Способ профилактики алкоголь-индуцированной нефропатии на фоне свинцовой интоксикации у крыс в эксперименте

Изобретение относится к медицине, экспериментальной биологии, токсикологии и может быть использовано для профилактики поражений, вызванных длительной алкогольной интоксикацией на фоне свинцовой интоксикации у экспериментальных животных. Способ включает введение крысам раствора амида изовалериановой кислоты в дозе 500 мг/кг совместно с 40%-ным этанолом в дозе 3,0 г/кг каждый день в течение 30 дней и ацетатом свинца в дозе 25 мг/кг на фоне профилактического введения мелатонина в дозе 10 мг/кг. Изобретение обеспечивает снижение токсического влияния, вызванного хронической алкогольной и свинцовой интоксикациями за счет стабилизации процессов перекисного окисления липидов и мембранопротекторного действия. 4 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к медицине, экспериментальной биологии, токсикологии и может быть использовано для профилактики поражений, вызванных длительной алкогольной интоксикацией на фоне свинцовой интоксикации у экспериментальных животных.

Статистические исследования показывают, что в течение 15 лет уровень потребления алкоголя держится на отметке 13 литров в год на одного жителя России [Статистика алкоголизма в мире. URL: http://vawilon.ru/statistika-alkogolizma-v-mire]. Необходимо также отметить, что из 2,2 млн. людей, страдающих алкоголизмом и получивших курсовое медикаментозное лечение, излечились только 59 тысяч человек, что составляет лишь 2,7% от общего числа и это показывает актуальность изучения способов профилактики и лечения данной патологии [Статистика развития алкогольной зависимости. URL: https://narkozavisimost.ru/uslugi/lecheniealkogolizma/alkogolizm-i-rossiyal.

Наряду с этим экологическая обстановка в современном мире, остается неблагоприятной из-за продолжающегося применения в промышленности тяжелых металлов, в том числе и свинца, загрязняющего почву и воду [Role of toxic elements in chronic kidney disease / FevrierPaul A., Soyibo A.K., Mitchell S. [et al.] // Journal of. Health & Pollution. 2018. Vol.8 (20). DOI: 10.5696/2156-9614-8.20.181202 / Fevrier-Paul A, Soyibo AK, Mitchell S, et al. Role of toxic elements in chronic kidney disease. Journal of. Health & Pollution. 2018;8(20). DOI: 10.5696/2156- 9614-8.20.181202]. Поступая в организм, свинец накапливается в разных тканях, нарушая морфологическое строение и функции [Брин Вадим Борисович, Митциев Астан Керменович, Митциев Кермен Гагеевич Коррекция мелаксеном нарушения концентрирующей функции почек при экспериментальной свинцовой недостаточности // Медицинский вестник Северного Кавказа. 2014. №1 (33)]. Свинец и его соединения, которые в течение долгого времени накапливаются в тканях способны вызывать нарушение работы многих органов - сердца, сосудов, головного мозга, а также почек [Способ профилактики экспериментальной токсической нефропатии: патент 2716509 Рос. Федерация. №2019108947 / Брин В.Б., Ислаев А.А.; заявл. 12.03.2020; опубл. 27.03.2019; Бюл. N 8. 9 с.].

Выбранный в качестве профилактики синтетический аналог гормона эпифиза - мелатонин уже ранее демонстрировал свое положительное влияние при интоксикации тяжелыми металлами за счет ингибирования процессов перекисного окисления [Брин В.Б., Митциев А.К., Митциев К.Г. Профилактика изменений структуры тканей сердца и почек при хроническом отравлении ацетатом свинца в эксперименте // ВНМТ. 2012. №1.]

Известен способ профилактики хронической молибденовой коагулопатии [Патент на изобретение RU RU 2739690, 2021], осуществляемый путем ежедневного введения антиоксиданта и тяжелого металла в течение двух месяцев, при этом в качестве антиоксиданта животным с первого дня эксперимента вводят через зонд в желудок 0,2 мл раствора, содержащего 0,5 мг мелатонина на каждые 100 г веса, одновременно с ежедневным внутрижелудочным введением 0,3 мл раствора парамолибдата аммония, содержащего 5 мг молибдена.

