Способ количественного определения сирингина в коре сирени обыкновенной




Владельцы патента RU 2782620:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу количественного определения сирингина в коре сирени обыкновенной. Способ количественного определения сирингина в коре сирени обыкновенной, заключающийся в получении извлечения из растительного сырья путем экстракции сирингина из коры сирени обыкновенной 70% этиловым спиртом при соотношении сырье:экстрагент 1:30 и его последующего анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии при длине волны 266 нм, в котором экстрагируют сирингин в течение 60 мин, хроматографическое разделение осуществляют в изократическом режиме и в качестве подвижной фазы используют смесь ацетонитрила с 1% раствором уксусной кислоты в воде в соотношении 15:85; содержание сирингина в коре сирени обыкновенной в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где Н - среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора испытуемого образца; Но - среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора стандартного образца сирингина; V - объем извлечения, мл; Р - разведение; Vo - объем раствора стандартного образца сирингина, мл; V1 - объем вводимой пробы раствора испытуемого образца, мкл; V2 - объем вводимой пробы раствора стандартного образца сирингина, мкл; mo - масса стандартного образца, г; m - масса сырья, г; W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах; 0,95 - коэффициент пересчета сирингина на безводное вещество. Вышеописанный способ позволяет увеличить выход сиригина и уменьшить продолжительность способа количественного определения сирингина в коре сирени обыкновенной. 2 ил., 1 пр.

 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении анализа содержания сирингина в коре сирени обыкновенной.

Действующая система контроля качества требует постоянного усовершенствования подходов к стандартизации биологически активных соединений (БАС) с использованием современных методов анализа и актуальных данных об физико-химических, спектральных и фармакологических свойствах, позволяющих дифференцированно определять конкретные БАС.

Сирень обыкновенная (Syringa vulgaris L., сем. Маслинные - Oleaceae) – листопадный кустарник, культивируется как декоративное растение, но известно своими лечебными свойствами (1-4). При фитохимическом изучении учеными СамГМУ и ВИЛАР выявлено, что доминирующим биологическим активным соединением коры сирени является циннамилгликозид сирингин (2,3,5). В официальной медицине кора сирени обыкновенной используется в качестве сырья для получения государственного стандартного образца элеутерозида В (сирингина) (ВФС 42-2088-92 «Cирингин-стандартный образец»), используемого при оценке качества корневищ и корней элеутерококка колючего (Eleutherococcus senticosus Maxim, сем. Аралиевые – Araliaceae), лекарственных препаратов и биологически активных добавок на основе сырья элеутерококка колючего (2, 5).

Для определения содержания сирингина в коре сирени используются спектрофотометрические, хроматоспектрофотометрические методы, метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (2,5).

В качестве прототипа нами взят фармакопейный способ определения сирингина в корневищах и корнях элеутерококка колючего (6). Способ предусматривает дробную экстракцию сирингина с использованием в качестве экстрагента 96 % этанолом при нагревании с обратным холодильником на водяной бане. ВЭЖХ-анализ содержания сирингина проводится в следующих условиях (6):

- колонка из нержавеющей стали 250×4,6 мм, эндкепированный октадецилсиликагель для хроматографии, диаметр 5 мкм,

- элюирование в градиентном режиме, подвижная фаза – раствор фосфорной кислоты концентрированной в воде и ацетонитрил для хроматографии в разных соотношениях.

- детекция при длине волны 266 нм.

Продолжительность анализа может составлять до 45 мин.

На наш взгляд, используемые в прототипе параметры экстракции не позволяют обеспечить высокий выход сирингина, так как сирингин мало и медленно растворим в 95 % этаноле (2,3).

Кроме этого, известно, что при градиентном режиме корректировка условий является более критичной, может привести к некорректной идентификации пиков, их наложению или сдвигам, при которых интересующие вещества могут выйти после указанного времени регистрации хроматограммы (7).

Таким образом, целью изобретения является разработка нового способа определения количественного содержания сирингина в коре сирени обыкновенной с увеличенным выходом сирингина и меньшей продолжительностью анализа при сохранении правильности, специфичности и прецизионности метода.

Техническим результатом является увеличение выхода сирингина и уменьшение продолжительности способа количественного определения сирингина в коре сирени обыкновенной.

