Способ получения флюоресцирующих противогрипозных антител

 

ОП ИС

ИЗОБРЕ

C0I03 СОВетскнх

Соцналнстннескнх

Республик

К АВТОРШОМУ СВ (61) Дополнительное к авт.

Кл, (22) Заявлено 07, 12,.70 (21) с присоединением заявки г«" (23) Приоритет (43) Опубликовано25;05.76 (45) Дата опубликования о

1 К 23/00

Государственный комнтет

Совета Министров СССР по делам нзооретеннй н отнрытнй

К 615.45;

6. 8,097. 5 (088. 8) (72) Авторы изобретения

И, Е, Меп«ерякэва, P. Я. Пэ;«я«, Т. A. Д.эбина и Л. Е. Камфорин (71) Заявитель

Всесо«эзнь«й научно-исспедон:,тепьскпй и««ст1«туг гриппа (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ1 Ф г110ОРЕС«1к«1- У10ЩЧ"

ПРОТИВОПэИППОЗ11ЫХ ЛНТИТЕЛ

Изобретение относится к медициче и вирусопогии и «сасаетсл способов г«онуче««ия фпюоресцируюгпих прот««вэгр««ппэз «i,rx ант««теп.

Известен способ попучен«:и фпюоресцируюших противэгриппэзных а«п1«теп из сывороточного j — гпобупина путем егэ хроматографиии на иммуносорбенте и iioi«b«ol.ации фпюэрэ«.ромом.

Ueiib изобретения - искпкэче««««е, неспецифической фпюоресценции, Этэ постигается тем, что прэтивогриппозный g гпсбупин коньюгируют с фпюорохромом, а затем сорбируют на иммуносэрбе те, представпя;эщем собой ТЕАЕ-цеппюпэзу с адсорбирован- f» ным вирусом гриппа, и эпюпруют меченые противогриппозные фпюоросцирующие антитепа.

Йпя попучения фпюоресдиру«стих прэтивогриппозных антител в««руссэдержа«««ую аппантэисную жидкость урав««эве«««ива«ст гепьфипьтрацией через Сефадекс Г-25 в физиопогическом фоська I«DM б3 Феэ««эм растворе (рН 7, 2), Уравнсве«пенную, вирусную суспензию наносят на TE IÅ - цеппюпозу 2б в хпэр-форме, номен«е«к.:ую в кспонку размер-3м 10х1,5 см. Адсорбцию вируса прово длт пэд кспгро,"-:."« Iloÿ«ill«I««гемеггпютинац1 ii вы те!«аюп,ей из Kэп э«»ки жидкОсти. HB к"-по««к«у- rip«IE =,»i ««i.ol э выше 13азме13а наносят

:;o бэпэе 1 00000 гемс ггпютинирую«цих . .,.: iiь ц вируса I р««1!««а ° «э|3ocTL фипьтро» . :„.;.««Ил 1 ««з««пя/5 сек. Пэ экэ:, ча««««и фипьтро« .- 3 и«!я к оп э«iir пэ с;1b«B3iсT 1 Ократным ко»

".;:.чествэм буфер«oi-о рк«створа (по отноше

l«iiIO К КОПИЧЕСТВУ t«P Oi« i»IЦЕ«П«эй ЖИДКОСТИ) дэ : с .Ознэвегил спедэь бепка и несвязавц««гэсл в:«.-; уса, 1«ег««.эт1-ируемых спектрофо

Toк«етрпчес ки прп 280 к«к««. Через пону--:..::«1«bi BivIXi) i«OCO3«3ei«T ПРО««УСКаЮТ CbIBOPO

«э:«««ь«й пммугн ый g - гпэбупин, предваритвпь;«э <сиь«г««13эва;«н«,«й с фпюэрсхрсмомр с та» кю". же сксрост-=.ю. Затем копонку снова —::рэмывают буферным раствором. Диссоциаi!io coo!I«!ô«I»«oi3iroi о кок iiliiскса п13эвэдят

1: ".cl «3opoM, содержа«!Н«м 1/о хпэристэго на7 рил при рН ",8, в «спи «естве 2-3 объема эг объем:. кэ;«с:«ки, Фп-.ссресцируюшие антитеЭПКЭ««РУ«эт« и 13 ПЕРНЫ". ПСРДИЯХ фИПЬтоо Ta (в кисл и з-.. е >, 1!спу.«енный препарат

:341271

Составитель В. Таратута

Ре,фактор Д. Пинчук Техред,. И. Асталощ Корректор, А Власенко

Заказ 1609/76 Тираж 629 Подписное

ЦНИИПИ I осударственногокомитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113О38, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП " Патент, г. Ужгород, уп. Проектная, 4 очищенных флюоресцирующих противогриппозиых антител концентрируют и лиофилизируют в присутствии сахарозы в ампулах по 1-2мл.

Формула изобретения

Способ получения флюоресцирующих противогриппозных антител из сывороточного — глобулина путем его хроматографии на

4 иммуносорбенте и конъюгации с флюорохромом, о т п и ч а ю щ.и и с я тем, что, с цепью исключения неспецифической фпюоресценцни, противогриппозный g" гпэбулин конъюгируют с флюорохромом, а за тем сорбируют на иммуносорбенте, представляющем собой TEAE-целлюлозу с адсорбированным вирусом гриппа, и эпюируют меченые противогриппозные фпюоресцирук> щи е антитела.