Бензазепиновые соединения, конъюгаты и их применение
Изобретение относится к соединению, представленному структурой формулы (IIA), или к его фармацевтически приемлемой соли, где представляет собой двойную связь, L10 выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи L10 с R5, L2 представляет собой -C(O)-, каждый из R1 и R2 представляет собой водород, R4 представляет собой -N(R10)2, R5 выбран из С9-10 бициклического карбоцикла и 9-10-членного конденсированного 5-6 или конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, содержащего 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и бора, где R5 необязательно замещен и где заместители независимо выбраны в каждом случае из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)OR10, =O и -CH3, необязательно замещенного -N(R10)2 или фенилом, необязательно замещенным -C(O)N(R10)2, и R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -C(O)OCH2C6H5 и C1-6 алкила, необязательно замещенного галогеном, -NH2, -NHC(O)OCH2C6H5 или фенилом. Изобретение также относится к конъюгатам с конструкцией на основе антитела и фармацевтическим композициям, обладающим активностью агониста TLR8, на основе соединения формулы (IIA). Технический результат - получены новые соединения, конъюгаты и фармацевтическая композиция на их основе, которые могут найти применение в медицине для лечения рака. 8 н. и 33 з.п. ф-лы, 10 ил., 6 табл., 16 пр.
ПЕРЕКРЕСТНЫЕ ССЫЛКИ НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно предварительной заявке на изобретение США 62/622780, поданной 26 января 2018 года, предварительной заявке на изобретение США 62/573630, поданной 17 октября 2017 года, и предварительной заявке на изобретение США 62/471886, поданной 15 марта, 2017, содержание каждой из которых включено в настоящую заявку во всей полноте посредством ссылки.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0002] Одной из основных причин смертности в Соединенных Штатах является рак. Обычные способы лечения рака, такие как химиотерапия, хирургия или лучевая терапия, имеют тенденцию быть либо высокотоксичными, либо неспецифичными в отношении рака, либо и то, и другое, что приводит к ограниченной эффективности и вредным побочным эффектам. Тем не менее, иммунная система может стать мощным, специфическим инструментом в борьбе с раком. Во многих случаях опухоли могут специфически экспрессировать гены, продукты которых необходимы для запуска или поддержания злокачественного состояния. Эти белки могут служить антигенными маркерами для развития и установления более специфического противоракового иммунного ответа. Усиление этого специфического иммунного ответа может стать мощным противораковым средством, которое может быть более эффективным, чем обычные способы лечения рака, и иметь меньше побочных эффектов.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0003] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к соединению, представленному структурой формулы (IIA):
или его фармацевтически приемлемой соли, где:
представляет собой необязательную двойную связь,
L10 представляет собой -X10-,
L2 выбран из -X2-, -X2-C1-6алкилен-X2-, -X2-C2-6алкенилен-X2- и -X2-C2-6алкинилен-X2-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более R12,
X10 выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи X10 с R5,
X2 в каждом случае независимо выбран из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)С(NR10), -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O)-, -OS(O)2-, -S(O)2O-, -N(R10)S(O)2, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и С3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R5 выбран из ненасыщенного С4-8 карбоцикла, бициклического карбоцикла, и конденсированного 5-5, конденсированного 5-6 и конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, где R5 необязательно замещен и где заместители независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и С3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R5 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OH, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, -C1-10 галогеналкила, -O-C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила,
R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла.
[0004] В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (IIA) представлено формулой (IIB):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, и
R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл.
[0005] В некоторых вариантах осуществления R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OH, -OR10, -NO2, -CN и C1-10 алкила. В некоторых вариантах осуществления каждый из R20, R21, R22 и R23 может представлять собой водород. В некоторых вариантах осуществления R21 представляет собой галоген. В некоторых вариантах осуществления R21 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R21 представляет собой -OR10. Например, R21 может представлять собой -OCH3.
[0006] В некоторых вариантах осуществления R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OH, -NO2, -CN и C1-10 алкила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл. В некоторых вариантах осуществления каждый из R24 и R25 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-5 карбоцикл, где заместители выбраны из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла.
[0007] В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R2 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R2 представляет собой -C(O)-.
[0008] В некоторых вариантах осуществления L10 выбран из -C(O)N(R10)-*. В некоторых вариантах осуществления R10 в -C(O)N(R10)-* выбран из водорода и C1-6 алкила. Например, L10 может представлять собой -C(O)NH-*.
[0009] В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный бициклический карбоцикл. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный 8-12-членный бициклический карбоцикл. R5 может представлять собой необязательно замещенный 8-12-членный бициклический карбоцикл, замещенный одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный 8-12-членный бициклический карбоцикл, замещенный одним или более заместителями, независимо выбранными из -OR10, -N(R10)2 и =O. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный индан и необязательно замещенный тетрагидронафталин. R5 может быть выбран из: 
и 
, любой из которых является необязательно замещенным. Например, R5 выбран из: 
, 
, 
, 
, 
, 
и 
.
[0010] В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный ненасыщенный С4-8 карбоцикл. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный ненасыщенный С4-6 карбоцикл. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный ненасыщенный С4-6 карбоцикл с одним или более заместителями, независимо выбранными из необязательно замещенного C3-12 карбоцикла, и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла. R5 может представлять собой необязательно замещенный ненасыщенный С4-6 карбоцикл с одним или более заместителями, независимо выбранными из необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного С1-10 алкила, необязательно замещенного С2-10 алкенила и галогена.
[0011] В некоторых вариантах осуществления R5 выбран из необязательно замещенного конденсированного 5-5, конденсированного 5-6 и конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный конденсированный 5-5, конденсированный 5-6 и конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл с одним или более заместителями, независимо выбранными из -C(O)OR10, -N(R10)2, -OR10 и необязательно замещенного C1-10 алкила. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный конденсированный 5-5, конденсированный 5-6 и конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл, замещенный -C(O)OR10. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл. Например, конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл может представлять собой необязательно замещенный пиридин-пиперидин. В некоторых вариантах осуществления L10 связан с атомом углерода пиридина конденсированного пиридин-пиперидина. В некоторых вариантах осуществления R5 выбран из тетрагидрохинолина, тетрагидроизохинолина, тетрагидронафтиридина, циклопентапиридина и дигидробензоксаборола, любой из которых является необязательно замещенным. R5 может представлять собой необязательно замещенный тетрагидронафтиридин. В некоторых вариантах осуществления R5 выбран из: 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
и 
.
[0012] В некоторых вариантах осуществления, когда R5 является замещенным, заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла. В некоторых вариантах осуществления заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O и -CN, и C1-10 алкила, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -NO2, =O и -CN. В некоторых вариантах осуществления R5 не является замещенным.
[0013] В некоторых вариантах осуществления L2 выбран из -C(O)- и -C(O)NR10-. В некоторых вариантах осуществления L2 представляет собой -C(O)-. В некоторых вариантах осуществления L2 выбран из -C(O)NR10-. R10 в -C(O)NR10- может быть выбран из водорода и C1-6 алкила. Например, L2 может представлять собой -C(O)NH-.
[0014] В некоторых вариантах осуществления R4 выбран из -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R4 выбран из -OR10 и -N(R10)2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой -N(R10)2. R10 в -N(R10)2 независимо выбран в каждом случае из необязательно замещенного C1-6 алкила. В некоторых вариантах осуществления R10 в -N(R10)2 независимо выбран в каждом случае из метила, этила, пропила и бутила, любой из которых является необязательно замещенным. Например, R4 может представлять собой 
. В некоторых вариантах осуществления -L2-R4 представляет собой 
.
[0015] В некоторых вариантах осуществления R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла.
[0016] В некоторых вариантах осуществления соединение выбрано из:
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
и 
,
и соли любого из них.
[0017] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к соединению, представленному структурой формулы (IIIA):
или его фармацевтически приемлемой соли, где:
представляет собой необязательную двойную связь,
L11 представляет собой -X11-,
L2 выбран из -X2-, -X2-C1-6алкилен-X2-, -X2-C2-6алкенилен-X2- и -X2-C2-6алкинилен-X2-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более R12,
X11 выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи X11 с R6,
X2 в каждом случае независимо выбран из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)С(NR10), -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O)-, -OS(O)2-, -S(O)2O-, -N(R10)S(O)2, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R6 выбран из фенила и 5- или 6-членного гетероарила, любой из которых замещен одним или более заместителями, выбранными из R7, и R6 дополнительно необязательно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12,
R7 выбран из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR11, -C1-3алкилен-NHC(O)R10, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10, -C1-3алкилен-NHC(O)-C1-3алкилен-R10 и 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R12,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OH, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, -C1-10 алкила, -C1-10 галогеналкила, -O-C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла,
R11 выбран из C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из R12,
R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла. В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (IIIA) представлено формулой (IIIB):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, и
R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл.
[0018] В некоторых вариантах осуществления R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OH, -NO2, -CN и C1-10 алкила. В некоторых вариантах осуществления каждый из R20, R21, R22 и R23 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OH, -NO2, -CN и C1-10 алкила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл. В некоторых вариантах осуществления каждый из R24 и R25 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-5 карбоцикл.
[0019] В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R2 представляет собой водород.
[0020] В некоторых вариантах осуществления L11 выбран из -C(O)N(R10)-*. В некоторых вариантах осуществления R10 в -C(O)N(R10)-* выбран из водорода и C1-6 алкила. Например, L11 может представлять собой -C(O)NH-*.
[0021] В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой фенил, замещенный R7, и R6 дополнительно необязательно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12. В некоторых вариантах осуществления R6 выбран из фенила, замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C1-3алкилен-NHC(O)R10 и -C(O)CH3, и 3-12-членного гетероцикла, который необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из -ОН, -N(R10)2, -NHC(O)(R10), -NHC(O)O(R10),-NHC(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -C(O)2R10 и -C1-3алкилен-(R10), и R6 дополнительно необязательно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12. Например, R6 может быть выбран из: 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
и 
.
[0022] В некоторых вариантах осуществления R6 выбран из 5- и 6-членного гетероарила, замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R7, и R6 дополнительно необязательно замещен одним или более дополнительными заместителями, выбранными из R12. В некоторых вариантах осуществления R6 выбран из 5- и 6-членного гетероарила, замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR10, -C1-3алкилен-NHC(O)R10, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10 и -C1-3алкилен-NHC(O)-C1-3алкилен-(R10), и 3-12-членного гетероцикла, который необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из -ОН, -N(R10)2, -NHC(O)(R10), -NHC(O)O(R10), -NHC(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -C(O)2R10 и -C1-3алкилен-(R10), и R6 необязательно дополнительно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12. R6 может быть выбран из замещенного пиридина, пиразина, пиримидина, пиридазина, фурана, пирана, оксазола, тиазола, имидазола, пиразола, оксадиазола, оксатиазола и триазола, и R6 необязательно дополнительно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой замещенный пиридин, и R6 необязательно дополнительно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12. R6 может представлять собой: 
или 
. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой замещенный пиридин, и где R7 представляет собой -C1-3алкилен-NHC(O)-C1-3алкилен-R10. В некоторых вариантах осуществления R7 представляет собой -C1алкилен-NHC(O)-C1алкилен-R10. В некоторых вариантах осуществления R7 представляет собой -C1алкилен-NHC(O)-C1алкилен-NH2. В некоторых вариантах осуществления R6 выбран из: 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
и 
. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой .
[0023] В некоторых вариантах осуществления L2 выбран из -C(O)- и -C(O)NR10. В некоторых вариантах осуществления L2 выбран из -C(O)NR10-. R10 в -C(O)NR10- может быть выбран из водорода и C1-6 алкила. Например, L2 может представлять собой -C(O)NH-. В некоторых вариантах осуществления L2 представляет собой -C(O)-.
[0024] В некоторых вариантах осуществления R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R4 выбран из: -OR10 и -N(R10)2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой -N(R10)2. R10 в -N(R10)2 может быть независимо выбран в каждом случае из необязательно замещенного C1-6 алкила. В некоторых вариантах осуществления R10 в -N(R10)2 независимо выбран в каждом случае из метила, этила, пропила и бутила, любые из которых являются необязательно замещенными. Например, R4 может представлять собой . В некоторых вариантах осуществления -L2-R4 представляет собой .
[0025] В некоторых вариантах осуществления R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла. В некоторых вариантах осуществления соединение выбрано из: 
, ,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
и
, и соли любого из них.
[0026] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к соединению, представленному структурой формулы (IA):
или его фармацевтически приемлемой соли, где:
представляет собой необязательную двойную связь,
L1 выбран из -X1-, -X2-C1-6алкилен-X2-C1-6алкилена-, -X2-C2-6алкенилен-X2- и -X2-C2-6алкинилен-X2-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более R12,
L2 выбран из -X2-, -X2-C1-6алкилен-X2-, -X2-C2-6алкенилен-X2- и -X2-C2-6алкинилен-X2-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более R12,
X1 выбран из -S-*, -N(R10)-*, -C(O)O-*, -OC(O)-*, -OC(O)O-*, - C(O)N(R10)C(O)- *, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)*, -N(R10)C(O)-*, -CR102N(R10)C(O)-*, -N(R10)C(O)N(R10)-*, -N(R10)C(O)O-*, -OC(O)N(R10)-*, -C(NR10)-*, -N(R10)C(NR10)-*, -C(NR10)N(R10)-*, -N(R10)C(NR10)N(R10)-*, -S(O)2-*, -OS(O)-*, -S(O)O-*, -S(O), -OS(O)2-*, -S(O)2O*, -N(R10)S(O)2-*, -S(O)2N(R10)-*, -N(R10)S(O)-*, -S(O)N(R10)-*, -N(R10)S(O)2N(R10)-* и -N(R10)S(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи X1 с R3,
X2 независимо выбран в каждом случае из -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10), -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O), -OS(O)2-, -S(O)2O, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R3 выбран из необязательно замещенного С3-12 карбоцикла и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла, где заместители на R3 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R3 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из: водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила,
R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла. В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (IA) представлено формулой (IB):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, и
R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл.
[0027] В некоторых вариантах осуществления R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OH, -NO2, -CN и C1-10 алкила. В некоторых вариантах осуществления каждый из R20, R21, R22 и R23 представляет собой водород.
[0028] В некоторых вариантах осуществления R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OH, -NO2, -CN и C1-10 алкила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл. В некоторых вариантах осуществления каждый из R24 и R25 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-5 карбоцикл.
[0029] В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R2 представляет собой водород.
[0030] В некоторых вариантах осуществления L1 выбран из -N(R10)C(O)-*, -S(O)2N(R10)-*, -CR102N(R10)C (O)-* и -X2-C1-6алкилен-X2-C1-6алкилена-. В некоторых вариантах осуществления L1 выбран из -N(R10)C(O)-*. В некоторых вариантах осуществления R10 в -N(R10)C(O)-* выбран из водорода и C1-6 алкила. Например, L1 может представлять собой -NHC(O)-*. В некоторых вариантах осуществления L1 выбран из -S(O)2N(R10)-*. В некоторых вариантах осуществления R10 в -S(O)2N(R10)-* выбран из водорода и C1-6 алкила. Например, L1 представляет собой -S(O)2NH-*. В некоторых вариантах осуществления L1 представляет собой -CR102N(R10)C(O)-*. В некоторых вариантах осуществления L1 выбран из -CH2N(H)C(O)-* и -CH(CH3)N(H)C(O)-*.
[0031] В некоторых вариантах осуществления R3 выбран из необязательно замещенного C3-12 карбоцикла и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла, где заместители на R3 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R3 выбран из необязательно замещенного C3-12 карбоцикла и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла, где заместители на R3 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла.
[0032] В некоторых вариантах осуществления R3 выбран из необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарила. В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой необязательно замещенный гетероарил. R3 может представлять собой необязательно замещенный гетероарил, замещенный одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R3 выбран из необязательно замещенного 6-членного гетероарила. Например, R3 может представлять собой необязательно замещенный пиридин. В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой необязательно замещенный арил. В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой необязательно замещенный арил, замещенный одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. R3 может представлять собой необязательно замещенный фенил. В некоторых вариантах осуществления R3 выбран из пиридина, фенила, тетрагидронафталина, тетрагидрохинолина, тетрагидроизохинолина, индана, циклопропилбензола, циклопентапиридина и дигидробензоксаборола, любой из которых является необязательно замещенным. R3 может быть выбран из: ,
,
, ,
,
,
,
, ,
,
,
,
и
, любой из которых является необязательно замещенным. Например, R3 может быть выбран из:
[0033] ,
,
, , , , , , , , , ,
, , , , , , , .
, , , , ,
,
,
, , , , , , , , , ,
, ,
, ,
,
,
,
,
,
,
и
.
[0034] В некоторых вариантах осуществления L2 выбран из -C(O)- и -C(O)NR10-. В некоторых вариантах осуществления L2 представляет собой -C(O)-. В некоторых вариантах осуществления L2 выбран из -C(O)NR10-. R10 в -C(O)NR10- может быть выбран из водорода и C1-6 алкила. Например, L2 может представлять собой -C(O)NH-.
[0035] В некоторых вариантах осуществления R4 выбран из -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0031] В некоторых вариантах осуществления R4 выбран из -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла. В некоторых вариантах осуществления R4 выбран из -OR10 и -N(R10)2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой -N(R10)2. R10 в -N(R10)2 может быть независимо выбран в каждом случае из необязательно замещенного C1-6 алкила. В некоторых вариантах осуществления R10 в -N(R10)2 независимо выбран в каждом случае из метила, этила, пропила и бутила, любой из которых является необязательно замещенным. Например, R4 может представлять собой . В некоторых вариантах осуществления L2-R4 представляет собой .
[0037] В некоторых вариантах осуществления R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла.
[0038] В некоторых вариантах осуществления соединение выбрано из: ,
и соли любого из них.
[0039] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к соединению, представленному структурой формулы (IVA):
или его фармацевтически приемлемой соли, где:
представляет собой необязательную двойную связь,
L12 выбран из -X3-, -X3-C1-6алкилен-X3-, -X3-C2-6алкенилен-X3- и -X3-C2-6алкинилен-X3-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более заместителями, независимо выбранными из R12,
L22 независимо выбран из -X4-, -X4-C1-6алкилен-X4-, -X4-C2-6алкенилен-X4- и -X4-C2-6алкинилен-X4-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более заместителями, независимо выбранными из R10,
X3 и X4 независимо выбраны в каждом случае из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, S(O)-, -OS(O)2-, -S(O)2O-, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из L3 и водорода, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 и R8 независимо выбраны из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 и R8 необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из L3, водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила,
L3 представляет собой линкерный фрагмент, где по меньшей мере один из R1, R2 и R10 представляет собой L3, или по меньшей мере один заместитель на группе, выбранной из R1, R2, R4, R8, X3 и X4, представляет собой L3, и
R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла. В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (IVA) представлено формулой (IVB):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, и
R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл.
[0040] В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой L3. В некоторых вариантах осуществления R2 представляет собой L3.
[0041] В некоторых вариантах осуществления L12 представляет собой -C(O)N(R10)-. В некоторых вариантах осуществления R10 в -C(O)N(R10)- выбран из водорода, C1-6 алкила и L3. Например, L12 может представлять собой -C(O)NH-.
[0042] В некоторых вариантах осуществления R8 представляет собой необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил. R8 может представлять собой необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, замещенный L3. В некоторых вариантах осуществления R8 представляет собой необязательно замещенный пиридин, замещенный L3.
[0043] В некоторых вариантах осуществления L22 выбран из -C(O)- и -C(O)NR10-.В некоторых вариантах осуществления L22 представляет собой -C(O)-. В некоторых вариантах осуществления L22 представляет собой -C(O)NR10-. R10 в -C(O)NR10- может быть выбран из водорода, C1-6 алкила и -L3. Например, L22 может представлять собой -C(O)NH-.
[0044] В некоторых вариантах осуществления R4 выбран из -OR10 и -N(R10)2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла, арила и гетероарила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой -N(R10)2 и R10 в -N(R10)2 выбран из L3 и водорода, и где по меньшей мере один R10 в -N(R10)2 представляет собой L3.
[0045] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к соединению из таблицы 1 или его соли, выбранному из: 1.1, 1.2, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12, 1.13, 1.14, 1.15, 1.16, 1.17, 1.18, 1.19, 1.20, 1.23, 1.24, 1.25, 1.26, 1.27, 1.29, 1.30, 1.31, 1.32, 1.33, 1.34, 1.35, 1.36, 1.37, 1.38, 1.39, 1.40, 1.41, 1.42, 1.43, 1.44, 1.45, 1.46, 1.48 1.50, 1.51, 1.52, 1.53, 1.54, 1.55, 1.56, 1.57, 1.58, 1.59, 1.60, 1.61 и 1.63.
[0046] В некоторых вариантах осуществления соединение дополнительно ковалентно связано с линкером L3. В некоторых вариантах осуществления L3 представляет собой нерасщепляемый линкер. В некоторых вариантах осуществления L3 представляет собой расщепляемый линкер. L3 может расщепляться лизосомальным ферментом. В некоторых вариантах осуществления соединение ковалентно присоединено к конструкции на основе антитела. В некоторых вариантах осуществления соединение ковалентно присоединено к нацеливающему фрагменту, необязательно через линкер. В некоторых вариантах осуществления нацеливающий фрагмент или конструкция на основе антитела специфически связывается с опухолевым антигеном. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела или нацеливающий фрагмент дополнительно содержит мишень-связывающий домен.
[0047] В некоторых вариантах осуществления L3 представлен формулой: ,
где L4 представляет собой С-конец пептида, и L5 выбран из связи, алкилена и гетероалкилена, где L5 необязательно замещен одной или более группами, независимо выбранными из R32, и RX представляет собой реакционноспособный фрагмент, и
R32 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2, -NO2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2, -NO2. В некоторых вариантах осуществления RX содержит уходящую группу. В некоторых вариантах осуществления RX содержит малеимид. В некоторых вариантах осуществления L3 дополнительно ковалентно связан с конструкцией на основе антитела. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела направлена против опухолевого антигена. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела дополнительно содержит мишень-связывающий домен.
[0048] В некоторых вариантах осуществления L3 представлен формулой: ,
где L4 представляет собой С-конец пептида и L5 выбран из связи, алкилена и гетероалкилена, где L5 необязательно замещен одной или более группами, независимо выбранными из R32, RX* содержит связь, сукцинимидный фрагмент или гидролизованный сукцинимидный фрагмент, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, где на RX* представляет собой точку присоединения к остатку в конструкции на основе антитела, и
R32 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2, -NO2; и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2, -NO2. В некоторых вариантах осуществления пептид в L3 содержит Val-Cit или Val-Ala.
[0049] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к соединению или соли, выбранным из:
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
и соли любого из них.
[0050] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к соединению или соли, выбранным из:
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
и соли любого из них, где RX* представляет собой связь, сукцинимидный фрагмент или гидролизованный сукцинимидный фрагмент, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, где на RX* представляет собой точку присоединения к остатку в конструкции на основе антитела.
[0051] В некоторых вариантах осуществления L3 представлен формулой: , где RX содержит реакционноспособный фрагмент, и n равно 0-9. В некоторых вариантах осуществления RX содержит уходящую группу. В некоторых вариантах осуществления RX содержит малеимид. В некоторых вариантах осуществления L3 представляет собой
, где RX* содержит связь, сукцинимидный фрагмент или гидролизованный сукцинимидный фрагмент, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, где
на RX* представляет собой точку присоединения к остатку в конструкции на основе антитела, и n равно 0-9.
[0052] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к соединению или соли, выбранным из:
,
,
,
и соли любого из них.
[0053] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к соединению или соли, выбранным из: ,
,
,
и соли любого из них, где RX* содержит связь, сукцинимидный фрагмент или гидролизованный сукцинимидный фрагмент, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, где
на RX* представляет собой точку присоединения к остатку в конструкции на основе антитела.
[0054] В некоторых вариантах осуществления RX* содержит сукцинамидный фрагмент и связан с остатком цистеина в конструкции на основе антитела. В некоторых вариантах осуществления RX* содержит гидролизованный сукцинамидный фрагмент и связан с остатком цистеина в конструкции на основе антитела. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антигенсвязывающий домен к HER2. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антигенсвязывающий домен к TROP2. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой пертузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой трастузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой сацитузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент.
[0055] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к конъюгату, представленному формулой: , где антитело представляет собой конструкцию на основе антитела, D представляет собой соединение или соль, как описано в настоящем документе, и L3 представляет собой линкерный фрагмент.
[0056] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к конъюгату, представленному формулой: , где антитело представляет собой конструкцию на основе антитела, и D-L3 представляет собой соединение или соль, как описано в настоящем документе.
[0057] В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антигенсвязывающий домен к HER2. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антигенсвязывающий домен к TROP2. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой пертузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой трастузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой сацитузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент.
[0058] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение или соль, как описано в настоящем документе, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
[0059] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей конъюгат, как описано в настоящем документе, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
[0060] В некоторых вариантах осуществления среднее соотношение между лекарственным средством и антителом (DAR) для конъюгата составляет от приблизительно 2 до приблизительно 8, или от приблизительно 1 до приблизительно 3, или от приблизительно 3 до приблизительно 5.
[0061] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу уничтожения опухолевых клеток in vivo, включающему приведение популяции опухолевых клеток в контакт с конъюгатом, как описано в настоящем документе.
[0062] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу лечения, включающему введение субъекту конъюгата, как описано в настоящем документе.
[0063] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу лечения, включающему введение субъекту, нуждающемуся в этом, соединения или соли, как описано в настоящем документе.
[0064] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение субъекту, нуждающемуся в этом, конъюгата, как описано в настоящем документе.
[0065] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение субъекту, нуждающемуся в этом, соединения или соли, как описано в настоящем документе.
[0066] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к соединению или соли, как описано в настоящем документе, для применения в способе лечения организма субъекта посредством терапии.
[0067] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к соединению или соли, как описано в настоящем документе, для применения в способе лечения рака.
[0068] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к конъюгату, как описано в настоящем документе, для применения в способе лечения организма субъекта посредством терапии.
[0069] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к конъюгату, как описано в настоящем документе, для применения в способе лечения рака.
[0070] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу доставки бензазепинового соединения к раковой клетке у субъекта, включающему введение конъюгата, как описано в настоящем документе, нуждающемуся в этом субъекту.
[0071] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение эффективного количества конъюгата антитела, где конъюгат антитела содержит конструкцию на основе антитела, ковалентно связанную через линкер с агонистом TLR8, где агонист TLR8 имеет Kd для TLR7, в два раза или более чем в два раза превышающую Kd для TLR8, и где конъюгат антитела содержит от 1 до 20 агонистов TLR8 на конструкцию на основе антитела, предпочтительно от 1 до 8, от 3 до 5 или от 1 до 3.
[0072] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение эффективного количества конъюгата антитела, где конъюгат антитела содержит конструкцию на основе антитела, ковалентно связанную через линкер с агонистом TLR8, где агонист TLR8 оказывает агонистическое действие на TLR8 с по меньшей мере EC50, на порядок меньшей, чем количество того же соединения, требуемое для проявления агонистического действия на TLR7, и где конъюгат антитела содержит от 1 до 20 агонистов TLR8 на конструкцию на основе антитела, предпочтительно от 1 до 8, от 3 до 5 или от 1 до 3.
[0073] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение эффективного количества конъюгата антитела, где конъюгат антитела содержит конструкцию на основе антитела, ковалентно связанную через линкер с агонистом TLR8, где агонист TLR8 содержит бензазепин, замещенный бициклическим гетероциклом, и где конъюгат антитела содержит от 1 до 20 агонистов TLR8 на конструкцию на основе антитела, предпочтительно от 1 до 8, от 3 до 5 или от 1 до 3.
[0074] В некоторых вариантах осуществления, настоящее изобретение относится к способу получения конъюгата антитела формулы , где антитело представляет собой конструкцию на основе антитела, и L3-D выбран из соединения или соли, как описано в настоящем документе, включающему приведение L3-D в контакт с конструкцией на основе антитела.
[0075] В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антигенсвязывающий домен к HER2. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антигенсвязывающий домен к TROP2. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой пертузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой трастузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой сацитузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых вариантах осуществления способы дополнительно включают очистку конъюгата антитела.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[0076] Новые признаки настоящего изобретения изложены с особым вниманием в прилагаемой формуле изобретения. Особенности и преимущества настоящего изобретения будут лучше поняты из нижеследующего подробного описания, содержащего иллюстративные варианты осуществления, в которых раскрыты принципы настоящего изобретения, и прилагаемых графических материалов, где:
[0077] На фигуре 1 показано, что конъюгаты агониста HER2-TLR8 и конъюгаты агониста HER2 × CD40 TLR8 были активными в присутствии мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК) и клеток SKBR3, которые экспрессируют HER2, что измеряли по продукции TNFα.
[0078] На фигуре 2 показано, что конъюгаты агониста TROP2-TLR8 были активными в присутствии МКПК и клеток SKBR3, которые экспрессируют HER2, что измеряли по продукции TNFα.
[0079] На фигуре 3 показано, что конъюгат агониста CEA-TLR8 был активен в присутствии моноцитов и клеток СНО, сконструированных для экспрессии СЕА, тогда как отдельно антитело СЕА, и контрольные антитела и конъюгаты не были активны, что измеряли по продукции TNFα.
[0080] На фигуре 4 показано, что конъюгат агониста анти-CEA-TLR8 и конъюгат агониста CEA × CD40 TLR8 были активными в присутствии моноцитов и клеток SKCO-1, что измеряли по продукции TNFα.
[0081] На фигуре 5 показано, что конъюгат агониста TROP TRL8 был активным в зависимости от дозы на различных линиях клеток, экспрессирующих TROP2.
[0082] На фигуре 6 показано, что конъюгат агониста TROP2 TLR8 был активным в зависимости от дозы на различных клеточных линиях, экспрессирующих TROP2.
[0083] На фигуре 7 показана индукция TNF-α в клетках SKBR3 конъюгатами aTROP2.
[0084] На фигуре 8 показана индукция TNF-α в клетках MCF7 конъюгатами aTROP2.
[0085] На фигуре 9 показана индукция TNF-α в клетках NCI-N87 конъюгатами aHER2.
[0086] На фигуре 10 показана индукция TNF-α в клетках MDA-MB-453 конъюгатами aHER2.
ВКЛЮЧЕНИЕ В ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ СВЕДЕНИЙ ПОСРЕДСТВОМ ССЫЛКИ
[0087] Все публикации, патенты и заявки на патенты, упомянутые в настоящем описании, включены в настоящее описание посредством ссылки в той же степени, как если бы каждая отдельная публикация, патент или заявка на патент была специально и индивидуально включена посредством ссылки.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0088] Несмотря на то, что предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения показаны и описаны в данном документе, специалистам в данной области техники будет очевидно, что такие варианты осуществления представлены только в качестве примера. Специалисты в данной области техники могут осуществлять различные вариации, изменения и замены без отступления от изобретения. Следует понимать, что различные альтернативы вариантов осуществления настоящего изобретения, описанных в данном документе, могут быть применены на практике. Предполагается, что нижеследующая формула настоящего изобретения определяет объем изобретения и что таким образом охватываются способы и структуры в пределах объема этой формулы настоящего изобретения и их эквиваленты.
[0089] Настоящее изобретение относится к соединениям, конъюгатам и фармацевтическим композициям для применения для лечения заболеваний. В определенных вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению представляют собой модуляторы TLR8. В определенных вариантах осуществления соединения представляют собой агонисты TLR8. Toll-подобные рецепторы (TLR) представляют собой семейство трансмембранных рецепторов, которые экспрессируются на клетках иммунной системы, таких как дендритные клетки, макрофаги, моноциты, T-клетки, B-клетки, NK-клетки и тучные клетки, но также и на различных неиммунных клетках, таких как эндотелиальные клетки, эпителиальные клетки и даже опухолевые клетки. TLR могут иметь много изоформ, включая TLR4, TLR7 и TLR8.
[0090] TLR8 локализуются в эндолизосомальном/фагосомальном компартменте и преимущественно экспрессируются клетками миелоидного происхождения. Лигирование TLR приводит к активации NF-κB и IRF-зависимых путей с определенной последовательностью активации и ответом в отношении конкретного TLR и типа клеток. В то время как TLR7 в основном экспрессируется во всех подтипах дендритных клеток (ДК и, в контексте настоящего документа, пДК, плазмацитоидные дендритные клетки) и может индуцироваться в B-клетках при стимуляции IFNα, экспрессия TLR8 в значительной степени ограничена моноцитами, макрофагами и миелоидными ДК. Сигналинг TLR8 через MyD88 может активироваться бактериальной одноцепочечной РНК, агонистами малых молекул и микроРНК. Активация TLR8 приводит к продуцированию различных провоспалительных цитокинов, таких как IL-6, IL-12 и TNF-α, и к усилению экспрессии костимулирующих молекул, таких как CD80, CD86 и хемокиновые рецепторы. Кроме того, активация TLR8 может индуцировать интерферон I типа (IFNβ) в первичных моноцитах человека.
[0091] Более агонистов, нацеленных на активацию различных TLR, можно применять при различных иммунотерапиях, включая адъювант вакцины и при иммунотерапии рака. Агонисты TLR могут варьироваться от простых молекул до сложных макромолекул. Аналогично, размеры агонистов TLR могут варьироваться от маленьких до больших. Агонисты TLR могут быть синтетическими или биосинтетическими агонистами. Агонисты TLR также могут представлять собой патоген-ассоциированный молекулярный паттерн (ПАМП).
[0092] Соединения по настоящему изобретению могут быть полезны для лечения и профилактики, например, вакцинации, рака, аутоиммунных заболеваний, воспаления, сепсиса, аллергии, астмы, отторжения трансплантата, болезни "трансплантат против хозяина", иммунодефицитов и инфекционных заболеваний.
[0093] В определенных вариантах осуществления соединения можно применять для лечения рака либо в виде отдельных агентов, либо в комбинированной терапии. В некоторых вариантах осуществления соединения можно применять в качестве отдельно взятых иммуномодуляторов, адъювантом вакцины и в сочетании с традиционными методами лечения рака. В определенных вариантах осуществления соединения включают в конъюгат, который можно применять, например, для усиления иммунного ответа. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к конъюгатам конструкции на основе антитела и бензазепинового соединения и их применению для лечения рака.
Определения
[0094] Если не определено иначе, все технические и научные термины, в контексте настоящего документа, имеют то же значение, которое обычно понимает специалист в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Все патенты и публикации, в контексте настоящего документа, включены посредством ссылки.
[0095] В контексте настоящего описания и формулы настоящего изобретения, формы единственного числа включают формы множественного числа, если явно не указано иное.
[0096] Термин "антитело", в контексте настоящего документа, может относиться к молекуле иммуноглобулина, которая специфически связывается или является иммунологически реактивной по отношению к конкретному антигену. Антитело может включать, например, его поликлональные, моноклональные, генетически сконструированные и антигенсвязывающие фрагменты. Антитело может быть, например, мышиным, химерным, гуманизированным, гетероконъюгатом, биспецифичным, диателом, триателом или тетрателом. Антигенсвязывающий фрагмент может включать, например, Fab', F(ab')2, Fab, Fv, rIgG и scFv.
[0097] Термин "антигенсвязывающий домен", в контексте настоящего документа, относится к области молекулы, которая связывается с антигеном. Антигенсвязывающий домен по настоящему изобретению может представлять собой домен, который может специфически связываться с антигеном. Антигенсвязывающий домен может представлять собой антигенсвязывающую часть антитела или фрагмент антитела. Антигенсвязывающий домен может представлять собой один или более фрагментов антитела, которые могут сохранять способность специфически связываться с антигеном. Антигенсвязывающий домен может представлять собой антигенсвязывающий фрагмент. Антигенсвязывающий домен может распознавать один антиген. Антигенсвязывающий домен может распознавать, например, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять или более антигенов.
[0098] Термин "конструкция на основе антитела", в контексте настоящего документа, относится к молекуле, например, белку, пептиду, антителу или его части, которая содержит антигенсвязывающий домен и Fc домен. Конструкция на основе антитела может распознавать, например, множественные антигены.
[0099] Сокращения для аминокислот, в контексте настоящего документа, являются общепринятыми и могут быть следующими: аланин (A, Ala), аргинин (R, Arg), аспарагин (N, Asn), аспарагиновая кислота (D, Asp), цистеин (C, Cys), глутаминовая кислота (E, Glu), глютамин (Q, Gln), глицин (G, Gly), гистидин (H, His), изолейцин (I, Ile), лейцин (L, Leu), лизин (K, Lys), метионин (М, Met), фенилаланин (F, Phe), пролин (P, Pro), серин (S, Ser), треонин (T, Thr), триптофан (W, Trp), тирозин (Y, Tyr), валин (V, Val). Другие аминокислоты включают цитруллин (Cit), гомоцистеин (Hey), гидроксипролин (Hyp), орнитин (Orn), и тироксин (Thx).
[0100] Термин "конъюгат" в контексте настоящего описания относится к конструкции на основе антитела, которая связана, например, ковалентно связана, либо непосредственно, либо через линкер с соединением или соединением-линкером, описанным здесь, например, соединение или соль по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0101] Термин "Fc домен", в контексте настоящего документа, может представлять собой Fc домен антитела или не-антитела, который может связываться с Fc рецептором.
[0102] Термин "распознавать", в контексте настоящего документа, в отношении взаимодействий антител может относиться к ассоциации или связыванию между антигенсвязывающим доменом антитела или его части и антигеном.
[0103] Термин "мишень-связывающий домен", в контексте настоящего документа, может относиться к конструкции, которая содержит антигенсвязывающий домен антитела или не-антитела, которое может связываться с антигеном.
[0104] Термин "опухолевый антиген", в контексте настоящего документа, может представлять собой антигенную субстанцию, связанную с опухолью или раковой клеткой, и может вызывать иммунный ответ у хозяина.
[0105] Термин "соль" или "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, полученным из множества органических и неорганических противоионов, хорошо известных в данной области техники. Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты могут быть образованы с неорганическими кислотами и органическими кислотами. Неорганические кислоты, из которых могут быть получены соли, включают, например, соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, фосфорную кислоту и тому подобное. Органические кислоты, из которых могут быть получены соли, включают, например, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, пировиноградную кислоту, щавелевую кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, коричную кислоту, миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту, салициловую кислоту и тому подобное. Фармацевтически приемлемые соли присоединения основания могут быть образованы с неорганическими и органическими основаниями. Неорганические основания, из которых могут быть получены соли, включают, например, натрий, калий, литий, аммоний, кальций, магний, железо, цинк, медь, марганец, алюминий и тому подобное. Органические основания, из которых могут быть получены соли, включают, например, первичные, вторичные и третичные амины, замещенные амины, включая встречающиеся в природе замещенные амины, циклические амины, основные ионообменные смолы и тому подобное, в частности, такие как изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триэтиламин, трипропиламин и этаноламин. В некоторых вариантах фармацевтически приемлемая соль присоединения основания выбрана из солей аммония, калия, натрия, кальция и магния.
[0106] Термин "Cx-y" при применении в сочетании с химическим фрагментом, таким как алкил, алкенил или алкинил, подразумевает включение групп, которые содержат от x до y атомов углерода в цепи. Например, термин "С1-6 алкил" относится к замещенным или незамещенным насыщенным углеводородным группам, включая алкильные группы с прямой или разветвленной цепью, которые содержат от 1 до 6 атомов углерода. Термин -Cx-yалкилен- относится к замещенной или незамещенной алкиленовой цепи с числом атомов углерода от x до y в алкиленовой цепи. Например, -C1-6алкилен- может быть выбран из метилена, этилена, пропилена, бутилена, пентилена и гексилена, любой из которых является необязательно замещенным.
[0107] Термины "Cx-yалкенил" и "Cx-yалкилнил" относятся к замещенным или незамещенным ненасыщенным алифатическим группам, аналогичным по длине и возможному замещению по алкилам, как описанно выше, но которые содержат по меньшей мере одну двойную или тройную связь, соответственно. Термин -Cx-yалкенилен- относится к замещенной или незамещенной алкениленовой цепи с числом атомов углерода от x до y в алкениленовой цепи. Например, -C2-6алкенилен- может быть выбран из этенилена, пропенилена, бутенилена, пентенилена и гексенилена, любой из которых является необязательно замещенным. Алкениленовая цепь может иметь одну двойную связь или более одной двойной связи в алкениленовой цепи. Термин -Cx-yалкилкилен- относится к замещенной или незамещенной алкиниленовой цепи с числом атомов углерода от x до y в алкениленовой цепи. Например, -C2-6алкенилен- может быть выбран из этинилена, пропинилена, бутинилена, пентинилена и гексинилена, любой из которых является необязательно замещенным. Алкиниленовая цепь может иметь одну тройную связь или более одной тройной связи в алкиниленовой цепи.
[0108] "Алкилен" относится к прямой двухвалентной углеводородной цепи, связывающей остальную часть молекулы с радикальной группой, состоящей исключительно из углерода и водорода, не содержащей ненасыщенности и предпочтительно имеющей от одного до двенадцати атомов углерода, например, метилен, этилен, пропилен, бутилен и тому подобное. Алкиленовая цепь присоединена к остальной части молекулы через одинарную связь и к радикальной группе через одинарную связь. Точки присоединения алкиленовой цепи к остальной части молекулы и к радикальной группе оканчивают концевые атомы углерода соответственно. В других вариантах осуществления алкилен содержит от одного до пяти атомов углерода (то есть C1-C5 алкилен). В других вариантах осуществления алкилен содержит от одного до четырех атомов углерода (то есть C1-C4 алкилен). В других вариантах осуществления алкилен содержит от одного до трех атомов углерода (то есть C1-C3 алкилен). В других вариантах осуществления алкилен содержит от одного до двух атомов углерода (то есть C1-C2 алкилен). В других вариантах осуществления алкилен содержит один атом углерода (то есть С1 алкилен). В других вариантах осуществления алкилен содержит от пяти до восьми атомов углерода (то есть C5-C8 алкилен). В других вариантах осуществления алкилен содержит от двух до пяти атомов углерода (то есть C2-C5 алкилен). В других вариантах осуществления алкилен содержит от трех до пяти атомов углерода (то есть C3-C5 алкилен). Если специально не указано иное в описании, алкиленовая цепь необязательно замещена одним или более заместителями, такими как те заместители, которые описаны в настоящем документе.
