Штамм @ @ @ @ ипм @ -2-продуцент @ -эндотоксина
ШТАММ BACILLUS THURINGIEN- SIS VAR. KURSTAKI ИПМ Z-2-ПРОДУЦЕНТ S-ЭНДОТОКСИНА.Хранится в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского'института прикладной микробиологии, депонирован под регистрационным номером ИПМ Z-2.Морфолого-культуральные признаки.Вегетативные клетки. Крупные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно, парами или цепочками, на агаризованной среде цепочки короткие. Размер клеток
,=- =3 ., н ч. =.,- к(Я
g."ÿ >%1: " " * "" союз советЬ цх. > ."":."- -" "-"- " =
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИН (19) (И) 3(5D А 01 N 63/02
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
H ASTOPGHOMV СВИДЕТЕЛЬС ВУ (21) 2498839/30-15 (22) 22.06. 77 (46) 15.07.84. Бюл. ¹- 26 (72) Э.P.Çóðaáonà, Н.А.Рассомагина, Т.П.Дубинина, Т.П.Круглякова, Е.Н.Карева и Г.П.Панова (7 1) Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии (53) 576.851.51(088.8) (56) 1. Исакова Н.П. Опытный отбор и сохранение штаммов Bacillus thueringiensis для производства энтобактерина-3. Труды ВИЗР. В.31, 1968, с.371.
2. Авторское свидетельство СССР
¹ 144579, кл. А 01 N 15/00, 1961 (прототип) . (54) (57) ШТАММ ВАСП.LUS THURINGIENSIS VAR. KURSTAKI ИПМ Z-2-ПРОДУЦЕНТ б -ЗН,".,ОТОКСИНА.
Хранится в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского института прикладной микробиологии, депонирован под регистрационным номером ИПМ
z-2.
Морфолого-культуральные признаки.
Вегетативные клетки ° Крупные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно, парами или цепочками, на агаризованной среде цепочки короткие. Размер клеток (1,7-1,9)х(3,5-6,9) мк. Перитрихи.
Имеет белковые токсические для насекомых, параспоральные включения кристалл-токсинов (о --эндотоксин), ромбовидной формы с четкими гранями.
Мясо-пептонный агар. Образует колонии с мягкой гладкой поверхностью, белые, матовые с зубчатым краем.
Рост обильный.
Мясо-пептонный бульон. Образует кольцеобразную пленку, умеренное волокнистое помутнение.
Желточная среда. Рост обильный, поверхность гладкая, матовая. Пигмент не образует.
Ломтики картофеля. Рост обильный, сплошной, поверхность гладкая, матовая, пигмент не образует.
Молочный агар. Рост обильный, сплошной, с волнистым краем, с сухой матовой поверхностью белого цвета.
Сывороточный агар. Рост обильный, сплошной, с волнистым краем, поверхность сухая, блестящая, белого цвета.
Физиолого-биохимические признаки.
Аэроб. Граммположительный. Дает положительную реакцию Фельгена.
Оптимум роста 32 С.
Отношение к источникам углерода.
Усваивает: глюкозу, крахмал, эскулин, фруктозу, мальтозу, салицин.
Не усваивает: лактозу, арабинозу, рамнозу, сахарозу, маннозу, сорбит, маннит, ксилозу.
Отношение к источникам азота.
Усваивает нитратные и аммонийные формы азота.
Молоко не пептонизирует.
Желатину не разжижает.
Крахмал гидролизует.
Нитраты восстанавливает.
Антигенные свойства.
Относится к 3 серотипу вида Bacillus
thuringiensis. Не продуцирует термостабильный -экзотоксин.
Патогенные свойства.
Обладает токсичностью для гусениц мельничной огневки, непарного, коль665684 чатого и тутового шелкопрядов, яблонной и капустной моли, златогузки, капустной и репной белянок, рапсового пилильщика и других видов насекомых из отряда чешуекрылых (1.epidoptera 1..)
Фагоустойчивость.Устойчив ко всем производственным фагам.
Изобретение относится к области микробиологии, в частности к производству энтомопатогенных препаратов, применяемых в сельском и лесном хозяйстве для борьбы с вредными насекомыми
Известны штаммы Bacillus thuringiensis (cereus) var. galleriae, V сератипа, которые используются для получения энтобактерина. 10
Однако они недостаточно фагоуатойчивы и продуктивны и обладают несколько другим спектром действия.
Целью изобретения является получение штамма Ш серотипа культуры
Bacillus thuringiensis var. kurstakiпродуцента о -эндотоксина, обладающего высокопродуктивностью, устойчивостью ко многим производственным фагам и более широким спектром действия на вредных насекомых.