Недостатком данного способа является длительность реализации модели (60 дней), а также то, что в эксперименте не исследуется влияние свинца, что не позволяет судить об изменениях, вызванных свинцовой интоксикацией.

Известен способ профилактики токсического действия и накопления кобальта в тканях у экспериментальных животных при моделировании хронического отравления [Патент на изобретение 2312666 С1, 2007], заключающийся в том, что животным ежедневно вводят хлорид кобальта в дозировке 0,2 мг/кг через зонд в желудок и через день ирлит-7 в виде 6% взвеси, также через зонд в желудок. Продолжительность эксперимента 2 месяца.

Недостатком данного способа является то, что используемый ирлит-7 способен приводить к изменению водного гомеостазиса из-за своей выраженной сорбционной способности.

Известен способ профилактики токсического действия кобальта у экспериментальных животных при хроническом отравлении, [Патент на изобретение RU 2431482, 2013] осуществляемый путем введения детоксиканта и хлорида кобальта через зонд в желудок в течение 30 дней. При этом в качестве детоксиканта применяют мелатонин. Мелатонин вводят животным ежедневно в дозе 10 мг/кг. Хлорид кобальта вводят в дозе 2 мг/кг.

Недостатком данного способа является то, что в эксперименте не исследуется влияние свинца, что не позволяет судить об изменениях, вызванных свинцовой интоксикацией.

Наиболее близким к заявляемому изобретению является способ профилактики хронической токсической артериальной гипертонии и кардиопатии у экспериментальных животных [Патент на изобретение RU 2455985, 2013], заключающийся в том, что животным ежедневно 1 раз в сутки одновременно внутрижелудочно вводят ацетат свинца в дозе 40 мг/кг и детоксикант.В качестве детоксиканта вводят препарат мелатонина в дозе 10 мг/кг.

Недостатком способа является то, что не исследуется влияние хронической алкогольной интоксикации на модель, что не позволяет изучить профилактическое действие мелатонина при алкогольных интоксикациях. Также не показаны изменения со стороны электролито-водовыделительной функции почек.

Заявляемое изобретение направлено на решение задачи, заключающейся в создании способа профилактики алкоголь-индуцированной нефропатии на фоне свинцовой интоксикации у крыс в эксперименте.

Решение этой задачи позволяет более полно изучить патофизиологические механизмы развития алкоголь-индуцированной нефропатии на фоне свинцовой интоксикации, создать способ профилактики алкоголь-индуцированной нефропатии на фоне свинцовой интоксикации, повышающий воспроизводимость, удобный для проведения эксперимента на животных и экономически выгодный.

Для достижения этого технического результата заявляемое изобретение способ профилактики алкоголь-индуцированной нефропатии на фоне свинцовой интоксикации у крыс в эксперименте включает следующие существенные признаки:

Способ моделирования хронической алкогольной интоксикации включает следующие существенные признаки: в качестве токсического вещества используют 40%-ый раствор этанола, вводимый через зонд в желудок один раз в сутки в течение 30 дней в дозе 3,0 г/кг. Одновременно вместе с этанолом вводится неконкурентный ингибитор алкогольдегидрогеназы - амид изовалериановой кислоты в дозе 500 мг/кг в течение месяца, где на единицу раствора, равную 0,9 мл, приходится 50 мг вещества. Для получения свинцовой интоксикации токсическое вещество ацетат свинца растворяют в стерильной дистиллированной воде таким образом, что на единицу раствора, равную 0,2 мл, приходится 5 мг свинца (в пересчете на металл). На каждые 100 г веса крысы вводят 0,1 мл токсического раствора, что не является чрезмерной водной нагрузкой на организм экспериментального животного. Раствор мелатонина приготавливают таким образом, что на каждую единицу раствора, равную 1 мл, приходится 2 мг мелатонина. Раствор мелатонина готовят ежедневно перед введением. Раствор ацетата свинца вводят через атравматичный зонд в желудок в дозировке 25 мг/кг, ежедневно 1 раз в сутки в течение 30 дней. Одновременно, с первого дня моделирования хронической алкогольной интоксикации и введения ацетата свинца, каждый день интрагастрально вводят мелатонин в дозировке 10 мг/кг.

Данный способ отличается от прототипа тем, что впервые применяется антиоксидант мелатонин с целью профилактики хронической алкогольной интоксикации на фоне свинцовой интоксикации у экспериментальных животных.