[0109] "Алкенилен" относится к прямой двухвалентной углеводородной цепи, связывающей остальную часть молекулы с радикальной группой, состоящей исключительно из углерода и водорода, содержащей по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь и предпочтительно имеющей от двух до двенадцати атомов углерода. Алкениленовая цепь присоединена к остальной части молекулы через одинарную связь и к радикальной группе через одинарную связь. Точки присоединения алкениленовой цепи к остальной части молекулы и к радикальной группе оканчивают концевые атомы углерода соответственно. В других вариантах осуществления алкенилен содержит от двух до пяти атомов углерода (то есть C2-C5 алкенилен). В других вариантах осуществления алкенилен содержит от двух до четырех атомов углерода (то есть C2-C4 алкенилен). В других вариантах осуществления алкенилен содержит от двух до трех атомов углерода (то есть C2-C3 алкенилен). В других вариантах осуществления алкенилен содержит два атома углерода (то есть C2 алкенилен). В других вариантах осуществления алкенилен содержит от пяти до восьми атомов углерода (то есть C5-C8 алкенилен). В других вариантах осуществления алкенилен содержит от трех до пяти атомов углерода (то есть C3-C5 алкенилен). Если специально не указано иное в описании, алкениленовая цепь необязательно замещена одним или более заместителями, такими как те заместители, которые описаны в настоящем документе.
[0110] "Алкинилен" относится к прямой двухвалентной углеводородной цепи, связывающей остальную часть молекулы с радикальной группой, состоящей исключительно из углерода и водорода, содержащей по меньшей мере одну тройную углерод-углеродную связь и предпочтительно имеющей от двух до двенадцати атомов углерода. Алкиниленовая цепь присоединена к остальной части молекулы через одинарную связь и к радикальной группе через одинарную связь. Точки присоединения алкиниленовой цепи к остальной части молекулы и к радикальной группе оканчивают концевые атомы углерода соответственно. В других вариантах осуществления алкинилен содержит от двух до пяти атомов углерода (то есть C2-C5 алкинилен). В других вариантах осуществления алкинилен содержит от двух до четырех атомов углерода (то есть C2-C4 алкинилен). В других вариантах осуществления алкинилен содержит от двух до трех атомов углерода (то есть C2-C3 алкинилен). В других вариантах осуществления алкинилен содержит два атома углерода (то есть C2 алкинилен). В других вариантах осуществления алкинилен содержит от пяти до восьми атомов углерода (то есть C5-C8 алкинилен). В других вариантах осуществления алкинилен содержит от трех до пяти атомов углерода (то есть C3-C5 алкинилен). Если специально не указано иное в описании, алкиниленовая цепь необязательно замещена одним или несколькими заместителями, такими как те заместители, которые описаны в настоящем документе.
[0111] "Гетероалкилен" относится к прямой двухвалентной углеводородной цепи, включающей по меньшей мере один гетероатом в цепи, не содержащий ненасыщенности и предпочтительно имеющий от одного до двенадцати атомов углерода и от одного до 6 гетероатомов, например, -O-, -NH-, -S-. Гетероалкиленовая цепь присоединена к остальной части молекулы через одинарную связь и к радикальной группе через одинарную связь. Точки присоединения гетероалкиленовой цепи к остальной части молекулы и к радикальной группе оканчивают концевые атомы цепи. В других вариантах осуществления гетероалкилен содержит от одного до пяти атомов углерода и от одного до трех гетероатомов. В других вариантах осуществления гетероалкилен содержит от одного до четырех атомов углерода и от одного до трех гетероатомов. В других вариантах осуществления гетероалкилен содержит от одного до трех атомов углерода и от одного до двух гетероатомов. В других вариантах осуществления гетероалкилен содержит от одного до двух атомов углерода и от одного до двух гетероатомов. В других вариантах осуществления гетероалкилен содержит один атом углерода и от одного до двух гетероатомов. В других вариантах осуществления гетероалкилен содержит от пяти до восьми атомов углерода и от одного до четырех гетероатомов. В других вариантах осуществления гетероалкилен содержит от двух до пяти атомов углерода и от одного до трех гетероатомов. В других вариантах осуществления гетероалкилен содержит от трех до пяти атомов углерода и от одного до трех гетероатомов. Если специально не указано иное в описании, гетероалкиленовая цепь необязательно замещена одним или более заместителями, такими как те заместители, которые описаны в настоящем документе.
[0112] Термин "карбоцикл", в контексте настоящего документа, относится к насыщенному, ненасыщенному или ароматическому кольцу, где каждый атом кольца представляет собой углерод. Карбоцикл включает 3-10-членные моноциклические кольца, 6-12-членные бициклические кольца и 6-12-членные кольца с внутренним мостиком. Каждое кольцо бициклического карбоцикла может быть выбрано из насыщенных, ненасыщенных и ароматических колец. В типичном варианте осуществления ароматическое кольцо, например, фенил, может быть конденсировано с насыщенным или ненасыщенным кольцом, например, циклогексаном, циклопентаном или циклогексеном. Бициклический карбоцикл включает любую комбинацию насыщенных, ненасыщенных и ароматических бициклических колец, если позволяет валентность. Бициклический карбоцикл включает любую комбинацию размеров колец, таких как 4-5 конденсированные кольцевые системы, 5-5 конденсированные кольцевые системы, 5-6 конденсированные кольцевые системы, 6-6 конденсированные кольцевые системы, 5-7 конденсированные кольцевые системы, 6-7 конденсированные кольцевые системы, 5-8 конденсированные кольцевые системы и 6-8 конденсированные кольцевые системы. Типичные карбоциклы включают циклопентил, циклогексил, циклогексенил, адамантил, фенил, инданил и нафтил. Термин "ненасыщенный карбоцикл" относится к карбоциклам с по меньшей мере одной степенью ненасыщенности и исключает ароматические карбоциклы. Примеры ненасыщенных карбоциклов включают циклогексадиен, циклогексен и циклопентен.
[0113] Термин "гетероцикл", в контексте настоящего документа, относится к насыщенному, ненасыщенному или ароматическому кольцу, содержащему один или более гетероатомов. Типичные гетероатомы включают атомы N, O, Si, P, B и S. Гетероциклы включают 3-10-членные моноциклические кольца, 6-12-членные бициклические кольца и 6-12-членные кольца с внутренним мостиком. Бициклический гетероцикл включает любую комбинацию насыщенных, ненасыщенных и ароматических бициклических колец, если позволяет валентность. В типичном варианте осуществления ароматическое кольцо, например, пиридил, может быть конденсировано с насыщенным или ненасыщенным кольцом, например, циклогексаном, циклопентаном, морфолином, пиперидином или циклогексеном. Бициклический гетероцикл включает любую комбинацию размеров колец, таких как 4-5 конденсированные кольцевые системы, 5-5 конденсированные кольцевые системы, 5-6 конденсированные кольцевые системы, 6-6 конденсированные кольцевые системы, 5-7 конденсированные кольцевые системы, 6-7 конденсированные кольцевые системы, 5-8 конденсированные кольцевые системы и 6-8 конденсированные кольцевые системы. Термин "ненасыщенный гетероцикл" относится к гетероциклам с по меньшей мере одной степенью ненасыщенности и исключает ароматические гетероциклы. Примеры ненасыщенных гетероциклов включают дигидропиррол, дигидрофуран, оксазолин, пиразолин и дигидропиридин.
[0114] Термин "гетероарил" включает ароматические однокольцевые структуры, предпочтительно 5-7-членные кольца, более предпочтительно 5-6-членные кольца, чьи кольцевые структуры включают по меньшей мере один гетероатом, предпочтительно от одного до четырех гетероатомов, более предпочтительно один или два гетероатома. Термин "гетероарил" также включает полициклические кольцевые системы, имеющие два или более колец, в которых два или более атомов углерода являются общими для двух соседних колец, где по меньшей мере одно из колец является гетероароматическим, например, другие кольца могут быть ароматическими или неароматическими карбоциклическими, или гетероциклическими. Гетероарильные группы включают, например, пиррол, фуран, тиофен, имидазол, оксазол, тиазол, пиразол, пиридин, пиразин, пиридазин и пиримидин и тому подобное.
[0115] Термин "замещенный" относится к фрагментам, имеющим заместители, замещающие водород на одном или более атомах углерода или замещаемых гетероатомах, например, NH или NH2 соединения. Будет понятно, что "замещение" или "замещенный" включает неявное условие, что такое замещение соответствует допустимой валентности замещенного атома и заместителя, и что замещение приводит к стабильному соединению, то есть соединению, которое самопроизвольно не подвергается трансформации, такой как перегруппировка, циклизация, элиминирование и т. д. В некоторых вариантах осуществления термин "замещенный" относится к фрагментам, имеющим заместители, замещающие два атома водорода на одном и том же атоме углерода, например, замена двух атомов водорода на одном атоме углерода оксо, имино или тиоксо группой. Термин "замещенный", в контексте настоящего документа, предполагает включение всех допустимых заместителей органических соединений. В широком аспекте настоящего изобретения, допустимые заместители включают ациклические и циклические, разветвленные и неразветвленные, карбоциклические и гетероциклические, ароматические и неароматические заместители органических соединений. Допустимые заместители могут быть одним или более и одинаковыми или различными для соответствующих органических соединений.
[0116] В некоторых вариантах осуществления заместители могут включать любые заместители, описанные в настоящем документе, например: галоген, гидрокси, оксо (=O), тиоксо (=S), циано (-CN), нитро (-NO2), имино (=N-H), оксимо (=N-OH), гидразино (=N-NH2), -Rb-ORa, -Rb-OC(O)-Ra, -Rb-OC(O)-ORa, -Rb-OC(O)-N(Ra)2, -Rb-N(Ra)2, -Rb-C(O)Ra, -Rb-C(O)ORa, -Rb-C(O)N(Ra)2, -Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2, -Rb-N(Ra)C(O)ORa, -Rb-N(Ra)C(O)Ra, -Rb-N(Ra)S(O)tRa (где t равно 1 или 2), -Rb-S(O)tRa (где t равно 1 или 2), -Rb-S(O)tORa (где t равно 1 или 2) и -Rb-S(O)tN(Ra)2 (где t равно 1 или 2), и алкил, алкенил, алкинил, арил, аралкил, аралкенил, аралкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарил и гетероарилалкил, любой из которых может быть необязательно замещен алкилом, алкенилом, алкинилом, галогеном, галогеналкилом, галогеналкенилом, галогеналкинилом, оксо (=O), тиоксо (=S), циано (-CN), нитро (-NO2), имино (=N-H), оксимо (=N-OH), гидразином (=N-NH2), -Rb-ORa, -Rb-OC(O)-Ra, -Rb-OC(O)-ORa, -Rb-OC(O)-N(Ra)2, -Rb-N(Ra)2, -Rb-C(O)Ra, -Rb-C(O)ORa, -Rb-C(O)N(Ra)2, -Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2, -Rb-N(Ra)C(O)ORa, -Rb-N(Ra)C(O)Ra, -Rb-N(Ra)S(O)tRa (где t равно 1 или 2), -Rb-S(O)tRa (где t равно 1 или 2), -Rb-S(O)tORa (где t равно 1 или 2) и -Rb-S(O)tN(Ra)2 (где t равно 1 или 2) где каждый Ra независимо выбран из водорода, алкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арила, аралкила, гетероциклоалкила, гетероциклоалкилалкила, гетероарила или гетероарилалкила, где каждый Ra, если позволяет валентность, может быть необязательно замещен алкилом, алкенилом, алкинилом, галогеном, галогеналкилом, галогеналкенилом, галогеналкинилом, оксо (=O), тиоксо (=S), циано (-CN), нитро (-NO2), имино (=N-H), оксимо (=N-OH), гидразином (=N-NH2), -Rb-ORa, -Rb-OC(O)-Ra, -Rb-OC(O)-ORa, -Rb-OC(O)-N(Ra)2, -Rb-N(Ra)2, -Rb-C(O)Ra, -Rb-C(O)ORa, -Rb-C(O)N(Ra)2, -Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2, -Rb-N(Ra)C(O)ORa, -Rb-N(Ra)C(O)Ra, -Rb-N(Ra)S(O)tRa (где t равно 1 или 2), -Rb-S(O)tRa (где t равно 1 или 2), -Rb-S(O)tORa (где t равно 1 или 2) и -Rb-S(O)tN(Ra)2 (где t равно 1 или 2), и где каждый Rb независимо выбран из прямой связи или прямой или разветвленной алкиленовой, алкениленовой или алкиниленовой цепи, и каждый Rc представляет собой неразветвленную или разветвленную алкиленовую, алкениленовую или алкиниленовую цепь.
[0117] Специалистам в данной области техники будет понятно, что заместители сами могут быть замещены, если это необходимо. Если специально не указано, что они являются "незамещенными", ссылки на химические фрагменты в данном описании понимаются как включающие замещенные варианты. Например, указание на "гетероарильную" группу или фрагмент неявно включает как замещенные, так и незамещенные варианты, если не указано иное.
[0118] Выражения "парентеральное введение" и "введение парентерально", в контексте настоящего документа, означают способы введения, отличные от энтерального и местного введения, обычно путем инъекции, и включают, без ограничения, внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, интратекальную, интракапсулярную, интраорбитальную, внутрисердечную, внутрикожную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, внутрисуставную, подкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную и интрастернальную инъекцию и инфузию.
[0119] Выражение "фармацевтически приемлемый", в контексте настоящего документа, означает те соединения, материалы, композиции и/или лекарственные формы, которые с медицинской точки зрения подходят для применения с тканями людей и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем, или осложнений, соразмерные с разумным соотношением польза/риск.
[0120] Выражение "фармацевтически приемлемый эксципиент", в контексте настоящего документа, или "фармацевтически приемлемый носитель" означает фармацевтически приемлемый материал, композицию или носитель, такой как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, эксципиент, растворитель или материал для инкапсулирования. Каждый носитель должен быть "приемлемым" в смысле совместимости с другими ингредиентами композиции и не причинять вреда пациенту. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают: (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза, (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал, (3) целлюлоза и ее производные, такие как натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы, (4) порошкообразный трагакант, (5) солод, (6) желатин, (7) тальк, (8) наполнители, такие как масло какао и воски для суппозиториев, (9) масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло, (10) гликоли, такие как пропиленгликоль, (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль, (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат, (13) агар, (14) буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия, (15) альгиновая кислота, (16) апирогенная вода, (17) изотонический солевой раствор, (18) раствор Рингера, (19) этиловый спирт, (20) фосфатные буферные растворы, и (21) другие нетоксичные совместимые вещества, применяемые в фармацевтических композициях.
[0121] Выражение "нацеливающий фрагмент" относится к структуре, которая обладает селективным сродством к молекуле-мишени по сравнению с другими молекулами, не являющимися мишенями. Нацеливающий фрагмент связывается с молекулой-мишенью. Нацеливающий фрагмент может включать, например, антитело, пептид, лиганд, рецептор или его связывающую часть. Биологическая молекула-мишень может представлять собой биологический рецептор или другую структуру клетки, такую как опухолевый антиген.
Конструкция на основе антитела
[0122] В настоящем документе раскрыты конструкции на основе антител, которые можно применять вместе с соединениями по настоящему изобретению. В определенных вариантах осуществления соединения по изобретению связаны, например, ковалентно связаны, либо непосредственно, либо через линкер с соединением по настоящему изобретению, образуя конъюгаты. В определенных вариантах осуществления конъюгаты по настоящему изобретению представлены следующей формулой:
,
где A представляет собой конструкцию на основе антитела, L3 представляет собой линкер, D представляет собой соединение или соль по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) или (IIIC), или L3-D представляет собой соединение или соль по по любой из формул (IVA), (IVB) или (IVC), и n равно от 1 до 20. В некоторых вариантах осуществления n равно от 1 до 10, например, от 1 до 9, от 1 до 8, от 2 до 8, от 1 до 6, от 3 до 5 или от 1 до 3. В некоторых вариантах осуществления n равно 4. В некоторых вариантах осуществления каждый D или L3-D независимо выбран из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) или (IIIC), или формул (IVA), (IVB) или (IVC), соответственно.
[0123] В некоторых вариантах осуществления соединение или соль по настоящему изобретению, например, соединение или соль формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) могут упоминаться в настоящем документе как лекарственное средство, D, бензазепиновое соединение, иммуностимулирующее соединение, ISC или полезный груз, особенно когда упоминается как часть конъюгата. "ЛП", "линкер-полезный груз", "L3-D" или "соединение-линкер" могут применяться, в контексте настоящего документа, для обозначения соединения или соли по настоящему изобретению, связанных с линкером.
[0124] Конструкция на основе антитела по настоящему изобретению может содержать, например, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять или более антигенсвязывающих доменов. Конструкция на основе антитела может содержать два антигенсвязывающих домена, в которых каждый антигенсвязывающий домен может распознавать один и тот же антиген. Конструкция на основе антитела может содержать два антигенсвязывающих домена, в которых каждый антигенсвязывающий домен может распознавать разные антигены. Антигенсвязывающий домен может находиться в каркасе, где каркас представляет собой поддерживающий каркас для антигенсвязывающего домена. Антигенсвязывающий домен может находиться в каркасе, не принадлежащем к антителу. Антигенсвязывающий домен может находиться в каркасе антитела. Конструкция на основе антитела может содержать антигенсвязывающий домен в каркасе. Конструкция на основе антитела может содержать слитый белок Fc. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела представляет собой слитый белок Fc. Антигенсвязывающий домен может специфически связываться с опухолевым антигеном. Антигенсвязывающий домен может специфически связываться с антигеном, который по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 99% или на 100% гомологичен опухолевому антигену. Антигенсвязывающий домен может специфически связываться с антигеном на антигенпрезентирующей клетке (АРС). Антигенсвязывающий домен может специфически связываться с антигеном, который по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 99% или на 100% гомологичен антигену на антигенпрезентирующей клетке (АРС).
[0125] Антигенсвязывающий домен антитела может содержать один или более CDR легкой цепи (LC) и один или более CDR тяжелой цепи (HC). Например, антитело-связывающий домен антитела может содержать одно или более из следующих: область, определяющую комплементарность легкой цепи 1 (LC CDR1), область, определяющую комплементарность легкой цепи 2 (LC CDR2), или область, определяющую комплементарность легкой цепи 3 (LC CDR3). В другом примере антитело-связывающий домен может содержать одно или более из следующих: область, определяющую комплементарность тяжелой цепи 1 (HC CDR1), область, определяющую комплементарность тяжелой цепи 2 (HC CDR2), или область, определяющую комплементарность тяжелой цепи 3 (HC CDR3). В качестве дополнительного примера, антитело-связывающий домен антитела может содержать одно или более из следующих: LC CDR1, LC CDR2, LC CDR3, HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3.
[0126] Антигенсвязывающий домен конструкции на основе антитела может быть выбран из любого домена, который связывает антиген, включая, но не ограничиваясь ими, моноклональное антитело, поликлональное антитело, рекомбинантное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, например, вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), DARPin, аффимер, авимер, кноттин, монотело, аффинный зажим, внеклеточный домен, внеклеточный домен рецептора, рецептор, T-клеточный рецептор или рекомбинантный Т-клеточный рецептор.
[0127] Антигенсвязывающий домен конструкции на основе антитела может быть по меньшей мере на 80% гомологичен антигенсвязывающему домену, выбранному, но не ограничиваясь ими, из моноклонального антитела, поликлонального антитела, рекомбинантного антитела или его функционального фрагмента, например, вариабельного домена тяжелой цепи (VH) и вариабельного домена легкой цепи (VL), DARPin, аффимера, авимера, кноттина, монотела, аффинного зажима, внеклеточного домена, внеклеточного домена рецептора, рецептора, цитокина, лиганда, иммуноцитокина, Т-клеточного рецептора или рекомбинантного Т-клеточного рецептора.
[0128] В определенных вариантах осуществления конструкция на основе антитела по настоящему изобретению содержит Fc домен, который может дополнительно содержать Fc домен, в котором Fc домен может представлять собой часть Fc области, взаимодействующей с Fc рецепторами. Fc домен конструкции на основе антитела может взаимодействовать с Fc рецепторами (FcR), обнаруженными на иммунных клетках. Fc домен также может опосредовать взаимодействие между эффекторными молекулами и клетками, что может привести к активации иммунной системы. Домен Fc может происходить из изотипов антител IgG, IgA или IgD и может содержать два идентичных фрагмента белка, которые происходят из второго и третьего константных доменов тяжелых цепей антитела. В Fc домене, происходящем из изотипа антитела IgG, Fc область может содержать высококонсервативный сайт N-гликозилирования, который может быть существенным для FcR-опосредованных последующих эффектов. Домен Fc может происходить из изотипов антител IgM или IgE, в которых Fc домен может содержать три константных домена тяжелой цепи.
[0129] Fc домен может взаимодействовать с различными типами FcR. Различные типы FcR могут включать, например, FcγRI, FcγRIIA, FcγRIIB, FcγRIIIA, FcγRIIIB, FcαRI, FcμR, FcεRI, FcεRII и FcRn. FcR могут быть расположены на мембране определенных иммунных клеток, включая, например, В-лимфоциты, натуральные клетки-киллеры, макрофаги, нейтрофилы, фолликулярные дендритные клетки, эозинофилы, базофилы, тромбоциты и тучные клетки. Когда FcR задействован Fc доменом, FcR может инициировать функции, включая, например, клиренс комплекса антиген-антитело через рецептор-опосредованный эндоцитоз, антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (ADCC), антителозависимый клеточноопосредованный фагоцитоз (ADCP) и инициируемую лигандом передачу сигналов через плазматическую мембрану, которая может привести к изменениям секреции, экзоцитоза и клеточного метаболизма. FcR могут доставлять сигналы, при агрегации FcR антителами и многовалентными антигенами на клеточной поверхности. Агрегация FcR с иммунорецепторными тирозиновыми активирующими мотивами (ITAM) может последовательно активировать тирозинкиназы семейства SRC и тирозинкиназы семейства SYK. ITAM содержит дважды повторяющуюся последовательность YxxL, фланкирующую семь вариабельных остатков. Киназы SRC и SYK могут соединять преобразованные сигналы с общими путями активации.
[0130] Антитело по настоящему изобретению может состоять из двух идентичных легких белковых цепей и двух идентичных тяжелых белковых цепей, все ковалентно удерживаемые вместе дисульфидными связями. N-концевые области легкой и тяжелой цепей вместе могут образовывать сайт распознавания антигена антитела. Структурно различные функции антитела могут быть ограничены дискретными белковыми доменами (то есть областями). Сайты, которые могут распознавать и могут связывать антиген, могут состоять из трех областей, определяющих комплементарность (CDR), которые могут находиться в пределах вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи на N-концевом конце тяжелой цепи и легкой цепи. Константные домены могут обеспечивать общую структуру антитела и могут не участвовать непосредственно в связывании антитела с антигеном, но могут участвовать в различных эффекторных функциях, таких как участие антитела в антителозависимой клеточной цитотоксичности, и могут связывать Fc рецепторы. Константные домены могут содержать Fc область. Константные домены могут содержать Fc домен. Домены природных легких и тяжелых цепей могут иметь одинаковые общие структуры, и каждый домен может содержать четыре каркасных области, последовательности которых могут быть более консервативными, соединенными тремя гипервариабельными областями или CDR. Четыре каркасные области (FR) могут в значительной степени принимать конформацию β-листа, и CDR могут образовывать петли, соединяющие и, в некоторых аспектах, являющиеся частью структуры β-листа. CDR в каждой цепи могут удерживаться в непосредственной близости от каркасных областей и, вместе с CDR из другой цепи, могут способствовать образованию сайта связывания антигена.
[0131] Конструкция на основе антитела может содержать легкую цепь аминокислотной последовательности, имеющую по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять или десять модификаций, а в некоторых вариантах осуществления не более 40, 35 30, 25, 20, 15 или 10 модификаций аминокислотной последовательности относительно природной или исходной аминокислотной последовательности. Конструкция на основе антитела может содержать тяжелую цепь аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять или десять модификаций, а в некоторых вариантах осуществления не более 40, 35, 30, 25, 20, 15 или 10 модификаций аминокислотной последовательности относительно природной или исходной аминокислотной последовательности.
[0132] Антитело конструкции на основе антитела может включать антитело любого типа, которое может быть отнесено к различным классам иммуноглобинов, например, IgA, IgD, IgE, IgG и IgM. Несколько различных классов могут быть дополнительно разделены на изотипы, например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2. Антитело может дополнительно включать легкую цепь и тяжелую цепь, часто более чем одну цепь. Константные области тяжелой цепи (Fc), которые соответствуют различным классам иммуноглобулинов, могут представлять собой α, δ, ε, γ и μ соответственно. Легкие цепи могут представлять собой одну из каппа (κ) или лямбда (λ) на основе аминокислотных последовательностей константных доменов. Fc область может содержать Fc домен. Fc рецептор может связывать Fc домен. Конструкции на основе антител могут также включать любой их фрагмент или рекомбинантные формы, включая, но не ограничиваясь ими, одноцепочечные вариабельные фрагменты (scFv), "Т-тела", антикалины, центирины, аффитела, доменные антитела или пептидные антитела.
[0133] Конструкция на основе антитела может содержать фрагмент антитела. Фрагмент антитела может включать (i) фрагмент Fab, моновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и CH1, (ii) фрагмент F(ab')2, бивалентный фрагмент, содержащий два фрагмента Fab, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области, и (iii) фрагмент Fv, состоящий из доменов VL и VH одного плеча антитела. Хотя два домена фрагмента Fv, VL и VH, могут кодироваться отдельными генами, они могут быть связаны синтетическим линкером, который должен быть образован в виде единой белковой цепи, в которой области VL и VH образуют моновалентные молекулы.
[0134] Фрагменты F(ab')2 и Fab' могут быть получены с помощью генной инженерии или путем обработки иммуноглобулина (например, моноклонального антитела) протеазой, такой как пепсин и папаин, и могут включать фрагмент антитела, полученный путем расщепления иммуноглобулина вблизи дисульфидных связей, существующих между шарнирными областями в каждой из двух H-цепей. Фрагмент Fab также может содержать константный домен легкой цепи и первый константный домен (CH1) тяжелой цепи. Фрагменты Fab' могут отличаться от фрагментов Fab путем добавления нескольких остатков на карбоксильном конце домена CH1 тяжелой цепи, включая один или более цистеина(ов) из шарнирной области антитела.
[0135] Fv может представлять собой минимальный фрагмент антитела, который содержит полный антигенраспознающий и антигенсвязывающий сайт. Эта область может состоять из димера одной вариабельной области тяжелой цепи и одного легкой цепи в тесной нековалентной связи. В этой конфигурации три гипервариабельные области каждого вариабельного домена могут взаимодействовать, чтобы определить антигенсвязывающий сайт на поверхности димера VH-VL. Один вариабельный домен (или половина Fv, содержащая только три гипервариабельные области, специфичные для антигена) может распознавать и связывать антиген, хотя связывание может происходить при более низкой аффинности, по сравнению с аффинностью всего сайта связывания.
[0136] Антитело может включать Fc область, содержащую Fc домен. Fc домен антитела может взаимодействовать с FcR, обнаруженными в иммунных клетках. Fc домен также может опосредовать взаимодействие между эффекторными молекулами и клетками, что может привести к активации иммунной системы. В изотипах антител IgG, IgA и IgD Fc область может содержать два идентичных фрагмента белка, которые могут быть получены из второго и третьего константных доменов тяжелых цепей антитела. В изотипах антител IgM и IgE, Fc области могут содержать три константных домена тяжелой цепи. В изотипе антител IgG, Fc области могут содержать высококонсервативный сайт N-гликозилирования, который может быть важным для FcR-опосредованных последующих эффектов.
[0137] Антитело, в контексте настоящего документа, может быть "гуманизированным". Гуманизированные формы нечеловеческих (например, мышиных) антител могут представлять собой химерные иммуноглобулины, цепи иммуноглобулинов или их фрагменты (такие как Fv, Fab, Fab', F(ab')2 или другие мишень-связывающие субдомены антител), которые могут содержать минимальные последовательности, полученные из нечеловеческого иммуноглобулина. В общем, гуманизированное антитело может содержать по существу все, по меньшей мере один, и, как правило, два вариабельных домена, в которых все или по существу все области CDR соответствуют доменам нечеловеческого иммуноглобулина и все или по существу все каркасные области являются последовательностями иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело также может содержать по меньшей мере часть константной области иммуноглобулина (Fc), обычно, консенсусной последовательности человеческого иммуноглобулина.
[0138] Описанное в настоящем документе антитело может представлять собой человеческое антитело. Термин "антитела человека", в контексте настоящего документа, может включать антитела, имеющие, например, аминокислотную последовательность иммуноглобулина человека, и может включать антитела, выделенные из библиотек иммуноглобулинов человека или животных, трансгенных по одному или более иммуноглобулинам человека, которые не экспрессируют эндогенные иммуноглобулины. Человеческие антитела могут быть получены с применением трансгенных мышей, которые не способны экспрессировать функциональные эндогенные иммуноглобулины, но которые могут экспрессировать гены человеческого иммуноглобулина. Полностью человеческие антитела, которые распознают выбранный эпитоп, могут быть получены с помощью управляемого отбора. В этом подходе отобранное нечеловеческое моноклональное антитело, например, мышиное антитело, можно применять для направления отбора полностью человеческого антитела, распознающего тот же эпитоп.
[0139] Описанное в настоящем документе антитело может представлять собой биспецифичное антитело или антитело с двумя вариабельными доменами (DVD). Биспецифичные и DVD-антитела могут быть моноклональными, часто человеческими или гуманизированными антителами, которые могут иметь специфичность связывания по меньшей мере для двух разных антигенов.
[0140] Описанное в настоящем документе антитело может представлять собой дериватизированное антитело. Например, дериватизированные антитела могут быть модифицированы гликозилированием, ацетилированием, пегилированием, фосфорилированием, амидированием, дериватизацией известными защитными/блокирующими группами, протеолитическим расщеплением, связыванием с клеточным лигандом или другим белком.
[0141] Описанное в настоящем документе антитело может иметь последовательность, которая была модифицирована для изменения по меньшей мере одной биологической эффекторной функции, опосредованной константной областью, относительно соответствующей последовательности дикого типа. Например, в некоторых вариантах осуществления антитело может быть модифицировано для снижения по меньшей мере одной биологической эффекторной функции, опосредованной константной областью, по сравнению с немодифицированным антителом, например, снижения связывания с Fc рецептором (FcR). Связывание FcR может быть снижено, например, путем мутации сегмента константной области иммуноглобулина антитела в определенных областях, необходимых для взаимодействий FcR.
[0142] Антитело или Fc домен, в контексте настоящего документа, могут быть модифицированы для приобретения или улучшения по меньшей мере одной биологической эффекторной функции, опосредованной константной областью, относительно немодифицированного антитела или Fc домена, например, для усиления взаимодействий FcγR. Например, антитело с константной областью, которая связывает FcγRIIA, FcγRIIB и/или FcγRIIIA с большей аффинностью, чем соответствующая константная область дикого типа, может быть получено в соответствии со способами, описанными в настоящем документе. Домен Fc, который связывает FcγRIIA, FcγRIIB и/или FcγRIIIA с большей аффинностью, чем соответствующий домен Fc дикого типа, может быть получен в соответствии со способами, описанными в настоящем документе.
[0143] В определенных вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антигенсвязывающий домен и Fc домен IgG, где Kd для связывания антигенсвязывающего домена с первым антигеном в присутствии иммуностимулирующего соединения составляет менее чем приблизительно 100 нМ, и не более чем примерно в 100 раз больше Kd для связывания антигенсвязывающего домена с первым антигеном в отсутствие иммуностимулирующего соединения. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела имеет Kd для связывания Fc домена IgG с Fc рецептором в присутствии иммуностимулирующего соединения не более чем примерно в 100 раз больше Kd для связывания Fc домена IgG с Fc рецептором в отсутствие иммуностимулирующего соединения. В определенных вариантах осуществления первый антиген выбран из CD5, CD19, CD20, CD25, CD37, CD30, CD33, CD40, CD45, CAMPATH-1, BCMA, CS-1, PD-L1, B7-H3, B7-DC, HLD-DR, карциноэмбрионального антигена (CEA), TAG-72, EpCAM, MUC1, фолат-связывающего белка, A33, G250, простат-специфического мембранного антигена (PSMA), ферритина, GD2, GD3, GM2, Ley, CA-125, CA19-9, эпидермального фактора роста, p185HER2, рецептора IL-2, EGFRvIII (de2-7 EGFR), белка активации фибробластов, тенасцина, металлопротеиназы, эндосиалина, фактора роста эндотелия сосудов, avB3, WT1, LMP2, HPV E6, HPV E7, Her-2/neu, MAGE A3, не мутантного p53, NY-ESO-1, MelanA/MART1, мутантного Ras, gp100, мутантного p53, PR1, bcr-abl, тиронсиназы, сурвивина, PSA, hTERT, белка с точками разрыва при транслокации при саркоме, EphA2, PAP, ML-IAP, AFP, ERG, NA17, PAX3, ALK, рецептора андрогена, циклина B1, полисиаловой кислоты, MYCN, RhoC, TRP-2, фукозила GM1, мезотелина (MSLN), PSCA, MAGE Al, sLe (животное), CYP1B1, PLAV1, GM3, BORIS, Tn, GloboH, ETV6-AML, NY-BR-1, RGS5, SART3, STn, карбоангидразы IX, PAX5, белка спермиев 17 OY-TESL, LCK, HMWMAA, AKAP-4, SSX2, XAGE 1, Legumain, Tie 3, VEGFR2, MAD-CT-1, PDGFR-B, MAD-CT-2, ROR2, TRAIL1, MUC16, MAGE A4, MAGE C2, GAGE, EGFR, CMET, HER3, MUC15, CA6, NAPI2B, TROP2, CLDN6, CLDN16, CLDN18.2, CLorf186, RON, LY6E, FRA, DLL3, PTK7, STRA6, TMPRSS3, TMPRSS4, TMEM238, UPK1B, VTCN1, LIV1, ROR1 или Fos-связанный антиген 1. В некоторых вариантах осуществления первый антиген экспрессируется на иммунной клетке. В определенных вариантах осуществления первый антиген представляет собой CD40, HER2 или TROP2. В определенных вариантах осуществления первый антиген представляет собой HER2 или TROP2.
[0144] В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антитело человека или гуманизированное антитело или его антигенсвязывающую часть, например гуманизированное антитело CD40, гуманизированное антитело HER2 или гуманизированное антитело TROP2. В определенных вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антитело TROP2, например, сацитузумаб, или его антигенсвязывающую часть. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи сацитузумаба (SEQ ID NO: 3 и 4). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи сацитузумаба (SEQ ID NO: 4) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи сацитузумаба (SEQ ID NO: 3), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи сацитузумаба (SEQ ID NO: 4) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи сацитузумаба (SEQ ID NO: 3), в соответствии с IMGT (ImMunoGeneTics). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антитело к HER2, например, пертузумаб, трастузумаб или его антигенсвязывающую часть. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи пертузумаба (SEQ ID NO: 1 и 2). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи пертузумаба (SEQ ID NO: 2) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи пертузумаба (SEQ ID NO: 1), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи пертузумаба (SEQ ID NO: 2) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи пертузумаба (SEQ ID NO: 1), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи трастузумаба (SEQ ID NO: 7 и 8). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела включает LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи трастузумаба (SEQ ID NO: 8) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи трастузумаба (SEQ ID NO: 7), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела включает LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи трастузумаба (SEQ ID NO: 8) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи трастузумаба (SEQ ID NO: 7), в соответствии с IMGT. В определенных вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антитело к CD40 или его антигенсвязывающую часть. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательность вариабельной области тяжелой и легкой цепи сацитузумаба (SEQ ID NO: 3 и 4). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи сацитузумаба (SEQ ID NO: 4) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи сацитузумаба (SEQ ID NO: 3), в соответствии с индексом по Кабату.
[0145] В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антитело Liv-1, например, ладиратузумаб, huLiv1-14 (WO 2012078688), Liv1-1.7A4 (US 2011/0117013), huLiv1-22 (WO 2012078688) или его антигенсвязывающую часть. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепей ладиратузумаба (SEQ ID NO: 5 и 6). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи ладиратузумаба (SEQ ID NO: 6) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи ладиратузумаба (SEQ ID NO: 5), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи ладиратузумаба (SEQ ID NO: 6) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи ладиратузумаба (SEQ ID NO: 5), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи huLiv1-14 (SEQ ID NO: 17 и 18). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи huLiv1-14 (SEQ ID NO: 18) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи huLiv1-14 (SEQ ID NO: 17), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи huLiv1-14 (SEQ ID NO: 18) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи huLiv1-14 (SEQ ID NO: 17), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи Liv1-1.7A4 (SEQ ID NO: 19 и 20). В определенных вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи Liv1-1.7A4 (SEQ ID NO: 20) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи Liv1-1.7A4 (SEQ ID NO: 19), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи Liv1-1.7A4 (SEQ ID NO: 20) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи Liv1-1.7A4 (SEQ ID NO: 19), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи Liv1-1.7A4 (SEQ ID NO: 20) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи Liv1-1.7A4 (SEQ ID NO: 19), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи Liv1-1.7A4 (SEQ ID NO: 20) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи Liv1-1.7A4 (SEQ ID NO: 19), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи huLiv1-22 (SEQ ID NO: 21 и 22). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи huLiv1-22 (SEQ ID NO: 22) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи huLiv1-22 (SEQ ID NO: 21), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи huLiv1-22 (SEQ ID NO: 22) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи huLiv1-22 (SEQ ID NO: 21), в соответствии с IMGT.
[0146] В определенных вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антитело MUC16, например, софитузумаб, 4H11 (US2013/0171152), 4H5 (US2013/0171152) или его антигенсвязывающую часть. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи софитузумаба (SEQ ID NO: 23 и 24). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи софитузумаба (SEQ ID NO: 24) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи софитузумаба (SEQ ID NO: 23), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи софитузумаба (SEQ ID NO: 24) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи софитузумаба ( SEQ ID NO: 23), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи антитела 4H11 (SEQ ID NO: 13 и 14). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи антитела 4H11 (SEQ ID NO: 14) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи антитела 4H11 (SEQ ID NO: 13), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит гуманизированное антитело, содержащее LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи антитела 4H11 (SEQ ID NO: 14) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи антитела 4H11 (SEQ ID NO: 13), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи антитела 4H11 (SEQ ID NO: 14) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи антитела 4H11 (SEQ ID NO: 13), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи антитела 4H11 (SEQ ID NO: 14) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи 4H11 (SEQ ID NO: 13), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи антитела 4А5 (SEQ ID NO: 15 и 16). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи антитела 4A5 (SEQ ID NO: 16) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи 4A5 (SEQ ID NO: 15), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи антитела 4A5 (SEQ ID NO: 16) и HC CDR1, HC CDR2 и CDR3 HC вариабельной области тяжелой цепи антитела 4A5 (SEQ ID NO: 15), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи антитела 4A5 (SEQ ID NO: 16) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи антитела 4A5 (SEQ ID NO: 15), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи 4A5 (SEQ ID NO: 16) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи 4A5 (SEQ ID NO: 15), в соответствии с IMGT.
[0147] В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит антитело к PD-L1, например атезолизумаб, MDX-1105 (WO 2007/005874) или его антигенсвязывающую часть. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепей атезолизумаба (SEQ ID NO: 11 и 12). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи атезолизумаба (SEQ ID NO: 12) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи атезолизумаба (SEQ ID NO: 11), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи атезолизумаба (SEQ ID NO: 12) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи атезолизумаба (SEQ ID NO: 11), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепи MDX-1105 (SEQ ID NO: 9 и 10). В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи MDX-1105 (SEQ ID NO: 10) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи MDX-1105 (SEQ ID NO: 9), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи MDX-1105 (SEQ ID NO: 10) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи MDX-1105 (SEQ ID NO: 9), в соответствии с индексом по Кабату. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи MDX-1105 (SEQ ID NO: 10) и HC CDR1, HC CDR2 и HC CDR3 вариабельной области тяжелой цепи MDX-1105 (SEQ ID NO: 9), в соответствии с IMGT. В некоторых вариантах осуществления конструкция на основе антитела содержит гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие LC CDR1, LC CDR2 и LC CDR3 вариабельной области легкой цепи MDX-1105 (SEQ ID NO: 10) и HC CDR1, HC CDR2 и CDR3 HC вариабельной области тяжелой цепи MDX-1105 (SEQ ID NO: 9), в соответствии с IMGT.
[0148] Конструкция на основе антитела может содержать антитело с модификациями по меньшей мере одного аминокислотного остатка. Модификации могут быть заменами, добавлениями, мутациями, делециями или тому подобным. Модификация антитела может представлять собой вставку не встречающейся в природе аминокислоты.