Технический результат достигается тем, что способ осуществляют путем экстракции сирингина из коры сирени обыкновенной 70 % этиловым спиртом, ВЭЖХ-анализа полученных извлечений в изократическом режиме элюирования с использованием в качестве подвижной фазы смеси ацетонитрила и 1% раствора уксусной кислоты в воде в соотношении 15:85 и детекцией при длине волны 266 нм.

Содержание сирингина в коре сирени обыкновенной в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле

,

где H – среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора испытуемого образца;

Hо – среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора стандартного образца сирингина;

V – объем извлечения, мл;

P – разведение;

Vо – объем раствора стандартного образца сирингина, мл,

V1 – объем вводимой пробы раствора испытуемого образца, мкл;

V2 – объем вводимой пробы раствора стандартного образца сирингина, мкл;

mо – масса стандартного образца, г;

m – масса сырья, г;

W – потеря в массе при высушивании сырья, в процентах;

0,95 – коэффициент пересчета сирингина на безводное вещество.

Способ осуществляют следующим образом. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1 г измельченного сырья (точная навеска) помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл 70% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на весах с точностью до ±0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 мин. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (раствор А). 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят водой очищенной до метки (раствор В).

1 мкл раствора В вводят в жидкостной хроматограф «Милихром-6» с УФ-детектором. Хроматографируют в условиях обращенно-фазовой хроматографии в изократическом режиме: стальная колонка «КАХ-6-80-4» (2 мм х 80 мм; Separon-C18, диаметр 5 мкм), подвижная фаза – ацетонитрил : 1% раствор уксусной кислоты в воде в соотношении 15:85, скорость элюирования – 100 мкл/мин, объем элюента - 1000 мкл.

Проводят УФ-детектирование при длине волны 266 нм, диапазон чувствительности 0,5. Проводят не менее 3 параллельных определений.

Параллельно 1 мкл раствора стандартного образца сирингина вводят в хроматограф и хроматографируют, как описано выше. Проводят определение высоты пика сирингина и рассчитывают среднюю высоту пика по результатам трех параллельных определений.

Содержание сирингина в коре сирени обыкновенной в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле

,

где H – среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора испытуемого образца;

Hо – среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора стандартного образца сирингина;

V – объем извлечения, мл;

P – разведение;

Vо – объем раствора стандартного образца сирингина, мл,

V1 – объем вводимой пробы раствора испытуемого образца, мкл;

V2 – объем вводимой пробы раствора стандартного образца сирингина, мкл;

mо – масса стандартного образца, г;

m – масса сырья, г;

W – потеря в массе при высушивании сырья, в процентах;

0,95 – коэффициент пересчета сирингина на безводное вещество.

Примечание: Приготовление раствора стандартного образца сирингина. Около 0,025 г (точная навеска) государственного стандартного образца сирингина (содержание основного вещества ≥95 %) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в небольшом количестве 95% этилового спирта при нагревании на водяной бане, доводят 95% этиловым спиртом до метки, перемешивают.

Валидационная оценка разработанной методики проводилась по показателям: специфичность, линейность, правильность (открываемость), прецизионность. Специфичность методики определялась по соответствию времен удерживания стандартного образца сирингина и соответствующего пика на ВЭЖХ-хроматограмме испытуемого раствора, а также по разрешению между наиболее близкими пиками и фактору асимметрии пиков сирингина.

На фиг. 1 представлена ВЭЖХ-хроматограмма стандартного раствора сирингина, на фиг. 2 – ВЭЖХ-хроматограмма водно-спиртового извлечения из коры сирени обыкновенной (обозначения: 1 – водно-спиртовое извлечение из коры сирени обыкновенной; 2 – стандартный образец сирингина). В условиях ВЭЖХ-анализа время удерживания пика сирингина на хроматограммах стандартного образца сирингина и водно-спиртового извлечения из коры сирени обыкновенной составило 4,046±0,070 мин и 4,092±0,082 мин соответственно.

Определение линейности проводили на пяти уровнях концентраций растворов сирингина (с концентрациями в диапазоне от 0,3424 до 0,5136 мг/мл). Коэффициент корреляции составил 0,99971. Этот диапазон можно рассматривать как аналитическую область методики.

