Способ получения люмистерина
ГУ ОП ИСАЯИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ би . ((i) 4662I9
Союз Советских
Социалистических
Республик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 22.05.73 (21) 1924663, 23-4 с присоединением заявки № (32) Приоритет
Опубликовано 05.04.75. Бюллетень № 13
Дата опубликования описания 15.12.75 (51) М. Кл. С 07с 171/08
Государственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 547.689.6.07 (088.8) (72) Авторы изобретения
Р. И. Яхимович, В. А. Богуславский и В. П. Вендт
Институт биохимии АН Украинской ССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЮМИСТЕРИНА, Изобретение относится к усовершенствованию способа получения люмистериназ, обладающего биологической активностью, который можно использовать в витаминной и химикофармацевтической промышленности.
Известен способ получения люмистериназ, заключающийся в том, что 7-дегидрохолестерин облучают ртутной лампой при длине волны 265 — 280 нм до 10% -ного превращения
7-дегидрохолестерина, непревращенный 7-дегидрохолестерин удаляют путем осаждения его в виде комплекса с дигитонином, продукты облучения отделяют реакцией с малеиновым ангидридом, люмистеринсодержащую фракцию этерифицируют 3,5-динитробензоилхлоридом с последующей очисткой хроматографированием на окиси алюминия и неоднократной перекристаллизацией 3,5-динитробензоата люмистериназ. Омылением очищенного эфира люмистериназ получают целевой продукт.
Недостатком такого способа является многостадий ность процесса, при котором неизбежны значительные потери выделяемого люмистериназ.
С целью упрощения процесса предложено облучение 7-дегидрохолестерина проводить
УФ-светом при длине волны 310 — 312 нм и целевой продукт выделять вымораживанием.
По предлагаемому способу облучение проводят до 40 — 60% -ного превращения исходного 7-дегидрохолестерина, а вымораживание — при (— 15) — (— 25) С.
Пример. 43 r 93%-ного 7-дегидрохолестерина растворяют при перемешивании и нагревании не выше 35 — 40 С в 20 л этанола для получения 0,2% -ного раствора. После полного растворения вещества полученный раст)() вор охлаждают до 18 — 20 С и пропускают через него в течение 10 — 15 мин ток азота для удаления кислорода.
Полученный раствор облучают в аппарате проточного типа с 20 эритемными лампами с
) 5 люминофором Э-2 (максимум испускания
310 — 312 нм) в токе инертного газа при 20—
30 С со скоростью, обеспечивающей 40 — 60%ное превращение исходного 7-дегидрохолестерина.
20 Для отделения непревращенного 7-дегидрохолестерина облученный раствор концентрируют упариванием в 10 — 12 раз в вакуум-выпарном аппарате при температуре не выше
45 С. 1,5 — 2 л полученного концентрированно25 го раствора вносят в холодильник с температурой (— 10) — (— 25) С и выдерживают в течение 3 — 12 час для вымораживания непревращенного 7-дегидрохолестерина. 17,8 г выпавших кристаллов с содержанием 7-дегидро3() холестерина 90% промывают холодным этано466219
Составитель И. Илюхина
Редактор 3. Горбунова Техред 3, Тараненко Корректор Т. Добровольская
Заказ 2805/12 Изд. Ко 636 Тираж 529 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, 7К-35, Раушская наб., д. а 5
Типография, пр Сапунова, 2 лом и сушат в вакуумсушильном шкафу при
35 С в течение 3 — 4 час до постоянного веса.
Спиртовой раствор после отделения вымороженного 7-дегидрохолестерина снова упаривают в 10 — 12 раз в вакууме при температуре не выше 45 С. 0,15 — 0,18 л полученного концентрата выдерживают 12 час для повторного вымораживания непревращенного 7-дегидрохолестерина при (— 10) — (— 25) С.
0,15 л фильтрата, образовавшегося после отделения второго вымороженного осадка (1,8 г
80 /о -ного 7-дегидрохолестерина), анализируют путем хроматографического разделения смеси продуктов на пластинках с тонким слоем силикагеля в системе петролейный эфир-серный эфир (1: 1) с последующим спектрофотометрическим количественным определением веществ. Раствор содержит 14,3 г (65 /о по превращенному 7-дегидрохолестерину) провитамина Дз, 2,2 г (10% по превращенному 7-дегидрохолестерину) витамина Дз, 3,3 г (15% по превращенному 7-дегидрохолестерину) люмистериназ и 0,4 г непрореагировавшего 7-дегидрохолестериназ.
Этот раствор выдерживают в низкотемпе5 ратурном холодильнике при (— 15) — (— 25) С в течение 4 — 12 час, после чего выпадает осадок люмистериназ, который отфильтровывают, промывают холодным спиртом и сушат в вакууме при 40 С в течение 3 — 4 час. Получают
10 2,8 г люмистеРиназ с содеРжанием основного вещества 95 — 98 /о и т. пл. 85 — 86 С.
Предмет изобретения
Способ получения люмистериназ путем об15 лучения 7-дегидрохолестерина УФ-светом, отделения непревращенного 7-дегидрохолестерина и выделения целевого продукта, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью упрощения процесса, облучение проводят при длине вол20 ны 310 — 312 нм и целевой продукт выделяют вымораживанием.