[0149] Типичные последовательности VH и VL конструкции на основе антитела представлены в таблице A ниже.
| Таблица A: | |||
| Типичные последовательности VH и последовательности VL конструкции на основе антитела | |||
| Антитело | Область | SEQ ID NO: | Последовательность |
| Пертузумаб | VH | 1 | EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTDYTMDWVRQAPGKGLEWVADVNPNSGGSIYNQRFKGRFTLSVDRSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARNLGPSFYFDYWGQGTLVTVSS |
| VL | 2 | DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVSIGVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRYTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYIYPYTFGQGTKVEIK | |
| Сацитузумаб | VH | 3 | QVQLQQSGSELKKPGASVKVSCKASGYTFTNYGMNWVKQAPGQGLKWMGWINTYTGEPTYTDDFKGRFAFSLDTSVSTAYLQISSLKADDTAVYFCARGGFGSSYWYFDVWGQGSLVTVSS |
| VL | 4 | DIQLTQSPSSLSASVGDRVSITCKASQDVSIAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASYRYTGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYYCQQHYITPLTFGAGTKVEIK | |
| Ладиратузумаб | VH | 5 | QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGLTIEDYYMHWVRQAPGQGLEWMGWIDPENGDTEYGPKFQGRVTMTRDTSINTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVHNAHYGTWFAYWGQGTLVTVSS |
| VL | 6 | DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSSQSLLHSSGNTYLEYFQQRPGQSPRPLIYKISTRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPYTFGGGTKVEIK | |
| Трастузумаб | VH | 7 | EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFNIKDTYIHWVRQAPGKGLEWVARIYPTNGYTRYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCSRWGGDGFYAMDYWGQGTLVTVSS |
| VL | 8 | DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVNTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSRSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQHYTTPPTFGQGTKVEIK | |
| MDX-1105 | VH | 9 | QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKTSGDTFSTYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGKAHYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYFCARKFHFVSGSPFGMDVWGQGTTVTVSS |
| VL | 10 | EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPTFGQGTKVEIK | |
| Атезолизумаб | VH | 11 | EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSS |
| VL | 12 | DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIK | |
| 4H11 | VH | 13 | EVKLQESGGGFVKPGGSLKVSCAASGFTFSSYAMSWVRLSPEMRLEWVATISSAGGYIFYSDSVQGRFTISRDNAKNTLHLQMGSLRSGDTAMYYCARQGFGNYGDYYAMDYWGQGTTVTVSS |
| VL | 14 | DIELTQSPSSLAVSAGEKVTMSCKSSQSLLNSRTRKNQLAWYQQKPGQSPELLIYWASTRQSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQQSYNLLTFGPGTKLEVK | |
| 4A5 | VH | 15 | EVKLEESGGGFVKPGGSLKISCAASGFTFRNYAMSWVRLSPEMRLEWVATISSAGGYIFYSDSVQGRFTISRDNAKNTLHLQMGSLRSGDTAMYYCARQGFGNYGDYYAMDYWGQGTTVTVSS |
| VL | 16 | DIELTQSPSSLAVSAGEKVTMSCKSSQSLLNSRTRKNQLAWYQQKTGQSPELLIYWASTRQSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSVQAEDLAVYYCQQSYNLLTFGPGTKLEIK | |
| huLiv1-14 | VH | 17 | QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTIEDYYMHWVRQAPGQGLEWMGWIDPENGDTEYAPTFQGRVTMTRDTSINTAYMELSRLRSDDTAVYYCARHDAHYGTWFAYWGQGTLVTVSS |
| VL | 18 | DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSSQSIIRNDGNTYLEWYQQRPGQSPRRLIYRVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPYTFGGGTKVEIK | |
| Liv1-1.7A4 | VH | 19 | EIQLQQSGPELMKPGASVKISCKASTYSFTRYFMHWVKQSHGESLEWIGYIDPFNGGTGYNQKFKGKATLTVDKSSSTAYMHLSSLTSEDSAVYYCVTYGSDYFDYWGQGTTLTVSS |
| VL | 20 | DIVMTQPQKFMSTSVGDRVSVTCKASQNVETDVVWYQQKPGQPPKALIYSASYRHSGVPDRFTGSGSGTNFTLTISTVQSEDLAEYFCQQYNNYPFTFGSGTKLEIIR | |
| huLiv1-22 | VH | 21 | QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGLTIEDYYMHWVRQAPGQGLEWMGWIDPENGDTEYGPKFQGRVTMTRDTSINTAYMELSRLRSDDTAVYYCAVHNAHYGTWFAYWGQGTLVTVSS |
| VL | 22 | DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSSQSLLHSSGNTYLEWYQQRPGQSPRPLIYKISTRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCFQGSHVPYTFGGGTKVEIK | |
| Софитузумаб | VH | 23 | EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYSITNDYAWNWVRQAPGKGLEWVGYISYSGYTTYNPSLKSRFTISRDTSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARWTSGLDYWGQGTLVTVSS |
| VL | 24 | DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASDLIHNWLAWYQQKPGKAPKLLIYGATSLETGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYWTTPFTFGQGTKVEIK |
Мишень-связывающий домен конструкции на основе антитела
[0150] Конструкция на основе антитела может дополнительно содержать мишень-связывающий домен. Мишень-связывающий домен может содержать домен, который связывается с мишенью. Мишенью может быть антиген. Мишень-связывающий домен может содержать антигенсвязывающий домен. Мишень-связывающий домен может представлять собой домен, который может специфически связываться с антигеном. Мишень-связывающий домен может представлять собой антигенсвязывающую часть антитела или фрагмент антитела. Мишень-связывающий домен может представлять собой один или более фрагментов антитела, которые могут сохранять способность специфически связываться с антигеном. Мишень-связывающий домен может быть любым антигенсвязывающим фрагментом. Мишень-связывающий домен может находиться в каркасе, представляющим собой поддерживающий каркас для антигенсвязывающего домена. Мишень-связывающий домен может содержать антигенсвязывающий домен в каркасе.
[0151] Мишень-связывающий домен может содержать антигенсвязывающий домен, который может относиться к части антитела, содержащей часть распознавания антигена, то есть антигенную определяющую вариабельную область антитела, достаточную для обеспечения распознавания и связывания части распознавания антигена с мишенью, такой как антиген, то есть эпитоп. Мишень-связывающий домен может содержать антигенсвязывающий домен антитела. В определенных вариантах осуществления мишень-связывающий домен представляет собой агонист CD40.
[0152] Fv может представлять собой минимальный фрагмент антитела, который содержит полный сайт распознавания и связывания антигена. Эта область может состоять из димера вариабельного домена одной тяжелой цепи и одной легкой цепи в тесной нековалентной связи. В этой конфигурации три гипервариабельные области каждого вариабельного домена могут взаимодействовать, чтобы определить антигенсвязывающий сайт на поверхности димера VH-VL. Один вариабельный домен (или половина Fv, содержащая только три гипервариабельные области, специфичные для антигена) может распознавать и связывать антиген, хотя и с более низкой аффинностью, чем весь сайт связывания.
[0153] Мишень-связывающий домен может быть по меньшей мере на 80% гомологичен антигенсвязывающему домену, выбранному, но не ограничиваясь ими, из моноклонального антитела, поликлонального антитела, рекомбинантного антитела или его функционального фрагмента, например, вариабельного домена тяжелой цепи (VH) и вариабельного домена легкой цепи (VL), одноцепочечного вариабельного фрагмента (scFv), DARPin, аффимера, авимера, кноттина, монотела, аффинного зажима, внеклеточного домена, внеклеточного домена рецептора, цитокина, лиганда, иммуноцитокина, Т-клеточного рецептора или рекомбинантного Т-клеточного рецептора.
[0154] Мишень-связывающий домен может быть присоединен к конструкции на основе антитела. Например, конструкция на основе антитела может быть слита с мишень-связывающим доменом для слияния конструкции на основе антитела с мишень-связывающим доменом. Слияние конструкции на основе антитела с мишень-связывающим доменом может быть результатом того, что последовательность нуклеиновой кислоты мишень-связывающего домена, экспрессируется внутри рамки считывания, с последовательностью нуклеиновой кислоты конструкции на основе антитела. Слияние конструкции на основе антитела с мишень-связывающим доменом может быть результатом генетической нуклеотидной последовательности внутри рамки считывания или последовательной пептидной последовательности, кодирующей конструкцию на основе антитела с мишень-связывающим доменом. В качестве другого примера, мишень-связывающий домен может быть связан с конструкцией на основе антитела. Мишень-связывающий домен может быть связан с конструкцией на основе антитела с помощью химической конъюгации. Мишень-связывающий домен может быть присоединен к концу Fc области. Мишень-связывающий домен может быть присоединен к концу Fc области. Мишень-связывающий домен может быть присоединен к концу конструкции на основе антитела. Мишень-связывающий домен может быть присоединен к концу антитела. Мишень-связывающий домен может быть присоединен к легкой цепи антитела. Мишень-связывающий домен может быть присоединен к концу легкой цепи антитела. Мишень-связывающий домен может быть присоединен к тяжелой цепи антитела. Мишень-связывающий домен может быть присоединен к концу тяжелой цепи антитела. Конец может представлять собой С-конец. Конструкция на основе антитела может быть присоединена к 1, 2, 3 и/или 4 мишень-связывающим доменам. Мишень-связывающий домен может направлять конструкцию на основе антитела, например, на конкретную клетку или тип клетки. Мишень-связывающий домен конструкции на основе антитела может быть выбран для распознавания антигена, например, антигена, экспрессированного на иммунной клетке. Антиген может представлять собой пептид или его фрагмент. Антиген может быть экспрессирован на антигенпрезентирующей клетке. Антиген может быть экспрессирован на дендритной клетке, макрофаге или B-клетке. В качестве другого примера, антиген может представлять собой опухолевый антиген. Опухолевый антиген может быть любым опухолевым антигеном, описанным в настоящем документе. Когда множественные мишень-связывающие домены присоединены к конструкции на основе антитела, мишень-связывающие домены могут связываться с одним и тем же антигеном. Когда множественные мишень-связывающие домены присоединены к конструкции на основе антитела, мишень-связывающие домены могут связывать разные антигены.
[0155] В определенных вариантах осуществления конструкция на основе антитела, описанная в настоящем документе, специфически связывает второй антиген. В некоторых вариантах осуществления мишень-связывающий домен связан, например, ковалентно связан, с конструкцией на основе антитела на C-конце Fc домена.
Соединения
[0156] Далее описаны соединения и их соли, которые могут быть применены в способах по настоящему изобретению. Соединения и соли, описанные в формулах (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), могут быть ковалентно связаны с линкерами L3, которые дополнительно могут быть ковалентно связаны с конструкциями на основе антител. Соединение и соли, описанные в формулах (IVA), (IVB), (IVC), ковалентно связаны с линкерами L3, которые могут быть дополнительно ковалентно связаны с конструкциями на основе антител.
[0157] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к соединению, представленному структурой формулы (IA):
или его фармацевтически приемлемой соли, где:
представляет собой необязательную двойную связь,
L1 выбран из -X1-, -X2-C1-6алкилен-X2-C1-6алкилена-, -X2-C2-6алкенилен-X2- и -X2-C2-6алкинилен-X2-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более R12,
L2 выбран из -X2-, -X2-C1-6алкилен-X2-, -X2-C2-6алкенилен-X2- и -X2-C2-6алкинилен-X2-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более R12,
X1 выбран из -S-*, -N(R10)-*, -C(O)O-*, -OC(O)-*, -OC(O)O-*, - C(O)N(R10)C(O)- *, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)*, -N(R10)C(O)-*, -CR102N(R10)C(O)-*, -N(R10)C(O)N(R10)-*, -N(R10)C(O)O-*, -OC(O)N(R10)-*, -C(NR10)-*, -N(R10)C(NR10)-*, -C(NR10)N(R10)-*, -N(R10)C(NR10)N(R10)-*, -S(O)2-*, -OS(O)-*, -S(O)O-*, -S(O), -OS(O)2-*, -S(O)2O*, -N(R10)S(O)2-*, -S(O)2N(R10)-*, -N(R10)S(O)-*, -S(O)N(R10)-*, -N(R10)S(O)2N(R10)-* и -N(R10)S(O)N(R10)-*, где * представляет собой место связи X1 с R3,
X2 независимо выбран в каждом случае из -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10), -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O), -OS(O)2-, -S(O)2O, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-,
-N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R3 выбран из необязательно замещенного С3-12 карбоцикла и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла, где заместители на R3 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R3 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из: водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила,
R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла.
[0158] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), X2 независимо выбран в каждом случае из -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10), -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O), -OS(O)2-, -S(O)2O, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-.
[0159] В определенных вариантах осуществления для соединения формулы (IA):
представляет собой необязательную двойную связь,
L1' независимо выбран из -X1-, -X2-C1-6алкил-X2-, -X2-C2-6алкенил-X2- и -X2-C2-6алкинил-X2-, каждый из которых необязательно замещен в каждом случае одним или более R10,
L2 независимо выбран из -X2-, -X2-C1-6алкил-X2-, -X2-C2-6алкенил-X2- и -X2-C2-6алкинил-X2-, каждый из которых необязательно замещен в каждом случае одним или более R10,
X1 в каждом случае независимо выбран из -S-*, -N(R10)-*, -C(O)O-*, -OC(O)-*, -OC(O)O-*, -C(O)N(R10)C(O)-*, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)-*, -N(R10)C(O)-*, -CR102N(R10)C(O)-*, -N(R10)C(O)N(R10)-*, -N(R10)C(O)O-*, -OC(O)N(R10)-*, -C(NR10)-*, -N(R10)C(NR10)-*, -C(NR10)N(R10)-*, -N(R10)C(NR10)N(R10)-*, -S(O)2-*, -OS(O)-*, -S(O)O-*, -S(O)-*, -OS(O)2-*, -S(O)2O*, -N(R10)S(O)2-*, -S(O)2N(R10)-*, -N(R10)S(O)-*, -S(O)N(R10)-*, -N(R10)S(O)2N(R10)-* и -N(R10)S(O)N(R10)-*, где * представляет собой место связи X1 с R3,
X2 в каждом случае независимо выбран из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O)-, -OS(O)2-, -S(O)2O, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R3 выбран из необязательно замещенного С3-12 карбоцикла и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла, где заместители независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R3 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из: водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, выбранным из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла. Термин "бензазепиновое ядро", в контексте настоящего документа, относится как к бензазепиновому, так и к 4,5-дигидробензазепиновому ядру кольцевой системы.
[0160] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), L2 может быть присоединен к С2, С3, С4 или С5 бензазепинового ядра, где нумерация бензазепина является следующей: . В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), L2 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4. В определенных вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA),
представляет собой двойную связь, и L2 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4.
[0161] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), L1 может быть присоединен к C6, C7, C8 или C9. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), L1 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С8. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), представляет собой двойную связь, L2 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4, а L1 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С8.
[0162] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA) замещаемый углерод на бензазепиновом ядре выбран из C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 и C9. Бензазепиновое ядро для соединения или соли формулы (IA) может быть необязательно замещено заместителем, выбранным из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), фрагмент в любом из С2, С3, С4, С5, С6, С7, С8 и С9 бензазепинового ядра независимо выбран из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила.
[0163] В одном варианте осуществления соединение формулы (IA) представлено формулой (IB):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, и
R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл.
[0164] В определенных вариантах осуществления соединение формулы (IA) представлено формулой (IC):
,
или его фармацевтически приемлемая соль.
[0165] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB) или (IC), L1 выбран из -N(R10)C(O)-*, -S(O)2N(R10)-*, CR102N(R10)C (O)-* и -X2-C1-6 алкилен-X2-C1-6 алкилена, где каждый C1-6 алкилен необязательно замещен одним или более заместителями R12. В некоторых вариантах осуществления L1 выбран из -N(R10)C(O)-*. В некоторых вариантах осуществления R10 в -N(R10)C(O)-* выбран из водорода и C1-6 алкила. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB) или (IC) L1 представляет собой -NHC(O)-*.
[0166] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB) или (IC) L1 выбран из -S(O)2N(R10)-*. В некоторых вариантах осуществления R10 в -S(O)2N(R10)-* выбран из водорода и C1-6 алкила. В некоторых вариантах осуществления L1 выбран из -S(O)2NH-*.
[0167] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB) или (IC), L1 выбран из -CR102N(R10)C(O)-*. В некоторых вариантах осуществления L1 выбран из -CH2N(H)C(O)-* и -CH(CH3)N(H)C(O)-*.
[0168] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB) или (IC), R3 выбран из необязательно замещенного С3-12 карбоцикла и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла, где заместители на R3 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R3 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0169] R3 может быть выбран из необязательно замещенного C3-12 карбоцикла и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла, где заместители на R3 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0170] В некоторых вариантах осуществления R3 выбран из необязательно замещенного C3-12 карбоцикла и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла, где заместители на R3 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла.
[0171] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB) или (IC), R3 выбран из необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарила, например, R3 представляет собой необязательно замещенный гетероарил. В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой необязательно замещенный гетероарил, замещенный одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. R3 может быть выбран из необязательно замещенного 5- или 6-членного гетероарила. Например, R3 может быть выбран из: ,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
и
, любой из которых является необязательно замещенным. В некоторых вариантах осуществления R3 выбран из необязательно замещенного 6-членного гетероарила, например, R3 представляет собой необязательно замещенный пиридин.
[0172] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB) или (IC), R3 представляет собой необязательно замещенный арил, например, R3 представляет собой арил, необязательно замещенный одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. R3 может быть выбран из необязательно замещенного фенила и необязательно замещенного нафтила. В определенных вариантах осуществления R3 представляет собой необязательно замещенный фенил.
[0173] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB) или (IC), R3 выбран из пиридина, фенила, тетрагидронафталина, тетрагидрохинолина, тетрагидроизохинолина, индана, циклопропилбензола, циклопентапиридина и дигидробензоксаборола, любой из которых является необязательно замещенным. R3 может быть выбран из:,
,
, ,
,
,
,
, ,
,
,
,
и
, любой из которых является необязательно замещенным. R3 может быть выбран из:
,
,
, , , , , , , , , ,
, , , , , , , .
, , , , ,
,
,
, , , , , , , , , ,
, ,
, ,
,
,
,
,
и
.
[0174] В некоторых вариантах осуществления для соединения формулы (IA), (IB) или (IC) или его фармацевтически приемлемой соли:
L1 выбран из -N(R10)C(O)-*, -S(O)2N(R10)-*, -CR102N(R10)C(O)-* и -X2-C1-6 алкилен-X2-C1-6 алкилена-,
L2 представляет собой -C(O)-,
X2 в каждом случае независимо выбран из -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)- и -N(R10)C(O)O-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, и C1-10 алкил, необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R3 выбран из необязательно замещенного фенила, гетероарила и 9- или 10-членного бициклического карбоцикла, где заместители независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, где C1-10 алкил необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, где C1-10 алкил необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла,
R10 независимо выбран в каждом случае из: водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен одним или более R12, где R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, и С1-10 алкил необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла.
[0175] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IB) или (IC), соединение может дополнительно содержать линкер (L3). Линкер может быть ковалентно связан с любым положением, если позволяет валентность, в соединении или соли формулы (IA), (IB) или (IC). Например, линкер может быть связан с R1, R2, R4, R3, X1 или X2. В некоторых вариантах осуществления линкер связан с атомом азота или кислорода соединения или соли формулы (IA), (IB) или (IC). Линкер может содержать реакционноспособный фрагмент, например, электрофил, который может реагировать с образованием ковалентной связи с фрагментом антитела, например, лизином, серином, треонином, цистеином, тирозином, аспарагиновой кислотой, глютамином, остатком аминокислоты, не встречающейся в природе, или остатком глутаминовой кислоты антитела. В некоторых вариантах осуществления соединение или соль формулы (IA), (IB) или (IC) могут быть ковалентно связаны через линкер с антителом.
[0176] В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к соединению, представленному структурой формулы (IIA):
или его фармацевтически приемлемой соли, где:
представляет собой необязательную двойную связь,
L10 представляет собой -X10-,
L2 выбран из -X2-, -X2-C1-6 алкилен-X2-, -X2-C2-6 алкенилен-X2- и -X2-C2-6 алкинилен-X2-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более R12,
X10 выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * представляет собой место связи X10 с R5,
X2 в каждом случае независимо выбран из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)С(NR10), -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O)-, -OS(O)2-, -S(O)2O-, -N(R10)S(O)2, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и С3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R5 выбран из ненасыщенного С4-8 карбоцикла, бициклического карбоцикла, и конденсированного 5-5, конденсированного 5-6 и конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, где R5 необязательно замещен и где заместители независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и С3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R5 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OH, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, -C1-10 галогеналкила, -O-C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила,
R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила, C2-6 алкинила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла.
[0177] В некоторых вариантах осуществления, для соединения формулы (IIA):
представляет собой необязательную двойную связь,
L10 независимо выбран из -X10-,
L2 независимо выбран из -X2-, -X2-C1-6 алкил-X2-, -X2-C2-6 алкенил-X2- и -X2-C2-6 алкинил-X2-, каждый из которых необязательно замещен в каждом случае одним или более R10,
X10 в каждом случае независимо выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * представляет собой место связи X10 с R5,
X2 в каждом случае независимо выбран из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10), -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O), -OS(O)2-, -S(O)2O, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и С3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R5 выбран из необязательно замещенного насыщенного и ненасыщенного С3-8 карбоцикла, необязательно замещенного насыщенного и ненасыщенного 3-8-членного гетероцикла, необязательно замещенного бициклического карбоцикла и необязательно замещенного бициклического гетероцикла, где заместители в каждом случае независимо выбраны из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R5 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила, и
где любой замещаемый углерод в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, выбранным из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла.
[0178] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), L2 может быть присоединен к С2, С3, С4 или С5 бензазепинового ядра, где нумерация бензазепина является следующей: . В некоторых вариантах осуществления L2 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4. В определенных вариантах осуществления
представляет собой двойную связь, и L2 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4.
[0179] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), L10 может быть присоединен к С6, С7, С8 или С9. В некоторых вариантах осуществления L10 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С8. В некоторых вариантах осуществления представляет собой двойную связь, L2 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4, и L10 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С8.
[0180] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), замещаемый углерод на бензазепиновом ядре выбран из C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 и C9. Бензазепиновое ядро для соединения или соли формулы (IIA) может быть необязательно замещено заместителем, выбранным из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), фрагмент в любом из С2, С3, С4, С5, С6, С7, С8 и С9 бензазепинового ядра независимо выбран из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила. В одном варианте осуществления соединение формулы (IIA) представлено формулой (IIB):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, и
R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл.
[0181] В одном варианте осуществления соединение формулы (IIA) представлено формулой (IIC):
,
или его фармацевтически приемлемая соль.
[0182] В определенных вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), L10 представляет собой -C(O)-. В определенных вариантах осуществления L10 выбран из -C(O)N(R10)*. В некоторых вариантах осуществления R10 в -C(O)N(R10)-* выбран из водорода и C1-6 алкила. В некоторых вариантах осуществления L10 представляет собой -C(O)NH-*.
[0183] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), R5 представляет собой необязательно замещенный 8-12-членный бициклический карбоцикл. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный бициклический карбоцикл, например, необязательно замещенный 8-12-членный бициклический карбоцикл, такой как индан, нафталин, дигидронафталин, тетрагидронафталин. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный 8-12-членный бициклический карбоцикл с одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный 8-12-членный бициклический карбоцикл с одним или более заместителями, независимо выбранными из -OR10, -N(R10)2 и =O. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный индан или необязательно замещенный тетрагидронафталин. В некоторых вариантах осуществления R5 выбран из: и , любой из которых является необязательно замещенным. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), R5 выбран из:
, , , , , и .
[0184] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), R5 представляет собой необязательно замещенный ненасыщенный С4-8 карбоцикл. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный ненасыщенный C4-6 карбоцикл, например, циклопентен, циклопентадиен, циклогексен, циклобутен. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный ненасыщенный C4-6 карбоцикл с одним или более заместителями, независимо выбранными из необязательно замещенного С3-12 карбоцикла и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный ненасыщенный C4-6 карбоцикл с одним или более заместителями, независимо выбранными из необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного 3-12 гетероцикла, необязательно замещенного С1-10 алкила, необязательно замещенного С2-10 алкенила и галогена.
[0185] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), R5 представляет собой необязательно замещенный конденсированный 5-5, конденсированный 5-6 и конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный конденсированный 5-5, конденсированный 5-6 и конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл с одним или более заместителями, независимо выбранными из -C(O)OR10, -N(R10)2, -OR10, и необязательно замещенного С1-10 алкила. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный конденсированный 5-5, конденсированный 5-6 и конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл, замещенный -C(O)OR10. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл. Слитый 6-6 бициклический гетероцикл может представлять собой необязательно замещенный пиридин-пиперидин. В некоторых вариантах осуществления L10 связан с атомом углерода пиридина конденсированного пиридин-пиперидина. В некоторых вариантах осуществления R5 выбран из тетрагидрохинолина, тетрагидроизохинолина, тетрагидронафтиридина, циклопентапиридина и дигидробензоксаборола, любой из которых является необязательно замещенным. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой необязательно замещенный тетрагидронафтиридин. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IIA), (IIB) или (IIC) R5 выбран из:
, , , , , , , , , , , , , , , , , , и .
[0186] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), R5 выбран из тетрагидронафталина, тетрагидрохинолина, тетрагидроизохинолина, индана, циклопропилбензола, циклопентапиридина и дигидробензоксаборола, любой из которых является необязательно замещенным. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), R5 выбран из: , ,
,
,
,
, ,
,
,
,
и
, любой из которых является необязательно замещенным. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), R5 выбран из:
, , , , , , , , , , , , , , , , .
и .
[0187] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), когда R5 является замещенным, заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и –CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0188] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), когда R5 является замещенным, заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла.
[0189] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), когда R5 является замещенным, заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN. В некоторых вариантах осуществления заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O и -CN, и C1-10 алкила, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -NO2, =O и -CN. В определенных вариантах осуществления R5 не является замещенным.
[0190] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), R5 выбран из насыщенного и ненасыщенного С3-8 карбоцикла, бициклического карбоцикла и бициклического гетероцикла, любой из которых необязательно замещен, и где заместители в каждом случае независимо выбраны из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R5 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0191] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC), R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OH, -OR10, -NO2, -CN и C1-10 алкила. В некоторых вариантах осуществления каждый из R20, R21, R22 и R23 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R21 представляет собой галоген, например, фтор. В типичном варианте осуществления R21 представляет собой водород. В других вариантах осуществления R21 представляет собой -OR10. Например, R21 может представлять собой -OCH3.
[0192] В некоторых вариантах осуществления для соединения формулы (IIA), (IIB) или (IIC) или его фармацевтически приемлемой соли:
L10 выбран из -C(O)N(R10)-* и -C(O)-,
L2 представляет собой -C(O)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, и C 1-10 алкила, необязательно замещенного в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, и C1-10 алкила, необязательно замещенного в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла,
R5 выбран из необязательно замещенного ненасыщенного C4-8 карбоцикла, необязательно замещенного бициклического карбоцикла и необязательно замещенного конденсированного 5-5, конденсированного 5-6 и конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, где заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R5 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5 и C1-10 алкила, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12.
[0193] В некоторых вариантах осуществления для соединения формулы (IIA), (IIB) или (IIC) или его фармацевтически приемлемой соли:
L10 выбран из -C(O)N(R10)-* и -C(O)-,
L2 представляет собой -C(O)-,
каждый из R1 и R2 представляет собой водород,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10,
R5 выбран из необязательно замещенных необязательно замещенных конденсированных 5-5, конденсированных 5-6 и конденсированных 6-6 бициклических гетероциклов, где заместители независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R5 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5 и C1-10 алкила, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OH, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12.
[0194] В некоторых вариантах осуществления для соединения формулы (IIB) или (IIC) или его фармацевтически приемлемой соли:
L10 выбран из -C(O)N(R10)-*, такого как -C(O)NH-*,
L2 представляет собой -C(O)-,
каждый из R1 и R2 представляет собой водород,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, например R4 представляет собой -N(R10)2,
R5 выбран из необязательно замещенного необязательно замещенного конденсированного 5-5, конденсированного 5-6 и конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, например, R5 выбран из тетрагидрохинолина, тетрагидроизохиналина, дигидроиндена, где заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, и C1-10 алкила, необязательно замещенного в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5 и C1-10 алкила, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OH, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла,
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, например, каждый из R20, R21, R22 и R23 представляет собой водород, и
R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, например, каждый из R24 и R25 представляет собой водород.
[0195] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC) соединение может дополнительно содержать линкер (L3). Линкер может быть ковалентно связан с любым положением, если позволяет валентность, в соединении или соли формулы (IIA), (IIB) или (IIC). Например, линкер может быть связан с R1, R2, R4, R5, X10 или X2. В некоторых вариантах осуществления линкер может быть связан с атомом азота или атомом кислорода соединения или соли формул (IIA), (IIB) или (IIC). Линкер может содержать реакционноспособный фрагмент, например, электрофил, который может реагировать с образованием ковалентной связи с фрагментом антитела, например, лизином, серином, треонином, цистеином, тирозином, аспарагиновой кислотой, глютамином, остатком аминокислоты, не встречающейся в природе, или остатком глутаминовой кислоты антитела. В некоторых вариантах осуществления соединение или соль формулы (IIA), (IIB) или (IIC) могут быть ковалентно связаны через линкер с конструкцией на основе антитела.
[0196] В некоторых аспектах настоящее изобретение относится к соединению, представленному структурой формулы (IIIA):
или его фармацевтически приемлемой соли, где:
представляет собой необязательную двойную связь,
L11 представляет собой -X11-,
L2 выбран из -X21-, -X21-C1-6алкилен-X21-, -X21-C2-6алкенилен-X21- и -X2-C2-6алкинилен-X2-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену или алкинилену одним или более R12,
X11 выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи X11 с R6,
X21 в каждом случае независимо выбран из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O)-, -OS(O)2-, -S(O)2O-, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и C2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R6 выбран из фенила и 5- или 6-членного гетероарила, любой из которых замещен одним или более заместителями, выбранными из R7, и R6 дополнительно необязательно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12,
R7 выбран из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR11, -C1-3алкилен-NHC(O)R10, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10, -C1-3алкилен-NHC(O)-C1-3алкилен-R10 и 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R12,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OH, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, -C1-10 алкила, -C1-10 галогеналкила, -O-C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла,
R11 выбран из C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из R12,
R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла.
[0197] В определенных вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA):
представляет собой необязательную двойную связь,
L11 представляет собой -X11-,
L2 независимо выбран из -X2-, -X2-C1-6алкилен-X2-, -X2-C2-6алкенилен-X2- и -X2-C2-6алкинилен-X2-, каждый из которых необязательно замещен в каждом случае одним или более R10,
X11 выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи X11 с R6,
X2 в каждом случае независимо выбран из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -(O)N(R10)C(O)N(R10), -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O)-, -OS(O)2-, -S(O)2O, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R6 выбран из фенила и 5- или 6-членного гетероарила, любой из которых замещен одним или более заместителями, выбранными из R7,
R7 выбран из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR10, -C1-3алкилен-NHC(O)R10, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10 и -C1-3алкилен-NHC(O) -C1-3алкилен-(R10)2, и необязательно замещенного 3-12-членного гетероцикла,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, выбранным из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла.
[0198] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), L2 может быть присоединен к С2, С3, С4 или С5 бензазепинового ядра, где нумерация бензазепина является следующей: . В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), L2 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4. В определенных вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA),
представляет собой двойную связь, и L2 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4.
[0199] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), L11 может быть присоединен к С6, С7, С8 или С9. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), L11 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С8. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), представляет собой двойную связь, L2 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4, а L11 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С8.
[0200] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA) замещаемый углерод на бензазепиновом ядре выбран из С2, С3, С4, С5, С6, С7, С8 и С9. Бензазепиновое ядро для соединения или соли формулы (IIIA) может быть необязательно замещено заместителем, выбранным из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), фрагмент на любом из С2, С3, С4, С 5, C6, C7, C8 и C9 бензазепинового ядра независимо выбран из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила.
[0201] В некоторых вариантах осуществления соединение формулы (IIIA) представлено формулой (IIIB):
,
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, и
R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл.
[0202] В одном варианте осуществления соединение формулы (IIIA) представлено формулой (IIIC):
,
или его фармацевтически приемлемая соль.
[0203] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), (IIIB) или (IIIC), L11 выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи L11 с R6. В некоторых вариантах осуществления L11 представляет собой -C(O)-. В определенных вариантах осуществления L11 выбран из -C(O)N(R10)-*. В определенных вариантах осуществления R10 или L11 выбран из водорода и C1-6 алкила.
[0204] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), (IIIB) или (IIIC), R6 дополнительно необязательно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), (IIIB) или (IIIC), R7 выбран из -C(O)N(R10)N(R10)2, -C(O)N(R10)-C1-3 алкилен-N(R10)2, -C(O)CH3, -C1-3алкилен-N(R10)C(O)OR11, -C1-3алкилен-N(R10)C(O)R10, -C1-3алкилен-N(R10)C(O)N(R10)2, -C1-3алкилен-N(R10)C(O)-C1-3алкилен-R10 и 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R12. R11 может быть выбран из С3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из R12. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IIIA), (IIIB) или (IIIC), R7 выбран из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR11, -C1-3алкилен-NHC(O)R10, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10, -C1-3алкилен-NHC(O)-C1-3алкилен-R10 и 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R12. В некоторых вариантах осуществления R7 выбран из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR11, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10, -C1-3алкилен-NHC(O)-C1-3алкилен-R10 и 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R12. В определенном варианте осуществления R7 представляет собой 3-12-членный гетероцикл, необязательно замещенный одним или более заместителями, независимо выбранными из R12.
[0205] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IIIA), (IIIB) или (IIIC) R6 выбран из необязательно замещенного фенила и необязательно замещенного 5-6-членного гетероарила, где R6 замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из R7. В некоторых вариантах осуществления R6 выбран из необязательно замещенного фенила, где фенил замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из R7. В некоторых вариантах осуществления R6 выбран из необязательно замещенного фенила, где фенил замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10) и -C(O)CH3, и 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного одним или более заместителями, выбранными из -OH, -N(R10)2, -NHC(O)(R10), -NHC(O)O(R10), -NHC(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)2R10 и -C1-3алкилен-(R10) и, необязательно, дополнительно замещенный одним или более дополнительными заместителями. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), (IIIB) или (IIIC), R6 выбран из:
, , , ,
,
, , и
.
[0206] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IIIA), (IIIB) или (IIIC), R6 выбран из необязательно замещенного 5-6-членного гетероарила, где гетероарил замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из R7. R6 может быть выбран из 5- и 6-членного гетероарила, замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R7, и R6 может быть дополнительно необязательно замещен одним или более дополнительными заместителями, выбранными из R12. В некоторых вариантах осуществления R6 выбран из необязательно замещенного 5-6-членного гетероарила, где гетероарил замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR10, -C1-3алкилен-NHC(O)R10, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10 и -C1-3алкилен-NHC(O) -C1-3алкилен-(R10), и 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного одним или более заместителями, выбранными из -OH, -N(R10)2, -NHC(O)(R10), -NHC(O)O(R10), -NHC(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -C(O)2R10 и -C1-3алкилен-(R10), и R6 необязательно дополнительно замещенный одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12. В некоторых вариантах R6 выбран из замещенного пиридина, пиразина, пиримидина, пиридазина, фурана, пирана, оксазола, тиазола, имидазола, пиразола, оксадиазола, оксатиазола и триазола, и R6 необязательно дополнительно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12. R6 может быть необязательно замещенным пиридином, и R6 необязательно дополнительно замещен одним или более дополнительными заместителями, независимо выбранными из R12. В определенных вариантах осуществления R6 может быть представлен следующим образом: или . В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой замещенный пиридин, и где R7 представляет собой -C1-3алкилен-NHC(O)-C1-3алкилен-R10. R7 может представлять собой -C1алкилен-NHC(O)-C1алкилен-R10. R7 может представлять собой -C1алкилен-NHC(O)-C1алкилен-NH2. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), (IIIB) или (IIIC), R6 выбран из: , , , , , , , , , ,
, , и . В типичном варианте осуществления R6 представляет собой.
[0207] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), (IIIB) или (IIIC), соединение может дополнительно содержать линкер (L3). Линкер может быть ковалентно связан с любым положением, если позволяет валентность, в соединении или соли формулы (IIIA), (IIIB) или (IIIC). Например, линкер может быть связан с R1, R2, R4, R6, X11 или X2. В некоторых вариантах осуществления линкер связан с атомом азота или кислорода соединения или соли формул (IIIA), (IIIB) или (IIIC). Линкер может содержать реакционноспособный фрагмент, например, электрофил, который может реагировать с образованием ковалентной связи с фрагментом конструкции на основе антитела, лизином, серином, треонином, цистеином, тирозином, аспарагиновой кислотой, глютамином, остатком аминокислоты, не встречающейся в природе, или остатком глутаминовой кислоты антитела. В некоторых вариантах осуществления соединение или соль формулы (IIA), (IIB) или (IIC) могут быть ковалентно связаны через линкерный фрагмент с конструкцией на основе антитела.
[0208] В определенных вариантах осуществления для соединения или соли формул (IIIA), (IIIB) или (IIIC):
L11 представляет собой -C(O)N(R10)-*, например, L11 представляет собой -C(O)NH-,
L2 выбран из -C(O)- и -C(O)NR10-,
R1 и R2 независимо выбраны из водорода, и C1-10 алкила, необязательно замещенного в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, и C1-10 алкила, необязательно замещенного в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла,
R6 выбран из фенила и 5- или 6-членного гетероарила, любой из которых замещен одним или более заместителями, выбранными из R7,
R7 выбран из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR11, -C1-3алкилен-NHC(O)R10, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10 и -C1-3алкилен-NHC(O) -C1-3алкилен-(R10)2, и 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R12,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила,
R11 выбран из C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из R12, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12.
[0209] В определенных вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), (IIIB) или (IIIC):
L11 представляет собой -C(O)N(R10)-*,
L2 представляет собой -C(O)-,
каждый из R1 и R2 представляет собой водород,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10,
R6 выбран из фенила и 5- или 6-членного гетероарила, любой из которых замещен одним или более заместителями, выбранными из R7,
R7 выбран из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR11, -C1-3алкилен-NHC(O)R10, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10, и -C1-3алкилен-NHC(O) -C1-3алкилен-(R10)2,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила,
R11 выбран из C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из R12, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12.
[0210] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIIA), (IIIB) или (IIIC):
L11 представляет собой -C(O)N(R10)-*, например, L11 представляет собой -C(O)NH-,
L2 представляет собой -C(O)-,
каждый из R1 и R2 представляет собой водород,
R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10,
R6 выбран из фенила и 5- или 6-членного гетероарила, например, пиридина, любой из которых замещен одним или более заместителями, выбранными из R7,
R7 выбран из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR11, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10 и -C1-3алкилен-NHC(O) -C1-3алкилен-(R10)2, и 3-12-членного гетероцикла, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R12,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила,
R11 выбран из C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из R12, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12.
[0211] В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OH, -NO2, -CN и C1-10 алкила. В некоторых вариантах осуществления каждый из R20, R21, R22 и R23 представляет собой водород.
[0212] В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -ОН, -NO2, -CN и C1-10 алкила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), каждый из R24 и R25 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-5 карбоцикл, где заместители могут быть выбраны из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла.
[0213] В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R1 и R2 независимо выбраны из водорода, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и –CN. В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC) R1 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC) R2 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC) R1 представляет собой водород и R2 представляет собой водород.
[0213] В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), L2 независимо выбран из -X2-, -X2-C1-6 алкил-X2-, -X2-C2-6 алкенил-X2- и -X2-C2-6 алкинил-X2-, каждый из которых необязательно замещен в каждом случае одним или более R10. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), L2 выбран из -C(O)- и -C(O)NR10-. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), L2 выбран из -C(O)-. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), L2 выбран из -C(O)NR10-. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R10 в -C(O)NR10- выбран из водорода и C1-6 алкила. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), L2 представляет собой -C(O)NH-.
[0215] В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), X2 в каждом случае независимо выбран из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10), -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O), -OS(O)2-, -S(O)2O, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10 и -N(R10)S(O)N(R10)-. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), X2 в каждом случае независимо выбран из -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10), -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O), -OS(O)2-, -S(O)2O, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10и -N(R10)S(O)N(R10)-. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), X2 выбран из -C(O)- и -С(O)NR10-. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), X2 выбран из -C(O)-. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), X2 выбран из -С(O)NR10-. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R10 в -C(O)NR10- выбран из водорода и C1-6 алкила. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), X2 представляет собой -C(O)NH-.
[0216] В некоторых вариантах для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R4 выбран из -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0217] В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R4 выбран из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0218] В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R4 выбран из: -OR10 и -N(R10)2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила. В некоторых вариантах осуществления для соединения по по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R4 представляет собой -N(R10)2.
[0219] В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена-OH, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, -C1-10 галогеналкила, -O-C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила.
[0220] В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R4 представляет собой -N(R10)2, и каждый R10 независимо выбран из необязательно замещенного C1-6 алкила. В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R4 представляет собой -N(R10)2, и каждый R10 независимо выбран из метила, этила, пропила и бутила, любой из которых является необязательно замещенным. В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R4 представляет собой .
[0221] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IIA), (IIIA), любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, независимо выбранным из R12, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла. В некоторых вариантах осуществления R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0222] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) или (IIIC), R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0223] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) или (IIIC), R12 может быть независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла.
[0224] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) или (IIIC), R12 может быть независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, и C1-10 алкила, необязательно замещенного одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN.
[0225] В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, C2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0226] В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) и (IIIC), R12 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -S(O)R10, -S(O)2R10, -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN, C1-10 алкила, необязательно замещенного в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, и C3-10 карбоцикла и 3-10-членного гетероцикла, где каждый C3-10 карбоцикл и 3-10-членный гетероцикл в R12 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN и C1-6 алкила.
[0227] В настоящем документе рассматривается любая комбинация групп, описанных выше для различных переменных. В настоящем описании, группы и их заместители могут быть выбраны для обеспечения стабильных фрагментов и соединений.
[0228] В определенных вариантах осуществления типичные соединения могут включать, но не ограничиваются ими, соединение или соль любого из соединений 1.1-1.67: ,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
и
.