ШтАм 2-2 выделен из погибших во время естественной эпизоотии гусениц мельничной огневки (Ephestia
kuehniella).
Полученный штамм Bacillus thurinpiensis var. kurstaki z-2-продуцент о-эндотоксина депонирован в коллекции Всесоюзного научно-исследовательского института прикладной микробио.логии под регистрационным номером
ИЧМ z-2..
Морфолого-культуральные признаки.
Вегетативные клетки. Крупные споровые палочки с закругленными концами расположенные одиночно, парами
Э или цепочками, на агаризованной среде цепочки короткие. Размер клеток (1,7-1,9)х(3,5-6,9) мк.- Перитриха.
Морфологической особенностью является наличие белковых, токсических для насекомых параспоральных включений кристалл-токсинов (о -эндотоксин) ромбовидной формы с четкими гранями.
Мясо-пептонный агар. Образует колонии с мягкой гладкой поверхностью, с зубчатым краем, белого цвета. Рост обильный.
Мясо-пептонный бульон. Образует кольцеобразную пленку, умеренное волокнистое помутнение °
Желточная среда. Рост обильный, поверхность гладкая, матовая.. Пигмент не образует.
Ломтики картофеля. Рост обильный, сплошной, поверхность гладкая, матовая, пигмент не образует.
Молочный агар. Рост обильный, сплошной, с- волнистым краем, с сухой матовой поверхностью белого цвета.
Пептонно-кукурузный агар. Рост обильный сплошной, с ветвистым краем, поверхность сухая, матовая, белого цвета.
Сывороточный агар. Рост обильный, сплошной, с волнистым краем, поверхность сухая, блестящая, белого цвета.
Физиолого-биохимические признаки.
Аэроб. Граммположительный. Дает положительную реакцию Фельгена °
Оптимум роста 32 С. ,Отношение к источникам углерода.
Усваивает: глюкозу, крахмал, эскулин, 1 фруктозу, мальтоэу, салицин.
Не усваивает: лактозу, арабинозу, рамнозу, сахарозу, маннозу, сорбит, маннит, ксилозу.
Отношение к источникам азбта.
Усваивает нитратные и аммонийные формы азота.
Молоко не пептонизирует.
Желатину не разжижает.
Крахмал гидролизует °
Нитраты восстанавливает.
Антигенные свойства.
Относится к lil серотипу вида
Bacillus thuringiensis.
Не продуцирует термостабильный
-экз отоксин.
Патогенные свойства.
Обладает токсичностью для гусениц мельничной огневки, непарного, коль:665684
Таблица1
Гибель гусениц 3-х видов насекомых на 6-е сутки в процентах.
Капустная моль
0,1Х 0,01
Пчелиная огневка Рапсовый пилильщик
Штамм
1Х 0,1Х 1Х 0,1Х Х
100
100
100
59
z-2
0
69 — 6
Т а б л и ц а 2.
Производственные фаги
1 1 1 I
Штамм
4 7 17 18 23 27 25 29 148
z-2
69-6
Корректор О.Тигор
Заказ 5486 Тираж 722 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", r.Óæãîðîä, ул.Проектная, 4 чатого и тутового шелкопрядов, яблонной моли, златогузки, капустной и репной белянок, капустной моли, рапсового пилильщнка и других видов насекомых из отряда чешуекрылых (1.epidoptera L.).
Результаты сравнительного исслеования вирулентности производственного штамма 69-6 и штамма Z-2 пред10 ставлены в табл. 1.
Таким образом, штамм Bacillus
thuringiensis var kurstaki z-2 обладает значительными вирулентными свойствами..
Фагоустойчивость.
Устойчив к йабору производственных фагов (см. табл ° 2)
Пример. Культуру выращивают на дрожжа-полисахаридной среде, со20
Редактор О.IOpKQBa Техред Л.Микеш держащей (вес. Х) кормовые дрожжи 3,0; кукурузную муку 2,8; водопроводную воду 1 л в качалочных колбах на 750 мл с количеством среды
25 мл, рН среды после стерилизации
6,9-7,0.
Ферментацию проводят в глубинных условиях на качалке с числом оборотов 220-240 об/мин при температуре
30-32 С и времени культивирования
72 ч. Получают титр культуральной жидкости 3,5-4 млрд. клеток/мл.
Преимущества предлагаемого штамма Z-2 заключаются в том, что он устойчив по всем производственным фагам, обладает более широким инсектицидным спектром действия и высокопродуктивен, что дает возможность получать препарат с титром 25 млрд, спор/r.
