Патент ссср 453828
ОПИСАНИЕ 4
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Респчблии
К ПАТЕНТУ (61) Зависимый от патента (22) Заявлено 21.08.69 (21) 1368679/1726184/
/23-4 (32) Приоритет 30.08.68 (31) 13067/68 (33) Швейцария
Опубликовано 15.12.74. Бюллетень ¹ 46 (51) М. Кл. С 07с 103/52
Гасударственный комитет
Совета Министров СССР (53) УДК 547.964.4.07 (088.8) ло делам изобретений. и открытий
Дата опубликования описания 05.05.75 (72) Авторы изобретения
Иностранцы
Вернер Риттел, Макс Бруггер, Бруно Камбер, Бернхард Риникер и
Петер Сибер (Швейцария) и Гендрик Мари Гревен (Голландия) Иностранная фирма
«Циба-Гейги АГ» (Швейцария) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПОКАЛЬЦЕМИЧЕСКИХ
ПЕПТИДОВ
Изобретение относится к области получения новых физиологически активных пептидов, которые являются родственными, либо идентичными тиреокальцитонину человека.
Предлагаемый способ основан на известном в химии пептидов методе получения цистилсодержащих пептидов путем окисления соответствующих цистеил или тритилцистеилсодержащих пептидов.
Предлагаемый способ основан на известных реакциях получения гипокальцемических пептидов формулы — — н,— <—
 — СН- CO — гл."- ас -nee — .eo- mpe-ö èc- em-nåèma- тре-mnp-и;.Р- глн-а а-!pnn — асн — лаз— рап- гас- mpe- рал- прп- гл»- тре- cna — vneгпа — аап — гпа — апа — pn — NH, 20 где R означает атом водорода, свободную или ацилированную аминогруппу, или соответствующих соединений, в которых остатки аспарагина или глутамина могут быть заменены остатками аспарагиновой или глутами- 25 новой кислоты или остаток аспарагиновой кислоты может быль заменен остатком аспарагина.
Способ заключается в том, что соединения формулы сн — н
/
Н-СН вЂ” СО-.=.-.-аае —.-e -аеа-mpe-«vc-тп-пеаг па —, <; e — 7г, а — " ре — e а - а 7- pg.,г ",— — аг — лаз рап- г., а-. чае- enon.— паа- zëí- —. а;.е- ала — алег " — ь7 —.",па-, 7па-ааа — 1ч Н и или указанные выше аналоги или производные, в которых меркаптогруппы являются свободными или защищенными тритильной защитой, окисляют в дисульфиды.
Окисление пептидов можно проводить общеизвестным методом калиферроцианидом в водном растворе или иодом, или воздухом в жидком ам ми аке.
Окисление пептидов, в которых меркаптогруппы защищены тритильными группами, можно осуществлять при одновременном отщеплении защитных групп иодом в метаноле.
Продукты выделяют в свободном виде или в виде физиологически переносимых кислотно-аддитивных солей или комплексов известными приемами.
Пример 1. Н-цис-гли-асн-лей-сер-тре-цисмет-лей-гли-тре-тир-тре-глн-асп-фал-асн - лиз453828
Составитель В. Назинв
Техред H. Куклина Корректор Е, Рогвйлина
Редактор Л. Емельянова
Заказ 690/3 Изд. ¹ 1062 Тираж 506 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, )K-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, нр. Сапунова, 2 фал-гис-тре-фал-про-глн-тре - ала - иле - гливал-гли-ала-про-ХНз (кальцитонип М).