[0229] В определенных вариантах осуществления любое из соединений с 1.1 по 1.67 ковалентно связано с линкером (L3). Линкер может быть ковалентно связан с любым положением, если позволяет валентность, в соединении или соли соединений с 1,1 по 1,67. Линкер может быть связан с амином в бензазепиновом ядре. Линкер может быть связан с замещаемым атомом азота или кислорода любого из соединений с 1.1 по 1.67. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один из R1, R2 и R10 заменен на L3. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один заместитель на группе, выбранной из R1, R2, R3, R4, R5, R6, X1 и X2, представляет собой -L3. Линкер может содержать реакционноспособный фрагмент, например, электрофил, который может реагировать с образованием ковалентной связи с фрагментом конструкции антитела, таким как, например, лизин, серин, треонин, цистеин, тирозин, аспарагиновая кислота, глютамин, остаток аминокислоты, не встречающейся в природе, или остаток глутаминовой кислоты любого антитела. В некоторых вариантах осуществления соединение или соль соединений с 1,1 по 1,67 могут быть ковалентно связаны через линкер с конструкцией на основе антитела.
[0230] Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
Соединение может быть представлено
или его солью.
[0231] В некоторых аспектах настоящее изобретение относится к соединениям, которые включают линкер L3. В некоторых вариантах осуществления соединение, связанное с линкером, представлено структурой формулы (IVA):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
представляет собой необязательную двойную связь,
L12 независимо выбран из -X3-, -X3-C1-6 алкил-X3-, -X3-C2-6 алкенил-X3- и -X3-C2-6 алкинил-X3-, каждый из которых необязательно замещен в каждом случае одним или более R10,
L22 независимо выбран из -X4-, -X4-C1-6алкил-X4-, -X4-C2-6алкенил-X4- и -X4-C2-6алкинил-X4-, каждый из которых необязательно замещен в каждом случае одним или более R10,
X3 и X4 независимо выбраны в каждом случае из связи, -O-, -S-, -N(R10)-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -OC(O)O-, -C(O)N(R10)-, -C(O)N(R10)C(O)-, -C(O)N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)-, -N(R10)C(O)N(R10)-, -N(R10)C(O)O-, -OC(O)N(R10)-, -C(NR10)-, -N(R10)C(NR10)-, -C(NR10)N(R10)-, -N(R10)C(NR10)N(R10)-, -S(O)2-, -OS(O)-, -S(O)O-, -S(O), -OS(O)2-, -S(O)2O-, -N(R10)S(O)2-, -S(O)2N(R10)-, -N(R10)S(O)-, -S(O)N(R10)-, -N(R10)S(O)2N(R10)- и -N(R10)S(O)N(R10)-,
R1 и R2 независимо выбраны из L3 и водорода, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN,
R4 и R8 независимо выбраны из -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый C3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 и R8 независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила,
R10 независимо выбран в каждом случае из L3, водорода, -NH2, -C(O)OCH2C6H5, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из галогена, -CN, -NO2, -NH2, =O, =S, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла и галогеналкила,
L3 представляет собой линкерный фрагмент, где по меньшей мере один из R1, R2 и R10 представляет собой L3 или по меньшей мере один заместитель на R1, R2, R4, R8, X3 и X4 представляет собой -L3, и
где любой замещаемый атом углерода в бензазепиновом ядре необязательно замещен заместителем, выбранным из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2-, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла.
[0232] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), L22 может быть присоединен к С2, С3, С4 или С5 бензазепинового ядра, где нумерация бензазепина является следующей: . В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), L22 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4. В определенных вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IIA),
представляет собой двойную связь, и L22 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4.
[0233] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), L12 может быть присоединен к C6, C7, C8 или C9. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), L12 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С8. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), представляет собой двойную связь, L22 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С4, а L12 присоединен к бензазепиновому ядру в положении С8.
[0234] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), замещаемый атом углерода на бензазепиновом ядре выбран из C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 и C9. Бензазепиновое ядро для соединения или соли формулы (IVA) может быть необязательно замещено заместителем, выбранным из галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2-, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -P(O)(OR10)2, -OP(O)(OR10)2, -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, или два заместителя на одном атоме углерода объединяются с образованием 3-7-членного карбоцикла. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA) фрагмент на любом из С2, С3, С4, С 5, C6, C7, C8 и C9 бензазепинового ядра независимо выбран из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10 -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила.
[0235] В одном варианте осуществления соединение формулы (IVA) представлено формулой (IVB):
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, и
R24 и R25 независимо выбраны из водорода, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, или R24 и R25, взятые вместе, образуют необязательно замещенный насыщенный С3-7 карбоцикл.
[0236] В определенных вариантах осуществления соединение формулы (IVA) представлено формулой (IVC):
,
или его фармацевтически приемлемая соль.
[0237] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли по любой из формул (IVA), (IVB) и (IVC), L12 выбран из -X3-, -X3-C1-6 алкилен-X3-, -X3-C2-6 алкенилен-X3- и -X3-C2-6 алкинилен-X3-, каждый из которых необязательно замещен по алкилену, алкенилену и алкинилену одним или более R12.
[0238] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли любой из формул (IVA), (IVB) и (IVC), L22 выбран из -X4-, -X4-C1-6 алкилен-X4-, -X4-C2-6 алкенилен-X4- и -X4-C2-6 алкинилен-X4-, необязательно замещенного по алкилену, алкенилену и алкинилену одним или более R12.
[0239] В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IVA), (IVB) и (IVC), R1 и R2 независимо выбраны из -L3, водорода, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из -L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10) и -CN.
[0240] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC), R1 выбран из -L3. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC) R2 выбран из -L3. В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IVA), (IVB) и (IVC), R1 представляет собой - L3 и R2 представляет собой водород.
[0241] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IVA), (IVB) или (IVC), L12 независимо выбран из -X3-, -X3-C1-6 алкил-X3-, -X3-C2-6 алкенил-X3-, и -X3-C2-6 алкинил-X3-, каждый из которых необязательно замещен в каждом случае одним или более R10. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IVA), (IVB) или (IVC) L12 выбран из -C(O)- и -C(O)NR10-. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC), L12 представляет собой -C(O)N(R10)-. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC) R10 в -C(O)N(R10)- выбран из водорода, C1-6 алкила и -L3. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC), L12 представляет собой -C(O)NH-. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC), L12 представляет собой -C(O)N(L3)-.
[0242] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC), R4 и R8 независимо выбраны из -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, каждый из которых независимо необязательно замещен одним или более заместителями, выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила.
[0243] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IVA), (IVB) или (IVC), R8 представляет собой необязательно замещенный 5-6-членный гетероарил. В некоторых вариантах осуществления R8 представляет собой необязательно замещенный 5-6-членный гетероарил, замещенный -L3. R8 может представлять собой необязательно замещенный пиридин, замещенный -L3.
[0244] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IVA), (IVB) или (IVC) L22 независимо выбран из -X4-, X4 C1-6 алкила X4, X4 C2-6 алкенил-X4 и -X4 C2-6 алкинил X4, каждый из которых необязательно замещен в каждом случае одним или более R10. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC) L22 выбран из -C(O)- и -C(O)NR10-. L22 может представлять собой -C(O)-. В некоторых вариантах осуществления L22 представляет собой -C(O)NR10-, где R10 в -C(O)NR10- может быть выбран из водорода, C1-6 алкила и -L3. В некоторых вариантах осуществления L22 представляет собой -C(O)NH-. В некоторых вариантах осуществления L12 представляет собой -C(O)N(L3)-.
[0245] В некоторых вариантах осуществления для соединения формул (IVA), (IVB) или (IVC), R4 выбран из -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из -L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, и C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла, где каждый С3-12 карбоцикл и 3-12-членный гетероцикл в R4 независимо необязательно замещены одним или более заместителями, выбранными из -L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-6 алкила, C2-6 алкенила и C2-6 алкинила. В некоторых вариантах осуществления R4 выбран из -OR10 и -N(R10)2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила, C3-12 карбоцикла, 3-12-членного гетероцикла, арила и гетероарила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из -L3, галогена, -OR10, -SR10, -N(R10)2, -S(O)R10, -S(O)2R10,-C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C1-10 алкила, C2-10 алкенила, С2-10 алкинила. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC), R10 в -N(R10)2 выбран из -L3 и водорода, и где по меньшей мере один R10 в -N(R10)2 представляет собой -L3.
[0246] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC), R4 выбран из -OR10, -N(R10)2, -C(O)N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -S(O)R10 и -S(O)2R10, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из L3, галогена, -OR10, -SR10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -N(R10)C(O)N(R10)2, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)OR10, -OC(O)R10, -NO2, =O, =S, =N(R10), -CN, C3-12 карбоцикла и 3-12-членного гетероцикла.
[0247] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), L3 представляет собой нерасщепляемый линкер. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC), L3 представляет собой расщепляемый линкер, такой как линкер, расщепляемый лизосомальным ферментом.
[0248] В некоторых вариантах осуществления фрагмент, описанный в настоящем документе, включает в себя символ, который указывает точку присоединения, например точку присоединения химического фрагмента к остальной части соединения, точку присоединения линкера к соединению по настоящему изобретению или точку присоединения линкера к конструкции на основе антитела, как указано в настоящем описании.
[0249] Некоторые типичные линкеры (L3) описаны далее в описании, а дополнительные линкеры описаны в нижеследующем разделе, озаглавленном "Линкеры". В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), -L3 представлен формулой: , где пептид представляет собой группу, содержащую от одной до десяти аминокислот. В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), -L3 представлен формулой:
, где пептид представляет собой группу, включающую от одной до десяти аминокислот, и RX представляет собой реакционноспособный фрагмент, и
, где L4 представляет собой С-конец пептида и L5 выбран из связи, алкилена и гетероалкилена, где L5 необязательно замещен одной или более группами, независимо выбранными из R32, RX представляет собой реакционноспособный фрагмент, и R32 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2, -NO2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2 и -NO2.
[0250] В некоторых вариантах осуществления для соединения по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), -L3 представлен формулой: , где L4 представляет собой С-конец пептида и L5 выбран из связи, алкилена и гетероалкилена, где L5 необязательно замещен одной или более группами, независимо выбранными из R32, RX* представляет собой связь, сукцинимидный фрагмент или гидролизованный сукцинимидный фрагмент, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, где
на RX* представляет собой точку присоединения к остатку в конструкции на основе антитела, и R32 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2, -NO2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2 и -NO2. Реакционноспособный фрагмент может быть выбран из электрофила, например, α,β-ненасыщенного карбонила, такого как малеимид, и уходящей группы.
[0251] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), -L3 представлен формулой:
, где L4 представляет собой С-конец пептида и L5 выбран из связи, алкилена и гетероалкилена, где L5 необязательно замещен одной или более группами независимо выбранными из R32, RX* представляет собой связь, сукцинимидный фрагмент или гидролизованный сукцинимидный фрагмент, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, где антитело представляет собой конструкцию на основе антитела, и R32 независимо выбран в каждом случае из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2, -NO2, и C1-10 алкила, C2-10 алкенила и С2-10 алкинила, каждый из которых независимо необязательно замещен в каждом случае одним или более заместителями, выбранными из галогена, -OH, -CN, -O-алкила, -SH, =O, =S, -NH2 и -NO2. L3 может быть представлен формулой:
, где L4 и L5 независимо выбраны из связи, алкилена и гетероалкилена, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, независимо выбранными из R12,
слева представляет собой точку присоединения к остальной части соединения, RX* представляет собой связь, сукцинимидный фрагмент или гидролизованный сукцинимидный фрагмент, присоединенный к
справа от остатка в конструкции на основе антитела, пептид представляет собой группу, содержащую от одной до 10 аминокислот.
[0252] В некоторых вариантах соединение представляет собой: или его соль.
[0253] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), -L3 представлен формулой: , и
представляет собой точку присоединения к остальной части соединения.
[0254] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), -L3 представлен формулой: , где RX содержит реакционноспособный фрагмент, например малеимид или уходящую группу, n равно 0-9 и
представляет собой точку присоединения к остальной части соединения.
[0255] В некоторых вариантах осуществления для соединения или соли формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), -L3 представлен формулой, RX* представляет собой связь, сукцинимидный фрагмент или гидролизованный сукцинимидный фрагмент, присоединенный к
справа от остатка в конструкции на основе антитела, n равно 0-9 и
слева представляет собой точку присоединения к остаток соединения.
[0256] В определенных вариантах осуществления соединение представляет собой: или его соль.
[0257] Химические объекты, имеющие двойные углерод-углеродные связи или двойные углерод-азотные связи, могут существовать в Z- или E-форме (или цис- или транс-форме). Кроме того, некоторые химические объекты могут существовать в различных таутомерных формах. Если не указано иное, соединения, описанные в настоящем документе, также включают все Z-, E- и таутомерные формы.
[0258] "Таутомер" относится к молекуле, в которой возможен сдвиг протона от одного атома молекулы к другому атому той же молекулы. Соединения, представленные в настоящем документе, в определенных вариантах осуществления существуют в виде таутомеров. В условиях, когда таутомеризация возможна, будет существовать химическое равновесие таутомеров. Точное соотношение таутомеров зависит от нескольких факторов, включая физическое состояние, температуру, растворитель и pH. Некоторые примеры таутомерного равновесия включают:
.
[0259] Раскрытые в настоящем описании соединения в некоторых вариантах осуществления применяются в различных обогащенных изотопных формах, например, обогащенных по содержанию 2H, 3H, 11C, 13C и/или 14C. В одном конкретном варианте осуществления соединение дейтерировано по меньшей мере в одном положении. Такие дейтерированные формы могут быть получены способом, описанным в патентах США 5846514 и 6339997. Как раскрыто в патентах США 5844514 и 6334997, дейтерирование может улучшить метаболическую стабильность и/или эффективность, увеличивая таким образом продолжительность действия лекарственных средств.
[0260] Если не указано иное, соединения, описанные в настоящем документе, включают соединения, которые отличаются только присутствием одного или более изотопно-обогащенных атомов. Например, соединения, имеющие настоящие структуры, за исключением замены водорода дейтерием или тритием, или замены углерода 13C- или 14C-обогащенным углеродом, входят в объем настоящего изобретения.
[0261] Соединения по настоящему изобретению необязательно содержат неестественные пропорции атомных изотопов у одного или более атомов, которые составляют такие соединения. Например, соединения могут быть помечены изотопами, такими как, например, дейтерий (2H), тритий (3H), йод-125 (125I) или углерод 14 (14C). Рассматриваются все изотопные замещения 2H, 11C, 13C, 14C, 15C, 12N, 13N, 15N, 16N, 16O, 17O, 14F, 15F, 16F, 17F, 18F, 33S, 34S, 35S, 36S, 35Cl, 37Cl, 79Br, 81Br и 125I. Все изотопные варианты соединений по настоящему изобретению, независимо от того, радиоактивны они или нет, включены в объем настоящего изобретения.
[0262] В определенных вариантах осуществления, соединения, раскрытые в настоящем документе, имеют некоторые или все атомы 1H, замещенные атомами 2H. Способы получения дейтерийсодержащих соединений известны в данной области техники и включают, в качестве неограничивающего примера, следующие синтетические способы.
[0263] Замещенные дейтерием соединения получают различными способами, например, описанными в: Dean, Dennis C.; Editor. Recent Advances in the Synthesis and Applications of Radiolabeled Compounds for Drug Discovery and Development. [In: Curr., Pharm. Des., 2000; 6(10)] 2000, 110 pp; George W.; Varma, Rajender S. The Synthesis of Radiolabeled Compounds via Organometallic Intermediates, Tetrahedron, 1989, 45(21), 6601-21; и Evans, E. Anthony. Synthesis of radiolabeled compounds, J. Radioanal. Chem., 1981, 64(1-2), 9-32.
[0264] Дейтерированные исходные материалы легко доступны и подвергаются синтетическим способам, описанным в настоящем документе, для обеспечения синтеза дейтерийсодержащих соединений. Большое количество дейтерийсодержащих реагентов и строительных блоков коммерчески доступно у поставщиков химических веществ, таких как Aldrich Chemical Co.
[0265] Соединения по настоящему изобретению также включают кристаллические и аморфные формы этих соединений, фармацевтически приемлемые соли и активные метаболиты этих соединений, имеющих одинаковый тип активности, включая, например, полиморфы, псевдополиморфы, сольваты, гидраты, несольватированные полиморфы (включая ангидраты), конформационные полиморфы и аморфные формы соединений, а также их смеси.
[0266] В некоторых аспектах настоящее изобретение относится к способу лечения рака. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу, включающему введение конъюгата, соединения или соли формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) субъекту, нуждающемуся в этом.
[0267] В некоторых аспектах, соединения по настоящему изобретению проявляют селективные связывающие или агонистические свойства в отношении одного рецептора по сравнению с другим рецептором. В некоторых вариантах осуществления соединение, описанное в настоящем документе, избирательно связывает или модулирует активность одного toll-подобного рецептора над другим, например, TLR8 и TLR7. Например, соединение или соль формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) может иметь более слабое связывание с TLR7 по сравнению с TLR8, измеренное значениями Kd, например, Kd соединения для TLR7 в два или более раз превышает Kd для TLR8, или на порядок или более, или даже на два порядка или более, чем Kd для TLR8. В некоторых вариантах осуществления соединение или соль формулы (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) обладает большей активностью в отношении одного toll-подобного рецептора по сравнению с другим, например, TLR8 и TLR7. В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению оказывает агонистическое действие на TLR8 с ЕС50, равным 500 нМ или менее, тогда как то же самое соединение оказывает агонистическое действие на TLR7 с ED50, превышающим 1 мкМ. В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению оказывает агонистическое действие на TLR8 с по меньшей мере EC50, на порядок меньшей или даже на два порядка меньшей, чем количество того же соединения, которое требуется для проявления агонистического действия на TLR7.
[0268] В настоящее описание включены соли, в частности фармацевтически приемлемые соли соединений, описанных в настоящем документе. Соединения по настоящему изобретению, которые обладают достаточно кислыми, достаточно основными или обеими функциональными группами, могут реагировать с любым из ряда неорганических оснований и неорганических и органических кислот с образованием соли. Альтернативно, соединения, которые по своей природе заряжены, такие как соединения с четвертичным азотом, могут образовывать соль с подходящим противоионом, например, галогенидом, таким как бромид, хлорид или фторид, особенно бромид.
[0269] Описанные в настоящем документе соединения могут в некоторых случаях существовать в виде диастереомеров, энантиомеров или других стереоизомерных форм. Соединения, представленные в настоящем документе, включают все диастереомерные, энантиомерные и эпимерные формы, а также их соответствующие смеси. Разделение стереоизомеров может быть выполнено с помощью хроматографии или путем образования диастереомеров и разделения путем перекристаллизации или хроматографии, или любой их смеси. (Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981, включенный в настоящую заявку посредством ссылки). Стереоизомеры также могут быть получены стереоселективным синтезом.
[0270] Способы и композиции, описанные в настоящем документе, включают применение аморфных форм, а также кристаллических форм (также известных как полиморфы). Соединения, описанные в настоящем документе, могут быть в форме фармацевтически приемлемых солей. Кроме того, активные метаболиты этих соединений, обладающие одинаковым типом активности, включены в объем настоящего изобретения. Кроме того, соединения, описанные в настоящем документе, могут существовать в несольватированных, а также в сольватированных формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и тому подобное. Сольватированные формы соединений, представленные в настоящем документе, также считаются раскрытыми в настоящем документе.
[0271] В определенных вариантах осуществления соединения или соли соединений по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) могут представлять собой пролекарство, например, где гидроксил в исходном соединении представлен в виде эфира или карбоната, или карбоновая кислота, присутствующая в исходном соединении, представлена в виде эфира. Термин "пролекарство" предназначен для охвата соединений, которые в физиологических условиях превращаются в фармацевтические агенты по настоящему изобретению. Одним из способов получения пролекарства является включение одной или более выбранных фрагментов, которые гидролизуются в физиологических условиях для выявления желаемой молекулы. В других вариантах осуществления пролекарство превращается ферментативной активностью животного-хозяина, например, специфические клетки-мишени в животном-хозяине. Например, сложные эфиры или карбонаты (например, сложные эфиры или карбонаты спиртов, или карбоновых кислот и сложные эфиры фосфоновых кислот) являются предпочтительными пролекарствами по настоящему изобретению.
[0272] Пролекарственные формы описанных в настоящем документе соединений, где пролекарство метаболизируется in vivo с образованием соединения по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), как раскрыто в настоящем документе, включены в объем формулы настоящего изобретения. В некоторых случаях некоторые из описанных в настоящем документе соединений могут быть пролекарствами для другого производного или активного соединения.
[0273] Пролекарства часто полезны, потому что в некоторых ситуациях их легче вводить, чем исходное лекарственное средство. Они могут, например, быть биодоступными при пероральном введении, тогда как исходное лекарственное средство - нет. Пролекарства могут помочь улучшить клеточную проницаемость соединения по сравнению с исходным лекарственным средством. Пролекарство может также иметь улучшенную растворимость в фармацевтических композициях по сравнению с исходным лекарственным средством. Пролекарства могут быть сконструированы как обратимые производные лекарственного средства, для применения в качестве модификаторов для усиления транспорта лекарственного средства к тканям, специфичным для конкретного участка, или для увеличения количества лекарственного средства внутри клетки.
[0274] В некоторых вариантах осуществления дизайн пролекарства увеличивает липофильность фармацевтического агента. В некоторых вариантах осуществления дизайн пролекарства увеличивает эффективную растворимость в воде. См., например, Fedorak et al., Am. J. Physiol., 269:G210-218 (1995); McLoed et al., Gastroenterol, 106:405-413 (1994); Hochhaus et al., Biomed. Chrom., 6:283-286 (1992); J. Larsen and H. Bundgaard, Int. J. Pharmaceutics, 37, 87 (1987); J. Larsen et al., Int. J. Pharmaceutics, 47, 103 (1988); Sinkula et al., J. Pharm. Sci., 64:181-210 (1975); T. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series; и Edward B. Roche, Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, включенные в настоящую заявку для такого раскрытия). В соответствии с другим вариантом осуществления настоящее изобретение относится к способам получения указанных выше соединений. Соединения могут быть получены обычными способами. Преимущественно, эти соединения удобно получать из легко доступных исходных материалов.
[0275] Преобразования синтетической химии и методологии, полезные для получения соединений, описанных в настоящем документе, известны в данной области техники и включают, например, описанные в R. Larock, Comprehensive Organic Transformations (1989); T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2d. Ed. (1991); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis (1994); и L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis (1995).
Линкеры
[0276] Соединения и соли, описанные в настоящем документе, могут быть связаны с линкером, также называемым в настоящем документе L3, например, пептидным линкером. В некоторых вариантах осуществления линкер также связан с конструкцией на основе антитела и упоминается как конъюгат или конъюгат конструкции на основе антитела. Линкеры конъюгатов, описанных в данном документе, могут не влиять на связывание активных частей конъюгата, например, антигенсвязывающих доменов, Fc доменов, мишень-связывающих доменов, антител, агонистов или тому подобного, с мишенью, которая может быть родственным партнером по связыванию, например, антигеном. Конъюгат может содержать несколько линкеров, каждый из которых имеет одно или более присоединенных соединений. Эти линкеры могут быть одинаковыми или различными линкерами. Некоторые типичные линкеры (L3) описаны в предыдущем разделе под названием "Соединения", а дополнительные линкеры описаны в данном разделе.
[0277] Линкер может быть коротким, гибким, жестким, расщепляемым, нерасщепляемым, гидрофильным или гидрофобным. Линкер может содержать сегменты, которые имеют разные характеристики, такие как сегменты гибкости или сегменты жесткости. Линкер может быть химически устойчивым к внеклеточной среде, например, химически стабильным в кровотоке, или может включать связи, которые не являются стабильными или селективно стабильными. Линкер может включать в себя связи, которые предназначены для расщепления и/или разрушения или иного разрушения конкретно или неспецифично внутри клеток. Расщепляемый линкер может быть чувствительным к ферментам. Расщепляемый линкер может расщепляться ферментами, такими как протеазы. Расщепляемый линкер может содержать валин-цитруллиновый линкер или валин-аланиновый пептид. Валин-цитруллин- или валин-аланинсодержащий линкер может содержать пентафторфенильную группу. Валин-цитруллин- или валин-аланинсодержащий линкер может содержать малеимидную или сукцинимидную группу. Валин-цитруллин- или валин-аланинсодержащий линкер может содержать группу пара-аминобензилового спирта (PABA) или пара-аминобензилкарбамат (PABC).
[0278] Валин-цитруллин- или валин-аланинсодержащий линкер может содержать группу PABA и пентафторфенильную группу. Валин-цитруллин- или валин-аланинсодержащий линкер может содержать группу PABA и малеимидную или сукцинимидную группу.
[0279] Нерасщепляемый линкер может быть нечувствительным к протеазе. Нерасщепляемый линкер может представлять собой малеимидокапроильный линкер. Малеимидокапроильный линкер может содержать N-малеимидометилциклогексан-1-карбоксилат. Малеимидокапроильный линкер может содержать сукцинимидную группу. Малеимидокапроильный линкер может содержать пентафторфенильную группу. Линкер может представлять собой комбинацию малеимидокапроильной группы и одной или более молекул полиэтиленгликоля. Линкер может представлять собой линкер малеимид-ПЭГ4. Линкер может представлять собой комбинацию малеимидокапроильного линкера, содержащего сукцинимидную группу и одну или более молекул полиэтиленгликоля. Линкер может представлять собой комбинацию малеимидокапроильного линкера, содержащего пентафторфенильную группу и одну или более молекул полиэтиленгликоля. Линкер может содержать малеимиды, связанные с молекулами полиэтиленгликоля, в которых полиэтиленгликоль может обеспечивать большую гибкость линкера или может применяться для удлинения линкера. Линкер может представлять собой линкер (малеимидокапроил)-(валин-цитруллин)-(пара-аминобензилоксикарбонил). Линкер может представлять собой линкер, подходящий для присоединения к генно-инженерному цистеину (THIOMAB). Линкер THIOMAB может представлять собой линкер (малеимидокапроил)-(валин-цитруллин)-(пара-аминобензилоксикарбонил)-.
[0280] Линкер также может содержать алкилен, алкенилен, алкинилен, полиэфир, полиэфир, полиамидную группу(ы), а также полиаминокислоты, полипептиды, расщепляемые пептиды или аминобензилкарбаматы. Линкер может содержать малеимид на одном конце и N-гидроксисукцинимидиловый эфир на другом конце. Линкер может содержать лизин с ацетилированным амином на N-конце и сайт расщепления валин-цитруллин. Линкер может представлять собой связь, созданную микробной трансглутаминазой, где связь может быть создана между аминсодержащим фрагментом и фрагментом, сконструированным для содержания глютамина, в результате ферментного катализирования образования связи между ацильной группой боковой цепи глютамина и первичным амином лизиновой цепи. Линкер может содержать реакционноспособный первичный амин. Линкер может представлять собой линкер сортаза A. Линкер сортаза А может быть создан ферментом Сортаза А, сливающим мотив распознавания LXPTG с N-концевым мотивом GGG для регенерации нативной амидной связи. Созданный линкер может поэтому связывать фрагмент, присоединенный к мотиву распознавания LXPTG, с фрагментом, присоединенным к N-концевому мотиву GGG.
[0281] В описанных в настоящем документе конъюгатах соединение или соль по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) связаны с конструкцией на основе антитела посредством линкера(ов), также называемого в настоящем документе L3. L3, в контексте настоящего документа, может быть выбран из любого из линкерных фрагментов, описанных в настоящем документе. Линкер, связывающий соединение или соль с конструкцией на основе антитела конъюгата, может быть коротким, длинным, гидрофобным, гидрофильным, гибким или жестким, или может состоять из сегментов, каждый из которых независимо обладает одним или более из вышеупомянутых свойств, так что линкер может включать сегменты, имеющие разные свойства. Линкеры могут быть поливалентными, так что они ковалентно связывают более одного соединения или более одной соли с одним сайтом в конструкции на основе антитела, или могут быть одновалентными, чтобы ковалентно связывать одно соединение или соль с одним сайтом в конструкции на основе антитела.
[0282] Линкеры по изобретению (L3) могут иметь от приблизительно 10 до приблизительно 500 атомов в линкере, например, от приблизительно 10 до приблизительно 400 атомов, например, от приблизительно 10 до приблизительно 300 атомов в линкере. В определенных вариантах осуществления линкеры по настоящему изобретению имеют от приблизительно 30 до приблизительно 400 атомов, например, от приблизительно 30 до приблизительно 300 атомов в линкере.
[0283] Как будет понятно специалистам в данной области техники, линкеры могут связывать соединение или соль по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) с конструкцией на основе антитела посредством ковалентных связей между линкером и конструкцией на основе антитела и соединением. Выражение "линкер", в контексте настоящего документа, включает (i) неконъюгированные формы линкера, которые включают функциональную группу, способную ковалентно связывать линкер с бензазепиновым соединением(ями), и функциональную группу, способную ковалентно связывать линкер с конструкцией на основе антитела, (ii) частично конъюгированные формы линкера, которые включают функциональную группу, способную ковалентно связывать линкер с конструкцией на основе антитела и которая ковалентно связана с соединением(ями) или солью(ями) по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) или наоборот, и (iii) полностью конъюгированные формы линкера, который ковалентно связан как с соединением(ями), так и с солью(ями) по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) и конструкцией на основе антитела. Один вариант осуществления относится к конъюгату, образованному взаимодействием конструкции на основе антитела, которая связывает рецептор клеточной поверхности или ассоциированный с опухолью антиген, экспрессируемый в опухолевой клетке, с линкером-соединением, описанным в настоящем документе, в условиях, при которых линкер-соединение ковалентно связывается с конструкцией на основе антитела. Один вариант осуществления относится к способу получения конъюгата, образованного взаимодействием линкер-соединения, описанного в настоящем документе, в условиях, при которых линкер-соединение ковалентно связывается с конструкцией на основе антитела. Один вариант осуществления относится к способу стимуляции иммунной активности в клетке, которая экспрессирует CD40, включающему взаимодействие клетки с описанным в настоящем документе конъюгатом, который способен связываться с клеткой, в условиях, при которых конъюгат связывается с клеткой.
[0284] Описаны типичные поливалентные линкеры, которые можно применять для связывания многих бензазепиновых соединений с конструкцией на основе антитела. Например, линкерная технология Fleximer® позволяет получать конъюгаты с высоким DAR с хорошими физико-химическими свойствами. Как показано ниже, линкерная технология Fleximer® основана на включении молекул лекарственного средства в солюбилизирующий полиацетальный каркас через последовательность сложноэфирных связей. Способ позволяет получать высоконагруженные конъюгаты (DAR не более 20), сохраняя при этом хорошие физико-химические свойства. Данный способ можно применять с бензазепиновым соединением, как показано на схеме ниже.
[0285] Для применения линкерной технологии Fleximer®, представленной на схеме выше, алифатический спирт может присутствовать или вводиться в бензазепиновое соединение. Затем спиртовая группа конъюгируется с аланиновой группой, которая затем синтетически включается в линкер Fleximer®. Липосомная обработка конъюгата in vitro высвобождает исходное спиртосодержащее лекарственное средство.
[0286] В качестве примера, а не ограничения, некоторые расщепляемые и нерасщепляемые линкеры, которые могут быть включены в описанные в настоящем документе конъюгаты, описанные ниже.
[0287] Расщепляемые линкеры могут расщепляться in vitro и in vivo. Расщепляемые линкеры могут включать химически или ферментативно нестабильные, или разлагаемые связи. Расщепляемые линкеры могут полагаться на процессы внутри клетки для выделения бензазепинового соединения, такие как уменьшение цитоплазмы, воздействие кислотных условий в лизосоме или расщепление специфическими протеазами или другими ферментами в клетке. Расщепляемые линкеры могут включать одну или более химических связей, которые являются химически или ферментативно расщепляемыми, в то время как остальная часть линкера может быть нерасщепляемой.
[0288] Линкер может содержать химически лабильную группу, такую как гидразоновые и/или дисульфидные группы. Линкеры, содержащие химически лабильные группы, могут использовать дифференциальные свойства между плазмой и некоторыми цитоплазматическими компартментами. Внутриклеточные условия, которые могут способствовать высвобождению бензазепинового соединения для гидразонсодержащих линкеров, могут представлять собой кислотную среду эндосом и лизосом, в то время как дисульфидсодержащие линкеры могут быть уменьшены в цитозоле, который может содержать высокие концентрации тиола, например, глутатион. Плазменная стабильность линкера, содержащего химически лабильную группу, может быть увеличена путем введения стерического затруднения с применением заместителей рядом с химически лабильной группой.
[0289] Кислотно-лабильные группы, такие как гидразон, могут оставаться интактными во время системного кровообращения в среде с нейтральным рН крови (рН от 7,3 до 7,5) и могут подвергаться гидролизу и могут высвобождать бензазепиновое соединение после того, как конъюгат бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела, интернализуется в слабокислых эндосомальных (рН от 5,0 до 6,5) и лизосомальных (рН от 4,5 до 5,0) компартментах клетки. Этот рН-зависимый механизм высвобождения может быть связан с неспецифическим высвобождением лекарственного средства. Чтобы повысить стабильность гидразонной группы линкера, линкер можно варьировать путем химической модификации, например, замещения, позволяя осуществлять настройку для достижения более эффективного высвобождения в лизосоме с минимальными потерями в кровотоке.
[0290] Гидразонсодержащие линкеры могут содержать дополнительные сайты расщепления, такие как дополнительные кислотно-лабильные сайты расщепления и/или ферментативно лабильные сайты расщепления. Конъюгаты бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела, включающие типичные гидразонсодержащие линкеры, могут включать, например, следующие структуры:
где D представляет собой соединение или соль по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC) и Ab представляет собой конструкцию на основе антитела, соответственно, и n представляет собой число связанных с соединением линкеров (LP), связанных с конструкцией на основе антитела. В некоторых линкерах, таких как линкер (Ia), линкер может содержать две расщепляемые группы, дисульфидный и гидразоновый фрагмент. Для таких линкеров эффективное высвобождение немодифицированного свободного бензазепинового соединения может потребовать кислого рН или восстановления дисульфида и кислого рН. Линкеры, такие как (Ib) и (Ic), могут быть эффективными с одним сайтом расщепления гидразона.
[0291] Другие кислотно-лабильные группы, которые могут быть включены в линкеры, включают цис-аконитилсодержащие линкеры. Химия цис-аконитила может применять карбоновую кислоту, расположенную рядом с амидной связью, для ускорения гидролиза амида в кислых условиях.
[0292] Расщепляемые линкеры также могут включать дисульфидную группу. Дисульфиды могут быть термодинамически стабильными при физиологическом рН и могут быть предназначены для высвобождения бензазепинового соединения при интернализации внутри клеток, где цитозоль может обеспечивать значительно более восстановительную среду по сравнению с внеклеточной средой. Расщепление дисульфидных связей может потребовать присутствия цитоплазматического тиолового кофактора, такого как (восстановленный) глутатион (GSH), так что дисульфидсодержащие линкеры могут быть достаточно стабильными в кровотоке, селективно высвобождая бензазепиновое соединение в цитозоле. Внутриклеточный фермент протеин-дисульфид-изомераза или подобные ферменты, способные расщеплять дисульфидные связи, также могут вносить вклад в преимущественное расщепление дисульфидных связей внутри клеток. GSH может присутствовать в клетках в диапазоне концентраций от 0,5 до 10 мМ по сравнению со значительно более низкой концентрацией GSH или цистеина, наиболее распространенного низкомолекулярного тиола, в кровотоке приблизительно при 5 мкМ. Опухолевые клетки, где нерегулярный кровоток может привести к гипоксическому состоянию, могут привести к усилению активности восстановительных ферментов и, следовательно, к еще более высоким концентрациям глутатиона. Стабильность in vivo дисульфидсодержащего линкера может быть повышена путем химической модификации линкера, например, путем применения стерического затруднения, примыкающего к дисульфидной связи.
[0293] Конъюгаты бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела, включающие типичные дисульфидсодержащие линкеры, могут включать следующие структуры:
,
где D представляет собой соединение или соль по любой из формул (IA), (IIA), (IB), (IIB), (IIIA) и (IIIB), и Ab представляет собой конструкцию на основе антитела, соответственно, n представляет собой число соединений, связанных с линкерами (L3), связанных с конструкцией на основе антитела, и R в каждом случае независимо выбран, например, из водорода или алкила. Увеличение стерических затруднений, примыкающих к дисульфидной связи, может увеличить стабильность линкера. Структуры, такие как (IIa) и (IIc), могут демонстрировать повышенную стабильность in vivo, когда одна или более групп R выбрана из низшего алкила, такого как метил.
[0294] Другим типом линкера, который можно применять, является линкер, который специфически расщепляется ферментом. Например, линкер может расщепляться лизосомальным ферментом. Такие линкеры могут быть на основе пептидов или могут включать пептидные области, которые могут действовать как субстраты для ферментов. Линкеры на основе пептидов могут быть более стабильными в плазме и во внеклеточной среде, чем химически лабильные линкеры.
[0295] Пептидные связи могут иметь хорошую стабильность в сыворотке, поскольку лизосомальные протеолитические ферменты могут иметь очень низкую активность в крови из-за эндогенных ингибиторов и неблагоприятно высокого значения рН крови по сравнению с лизосомами. Высвобождение бензазепинового соединения из конструкции на основе антитела может происходить вследствие действия лизосомальных протеаз, например, катепсина и плазмина. Эти протеазы могут присутствовать на повышенных уровнях в некоторых опухолевых тканях. Линкер может расщепляться лизосомальным ферментом. Лизосомальный фермент может представлять собой, например, катепсин B, катепсин S, β-глюкуронидазу или β-галактозидазу.
[0296] Расщепляемый пептид может быть выбран из тетрапептидов, таких как Gly-Phe-Leu-Gly, Ala-Leu-Ala-Leu, или дипептидов, таких как Val-Cit, Val-Ala и Phe-Lys. Дипептиды могут иметь более низкую гидрофобность по сравнению с более длинными пептидами.
[0297] Разнообразные расщепляемые линкеры на основе дипептидов могут быть применены в конъюгатах бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела, описанных в настоящем документе.
[0298] Ферментативно расщепляемые линкеры могут включать саморасщепляющийся спейсер для пространственного отделения бензазепинового соединения от сайта ферментативного расщепления. Прямое присоединение бензазепинового соединения к пептидному линкеру может приводить к протеолитическому высвобождению бензазепинового соединения или аминокислотного аддукта бензазепинового соединения, что ухудшает его активность. Применение саморасщепляющегося спейсера позволяет исключить полностью активное, химически немодифицированное бензазепиновое соединение при гидролизе амидной связи.
[0299] Один саморасщепляющийся спейсер может представлять собой бифункциональную группу пара-аминобензилового спирта, которая может связываться с пептидом через аминогруппу, образуя амидную связь, в то время как аминосодержащие бензазепиновые соединения могут быть присоединены через карбаматные функциональные группы к бензильной гидроксильной группе линкера (с получением п-амидобензилкарбамата, PABC). Полученное пробензазепиновое соединение может быть активировано после протеазо-опосредованного расщепления, что приводит к реакции 1,6-элиминации с высвобождением немодифицированного бензазепинового соединения, диоксида углерода и остатков линкера. Следующая схема изображает фрагментацию п-амидобензилкарбамата и высвобождение бензазепинового соединения:
где X-D представляет собой немодифицированное бензазепиновое соединение. Гетероциклические варианты этой саморасщепляющейся группы также были описаны.
[0300] Ферментативно расщепляемый линкер может представлять собой линкер на основе β-глюкуроновой кислоты. Быстрое высвобождение бензазепинового соединения может быть осуществлено путем расщепления β-глюкуронид-гликозидной связи лизосомальным ферментом β-глюкуронидазой. Этот фермент может широко присутствовать в лизосомах и может быть сверхэкспрессирован в некоторых типах опухолей, в то время как активность фермента вне клеток может быть низкой. Линкеры на основе β-глюкуроновой кислоты могут быть применены для того, чтобы обойти тенденцию агрегации конъюгата бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела к агрегации вследствие гидрофильной природы β-глюкуронидов. В некоторых вариантах осуществления линкеры на основе β-глюкуроновой кислоты могут связывать конструкцию на основе антитела с гидрофобным бензазепиновым соединением. Следующая схема изображает высвобождение бензазепинового соединения (D) из конъюгата бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела, содержащего линкер на основе β-глюкуроновой кислоты:
где Ab обозначает конструкцию на основе антитела.
[0301] Описано множество расщепляемых линкеров на основе β-глюкуроновой кислоты, которые могут быть применены для связывания лекарственных средств, таких как ауристатины, аналоги камптотецина и доксорубицина, белки, связывающиеся с малой бороздой CBI и псимберин к антителам. Эти линкеры на основе β-глюкуроновой кислоты можно применять в конъюгатах, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления ферментативно расщепляемый линкер представляет собой линкер на основе β-галактозида. β-галактозид в изобилии присутствует в лизосомах, в то время как активность фермента вне клеток низкая.
[0302] Кроме того, бензазепиновые соединения, содержащие фенольную группу, могут быть ковалентно связаны с линкером через фенольный кислород. Один из таких линкеров опирается на способ, в котором диаминоэтан "Space Link" применяют в сочетании с традиционными саморасщепляющимися группами на основе "PABO" для доставки фенолов.
[0303] Расщепляемые линкеры могут включать нерасщепляемые части или сегменты, и/или расщепляемые сегменты или части могут быть включены в иначе нерасщепляемый линкер, чтобы сделать его расщепляемым. Только в качестве примера, полиэтиленгликоль (ПЭГ) и родственные полимеры могут включать расщепляемые группы в основной цепи полимера. Например, линкер на основе полиэтиленгликоля или полимера может включать одну или более расщепляемых групп, таких как дисульфид, гидразон или дипептид.