Правильность методики определяли методом добавок путем добавления раствора сирингина с известной концентрацией (80 %, 100 % и 120 %) к испытуемому раствору. При этом средний процент открываемости составил 98,8 %.

Исследование внутренней прецизионности методики указывает на сходимость полученных концентраций анализируемого вещества: ошибка определения среднего результата содержания сирингина в коре сирени обыкновенной с доверительной вероятностью 95 % составляла ±3,20 %. При оценке внутрилабораторной прецизионности также показаны удовлетворительные результаты, так как относительная погрешность определения сирингина в первый и второй дни анализа находится в диапазоне от 0,82 % до 1,20 %.

Нами было также изучено влияние экстрагента на процесс экстракции. В таблице 1 представлено влияние различных параметров экстракции (экстрагент, продолжительность экстракции, соотношение «сырье-экстрагент») на полноту извлечения сирингина из коры сирени обыкновенной. В результате эксперимента было определено, что оптимальными параметрами экстракции являются: однократное извлечение 70 % этиловым спиртом на кипящей водяной бане в течение 60 минут в соотношении «сырье-экстрагент» - 1:30.

Учитывая, что увеличение числа операций на стадии пробоподготовки ведет к возрастанию ошибки, выбор сделан в пользу одностадийного процесса экстракции с подтверждением требуемой точности количественного определения.

Предлагаемый способ поясняется следующим примером.

Пример.

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 1 г измельченного сырья (точная навеска) помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл 70% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на весах с точностью до ±0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 мин. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (раствор А). 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят водой очищенной до метки (раствор В).

1 мкл раствора В вводят в жидкостной хроматограф «Милихром-6» с УФ-детектором. Хроматографируют в условиях обращенно-фазовой хроматографии в изократическом режиме: стальная колонка «КАХ-6-80-4» (2 мм х 80 мм; Separon-C18, диаметр 5 мкм), подвижная фаза – ацетонитрил : 1% раствор уксусной кислоты в воде в соотношении 15:85, скорость элюирования – 100 мкл/мин, объем элюента - 1000 мкл.

Проводят УФ-детектирование при длине волны 266 нм, диапазон чувствительности 0,5. Проводят не менее 3 параллельных определений.

Параллельно 1 мкл раствора стандартного образца сирингина вводят в хроматограф и хроматографируют, как описано выше. Проводят определение высоты пика сирингина и рассчитывают среднюю высоту пика по результатам трех параллельных определений.

Содержание сирингина в коре сирени обыкновенной в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X, %) вычисляют по формуле

где H = 472,7941 – среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора испытуемого образца;

Hо = 327,3610 – среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора стандартного образца сирингина;

m = 1,0510 – масса сырья, г;

mо = 0,0249 – масса стандартного образца, г;

W = 11 – потеря в массе при высушивании сырья, в процентах;

Примечание: Приготовление раствора стандартного образца сирингина. Около 0,025 г (точная навеска) государственного стандартного образца сирингина (содержание основного вещества ≥95%) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в небольшом количестве 95% этилового спирта при нагревании на водяной бане, доводят 95% этиловым спиртом до метки, перемешивают.

Испытание проведено в трех повторностях. Все данные были статистически обработаны. Содержание сирингина составило 5,01 % ± 0,18 %.

Таким образом, предлагаемый способ количественного определения сирингина в коре сирени обыкновенной обладает следующими преимуществами:

1. Элюирование в изократическом режиме позволяет избежать проблем (некорректная идентификация пиков, их наложение или сдвиги, при которых интересующие вещества могут выйти после указанного времени регистрации хроматограммы), возникающих при проведении хроматографического анализа в градиентном режиме.

2. Продолжительность хроматографического анализа составляет 10 мин по сравнению с 45 мин в прототипе.

3. Использование в разработанном способе 70 % этилового спирта позволяет повысить эффективность экстракции в 2 раза (при сравнении результатов анализа сирингина при использовании в качестве экстрагентов 70 % этанола и 95 % этанола, как в прототипе) (таблица 1).

4. Ошибка определения среднего результата содержания сирингина с доверительной вероятностью 95 % составляет +3,20 %, что свидетельствует о высокой воспроизводимости методики.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ

1. Спиридович, Е.В. Анализ вторичных метаболитов в коре видов рода сирень (Syringa L.), интродуцированных в Центральном ботаническом саду НАН Беларуси / Е.В. Спиридонович, П.С. Шабуня, С.А. Фатыхова и др. // Вестник фармации. – 2018. – Т. 82, № 4. – С. 28-37.

