Способ получения фицина

 

ОПИСАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

281745

Союз Советскиз

Социалистическив

Респуолин

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 1.Х,1968 (№ 1272486/31-!6) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 14.1Х.1970. Бюллетень № 29

Дата опубликования описания 14.Х11.1070

Кл. 3011, 2, 03

МПК А 61k 19/00

С 07О 7/00

УД1", 61 5.45:65.779,94 (088.8) Комитет по дедам иаобретеиий и открытие при Совете Министров

СССР

Авторы изобретения

А. Е. Мшвидобадзе, Б. И. Чумбуридзе и Р. В. Махарадзе

Тбилисский государственный медицинский институт

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФИЦИНА

Предмет изобретения

Изобретение Относится к области фарма кологии в частности получения фицина, иопользуемого в качестве лечебного средства.

Известны способы получения фицина из энзимсодержагцсго растительного сырья, например млечного сока инжира, путем осаждения фицина, очистки его с последующим диализом и сушкой.

Эти способы не позволяют получать чистый фицин в кристаллическом состоянии.

С целью выделения фицпна:в чистом виде в предлагаемом способе очистку осуществляют хроматографированием его на диэтиламиноэтилцеллюлозс с градиентной элюцией в ацетатном буферном растворе при рН 5,5—

5,7 в присутствии 0,5М раствора хлорида натрия.

Для получения фпцпна предлагаемым способом млечный сок из листьев и незрелых плодов инжира цептрифугируют при 5000—

5500 об/мин в течение 40 — 45 мин и смеши вают центрифугат с ацетоном в соотношении

1: 3. Выделявшийся фермент отделяют центрифугированием и растворяют в дистиллированной воде. Осаждение фермента ацетоном повторяют еще 3 — 4 раза, отделяя растворитель с примесями центрифугированием. Выделившийся сырой фермент растворяют в десятикратном количестве дистиллированной Воды. Полученный раствор пропускают через диэтиламиноэтилцелл10лозой пви

10 С. Элюцию осущоствляют ацетатным буферным раствором при рН 5,5 — 5,7 в присутствии 0,5М раствора хлорида натрия со скоростью 0,3 ял/1тин, собирая фракции по 10 .11л (исходя из 50 лтл 10%-ного водного раствора фицина и колонки диаметром 3 с,1т и длиной

50 сл1). Чистый фпцин выделяют из фракций

10 с максимумом сзетопоглощения прп 280 ль11к, проявляющих протеолитическую активность и нp содержащllх посторонних ОргliнH IескHх примесей. Этп фракции диализнруют пропу скяниеы через колонк с сефадексом и затем

15 подвергают лиофильнои сушке. Выход 7% от исходного растительного сырья.

20 Способ получения фицина из энзпмсодер>кащего растительного сырья, например млечного сока инжира, путем осаждения фицина, очистки его с последующим диализом и сушко1, отличатощийся тем, что, с целью выде25 пения фицина з чистом виде, очистку осуществляют хроматографированием его на диэтиламиноэтилцеллюлозе с градиентной элюцией в ацстатном буферном растворе при рН 5,5 — 5,7 в присутствии 0,5Ы раствора хлорида натрия.