Способ идентификации бактерий рода brucella

 

О П И С А Н И Е 3I0932

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскиз

Социалистические

Ресоублик

Зависимое от авт. свидетельства _#_e

Заявлено ОЗ.YL1970 (№ 1434152/31-1G) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 09Х111.1971. Бюллетень № 24

Дата опубликования описания 18.Х.1971

МПК С 12k 1/04

Комитет ло делам изобретеииЯ и открытиЯ при Соеете Мииистрсе

СССР

УДК 576.8.078.39 (088.8) 1

r Q J 1-1 А Я

Авторы изобретения

П. А. Вершилова, Е. А. Драновская и В. М. Кушнаре

Заявитель

Институт эпидемиологии и микробиологии им. H. Ф. Гамалеи

СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ БАКТЕРИЙ РОДА ВКЬСЕ1.1.А

Изобретение относится к микробиологии.

Известны способы идентификации бактерий рода ВгпсеИа, основанные на определении их морфологических и биохимических признаков.

Указанные способы обычно не позволяют точно идентифицировать атипичные разновидности бруцелл.

Цель изобретения — более эффективное определение возбудителя бруцеллеза, в частности атипичных разновидностей. Это достигается тем, что проводят спектрофотометрический анализ а- и Р-характеристических полос поглощения цитохрома С.

Спектрофотометрический анализ восстановленного, например, гидросульфитом натрия цитохрома С проводят с убитыми, например, спиртом на холоду микробными взвесями с конечной концентрацией микробных тел в них

300 — 400 млрд/лтл на регистрирующем приборе, например СФ-10 или СФ-14.

Для идентификации бактерий выращенную 2-суточную культуру бруцелл смывают и промывают при центрифугировании 4 раза

1/15 моль раствором фосфатного буфера с рН 7,0. К осадку клеток добавляют 6-кратный объем этилового спирта и оставляют на

2 — 3 недели при 4 С. После проверки стерильности клетки отделяют от спирта центрифугированием и промывают дважды дистиллированной водой при 5000 об/мин в течение 30 мин. Конечная концентрация убитых спиртом микрооных тел составляет 300—

400 млрд/лл. В кювету спектрофотометра помещают 2 мл бактериальной взвеси и автоматически записывают спектры в области длин волн 400 — 750 лами. Перед спектрофотометрированием цитохромы восстанавливают гидросульфитом натрия в течение 5 мин при комнатной температуре. На полученном спектре у бруцелл четко выявляются а- и р-полосы

10 поглощения цитохрома С в отличие от грачотрицательных бактерий некоторых друпгх родов.

Предмет изобретения

15 1. Способ индентификации бактерий рода

Brucella, основанный на определении их морфологических и биохимических признаков, отличающийся тем, что, с целью более эффективного определения возбудителя бруцеллеза, 20 в частности атипичных разновидностей, проводят спектрофотометрический анализ а- и рхарактерпстических. полос поглощения цитохрома С.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что

25 спектрофотометрический анализ восстановленного, например, гидросульфитом натрия, цитохрома С проводят с убитыми, например, спиртом на холоду микробными взвесями с конечной концентрацией микробных тел в

Зо них 300 — 400 млрд/мл на регистрирующем приборе, например СФ-10 или СФ-14.