Между отличительными признаками заявляемого изобретения и техническим результатом существует следующая причинно-следственная связь: мелатонин на фоне алкоголь-индуцированной нефропатии и свинцовой интоксикации способствует стабилизации процессов перекисного окисления липидов, обладая мембранопротекторным действием, уменьшает токсическое действие свинца на организм, обладает детоксикационым действием. Это является удобной и приближенной к натуральным условиям моделью.

По имеющимся у авторов сведениям, совокупность существенных признаков, характеризующих сущность заявляемого изобретения, не известна, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения критерию «новизна».

По мнению авторов, сущность заявляемого изобретения не следует для специалистов явным образом из известного уровня медицины, так как из него не выявляется вышеуказанная возможность получения способа моделирования алкоголь-индуцированной нефропатии при свинцовой интоксикации у крыс в эксперименте, что позволяет сделать вывод о соответствии критерию «изобретательский уровень».

Совокупность существенных признаков, характеризующих сущность изобретения, в принципе может быть многократно использована в медицине с получением результата, заключающегося в более точном и легко воспроизводимом способе профилактики алкоголь-индуцированной нефропатии на фоне свинцовой интоксикации, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения критерию «промышленная применимость».

Данный способ осуществляется следующим образом.

Для получения действующего раствора при моделировании хронической алкогольной интоксикации- амид изовалериановой кислоты растворяют в стерильной дистиллированной воде таким образом, что на единицу раствора, равную 0,9 мл, приходится 50 мг амида изовалериановой кислоты. На каждые 100 г веса крысы вводят 0,9 мл действующего раствора, что не является чрезмерной водной нагрузкой на организм экспериментального животного.

Для получения действующего раствора при моделировании свинцовой интоксикации токсическое вещество ацетат свинца растворяют в стерильной дистиллированной воде таким образом, что на единицу раствора, равную 0,2 мл, приходится 5 мг свинца (в пересчете на металл). На каждые 100 г веса крысы вводят 0,1 мл токсического раствора, что не является чрезмерной водной нагрузкой на организм экспериментального животного.

Для получения действующего профилактического раствора для устранения патологических эффектов алкоголь-индуцированной нефропатии и свинцовой интоксикации - раствор мелатонина приготавливают таким образом, что на каждую единицу раствора, равную 1 мл, приходится 2 мг мелатонина. Раствор мелатонина готовят ежедневно перед введением.

Использование крыс в экспериментах осуществляли в соответствии с Европейской конвенцией по охране позвоночных (1986) и правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗРФ №708 от 23.08.2010).

Функциональное состояние почек оценивается с применением общепринятых методов исследования (Наточин Ю.В. Физиология почки: формулы и расчеты. Л. «Наука». 1974. - 56 с), с использованием биохимических наборов реагентов для исследования мочи фирмы «Ольвекс» и «Агат-Мед» (Россия) на спектрофотометре «Solar» (Беларусь).

Полученные результаты обрабатывались статистически с учетом распределения признаков в группах с использованием критерия Шапиро-Уилка. Для сравнения изучаемых данных применяли непараметрический U-критерий Манна-Уитни. Статистическую обработку полученных результатов осуществляли с помощью стандартного пакета программ Microsoft Excel 2016 и Statistica 10.0. Различия считались достоверными при р<0,05.

Сущность способа профилактики подтверждена результатами исследования функционального состояния почек (нарушения электролито-водовыделительной функции почек) при спонтанном 6-часовом диурезе и 5%-ой водной нагрузке у экспериментальных животных.

Пример 1. Крысам-самцам линии Вистар массой 200-300 грамм вводили раствор амида изовалериановой кислоты в дозе 500 мг/кг совместно с 40%-ым этанолом в дозе 3,0 г/кг каждый день в течение 30 дней и ацетат свинца в дозе 25 мг/кг на фоне профилактического введения мелатонина в дозе 10 мг/кг в течение месяца.

