Способ получения @ -нитроанилидов @ -защищенных аминокислот

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ n-НИТРОАНИЛИДОВ N-ЗАЩИЩЕННЫХ АМИНОКИСЛОТ, . на основе N-защищенной аминокислоты и и.-нитроанилина с использованием активирующего карбоксильную группу соединения, отличающИйс я тем, что с целью упрощения про-цесса ,взаимодействие N -зацищенной аминокислоты с и-нитроанилином осуществляют в одну стадию в присутствии пиридина иди-трет -бутилпирокарбоната в качестве активирующего карбо-ксильную группу соединения.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК ()9) (1П

ЗШ С 07 С 103 50

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

H АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3211889/23-04 (22) 29.10. 80 (46) 30.12.83. Бюл. М 48 (7 2) В.Ф. Позднев (71) Институт биологической и медицинской химии ANH СССР (53) 547 ° 466. 07 (088 ° 8) (56) 1. Патент США Р 4119620, кл. 260-112.5, опублик . 197 8.

2. Патент США Р 4043992, кл. 260-112 R опублик ° 1977.

3. Т.Yoshimofo, М.Pischl. Роя1ргоипе Cleaving Engyme and Postproline Dipeptidyl, Ю . Biol, Chem., 253, 1978, с. 3708-3717. (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 1% -НИТРОАНИЛИДОВ Н-ЗАЩИЩЕННЫХ ANHHOKHCJIOT, . на основе N-защищенной аминокислоты и ю-нитроанилина с использованием активирующего карбоксильную группу соединения, о т л и ч а ю щ и йс я тем,что с целью упрощен; я про-цесса, взаимодействие )) -за цищенной аминокислоты с и -нитроанилином осуществляют в одну стадию в присутствии пиридина и ди-трет -бутилпирокарбоната в качестве активирующего карбо-. ксильную группу соединения.

928763

Изобретение относится к усонершенствонанномУ способу получения и = нитроанилидов N çàùèùåííûõ амино кислот, которые применяются в качестве полупродуктов при получении хромофорных пептидных субстратов протеолитических ферментов и диагностических препаратов.

Изнестен способ получения h -нитроанилида N-защищенного L -пролина

Ф конденсацией N çàùèùåííîãî L -пролина с п-нитроанилином, в котором для активации карбоксильной группы используют хлорокись фосфора. Процесс недут в абсолютном тетрагидрофуране при -15 C в присутствии триэтила- 15 мина, Выход около 50% (lj . Однако этот способ имеет ограниченное применение, так как для других аминокис. лот он неприменим из-за рацемизации.

Известен также„способ получения п-нитроанилидон N-защищенных аминокислот конденсацией п-нитрофенилового эфира N-защищенной аминокислоты с п-нитроанилином н присутствии 2-оксипиридината натрия. Выход 73Ъ.Р)

Недостатками этого способа является необходимость получения и ка- честве исходных реагентов актинированного эфира и катализатора, что усложняет и удорожает процесс.

Наиболее близким к предлагаемому способу по технической сущности и достигаемому результату является способ получения и-нитроанилидов N-защищенных аминокислот, по которому сначала N-защищенную аминокислоту активизируют с помощью дициклогексилкарбодиимида н тетрагидрО фуране при 0 С, затем отфильтровына-, о ют дицик лог ек силмоч енину, после ч его полученный симметричный ангидрид

N-защищенной аминокислоты подвергаО ют взаимодействию с п-нитроанилином при О C. По окончании реакции раствор упаривают и из остатка кристаллизацией из эфира получают целевой 45 продукт с выходом 69% f.З3

Недостатками этого способа являются днухстадийность процесса и тот факт, что продуктивно используется менее половины взятой н реакцию N — 5Q защищенной аминокислоты.

Целью изобретения является упрощение процесса.

Цель додтигается тем, что взаимодействие N"-защищенной аминокислоты с 55 п-нитроанилином осуществляют в одну стадию в присутствии пиридина и дитрет-бутилпирокарбоната н качестве активирующего карбоксильную группу соединения, 60

Отличительными признаками пред лагаемого способа являются и спал ь зовайие в качестве активизирующего карфоксильную группу соединения ди-третбутилпирокарбоната и проведение про- j5 цесса в одну стадию в присутстнии пи ридина при комнатной температуре °

При осуществлении конденсации с помощью ди-трет -бутилпирокарбоната фОК О) в качестве промежуточного активированного соединения образуется смешанный ангидрид Ф:защищенной аминокислоты итрет-бутилового эфира угольной кислоты, который по мере образования реагирует с п-нитроанилином с образованием п-нитроанилида.