2. Климова, И.Ю. Аналитические и технические исследования по разработке новых препаратов на основе коры сирени обыкновенной / Инна Юрьевна Климова // Дисс. на соискание … уч. степени канд. фармац. наук. – Самара, 2005. – 159 с.

3. Куркин, В.А., Фенольные соединения коры Syringa vulgaris / В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, Н.А. Гриненко и др. // Химия природных соединений. – 1989. - № 4. – С. 581–582.

4. Woźniak, M. Effects of phytochemically characterized extracts from Syringa vulgaris and isolated secoiridoids on mediators of inflammation in a human neutrophil model / M. Woźniak, B. Michalak, J. Wyszomierska et al. // Front. Pharmacol. – 2018. – Vol. 9. – P. 349. doi: 10.3389/fphar.2018.00349.

5. Авдеева, Е.В. Фитохимические и аналитические исследования по созданию галеновых препаратов на основе лекарственного растительного сырья, содержащего производные коричных спиртов / Е.В. Авдеева // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. – 2007. – № 2. – С. 129-136.

6. ФС.2.5.0053.15 Элеутерококка колючего корневища и корни (Eleutherococci senticosi rhizomata et radices) / Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд., Т. IV. – Министерство здравоохранения Российской Федерации, 2018. URL: http://resource.rucml.ru/feml/pharmacopia/14_4/HTML/1467/index.html#zoom=z.

7. ОФС.1.2.1.2.0001.15 Хроматография / Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. – Министерство здравоохранения Российской Федерации, 2018. URL: http://www.femb.ru/femb/pharmacopea.php.

Способ количественного определения сирингина в коре сирени обыкновенной, заключающийся в получении извлечения из растительного сырья путем экстракции сирингина из коры сирени обыкновенной 70% этиловым спиртом при соотношении сырье:экстрагент 1:30 и его последующего анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии при длине волны 266 нм, отличающийся тем, экстрагируют сирингин в течение 60 мин, хроматографическое разделение осуществляют в изократическом режиме и в качестве подвижной фазы используют смесь ацетонитрила с 1% раствором уксусной кислоты в воде в соотношении 15:85; содержание сирингина в коре сирени обыкновенной в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле

,

где Н - среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора испытуемого образца;

Но - среднее значение высоты пика сирингина, вычисленное из хроматограмм раствора стандартного образца сирингина;

V - объем извлечения, мл;

Р - разведение;

Vo - объем раствора стандартного образца сирингина, мл,

V1 - объем вводимой пробы раствора испытуемого образца, мкл;

V2 - объем вводимой пробы раствора стандартного образца сирингина, мкл;

mo - масса стандартного образца, г;

m - масса сырья, г;

W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах;

0,95 - коэффициент пересчета сирингина на безводное вещество.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности. Раскрыт способ количественного определения алоэнина в свежих листьях алоэ древовидного, заключающийся в получении извлечения из растительного сырья и его последующего анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, при этом экстракцию алоэнина проводят водно-спиртовыми смесями с концентрацией этилового спирта в диапазоне 40-70 % в течение 60 мин при использовании 50 мл экстрагента на 1 г измельченного сырья, хроматографическое разделение осуществляют в изократическом режиме с использованием в качестве подвижной фазы смеси ацетонитрила с 1% раствором уксусной кислоты в воде в соотношении 25 : 75; далее рассчитывают содержание алоэнина Х в процентах в пересчете на абсолютно сухое сырье.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности. Раскрыт способ количественного определения алоэнина в свежих листьях алоэ древовидного, заключающийся в получении извлечения из растительного сырья и его последующего анализа методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, при этом экстракцию алоэнина проводят водно-спиртовыми смесями с концентрацией этилового спирта в диапазоне 40-70 % в течение 60 мин при использовании 50 мл экстрагента на 1 г измельченного сырья, хроматографическое разделение осуществляют в изократическом режиме с использованием в качестве подвижной фазы смеси ацетонитрила с 1% раствором уксусной кислоты в воде в соотношении 25 : 75; далее рассчитывают содержание алоэнина Х в процентах в пересчете на абсолютно сухое сырье.