Контролем служили одиннадцать групп животных, содержащиеся в стандартных условиях вивария:

1) фоновые (интактные) животные (10 крыс)

2) группа с внутрижелудочным введением мелатонина в дозе 10 мг/кг(10 крыс)

3) группа с интрагастральным введением 40%-го этанола в дозе 3,0 г/кг в течение месяца (10 крыс)

4) группа с интрагастральным введением 40%-го этанола в дозе 3,0 г/кг и мелатонина в дозе 10 мг/кг в течение месяца (10 крыс)

5) группа с интрагастральным введением раствора амида изовалериановой кислоты (ингибитор алкогольдегидрогеназы) в дозе 500 мг/кг в течение месяца (10 крыс)

6) группа с интрагастральным введением раствора амида изовалериановой кислоты в дозе 500 мг/кг и мелатонина в дозе 10 мг/кг в течение месяца (10 крыс)

7) группа с интрагастральным введением раствора амида изовалериановой кислоты в дозе 500 мг/кг совместно с 40%-ым этанолом в дозе 3,0 г/кг каждый день в течение 30 дней (модель хронической алкогольной интоксикации) (10 крыс)

8) группа с моделированием хронической алкогольной интоксикации и внутрижелудочным введением мелатонина в дозе 10 мг/кг каждый день в течение 30 дней (10 крыс)

9) группа с внутрижелудочным введением ацетата свинца в дозе 25 мг/кг в течение месяца (10 крыс)

10) группа с внутрижелудочным введением ацетата свинца в дозе 25 мг/кг и введением мелатонина в дозе 10 мг/кг в течение месяца (10 крыс)

11) группа с моделированием хронической алкогольной интоксикации и введением ацетата свинца в дозе 25 мг/кг (10 крыс).

Изучение основных процессов мочеобразования, анализ содержания электролитов в крови (натрия и калия) и их почечной обработки проводили в условиях спонтанного диуреза и 5%-ой водной нагрузки через один месяц. Для изучения функции почек при спонтанном диурезе животные помещались в обменные клетки, где в течение 6 часов у них производился сбор мочи. С целью изучения функции почек в условиях водного диуреза животным через зонд в желудок давалась водная нагрузка (5% от массы тела), после чего в обменных клетках собиралась моча через каждый час в течение 3-х часов. Содержание натрия и калия в моче и плазме крови определяли ионо селективным методом на анализаторе электролитов «Кверти-Мед» Москва. Концентрацию креатинина в моче и плазме крови, общего белка в моче определяли спектрофотометрически.

Расчеты скорости клубочковой фильтрации, величины канальцевой реабсорбции воды, экскреции натрия и калия, фильтрационного заряда катионов и относительной канальцевой реабсорбции натрия производились по формулам Ю.В. Наточина (1974).

При изучении водовыделительной функции при спонтанном 6-часовом диурезе было установлено, что в контрольных группах №2-6 достоверных изменений функционального состояния почек не выявлялось.

В группе №7 с моделированием хронической алкогольной интоксикации выявлялось уменьшение объема 6-часового спонтанного диуреза (р≤0,01), связанное со снижением скорости клубочковой фильтрации (р≤0,01), вопреки тенденции к снижению канальцевой реабсорбции воды (табл.1). Наблюдалось увеличение концентрации белка в моче (р≤0,001) (табл.1). В группе №8 с профилактическим применением мелатонина на фоне хронической алкогольной интоксикации наблюдалось увеличение спонтанного диуреза и канальцевой реабсорбции воды (р≤0,05) относительно группы №7, также установлено снижение белка в моче (р≤0,001), (табл.1).

В группе №9 в группе с внутрижелудочным введением ацетата свинца наблюдалось увеличение объема 6-часового спонтанного диуреза (р≤0,05) и увеличение содержания белка в моче (р≤0,05). В группе №10 с профилактическим применением мелатонина при свинцовой интоксикации наблюдалось снижение объема 6-часового спонтанного диуреза (р≤0,05), также установлено снижение белка в моче (р≤0,05) относительно группы №9.

