Способ обнаружения уробилиногена

 

CAHNE

P E 7 I:-.: Н И Я йАТЕБТУ

ОЛй

К 3 5

К п11 535914

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 16.06.72 (21) 1799317/28-13 (51) М. Кл 2 б 01N 33/16 (23) Приоритет — (32) 19.06.71 (31) P 2130559.9 (33) ФРГ

Опубликовано 15.11 76 Бюллетень № 42

Государстееннь1е I;GNHTG i

Совета Министров СгСР по делам изобретений и отхрь тий (53) УДК 616-074 (088.8) Дата опубликования оп .сания 15.02.77 (72) Авторы изооретения

Иностранцы

Вальтер Риттерсдорф, Дитер Бергер, Ханс-Георг Рей и Петер Рикманн (ФРГ) .Иностранная фирма (71) Заявитель

«Берингер Манихайм ГмбХ» (ФРГ) (54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ УРОБИЛИНОГЕНА

_#_ Mo+Xe

Изобретение относится,к области медицины.

Известен способ определения уробилиногена в моче на оонове цветной реакции с помощью индикаторной пленки, приготовленной обработкой смесью п-диметилбензальдегида, ортофосфорной кислоты, поливинилацетата, органического сульфоната натрия, метанола.

Цель изобретения — повышение чувствительности способа и обеспечение возможности определения уробилиногена в присутствии билирубина.

Для достижен|ия поставлен ной цели в качестве индикатора используют бензолдиазониевые соли общей формулы где RI — окси, алкилмеркапто-, низкая алкоксильная группа; R — окси-, алкокси-, фенокси-, аралкокси-, алкилмеркапто-, фенилмеркапто-, фенилалкиламинная группы. При этом один из остатков RI и В2 может быть водородом, галогеном, метильной группой.

R3 и R4 — водород, галоген, оксп-, алкокси-, фенокси-, алкилмеркапто-, фепилмеркапто-, фенплалкиламинная группы.

5 Х вЂ” хлорид, сульфат, тетрафторборат, тетB рахлорцинкат, гексахлорантимонат, арилсульфонат, остаток карбоновой кислоты. В качестве кислоты используют метафосфорную кислоту.

lo Пример 1. Фильтровальную бумагу (Шлайхер и Шюлл 23 SL пропитывают раствором следующего состава:

Фторборат 4-метоксилбензолдиазония, r 0,3

Метафосфорная кислота, r 10,0

Додецилбензолсульфокислота (натриевая соль), г 0,4

20 Метанол, мл 5,0

Вода, мл По 100

Затем ее сушат при 40 С.

При погружении в мочу без уробилиногена

25 индикаторная бумага не дает цветной реакции. При погp ìIeíè!è В мочу с нормальным содержанием уробилиногена через 5 — 10 сек бумага получает розовый цвет, а в мочу с

535914

0,25

1,0

10,0

0,5 повышенным содержанием уро бил иногенав кармино-красный.

Такие хке цветные реакции дает индикаторная бумага, содержащая 0,3 г следующих диазониевых солей: фторборат 2-метоксибензолдиазония; сульфат 2-оксибензолдиазония; сульфат 4-оксибензолдиазония; фторборат 2,4-диоксибензолдиазония.

Пример 2. Фильтровальную бумату (Шлайхер и Шюлл 23 SL) пропитывают раствором следующего состава, г:

Фторборат 4-метоксибензолдиам мания 0,3

Щавелевая кислота 10,0

Затем ее сушат при 40 С.

П р и м ер 3. Фильтровальную бумагу (Шлайхер и Шюлл 23 SL) пропитывают раствором следующего состава:

4-Этокснанилин, г

Изоамилонитрил, мл

Щавелевая кислота, г

1-1атриевая соль додецилбензолсульфокислоты, г 0,4

Метанол, мл До 100

Затем ее сушат прп 40 С.

Эта индикаториая бумага реагирует с мочой, содержащей уробилиноген, с образованием кармино -красного цвета.

Фиолетовый оттенок индикаторная бумага получает, если 4-этоксианилин заменить равными количествами 2-этокси-, 4-бутокси-, 4фенокси-, 4-метокси-2-метил-, 2-метокси-5-метил-, 2-метилмеркапто-4-метилмеркапто-4-хлорметокси-5-метил-, 5-хлор-2-окси- или 4-бензилоксианилином.

Пример 4, Фильтровальную бумагу (Шлайхер и Шюлл 23 SL) пропитывают раствором следующего состава:

1. Фторборат 4-ацетамидобензолдиазония, r 0,3

Метафосфат натрия, г 5,0

Вода, мл До 100

II. Щавелевая кислота, г 10,0

Лаурилсульфат натрия, г 0,5

Метанол, мл До 100

Затем ее сушат.

Эта индикаторная бумага реагирует с мочой, содержащей уробилиноген, с образованием кармино-красной окраски.

Пропитанная аналогичным способом фторборатом 3-метокси-4-ацетамидобензолдиазония бумага реагирует с красно-фиолетовой окраской.