Настоящее изобретение относится к способам контроля, оценки и регулирования циклических хроматографических процессов очистки. Предложен способ контроля, оценки и регулирования циклического хроматографического процесса очистки, включающего по меньшей мере два адсорбера, причем способ включает по меньшей мере следующие стадии: а) контроль хроматограммы, включающий измерение по меньшей мере одного текущего сигнала, пропорционального концентрации, в жидкости; b) оценка хроматограммы, включающая сравнение по меньшей мере одного из указанных текущих сигналов, пропорциональных концентрации, измеренных на стадии (а), с его пороговым значением; с) регулирование процесса хроматографической очистки посредством адаптации завершения текущей фазы на основании сравнения во время стадии (b) и начала следующей фазы.

Изобретение относится к хроматографическому анализу химических соединений и может быть использовано для идентификации и выявления наркотических и психоактивных веществ в биосубстрате человека. Способ идентификации наркотических и психоактивных веществ в биологических объектах, в котором образец биосубстрата человека в виде органа или фрагмента мышечной ткани измельчают до состояния гомогената и осуществляют его хромато-спектрометрическое исследование с регистрацией сигнала масс-спектрометра в виде профиля пиков анализируемых веществ на хроматограмме с последующим определением принадлежности каждого пика анализируемому веществу и сравнением с эталонными аналитическими характеристиками искомого вещества, при этом образец биосубстрата человека в виде гомогената перед хромато-спектрометрическим исследованием подвергают щелочному гидролизу и экстрагируют неполярным растворителем из щелочной среды для обеспечения оптимального соотношения сигнал/шум для целевых аналитов, затем полученный экстракт упаривают и при образовании вязкого маслянистого осадка его реэкстрагируют водным кислым раствором и далее целевые вещества извлекают из полученного водного раствора неполярным растворителем при щелочных значениях рН, а хромато-спектрометрическое исследование проводят в режиме регистрации SIM-спектров, причем набор ионов для SIM-регистрации выбирают из условия выбора всех фрагментов масс-спектра с интенсивностью более 1%.

Изобретение относится к хромато-масс-спектрометрическому анализу и может быть использовано в медицине, биологии, экологии и допинговом контроле для идентификации наркотических и психоактивных веществ в волосах и ногтях человека. Способ идентификации наркотических и психоактивных веществ в сложных биологических матрицах организма человека включает подготовку образца биосубстрата человека в виде срезов волос или ногтевых пластин, и осуществляют его первое предварительное масс-спектрометрическое исследование с регистрацией сигнала детектора масс-спектрометра в виде профиля пиков анализируемых веществ на хроматограмме с последующим определением принадлежности каждого пика анализируемому веществу сравнением с эталонными аналитическими характеристиками вещества, затем последовательно проводят еще N последующих предварительных масс-спектрометрических исследований, перед каждым из которых образец биосубстрата промывают метанолом, при этом после проведения предварительных масс-спектрометрических исследований измельчают образец биосубстрата человека до состояния пудры до долей миллиметров и проводят заключительное масс-спектрометрическое исследование, причем если при последовательном проведении предварительных масс-спектрометрических исследований наблюдается последовательное уменьшение массы анализируемых веществ и существенное увеличение их массы при заключительном масс-спектрометрическом исследовании, то принимают решение об идентификации этих веществ в биосубстрате человека.

Изобретение относится к идентификации неизвестных соединений и, в частности, но не исключительно, к способам и системам идентификации неизвестных соединений методом газовой хроматографии - масс-спектрометрии с использованием индекса удерживания в качестве второго параметра для идентификации. Компьютерный способ создания базы данных стандартных соединений с ассоциированными индексами удерживания для идентификации неизвестного соединения с использованием газовой хроматографии - масс-спектрометрии, ГХ-МС, включает оценку прогнозируемого индекса удерживания стандартного соединения из библиотеки масс-спектрометрических стандартов ГХ-МС на основе атомной структуры стандартного соединения.