В группе №11 с моделированием хронической алкогольной интоксикации на фоне свинцовой интоксикации наблюдалось уменьшение объема 6-часового спонтанного диуреза (р≤0,001), снижение канальцевой реабсорбции воды (р≤0,01), скорости клубочковой фильтрации (р≤0,001) и увеличение содержания белка в моче (р≤0,001) относительно интактных значений. В группе №12 с моделированием хронической алкогольной интоксикации на фоне свинцовой интоксикации и введением мелатонина наблюдалось увеличение объема 6-часового спонтанного диуреза (р≤0,05), увеличение канальцевой реабсорбции воды (р≤0,05), скорости клубочковой фильтрации (р≤0,05) и снижение содержания белка в моче (р≤0,001) относительно группы №11, что вероятно связано с одним из основных профилактических эффектов мелатонина, проявляющимся повышением чувствительности канальцевого аппарата почек к эндогенным регуляторам процессов мочеобразования. Положительное влияние мелатонина при токсических нефропатиях подтверждается и в литературе, где утверждается, что он снижает выраженность процессов перекисного окисления липидов в клеточных структурах почек, уменьшает количество активных форм кислорода, а также оказывает и иммуномодулирующее действие [Бузоева М.Р., Брин В.Б. Влияние мелаксена на функциональное состояние почек в условиях кадмиевой интоксикации на фоне гиперкальциемии // ВНМТ. 2019. №3].

При изучении электролитовыделительной функции в условиях 6-часового спонтанного диуреза было установлено, что в контрольных группах №2-6 достоверных изменений функционального состояния почек не выявлялось.

В группе №7 с моделированием хронической алкогольной интоксикации выявлялось увеличение экскреции натрия (р≤0,01) и калия (р≤0,001) относительно фоновых значений. Фильтрационный заряд натрия (р≤0,001) и канальцевая реабсорбция катиона (р≤0,001) демонстрировали снижение. Концентрация натрия в крови (р≤0,05) снижалась, тогда как концентрация калия в крови достоверно увеличивалась (р≤0,01). В группе №8 с профилактическим применением мелатонина на фоне хронической алкогольной интоксикации наблюдалось увеличение экскреции натрия (р≤0,05) и калия (р≤0,05) относительно группы №7. Канальцевая реабсорбция натрия (р≤0,05) демонстрировала увеличение, также наблюдалось увеличение концентрации натрия в крови (р≤0,05) и снижение концентрации калия (р≤0,01), (табл.2) в плазме. Полученные результаты соответствуют изменениям, описанным в литературе при данной патологии [Pusey, С.D., Holland, М. J., Cashman, S. J., Sinico, R. A., Lloveras, J. J., Evans, D. J., & Lockwood, С.M. (1991). Experimental autoimmune glomerulonephritis induced by homologous and isologous glomerular basement membrane in Brown-Norway rats. Nephrology, dialysis, transplantation: official publication of the European Dialysis and Transplant Association - European Renal Association, 6(7), 457-465. https://doi.org/10.1093/ndt/6.7.457].

В группе №9 с внутрижелудочным введением ацетата свинца наблюдалось снижение концентрации натрия в крови (р≤0,05). В группе №10 с профилактическим применением мелатонина при свинцовой интоксикации наблюдалось увеличение концентрации натрия в крови (р≤0,05) по сравнению с группой №9.

В группе №11 с моделированием хронической алкогольной интоксикации на фоне свинцовой интоксикации наблюдалось увеличение экскреции натрия (р≤0,001) и калия (р≤0,001) относительно фоновых значений. Фильтрационный заряд натрия (р≤0,001) и канальцевая реабсорбция катиона (р≤0,001) демонстрировали снижение. Концентрация натрия в крови (р≤0,05) снижалась. Концентрация калия в крови достоверно увеличивалась(р≤0,01) (табл.2). В группе №12 с моделированием хронической алкогольной интоксикации на фоне свинцовой интоксикации и введением мелатонина наблюдалось снижение экскреции натрия (р≤0,05) и калия (р≤0,01) относительно группы №11. Наблюдалось снижение концентрации калия в крови (р≤0,05) (табл.2) в плазме по сравнению с группой №15.

Исследование водовыделительной функции почек экспериментальных животных в условиях водной нагрузки не выявило достоверных изменений с фоновыми значениями в группах №2-6.