Реакцию проводят н апротонных органи ческих растворителях в присутствии пиридина при обычной температуре и давлении. Пиридин в этой реакции выполняет функцию основания и катализатора. В выбранных условиях реакции БОК О реагирует с карбоксильной группой значительно быстрее, чем с п-нитроанилином. Образующийся в результате реакции трет -бутанол не реагирует ни с БОК О, ни со смешанным ангидридом. Благодаря этому практически единственным продуктом реакции является и-нитроанилид и процесс можно проводить без выделения смешанного ангидрида, т.е. сразу смешивая все компоненты ре,акции.

Ди-трет -бутилпирокарбонат всегда используют в избытке по отношению к N-защищенной аминокислоте. В качестве растворителя обычно применяют бензол или смесь бензола с этиМацетатом. Контроль за ходом реакции осуществляют по выделению двуокиси углерода и по ТСХ. П -Нитроанилид выделяют экстракционным методом с Iio» следующей кристаллизацией из подходящих растворителей. Выход целевого продукта 60-90%.

Пример 1. т) -Нитроанилид

N-трет-бутилоксикарбонил-L-пролина.

Раствор 1,3 r (6 ммоль) БОК-L-npo лина, 0,4 мл пиридина,0,9 г п-нитро,анилина и 1, 5 мл (6,8 ммоль) БОК О ..

1 н 10 мл бензола перемешивают при 2223 С 6 ч и оставляют на ночь.

Затем добавляют 0 5 мл.ВОК О перемешивают 2 ч, смесь разбавляют

20 мл этилацетата, фильтруют, осадок на фильтре промывают этилацетатом, Фи трат пром ают водой. О.™ НгЯ04 водой, 1М К СО, водой, рассолом, высушивают Na

Найдено,Ъ: С 57,90; Н 6,50;

N 12,41

С„6 Н „N Oy *

Вычислено, Ъ: С 57,30; Н 6,31;

N 12,52.

9287 63

Составитель М.Бибикова

Редактор З.Бородкина Техред N .Гергель Корректор A.Ïîâõ

Заказ 10598/8 Тираж 418

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, .4

Пример 2. п-Нитроанилид Ф тра -бутилоксикарбонил-L-фенилаланина, Из 0,8 г БОК-L-фенилаланина, 0,2 мл пиридина, 0,5 г и-нитроанилина и 1 мл БОК О в смеси 5 мл бензола и 3 мл этилацетата в условиях приме- 5 ра 1 получают 0,8 г (69%) целевого продукта, т . пл . 16 8- 16 9 С f ý ôè ð- петро" лейный эфир). fag -74 (с 1, дМФА), Rf 0,7.

Найдено, В: С 62, 56; H 5, 80; 10

N 11 12.

С Н, Ы О;

Вычислено,%: С 62,32; H 6,01;

N 10,90.

Пример 3. П -Нитроанилид трет -бутилоксикарбонилглицина.

К смеси 1,75 г БОК-глицина, 0,7 мл пиридина, 1,4 г нитроанилина в 10 мл бензола и 5 мл этилацетата при пере- 20 мешивании добавляют БОК О тремя порциями по 1 мл через каждые 1, 5 ч и перемешивают еще 2 ч, причем образуется кристаллический осадок. его отфильтровывают, промывают эфиром и после высушивания получают 1,8 г (61%) целевого продукта, т.пл.194195 С. Rf 0,55.

Найдено,%: С 53,10; Н 6,13;

N 14,12

С, Н,д Н ф.

Вычислено, Ъ: С 52, 87; Н 5, 80;

N 14,23. а(Пример 4. и -Ннтроанилид N-. бензилоксикарбонил-L -пролина.

Раствор 1,2 г (4,85 ммоль) КБЗ- „пролина, 0,9 г нитроанилина 0,4 мл пиридина-и 1,5 мл БОК О в б мл этилацетата перемешивают нри 20аС 16 ч.

Смесь разбавляют этилацетатом до

30 мл, обрабатывают, как в примере 1> и после упаривания растворителя получают маслообразный остаток (1,8 г) который кристаллизуют из эфира. Получают 1,0 г (56%) кристаллического продукта, т.пл. 159-160ОС., fg) -100 (с 1,СНЗОН) .

Таким образом, предлагаемый способ получения п-нитроанилидов Nзащищенных аминокислот представляет собой простой в технологическом отношении процесс, осуществляемый в одну стадию и лишенный недостатков ,известных способов. Выделение целе . вых продуктов отличается простотой. и качество их высокое без пециальной очистки.