[0304] Другие разлагаемые связи, которые могут быть включены в линкеры, могут включать сложноэфирные связи, образованные реакцией карбоновых кислот ПЭГ или активированных карбоновых кислот ПЭГ со спиртовыми группами в бензазепиновом соединении, где такие сложноэфирные группы могут гидролизоваться в физиологических условиях с высвобождением бензазепинового соединения. Гидролитически разлагаемые связи могут включать, но не ограничиваются ими, карбонатные связи, иминные связи, возникающие в результате реакции амина и альдегида, связи фосфатного эфира, образованные при взаимодействии спирта с фосфатной группой, ацетальные связи, которые являются продуктом реакции альдегида и спирта, ортоэфирные связи, которые являются продуктом реакции формиата и спирта, и олигонуклеотидные связи, образованные фосфорамидитной группой, включая, но не ограничиваясь ими, на конце полимер и 5'-гидроксильную группу олигонуклеотида.
[0305] Линкер может содержать ферментативно расщепляемый пептидный фрагмент, например, линкер, содержащий структурные формулы (IIIa), (IIIb), (IIIc) или (IIId):
или его соль, где: "пептид" представляет собой пептид (обозначен в N → C-ориентации, где пептид включает амино и карбокси "концы"), который расщепляется лизосомальным ферментом, Т представляет собой полимер, содержащий одно или более звеньев этиленгликоля или алкиленовую цепь или их комбинации, Ra выбран из водорода, алкила, сульфоната и метилсульфоната, Ry представляет собой водород или C1-4 алкил-(O)r-(C1-4 алкилен)s-G1 или C1-4 алкил-(N)-[(C1-4 алкилен)-G1]2, Rz представляет собой C1-4 алкил-(O)r-(C1-4 алкилен)s-G2; G1 представляет собой SO3H, CO2H, ПЭГ4-32 или сахарный компонент, G2 представляет собой SO3H, CO2H или фрагмент ПЭГ4-32, r равно 0 или 1, s равно 0 или 1, p представляет собой целое число от 0 до 5, q равно 0 или 1, х равно 0 или 1, у равно 0 или 1, представляет собой точку присоединения линкера к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), или (IIIC), и * представляет точку присоединения к оставшейся части линкера.
[0306] В определенных вариантах осуществления пептид может быть выбран из природных аминокислот, неприродных аминокислот или их смеси. В определенных вариантах осуществления пептид может быть выбран из трипептида или дипептида. В конкретных вариантах осуществления дипептид может содержать L-аминокислоты и быть выбран из: Val-Cit; Cit-Val; Ala-Ala; Ala-Cit; Cit-Ala; Asn-Cit; Cit-Asn; Cit-Cit; Val-Glu; Glu-Val; Ser-Cit; Cit-Ser; Lys-Cit; Cit-Lys; Asp-Cit; Cit-Asp; Ala-Val; Val-Ala; Phe-Lys; Lys-Phe; Val-Lys; Lys-Val; Ala-Lys; Lys-Ala; Phe-Cit; Cit-Phe; Leu- Cit; Cit-Leu; Ile-Cit; Cit-Ile; Phe-Arg; Arg-Phe; Cit-Trp и Trp-Cit или их солей.
[0307] Типичные варианты осуществления линкеров в соответствии со структурной формулой (IIIa) проиллюстрированы ниже (как показано, линкеры включают реакционноспособную группу, подходящую для ковалентного связывания линкера с конструкцией на основе антитела):
где указывает сайт присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0308] Типичные варианты линкеров в соответствии со структурной формулой (IIIb), (IIIc) или (IIId), которые могут быть включены в конъюгаты, описанные в настоящем документе, могут включать линкеры, показанные ниже (как показано, линкеры могут включать реакционноспособную группу, подходящую для ковалентного связывания линкера к конструкции антитела):
где указывает сайт присоединения к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0309] Линкер может содержать ферментативно расщепляемый сахарный компонент, например, линкер, содержащий структурные формулы (IVa), (IVb), (IVc), (IVd) или (IVe):
или его соль, где: q равно 0 или 1, r равно 0 или 1, Х1 представляет собой СН2, О или NH, представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), и * представляет собой точку присоединения к оставшейся части линкера.
[0310] Типичные варианты осуществления линкеров в соответствии со структурной формулой (IVa), которые могут быть включены в конъюгаты бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела, описанные в настоящем документе, могут включать линкеры, показанные ниже (как показано, линкеры включают группу, подходящую для ковалентного связывания линкера с конструкцией на основе антитела):
,
где представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0311] Типичные варианты осуществления линкеров в соответствии со структурной формулой (IVb), которые могут быть включены в конъюгаты, описанные в настоящем документе, включают линкеры, показанные ниже (как показано, линкеры включают группу, подходящую для ковалентного связывания линкера с конструкцией на основе антитела):
,
где представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0312] Типичные варианты осуществления линкеров в соответствии со структурной формулой (IVc), которые могут быть включены в конъюгаты, описанные в настоящем документе, включают линкеры, поканные ниже (как показано, линкеры включают группу, подходящую для ковалентного связывания линкера с конструкцией на основе антитела):
,
где представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0313] Примерные варианты осуществления линкеров в соответствии со структурной формулой (IVd), которые могут быть включены в конъюгаты, описанные в настоящем документе, включают линкеры, показанные ниже (как показано, линкеры включают группу, подходящую для ковалентного связывания линкера с конструкцией на основе антитела):
,
где представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0314] Типичные варианты осуществления линкеров в соответствии со структурной формулой (IVe), которые могут быть включены в конъюгаты, описанные в настоящем документе, включают линкеры, показанные ниже (как показано, линкеры включают группу, подходящую для ковалентного связывания линкера с конструкцией на основе антитела):
,
где представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0315] Хотя расщепляемые линкеры могут обеспечивать определенные преимущества, линкеры, содержащие конъюгат, описанный в настоящем документе, не обязательно должны расщепляться. Для нерасщепляемых линкеров высвобождение бензазепинового соединения может не зависеть от дифференциальных свойств между плазмой и некоторыми цитоплазматическими компартментами. Высвобождение бензазепинового соединения может происходить после интернализации конъюгата конструкции на основе антитела с бензазепиновым соединением через антиген-опосредованный эндоцитоз и доставку в лизосомальный компартмент, где конструкция на основе антитела может быть разложена до уровня аминокислот посредством внутриклеточной протеолитической деградации. Этот процесс может высвобождать производное бензазепинового соединения, которое образуется из бензазепинового соединения, линкера и аминокислотного остатка или остатков, к которым линкер был ковалентно присоединен. Производное бензазепинового соединения из конъюгатов конструкции на основе антитела и бензазепинового соединения с нерасщепляемыми линкерами могут быть более гидрофильными и менее проницаемыми для мембраны, что может приводить к меньшим неспецифическим воздействиям и меньшей неспецифической токсичности по сравнению с конъюгатами бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела с расщепляемым линкером. Конъюгаты бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела с нерасщепляемыми линкерами могут иметь большую стабильность в кровотоке, чем конъюгаты бензазепинового соединения и конструкции на основе антитела с расщепляемыми линкерами. Нерасщепляемые линкеры могут включать алкиленовые цепи или могут быть полимерными, такими как, например, на основе полиалкиленгликолевых полимеров, амидных полимеров, или могут включать сегменты алкиленовых цепей, полиалкиленгликолей и/или амидных полимеров. Линкер может содержать сегмент полиэтиленгликоля, имеющий от 1 до 6 единиц этиленгликоля.
[0316] Линкер может быть нерасщепляемым in vivo, например, линкер в соответствии с формулами ниже:
или их соли, где: Ra выбран из водорода, алкила, сульфоната и метилсульфоната, Rx представляет собой реакционноспособную группу, содержащую функциональную группу, способную ковалентно связывать линкер с конструкцией на основе антитела, и представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0317] Типичные варианты осуществления линкеров в соответствии со структурной формулой (Va) - (Vf), которые могут быть включены в конъюгаты, описанные в настоящем документе, включают линкеры, показанные ниже (как показано, линкеры включают группу, подходящую для ковалентного связывания линкера с конструкцией на основе антитела, и представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC):
.
[0318] Группы присоединения, которые применяются для присоединения линкеров к конструкции на основе антитела, могут иметь электрофильную природу и включать, например, малеимидные группы, алкины, алкиноаты, аллены и алленоаты, активированные дисульфиды, активные сложные эфиры, такие как сложные эфиры NHS и сложные эфиры HOBt, галоформиаты, галогенангидриды, алкилы и бензилгалогениды, такие как галоацетамиды. Существуют также новые технологии, связанные с "самостабилизирующимися" малеимидами и "мостиковыми дисульфидами", которые могут быть применены в соответствии с настоящим изобретением.
[0319] Малеимидные группы часто применяют при получении конъюгатов из-за их специфичности для взаимодействия с тиольными группами, например, цистеиновыми группами антитела конъюгата. Реакция между тиольной группой антитела и лекарственным средством с линкером, включающим малеимидную группу, протекает по следующей схеме:
[0320] Также может иметь место обратная реакция, приводящая к удалению малеимида из тиозамещенного сукцинимида. Эта обратная реакция нежелательна, поскольку малеимидная группа может впоследствии вступать в реакцию с другой доступной тиольной группой, такой как другие белки в организме, имеющие доступные цистеины. Соответственно, обратная реакция может нарушить специфичность конъюгата. Одним из способов предотвращения обратной реакции является включение основной группы в связующую группу, показанную на схеме выше. Не желая быть связанными теорией, присутствие основной группы может увеличить нуклеофильность близлежащих молекул воды, чтобы способствовать гидролизу сукцинимидной группы с раскрытием цикла. Гидролизованная форма группы присоединения устойчива к деконъюгации в присутствии белков плазмы. Так называемые "самостабилизирующиеся" линкеры обеспечивают конъюгаты с улучшенной стабильностью. Типичная схема показана ниже:
[0321] Реакция гидролиза, схематически представленная выше, может происходить также в карбонильной группе сукцинимидной группы. Соответственно, могут появиться два возможных изомера, как показано ниже:
[0322] Идентичность основания, а также расстояние между основанием и малеимидной группой могут быть изменены для настройки скорости гидролиза тиозамещенной сукцинимидной группы и оптимизации доставки конъюгата к мишени путем, например, улучшения специфичности и стабильности конъюгата.
[0323] Основания, подходящие для включения в линкер, описанный в настоящем документе, например, любой L3, описанный в настоящем документе, с малеимидной группой перед конъюгированием с конструкцией на основе антитела, могут способствовать гидролизу соседней сукцинимидной группы, образованной после конъюгации конструкции на основе антитела с линкером. Основания могут включать, например, амины (например, -N(R26)(R27), где R26 и R27 независимо выбраны из H и C1-6 алкила), азотсодержащие гетероциклы (например, 3-12-членный гетероцикл, включающий один или более атомов азота и, необязательно, одну или более двойных связей), амидины, гуанидины и карбоциклы или гетероциклы, замещенные одной или более аминогруппами (например, 3-12-членный ароматический или неароматический цикл, необязательно включающий гетероатом, такой как атом азота, и замещенный одним или более аминами типа -N(R26)(R27), где R26 и R27 независимо выбраны из H или C1-6 алкила). Единица основания может быть отделена от малеимидной группы, например, алкиленовой цепью в форме -(CH2)m-, где m представляет собой целое число от 0 до 10. Алкиленовая цепь может быть необязательно замещена другими функциональными группами, такими как описано в настоящем документе.
[0324] Линкер (L3), описанный в настоящем документе с малеимидной группой, может включать электроноакцепторную группу, такую как, но не ограничиваясь ими, -C(O)R, =O, -CN, -NO2, -CX3, -X, -COOR, -CONR2, -COR, -COX, -SO2R, -SO2OR, -SO2NHR, -SO2NR2, PO3R2, -P(O)(CH3)NHR, -NO, -NR3+, -CR=CR2 и -C≡CR, где каждый R независимо выбран из H и C1-6 алкила и каждый X независимо выбран из F, Br, Cl и I. Самостабилизирующиеся линкеры также могут включать арильные, например, фенильные или гетероарильные, например пиридиновые, группы необязательно замещенный электроноакцепторными группами, такими как те, что описаны в настоящем документе.
[0325] Примеры самостабилизирующихся линкеров приведены, например, в патенте США 2013/0309256, линкеры которой включены в настоящее описание посредством ссылки. Понятно, что самостабилизирующийся линкер, применимый в сочетании с соединениями по настоящему изобретению, может быть эквивалентно описан как незамещенные линкеры, включающие малеимид, тиозамещенные линкеры, включающие сукцинимид, или гидролизованные, тиозамещенные, включающие сукцинимид линкеры с открытым циклом.
[0326] В определенных вариантах осуществления линкер по настоящему изобретению (L3) содержит стабилизирующий линкерный фрагмент, выбранный из:
.
[0327] В схеме, представленной выше, нижняя структура может упоминаться как (малеимидо)-DPR-Val-Cit-PAB, где DPR относится к диаминопропиноевой кислоте, Val относится к валину, Cit относится к цитруллину, а PAB относится к пара-аминобензилкарбонилу. представляет собой точку присоединения к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0328] Способ образования мостика пар сульфгидрильных групп, полученных в результате восстановления нативной шарнирной дисульфидной связи, раскрыт и изображен на схеме ниже. Преимуществом этого способа является способность синтезировать гомогенные конъюгаты DAR4 путем полного восстановления IgG (для получения 4 пар сульфгидрилов из дисульфидов межцепочечных цепей) с последующей реакцией с 4 эквивалентами алкилирующего агента. Конъюгаты, содержащие "мостиковые дисульфиды", также, как утверждается, имеют повышенную стабильность.
[0329] Аналогично, как показано ниже, было разработано производное малеимида, которое способно связывать пару сульфгидрильных групп.
[0330] Линкер по настоящему изобретению, L3, может содержать следующие структурные формулы (VIa), (VIb) или (VIc):
или их соли, где: Rq представляет собой H или -O-(CH2CH2O)11-CH3, х равно 0 или 1, у равно 0 или 1, G2 представляет собой CH2CH2CH2SO3H или –CH2CH2O-(CH2CH2O)11-CH3, Rw представляет собой -O-CH2CH2SO3H или –NH(CO)-CH2CH2O-(CH2CH2O)12-CH3, и * представляет точку присоединения к оставшейся части линкера.
[0331] Типичные варианты осуществления линкеров в соответствии со структурной формулой (VIa) и (VIb), которые могут быть включены в конъюгаты, описанные в настоящем документе, могут включать линкеры, представленные ниже (как показано, линкеры могут включать группу, подходящую для ковалентного связывания линкера с конструкцией на основе антитела):
,
где представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0332] Типичные варианты осуществления линкеров в соответствии со структурной формулой (VIc), которые могут быть включены в конъюгаты конструкции на основе антитела и бензазепинового соединения, описанные в настоящем документе, могут включать линкеры, представленные ниже (как показано, линкеры могут включать группу, подходящую для ковалентного связывания линкера с конструкцией на основе антитела):
,
где представляет собой точку присоединения линкера (L3) к соединению или соли по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC).
[0333] Как известно специалистам в данной области техники, на линкер, выбранный для конкретного конъюгата, могут влиять различные факторы, включая, но не ограничиваясь ими, сайт присоединения к конструкции на основе антитела (например, lys, cys или другие аминокислотные остатки), структурные ограничения фармакофора лекарственного средства и липофильность лекарственного средства. Конкретный линкер, выбранный для конъюгата, должен стремиться сбалансировать эти различные факторы для специфической комбинации конструкции на основе антитела/лекарственное средство.
[0334] Например, было обнаружено, что конъюгаты влияют на неспецифический цитолиз антиген-негативных клеток, присутствующих в непосредственной близости от антиген-позитивных опухолевых клеток. Механизм неспецифического цитолиза клеток конъюгатами показал, что могут играть роль метаболические продукты, образующиеся во время внутриклеточной обработки конъюгатов. Нейтральные цитотоксические метаболиты, образующиеся в результате метаболизма конъюгатов в антиген-позитивных клетках, по-видимому, играют роль в неспецифическом цитолизе клеток, в то время как можно предотвратить диффузию заряженных метаболитов через мембрану в среду или из среды через мембрану и, следовательно, они не смогут оказывать влияние на неспецифический цитолиз. В некоторых вариантах осуществления линкер выбран для ослабления эффекта неспецифического цитолиза, вызванного клеточными метаболитами конъюгата. В некоторых вариантах осуществления линкер выбран для увеличения эффекта неспецифического цитолиза.
[0335] Свойства линкера или линкер-соединения могут также влиять на агрегацию конъюгата в условиях применения и/или хранения. Как правило, конъюгаты, описанные в литературе, содержат не более 3-4 молекул лекарственного средства на молекулу антитела. Попытки получить более высокие соотношения между лекарственным средством и антителом ("DAR") часто оказывались неудачными, особенно если лекарственное средство и линкер были гидрофобными из-за агрегации конъюгата. Во многих случаях значения DAR выше 3-4 могут быть полезны в качестве средства повышения активности. В случаях, когда бензазепиновое соединение является более гидрофобным по природе, может быть желательно выбрать линкеры, которые являются относительно гидрофильными, в качестве средства уменьшения агрегации конъюгата, особенно в тех случаях, когда желательны значения DAR, превышающие 3-4. Таким образом, в определенных вариантах осуществления линкер включает химические фрагменты, которые уменьшают агрегацию конъюгатов во время хранения и/или применения. Линкер может включать полярные или гидрофильные группы, такие как заряженные группы или группы, которые становятся заряженными при физиологическом рН для уменьшения агрегации конъюгатов. Например, линкер может включать заряженные группы, такие как соли или группы, которые депротонируют, например, карбоксилаты или протонаты, например, амины, при физиологическом рН.
[0336] В конкретных вариантах осуществления агрегация конъюгатов во время хранения или применения составляет менее чем приблизительно 40%, как определено с помощью эксклюзионной хроматографии по размеру (SEC). В конкретных вариантах осуществления агрегация конъюгатов во время хранения или применения составляет менее 35%, например, менее приблизительно 30%, например, менее приблизительно 25%, например, менее приблизительно 20%, например, менее приблизительно 15%, например, менее приблизительно 10%, например, менее приблизительно 5%, например, менее приблизительно 4% или даже менее, как определено с помощью эксклюзионной хроматографии по размеру (SEC).
Присоединение линкеров к конструкции на основе антитела
[0337] Описанные в настоящем документе конъюгаты могут содержать линкер, например, расщепляемый линкер, такой как пептидный линкер или нерасщепляемый линкер. Линкеры конъюгатов и способы, описанные в настоящем документе, могут не влиять на связывание активных частей конъюгата (например, активные части включают антигенсвязывающие домены, Fc домены, мишень-связывающие домены, антитела, соединения или соли по настоящему изобретнию, например, формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) или (IIIC) или линкерные соединения формул (IVA), (IVB) или (IVC)) с мишенью, которая может быть родственным партнером по связыванию, например, антигеном. Линкерная последовательность может образовывать связь между различными частями конъюгата, например, между конструкцией на основе антитела и соединением или солью по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления конъюгат содержит множество линкеров. В определенных вариантах осуществления, где конъюгат содержит множество линкеров, линкеры могут быть одинаковыми линкерами или различными линкерами.
[0338] Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела посредством связи между конструкцией на основе антитела и линкером. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела против опухолевого антигена связью между конструкцией на основе антитела против опухолевого антигена и линкером. Линкер может быть связан с концом аминокислотной последовательности конструкции на основе антитела или может быть связан с модификацией боковой цепи в конструкции на основе антитела, такой как боковая цепь лизина, серина, треонина, цистеина, тирозина, аспарагиновой кислоты, глютамина, остатка аминокислоты, не встречающейся в природе, или остатка глутаминовой кислоты. Линкер может быть связан с концом аминокислотной последовательности Fc домена или Fc области конструкции на основе антитела, или может быть связан с модификацией боковой цепи Fc домена или Fc области конструкции на основе антитела, такой как боковая сторона цепь лизина, серина, треонина, цистеина, тирозина, аспарагиновой кислоты, глутамина, остатка аминокислоты, не встречающейся в природе, или остатка глутаминовой кислоты. Линкер может быть связан с концом аминокислотной последовательности Fc домена конструкции на основе антитела или может быть связан с модификацией боковой цепи Fc домена конструкции на основе антитела, такой как боковая цепь лизина, серина треонин, цистеин, тирозин, аспарагиновая кислота, глутамин, остатка аминокислоты, не встречающейся в природе, или остатка глутаминовой кислоты.
[0339] Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела в шарнире цистеина. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела в лизине константного домена легкой цепи. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела в лизине константного домена тяжелой цепи. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела по генно-инженерному цистеину в легкой цепи. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела в Fc области лизина. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела в Fc домена лизина. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела в Fc области цистеина. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела в Fc домене цистеина. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела с глютамином легкой цепи, таким как генно-инженерный глютамин. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела с глутамином тяжелой цепи, таким как генно-инженерный глютамин. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела по не встречающейся в природе аминокислоте, встроенной в легкую цепь. Линкер может быть связан с конструкцией на основе антитела по не встречающейся в природе аминокислоте, встроенной в тяжелую цепь. Аминокислоты могут быть встроены в аминокислотную последовательность конструкции на основе антитела, например, линкера конъюгата. Генно-инженерные аминокислоты могут быть добавлены к последовательности существующих аминокислот. Генно-инженерные аминокислоты могут быть заменены одной или более существующими аминокислотами последовательности аминокислот.
[0340] Линкер может быть конъюгирован с конструкцией на основе антитела через сульфгидрильную группу на конструкции на основе антитела. Линкер может быть конъюгирован с конструкцией на основе антитела через первичный амин на конструкции на основе антитела. Линкер может быть конъюгирован с конструкцией на основе антитела через остаток не встречающейся в природе аминокислоты на конструкции на основе антитела, например, кетоновый фрагмент.
[0341] Когда один или более линкеров связаны с конструкцией на основе антитела в сайтах, описанных в настоящем документе, Fc домен конструкции на основе антитела может связываться с Fc рецепторами. В определенных вариантах осуществления конструкция на основе антитела, связанная через линкер, или конструкция на основе антитела, связанная с линкером, связанным с соединением или солью по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) или (IIIC) или связанным через соединение-линкер формул (IVA), (IVB) или (IVC), сохраняет способность Fc домена антитела связывать Fc рецепторы. В определенных вариантах осуществления, когда линкер связан с конструкцией на основе антитела в сайтах, описанных в настоящем документе, антигенсвязывающий домен конструкции на основе антитела, связанный с линкером, или конструкция на основе антитела, связанная через линкер, связан с соединением или солью по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB) или (IIIC) или связан через соединение-линкер формул (IVA), (IVB) или (IVC) может связывать свой антиген. В некоторых вариантах осуществления, когда линкер связан с конструкцией на основе антитела в сайтах, описанных в настоящем документе, мишень-связывающий домен конструкции на основе антитела, связанный с линкером, или конструкция на основе антитела, связанная с линкером, связанным с соединением или солью по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (II) IC), (IVA), (IVB) или (IVC) может связывать свой антиген.
[0342] В определенных вариантах осуществления соединение или соединение-линкер по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), раскрытые в данном документе, присоединены к Fc области или домену антитела по генно-инженерному остатку цистеина. В некоторых вариантах осуществления генно-инженерный остаток цистеина находится в одном или более положениях HC S239C, LC V205C, LC A114C, HC A140C, LC K149C, LC S168C, LC S153C, LC A127C, HC T116C и HC S115C, где HC относится к тяжелой цепи, LC относится к легкой цепи, а нумерация аминокислотных остатков в Fc области соответствует индексу ЕС, как по Кабату. В определенных вариантах осуществления соединение или соединение-линкер по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), раскрытые в данном документе, могут не быть присоедины к аминокислотному остатку Fc домена IgG, раскрытого в данном документе, выбранного из: 221, 222, 224, 227, 228, 230, 231, 223, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 243, 244, 245, 246, 247, 249, 250, 258, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 278, 280, 281, 283, 285, 286, 288, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 302, 305, 313, 317, 318, 320, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335 336, 396, 428 или любого их подмножества, где нумерация аминокислотных остатков в Fc домене соответствует индексу ЕС, как по Кабату.
Биоконъюгация на основе лизина
[0343] Конструкция на основе антитела может быть конъюгирована с линкером посредством биоконъюгации на основе лизина. Конструкция на основе антитела может быть перемещена в подходящий буфер, например, фосфат, борат, PBS, трис-ацетат, трис-глицин, HEPES, MOPS, MES, EPS, HEPPS, гистидин или HEPBS в концентрации от приблизительно 2 мг/мл до приблизительно 10 мг/мл. Соответствующее количество эквивалентов соединения-линкера, например, соединения или соли формулы (IVA), (IVB) или (IVC), описанных в настоящем документе, может быть добавлено в виде раствора при перемешивании. В зависимости от физических свойств бензазепин-линкерной конструкции, перед добавлением бензазепин-линкерной конструкции может быть введен сорастворитель для облегчения растворимости. Реакционную смесь можно перемешивать при комнатной температуре в течение от 2 до 12 часов в зависимости от наблюдаемой реакционной способности. Ход реакции можно отслеживать с помощью ЖХ-МС. Как только реакция считается завершенной, оставшиеся бензазепин-линкерные конструкции могут быть удалены применимыми способами, и конъюгат бензазепина и конструкции на основе антитела может быть перемещен в желаемую буферную смесь. Связанные с лизином конъюгаты могут быть получены, начиная с антитела (mAb) или биспецифического антитела (bsAb) и конструкции бензазепин-линкер, например, 10 эквивалентов, следуя схеме А, приведенной ниже (конъюгат = конъюгат конструкции на основе антитела и бензазепина). Содержание мономера и соотношения конструкции на основе антитела и бензазепина (молярные соотношения) могут быть определены способами, описанными в настоящем документе.
Схема А:
Биоконъюгация на основе цистеина
[0344] Конструкция на основе антитела может быть конъюгирована с линкером посредством биоконъюгации на основе цистеина. Конструкция на основе антитела может быть перемещена в подходящий буфер, например, фосфат, борат, PBS, трис-ацетат, трис-глицин, HEPES, MOPS, MES, EPS, HEPPS, гистидин или HEPBS в концентрации от приблизительно 2 мг/мл до примерно 10 мг/мл с соответствующим количеством эквивалентов восстановителя, например, дитиотреитола или трис(2-карбоксиэтил)фосфина. Полученный раствор можно перемешивать в течение соответствующего времени и температуры для достижения желаемого снижения. Соединение-линкер, например, соединение или соль формулы (IVA), (IVB) или (IVC), описанные в настоящем документе, могут быть добавлены в виде раствора при перемешивании. В зависимости от физических свойств бензазепин-линкерной конструкции, перед добавлением бензазепин-линкерной конструкции может быть введен сорастворитель для облегчения растворимости. Реакционную смесь можно перемешивать при комнатной температуре в течение от приблизительно 1 часа до приблизительно 12 часов в зависимости от наблюдаемой реакционной способности. Ход реакции можно контролировать с помощью жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Как только реакция считается завершенной, оставшаяся свободная бензазепин-линкерная конструкция может быть удалена применимыми способами, и конъюгат бензазепина и конструкции на основе антитела может быть перемещен в желаемую буферную смесь. Такие конъюгаты на основе цистеина могут быть получены, исходя из конструкции на основе антитела (mAb) и бензазепина-линкера, например, 7 эквивалентов, с применением условий, описанных на схеме B ниже (конъюгат = конструкция антитела-конъюгат бензазепинового соединения). Содержание мономера и соотношения лекарственного средства и антитела могут быть определены способами, описанными в настоящем документе.
Схема B:
Фармацевтические композиции
[0345] Композиции, конъюгаты и способы, описанные в настоящем документе, можно считать применимыми в качестве фармацевтических композиций для введения субъекту, нуждающемуся в этом. Фармацевтические композиции могут содержать по меньшей мере соединения, соли или конъюгаты, описанные в настоящем документе, и один или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей, эксципиентов, стабилизаторов, диспергирующих агентов, суспендирующих агентов и/или загустителей. Композиция может содержать конъюгат, имеющий конструкцию на основе антитела, и соединение или соль по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC) соединенные через линкер, как описано в настоящем документе. Композиция может содержать конъюгат, имеющий конструкцию на основе антитела, мишень-связывающий домен и соединение или соль по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC), соединенные через линкер. Композиция может содержать любой конъюгат, описанный в настоящем документе. Конструкция антитела может представлять собой антитело против CD40. Конъюгат может содержать антитело против CD40 и бензазепин. Конъюгат может содержать антитело против HER2 и бензазепин. Конъюгат может содержать антитело против TROP2 и бензазепин. Фармацевтическая композиция может содержать по меньшей мере соединения, соли или конъюгаты, описанные в настоящем документе, и один или более буферов, антибиотиков, стероидов, углеводов, лекарственных средств (например, лекарственные средства для химиотерапии), радиации, полипептидов, хелаторов, адъювантов и/или консервантов.
[0346] Фармацевтические композиции могут быть получены с применением одного или более физиологически приемлемых носителей, включающих эксципиенты и вспомогательные вещества. Состав может быть изменен в зависимости от выбранного пути введения. Фармацевтические композиции, содержащие соединение, соль или конъюгат по настоящему изобретению, могут быть получены, например, путем лиофилизации соединения, соли или конъюгата, смешивания, растворения, эмульгирования, инкапсулирования или захвата конъюгата. Фармацевтические композиции могут также включать соединения, соли или конъюгаты, описанные в настоящем документе, в форме свободного основания или в форме фармацевтически приемлемой соли.
[0347] Способы получения конъюгатов, описанных в настоящем документе, могут включать получение любого из соединений, солей или конъюгатов, описанных в настоящем документе, с одним или более инертными фармацевтически приемлемыми эксципиентами или носителями для образования твердой, полутвердой или жидкой композиции. Твердые композиции могут включать, например, порошки, таблетки, диспергируемые гранулы и капсулы, и в некоторых аспектах твердые композиции дополнительно содержат нетоксичные вспомогательные вещества, например, смачивающие или эмульгирующие агенты, буферные рН-агенты и другие фармацевтически приемлемые добавки. Альтернативно, соединения, соли или конъюгаты, описанные в данном документе, могут быть лиофилизированы или находиться в форме порошка для восстановления перед применением подходящим носителем, например, стерильной апирогенной водой.
[0348] Фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, могут содержать по меньшей мере один активный ингредиент (например, соединение, соль или конъюгат). Активные ингредиенты могут быть захвачены в микрокапсулы, полученные, например, способами коацервации или межфазной полимеризацией (например, микрокапсулы гидроксиметилцеллюлозы или желатина и поли-(метилметацилат) микрокапсулы, соответственно), в коллоидных системах доставки лекарств (например, липосомы, альбуминовые микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсиях.
[0349] Фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, часто дополнительно могут содержать более одного активного соединения (например, соединение, соль или конъюгат и другие агенты), как необходимо для конкретного показания, подлежащего лечению. Активные соединения могут обладать дополнительными активностями, которые не оказывают отрицательного влияния друг на друга. Например, композиция может также содержать химиотерапевтический агент, цитотоксический агент, цитокин, ингибитор роста, антигормональный агент, антиангиогенный агент и/или кардиопротектор. Такие молекулы могут присутствовать в комбинации в количествах, которые эффективны для предполагаемого назначения.
[0350] Композиции и составы могут быть стерилизованы. Стерилизация может быть выполнена фильтрацией путем стерильной фильтрации.
[0351] Композиции, описанные в настоящем документе, могут быть получены для введения в виде инъекций. Неограничивающие примеры композиций для инъекций могут включать стерильную суспензию, раствор или эмульсию в масляных или водных носителях. Подходящие масляные носители могут включать, но не ограничиваются ими, липофильные растворители или носители, такие как жирные масла или синтетические сложные эфиры жирных кислот или липосомы. Водные инъекционные суспензии могут содержать вещества, которые увеличивают вязкость суспензии. Суспензия также может содержать подходящие стабилизаторы. Инъекции могут быть получены для струйного введения или непрерывной инфузии. Альтернативно, композиции, описанные в настоящем документе, могут быть лиофилизированы или находятся в форме порошка для разведения перед применением подходящим носителем, например, стерильной апирогенной водой.
[0352] Для парентерального введения, соединения, соли или конъюгаты могут быть получены в форме для инъекций в однократной дозировке (например, применять раствор, суспензию, эмульсию) в сочетании с фармацевтически приемлемым парентеральным носителем. Такие носители могут быть по своей природе нетоксичными и нетерапевтическими. Носителями могут быть вода, солевой раствор, раствор Рингера, раствор декстрозы и 5% сывороточный альбумин человека. Неводные носители, такие как жирные масла и этилолеат, также можно применять. Липосомы могут быть применены в качестве носителей. Носитель может содержать незначительные количества добавок, таких как вещества, которые повышают изотоничность и химическую стабильность (например, буферы и консерванты).
[0353] Также могут быть получены композиции с замедленным высвобождением. Примеры композиций с замедленным высвобождением могут включать полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобных полимеров, которые могут содержать соединение, соль или конъюгат, и эти матрицы могут быть в форме определенных изделий (например, пленок или микрокапсул). Примеры матриц с замедленным высвобождением могут включать сложные полиэфиры, гидрогели (например, поли(2-гидроксиэтилметакрилат) или поли(виниловый спирт)), полилактиды, сополимеры L-глутаминовой кислоты и γ-этил-L-глутамата, не разлагаемые сополимеры этилена и винилацетата, разлагаемые сополимеры молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPO™ (то есть инъецируемые микросферы, состоящие из сополимера молочной кислоты и гликолевой кислоты и ацетата лейпролида) и поли-D-(-)-3-гидроксибутириновой кислоты.
[0354] Фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, могут быть получены для хранения путем смешивания соединения, соли или конъюгата с фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом и/или стабилизатором. Эта композиция может представлять собой лиофилизированную композицию или водный раствор. Приемлемые носители, эксципиенты и/или стабилизаторы могут быть нетоксичными для реципиентов в применяемых дозировках и концентрациях. Приемлемые носители, эксципиенты и/или стабилизаторы могут включать буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты, антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин, консерванты, полипептиды, белки, такие как сывороточный альбумин или желатин, гидрофильные полимеры, аминокислоты, моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины, хелатообразующие агенты, такие как ЭДТА, сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит, солеобразующие противоионы, такие как натрий, комплексы металлов, и/или неионные поверхностно-активные вещества или полиэтиленгликоль.
[0355] Фармацевтические композиции конъюгатов, описанных в настоящем документе, могут иметь среднее соотношение между лекарственным средством и антителом ("DAR"), выбранное от приблизительно 1 до приблизительно 10, где лекарственное средство представляет собой соединение или соль по любой из формул (IA), (IB), (IC), (IIA), (IIB), (IIC), (IIIA), (IIIB), (IIIC), (IVA), (IVB) или (IVC). В определенных вариантах осуществления средний DAR композиции составляет от приблизительно 2 до приблизительно 8, например, от приблизительно 3 до приблизительно 8, например, от приблизительно 3 до приблизительно 7. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет средний DAR приблизительно 3, приблизительно 3,5, приблизительно 4, приблизительно 4,5, приблизительно 5, приблизительно 5,5, приблизительно 6 или приблизительно 6,6.
Терапевтические применения
[0356] Композиции, конъюгаты и способы по настоящему изобретению могут быть полезны для множества различных субъектов, включая, но не ограничиваясь ими, млекопитающее, человек, отличное от человека млекопитающее, домашнее животное (например, лабораторные животные, домашние животные или домашний скот), не одомашненное животное (например, дикая природа), собака, кошка, грызун, мышь, хомяк, корова, птица, курица, рыба, свинья, лошадь, коза, овца, кролик и любая их комбинация.
[0357] Композиции, конъюгаты и способы, описанные в настоящем документе, могут быть полезны в качестве терапевтического средства, например, лечения, которое может быть назначено субъекту, нуждающемуся в этом. Терапевтический эффект настоящего раскрытия может быть достигнут у субъекта путем уменьшения, подавления, ремиссии или устранения болезненного состояния, включая, но не ограничиваясь этим, его симптом. Терапевтический эффект у субъекта, имеющего заболевание или состояние, или предрасположенного к тому, чтобы иметь или начинает проявлять заболевание или состояние, может быть достигнут путем уменьшения, подавления, предотвращения, ремиссии или устранения состояния, или заболевание, или предварительное состояние или состояние до заболевания.
[0358] При осуществлении способов, описанных в настоящем документе, терапевтически эффективные количества композиций и конъюгатов, описанных в настоящем документе, можно вводить субъекту, нуждающемуся в этом, часто для лечения и/или предотвращения состояния или его прогрессирования. Фармацевтическая композиция может влиять на физиологию субъекта, такую как иммунная система, воспалительный ответ или другое физиологическое воздействие. Терапевтически эффективное количество может варьироваться в зависимости от тяжести заболевания, возраста и относительного состояния здоровья субъекта, активности применяемых соединений и других факторов.
[0359] Лечить и/или лечение может относиться к любым признакам успеха в лечении или ослаблении заболевания, или состояния. Лечение может включать, например, уменьшение, задержку или облегчение тяжести одного или более симптомов заболевания или состояния, или оно может включать уменьшение частоты появления симптомов заболевания, дефекта, расстройства или неблагоприятного состояния и т.п., перенесенного пациентом. Термин "лечение" может применяться в настоящем документе для обозначения способа, который приводит к некоторому уровню лечения или улучшения заболевания, или состояния и может предусматривать ряд результатов, направленных на достижение этой цели, в том числе, но не ограничиваясь только профилактикой заболевания.
[0360] Предотвращение, профилактика и тому подобное могут относиться к профилактике заболевания или состояния, например, образования опухоли, у пациента. Например, если индивидуум, подверженный риску развития опухоли или другой формы рака, проходит лечение способами по настоящему изобретению и у него позднее не развивает опухоль или другая форма рака, то заболевание предотвращается, по меньшей мере, на больший период времени для данного индивидуума. Профилактика также может относиться к предотвращению повторного возникновения заболевания или состояния у пациента, который ранее лечился от заболевания или состояния, например, путем предотвращения рецидива.
[0361] Терапевтически эффективным количеством может быть количество композиции или ее активного компонента, достаточное для обеспечения полезного эффекта или иного уменьшения вредного неблагоприятного события для индивидуума, которому вводят композицию. Терапевтически эффективной дозой может быть доза, которая вызывает один или более желательных, или желаемых (например, полезных) эффектов, в отношении которых ее вводят, причем такое введение происходит один или более раз в течение определенного периода времени. Точная доза может зависеть от цели лечения и может быть установлена специалистом в данной области техники с применением известных способов.
[0362] Описанные в настоящем документе конъюгаты, которые можно применять в терапии, могут быть получены и дозировки установлены в соответствии с надлежащей медицинской практикой, принимая во внимание заболевание или состояние, подлежащее лечению, состояние отдельного пациента, место доставки композиции, способ введения и другие факторы, известные практикующим врачам. Композиции, описанные в настоящем документе, могут быть получены в соответствии с описанием препарата, описанным в настоящем документе.
[0363] Фармацевтические композиции могут быть применены в способах, описанных в настоящем документе, и могут вводиться нуждающемуся в этом субъекту с применением способа, известного специалисту в данной области техники, которая может быть подходящей в качестве терапии для заболевания или состояния, поражающего субъекта. Специалисту в данной области техники будет понятно, что количество, продолжительность и частота введения фармацевтической композиции, описанной в настоящем документе, субъекту, нуждающемуся в этом, зависит от множества факторов, включая, например, но не ограничиваясь ими, здоровье субъекта, конкретное заболевание или состояние пациента, степень или уровень конкретного заболевания или состояния пациента, дополнительные терапевтические средства, которые субъекту вводят или вводили, и тому подобное.
[0364] Способы и композиции, описанные в настоящем документе, могут быть введены субъекту, нуждающемуся в этом. Часто введение композиций, описанных в настоящем документе, может включать пути введения, неограничивающие примеры путей введения включают внутривенное, внутриартериальное, подкожное, субдуральное, внутримышечное, внутричерепное, интрастернальное, внутриопухолевое или внутрибрюшинное. Кроме того, фармацевтическую композицию можно вводить субъекту дополнительными путями введения, например, путем ингаляции, перорального, дермального, интраназального или интратекального введения.
[0365] Композиции и конъюгаты по настоящему изобретению можно вводить субъекту, нуждающемуся в этом, при первом введении и при одном или более дополнительных введениях. Одно или более дополнительных введений могут быть сделаны субъекту, нуждающемуся в этом, через минуты, часы, дни, недели или месяцы после первого введения. Любое из дополнительных введений может быть сделано субъекту, нуждающемуся в этом, менее чем через 21 день или менее 14 дней, менее 10 дней, менее 7 дней, менее 4 дней или менее 1 дня после первого введения. Одно или более введений можно проводить более одного раза в день, более одного раза в неделю или более одного раза в месяц. Введения могут быть еженедельными, раз в две недели (каждые две недели), каждые три недели, ежемесячно или раз в два месяца.