В группе №7 с моделированием хронической алкогольной интоксикации выявлялось уменьшение объема диуреза на 1-м (р≤0,05) и 2-м (р≤0,01) часе водной нагрузки, связанное со снижением скорости клубочковой фильтрации на 1-м (р≤0,01), 2-м (р≤0,05), и 3 часе (р≤0,01), вопреки тенденции к снижению канальцевой реабсорбции воды на 1-м (р≤0,05) и 2-м (р≤0,05) часе водной нагрузки относительно фоновых значений. Диурез за 3 часа наблюдался ниже фоновых значений (р≤0,001), как и выведение водной нагрузки (р≤0,001) относительно интактной группы. В группе №8 с профилактическим применением мелатонина на фоне хронической алкогольной интоксикации наблюдалось увеличение водного диуреза на 1-м (р≤0,01), 2-м (р≤0,05) и увеличение канальцевой реабсорбции воды на 1-м (р≤0,05) и 2-м (р≤0,01), (табл.3) часе водной нагрузки относительно группы №7. Диурез за 3 часа демонстрировал увеличение (р≤0,001), как и выведение водной нагрузки (р≤0,001)от группы №7.

В группе №9 с внутрижелудочным введением ацетата свинца наблюдалось увеличение объема водного диуреза на 2-м (р≤0,05), тенденции к снижению канальцевой реабсорбции воды на 2-м часе и достоверного снижения на 3-м часе (р≤0,05) водной нагрузки от фоновых значений. Скорость клубочковой фильтрации на 1-м (р≤0,05) и 3 часе (р≤0,05) демонстрировала снижение по сравнению с интактными животными. Диурез за 3 часа показал увеличение относительно фоновых значений (р≤0,05), как и выведение водной нагрузки (р≤0,01) относительно интактной группы. В группе №10 с введением мелатонина при свинцовой интоксикации наблюдалось снижение объема водного диуреза на 1-м (р≤0,05), 2-м часе (р≤0,001) увеличение канальцевой реабсорбции воды на 1-м (р≤0,05) и 3 часе (р≤0,05) и клубочковой фильтрации на 1-м (р≤0,05) (табл.3) водной нагрузки относительно группы №9. Диурез за 3 часа демонстрировал снижение (р≤0,01), как и процент выведения водной нагрузки (р≤0,001) относительно группы №9.

В группе №11 с моделированием хронической алкогольной интоксикации на фоне свинцовой наблюдалось снижение объема водного диуреза в 1-й (р≤0,05) и 2 час (р≤0,05) водной нагрузки, снижение канальцевой реабсорбции воды на 1-м часе (р≤0,05), 2-м часе (р≤0,001), 3-м (р≤0,001) часе водной нагрузки от фоновых значений. Скорость клубочковой фильтрации на 1-м (р≤0,01), 2-м часе (р≤0,01) и 3 часе (р≤0,001) демонстрировали снижение по сравнению с интактными животными. Диурез за 3 часа демонстрировал снижение относительно фоновых значений (р≤0,001), как и процент выведения водной нагрузки (р≤0,001) относительно интактной группы. В группе №12 с моделированием хронической алкогольной интоксикации на фоне свинцовой интоксикации и введением мелатонина наблюдалось увеличение объема водного диуреза на 1-м (р≤0,05) и 2-м часе (р≤0,05), увеличение канальцевой реабсорбции воды на 2-м (р≤0,05) и 3 часе (р≤0,001) и клубочковой фильтрации на 2-м (р≤0,05) и 3-м часе (р≤0,01) (табл.3) водной нагрузки относительно группы №11. Диурез за 3 часа демонстрировал увеличение (р≤0,01), как и процент выведения водной нагрузки (р≤0,001) относительно группы №11.

Исследование электролитовыделительной функции почек экспериментальных животных в условиях водной нагрузки не выявило достоверных изменений по сравнению с фоновыми значениями в группах №2-6.

