Состав для стабилизации стрептокиназы
1. СОСТАВ ДЛЯ СТАБИЛИЗАЦИИ СТРЕПТОКИНАЗЫ на основе желатины, содержащий хлористый натрий, дистиллированную воду, отличающийс я тем, что, с целью увеличения срока сохранности активности фермента, состав содержит гидролизованную желатину(желатиноль) и дополнительно сернокислый магний при следующем соотношении ингредиентов, мас.%: Желатиноль0,2 -. 0,6 Хлористый натрий 0,85 - 0,90 Сернокислый магний 0,05 - 0,20 Дистиллированная ч; Остальное вода 2. Состав поп. 1, отличаюtn и и с я тем, что, с целью увеличе:ния сохранения активности фермента при лиофилизации, он дополнительно содержит 1-4 Мас.% аминоуксусной g кислоты. (Л
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
3(51) 1, ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3458316/28;13 (22) 25.06.82 (46) 07.04.84. Бюл. Р 13 (72) Е.N,Смирнова, В.H.Àëåêñååâà, Н.А.Литке, Н.З.Мания, Н.M.Øàøêîâà, М.М.Немирович-Данченко, О,Г.Байдакова, T.È.Äàâûäîâà, Е.A.Ñåìåíoâà . и В.В.Лебедева (71) Ленинградский научно-исследова.тельский институт вакцин и сывороток (53) 577.15(088.8) (56) 1. Проспект фирмы Behringwerke фР1 На8шассе1,Marburg-lahn 1971 °
2. Авторское свидетельство СССР
;У 897247, кл. A 61 К 37/48, 1979. ,(54)(57) 1. СОСТАВ ДЛЯ СТАБИЛИЗАЦИИ
СТРЕПТОКИНАЗЫ на основе желатины, содержащий хлористый натрий, дистил„„SU„„,l 084024 А
:лированную воду, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью увеличения срока сохранности активности фермента, состав содержит гидролиэованную желатину(желатиноль) и дополнительно сернокислый магний при следующем соотношении ингредиентов, мас.З:
Желатиноль 0,2 -,0,6
Хлористый натрий 0,85 — 0,90
Сернокислый магний 0,05 — 0,20
Дистиллированная <„- Остальное вода
2. Состав по п. 1, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью увеличения сохранения активности фермента при лиофилизации, он дополнительно содержит 1-4 мас.В аминоуксусной Е
Я кислоты.
1084024
С целью увеличения сохранения активнос и стрептокиназы при лиофили- зации, состав дополнительно содержит
1-4 мас.Ъ аминоуксусной кислоты. 60
Использование желатиноля вместо желатины обеспечивает возможность медицинского применения стабилизируемого препарата, так как данная молекулярная форма — основа стабилизи- 65
Изобретение относится к технологии получения ферментов медицинского назначения и может быть использовано для стабилизации препаратов, действующим началом которых является фермент стрептокиназа. 5
Известен состав для стабилизации стрептокиназы(1 3, включающий следующие компоненты, вес.Ъ:
Желатин, 0,63
Хлористый натрий 0,85
Хлористый калий 0,038
Хлористый кальций 0,07
Дистиллированная Остальное вода
Однако этот состав обеспечивает сохранение исходной фибринолитической активности стрептокиназы лишь в течение 24 ч.
Известен также состав 2)для стабилизации стрептокиназы на основе 20 водного раствора желатины, содержащий следующие компоненты, вес,-:
Желатин для инъекций 0,25.. — 0,45
Хлористый натрий 0,06 — O,IO
Хлористый калий . 0,0025-0,0040 25
Хлористый кальций 0,005-0,009
Ал анин 0 5 — 1,5
Дистиллированная вода Остальное
Данный состав также не обеспечивает длительного сохранения фибринолитической активности стрептокиназы (эта активность сохраняется лишь в течение 72 ч). Кроме того, поскольку концентрация минеральных компонентов последнего состава на порядок ниже, чем в физиологическом растворе, затруднено использование целевого продукта по медицинскому назначению.
Целью изобретения является увеличение срока сохранности фибриноли .и40 ческой активности целевого продукта.
Поставленная цель достигается тем, что состав для стабилизации стрептокинзы на основе желатины, включающий хлористый натрий, дистил- 45 лированную воду, содержит гидролизованную желатину (желатиноль) и дополнительно сернокислый магний при следующем соотношении ингредиентов, мас.Ъ: 50
Желатиноль 0,2 — 0,6
Хлористый натрий 0,85 — 0,90
Сернокислый маг- 0,05 — 0,20 ний
Дистиллирован- S5 ная вода Остальное рующего состава, допущена фармкомитетом Минздрава СССР к внутреннему введению. Кроме того, данная форма основы обладает значительно меньшим разбросом молекулярной массы, что важно для стандартизации целевого продукта.
Причем желатиноль проявляет стабилизирующие свойства только в присутствии: сернокислого магния, при наличии в рец утчре сернокислого магния отпадает необходимость в введении хлоридов калия и кальция. Указанная концентрация хлористого натрия обеспечивает ионную силу раствора целевого продукта, соответствующую физиологической среде.