[0366] Композиции, конъюгаты и способы, обеспеченные в настоящем изобретении, могут быть полезны для лечения множества заболеваний, состояний, предотвращения заболевания или состояния у субъекта или других терапевтических применений для субъектов, нуждающихся в этом. Часто композиции, конъюгаты и способы, обеспеченные в настоящем изобретении, могут быть полезны для лечения гиперпластических состояний, включая, но не ограничиваясь ими, новообразования, рак, опухоли и тому подобное. Композиции, конъюгаты и способы, обеспеченные в настоящем документе, могут быть полезны для специфического нацеливания на TLR8. В одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению служат в качестве агонистов TLR8 и активируют иммунный ответ. В другом варианте осуществления конъюгаты по настоящему изобретению служат агонистами TLR8 и активируют иммунный ответ. Состояние, такое как рак, может быть связано с экспрессией молекулы на раковых клетках. Часто молекула, экспрессируемая раковыми клетками, может содержать внеклеточную часть, способную распознавать конструкцию на основе антитела конъюгата. Молекула, экспрессируемая раковыми клетками может представлять собой опухолевый антиген. Часть конъюгата, представляющая собой конструкцию на основе антитела, может распознавать опухолевый антиген. Опухолевый антиген может включать CD5, CD19, CD20, CD25, CD37, CD30, CD33, CD40, CD45, CAMPATH-1, BCMA, CS-1, PD-L1, B7-H3, B7-DC, HLD-DR, карциноэмбриональный антиген (CEA), TAG-72, EpCAM, MUC1, фолат-связывающий белок, A33, G250, простат-специфический мембранный антиген (PMSA), ферритин, GD2, GD3, GM2, Ley, CA-125, CA19-9, эпидермальный фактор роста, p185HER2, рецептор IL-2, EGFRvIII (de2-7 EGFR), белок активации фибробластов, тенасцин, металлопротеиназа, эндосиалин, фактор роста эндотелия сосудов, avB3, WT1, LMP2, HPV E6, HPV E7, Her-2/neu, MAGE A3, не мутантный p53, NY-ESO-1, MelanA/MART1, мутантный Ras, gp100, мутантный p53, PR1, bcr-abl, тиронсиназа, сурвивин, PSA, hTERT, белок с точками разрыва при транслокации при саркоме, EphA2, PAP, ML-IAP, AFP, ERG, NA17, PAX3, ALK, рецептор андрогена, циклин B1, полисиаловая кислота, MYCN, RhoC, TRP-2, фукозил GM1, мезотелин (MSLN), PSCA, MAGE A1, sLe (животное), CYP1B1 , PLAV1, GM3, BORIS, Tn, GloboH, ETV6-AML, NY-BR-1, RGS5, SART3, STn, карбоангидраза IX, PAX5, OY-TES1, белок спермиев 17, LCK, HMWMAA, AKAP-4, SSX2, XAGE 1, Legumain, Tie 3, VEGFR2, MAD-CT-1, PDGFR-B, MAD-CT-2, ROR2, TRAIL1, MUC16, MAGE A4, MAGE C2, GAGE, EGFR, CMET, HER3, MUC15, CA6, NAPI2B, TROP2, CLDN6, CLDN16, CLDN18.2, CLorf186, RON, LY6E, FRA, DLL3, PTK7, STRA6, TMPRSS3, TMPRSS4, TMEM238, UPK1B, VTCN1, LIV1, ROR1 или Fos-связанный антиген 1.
[0367] Как описано в настоящем документе, часть антигенсвязывающего домена конъюгата может быть сконфигурирована для распознавания молекулы, экспрессируемой раковой клеткой, такой как, например, антиген заболевания, антиген опухоли или антиген рака. Часто такие антигены известны специалистам в данной области техники или недавно обнаружено, что они связаны с таким состоянием, обычно ассоциируются и/или специфичны для таких состояний. Например, антиген заболевания, опухолевый антиген или раковый антиген представляет собой, но не ограничивается ими, CD5, CD19, CD20, CD25, CD37, CD30, CD33, CD40, CD45, CAMPATH-1, BCMA, CS-1, PD-L1, B7-H3, B7-DC, HLD-DR, карциноэмбриональный антиген (CEA), TAG-72, EpCAM, MUC1, фолат-связывающий белок, A33, G250, простат-специфический мембранный антиген (PSMA), ферритин, GD2 , GD3, GM2, Ley, CA-125, CA19-9, эпидермальный фактор роста, p185HER2, рецептор IL-2, EGFRVIII (de2-7 EGFR), белок активации фибробластов, тенасцин, металлопротеиназа, эндосиалин, сосудистый эндотелиальный фактор роста, avB3, WT1, LMP2, HPV E6, HPV E7, Her-2/neu, MAGE A3, не мутантный p53, NY-ESO-1, MelanA/MART1, мутантный Ras, gp100, мутантный p53, PR1, bcr-abl, тирозиназа, сурвивин, PSA, hTERT, белок с точками разрыва при транслокации при саркоме, EphA2, PAP, ML-IAP, AFP, ERG, NA17, PAX3, ALK, рецептор андрогена, циклин B1, полисиаловая кислота, MYCN, RhoC, TRP-2, фукозил GM1, мезотелин (MSLN), PSCA, MAGE A1, sLe (животное), CYP1B1, PLAV1, GM3, BORIS, Tn, GloboH, ETV6-AML, NY-BR-1, RGS5, SART3, STn, карбоангидраза IX, PAX5, OY-TES1, белок спермиев 17, LCK, HMWMAA, AKAP-4, SSX2, XAGE 1, Legumain, Tie 3, VEGFR2, MAD-CT-1, PDGFR-B, MAD-CT-2, ROR2, TRAIL1, MUC16, MAGE A4, MAGE C2, GAGE, EGFR, CMET, HER3, MUC15, CA6, NAPI2B, TROP2, CLDN6, CLDN16, CLDN18.2, CLorf186, RON, LY6E, FRA, DLL3, PTK7, STRA6, TMPRSS3, TMPRSS4, TMEM238, UPK1B, VTCN1, LIV1, ROR1 или Fos-связанный антиген 1. Кроме того, такие опухолевые антигены могут быть получены из следующих конкретных условий и/или семейств состояний, включая, но не ограничиваясь ими, рак, такой как рак головного мозга, рак кожи, лимфомы, саркомы, рак легких, рак печени, лейкемии, рак матки, рак молочной железы, рак яичников, рак шейки матки, рак мочевого пузыря, рак почки, гемангиосаркомы, рак костей, рак крови, рак яичка, рак простаты, рак желудка, рак кишечника, рак поджелудочной железы и другие виды рака, а также предраковые состояния, такие как гиперплазия или тому подобное.
[0368] Неограничивающие примеры рака могут включать острый лимфобластный лейкоз (ALL), Острый миелоидный лейкоз, адренокортикальная карцинома, детская церебеллярная или церебральная астроцитома, базально-клеточная карцинома, рак мочевого пузыря, опухоль костей, остеосаркома/злокачественная фиброзная гистиоцитома, рак мозга, опухоли головного мозга, такие как церебеллярная астроцитома, злокачественная глиома, эпендимома, медуллобластома, глиома зрительного пути и глиома гипоталамуса, глиома ствола мозга, рак молочной железы, бронхиальные аденомы/карциноиды, лимфома Беркитта, церебеллярная астроцитома, рак шейки матки, холангиокарцинома, хондросаркома, хронический лимфолейкоз, хронический миелогенный лейкоз, хронические миелопролиферативные нарушения, рак толстой кишки, кожная Т-клеточная лимфома, рак эндометрия, эпендимома, рак пищевода, рак глаза, такой как внутриглазная меланома и ретинобластома, рак желчного пузыря, глиома, волосатоклеточный лейкоз, рак головы и шеи, рак сердца, гепатоцеллюлярный (печеночный) рак, лимфома Ходжкина, гипофарингеальный рак, островковая клеточная карцинома (эндокринная поджелудочная железа), саркома Капоши, рак почки (почечно-клеточный рак), рак гортани, лейкоз, такой как, острый лимфобластный, острый миелоидный, хронический лимфоцитарный, хронический миелогенный и волосатоклеточный, рак губ и полости рта, липосаркома, рак легких, такой как немелкоклеточный и мелкоклеточный, лимфома, такая как, связанная со спидом, Беркитта, лимфома, кожная Т-клеточная, ходжкинская и неходжкинская, макроглобулинемия, злокачественная фиброзная гистиоцитома кости/остеосаркома, меланома, рак из клеток Меркеля, мезотелиомы, множественная миелома/новообразование плазмы, грибовидный микоз, миелодиспластические синдромы, миелодиспластические/миелопролиферативные заболевания, миелопролиферативные нарушения, хронические, рак полости носа и околоносовых пазух, рак носоглотки, нейробластома, олигодендроглиома, рак ротоглотки, остеосаркома/злокачественная фиброзная гистиоцитома кости, рак яичников, рак поджелудочной железы, рак паращитовидной железы, рак глотки, феохромоцитома, аденома гипофиза, неоплазия плазматических клеток, плевропульмональная бластома, рак простаты, рак прямой кишки, почечно-клеточный рак (рак почки), переходно-клеточный рак почечной лоханки и мочеточника, рабдомиосаркома, рак слюнных желез, семейство опухолей саркомы Юинга, саркома Капоши, саркома мягких тканей, саркома матки, ретикулез Сезари, рак кожи (немеланома), карцинома кожи, рак тонкой кишки, саркома мягких тканей, плоскоклеточный рак, плоскоклеточный рак шеи, первично скрытая, метастатическая, рак желудка, рак яичек, рак горла, тимома и карцинома тимуса, тимома, рак щитовидной железы, рак щитовидной железы у детей, рак матки, рак влагалища, макроглобулинемия Вальденстрема, опухоль Вильмса и любая их комбинация.
[0369] Настоящее изобретение обеспечивает любое терапевтическое соединение или конъюгат, раскрытые в данном документе, для применения в способе лечения организма человека или животного посредством терапии. Терапия может осуществляться любым способом, раскрытым в данном описании, например, стимуляцией иммунной системы. Изобретение относится к любому терапевтическому соединению или конъюгату, раскрытому в настоящем описании, для применения в стимуляции иммунной системы, вакцинации или иммунотерапии, включая, например, усиление иммунного ответа. Изобретение, кроме того, относится к любому терапевтическому соединению или конъюгату, раскрытому в настоящем документе, для профилактики или лечения любого состояния, раскрытого в настоящем документе, например, рака, аутоиммунного заболевания, воспаления, сепсиса, аллергии, астмы, отторжения трансплантата, болезни "трансплантат против хозяина", иммунодефицита или инфекционного заболевания. (как правило, вызвано инфекционным патогеном). Изобретение также обеспечивает любое терапевтическое соединение или конъюгат, раскрытые в данном документе, для получения любого клинического исхода, раскрытого в данном документе, для любого состояния, раскрытого в данном документе, такого как уменьшение опухолевых клеток in vivo. Изобретение также обеспечивает применение любого терапевтического соединения или конъюгата, раскрытого в настоящем документе, при получении лекарственного средства для предотвращения или лечения любого состояния, раскрытого в данном документе.
Общие схемы получения и примеры
[0370] Следующие схемы получения предоставлены в целях иллюстрации, а не ограничения. Следующие примеры иллюстрируют различные способы получения соединений, описанных в настоящем документе. Понятно, что специалист в данной области техники может получить эти соединения аналогичными способами или сочетанием других способов, известных специалисту в данной области. Понятно также, что специалист в данной области техники сможет получить их способом, подобным описанному ниже, применяя соответствующие исходные материалы и изменяя путь получения по мере необходимости. В общем, исходные материалы и реагенты могут быть получены от коммерческих поставщиков или синтезированы в соответствии с источниками, известными специалистам в данной области техники, или получены, как описано в настоящем документе.
Схема 1
Получение С-8 карбоксамида
[0371] Реакция альдегида (i) с соответствующим реагентом Виттига, таким как трет-бутил 3-циано-2-(трифенилфосфорилиден)пропаноат, при повышенных температурах с образованием олефина (ii), который подвергается восстановительной циклизации путем обработки олефина (ii) с восстановителем, таким как железный порошок в горячей уксусной кислоте для получения азепинов (iii). Снятие защиты со сложноэфирной группы C-4, с применением сильной кислоты, такой как HCl с получением соединений (iv), которые, в свою очередь, связываются с замещенным амином, с применением связующего агента, такого как BOP-реагент. Защита 2-амино-заместителя соединения (v) трет-бутоксикарбонильной группой. Гидролиз полученных соединений (vi) реагентами, такими как LiOH, в смеси ТГФ и метанола для получения соединения (vii). Преобразование C-8 карбоновой кислоты (vii) в амидную группу с применением известных реагентов, таких как HBTU и основание третичного амина. Опосредованное кислотой снятие защиты с соединений (viii) с применением реагента, такого как ТФУ, в дихлорметане обеспечивает целевые соединения (ix).
Схема 2
Альтернативное получение С-8 карбоксамидов
[0372] Реакция (i) в стандартных условиях, применяемых для карбонилирования арилгалогенидов, таких как монооксид углерода, палладиевый катализатор, такой как Pd(OAc)2, и лиганд, такой как 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен (XantPhos) и основание, такое как фосфат калия, в смеси ТГФ и воды для получения карбоновых кислот (ii). Преобразование в конечные продукты может быть затем выполнено способом, аналогичным в соответствии с описанным на схеме 1 (vii → ix).
Схема 3
Получение аналогов амина С-8
[0373] Взаимодействуют альдегид (i) с соответствующим реагентом Виттига, таким как этил 3-циано-2-(трифенилфосфорилиден)пропаноат, при температуре окружающей среды с получением олефина (ii), который подвергается восстановительной циклизации путем обработки олефина (ii) с помощью восстановителя, такого как порошок железа в горячей уксусной кислоте, с получением азепинов (iii). Защита аминной группы С-2, с применением Boc-ангидрида с получением соединения (iii), которое, в свою очередь, омыляют гидроксидом щелочного металла, таким как LiOH, с получением карбоновой кислоты, которая связана с замещенным амином, с применением агента сочетания, такого как BOP реагент для обеспечения соединений (iv). Преобразование C-8 карбоновой кислоты (v) в амидную группу, применяя известные реагенты, такие как EDCI/HOBT и основание третичного амина. Галоген-аминный обмен может быть осуществлен с применением стандартного способа, такого как опосредованные медью или катализируемые палладием реакции сочетания (бензофенон-имин / Pd(II)), для получения анилинов C-8 (vi). Функционализация аминов (vi) ацилированием или сульфонилированием дает соединения анилидов (X=C) или сульфонамидов (X=SO) (vii). Альтернативно, соединения (vii) могут быть получены напрямую посредством опосредованной палладием реакции сочетания бромида (v) и соответственно замещенного амида или сульфонамида. Опосредованное кислотой снятие защиты с соединений (vii) с применением такого реагента, как ТФУ, в дихлорметане проиводит к получению целевых соединений (viii).
Схема 4
Получение аналогов серы С-8
[0374] Реакция (i) с бензилтиолом в присутствии палладиевого катализатора, такого как Pd2(dba)3, и лиганда, такого как XantPhos, при повышенных температурах с образованием сульфидов C-8 (ii). Окислительное хлорирование сульфидов (ii) с помощью реагента, такого как 1,3-дихлор-5,5-диметилгидантоин (DCDMH), дает промежуточные сульфонилхлориды, которые могут реагировать с соответствующим образом замещенным амином структуры R'''NH2 с образованием сульфонамидов (iii). Опосредованное кислотой снятие защиты с соединений (iii) с применением реагента, такого как ТФУ, в дихлорметане проиводит к получению целевых соединений (iv).
Схема 5
Получение линкер-нагрузки
Линкер-нагрузка (LP) может быть синтезирован различными способами. Например, соединения LP могут быть синтезированы, как показано на схеме 5-1.
Схема 5-1:
[0375] Пегилированная карбоновая кислота (i), активированная для образования амидной связи, может реагировать с соответствующим замещенным аминосодержащим иммуностимулирующим соединением с получением промежуточного амида. Образование активированного сложного эфира (ii) может быть достигнуто путем реакции промежуточного амидсодержащего карбонового соединения с применением реагента, такого как N-гидроксисукцинимид или пентафторфенол, в присутствии связующего агента, такого как диизопропилкарбодиимид (DIC), с получением соединений (ii).
[0377] LP может быть получен, как показано на схеме 5-2.
Схема 5-2:
[0378] Активированный карбонат, такой как (i), может реагировать с соответствующим замещенным аминосодержащим иммуностимулирующим соединением с образованием карбаматов (ii), с которых можно снять защиту стандартными способами, основанными на природе сложноэфирной группы R3. Полученная карбоновая кислота (iii) может затем соединяться с активирующим агентом, таким как N-гидроксисукцинимид или пентафторфенол, для получения соединений (iv).
[0379] Соединение LP может быть синтезировано, как показано на схеме 5-3.
Схема 5-3:
[0380] Активированный сложный эфир карбоновой кислоты, такой как (i-a), может взаимодействовать с соответствующим замещенным аминосодержащим иммуномодулирующим соединением с образованием амидов (ii). Альтернативно, карбоновые кислоты типа (i-b) могут быть связаны с соответствующим замещенным аминосодержащим иммуностимулирующим соединением в присутствии агента, образующего амидную связь, такого как дициклогексикарбодиимд (DCC), для получения желаемого LP.
[0381] Соединение LP может быть получено различными способами, такими как показано на схеме 5-4.
Схема 5-4:
[0382] Активированный карбонат, такой как (i), может реагировать с соответствующим замещенным аминосодержащим иммуностимулирующим соединением, с получением карбаматов (ii) в качестве мишени ISC.
[0383] Соединение LP также можно получить, как показано на схеме 5-5.
Схема 5-5:
[0384] Активированная карбоновая кислота, такая как (ia, ib, ic), может реагировать с соответствующим замещенным аминосодержащим иммуностимулирующим соединением с образованием амидов (ii-a, ii-b, ii-c) в качестве целевого линкер-нагрузки (LP).
Пример 1
Получение соли ТФУ 2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(1,2,3,4-тетрагидрохинолин-7-ил)-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида (соединение 1.1)
Стадия А: Получение промежуточного соединения 1.1a
[0385] Бромацетонитрил (8,60 г, 71,7 ммоль, 4,78 мл) добавляли к раствору трет-бутил (трифенилфосфорилидин)ацетата (45,0 г, 119 ммоль, 1,00 экв.) в EtOAc (260 мл) при 25°C. Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 16 часов, после чего с помощью ТСХ (ДХМ: MeOH = 10: 1, Rf = 0,4) и ЖХ-МС показали, что реакция завершилась. Смесь охлаждали, фильтровали и промывали EtOAc (200 мл) и концентрировали, с получением неочищенного промежуточного соединения 1.1a в виде красного твердого вещества, которое применяли непосредственно без очистки.
Стадия B: получение Промежуточного соединения 1.1b
[0386] Раствор Промежуточного соединения 1.1a (11,4 г, 54,4 ммоль, 1,00 экв.) и метил 4-формил-3-нитробензоат (24,8 г, 59,8 ммоль, 1,10 экв.) в толуоле (200 мл) перемешивали при 25°C в течение 18 часов. ТСХ (петролейный эфир: EtOAc = 1: 2) показала, что реакция завершилась, и смесь сконцентрировали, с получением неочищенного продукта, который очищали хроматографией на силикагеле (петролейный эфир: EtOAc = от 10:1 до 8:1 до 4:1) с получением Промежуточного соединения 1.1b (11,3 г) в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (CDCl3) δ 8,86 (d, J = 1,3 Гц, 1H), 8,40 (dd, J = 7,9, 1,3 Гц, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,54 (d, J = 7,9 Гц, 1H), 3,97-4,05 (m, 3H), 3,27 (s, 2H), 1,60 ppm (s, 9H).
Стадия C: Получение Промежуточного соединения 1.1c
[0387] Порошок железа (6,79 г, 122 ммоль) добавляли к раствору Промежуточного соединения 1.1b (23,4 г, 20,3 ммоль, 1,00 экв.) в ледяной уксусной кислоте (230 мл) при 60°C. Смесь перемешивали при 85°С в течение 3 часов. ТСХ (петролейный эфир: EtOAc = 1:2, Rf = 0,43) показала, что реакция завершилась, и смесь охладили, отфильтровали, промыли уксусной кислотой (100 мл × 2) и сконцентрировали. Неочищенный остаток разбавляли EtOAc (100 мл) и промывали водн. NaHCO3 (50 мл × 3) и сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле с получением 15,9 г Промежуточного соединения 1.1c в виде желтого твердого вещества. 1H ЯМР (CDCl3) δ 7,95 (s, 1H), 7,76 (dd, J = 8,2, 1,5 Гц, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,46 (d, J = 8,2 Гц, 1H), 3,93 (s, 3H), 2,99 (s, 2H), 1,56 (s, 9H).
Стадия D: Получение Промежуточного соединения 1.1d
[0388] Раствор Промежуточного соединения 1.1c (8,00 г, 25,3 ммоль) в HCl/диоксане (160 мл) перемешивали при 25°C в течение 16 часов, после чего с помощью ЖХ-МС показали, что реакция завершилась. Смесь концентрировали, получая 12,5 г Промежуточного соединения 1.1d в виде светло-желтого твердого вещества, которое применяли непосредственно без очистки. 1H ЯМР (ДМСО-d6) δ 13,43 (br s, 1H), 13,00 (br s, 1H), 10,20 (s, 1H), 9,22 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,85-7,92 (m, 2H), 7,78-7,83 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,52 (s, 2H).
Стадия E: Получение Промежуточного соединения 1.1e
[0389] 5,0 г (13,3 ммоль) HBTU и 7,7 мл (44,4 ммоль) DIPEA добавляли к раствору, содержащему 3,3 г (11,1 ммоль) Промежуточного соединения 1.1d в 60 мл ДМФА при 0°C. Через 5 минут добавляли 2,2 г (21,7 ммоль) ди-н-пропиламина и реакционную смесь перемешивали до комнатной температуры в течение ночи. Реакцию гасили 20 мл насыщенного NH4Cl и затем 20 мл воды. Смесь экстрагировали EtOAc (3 × 30 мл) и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (2 ×), затем сушили над Na2SO4. После удаления осушающего агента и концентрации раствора EtOAc остаток очищали на силикагеле (колонка 80 г, от 0% до 20% метанол/ДХМ), получая 3,0 г Промежуточного соединения 1.1e. 1H ЯМР (CDCl3) δ 7,92 (d, J=1,5 Гц, 1H), 7,86 (dd, J = 8,2, 1,5 Гц, 1H), 7,38 (d, J = 8,2 Гц, 1H), 6,89 (s, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,39 (t, J=7,5 Гц, 4H), 3,22 (s, 2H), 1,68 (m, 4H), 0,91 (bs, 6H). ИЭР, m/z 343 [M+H].
Стадия F: Получение Промежуточного соединения 1.1f
[0390] Раствор, содержащий 1,8 г (5,3 ммоль) Промежуточного соединения 1.1e в 30 мл дихлорметана, охлаждали до 0°C и обрабатывали 2,2 мл (7,9 ммоль) ТЭА, а затем 1,7 г (7,9 ммоль) Boc2O. Реакционную смесь перемешивали до комнатной температуры в течение ночи и затем гасили 10 мл воды. Слои разделяли и водный слой снова экстрагировали дихлорметаном (3 × 30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором и сушили над Na2SO4. Растворитель удаляли и остаток очищали хроматографией на силикагеле (колонка 80 г, от 0% до 75% EtOAc/гексаны) с получением желаемого Промежуточного соединения 1.1f в виде белого твердого вещества.
Стадия G: Получение Промежуточного соединения 1.1g
[0391] Раствор, содержащий 500 мг (1,13 ммоль) Промежуточного соединения 1.1f в 10 мл смеси 1:1 ТГФ и воды, охлаждали до 0°C и обрабатывали 1,7 мл (1,7 ммоль) 1 N LiOH. После перемешивания в течение 16 часов добавляли кусочки льда, а затем 5%-ный раствор лимонной кислоты, достаточный для образования осадка (рН приблизительно 5,5). Полученную смесь трижды промывали EtOAc, а объединенные органические экстракты промывали солевым раствором и сушили над Na2SO4. Раствор выпаривали, получая 419 мг Промежуточного соединения 1.1g в виде бледно-желтого твердого вещества, которое применяли без очистки.
Стадия H: Получение соединения 1.1.
[0392] 46 мг (0,12 ммоль) HATU добавляли к раствору, содержащему 43 мг (0,10 ммоль) Промежуточного соединения 1.1f в 1,0 мл ДМФА. Реакционную смесь перемешивали в течение 5 минут и затем обрабатывали 30 мг (0,12 ммоль) 7-N-Вос-амино-1,2,3,4-тетрагидрохинолина и 0,022 мл (0,20 ммоль) NMM. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов, затем обрабатывали 5 мл насыщенного раствора NH4Cl и 5 мл воды. Полученную смесь трижды экстрагировали EtOAc и объединенные органические слои промывали солевым раствором, затем сушили над Na2SO4. После выпаривания растворителя неочищенное масло растворяли в 3 мл ДХМ и затем охлаждали до 0°C. Затем к смеси добавляли 0,6 мл ТФУ. Смесь перемешивали в течение 4 ч, выпаривали и полученный остаток очищали хроматографией с обращенной фазой, получая соль ТФУ соединения 1.1 в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (CD3OD) δ 7,96 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,85 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,79 (d, J=8,8Гц, 1H), 7,38 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,25 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,10 (s, 1H), 3,55 (t, J=7,5Гц, 6H), 3,33 (m, 2H), 2,90 (t, J=6,6Гц, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,69 (m, 4H), 0,77 (bs, 6H). ЖХ-МС [M+H] = 460,25.
Пример 2
Соединения 1.1-1.67
В таблице 1 приведены соединения с 1.1 по 1.67. Соединения с 1.2 по 1.67 (таблица 1) могут быть получены способом, аналогичным тому, который применяют для синтеза соединения 1.1 (пример 1), с применением промежуточного соединения 1.1f и соответственно замещенного амина.
| Таблица 1: | |||
| Соединения с 1.1 по 1.67 | |||
| Соединение | Структура и ИЮПАК | 1H ЯМР | M+1 |
| 1.1 |
соль ТФУ 2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(1,2,3,4-тетрагидрохинолин-7-ил)-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 7,96 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,85 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,79 (d, J=8,8Гц, 1H), 7,38 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,25 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,10 (s, 1H), 3,55 (t, J=7,5Гц, 6H), 3,33 (m, 2H), 2,90 (t, J=6,6Гц, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,69 (m, 4H), 0,77 (bs, 6H), | 460,3 |
| 1.2 |
N8-(3-ацетилфенил)-2-амино-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,35 (s, 1H), 7,97 (dd, J=1,5, 8,0Гц, 1H), 7,79 (dd, J=1,5, 8,8Гц, 1H), 7,75 (d, J=1,5Гц, 1H), 7,63 (dd, J=1,5, 7,5Гц, 1H), 7,51 (m, 2H), 6,92 (s, 1H), 3,43 (t, J=7,5Гц, 4H), 2,63 (s, 3H), 1,70 (m, 4H), 0,96 (bs, 3H), 0,87 (bs, 3H), | 446,9 |
| 1.3 |
HCl соль 2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(пиридин-3-илметил)-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 8,93 (s, 1H), 8,80 (d, J=5,5Гц, 1H), 8,68 (d, J=8,5Гц, 1H), 8,11 (m, 1H), 7,97 (d, J=1,5Гц, 1H), 7,89 (dd, J=1,5, 7,5Гц, 1H), 7,67 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,08 (s, 1H), 4,84 (s, 2H), 3,44 (bs, 4H), 3,25 (s, 2H), 1,69 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,92 (bs, 3H), 0,90 (bs, 3H), | 419,9 |
| 1.4 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N8-(8-оксо-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 8,27 (s, 1H), 7,97 (m, 3H), 7,71 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,37 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,11 (s, 1H), 3,55 (m, 4H), 3,28 (s, 2H), 3,00 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,69 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,15 (m, 2H), 1,70 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,98 (bs, 6H), | 473,2 |
| 1.5 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N8-(5-оксо-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 7,99 (m, 3H), 7,85 (s, 1H), 7,71 (m, 2H), 7,15 (s, 1H), 3,50 (m, 4H), 3,30 (s, 2H), 3,03 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,65 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,15 (m, 2H), 1,73 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,97 (bs, 6H), | 473,1 |
| 1.6 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N8-(3-(гидразинкарбонил)фенил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 8,41 (s, 1H), 7,99 (m, 2H), 7,67 (m, 2H), 7,57 t, J=8,0Гц, 1H), 7,12 (s, 1H), 3,65 (m, 5H), 1,66 (m, 4H), 0,96 (bs, 6H), | |
| 1.7 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N8-(8-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(ДМСО-d6) δ 10,1 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,56 (d, J=7,7Гц, 1H), 7,49 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,38 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,00 (d, J=8,1Гц, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 5,10 (bs, 1H), 4,54 (s, 1H), 3,28 (m, 4H), 3,28 (s, 2H), 2,66 (m, 4H), 1,88 (m, 2H), 1,66-1,32 (m, 6H), 0,87 (bs, 6H), | 475,2 |
| 1.8 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N8-(5-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3CN) δ 14,0 (bs, 1H), 11,0 (bs, 1H), 8,86 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,85 (d, J=7,7Гц, 1H), 7,62 (m, 2H), 7,42 (d, J=7,5Гц, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 4,68 (s, 1H), 3,28 (m, 4H), 3,15 (m, 4H), 2,76 (m, 2H), 1,88 (m, 3H), 1,61 (m, 4H), 0,92 (bs, 6H), | 475,2 |
| 1.9 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N8-(4-(3-гидроксипиперидин-1-ил)фенил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 9,98 (s, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,44 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,39 (d, J=8,4Гц, 1H), 6,90 (m, 3H), 6,75 (s, 1H), 4,77 (d, J=8,4Гц, 1H), 3,56 (m, 2H), 3,44 (m, 1H), 2,70-2,50 (m, 3H), 1,88 (m, 1H), 1,70 (m, 1H), 1,60 (m, 4H), 1,22 (m, 2H), 0,85 (bs, 6H), | |
| 1.10 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N8-(4-(4-гидроксипиперидин-1-ил)фенил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 7,95 (m, 4H), 7,71 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,55 (d, J=8,8Гц, 2H), 7,10 (s, 1H), 4,05 (m, 1H), 3,80 (m, 2H), 3,50 (m, 4H), 3,33 (s, 2H), 2,25 (m, 2H), 1,97 (m, 2H), 1,73 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,97 (bs, 6H), | |
| 1.11 |
N8-(4-(4-ацетилпиперидин-1-ил)фенил)-2-амино-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 7,95 (m, 4H), 7,71 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,55 (d, J=8,8Гц, 2H), 7,10 (s, 1H), 4,05 (m, 1H), 3,80 (m, 2H), 3,50 (m, 4H), 3,33 (s, 2H), 2,25 (m, 2H), 2,15 (s, 3H), 1,97 (m, 2H), 1,73 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,97 (bs, 6H), | |
| 1.12 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(1,2,3,4-тетрагидрохинолин-6-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 7,95 (m, 2H), 7,71 (m, 3H), 7,18 (m, 1H), 7,11 (s, 1H), 3,43 (m, 4H), 3,50 (m, 2H), 3,28 (s, 2H), 2,96 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,15 (m, 2H), 1,73 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,97 (bs, 6H), | 460,2 |
| 1.13 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 7,95 (m, 2H), 7,71 - 7,61 (m, 3H), 7,27 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,13 (s, 1H), 4,38 (s, 2H), 3,58 - 3,45 (m, 6H), 3,40 (s, 2H), 3,15 (t, J=6,6Гц, 2H), 1,71 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,96 (bs, 6H), | 460,2 |
| 1.14 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-7-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 7,95 (m, 2H), 7,71 - 7,61 (m, 3H), 7,27 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,13 (s, 1H), 4,39 (s, 2H), 3,58 - 3,45 (m, 6H), 3,40 (s, 2H), 3,14 (t, J=6,6Гц, 2H), 1,74 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,95 (bs, 6H), | 460,2 |
| 1.15 |
бензил (S)-(1-(((5-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-3-ил)метил)амино)-3-метил-1-оксобутан-2-ил)карбамат |
(CD3OD) δ 8,80 (d, J=2,1Гц, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,58 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 7,33-7,23 (m, 5H), 6,90 (s, 1H), 5,11 (d, J=6,8Гц, 2H), 4,44 (s, 2H), 3,98 (d, J=7,0Гц, 1H), 3,43 (m, 4H), 2,11 (m, 1H), 1,66 (m, 4H), 1,0-0,95 (m, 12H), | 668,3 |
| 1.16 |
бензил (S)-(1-(((5-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-3-ил)метил)амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамат |
(CD3OD) δ 8,80 (d, J=2,1Гц, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,61 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 7,45 (d, =8,2Гц, 1H), 7,33-7,11 (m, 10H), 6,90 (s, 1H), 5,00 (q, J=12,6Гц, 2H), 4,35 (m, 3H), 3,43 (m, 4H), 3,12 (m, 1H), 2,89 (m, 2H), 1,66 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 716,3 |
| 1.17 |
бензил (S)-2-(((5-(2-амино-4-(дипропил-карбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-3-ил)метил)карбамоил)пирролидин-1 карбоксилат |
(CD3OD) δ 8,82 (d, J=2,1Гц, 1H),8,69 (s, 1H), 8,33- 8,21 (m, 2H), 7,70 (d, J=17Гц, 1H), 7,57 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 7,45 (d, J=8,1Гц, 1H), 7,40-7,21 (m, 5H), 6,90 (s, 1H), 5,00 (q, J=12,6Гц, 2H), 4,49 (s, 1H), 4,35 (m, 2H), 3,63-3,53 (m, 2H), 3,45 (m, 4H), 2,85 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 2,10-1,86 (m, 3H), 1,65 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 666,5 |
| 1.18 |
трифторацетатная соль метил (3R,4S)-4-(3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3H-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)фенил)-1-бензилпирролидин-3-карбоксилат |
(CD3OD) δ 7,96 (m, 2H), 7,89 (bs, 1H), 7,70 (d, 8,2Гц, 2H), 7,55 (m, 6H), 7,42 (t, J=7,5Гц, 1H), 7,22 (d, J=7,0Гц, 1H), 7,11 (s, 1H), 4,53 (s, 2H), 3,90 (m, 3H), 3,70 (s, 3H), 3,51 (m, 4H), 3,37 (s, 2H), 1,70 (q, J=7,5Гц, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 622,2 |
| 1.19 |
трифторацетатная соль метил (3R,4S)-4-(4-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3H-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)фенил)-1-бензилпирролидин-3-карбоксилат |
(CD3OD) δ 7,95 (m, 2H), 7,75 (d, 8,2Гц, 2H), 7,69 (d, J=8,5Гц, 1H), 7,75 (m, 1H), 7,51 (m, 5H), 7,40 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,10 (s, 1H), 4,51 (s, 2H), 3,90 (m, 3H), 3,68 (s, 3H), 3,51 (m, 4H), 3,37 (s, 2H), 1,70 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,99-0,92 (m, 6H), | 622,2 |
| 1.20 |
бензил ((6-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-3- ил)метил)карбамат |
624,3 | |
| 1.21 |
трифторацетатная соль (S)-2-амино-N8-(1-фенилэтил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 7,82 (d, 8,1Гц, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,45 (d, J=8,1Гц, 2H), 7,34 (t, J=7,5Гц, 2H), 7,27 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,07 (s, 1H), 5,25 (q, J=7,0Гц, 1H), 3,45 (m, 4H), 3,33 (s, 2H), 1,74 (q, J=7,5Гц, 4H), 1,52 (d, J=7,1Гц, 3H), 0,94 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 433,2 |
| 1.22 |
Трифторацетатная соль (R)-2-амино-N8-(1-фенилэтил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ7,82 (d, 8,1Гц, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,45 (d, J=8,1Гц, 2H), 7,34 (t, J=7,5Гц, 2H), 7,27 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,07 (s, 1H), 5,25 (q, J=7,0Гц, 1H), 3,45 (m, 4H), 3,33 (s, 2H), 1,74 (q, J=7,5Гц, 4H), 1,52 (d, J=7,1Гц, 3H), 0,94 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 433,2 |
| 1.23 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N8-(2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 7,89 (s, 1H), 7,81 (dd, J=1,8, 8,2 Гц, 1H), 7,61 (d, J=8,2Гц, 1H), 7,34 (t, J=7,5Гц, 2H), 7,21 (m, 2H), 7,07 (s, 1H), 5,65 (q, J=7,8Гц, 1H), 3,48 (m, 4H), 3,28 (s, 2H), 3,01 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 1,68 (q, J=7,4Гц, 4H), 0,94 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 445,1 |
| 1.24 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N,N-дипропил-8-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-карбонил)-3Н-бензо[b]азепин-4-карбоксамида |
(CD3OD) δ 7,64 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,44 (m, 2H), 7,23 (m, 4H), 7,06 (s, 1H), 4,64, (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,48 (m, 4H), 3,28 (s, 2H), 3,01 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 1,98 (s, 1H), 1,71 (q, J=7,4Гц, 4H), 1,01 (bs, 3H), 0,95 (bs, 3H), | 445,1 |
| 1.25 |
Трифторацетатная соль N8-(4-ацетилфенил)-2-амино-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 8,04 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,94 (d, J=8,0Гц, 2H), 7,90 (d, J=8,8Гц, 2H), 7,69 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,10 (s, 1H), 3,43 (m, 4H), 3,28 (s, 2H), 2,60 (s, 3H), 1,71 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,96 (bs, 3H), 0,92 (bs, 3H), | 447,2 |
| 1.26 |
трифторацетатная соль бензил (2-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)этил)карбамата |
(CD3OD) δ 7,80 (d, J=1,5Гц, 1H), 7,74 (dd, J=1,5, 8,0Гц, 2H), 7,60 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,31 - 7,23 (m, 5H), 7,07 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 3,53 - 3,38 (m, 8H), 3,28 (s, 2H), 1,69 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,95 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 505,8 |
| 1.27 |
бензил (2-(3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)бензамидо)этил)карбамат |
(CD3OD) δ 7,82 - 7,75 (m, 4H), 7,74 (d, J=8,0Гц, 2H), 7,60 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,45 (m, 1H), 7,31 - 7,23 (m, 5H), 7,07 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 3,53 - 3,38 (m, 8H), 3,28 (s, 2H), 1,69 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,95 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 625,4 |
| 1.28 |
Трифторацетатная соль 2-амино-N8-((1S,2R)-2-фенилциклопропил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 7,83 (s, 1H), 7,79 (d, 8,1Гц, 1H), 7,61 (d, J=8,1Гц, 2H), 7,27 (t, J=7,5Гц, 2H), 7,19 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,06 (s, 1H), 3,45 (m, 4H), 3,28 (s, 2H), 3,00 (m, 1H), 2,21 (m, 1H), 1,68 (q, J=7,5Гц, 4H), 1,35 (m, 2H), 0,96 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 444,8 |
| 1.29 |
бензил 6-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилат |
(CD3OD) δ 7,95 (m, 2H), 7,71 - 7,61 (m, 3H), 7,27 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,23 (m, 5H), 7,13 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 4,38 (s, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,58 (t, J=7,5Гц, 2H), 3,28 (s, 2H), 3,15 (t, J=6,6Гц, 2H), 1,71 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,96 (bs, 6H), | 594,4 |
| 1.30 |
соль HCl бензил 7-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилата |
(CD3OD) δ7,95 (m, 2H), 7,71 - 7,61 (m, 3H), 7,27 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,23 (m, 5H), 7,13 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 4,38 (s, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,58 (t, J=7,5Гц, 2H), 3,28 (s, 2H), 3,15 (t, J=6,6Гц, 2H), 1,71 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,96 (bs, 6H), | 594,4 |
| 1.31 |
Соль бис ТФУ 2-амино-N8-(3-((3-фенилпропанамидо)метил)фенил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 9,15 (s, 1H), 8,63 (bs, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,02-7,99 (m, 2H), 7,71 (d, J=8,5Гц, 1H), 7,23-7,10 (m, 6H), 4,45 (s, 2H), 3,44 (m, 4H), 3,37 (s, 2H), 2,94 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,57 (t, J=7,5Гц, 2H), 1,61 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,96 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 566,3 |
| 1.32 |