В группе №7 с моделированием хронической алкогольной интоксикации выявлялось увеличение экскреции калия на 1-м (р≤0,01) и 3 часе (р≤0,001) относительно фоновых значений. Фильтрационный заряд натрия на 1-м (р≤0,05), 2-м (р≤0,05), и 3 часе (р≤0,001) показывал снижение и канальцевая реабсорбция катиона на 1-м (р≤0,05) и 3 часе (р≤0,001) водной нагрузки демонстрировала снижение относительно фоновых значений. Концентрация натрия в крови на 1-м (р≤0,05), 2-м (р≤0,01), и 3 часе (р≤0,05) снижалась, когда концентрация калия на 1-м (р≤0,001), 2-м (р≤0,01), и 3 часе (р≤0,05) в крови достоверно увеличивалась относительно фоновых значений. В группе №8 с профилактическим применением мелатонина на фоне хронической алкогольной интоксикации наблюдалось увеличение экскреции натрия на 1-м часе (р≤0,05) и калия на 1-м (р≤0,05), 2-м (р≤0,05), и 3 часе (р≤0,01) относительно группы №7. Канальцевая реабсорбция натрия на 1-м (р≤0,05), и 3 часе (р≤0,001) демонстрировала увеличение, также наблюдалось увеличение концентрации натрия в крови на 2-м (р≤0,05) и 3 часе (р≤0,05) и снижение концентрации калия на 1-м (р≤0,001), 2-м (р≤0,01), и 3 часе (р≤0,05), (табл.4) в плазме.

В группе №9 с моделированием свинцовой интоксикации наблюдалось увеличение экскреции натрия на 2-м часе (р≤0,05) и калия на 3 часе (р≤0,05) водной нагрузки относительно фоновых значений. Фильтрационный заряд натрия на 2-м (р≤0,05) и 3 часе (р≤0,01), канальцевая реабсорбция катиона на 2-м часе (р≤0,05) водной нагрузки демонстрировали снижение от фоновых значений. Концентрация калия на 1-м (р≤0,01) и 3 часе (р≤0,05) водной нагрузки в крови достоверно увеличивалась относительно интактных значений. В группе №10 с введением мелатонина при свинцовой интоксикации наблюдалось снижение экскреции натрия на 1-м (р≤0,05) и 3-м часе (р≤0,05) водной нагрузки относительно группы №9. Фильтрационный заряд калия на 1-м (р≤0,01) и 3-м (р≤0,05) часе водной нагрузки демонстрировали снижение относительно группы №11. Наблюдалось увеличение концентрации натрия в крови на 1-м часе (р≤0,05) (табл.4) водной нагрузки и снижение концентрация калия на 1-м (р≤0,01) и 3-м часе (р≤0,05) в плазме относительно группы №9.

В группе №11 с моделированием свинцовой интоксикации наблюдалось увеличение экскреции натрия на 1-м часе (р≤0,01), 2-м часе (р≤0,05), 3-м часе (р≤0,05) и калия в течение 3-х часов (р≤0,001) относительно фоновых значений. Фильтрационный заряд натрия на 1-м часе (р≤0,01), 2-м (р≤0,01) и 3 часе (р≤0,001), канальцевая реабсорбция катиона 1-м (р≤0,01), 2-м (р≤0,001) и на 3-м часе (р≤0,001) демонстрировали снижение от фоновых значений. Концентрация натрия в крови в течение 3-х часов (р≤0,01) снижалась, а калия на 1-м (р≤0,01), 2-м (р≤0,001) и 3 часе (р≤0,001) в крови достоверно увеличивалась относительно интактных значений. В группе №12 с введением мелатонина при свинцовой интоксикации наблюдалось снижение экскреции натрия на 1-м часе (р≤0,05) и 3-м часе (р≤0,05) водной нагрузки относительно группы №11. Фильтрационный заряд натрия на 1-м (р≤0,05), 2-м (р≤0,05) и 3-м часе (р≤0,01) водной нагрузки демонстрировали увеличение относительно группы №11. Наблюдалось увеличение концентрации натрия в крови на 1-м (р≤0,01), 2-м (р≤0,05) и 3-м часе (р≤0,01) (табл.4) водной нагрузки и снижение концентрация калия на 2-м часе (р≤0,05) и 3-м часе (р≤0,05) в плазме относительно группы №11.

Таким образом, из вышеизложенного следует, что введение мелатонина в условиях хронической алкогольной интоксикации на фоне свинцовой интоксикации является эффективным способом профилактики токсического воздействия чужеродных факторов.

Способ профилактики алкоголь-индуцированной нефропатии на фоне свинцовой интоксикации у крыс в эксперименте, включающий ежедневное внутрижелудочное введение мелатонина в дозе 10 мг/кг, отличающийся тем, что в течение 30 дней одновременно с мелатонином крысам вводят раствор амида изовалериановой кислоты в дозе 500 мг/кг, 40% этанол в дозе 3,0 г/кг и ацетат свинца в дозе 25 мг/кг.