Способ получения вещества,специфически связывающего раково- эмбриональный антиген опухолей толстого кишечника человека

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (1% (11) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3398561/28-13 (22) 28.12.81 (46). 07.09.86. Бюл.¹ 33 (71) 2-й Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова и Тихоокеанский институт биоорганической химии (72) Ю.С.Оводов, А,Ф.Павленко, А.В.Курика, В.В.Калашников и Ю.С.Татаринов (53) 664.38(088,8) (511 4 А 61 К 35/56 А 61 К 37/02 (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, СПЕЦИФИЧЕСКИ СВЯЗЫВАЮЩЕГО РАКОВОЭМБРИОНАЛЬНЫЙ АНТИГЕН ОПУХОЛЕЙ ТОЛСТОГО

КИШЕЧНИКА ЧЕЛОВЕКА, заключающийся в том, что ткань рака отшельника Pagurus prideauxi обрабатывают физиологическим или буферным раствором, гомогенизируют, после чего полученный экстракт диализуют против дистиллированной воды и лиофилизируют.

Ф 2

Редактор О.Юркова Техред Л.Сердюкова . Корректор С.111екмар

Тираж 660 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Заказ 4845/1

Производственно-полиграфическое предприятие, г,ужгород, ул.Проектная,4

Изобретение относится к биотехнологии и касается получения препарата, который может быть использован для иммунодиагностики, мониторинга и иммунотерапии опухолей.

Целью изобретения является получение вещества, специфически связывающего раково-эмбриональный антиген опухолей толстого кишечника человека.

Цель достигается тем, что способ получения вещества, специфически связывающего раково-эмбриональный антиген опухолей толстого кишечника человека заключается в том, что ткань отшельника Pagurus prideauxi обрабатывают физиологическим или буферным раствором, гомогенизируют, после чего полученный экстракт диализуют против дистиллированной воды и лиофилизируют.

Пример 1. Рака отшельника

Pagurus prideauxi освобождают от раковины и взвешивают. К 51 г тканей прибавляют 50 мл физиологического раствора хлористого натрия и гомогенизируют на гомогениэаторе Мр11 302 (Польша) в течение 10 мин при

10000 об/мин на ледяной бане, Экстракцию проводят перемешиванием гемогената механической мешалкой в течение 30 мин при комнатной температуре после чего его центрифугируют при

3000 g в течение 15 мин, Надосадочную жидкость диализуют против дважды сменяемой в,сутки дистиллированной воды при +4 С в течение 3 сут и лиоофилизируют, Получают 1,2 г (2,37.) вещества, содержащего РЭА-преципитин.

П р и м. е р 2. К 20 г ткани рака отшельника Pagurus prideauxi, освобожденного от раковины и хитинового покрова, прибавляют 25 мл 0,05 М фосфорного буфера рН 7,4, гомогенизируют, диализуют, как описано в примере 1. Получают 0,48 r (2,47) вещества, содержащего РЭА-преципитин.

Пример 3, К 10 г ткани рака отшельника Pagurus prideauxi прибавляют 15 мл 0,1 M трис-НС1 буфера рН 5,5, гомогенизируют, диализуют и лиофилизируют, как описано в примере 1, Получают 0,24 г (2,47.) РЭА-преципитинсодержащего вещества.

Специфичность РЭА-преципитина оп10 ределяют посредством иммунологических реакций.

Двойная диффузия по Оухтерлони.

При постановке реакции РЭА-преципитина с экстрактами нормальных органов

15 и объединенной плазмы доноров не выявляется линий преципитации, При постановке реакции РЭА-преципитина со стандартным образцом раково. эмбрионального антигена, а также

20 с экстрактами опухолей толстого кишечника образуется четкая линия преципитации.

Сопоставление экстракта РЭА-преципитина с моноспецифической сывороткой к раково-эмбриональному антигену показывает их полную идентичность.

Ингибирование реакции преципитации, Реакция образования преципитата

30 между РЭА-преципитином и раково-эмбриональным антигеном не ингибируется экстрактами нормальных органов и объединенной плазмы доноров, что указывает на строгую специфичность взаимодействия между РЭА-преципитином и раково-эмбриональным антигеном аналогично взаимодействию раково-эмбрионального антигена с моноспецифической антисывороткой.

40 Предлагаемый способ обеспечивает

Ф получение вещества, специфичного только к раково-эмбриональному антигену, что позволит использовать его для иммунодиагностики, а также для

45 доставки лекарственных препаратов к опухолям, содержащим раково-эмбриональный антиген, 4