Изобретение относится к способу прогнозирования газохроматографических индексов удерживания алкилфторфосфонатов и может быть использовано для идентификации опасных соединений. Предложенный способ заключается в преобразовании соединения несимметричной структуры в два соединения симметричной структуры относительно выбранного центра симметрии и в определении индекса удерживания как полусуммы индексов удерживания соединений симметричных структур, отличающийся тем, что в качестве центра симметрии соединения класса O-алкилалкилфторфосфонатов выбирают такой атом углерода в O-алкильном радикале, в разветвлении которого находятся два различных алкильных фрагмента или алкильный фрагмент и атом водорода; далее производят структурные преобразования соединения в два соединения того же класса, O-алкилалкилфторфосфонатов, симметричной структуры относительно выбранного атома углерода, используя лишь эти фрагменты и не подвергая структурному изменению остальную часть молекулы.

Изобретение относится к биологии и токсикологической химии и может быть использовано в практике химико-токсикологических, экспертно-криминалистических и клинических лабораторий. Способ осуществляется следующим образом: биологический объект, содержащий N-(4-нитро-2-феноксифенил)-метансульфонамид, измельчают, двукратно по 45 минут настаивают с порциями органического изолирующего агента, которым является метилацетат, полученные извлечения объединяют, растворитель из объединенного извлечения испаряют, остаток обрабатывают ацетоном, ацетоновое извлечение отделяют, растворитель из объединенного извлечения испаряют, остаток растворяют в диэтиловом эфире, эфирный раствор экстрагируют буферным раствором с pH 9-10, водно-щелочной экстракт подкисляют 24% раствором хлороводородной кислоты до pH 2-3, полученный раствор насыщают бромидом натрия, экстрагируют этилацетатом, полученный экстракт упаривают в токе воздуха при температуре 20-22°C до получения сухого остатка, остаток растворяют в смеси гексана и ацетона, взятых в соотношении 8:2 по объему, хроматографируют в макроколонке с силикагелем L 40/100 мкм с использованием подвижной фазы гексан-ацетон в соотношении 8:2 по объему, фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют в токе воздуха при температуре 20-22°C до полного удаления растворителя, остаток растворяют в метаноле и проводят определение комбинированным физико-химическим методом, в качестве которого используется хромато-масс-спектрометрия, с применением капиллярной колонки DB-5 MS EVIDEX с неподвижной фазой, представляющей собой 5%-фенил-95%-метилполисилоксан, используя масс-селективный детектор, работающий в режиме электронного удара, начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура повышается от 70°C до 290°C со скоростью 20°C в минуту, конечная температура колонки выдерживается в течение 16 минут, температура инжектора составляет 250°C, температура квадруполя 150°C, температура интерфейса детектора 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ, регистрируют масс-спектр по полному ионному току, вычисляя количество N-(4-нитро-2-феноксифенил)-метансульфонамида по площади хроматографического пика.

Изобретение относится к газохроматографическому анализу различных химических соединений и может быть использовано в медицине, биологии, экологии и допинговом контроле. .

Изобретение относится к способу получения перфторированного производного сложного эфира посредством химической реакции, где указанная реакция представляет собой реакцию фторирования служащего сырьем исходного соединения, реакцию химического превращения фрагмента перфторированного производного сложного эфира с получением другого перфторированного производного сложного эфира или реакцию взаимодействия карбоновой кислоты со спиртом при условии, что по меньшей мере один из реагентов - карбоновая кислота или спирт - представляет собой перфторированное соединение, причем указанное перфторированное производное сложного эфира представляет собой соединение, в состав которого входит фрагмент приведенной ниже формулы 1 и имеет температуру кипения самое большее 400°С, согласно которому время проведения упомянутой химической реакции является достаточным для того, чтобы выход перфторированного производного сложного эфира достиг заранее заданного значения, и при этом указанный выход перфторированного производного сложного эфира определяют посредством газовой хроматографии с использованием неполярной колонки.

Изобретение относится к способам проведения калибровок детектора углеводородных газов. Способ подачи поверочной газовой смеси детектору углеводородных газов при его калибровке характеризуется тем, что выполняют сквозное отверстие во фланце рядом с кабельным вводом, в которое вставляют штуцер, который с внутренней стороны фланца соединяют с одним концом трубки для подачи поверочной газовой смеси, а другой конец этой трубки соединяют с детектором газов для подачи, причем подачу поверочной газовой смеси осуществляют через конец штуцера, расположенный снаружи фланца.
Наркология
Наверх