Соль бис ТФУ 2-амино-N8-(5-((3-бензилуреидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 9,15 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,02-7,99 (m, 2H), 7,72 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,33 (m, 4H), 7,22 (m, 1H), 7,12 (s, 1H), 4,45 (s, 2H), 4,33 (s, 2H), 3,54 (m, 4H), 3,37 (s, 2H), 1,71 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,97 (bs, 3H), 0,92 (bs, 3H), | 568,3 |
| 1.33 |
2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(5-((1,2,3,4-тетрагидрохинолин-2-карбоксамидо)метил)пиридин-3-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,77 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,19 (m, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,59 (dd, J=8,1, 1,8Гц, 1H), 7,44 (d, J=8,1Гц, 1H), 6,99-6,84 (m, 3H), 6,66 (d, J=8,0Гц, 1H), 6,55 (t, J=7,3Гц, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,00 (t, J=5,2Гц, 1H), 3,44 (m, 4H), 2,85 (s, 2H), 2,74 (m, 1H), 2,51 (m, 1H), 2,25 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 1,67 (m, 4H), 0,96 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 593,3 |
| 1.34 |
2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(5-((1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоксамидо)метил)пиридин-3-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,80 (d, J=2,4Гц, 1H), 8,28 (d, J=2,1Гц, 1H), 8,25 (t, J=2,1Гц, 1H), 7,72 (d, J=1,9Гц, 1H), 7,61 (dd, J=1,9, 8,1Гц, 1H), 7,47 (d, J=8,2Гц, 1H), 7,13 (m, 3H), 7,05 (m, 1H), 6,90 (s, 1H), 4,50 (s, 2H), 4,05 (q, J=6,1Гц, 2H), 3,63 (dd, J=4,7, 10,5Гц, 1H), 3,43 (m, 4H), 3,05 (dd, J=4,7, 16,0Гц, 1H), 3,02 (m, 1H), 2,83 (d, J=16,6Гц, 1H), 1,71 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 594,4 |
| 1.35 |
(S)-2-амино-N8-(5-((2-амино-3-фенилпропанамидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8- дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,78 (d, J=2,3Гц, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,61 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 7,45 (d, =8,2Гц, 1H), 7,23-7,15 (m, 5H), 6,90 (s, 1H), 4,44 (q, J=12,6Гц, 2H), 3,63 (t, J=7,5Гц, 1H), 3,43 (m, 4H), 2,99 (m, 1H), 2,89 (m, 2H), 1,66 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 582,2 |
| 1.36 |
(R)-2-амино-N8-(5-((2-амино-3-фенил-пропанамидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4 , 8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,78 (d, J=2,3Гц, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,61 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 7,45 (d, =8,2Гц, 1H), 7,23-7,15 (m, 5H), 6,90 (s, 1H), 4,41 (d, J=15,0Гц, 1H), 4,34 (d, J=15,0Гц, 1H), 3,63 (t, J=7,5Гц, 1H), 3,43 (m, 4H), 2,99 (m, 1H), 2,89 (m, 2H), 1,66 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 582,2 |
| 1.37 |
Фенил ((5-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-3-ил)метил)карбамат |
(CD3OD) δ 8,85 (d, J=2,3Гц, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,95 (m, 2H), 7,72 (d, =8,5Гц, 1H), 7,41 (m, 2H), 7,21 (t, J=7,0Гц, 1H), 7,15 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,09 (s, 1H), 4,49 (s, 2H), 3,49 (m, 4H), 1,70 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 555,2 |
| 1.38 |
2-амино-N8-(5-((3-амино-3-фенил-propanamido)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,75 (d, J=2,1Гц, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,72 (d, J=2,0Гц, 1H), 7,61 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 7,47 (d, =8,2Гц, 1H), 7,33-7,15 (m, 5H), 6,90 (s, 1H), 4,41 (m, 3H), 3,43 (m, 4H), 2,89 (m, 2H), 2,67 (m, 2H), 1,66 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 582,2 |
| 1.39 |
2-амино-N8-(5-амино-5,6,7,8-тетрагидро-хинолин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(ДМСО) δ 10,3 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,50 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,41 (d, J=8,4Гц, 1H), 6,89 (bs, 2H), 6,78 (s, 1H), 3,81 (m, 1H), 3,43 (m, 4H), 2,75 (m, 4H), 1,99 (m, 2H), 1,75 (m, 1H), 1,61 (m, 5H), 0,88 (bs, 6H), | 475,3 |
| 1.40 |
Бензил (3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-5-ил)карбамат |
(CD3OD) δ 9,25 (d, J=2,1Гц, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,00 (d, J=2,0Гц, 1H), 7,61 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 7,33-7,15 (m, 5H), 7,10 (s, 1H), 5,25 (m, 4H), 5,05 (m, 1H), 3,63-3,55 (m, 4H), 3,12 (m, 2H), 2,22 (m, 2H), 1,98 (m, 2H), 1,66 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 609,3 |
| 1.41 |
2-Амино-N8-(5-амино-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,75 (d, J=2,1Гц, 1H), 8,55 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,61 (d, J=2,0Гц, 1H), 7,50 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 6,90 (s, 1H), 4,70 (m, 1H), 3,63-3,55 (m, 4H), 3,20-2,95 (m, 2H), 2,75 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 1,66 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 461,4 |
| 1.42 |
Бензил (3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-5-ил)карбамат |
(CD3OD) δ 8,72 (d, J=2,1Гц, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 8,00 (d, J=2,0Гц, 1H), 7,61 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 7,33-7,15 (m, 5H), 7,66 (d, 1H), 7,44-7,20 (m, 5H), 7,10 (s, 1H), 5,25 (m, 1H), 5,15 (s, 1H), 3,63-3,55 (m, 4H), 3,10-2,95 (m, 2H), 2,00 1,66 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 6H), | 595,4 |
| 1.43 |
N8-(6-ацетилпиридин-3-ил)-2-амино-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(ДМСО) δ 12,3 (s, 1H), 10,9 (s, 1H), 9,89 (s, 1H), 9,17 9s, 1H), 9,06 (s, 1H), 8,45 (d, J=8,8Гц, 1H), 8,05-7,95 (m, 3H), 7,77 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,05 (s, 1H), 3,44 (m, 6H), 2,60 (s, 3H), 1,65 (m, 4H), 0,90 (m, 6H), | 448,2 |
| 1.44 |
2-амино-N8-(3-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-5-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(ДМСО) δ 10,1 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,50-7,40 (m, 3H), 7,17 (d, J=8,4Гц, 1H), 6,90 (bs, 1H), 6,68 (s, 1H), 4,25 (m, 1H), 3,50-3,30 (m, 6H), 2,85-2,65 (m, 4H), 2,40 (m, 1H), 1,65-1,55 (m, 5H), 0,85 (bs, 6H), | 460,3 |
| 1.45 |
Бензил (6-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)карбамат |
(ДМСО) δ 10,1 (s, 1H), 7,72-7,55 (m, 3H), 7,50-7,40 (m, 5H), 7,17 (d, J=8,4Гц, 1H), 6,90 (bs, 1H), 6,88 (s, 1H), 5,15 (m, 3H), 3,40 (m, 4H), 2,85-2,65 (m, 4H), 2,40 (m, 1H), 1,80 (m, 1H), 1,65-1,55 (m, 4H), 0,85 (bs, 6H), | 594,3 |
| 1.46 |
Соль бис ТФУ 2-амино-N8-(5-((4-фенилбутанамидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 9,15 (d, J=2,1Гц, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,96 (dd, J=8,4, 2,1Гц, 1H), 7,71 (d, J=8,5Гц, 1H), 7,25-7,11 (m, 6H), 4,50 (s, 2H), 3,46 (m, 4H), 3,37 (s, 2H), 2,64 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,31 (t, J=7,5Гц, 2H), 1,95 (m, 2H), 1,69 (m, 4H), 0,96 (bs, 3H), 0,92 (bs, 3H), | 581,2 |
| 1.47 |
2-амино-N8-((1-гидрокси-1,3-дигидро-бензо[с][1,2]оксаборол-3-ил)метил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин 4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 7,78 (d, J=1,5Гц, 1H), 7,73 (dd, J=1,5, 8,5Гц, 1H), 7,66 (d, J=7,0Гц, 1H), 7,62 (d, J=8,5Гц 1H), 7,47 (m, 2H), 7,37 (m, 1H), 7,07 (s, 1H), 5,44 (dd, J=3,5, 8,5Гц, 1H), 4,00 (dd, J=3,5, 14,0Гц, 1H), 3,6-3,4 (m, 7H), 1,69 (m, 4H), 0,95 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 473,2 |
| 1.48 |
2-амино-N8-(6-бензил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 9,33 (s, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,05 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,74 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,31 - 7,22 (m, 5H), 7,12 (s, 1H), 4,40 (s, 2H), 4,37 (s, 2H), 3,48 (m, 4H), 3,38 - 3,28 (m, 8H), 1,71 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,97 - 0,92 (bs, 6H), | 551,3 |
| 1.49 |
соль ТФУ бензил (3-((2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)метил)-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-ил) карбамат |
(ДМСО) δ 12,0 (s, 1H), 9,82 (s, 1H), 9,29 (s, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,92 (m, 1H), 7,88-7,83 (m, 3H), 7,65 (d, J=8,5Гц, 1H), 7,50 (dd, J=8,0,,0 Гц, 1H), 7,45-7,33 (m, 6H), 7,01 (s, 1H), 5,30 (m, 1H), 5,15 (s, 2H), 3,70 (m, 1H), 4,40-3,30 (m, 5H), 1,58 (m, 4H), 0,89 (bs, 3H), 0,80 (bs, 3H), | 624 |
| 1.50 |
2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,68 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,58 (dd, J=8,4, 2,1Гц, 1H), 7,47 (d, J=8,4Гц, 1H), 6,91 (s, 1H), 4,08 (s, 2H), 3,38 - 3,28 (m, 6H), 2,95 (t, J=3,0Гц, 2H), 1,71 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,97 - 0,92 (bs, 6H), | 461 |
| 1.51 |
(S)-2-амино-N8-(5 -((2-амино-3-метилбутанамидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8- дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,78 (d, J=2,3Гц, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,57 (dd, J=1,5, 8,2Гц, 1H), 7,45 (d, =8,4Гц, 1H), 6,90 (s, 1H), 4,48 (s, 2H), 3,43 (m, 4H), 2,00 (m, 1H), 1,66 (m, 4H), 1,0-0,85 (m, 12H), | 534 |
| 1.52 |
бензил (3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-7-ил)карбамат |
(ДМСО) δ 10,3 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,52-7,35 (m, 6H), 6,90 (bs, 1H), 6,88 (s, 1H), 5,15 (s, 2H), 3,80 (m, 1H), 3,43 (m, 4H), 3,00-2,65 (m, 6H), 2,02 (m, 1H), 1,65-1,55 (m, 4H), 0,85 (bs, 6H), | 609,3 |
| 1.53 |
бензил (3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-6-ил) карбамат |
(CD3OD) δ 9,05 (m, 1H), 8,45 (m, 1H), 7,98 (m, 1H), 7,66 (m, 1H), 7,22-7,35 (m, 5H), 7,10 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 4,73 (m, 1H), 3,43 (m, 4H), 3,00-2,65 (m, 2H), 1,72-1,62 (m, 4H), 0,85 (bs, 6H), | 595,3 |
| 1.54 |
бензил 3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-карбоксилат |
(CD3OD) δ 8,70 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,93 (m, 2H), 7,66 (d, J=7,8Гц, 1H), 7,42-7,31 (m, 5H), 7,08 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,73 (m, 2H), 3,85 (bs, 2H), 3,43 (m, 4H), 3,00-2,95 (m, 2H), 1,72-1,62 (m, 4H), 0,85 (bs, 6H), | 595 |
| 1.55 |
бензил (1-(5-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-2-ил)пиперидин-3-ил)карбамат |
(ДМСО-d6) δ 12,2 (bs, 1H), 10,2 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,00-7,75 (m, 3H), 7,65 (d, J=7,8Гц, 1H), 7,43-7,25 (m, 5H), 7,01 (s, 1H), 6,82 (d, J=8,8Гц, 1H), 5,04 (s, 2H), 4,21 (d, J=12Гц, 1H), 4,04 (d, J=12Гц, 1H), 3,55-3,00 (m, 7H), 2,80-2,70 (m, 2H), 2,00-1,40 (m, 8H), 0,85 (bs, 6H), | 638,3 |
| 1.56 |
2-амино-N8-(6-(3-аминопиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(ДМСО-d6) δ 10,2 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 7,98 (d, J=7,2Гц, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,45 (m, 2H), 6,82 (d, J=8,2Гц, 1H), 4,21 (d, J=12Гц, 1H), 3,94 (d, J=12Гц, 1H), 2,80-2,70 (m, 4H), 2,00-1,40 (m, 10H), 0,85 (bs, 6H), | 504,2 |
| 1.57 |
соль трис HCl 2-амино-N8-(6-(4-аминопиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида |
(CD3OD) δ 8,65 (s, 1H), 8,16 (m, 1H), 8,00-7,96 (m, 2H), 7,70 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,32 (m, 1H), 7,11 (s, 1H), 4,33 (d, J=13,5Гц, 2H), 3,47-3,40 (m, 5H), 2,17 (m 2H), 1,72 (m, 6H), 0,94 (m, 6H), | 504,6 |
| 1.58 |
2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(5-(пирролидин-3-ил)пиридин-3-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,84 (J=1,5Гц, 1H), 8,42 (d, J=1,5Гц, 1H), 8,37 (d, J=1,5Гц, 1H), 8,01-7,98 (m, 2H), 7,71 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,11 (s, 1H), 4,80 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 7,73-3,60 (m, 2H), 3,52-3,44 (m, 2H), 2,57 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 1,71 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,97 (bs, 3H), 0,92 (bs, 3H), | 475 |
| 1.59 |
бензил (2-(4-((3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-ил)метил)бензамидо) этил)карбамат |
(CD3OD) δ 8,71 (J=1,5Гц, 1H), 8,05 (bs, 1H), 7,95 (m, 2H), 7,87 (m, 2H), 7,70 (d, J=9,0Гц, 1H), 7,57 (d, J=7,5Гц, 1H), 7,32-7,25 (m, 5H), 7,11 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 3,51-3,46 (m, 6H), 3,37 (m, 4H), 1,69 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,96 (bs, 3H), 0,92 (bs, 3H), | 771 |
| 1.60 |
2-амино-N8-(6-(4-((2-аминоэтил)карбамоил) бензил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,65 (J=2,5Гц, 1H), 7,95 (J=2,5Гц, 1H), 7,85 (d, J=8,5Гц, 2H), 7,68 (d, J=2,0Гц, 1H), 7,58-7,53 (m, 3H), 7,44 (d, J=8,5Гц, 1H), 6,89 (s, 1H), 3,82 (s, 2H), 3,70 (s, 2H), 3,53 (t, J=6,0Гц, 2H), 3,42 (m, 4H), 3,00-2,89 (m, 6H), 1,67 (m, 4H), 0,95-0,87 (m, 6H), | 637,6 |
| 1.61 |
соль трис ТФУ 2-амино-N8-(6-(4-((2-аминоэтил)карбамоил)пиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
(CD3OD) δ 8,57 (d, J=2,5Гц, 1H), 8,06 (dd, J=8,0, 2,5Гц, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,94 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,70 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,21 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,11 (s, 1H), 4,25 (d, J=13,5Гц, 2H), 3,48-3,44 (m, 6H), 3,17 (m, 2H), 3,06 (t, J=6,0Гц, 2H), 2,57 (m, 1H), 1,99-1,95 (m, 2H), 1,82-1,79 (m, 2H), 1,73-1,66 (m, 4H), 0,97 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H), | 575,6 |
| 1.62 |
2-амино-8-(никотинамидо)-N,N-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4-карбоксамид |
||
| 1.63 |
2-амино-N,N-дипропил-8-(N-(пиридин-3-ил) сульфамоил)-3Н-бензо[b]азепин-4-карбоксамид |
||
| 1.64 |
2-амино-N8-(5-((2-аминоацетамидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
1H ЯМР (ДМСО-d6) δ 10,4 (s, 1H), 8,85 (d, J=2,4Гц, 1H), 8,44 (t, J=6,0Гц, 1H), 8,23 (d, 2,0Гц, 1H), 8,13 (d, t, J=2,0Гц, 1H), 7,68 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,50 (dd, J=2,0, 8,0Гц, 1H), 7,41 (d, J=8,0Гц, 1H), 6,91 (bs, 2H), 6,79 (s, 1H), 4,33 (d, J=5,6Гц, 1H), 3,33 (m, 2H), 3,15 (s, 1H), 2,73 (s, 1H), 1,78 (bs, 1H), 1,56 (m, 4H), 0,84 (bs, 6H), | 492,3 |
| 1.65 |
2-амино-7-метокси-N4,N4-дипропил-N8-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
||
| 1.66 |
2-амино-7-фтор-N4,N4-дипропил-N8-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
||
| 1.67 |
2-амино-N8-(6-(4-((3-амино-2,2-дифторпропил)карбамоил)бензил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид |
Пример 3
Получение 8-замещенных анилидов
Получение 2-амино-8-(никотинамидо)-N,N-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4-карбоксамида (соединение 1.62)
Стадия А. Получение соединения 1.62.
[0394] К раствору, содержащему 46 мг (0,10 ммоль) трет-бутил (8-бром-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-2-ил)карбамат в 5 мл ДМФА, добавляли 65 мг (0,20 ммоль) Cs2CO3 и 15 мг (0,12 ммоль) никотинамида. Раствор дегазировали, затем обрабатывали 18 мг (0,2 экв.) BrettPhos Pd G3 и 11 мг (0,2 экв.) BrettPhos и нагревали при 90°С в течение 12 часов. Реакционную смесь охлаждали и подвергали хроматографии препаративной ВЭЖХ, получая 6 мг желаемого связанного и незащищенного соединения в виде не совсем белого твердого вещества. 1H ЯМР (ДМСО-d6) δ 10,4 (s, 1H), 9,10 (d, J=1,6Гц, 1H), 8,76 (d, J=8,0Гц, 1H), 8,28 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,36 (d, J=8,2Гц, 1H), 7,27 (d, J=8,0Гц, 1H), 6,80 (bs, 1H), 6,68 (s, 1H), 3,44 (m, 4H), 2,69 (m, 1H), 1,54 (m, 4H), 0,89 (bs, 6H). ЖХ-МС (M+H) = 406,2.
Пример 4
Получение 8-замещенных сульфонамидов
Получение 2-амино-N,N-дипропил-8-(N-(пиридин-3-ил)сульфамоил)-3H-бензо[b]азепин-4-карбоксамида (соединение 1.63)
Стадия А: Получение соединения 1.63.
[0395] К раствору, содержащему 460 мг (1,0 ммоль) трет-бутил (8-бром-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-2-ил)карбамата в 50 мл диоксана, добавляли 210 мг (2,0 ммоль) N,N-диизопропилэтиламина и 140 мг (1,2 ммоль) бензилтиола. Раствор дегазировали, затем обрабатывали 180 мг (0,20 ммоль) Pd2(dba)3 и 116 мг (0,20 ммоль) XantPhos и нагревали при 90°C в течение 6 часов. Реакционную смесь охлаждали и фильтровали через целит, затем подвергали хроматографии с обращенной фазой, получая 250 мг желаемого простого эфира тиола, который немедленно растворяли в ДХМ (20 мл) и уксусной кислоте (0,5 мл). Полученный раствор охлаждали на бане с ледяной водой и добавляли 1,3-дихлор-5,5-диметил-2-имидазолидиндион (197 мг, 1,0 ммоль). Через 2 часа смесь экстрагировали ДХМ и солевым раствором, и органическую фазу сушили и выпаривали. Остаток растворяли в MeCN и обрабатывали 1-метил-1Н-имидазолом и 3-аминопиридином при 0°С и перемешивали до комнатной температуры в течение 2 часов. Раствор экстрагировали солевым раствором и сушили над Na2SO4. Затем остаток растворяли в 4 мл ДХМ и обрабатывали 1 мл ТФУ и перемешивали в течение 2 часов. Выпаривание растворителя и очистка обращенно-фазовой ВЭЖХ приводили к получению 30 мг желаемого соединения 1.63. 1H ЯМР (ДМСО-d6) δ 10,5 (bs, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,25 (d, J=2,0Гц, 1H), 7,54 (d, 8,0Гц, 1H), 7,52 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,22 (dd, J=8,0, 2,0Гц, 1H), 7,07 (m, 2H), 6,73 (s, 1H), 3,30 (m, 4H), 2,95 (s, 2H), 2,11 (s, 1H), 1,54 (m, 4H), 0,85 (bs, 6H). ЖХ-МС (M+H) = 442,1.
Пример 5
Получение линкер-модифицированных нагрузок (LP):
Получение 4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил((5-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-3-ил)метил)карбамат (соединение-линкер 2.1)
Соединение-Линкер 2.1
Стадия A: Получение Соединения-Линкера 2.1.
[0396] 54 мг (0,07 ммоль) MC-Val-Cit-PAB-PNP (CAS № 159857-81-5) добавляли к раствору, содержащему 40 мг (0,07 ммоль) 2-амино-N8-(5-(аминометил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид в 1,0 мл ДМФА и 32 мкл (0,18 ммоль) DIPEA. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов, затем очищали непосредственно хроматографией с обращенной фазой (без ТФУ). Чистые фракции лиофилизировали и получали 60 мг (71%) желаемого продукта, который растворяли в 5 мл ДХМ и обрабатывали 1 мл ТФУ при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 45 минут и затем упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией с обращенной фазой (без ТФУ), получая 34 мг (62%) соединения-линкера 2.1 в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,81 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,58 (m, 2H), 7,45 (d, J=8,2 Гц, 2H), 7,33 (d, J=8,4Гц, 2H), 6,91 (s, 1H), 6,75 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 4,49 (m, 1H), 4,39 (m, 2H), 4,14 (d, J=6,5Гц, 1H), 3,47 (t, J=7,1Гц, 2H), 3,42 (m, 4H), 3,15 (m, 1H), 3,10 (m, 1H), 2,27 (t, J=7,4Гц, 2H), 2,05 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,75-1,52 (m, 13H), 1,31 (m, 2H), 0,97 (t, J=6,5Гц, 6H). ЖХ-МС [M+H] = 1033.
Пример 6
Получение линкер-модифицированных нагрузок (LP):
Получение 2-амино-N8-(5-((6-(4-((2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)метил)циклогексан-1-карбоксамидо)гексанамидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид (соединение-линкер 2.2)
Соединение-Линкер 2.2
Стадия A: Получение Соединения-Линкера 2.2.
[0397] 50 мг (0,11 ммоль) N-сукцинимидил 6-[[4-(малеимидометил)циклогексил]карбоксамидо]капроата (CAS № 125559-00-4) добавляли к раствору, содержащему 60 мг (0,11 ммоль) 2-амино-N8-(5-(аминометил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамида в 2,0 мл ДХМ и 15 мкл (0,11 ммоль) триэтиламина. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч, а затем очищали непосредственно с помощью хроматографии с обращенной фазой (без ТФУ). Чистые фракции лиофилизировали с получением желаемого продукта, который растворяли в 5 мл ДХМ и обрабатывали 1 мл ТФУ при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 2 часов и затем выпаривали. Полученный остаток очищали хроматографией с обращенной фазой (без ТФУ), получая 49 мг соединения-линкера 2.2 в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,78 (s, 1H), 8,25 (s, 2H), 7,70 (d, J=1,8Гц, 1H), 7,58 (dd, J=1,8, 8,1Гц, 1H), 7,46 (d, J=8,3Гц, 1H), 6,91 (s, 1H), 6,77 (s, 2H), 4,42 (s, 2H), 3,43 (m, 4H), 3,13 (t, J=6,9Гц, 2H), 2,85 (d, J=16,6Гц, 1H), 2,29 (t, J=7,3Гц, 2H), 2,05 (m, 1H), 1,8-1,6 (m, 12H), 1,51 (m, 1H), 1,37 (m, 4H), 1,11-0,84 (m, 9H). ЖХ-МС (M+H) = 767.
Пример 7
Получение линкер-модифицированных нагрузок (LP)
[0398] Пример 7А. Получение 2-амино-N8-(5-((6-(4-((2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)метил)циклогексан-1-карбоксамидо)гексанамидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид (соединение-линкер 2.3)
[0399] Раствор, содержащий 58 мг (0, 10 ммоль) соединения 1.35 и 30 мг (0,1 ммоль) 2,5-диоксопирролидин-1-ил-6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексаноат в 2 мл ДХМ обрабатывали 0,07 мл (0,4 ммоль) DIPEA и реакционную смесь перемешивали в течение 4 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь очищали без обработки способом обращенно-фазовой хроматографии с получением 28 мг Соединения-Линкера 2.3 в виде белого твердого вещества. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,81 (d, J=2,3Гц, 1H), 8,19 (d, J=1,9Гц, 1H), 8,08 (t, J=2,1Гц, 1H), 7,90 (m, 2H), 7,64 (dd, J=1,9, 8,1Гц, 1H), 7,25-7,15 (m, 5H), 7,06 (s, 1H), 6,77 (s, 2H), 4,62-4,57 (m, 3H), 4,39 (s, 2H), 3,45-3,40 (m, 4H), 3,39 (t, J=7,5Гц, 2H), 3,10 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 2,16 (t, J=7,5Гц, 2H), 1,70 (m, 4H), 1,50 (m, 4H), 1,10 (m, 4H), 0,95 (m, 6H). ЖХ-МС (M+H) = 775,8.
[0400] Следующие соединения-линкеры, Соединение-линкер с 2.4 по 2.7, могут быть получены способом, аналогичным описанному для Соединения-линкера 2.3 выше, путем взаимодействия Соединения 1.35 с соответственно замещенным линкером.
[0401] Соединение-Линкер 2.4
(S)-2-амино-N8-(5-((2-(6-(4-((2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)метил)циклогексан-1-карбоксамидо)гексанамидо)-3-фенилпропанамидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид
[0402] Из LC-smcc с получением белого твердого вещества. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,79 (d, J=2,0Гц, 1H), 8,17 (d, J=2,0Гц, 1H), 8,09 (t, J=2,0Гц, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,25-7,15 (m, 5H), 6,96 (s, 1H), 6,79 (s, 2H), 4,62-4,57 (m, 1H), 4,38 (s, 2H), 3,45-3,40 (m, 6H), 3,14 (m, 1H), 3,05 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,90 (m, 1H), 2,18 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,80-1,60 (m, 10H), 1,50-1,30 (m, 6H), 1,20-1,10 (m, 3H), 0,95 (m, 6H). ЖХ-МС (M+H) = 914,9.
[0403] Соединение-Линкер 2.5
(S)-2-амино-N8-(5-(4-бензил-24-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)-3,6,22-триоксо-9,12,15,18-тетраокса-2,5,21-триазатетракозил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид
[0404] Из mal-ПЭГ4-NHS с получением белого твердого вещества. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,91 (d, J=2,0Гц, 1H), 8,24 (d, J=2,0Гц, 1H), 8,15 (t, J=2,0Гц, 1H), 8,01-7,98 (m, 2H), 7,72 (d, 8,0Гц, 1H), 7,25-7,15 (m, 5H), 7,12 (s, 1H), 6,78 (s, 2H), 4,60 (m, 1H), 4,43 (s, 2H), 3,73 (t, J=7,5Гц, 2H), 3,70-3,40 (m, 20H), 3,39 (s, 2H), 3,15 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 2,45 (t, J=7,5Гц, 2H), 1,70 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,97-0,91 (m, 6H). ЖХ-МС (M+H) = 980,9.
[0405] Соединение-Линкер 2.6
(S)-2-амино-N8-(5-((2-(4-(4-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)фенил)бутанамидо)-3-фенилпропанамидо)метил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид, трифторацетатная соль
[0406] Из эфира SMPB NHS получали белое твердое вещество. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,95 (d, J=2,0Гц, 1H), 8,63 (d, J=2,0Гц, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,24 (m, 2H), 7,98 (m, 2H), 7,70 (d, J=9,0Гц, 1H), 7,25-7,15 (m, 9H), 7,16 (s, 1H), 6,94 (s, 2H), 4,60 (m, 1H), 4,51-4,37 (m, 2H), 3,15 (m, 1H), 2,91 (m, 1H), 2,51 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,22 (m, 2H), 1,81 (t, J=7,5Гц, 2H), 1,70 (q, J=7,5Гц, 4H), 0,95 (m, 6H). ЖХ-МС (M+H) = 823,8.
[0407] Соединение-Линкер 2.7
4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил((S)-1-(((5-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-3-ил)метил)амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)карбамат
[0408] Из mc-VC-PABA-PNP получали белое твердое вещество. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,78 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,89 (m, 2H), 7,64 (dd, J=1,9, 8,1Гц, 1H), 7,49 (d, J=8,0Гц, 2H), 7,25-7,15 (m, 7H), 7,06 (s, 1H), 6,77 (s, 2H), 4,96 (s, 2H), 4,48 (m, 1H), 4,49-4,34 (m, 3H), 4,14 (d, J=7,5Гц, 1H), 3,46-3,44 (m, 6H), 3,22 (m, 1H), 3,11 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 2,33-2,25 (m, 2H), 2,08 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 1,75-1,50 (m, 13H), 1,30 (m, 2H), 1,00-0,85 (m, 12H). ЖХ-МС (M+H) = 1181,4.
[0409] Соединение-Линкер 2.8
4-((R)-2-((R)-2-(5-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил) пентанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил(2-(1-(5-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-2-ил)пиперидин-4-карбоксамидо)этил)карбамат
[0410] Из Соединения 1.61 и mc-VC-PABA-PNP получали белое твердое вещество. 1H ЯМР (CD3OD) δ 10,1 (s, 1H), 9,49 (s, 1H), 9,33 (bs, 2H), 7,88 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,45 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,35 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,85-6,80 (m, 2H), 6,75 (s, 1H), 4,25 m, 2H), 3,54-3,34 (m, 10H), 3,05 (s, 4H), 2,85-2,75 (m, 4H), 2,44 (m, 1H), 1,99 (m, 1H), 1,70-1,60 (m, 12H), 0,95 (bs, 6H).
[0411] Соединение-Линкер 2.9
4-((R)-2-((R)-2-(5-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)пентанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил (1-(5-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-2-ил)пиперидин-4-ил)карбамат
[0412] Из Соединения 1.57 и mc-VC-PABA-PNP получали белое твердое вещество. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,37 (d, J=2,5Гц, 1H), 7,88 (dd, J=8,0, 2,5Гц, 1H), 7,57-7,54 (m, 3H), 7,43 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,31 (d, J=8,0Гц, 2H), 6,89 (s, 1H), 6,85-6,80 (m, 1H), 6,78 (s, 2H), 5,03 (s, 2H), 4,45 (m, 2H), 4,12 (m, 3H), 3,65 (m, 1H), 3,54 (t, J=7,5Гц, 2H), 3,44 (m, 4H), 3,20-2,96 (m, 4H), 2,26 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,05 (m, 1H), 1,99-1,50 (m, 18H), 1,30 (m, 2H), 0,97 (t, J=7,5Гц, 6H), 0,89 (bs, 6H).
[0413] Соединение-Линкер 2.20
4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил(2-(((5-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)пиридин-3-ил)метил)амино)-2-оксоэтил)карбамат
[0414] Из Соединения 1.64 и mc-VC-PABA-PNP получали белое твердое вещество. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,81 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,58 (m, 2H), 7,45 (d, J=8,2 Гц, 2H), 7,33 (d, J=8,4Гц, 2H), 6,91 (s, 1H), 6,75 (s, 2H), 4,96 (s, 2H), 4,48 (m, 1H), 4,49-4,34 (m, 3H), 4,14 (d, J=7,5Гц, 1H), 3,46-3,44 (m, 6H), 3,22 (m, 1H), 3,11 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 2,33-2,25 (m, 2H), 2,08 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 1,75-1,50 (m, 13H), 1,30 (m, 2H), 1,00-0,85 (m, 12H). ЖХ-МС (M+H) = 1090,2.
[0415] Соединение-Линкер 2.21
2-амино-N8-(6-(4-((2-(4-((2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)метил)циклогексан-1-карбоксамидо)этил)карбамоил)пиперидин-1-ил)пиридин-3-ил)-N4,N4-дипропил-3H-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид
[0416] Из соединения 1.61 и сукцинимидил 4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилата получали белое твердое вещество. 1H ЯМР (ДМСО-d6) δ 10,1 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,61 (bs, 2H), 7,92 (dd, J=8,0, 2,5Гц, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,53 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,41 (d, J=8,0Гц, 2H), 7,03 (s, 2H), 6,85-6,80 (m, 2H), 6,78 (s, 1H), 4,25 (m, 2H), 3,65 (m, 1H), 3,54 (t, J=7,5Гц, 2H), 3,44 (m, 4H), 3,20-2,96 (m, 4H), 2,26 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,05 (m, 1H), 1,99-1,50 (m, 18H), 1,30 (m, 2H), 0,97 (t, J=7,5Гц, 6H), 0,89 (bs, 6H). ЖХ-МС (M+H) = 794,5.
[0417] Пример 7В: Получение 4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил (2-(4-((3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил))-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-ил)метил)бензамидо)этил)карбамат (соединение-линкер 2.10)
Стадия А: Получение промежуточного соединения 7B-1
[0418] К перемешиваемому раствору 3-нитро-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридина дигидрохлорида (1,0 г, 3,97 ммоль) и трет-бутил-4-(бромметил)бензоата (1,18 г, 4,36 ммоль) в ДМФА (40 мл), охлажденного на ледяной бане, по каплям добавляли ТЭА (2,76 мл, 19,8 ммоль). Полученный прозрачный раствор перемешивали в течение ночи, до окончания охлаждающей бани. С помощью ЖХ-МС показали наиболее желаемый продукт с небольшим количеством оставшегося SM. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток разбавляли водой (45 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (5 мл), затем экстрагировали EtOAc (3х). Объединенные экстракты сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали. Остаток абсорбировали на силикагеле и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ISCO Золото 40 г; сухая загрузка, 0-20% CH2Cl2/MeOH), получая 1,32 г трет-бутил 4-((3-нитро-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-ил)метил)бензоат в виде сиропа оранжевого цвета. 1H ЯМР (ДМСО-d6) δ 9,15 (d, J=2,5Гц, 1H), 8,36 (d, J=2,5Гц, 1H), 7,88 (d, J=8,0Гц, 2H), 7,49 (d, J=8,0Гц, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,79 (s, 2H), 3,71 (s, 2H), 3,04 (m, 2H), 2,85 (m, 2H), 1,55 (s, 9H).
Стадия B: Получение промежуточного соединения 7B-2
[0419] К перемешиваемому раствору трет-бутил 4-((3-нитро-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-ил)метил)бензоата (1,32 г, 3,57 ммоль) в 27 мл ДХМ добавляли 4M HCl (9 мл, 36,0 ммоль) в диоксане при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили в вакууме, получая твердое вещество светло-желтого цвета, которое применяли непосредственно без дальнейшей очистки. 1H ЯМР (CD3OD) δ 9,33 (d, J=2,5Гц, 1H), 8,53 (d, J=2,5Гц, 1H), 8,19 (d, J=8,0Гц, 2H), 7,72 (d, J=8,0Гц, 2H), 4,82 (m, 2H), 4,66 (m, 2H), 4,61 (s, 2H), 3,44 (m, 2H).
Стадия C: Получение промежуточного соединения 7B-3
[0420] К перемешиваемому раствору 4-((3-нитро-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-ил)метил)бензойной кислоты дигидрохлорида (1,28 г, 3,32 ммоль), (9H-флуорен-9-ил)метил(2-аминоэтил)карбамат гидрохлорид (1,060 г, 3,32 ммоль) и диизопропилэтиламин (4,65 мл, 26,6 ммоль) в 30 мл ДХМ, охлажденного на ледяной бане, добавляли по каплям 2,4,6-трипропил-1,3,5,2,4,6-триоксатрифосфинан 2,4,6-триоксид (T3P®; 3,0 мл, 5,0 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, до окончания охлаждающей бани. Реакционную смесь распределяли между насыщенным NaHCO3 и EtOAc. Водный слой экстрагировали EtOAc (2х) и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали, получая 2,2 г желаемого продукта в виде оранжево-красного твердого вещества.
Стадия D: Получение промежуточного соединения 7B-4
[0421] Смесь (9Н-флуорен-9-ил)метил (2-(4-((3-нитро-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-ил)метил)бензамидо)этил)карбамат (2,0 г, 3,5 ммоль) и железо (1,930 г, 34,6 ммоль) в уксусной кислоте (30 мл) / воде (3 мл) перемешивали при 50°C в течение 45 минут. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным NaHCO3 (90 мл) и EtOAc (90 мл). Осадок собирали, промывали водой и EtOAc и сушили в вакууме, получая 1,9 г желто-коричневого твердого вещества, которое суспендировали в 1:1 CH2Cl2/MeOH и абсорбировали на силикагеле. Очистка колоночной флэш-хроматографией (ISCO Золото 80 г; сухая загрузка, 0-50% B в градиенте CH2Cl2, B: 80:18:2 CH2Cl2/MeOH/конц. NH4OH) давала 1,12 г желаемого продукта в виде не совсем белого твердого вещества.
Стадия E: Получение промежуточного соединения 7B-5
[0422] К перемешиваемому раствору 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоновой кислоты (350 мг, 0,815 ммоль) в ДМФА (5 мл) при комнатной температуре добавляли HATU (341 мг, 0,896 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 минут перед добавлением 669 мг (1,22 ммоль) (9Н-флуорен-9-ил)метил (2-(4-((3-амино-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-ил)метил)бензамидо)этил)карбамат в ДМФА (11 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 35 минут перед добавлением 0,427 мл (2,44 ммоль) основания Хунига. Полученный желтый раствор перемешивали в течение 18 часов, затем концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (ISCO Золото 40 г; сухая загрузка, 0-50% B в градиенте CH2Cl2, B: 80:18:2 CH2Cl2/MeOH/конц. NH4OH), получая 435 мг желаемого продукта в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия F: Получение промежуточного соединения 7B-6
[0423] К перемешиваемому раствору трет-бутил (8-((6-(4-((2-((((9H-флуорен-9-ил)метокси)карбонил)амино)этил)карбамоил)бензил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)карбамоил)-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-2-ил)карбамат (435 мг, 0,454 ммоль) в 3,6 мл ДМФА добавляли 0,90 мл (9,1 ммоль) пиперидина при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа, затем концентрировали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (ISCO золото 24 г, 0-50% B в градиенте CH2Cl2, B: 80:18:2 CH2Cl2/MeOH/конц. NH4OH), получая 241 мг желаемого продукта в виде твердого вещества светло-желтого цвета.
Стадия G: Получение соединения-линкера 2.10.
[0424] К перемешиваемому раствору трет-бутил (8-((6-(4-((2-аминоэтил)карбамоил)бензил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)карбамоил)-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-2-ил)карбамат (80 мг, 0,109 ммоль) и основанию Хунига (0,057 мл, 0,326 ммоль) в ДМФА (3,4 мл) в атмосфере азота, охлажденного в ледяной бане по каплям добавляли раствор 4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил(4-нитрофенил)карбонат (80 мг, 0,109 ммоль) в ДМФА (2 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи, до окончания охлаждающей бани. Затем реакционную смесь концентрировали и остаток нейтрализовали насыщенным NaHCO3 и очищали колонкой с обращенной фазой (золото C18 30 г; 5-60% CH3CN в воде, без ТФУ). Фракции объединяли, концентрировали, получая 100 мг желтоватого твердого вещества, которое непосредственно растворяли в 50 мл ДХМ и обрабатывали 10 мл ТФУ. Полученный раствор перемешивали в течение 1 часа, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили в вакууме, нейтрализовали насыщенным NaHCO3 и очищали колоночной хроматографией с обращенной фазой (ISCO Золото C18 30 г; 5-70% MeCN в градиенте воды, без ТФУ). Основные фракции объединяли и лиофилизировали с получением 22 мг не совсем белого твердого вещества. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,67 (d, J=2,5Гц, 1H), 7,91 (d, J=2,5Гц, 1H), 7,80 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,69 (d, J=2,5Гц, 1H), 7,58-7,50 (m, 5H), 7,45 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,26 (d, J=8,5Гц, 2H), 6,89 (s, 1H), 6,77 (s, 2H), 5,04 (s, 2H), 4,90 (m, 1H), 4,14 (d, J=7,5Гц, 1H), 3,81 (s, 2H), 3,69 (s, 2H), 3,51-3,40 (m, 8H), 3,34 (m, 2H), 3,22 (m, 1H), 3,11 (m, 2H), 2,97 (m, 2H), 2,90 (m, 3H), 2,25 (t, J=7,5Гц, 2H), 2,06 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,75-1,52 (m, 12H), 1,28 (m, 2H), 0,95 (t, J=7,5Гц, 6H), 0,89 (bs, 6H). ЖХ-МС (M+H) = 1235,9.
[0425] Пример 7C: Получение 4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил (2-(4-((3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил))-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-7,8-дигидро -1,6 нафтиридин-6(5H)-ил)метил)бензамидо)этил)карбамат (соединение-линкер 2.11)
Стадия A: Получение Соединения-Линкера 2.11.
[0426] Раствор 84,5 мг (0,115 ммоль) трет-бутил (8-((6-(4-((2-аминоэтил)карбамоил)бензил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)карбамоил)-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-2-ил)карбамат из вышеуказанной стадии F, 2,5-диоксопирролидин-1-ил 4-((2,5-диоксо-2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил)метил)циклогексан-1-карбоксилат (38,3 мг, 0,115 ммоль) и основание Хунига (0,040 мл, 0,229 ммоль) в ДХМ (2,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрировали досуха и остаток очищали колоночной хроматографией с обращенной фазой (ISCO Золото C18 100 г, 5-70% MeCN в водном градиенте, без ТФУ). Желаемые фракции объединяли и концентрировали, получая 79 мг желаемого продукта в виде желтого твердого вещества, которое затем растворяли в 2,5 мл ДХМ при комнатной температуре и затем обрабатывали ТФУ (500 мкл, 6,49 ммоль). Через 1 ч реакционную смесь концентрировали, остаток сушили в вакууме, нейтрализовали насыщенным NaHCO3 и очищали колоночной хроматографией с обращенной фазой (ISCO Золото C18 100 г; 5-60% MeCN в градиенте воды, без ТФУ). Основные фракции объединяли и концентрировали. Остаток лиофилизировали из смеси MeCN/вода, получая 25 мг желаемого продукта в виде не совсем белого твердого вещества. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,67 (d, J=2,5Гц, 1H), 7,91 (d, J=2,5Гц, 1H), 7,80 (d, J=8,0Гц, 1H), 7,68 (d, J=2,5Гц, 1H), 7,55 (dd, J=2,0, 8,0Гц, 1H), 7,53 (d, J=8,0Гц, 2H), 7,45 (d, J=8,0Гц, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,77 (s, 2H), 4,57 (s, 1H), 3,81 (s, 2H), 3,49-3,38 (m, 8H), 3,00 (m, 2H), 2,90 (m, 2H), 2,84 (m, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,70-1,58 (m, 8H), 1,39 (m, 2H), 1,0-0,89 (m, 10H). ЖХ-МС (M+H) = 856,8.
[0427] Пример 7D: Получение перфторфенил 4-((3-((2-(4-((3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-ил)метил)бензамидо)этил)тио)-2,5-диоксопирролидин-1-ил)метил)циклогексан-1-карбоксилат соль Трис ТФУ (Соединение-Линкер 2.12)
Получение Соединения-Линкера 2.12.