Растворяют 200 мг Н-цис-гли-асн-лей-серзре-цис-мет-лей-гли-тре-тир-тре-глн-асп - фаласн-лиз-фал-гис-тре-фал-про - глп - тре — алаиле-гли-вал-гли-ала-про-NH2 в 5 мл ледяной уксусной кислоты и прибавляют по каплям при интенсивном перемешивании раствор 3 г йода в 200 мл ледяной уксусной кислоты. Перемешивают в течение 1 ч при комнатной 10 температуре, затем добавляют 300 мл петролейного эфира и прибавляют воду, пока «е отделяется фаза петролейного эфира. Затем экстрагируют избыточный йод из петролейно о эфира, отделяют фазу петролейного эфира 15 и промывают дополнительно петролейным эфиром, пока не будет проэкстрагирован весь иод и фаза петролейного эфира станет бесцветной.
Затем раствор уксусной кислоты освобож- 20 дают на ротационном испарителе при 40 от остального петролейного эфира и раствор лиофилизируют. Остаток подвергают в целях очистки противоточному распределению на
320 ступенях в системе 1-н-бутанол:уксусная 25 кислота:вода (4:1:5). Чистый кальцитонин М находится во фракциях 101 †1 (максимально в трубе 109, К=0,52). Объединяют содержание этих труб и упаривают досуха в ротационном испарителе при температуре ба- 30 ни 45 С. Получают 177 мг кальцитонина М.
Этим способом можно получать следующие соединения:
Н-цис-гли-асн-лей-сер-тре-цис-мет - лей-глитре-тир-тре-глн-асн-фал-асн - лиз - фал - гис- 35 тре-фал-про-глн-тре-ала-иле-гли - вал - глиала-про-NH2 (анс"-кальцитонин М).
Ац-цис-гли-асн-лей-сер-тре-цис - мет — лейгли-тре-тир-тре-глн-асп - фал — асн - лиз-фалгис-тре-фал - про - глн-тре - ала-иле - гли-вал- 40 гли-ала-про-NH2 (N"-ацетил-кальцитонин М).
Бмп-гли-асн-лей-сер - тре - цис-мет-лей-глитре-тир-тре-глн-асп-фал - асн-лиз - фал-гистре-фал-про-глн - тре - ала - иле-гли - вал-глиала-про-NH. (Дезамино-кальцитонин М) . 45
N" -пальмитоил - цис-гли-асн-лей - сер-трецис-мет-лей-гли - тре - тир-тре-глн-асп - фаласн-лиз-фал - гис - тре-фал-про-глн-тре-алаиле-гли-вал-гли-ала-про-МН (N" -пальмитоил-кальцитонин М).
N" -лаурил - цис-гли - асн-лей-сер-тре-цисмет - лей - гли-тре-тир-тре-глн - асп - фаласн-лиз — фал - гис-тре - фал-про-глн-тре-алаиле-гли-вал-гли-ала-про-ХНз (N" -лаурилкальцитонин М).
Предмет изобретения
Способ получения гипокальцемических пептидов общей формулы
à — — сн, —
Р; CH- CO — 2 JLL — аси-леа- сгр- прг-иис- мета-лей— гли- mpe-птр-mpe- глн-acn — фал-асн — лиз— фал- г ис- mpe- фал- opo — глн — mpe-ала — иле— г JILL —. йал — гли — ала — TLpo — NH > где R — Н, NHz или ацил — NH; или соответствующих соединений, в которых остатки аспарагина или глутамина могут быть заменены остатками аспарагиновой или глутаминовой кислот или остаток аспарагиновой кислоты может быть заменен аспарагиновым остатком, отл и ч а ющи йся тем, что соединение фор мулы:
СН;Зн !
Н- СН вЂ” СО- гли — асн — леи- cep- moe-иис- метл-леи гли — TT!pe-тпир-тпре- глн- асп- LpQJI асн- лиефал — гис — mpe- фал — npo — глн — тпре- ала — „легт- 1ïë-гли-ала-пра — NH q или указанные выше аналоги или производные, в которых меркаптогруппы являются свободными или защищенными тритильной группой, окисляют в дисульфиды с последующим выделением целевых продуктов или их кислотно-аддитивных солей или их комплексов известными приемами.
