Способ приготовления основы питательной среды для культур тканей

 

Союз Советских

Социалистическик

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 30.XI,1970 (№ 1602512/31-16) с присоединением заявки №

Приоритет

Оп бликовапо 30.111.1972. Бюллетень № 12

М. Кл. С 12k 1/06

Комите по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

УДК 576.8.093.3(088.8) Дата опубликования описания 6Л .!972

Авторы изобретения

Заявители

А. Ф. Карышева и В. И. Вотяков

Белорусский научно-исследовательский ветеринарный институт и Белорусский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ОСНОВЫ П ИТАТЕЛЬНОЙ

СРЕДЫ ДЛЯ КУЛЬТУР ТКАНЕЙ

Изобретение относится к области вирусологии и может быть использовано для приготог.ления среды для культур тканей.

Известно приготовление среды для культур тканей нз аминокислот (среда 199), из лактальбумпна путем гндролпза.

Предлагаемый способ позволяет получить основу питательной среды для культур тканей со стабильными свойствами.

Для осуществления способа в качестве исходного сырья используют сухой белковый концентрат бульона от варки костей.

При мер. 300 л мясокостного бульона сушат на раопылительпой сушилке «Нема» прп температуре поступающего воздуха 110—

145 С, выходящего воздуха 65 — 75 С, давлении на форсунку 40 — 90 пт. Получают 33 кг сухого белкового концентрата с химическим составом: % белка 90, фосфора 0,13, кальция

0,3. В составе белка сухого белкового концентрата содержатся следующие аминокислоты: цистин, цистеин, орнитин, лизин, аргинин, серии, гистидпн, глицнн, аспарагиновая кислота, оксппролин, треонин, глутаминовая кислота, алании, пролин, тирозин, валин, метионин, фенилаланин, лейцин, триптофан.

30 г сухого белкового концентрата растворяют в 3 л дейонизированной воды при подогревании до 80 С. Раствор кипятят 30 лтин, дабавляют дейонизированную воду до первоначального объема, охлаждают до 40 С. Добавляют 600 лл ферментного препарата поджелудочной свиной железы и 20 лiл xJlopoформа. Гидролиз ведут,при 37 С двое суток.

Гидролпзат кипятят 40 — 50 лтин, доводят дейнонизированной водой до первоначального объема, охлаждают, фильтруют и стерплнзуют,в автоклаве прп 05 ат и 110 С в течение

20 мин.,Жидкий гндролизат сушат, например, 10 на лиофпльных установках пли распылительных сушилках до остаточной влажности не более 5о(о.

Выход 289 г сухого гпдролпза с остаточной влажностью 4,8%.

15 Для приготовления ростовой питательной среды для культур тканей на среде Хэнкса готовят 0,5%-ный стерильный раствор гпдролнзата сухого белкового концентрата и добавляют витамины, бычью сыворотку, антибно20 тики по общепринятым прописям.

При культивировании перевнваемых линий клеток на среде с гидролнзатом установлено, что монослой формируется на 4 — 5 сутки прн

25 засеве 1 ттлн клеток в 1 флакон емкостью

100 мл (выход клеток 6 — 7 млн.) ..

Прп засеве первично трипсинпзнрованных клеток посевная доза составляет 250 — 500 тыс. клеток в 1 лтл среды. Начиная с первого дня

30 роста и до образования монослоя,,постепенно

Способ приготовления основы питательной среды для культур тканей 

 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области сельского хозяйства и биотехнологии, в частности к способам микроклонального размножения растений и безвирусному семеноводству

Изобретение относится к медицинской и ветеринарной биотехнологии и касается усовершенствованного способа получения протеолитического гидролизата отходов переработки рыбы, а также питательной среды на его основе, предназначенной для выращивания клеток эукариотов - продуцентов биологически активных веществ, используемых для производства диагностических и профилактических биологических и медицинских препаратов

Изобретение относится к области иммунологии, в частности к получению и использованию моноклональных антител

Изобретение относится к биотехнологии и касается способа получения сухих стерильных питательных сред для культивирования разнообразных культур клеток, широко используемых в различных областях биологии, медицины, клеточной биотехнологии

Изобретение относится к области биотехнологии, а точнее к способам изменения степени стабильности кариотипа клеток

Изобретение относится к области биотехнологии, а точнее к способам изменения степени стабильности кариотипа клеток

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при работе с клеточными культурами и в вирусологии
Наверх