определен индекс D:

36,4 * 0,18 + 3,85* 0,59 + 71,1* 0,03 – 11,25= - 0,18

Учитывая, что D = -0,18 в данном случае прогнозировалась высокая скорость деградации гемоглобина у плода после внутриутробного переливания крови.

Операция внутриутробного внутрисосудистого переливания крови плоду проводилась у данной пациентки трижды с интервалом 14-16 дней. Скорость деградации гемоглобина у плода после первого переливания составила 4,3 г/л.

Пациентки была родоразрешена в сроке 34 недели. Родился живой недоношенный мальчик весом 2330 г, длиной 47 см с оценкой по шкале Апгар 5/7 баллов. Уровень гемоглобина при рождении составил 107 г/л. Ребенок переведен в отделение реанимации и интенсивной терапии новорожденных, где ему была проведена операция обменно-заменного переливания крови. В последующей ребенок наблюдался и лечился в отделении ранней реабилитации новорожденных. Ребенок выписан домой на 12-е сутки.

Клинический пример 3.

Пациентка Р. 32 года. В анамнезе двое срочных самостоятельных родов без особенностей. Оба ребенка имеют положительный резус-фактор. При данной беременности впервые были выявлены антитела к антигену D в титре 1:16. К сроку гестации 30 недель появились признаки тяжелой анемии у плода. Было проведено внутриутробное внутрисосудистое переливание крови, перед которым взяты образцы пуповинной крови. При исследовании крови плода выявлено: pCO₂ 31,7 мм рт.ст., уровень лактата 1,8 ммоль/л, количество С3 компонента комплемента 146,2 г/л.

По формуле прогноза определен индекс D:

31,7 * 0,18 + 1,8* 0,59 + 146,2* 0,03 – 11,25 = 0,28

Поскольку в данном случае D >-0,18 – нет риска высокой скорости деградации гемоглобина у плода.

Операция внутриутробного внутрисосудистого переливания крови плоду проводилась у данной пациентки однократно. Она была родоразрешена в сроке 34 недели. Родился живой недоношенный мальчик весом 2050 г, длиной 43 см с оценкой по шкале Апгар 6/7 баллов. Уровень гемоглобина и билирубина при рождении были в пределах допустимых значений. Скорость деградации гемоглобина у плода составила 0,7 г/л. Проведения гемотрансфузии не потребовалось. Ребенок переведен в отделение реанимации и интенсивной терапии с последующей реабилитацией в отделении ранней реабилитации новорожденных. Ребенок выписан домой на 14-е сутки.

Способ прогнозирования скорости деградации гемоглобина у плода с гемолитической болезнью после внутриутробного переливания крови, отличающийся тем, что определяют парциальное давление углекислого газа pCO₂, уровень лактата Lac, и С3 компоненту комплемента с последующим вычислением прогностического индекса D по формуле:

D = pCO₂* К1 + Lac* К2 + C3* К3 + константа,

где:

D – прогностический индекс скорости деградации гемоглобина,

pCO₂ – парциальное давление углекислого газа, мм рт.ст.;

Lac – уровень лактата, ммоль/л;

C3 - С3 компонент комплемента, г/л;

К1, К2, К3 коэффициенты;

К1 = 0,18,

К2 = 0,59,

К3 = 0,03

константа = -11,25,

при значении D ≤ -0,18 прогнозируют высокую скорость деградации гемоглобина у плода,

при значении D>-0,18 делают заключение, что нет риска высокой скорости деградации гемоглобина у плода.

Настоящее изобретение относится к количественному клеточному способу определения in vitro действия лиганда антитела против CD26, предпочтительно моноклонального антитела против CD26, такого как бегеломаб. Способ определения in vitro эффективности лиганда антитела против CD26, включает следующие стадии: а) инкубацию при 37°С или при комнатной температуре популяции человеческих Т-лимфоцитов, экспрессирующих рецептор CD26, в процентной доле более 75% с лигандом антитела против CD26 в концентрации в диапазоне от 0,001 мкг/мл до 150 мкг/мл; б) инкубацию с антителом против антитела CD26, меченным флуорохромом, которое распознает эпитоп CD26, отличающийся от эпитопа, распознаваемого лигандом антитела против CD26, используемого на стадии а); в) определение величины MFI (медиана интенсивности флуоресценции) для CD26, измеренной для образца клеток, обработанных лигандом антитела против CD26 (MFIT), и величины MFI для необработанных клеток (MFINT) путем цитофлуориметрического анализа; г) оценку процентной доли интернализации рецептора CD26 (%int CD26) или RFI (относительная интенсивность флуоресценции), рассчитываемой в соответствии со следующей формулой: где: если величина %int CD26 составляет менее 20%, это указывает на низкую эффективность лиганда антитела против CD26; если находится в диапазоне от 20% до 30%, это указывает на среднюю эффективность лиганда антитела против CD26; если составляет более 30%, это указывает на высокую эффективность лиганда антитела против CD26.

Количественный клеточный способ определения биологической активности лиганда антитела против cd26 // 2778454

Способ выбора стартовой схемы послеоперационного обезболивания у пациентов после видеолапароскопической холецистэктомии // 2778266

Изобретение относится к области медицины, в частности к фармакогенетике. Определяют полиморфизм rs1799853 гена CYP2C9.

Устройство для тестирования эффективности биологически активных веществ на клетках // 2777971

Изобретение относится к области биохимии и биофизики. Устройство для тестирования эффективности биологически активных веществ на клетках содержит блок локальной контролируемой подачи биологически активного вещества, включающий нанокапилляр, блок позиционирования нанокапилляра, блок сканирования поверхности клеток, блок для измерения реакции клеток на введенное биологически активное вещество, и блок для измерения и/или осуществления деформации клеток.

Устройство для тестирования эффективности биологически активных веществ на клетках // 2777971

Обнаружение антигена-мишени, фенотипический скрининг и его применение для идентификации специфичных эпитопов-мишеней клеток-мишеней // 2777769

Изобретение относится к области биотехнологии. Описан способ идентификации связывающего полипептида, который специфически связывается с антигеном клеточной поверхности.

Способ прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы с эксфолиативным синдромом // 2777667

Изобретение относится к области биотехнологии и медицинской диагностики, в частности к способу прогнозирования риска развития первичной открытоугольной глаукомы с эксфолиативным синдромом (ПОУГ с ЭС) у неродственных русских индивидуумов, уроженцев Центрально-Черноземного региона РФ. Для осуществления указанного способа сначала производят забор венозной крови.

Способ оценки риска необходимости применения кислородной терапии при covid-19 // 2777487

Изобретение относится к области медицины, в частности к молекулярно-генетической диагностике. Осуществляют забор биологического материала, выделение геномной ДНК с последующим генотипированием аллелей гена HLA-С.

Способ дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки ретромолярной области по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента // 2777180

Изобретение относится к области медицины. Способ осуществляют определением содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в лечение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований.

Композиции, изделия и способы, связанные с дозированием в клеточной терапии // 2776823

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены варианты способа определения риска развития токсичности у индивида, включающие анализ количества экспрессирующих рекомбинантный рецептор клеток в образце крови индивида, которому ранее вводили дозу экспрессирующих рекомбинантный рецептор клеток.

r-proadm как маркер для статуса внеклеточного объема субъекта // 2778457

Группа изобретений относится к области медицины. Способ включает в себя определение в образце, полученном у субъекта, уровня маркера проадреномедуллина (proADM) или его фрагмента, предпочтительно MR-proADM.