П р и м ер 5. Фильтровальную бумагу (Шлайхер и Шюлл 23 SL) пропитывают раствором следующего состава:

Толуолсульфат 3-хлор-4-метоксибензолдиазония, г

Сульфосалициловая кислота, г 5,0

Додецилбппзолсульфокислота (натриевая соль), г 0,8

Метанол, мл До 100

Эта индикаторная бумага при погружении в мочу, содержащую уробилиноген, дает кармино-красную окраску, При погружении в мочу, содержащую билирубин, через 10 — 20 сек получают сине-зеленую окраску. Мо,а содержащая уробилпноген и бплирубин, дает соответственно их содержанию полутона между этими двумя окрасками.

П р и м ер б. Полиэфирное волокно пропитывают раствором следующего состава:

Бспзолдпаммо невая соль, r 0,1

Сульфосалициловая кислота, r 10,0

Натриевая соль додецилбензолсульфокислоты, г 0,4

Метанол/вода 1: 1, мл До 100

Применяют следующие диазониевые соли:

2-метокси - 5 — хлорбензолдиазонпйтетрацппкат (прочная красная соль RC);

4- бензамидо-2-метил-5-метоксибензолдиазо— нийтетрахлорцинкат (прочная фиолетовая соль R);

4 -бензамидо-2,5 -диметоксибензолдиазонийтетрахлорцинкат (прочная синяя соль RR);

4-бензамидо - 2,б - диэтоксибензолдиазонийтетрахлорцинкат (прочная синяя соль);

4 -метоксифениламинбензолдиазонийхлор ид (варпамин, синяя соль B).

При реакции сульфата кислого фенпламинобензолдиазонита с мочой, содержащей уробилиноген, получают следующие окраски; красно-синяя; красно-фиолетовая; сине-фиолетовая; сине-фиолетовая; сине-зеленая; сине-зеленая.

Пример 7. Фильтровальную бумагу (Шлайхер и Шюлл 23 Я ) пропитывают водными растворами, в которых кроме 5 r кислого сульфата натрия содержится до 05 г следующеи диазониевой соли на 100 мл: фторборат 2,4-диметоксибензолдиазония; фторборат 3,4-диметоксибензолдиазония; фторборат 2,5-диметоксибензолдиазония; фторборат 3,4,5-трпметоксибензолдиазония; фторборат 4-окси-3,5-дихлорбензолдиазония; фторборат 5-хлор-2,4-димето ксибензолдиазония.

Все эти индикаторные бумаги реагируют с мочой, содержащей уробилиноген, с образованием от красной до лилово-красной окраски.

Если эти индикаторные бумаги пропитать

1%-ным раствором следующих смачивающих веществ, то получают прочные от красно-фиолетовой до сине-фиолетовой окраски: додецилбензолсульфокислоты (натриевая соль) в метиленхлориде, лауралсульфат натрия в хлороформе — метаноле, додекансульфокислота (натриевая соль) в хлороформе — метаноле, диоктплпатрийсульфосукцпнат в метпленхлориде.

Пример 8. Фильтровальную бумагу (Шлайхер и Шюлл 23 Я ) пропитывают раствором следующего содержания:

535914

N=-Mo Xs

Составитель Г, Смирнова

Техред А. Камышникова

Редактор Э. Шибаева

Корректор 3. Тарасова

Заказ 450,6 Изд. № 1861 Тираж 1029

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, К-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Типография, пр. Сапунова, 2

5-Аминосалициловая кислота, r 0,2

Метафосфорная кислота, т 15,0

Нитрит натрия, г 0,1

Натриевая соль додецилбензолсульфокислоты, r 0,4

Метанол, мл 5

Вода, мл До 100

И ндикаторная бумага реагирует с мочой, содержащей уробилиноген, с образованием кирпично-красной окраски. Бумага, пропитанная 5-амино-3-сульфосалициловой кислотой, реагирует с образованием кирпично-красной окр а ски.

Формула изобретения

1. Способ обнаружения уробилиногена, например, в моче, на основе цветной реакции при взаимодействии исследуемого образца с носителем, обработанным смесью индикатора, кислоты, по верхностно-активного вещества и стабилизатора, о тл ич а ю щи " я тем, что, с целью повышения чувствительности и обеспечения возможности определения уробилиногена в присутствии билирубина, в качестве индикатора используют бензолдиазониевые соли общей формулы где R(— окси-, алкилмеркапто-, низшие алкоксигруппы;

R2 — окси-, алкокси-, .фенокси-, аралжокси-, алкилмеркапто-, фенилмеркапто-, фенилалкиламиногруппы, замещенные фениламиноили ациламиногруппы; при этом один из остатков R> и Рз могут также быть водородом, галоидом или метильной группой;

Кз и R4 — водород, атом галоида, окси-, алкокси-, фенокси-, алкилмеркапто-, фенилмеркапто-, фенилалкиламино-, замещенные феннлампно-, ациламино-, алкил-, сульфо- и карбокоильные группы;

Х вЂ” хлорид, сульфат, тетрафторборат, тетB рахлорцианат, гексахлорантимонат, арилсульфонат или остаток карбоновой кислоты.

25 2. Способ по п. 1, о тлич ающий ся тем, что в качестве кислоты используют метафосфорную кислоту.