При стабилизации препаратов стрептокиназы, подлежащих лиофилизации, целесообразно в составе предлагаемой рецептуры дополнительно ввести 1,0-5,0 вес.В аминоуксусной кислоты.
Пример 1. Стабилизирующий состав готовят растворением в дистиллированной воде желатиноля, хлористого натрия и кристаллогидрата сернокислого магнияМ Я 7Н Оиз расчета следующей конечной концентрации указанных ингредиентов, вес. Ъ: желатиноль
0,6; хлористый натрий 0,85;plqS04 7Н о
0,41 (что обеспечивает содержанйе сернокислого магния 0,20); дистиллированная вода остальное.
Этим составом разбавляют концент.— рат стрептокиназы до конечной активности фермента 13000 ед/мл. Одну часть стабилизированного раствора стрептокиназы хранят при комнатной температуре в жидком виде, а другую — при той же температуре в лиофилизированном состоянии.
Данный стабилизирующий состав наиболее эффективен для жидкого препарата.
Пример 2. Стабилизирующий состав готовят аналогично примеру
1 при тех же соотношениях ингредиентов. В состав дополнительно вносят
4 вес.Ъ аминоуксусной кислоты.
Этот состав используют для стаби-. лизации препаратов с исходной актив-. ностью 125000 и 200000 ед/мл.
Дополнительное введение аминоуксусной кислоты способствует сохранению фибринолитической активности при лиофилизации стрептокиназы.
Пример 3 . Стабилизирующий состав готовят растворением в дистиллированной воде желатиноля, хлористого натрия, кристаллогидрата.сернокислого магния и аминоуксусной кислоты из расчета следующей конечной концентрации указанных ингредиентов, вес.Ъ: желатиноль 0,2; хлористый натрий 0,9;Nq504, 7Н2О 0,1 (что обеспечивает содержание сернокислого мат—
1084024
Активность по срокам хранения, ед(мл
ПриИсходная активность, ед/мл мер идкий препарат
Сухой препарат
2 недели 2 мес. 2 года недели 2 мес.
1 130000 (100%) 126000 (96,5%) 120000 (92,5%) 90000 (69,2%) 60000 (46,1%) 120000 (96%) 118000 (94%) 120000 (96В) 120000 (29%)
198000 (99%) 190000 (95%) 195000 (98%) 188000(94%)
255000 (94%) 245000 (913) 255000 (94%) 250000 (93%)
265000 (95%) 263000 (94%) 270600 (96%) 264000 (94%) 2 125000
20000
3 270000
280000.
5 470000(100%) опытов
64 250000(100%) опыта
5 350000(100%) 256000 (97%) 446000 (95%) 451000 (96%) 428000 (91%) 238000(95%) 241000(96,5В) 244000(97,5%) 334600 (95,5%) 322700(92, 2%) 273300(67,8%) 160000(45,7%)—
242000(97%) 232200(92%) 177500(71%) 120500(40%)
471000(94%) 456500(91%) 335500(67%) 221000(44%) 6 250000
500000 .
ВНИИПИ Заказ 1853/5 Тираж 688 Подписное
Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул.Проектная„ 4 ния, О, 05); аминоуксусная кисло па
1, О; дистиллированная вода остальное.
Пример 4. Стабилизирующий . состав готовят согласно .примеоу 3
5 из расчета следующей конечной концентрации ингредиентов, вес.В: желатиноль О, 4; хлористый натрий
О, 85;hlg50 7I{p0, 25 (что обеспечив ает содержание сернокислого магния 0,12); аминоуксусная кислота 2,0; дистиллированная вода остальное.
Данное соотношение ингредиентов является оптимальным. Оно позволяет хранить препарат стрептокиназы в лиофилизированном виде до двух лет 15 без существенного уменьшения фибринолитической активности..
Пример 5. Стабилизирующий состав готовят растворением в дистиллированной воде желатиноля, хлорис- g() того натрия, кристаллогидрата сернокислого магния из расчета следующей конечной концентрации указанных ингредиентов, вес ° %: желатиноль 0,2; хлористый натрий 0,87;hlgSo4 7Н 00,1, 25 (что обеспечивает содержание сернокислого магния О, 05); дистиллированная вода остальное.
П р и м .е р 6 ° Стабилизирующий состав готовят растворением в дистил- лированной воде желатинол", хлористого натрия и кристаллогидрата сернокислого магния из расчета конечных концентраций ингредиентов, вес.В: желатиноль 0,4; хлористый натрий
0,8уФдЩ 7Н О,2 (что обеспечивает содержание сернокислого магния O,l; дистиллированная вода остальное.
Этот состав используют для стабилизации препаратов стрептокиназы..
Результаты контроля фибринолитической активности жидкого и лиофилизированного препаратов стрептокиназы по срокам хранения, обработанных стабйлизирующим составом по примерам 1-6 представлены в таблице (фибринолитическая активность дана в единицах Коникова).
Таким образом, предлагемый состав может обеспечить сохранение фибринолитической активности стрептокиназы до дух лет, тогда как известный стабилизатор позволяет сохранить эту активность лишь .в течение
1-3 сут °