[0428] Раствор 2-амино-N4,N4-дипропил-N8-(6-(4-((2-(пиридин-2-илдисульфанил)этил)карбамоил)бензил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-3-ил)-3Н-бензо[b]азепин-4,8-дикарбоксамид (100 мг, 0,090 ммоль) (соль три-ТФУ) и 3,3',3''-фосфантриилтрипропионовая кислота гидрохлорид (38,9 мг, 0,136 ммоль) в 3 мл смеси 1:1 ацетонитрил / вода перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Реакционную смесь концентрировали в вакууме досуха с получением промежуточного соединения 7D-1 желтого пенистого твердого вещества, которое применяли непосредственно без дальнейшей очистки. Это промежуточное соединение превращали в конечное соединение-линкер 2,12 в соответствии со схемой выше. 1H ЯМР (CD3OD) δ 8,77 (d, J=2,0Гц, 1H), 8,22 (d, J=2,5Гц, 1H), 8,00-7,95 (m, 3H), 7,10 (s, 1H), 4,57 (bs, 2H), 4,47 (bs, 2H), 4,11 (dd, J=9,0, 3,5Гц, 1H), 3,76-3,62 (m, 3H), 3,45-3,35 (m, 4H), 3,40-3,35 (m, 4H), 3,24-3,18 (m, 4H), 2,98 (m, 1H), 2,71 (m, 1H), 2,54 (d, J=3,5Гц, 0,5H), 2,50 (d, J=3,5Гц, 0,5H), 2,15 (m, 2H), 1,83-1,79 (m, 2H), 1,74-1,64 (m, 6H), 1,55-1,45 (m, 2H), 1,17-1,10 (m, 2H), 0,96 (bs, 3H), 0,91 (bs, 3H). ЖХ-МС (M+H) = 1057,7.
[0429] Пример 7E: Получение соли ТФУ 4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил 3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-7-метокси-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-карбоксилат (соединение-линкер 2.14)
[0430] Получен способом, аналогичным соединению 1.1, с применением 2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоновой кислоты и коммерчески доступного трет-бутил 3-амино-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-карбоксилата (CAS № 355819-02-2).
1H ЯМР (ДМСО-d6) δ 12,1 (s, 1H), 10,4 (s, 1H), 10,0 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 8,73 (d, J=2,4Гц, 1H), 8,08 (d, J=7,6Гц, 2H), 7,80 (d, J=8,8Гц, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,60 (d, J=8,4Гц, 2H), 7,41 (s, 1H), 7,34 (d, J=8,8Гц, 2H), 7,03 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,99 (bs, 1H), 5,07 (s, 2H), 4,65 (m, 4H), 4,40 (m, 2H), 4,21 (m, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,74 (bt, 2H), 3,37 (t, J=6,8Гц, 5H), 3,29 (s, 2H), 3,11-2,95 (m, 4H), 2,22-1,95 (m, 4H), 1,60-1,15 (m, 12H), 0,88 (d, J=7,0Гц, 6H), 0,82 (d, J=7,0Гц, 6H). ЖХ-МС [M+H] = 1090,5. 19F ЯМР (ДМСО-d6) d -74,5.
[0431] Пример 7F: Получение 4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил 3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-7-метокси-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-карбоксилат (соединение-линкер 2.15)
[0432] Получен способом, аналогичным соединению 1.1, начиная с 2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-7-метокси-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоновой кислоты.
[0433] Пример 7G: Получение 4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил 3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-7-фтор-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-карбоксилат (соединение-линкер 2.16)
[0434] Получен способом, аналогичным соединению 1.1, начиная с 2-амино-4-(дипропилкарбамоил)-7-фтор-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоновой кислоты.
[0435] 1H ЯМР (ДМСО-d6) δ 12,2 (s, 1H), 10,8 (s, 1H), 10,0 (s, 1H), 9,89 (s, 1H), 9,27 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,08 (d, J=2,4Гц, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,80 (d, J=8,8Гц, 2H), 7,70-7,64 (m, 2H), 7,60 (d, J=8,4Гц, 1H), 7,34 (d, J=8,8Гц, 2H), 7,02 (s, 1H), 7,00 (s, 2H), 5,99 (bs, 1H), 5,07 (s, 2H), 4,65 (m, 4H), 4,40 (m, 2H), 4,21 (m, 2H), 3,73 (bt, 2H), 3,36 (m, 5H), 3,29 (s, 2H), 3,11-2,95 (m, 4H), 2,22-1,95 (m, 4H), 1,60-1,15 (m, 12H), 0,88 (d, J=7,0Гц, 6H), 0,82 (d, J=7,0Гц, 6H). ЖХ-МС [M+H] = 1079,5.
[0436] Пример 7F: Получение 4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)гексанамидо)-3-метилбутанамидо)-5-уреидопентанамидо)бензил (3-(4-((3-(2-амино-4-(дипропилкарбамоил))-3Н-бензо[b]азепин-8-карбоксамидо)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5H)-ил)метил)бензамидо)-2,2-дифторпропил)карбамат (соединение-линкер 2.17)
[0437] Получено способом, аналогичным соединению 1.1.
[0438] В таблице 2 показаны соединения-линкеры с 2.1 по 2.21.
Пример 8
Получение конъюгатов антитела и бензазепина
[0439] Протокол получения конъюгатов антитела и бензазепина
[0440] mAb (155 мг, 35,57 мл, 4,38 мг/мл в PBS) перемещали в HEPES (100 мМ, pH 7,0, 1 мМ DTPA) посредством фильтрования на центрифуге с отсечением по молекулярной массе компонентов (Millipore, 30 кДа). Полученный раствор mAb переносили в коническую пробирку объемом 50 мл (31,873 мл по массе). Концентрация mAb была определена как 4,39 мг/мл по A280 (общее содержание mAb составляло 140 мг, 3 мг отбирали для аналитических применений). К раствору mAb добавляли TCEP (2,0 экв., 1,85 мл, 1 мМ сток) при комнатной температуре и полученную смесь инкубировали при 37°C в течение 1 часа при осторожном встряхивании. После охлаждения до комнатной температуры в реакционную пробирку добавляли мешалку. При перемешивании к реакционной смеси по каплям добавляли ДМА (10% по объему, 3,0 мл). Соединение-линкер 2.1 (7,0 экв., 647 мкл, 10 мМ ДМА) добавляли по каплям и полученную реакционную смесь оставляли перемешиваться при температуре окружающей среды в течение 30 минут, и затем N-этилмалеимид (3,0 экв., 100 мМ ДМА, 28 мкл). После дополнительных 15 минут перемешивания добавляли цистеин (6,0 экв., 50 мМ HEPES, 111 мкл). Неочищенный конъюгат затем перемещали в PBS и очищали препаративной эксклюзионной хроматографией по размеру (HiLoad 26/600, Superdex 200pg) с применением PBS в качестве подвижной фазы. Чистые фракции концентрировали с помощью фильтрования на центрифуге с отсечением по молекулярной массе компонентов (Millipore, 30 кДа), стерильно фильтровали и переносили в конические пробирки объемом 15 мл. Соотношения конструкции антитело и лекарственного средства (молярные соотношения) определяли способами, описанными в примере 9.
Пример 9
Общий способ определения соотношения лекарственное средство-антитело
Хроматография с гидрофобным взаимодействием
[0441] 10 мкл раствора 6 мг/мл конъюгата впрыскивали в систему ВЭЖХ с колонкой TOSOH TSKgel Butyl-NPR TM для хроматографии с гидрофобным взаимодействием (HIC) (размер частиц 2,5 мкм, 4,6 мм х 35 мм). Затем в течение 18 минут начинали способ, в котором градиент подвижной фазы составлял от 100% подвижной фазы A до 100% подвижной фазы B в течение 12 минут, после чего следовало шестиминутное повторное уравновешивание при 100 % подвижной фазы А. Скорость потока составляла 0,8 мл/мин, и детектор был установлен на 280 нМ. Подвижная фаза А представляла собой 1,5 М сульфат аммония, 25 мМ фосфат натрия (рН 7). Подвижная фаза В представляла собой 25% изопропанол в 25 мМ фосфате натрия (рН 7). После запуска хроматограмму интегрировали и молярное соотношение определяли суммированием площади взвешенного пика.
Масс-спектрометрия
[0442] Один микрограмм конъюгата впрыскивали в ЖХ/МС, такой как Agilent 6550 iFunnel Q-TOF, оснащенный источником Agilent Dual Jet Stream ИЭР, соединенным с системой Agilent 1290 Infinity UHPLC. Необработанные данные получали и проводили деконволюцию с помощью программного обеспечения, такого как программное обеспечение для качественного анализа Agilent MassHunter, с BioConfirm с применением алгоритма деконволюции максимальной энтропии. Среднюю массу интактных конъюгатов иммуностимулирующего соединения и конструкции на основе антитела рассчитывали с помощью программного обеспечения, в котором для расчета применяли высоту верхнего пика при 25%. Эти данные затем импортировали в другую программу для расчета молярного соотношения конъюгата, такую как калькулятор молярного отношения Agilent.
Пример 10
Анализ репортерного гена TLR7/TLR8
Материалы и общие способы
[0443] Линии репортерных клеток (а именно, HEK-Blue Null1, HEK-Blue hTLR7 и HEK-Blue hTLR8) получены от InvivoGen. Клетки пересаживают/выращивают/хранят в жидком азоте в соответствии с инструкцией поставщика. Клетки обычно делятся два раза в неделю в ростовой среде DMEM с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки, 1X NEAA, 1 мМ пирувата, 2 мМ глютамина, 50 мкг/мл пенициллина, 50 ед/мл стрептомицина (каждый от Gibco) в присутствии следующих антибиотиков, как показано в таблице 3:
| Таблица 3: | |||
| Репортерные клеточные линии, обработанные антибиотиками | |||
| Клеточная линия | Зеоцин | Нормоцин | Бластицидин |
| HEK-Blue Null1 | 100 мкг/мл | 100 мкг/мл | Нет данных |
| HEK-Blue hTLR7 | 100 мкг/мл | 100 мкг/мл | 10 мкг/мл |
| HEK-Blue hTLR8 | 100 мкг/мл | 100 мкг/мл | 30 мкг/мл |
Общий способ скрининга малых молекул in vitro
[0444] Испытуемые образцы (в требуемых концентрациях, разведенных в DMEM) добавляли в 96-луночный планшет для анализа, 20 мкл на лунку. Репортерные клетки собирали из флаконов для тканевых культур путем инкубации в PBS при 37°C в течение двух минут после удаления среды из флакона и промывания клеток PBS. Клетки подсчитывали и разбавляли в среде HEK-Blue Detection при 0,22 × 106 клеток/мл. Затем 180 мкл клеток добавляли в планшет для анализа, содержащий 20 мкл тестируемых образцов, и инкубировали в течение 17 часов при 37°C в инкубаторе с увлажнением с 5% CO2. Оптическую плотность при 640 нм анализировали с применением планшет-ридера Envision (Perkin Elmer). Как описано в Таблице 4, соединения по настоящему изобретению со значением ЕС50 менее 500 нМ обладают активностью "А", от 500 нМ до 1 мкМ обладают активностью "В" и более 1 мкМ имеют активность "С".
| Таблица 4: | ||
| Скрининг малых молекул in vitro | ||
| Соединение | TLR8 EC50 | TLR7 EC50 |
| 1.15 | A | C |
| 1.16 | B | C |
| 1.17 | A | C |
| 1.18 | C | C |
Пример 11
Анализ скрининга МКПК
Материалы и общие способы
[0445] Мононуклеарные клетки периферической крови человека (МКПК) получали от BenTek, замораживали при 25 × 106 клеток/мл в 10% ДМСО (Sigma), приготовленном в фетальной бычьей сыворотке (Gibco), и хранили в жидком азоте. Для культивирования МКПК быстро размораживали на водяной бане при 37°С и разбавляли предварительно нагретым RPMI 1640 (Lonza) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки, 2 мМ глютамина, 50 мкг/мл пенициллина, 50 ед/мл стрептомицина (все от Gibco) и центрифугировали в течение 5 минут при 500 g. МКПК суспендировали в ростовой среде, описанной выше, и культивировали при концентрации 1 × 106 клеток на мл при 37°С в 5% CO2-инкубаторе.
Общий способ скрининга малых молекул in vitro
[0446] МКПК размораживали, суспендировали в концентрации 1 × 106 клеток/мл в ростовой среде и аликвотировали по 200 мкл в каждую лунку 96-луночного планшета для общего количества 0,2 × 106 клеток на лунку. МКПК инкубировали в течение от 16 до 18 часов при 37°С в инкубаторе с увлажнением с 5% CO2. На следующий день планшеты с МКПК центрифугировали при 500 × g в течение 5 минут и ростовую среду удаляли. 150 мкл из двенадцати концентраций в диапазоне от 1000 до 0,000238 нМ малых молекул, полученных в ростовой среде, добавляли в МКПК в двух экземплярах и инкубировали в течение 24 часов при 37°С в 5% CO2-инкубаторе. Перед сбором супернатанта клетки центрифугировали при 500 × g в течение 5 минут для удаления клеточного дебриса. Активность TNF-α оценивали в супернатанте с помощью ELISA (eBioscience) или HTRF (CisBio) согласно инструкциям производителя. Оптическую плотность при 450 нм и 570 нм (ELISA) или люминесценцию (HTRF) анализировали с применением планшет-ридера Envision (Perkin Elmer), как показано в таблице 5. Соединения по настоящему изобретению со значением EC50 менее 500 нМ имеют активность "A", от 500 нМ до 1 мкМ имеют активность"B", а от 1 мкМ до 3 мкМ имеют активность"C".
| Таблица 5: | |
| Скрининг малых молекул in vitro | |
| Соединение | EC50 (нМ) |
| 1.1 | A |
| 1.2 | A |
| 1.3 | A |
| 1.4 | A |
| 1.5 | A |
| 1.7 | A |
| 1.12 | A |
| 1.13 | A |
| 1.14 | A |
| 1.21 | A |
| 1.22 | A |
| 1.23 | A |
| 1.24 | A |
| 1.25 | A |
| 1.26 | A |
| 1.27 | A |
| 1.28 | A |
| .29 | A |
| 1.30 | A |
| 1.31 | A |
| 1.32 | A |
| 1.33 | A |
| 1.34 | A |
| 1.35 | A |
| 1.36 | A |
| 1.37 | A |
| 1.38 | A |
| 1.39 | A |
| 1.47 | B |
| 1.48 | A |
| 1.49 | B |
| 1.50 | A |
| 1.51 | C |
| 1.56 | C |
| 1.57 | A |
| 1.58 | B |
| 1.62 | B |
| 1.63 | B |
Пример 12
Иммуностимулирующие конъюгаты индуцируют продукцию TNFα МКПК
[0447] Этот пример показывает, что иммуностимулирующие конъюгаты могут увеличивать продукцию провоспалительного цитокина, TNFα, МКПК в присутствии опухолевых клеток.
[0448] МКПК выделяли из крови человека, как описано выше. Кратко, МКПК выделяли центрифугированием в градиенте фиколла, ресуспендировали в RPMI и высевали в 96-луночные планшеты для микротитрования с плоским дном (125000/лунку). Затем добавляли антиген-экспрессирующие опухолевые клетки (25000/лунку) вместе с титрующими концентрациями конъюгатов или неконъюгированных родительских антител в качестве контролей. После культивирования в течение ночи супернатанты собирали и уровни TNFα определяли с помощью AlphaLISA.
[0449] Ссылаясь на фиг. 1, опухолевые клетки SKBR3 добавляли в МКПК, полученные, как описано выше. Опухолевые клетки SKBR3 экспрессируют опухолевый антиген HER2. Добавляли конъюгаты анти-HER2 и TLR8-агониста бензазепина, как моноспецифичные, так и биспецифичные с CD40, и конъюгированные с различными TLR8-агонистами бензазепина. Конъюгаты и соединения-линкеры в них, применяемые в исследовании, описаны в таблице 6.
| Таблица 6: | |
| Типичные конъюгаты и их соединения-линкеры | |
| Конъюгат | Соединение-линкер |
| Конъюгат 1, Конъюгат DD, Конъюгат FF, Конъюгат C | Соединение-линкер 2.10 |
| Конъюгат 2, Конъюгат CC, Конъюгат EE, Конъюгат B | Соединение-линкер 2.8 |
| Конъюгат 3, Конъюгат F | Соединение-линкер 2.7 |
| Конъюгат 6, Конъюгат (Фигура 3), Конъюгат H Конъюгат I, агонист TLR 8 (Фигуры 5 и 6) | Соединение-линкер 2.2 |
| Конъюгат AA, Конъюгат BB, Конъюгат A | Соединение-линкер 2.1 |
| Конъюгат GG, Конъюгат BB | Соединение-линкер 2.21 |
| Конъюгат D | Соединение-линкер 2.11 |
| Конъюгат E | Соединение-линкер 2.9 |
| Конъюгат G | Соединение-линкер 2.17 |
[0450] Продукцию TNFα измеряли через 24 часа. Все конъюгаты были активными, стимулируя выработку TNFα в зависимости от дозы. Напротив, неконъюгированное антитело к HER2 (HER2 G1WT) и биспецифическое антитело к HER2 × CD40 (HER2 × CD40) не стимулировали продукцию TNFα.
[0451] Ссылаясь на фиг. 2, аналогичное исследование было выполнено с применением конъюгатов против TROP2. Конъюгат(ы) и его соединения-линкеры, применяемые в исследовании, проиллюстрированы в таблице 6. Антитела к TROP2, конъюгированные с различными нагрузками, стимулировали выработку TNFα в присутствии МКПК, в то время как неконъюгированное контрольное антитело не стимулировало.
Пример 13
Иммуностимулирующие конъюгаты индуцируют продукцию TNFα моноцитами
[0452] Этот пример показывает, что иммуностимулирующие конъюгаты могут увеличивать продукцию провоспалительного цитокина, TNFα, моноцитами в присутствии опухолевых клеток.
[0453] Моноциты получали следующим образом: МКПК выделяли из нормальной крови человека способом очистки фиколлом, а моноциты обогащали из МКПК способом применения стволовых клеток человеческого моноцита без наборов для негативного отбора с истощением CD16 в соответствии с инструкциями производителя. Моноциты затем медленно замораживали и хранили в жидком азоте. Перед анализом моноциты размораживали и оставляли на ночь при 37°C в 5% CO2 в аналитической среде (среда RPMI 1640 с добавлением 10% FBS, 50 мкг/мл пенициллина, 50 ед/мл стрептомицина, 1 мМ HEPES, 1X неосновных аминокислот кислоты, 0,1 мМ пирувата натрия). На следующий день моноциты высевали по 4 × 104 клеток/лунку с опухолевыми клетками или без них по 4 × 104 клеток/лунку в 96-луночные планшеты с плоским дном в аналитической среде, описанной выше. После культивирования в течение ночи супернатанты собирали и уровни TNFα определяли с помощью AlphaLISA.
[0454] Ссылаясь на фиг. 3, определяли активность конъюгата CEA и бензазепинового агониста TLR8 на CEA-экспрессирующих клетках CHO и на контрольных, неэкспрессирующих CEA клетках. Антитело к СЕА (СЕА-G1 WT), антитело к HER2 (антитело HER2-G1 WT) и конъюгат HER2 (конъюгат HER2-G1 WT) применяли в качестве контролей. Конъюгат и соединение-линкер в нем, которые применяли в исследовании, описаны в таблице 6. Обращаясь к фигуре, только СЕА-конъюгат проявлял активность, измеренную по продукции TNFα, в присутствии моноцитов и опухолевых клеток. Антитела и конъюгаты не стимулировали продукцию TNFα в присутствии клеток CHO, не экспрессирующих детектируемый HER2 или CEA.
[0455] Ссылаясь на фиг. 4, опухолевые клетки SKCO-1 добавляли к моноцитам, полученным, как описано выше. Клетки SKCO-1 экспрессируют опухолевый антиген CEA. Добавляли конъюгаты анти-СЕА и беназепинового агониста TLR8, либо моноспецифичные, либо биспецифичные с CD40, и конъюгированные с агонистом TLR8. Конъюгаты и соединения-линкеры в них, которые были применены в исследовании, описаны в таблице 6. Продукцию TNFα измеряли через 24 часа. Оба конъюгата были активными, стимулируя выработку TNFa в зависимости от дозы. Примечательно, что специфический конъюгат CEA × CD40 был более активным. Напротив, неконъюгированное антитело к CEA (CEA-G1 WT) и биспецифическое антитело к CEA × CD40 (CEA × CD40) не стимулировали продукцию TNFα.
[0456] Ссылаясь на фиг. 5, другое исследование было выполнено с применением анти-TROP2 конъюгата и десяти различных клеточных линий, экспрессирующих различные уровни TROP2. Применяемые в исследовании конъюгаты и соединение-линкер описаны в таблице 6. Как показано на фигуре, активность конъюгатов TROP2 и бензазепинового агониста TLR8, измеренная по продукции TNFα, варьируется в зависимости от дозы и, как правило, в соответствии с уровнем экспрессии TROP2 клеточной линией. Контрольная клеточная линия, wt-CHO, не экспрессирует обнаруживаемые уровни TROP2, и при применении этой клеточной линии было обнаружено небольшое продуцирование TNFα.
Пример 14
Иммуностимулирующие конъюгаты индуцируют продукцию TNFα макрофагами
[0457] Этот пример показывает, что иммуностимулирующие конъюгаты могут увеличивать продукцию провоспалительного цитокина, TNFα, макрофагами в присутствии опухолевых клеток.
[0458] Макрофаги получали следующим образом. Моноциты выделяли из мононуклеарных клеток периферической крови человека (МКПК) с применением отрицательного отбора на основе магнитных микроносителей и культивировали в течение 7 дней в присутствии GM-CSF для образования макрофагов. Макрофаги высевали в 96-луночные планшеты для микротитрования с плоским дном (40000/лунку). Затем добавляли антиген-экспрессирующие опухолевые клетки (40000/лунку) вместе с титрующими концентрациями конъюгатов или неконъюгированных родительских антител в качестве контролей. После культивирования в течение ночи супернатанты собирали и уровни TNFα определяли с помощью AlphaLISA. Ссылаясь на фиг. 6, исследование проводили с применением конъюгата против TROP2 и десяти различных клеточных линий, экспрессирующих различные уровни TROP2. Применяемые в исследовании конъюгаты и соединение-линкер показаны в таблице 6. Как показано на фигуре, активность конъюгатов TROP2 и бензазепинового агониста TLR8, измеренная по продукции TNFα, варьировалась в зависимости от дозы и обычно в соответствии с уровнем экспрессии TROP2 клеточной линией. Контрольная клеточная линия, wt-CHO, не экспрессирует обнаруживаемые уровни TROP2, и при применении этой клеточной линии было обнаружено небольшое продуцирование TNFα.
Пример 15
Иммуностимулирующие конъюгаты индуцируют продукцию TNFα МКПК
[0459] Этот пример показывает, что иммуностимулирующие конъюгаты могут увеличивать продукцию провоспалительного цитокина, TNFα (TNFα), МКПК в присутствии различных линий опухолевых клеток.
[0460] МКПК выделяли из крови человека, как описано выше. Кратко, МКПК выделяли центрифугированием в градиенте фиколла, ресуспендировали в RPMI и высевали в 96-луночные планшеты для микротитрования с плоским дном (125000/лунку). Затем добавляли антиген-экспрессирующие опухолевые клетки (25000/лунку) вместе с титрующими концентрациями конъюгатов или неконъюгированных родительских антител в качестве контролей. После культивирования в течение ночи супернатанты собирали и уровни TNFα определяли с помощью AlphaLISA.
[0461] Моноклональные антитела против TROP2 (aTROP2) или против HER2 (aHER2) конъюгировали с различными бензазепиновыми агонистами TLR8, присоединенными к линкерам. Соединения линкера-бензазепинового агониста TLR8 идентифицируются по номеру соединения и относятся к соединениям в приведенных выше примерах.
[0462] Ссылаясь на фиг. 7, конъюгаты aTROP2 и контрольное антитело aTROP2 добавляли к опухолевым клеткам SKBR3 (экспрессирующим высокие уровни TROP2). Все конъюгаты были активными, стимулируя продукцию TNFα МКПК в присутствии антиген-положительных опухолевых клеток. Контрольное антитело не стимулировало продукцию TNFα.
[0463] Ссылаясь на фиг. 8, конъюгаты aTROP2 и контрольное антитело aTROP2 добавляли к опухолевым клеткам MCF7 (экспрессирующим умеренные уровни TROP2). Конъюгаты были активными, стимулируя продукцию TNFα МКПК, хотя активность варьировалась в зависимости от соединения, присоединенного к антителу. Контрольное антитело не стимулировало продукцию TNFα.
[0464] Ссылаясь на фиг. 9, конъюгаты aHER2 и контрольное антитело aHER2 добавляли к опухолевым клеткам NCI-N87 (экспрессирующим высокие уровни HER2). Все конъюгаты были активными, стимулируя продукцию TNFα МКПК в присутствии антиген-положительных опухолевых клеток. Контрольное антитело не стимулировало продукцию TNFα.
[0465] Ссылаясь на фиг. 10, конъюгаты aHER2 и контрольное антитело aHER2 добавляли к опухолевым клеткам MDA-MB-453 (экспрессирующим умеренные уровни HER2). Все конъюгаты были активными, стимулируя продукцию TNFα МКПК, хотя активность варьировалась в зависимости от соединения, присоединенного к антителу. Контрольное антитело не стимулировало продукцию TNFα.
Пример 16
Антиген-зависимая активация моноцитов конъюгатом TROP2-бензазепинового TLR8 на мышиной модели
[0466] Этот пример показывает, что конъюгат антитела к TROP2, присоединенного к бензазепиновому агонисту TLR8, может активировать человеческие моноциты на мышиной модели.
[0467] Моноциты человека получали, как описано выше. Клетки Trop2+ MDA-MB-453 или Trop2- MiaPaca2 культивировали стандартными способами. Бензазепиновую линкерную нагрузку (LP) TLR8 получали присоединением линкера MCC (N-малеимидометил]циклогексан-1-карбоксилат) вместо линкера mc-vc-PABA в соединении-линкере 2.1 с образованием соединения-линкера 2.22. Конъюгаты TROP2-бензазепинового TLR8 получали путем конъюгации соединения-линкера 2.22 с антителом к TROP2 (сацитузумаб) с образованием конъюгата со средним значением DAR около 4.
[0468] В день 1 мышам NOD SCID инъецировали 5 × 105 клеток Trop2+ MDA-MB-453 или клеток Trop2- MiaPaca2. Спустя 7-10 дней, когда размер опухоли достигал примерно 300 мм3, мышам внутривенно вводили 5-20 мг/кг конъюгата TROP2-бензазепинового TLR8 или одного антитела к TROP2. Шестнадцать часов спустя 106 человеческих моноцитов вводили внутрь опухоли. Через четыре-шесть часов опухоли собирали и определяли. Моноциты идентифицировали путем окрашивания маркеров клеточной поверхности, а активацию моноцитов определяли путем внутриклеточного окрашивания IL-6.
[0469] У мышей, имеющих опухоль TROP2+ и получавших конъюгат бензазепинового агониста TLR8 и TROP2, человеческие моноциты были активированы. Напротив, у мышей, имеющих опухоль TROP2-, конъюгат бензазепинового агониста TLR8 и TROP2 не вызывал активацию моноцитов человека. Аналогично, контрольное антитело само по себе не вызывало активации моноцитов человека ни в одной из моделей.
1. Соединение, представленное структурой формулы (IIA)
,
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
представляет собой двойную связь,
L10 выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи L10 с R5,
L2 представляет собой -C(O)-,
каждый из R1 и R2 представляет собой водород,
R4 представляет собой -N(R10)2,
R5 выбран из С9-10 бициклического карбоцикла и 9-10-членного конденсированного 5-6 или конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, содержащего 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и бора, где R5 необязательно замещен, и где заместители независимо выбраны в каждом случае из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)OR10, =O и -CH3, необязательно замещенного -N(R10)2 или фенилом, необязательно замещенным -C(O)N(R10)2, и
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -C(O)OCH2C6H5 и C1-6 алкила, необязательно замещенного галогеном, -NH2, -NHC(O)OCH2C6H5 или фенилом.
2. Соединение по п. 1, где соединение или соль формулы (IIA) выбраны из:
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
и
и соли любого из них.
3. Соединение по п. 1, где соединение или соль формулы (IIA) выбраны из: ,
,
,
,
,
,
и соли любого из них.
4. Соединение, представленное структурой формулы (IIB)
,
или его фармацевтически приемлемая соль, где:
L10 выбран из -C(O)- и -C(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи L10 с R5-,
L2 представляет собой -C(O)-,
каждый из R1 и R2 представляет собой водород,
R4 представляет собой -N(R10)2,
R5 выбран из С9-10 бициклического карбоцикла и 9-10-членного конденсированного 5-6 или конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, содержащего 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и бора, где R5 необязательно замещен и где заместители независимо выбраны в каждом случае из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)OR10, =O и CH3, необязательно замещенного -N(R10)2 или фенилом,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -C(O)OCH2C6H5 и C1-6 алкила, необязательно замещенного фенилом,
R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена и -OR10 и
каждый из R24 и R25 представляет собой водород.
5. Соединение по п. 4, где
(а) R20, R21, R22 и R23 независимо выбраны из водорода, галогена и -OR10, или
(b) каждый из R24 и R25 представляет собой водород, или
(с) каждый из R1 и R2 представляет собой водород, или
(d) L10 представляет собой -C(O)N(R10)-*, необязательно, где R10 в -C(O)N(R10)-* представляет собой водород, или
(e) R5 представляет собой необязательно замещенный 9-10-членный бициклический карбоцикл, или
(f) R5 представляет собой 9-10-членный бициклический карбоцикл, необязательно замещенный одним или более заместителями, независимо выбранными из -OR10, -N(R10)2 и =O, необязательно, где R5 представляет собой необязательно замещенный индан и необязательно замещенный тетрагидронафталин, или
(g) R5 выбран из необязательно замещенного 9-10-членного конденсированного 5-6 или конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, содержащего 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и бора, или
(h) R5 выбран из тетрагидрохинолина, тетрагидроизохинолина, тетрагидронафтиридина, циклопентапиридина и дигидробензоксаборола, любой из которых является необязательно замещенным, необязательно, где заместители на R5 независимо выбраны в каждом случае из: -OR10, -N(R10)2, -C(O)OR10 и C1 алкила, необязательно замещенного -N(R10)2, или
(i) L2 представляет собой -C(O)-, или
(j) R4 представляет собой -N(R10)2, необязательно, где R10 в -N(R10)2 независимо выбран в каждом случае из необязательно замещенного C1-6 алкила, и дополнительно необязательно, где -L2-R4 представляет собой
6. Соединение по п. 4, где R5 выбран из необязательно замещенного 9-10-членного конденсированного 5-6 и конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, содержащего 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и бора, и где R5 необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из -C(O)OR10, -N(R10)2, -OR10 и необязательно замещенного C1 алкила.
7. Соединение по п. 6, где R5 представляет собой необязательно замещенный 10-членный конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и бора, необязательно, где конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл представляет собой необязательно замещенный пиридин-пиперидин, и дополнительно необязательно, где L10 связан с атомом углерода пиридина конденсированного пиридин-пиперидина.
8. Соединение по п. 4, где R5 выбран из необязательно замещенного 9-10-членного конденсированного 5-6 и конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, содержащего 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и бора, и где R5 не является замещенным.
9. Соединение по п. 4, где
L10 представляет собой -C(O)N(H)-*,
L2 представляет собой -C(O)-,
R1 и R2 представляют собой водород;
R4 представляет собой -N(R10)2, где R10 в -N(R10)2 независимо выбран в каждом случае из необязательно замещенного C1-6 алкила; и
R20, R21, R22, R23, R24 и R25 независимо выбраны из водорода.
10. Соединение по п. 9, где
(a) R5 представляет собой необязательно замещенный 9-10-членный бициклический карбоцикл; или
(b) R5 выбран из необязательно замещенного 9-10-членного конденсированного 5-6 или конденсированного 6-6 бициклического гетероцикла, содержащего 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и бора, необязательно, где R5 представляет собой необязательно замещенный 9-10-членный конденсированный 6-6 бициклический гетероцикл, содержащий 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и бора.
11. Конъюгат, представленный следующей формулой:
,
где Антитело представляет собой конструкцию на основе антитела, L3 представляет собой линкер и D представляет собой соединение, представленное структурой по любому из пп. 1-10.
12. Конъюгат, представленный следующей формулой:
,
где Антитело представляет собой конструкцию на основе антитела, L3 представляет собой линкер и D представляет собой соединение, представленное структурой формулы (IIIA)
,
или его фармацевтически приемлемую соль, где:
представляет собой двойную связь,
L11 представляет собой -C(O)N(R10)-*, где * обозначает место связи L11 с R6,
L2 представляет собой -C(O)-,
каждый из R1 и R2 представляет собой водород,
R4 представляет собой -N(R10)2,
R6 выбран из фенила и пиридила, любой из которых замещен R7,
R7 выбран из -C(O)NHNH2, -C(O)NH-C1-3алкилен-NH(R10), -C(O)CH3, -C1-3алкилен-NHC(O)OR11, -C1-3алкилен-NHC(O)R10, -C1-3алкилен-NHC(O)NHR10, -C1-3алкилен-NHC(O)-C1-3алкилен-R10 и 5-6-членного гетероцикла, выбранного из пирролидинила и пиперидинила, необязательно замещенного одним или более заместителями, независимо выбранными из R12,
R10 независимо выбран в каждом случае из водорода, -C(O)OCH2C6H5, C1-10 алкила, фенила и 5-10-членного гетероцикла, содержащего азот, каждый из которых необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из -NH2, -C(O)OCH2C6H5, -NHC(O)OCH2C6H5 и фенила,
R11 представляет собой фенил и
R12 независимо выбран в каждом случае из -OR10, -N(R10)2, -C(O)R10, -C(O)N(R10)2, -N(R10)C(O)R10, -C(O)OR10 и C1-10 алкила, замещенного фенилом, и
где конструкция на основе антитела специфически связывается с HER2, TROP2 или Liv-1 человека, и
где L3 связан с замещаемым азотом или кислородом соединения или соли формулы (IIIA).
13. Конъюгат по п. 12, где
(а) конструкция на основе антитела включает пертузумаб, трастузумаб, сацитузумаб, ладиратузумаб или их антигенсвязывающий фрагмент, необязательно, где среднее соотношение между лекарственным средством и антителом для композиции составляет от приблизительно 2 до приблизительно 8; или
(b) L3 ковалентно связан с замещаемым азотом соединения или соли формулы (IIIA).
14. Конъюгат по п. 12 или 13, где соединение или соль формулы (IIIA) выбраны из:
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
и
и соли любого из них.
15. Конъюгат по любому из пп. 11-14, где L3 представлен формулой
где L4 представляет собой С-конец пептида и L5 выбран из связи, алкилена и гетероалкилена,
где RX* содержит фрагмент пирролидин-2,5-дионила, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, или гидролизованный фрагмент пирролидин-2,5-дионила, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, и
где на RX* представляет собой точку присоединения к остатку в конструкции на основе антитела.
16. Конъюгат по п. 15, где RX* содержит фрагмент пирролидин-2,5-дионила, связанный с остатком в конструкции на основе антитела.
17. Конъюгат по любому из пп. 11-16, где каждый L3 присоединен к конструкции на основе антитела на остатке лизина или цистеина.
18. Конъюгат по любому из пп. 11-17, где L3 представляет собой нерасщепляемый линкер.
19. Конъюгат по любому из пп. 11-17, где L3 представляет собой расщепляемый линкер.
20. Конъюгат по п. 19, где L3 расщепляется лизосомальным ферментом.
21. Конъюгат по любому из пп. 11-20, где пептид в L3 содержит Val-Cit или Val-Ala.
22. Конъюгат по любому из пп. 11-14, где L3 представляет собой
,
где RX* содержит фрагмент пирролидин-2,5-дионила, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, или гидролизованный фрагмент пирролидин-2,5-дионила, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, где на RX* представляет собой точку присоединения к остатку в конструкции на основе антитела, и n равно 0-9.
23. Конъюгат по п. 22, где RX* содержит фрагмент пирролидин-2,5-дионила, связанный с остатком в конструкции на основе антитела.
24. Конъюгат по п. 22 или 23, где каждый L3 присоединен к конструкции на основе антитела на остатке лизина или цистеина.
25. Конъюгат по любому из пп. 22-24, где L3 присоединен, если позволяет валентность, к замещаемому атому азота в D.
26. Конъюгат по любому из пп. 23-25, где L3 присоединен, если позволяет валентность, к замещаемому атому кислорода в D.
27. Конъюгат по любому из пп. 11-26, где конструкция на основе антитела специфично связывается с опухолевым антигеном.
28. Конъюгат по любому из пп. 12-27, где соединение представляет собой соединение, выбранное из группы, состоящей из:
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
и
,
или их фармацевтически приемлемую соль.
29. Конъюгат по любому из пп. 12-27, где конъюгат включает соединение-линкер, выбранное из группы, состоящей из:
,
,
,
,
,
,
,
,
,
,
или их фармацевтически приемлемой соли.
30. Конъюгат или его соль, представленный формулой
,
где Антитело представляет собой конструкцию на основе антитела, содержащую HER2-антигенсвязывающий домен, и L3-D представляет собой "линкер-полезный груз", выбранный из группы, состоящей из:
,
,
,
,
,
,
и
,
где RX* представляет собой связь, сукцинимидный фрагмент или гидролизованный сукцинимидный фрагмент, связанный с остатком в конструкции на основе антитела, где на RX* представляет собой точку присоединения к остатку цистеина в конструкции на основе антитела.
31. Конъюгат или его соль по п. 30, где
(a) RX* представляет собой сукцинимидный фрагмент, необязательно, где RX* представляет собой гидролизованный сукцинимидный фрагмент; или
(b) конструкция на основе антитела представляет собой антитело, содержащее CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи, содержащиеся в вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи, содержащиеся в вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, в соответствии с индексом по Кабату; или
(c) конструкция на основе антитела представляет собой антитело, содержащее CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи, содержащиеся в вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи, содержащиеся в вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, в соответствии с индексом по Кабату; или
(d) антитело содержит антигенсвязывающий домен пертузумаба; или
(e) антитело содержит антигенсвязывающий домен трастузумаба.
32. Конъюгат или его соль по п. 30 или 31, где
(а) L3-D представляет собой
; или
(b) L3-D представляет собой
; или
(с) L3-D представляет собой
; или
(d) L3-D представляет собой
.
33. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью агониста TLR8, содержащая соединение по любому из пп. 1-10 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
34. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью агониста TLR8, содержащая конъюгат по любому из пп. 11-32 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
35. Фармацевтическая композиция по п. 33 или 34, где композиция составлена для подкожного или внутривенного введения.
36. Способ лечения рака, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп. 33-35.
37. Способ по п. 36, где рак включает острый лимфобластный лейкоз (ALL), острый миелоидный лейкоз, адренокортикальную карциному, астроцитому, базально-клеточную карциному, рак мочевого пузыря, опухоль костей, остеосаркому/злокачественную фиброзную гистиоцитому, рак мозга, опухоли головного мозга, церебеллярную астроцитому, злокачественную глиому, эпендимому, медуллобластому, опухоль зрительного пути, глиому гипоталамуса, глиому ствола мозга, рак молочной железы, бронхиальные аденомы/карциноиды, лимфому Беркитта, церебеллярную астроцитому, рак шейки матки, холангиокарциному, хондросаркому, хронический лимфолейкоз, хронический миелогенный лейкоз, хронические миелопролиферативные нарушения, рак толстой кишки, кожную Т-клеточную лимфому, рак эндометрия, эпендимому, рак пищевода, раки глаза, внутриглазную меланому, ретинобластому, рак желчного пузыря, глиому, волосатоклеточный лейкоз, рак головы и шеи, рак сердца, гепатоцеллюлярный (печеночный) рак, лимфому Ходжкина, гипофарингеальный рак, островковую клеточную карциному (эндокринная поджелудочная железа), саркому Капоши, рак почки (почечно-клеточный рак), рак гортани, лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, острый миелоидный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз, волосатоклеточный лейкоз, рак губ и полости рта, липосаркому, рак легких, немелкоклеточный рак легких, мелкоклеточный рак легких, лимфому, лимфому, связанную со СПИДом, лимфому Беркитта, кожную Т-клеточную лимфому, ходжкинскую лимфому, неходжкинскую лимфому, макроглобулинемию, злокачественную фиброзную гистиоцитому кости/остеосаркому, меланому, рак из клеток Меркеля, мезотелиому, множественную миелому/новообразование плазмы, грибовидный микоз, миелодиспластические синдромы, миелодиспластические/миелопролиферативные заболевания, миелопролиферативные нарушения, рак полости носа и околоносовых пазух, рак носоглотки, нейробластому, олигодендроглиому, рак ротоглотки, остеосаркому/злокачественную фиброзную гистиоцитому кости, рак яичников, рак поджелудочной железы, рак паращитовидной железы, рак глотки, феохромоцитому, аденому гипофиза, неоплазию плазматических клеток, плевропульмональную бластому, рак простаты, рак прямой кишки, почечно-клеточный рак (рак почки), переходно-клеточный рак почечной лоханки и мочеточника, рабдомиосаркому, рак слюнных желез, семейство опухолей саркомы Юинга, саркому Капоши, саркому мягких тканей, саркому матки, ретикулез Сезари, рак кожи (немеланома), карциному кожи, рак тонкой кишки, саркому мягких тканей, плоскоклеточный рак, плоскоклеточный рак шеи, первично скрытый, метастатический, рак желудка, рак яичек, рак горла, тимому и карциному тимуса, тимому, рак щитовидной железы, рак щитовидной железы у детей, рак матки, рак влагалища, макроглобулинемию Вальденстрема, опухоль Вильмса и любую их комбинацию.
38. Способ по п. 36, где рак включает рак молочной железы, рак легких, рак желудка и рак толстой кишки.
39. Способ по любому из пп. 36-38, где конструкция на основе антитела специфически связывается с HER2, TROP2 или Liv-1 человека.
40. Способ по любому из пп. 36-39, где конструкция на основе антитела включает пертузумаб, трастузумаб, сацитузумаб, ладиратузумаб или их антигенсвязывающий фрагмент.
41. Способ по п. 40, где среднее соотношение между лекарственным средством и антителом для композиции составляет от приблизительно 2 до приблизительно 8.
