Способ моделирования гипобиоза у теплокровных животных

 

СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ГИПОБИОЗА У ттиЮКРОВНЫХ животных путем введения рауседила и последующей иммобилизацией животного, отличающийся тем, что, с целью сокращения сроков введения в гипобиоз и удлинения периода поддержания гипобиоза , дополнительно вводят 5-окситриптофан в дозах 75-125 мг/кг веса и поддерживают температуру окружающей среды на 3-8 С ниже температуры тела животного. (Л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ ОИМФПН

РЕСПУБЛИК

O9} 01}

goal} G 09 В 23(28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ;

К ABTOPGHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21 )3452794/28-13

g2) 14.07.82 (46) 07.05.84. Бюл. ¹ 17 (72) Н.Н.Тимофеев, В.В.Ивлева, T.À.Üàòàøåâà и Г.А.Константинов (71 ) Научно-исследовательский институт фармакологии АИН СССР (53) 615. 777С779 (088.8) (56) 1. Тимофеев H.H. и др. Физиологические механизмы развития глубоких состояний искусственного гипобиоза. ,,П., "Физиологический журнал СССР им. И.Н.Сеченова", 1981, Р 7, т.Xll с. 1014-1019.

2. Тимофеев Н.Н. Искусственный гипобиоз как устойчивое функциональное состояние сниженной жизнедеятельности."Успехи физиологических наук", 1981, т. 12, № 4, с.52-72. (54) (57) CIIOCOB Г10ДЕПИРОВАНИЯ ГИПОБИОЗА У TEIIJIOKPOBHhIX ЖИВОТНЫХ путем введения рауседила и последующей иммобилизацией животного, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью сокращения сроков введения в гипобиоз и удлинения периода поддержания гипобиоза, дополнительно вводят 5-окситриптофан; в дозах 75-125 мг/кг веса и поддерживают температуру окружающей среды на 3-8 С ниже температуры тела животного.

1091213

Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине, а именно к экспериментальной физиологии и может быть использовано для получения длительно пролонгкруемых состояний сниженной жизнедеятельности гипобиоза), в значительной степени приближающихся к естественному гипобиозу гетеротермных организмов.

Известны способы получения состоя- IÐ ний глубокого гипобиоэа с использованием нейроплегических вешеств (аминазин, пипольфен, промедол в дозах

7:5:1 мл/кг массы соответственно с применением гипоксической (10-8 0<)15 или гИпоксическо-гиперкапнической (l0-12 . О> и 12-13% СО ) газовых сред (1 .

Наиболее близким к предлагаемому . является комбинированный способ, за. — 20 ключающийся в том, что рауседил (0,4-0,8 мг/кг массы), за сутки до начала опыта; за 15-20 мин до начала охлаждения — дроперицол (0,4 мг/кг), охлаждение ведется при 3-5 С в усло- 25 виях гипоксической или гипоксическо-гиперкапнической газовой среды, что дает возможность охладить животное до 20-24оС в течение 4-5 ч и перевести его на режим пролонгирования, затем в течение 1,5-2 ч газовый состав нормализуют и поднимают окружаюушю температуру до 18-20 C„

В указанных условиях удается поддерживать состояние только ггубокого гипобиоза не более 30-40 ч j 2 ).

Однако описанные способы моцелирования гипобиоза приводят к вымыванию серотонина из энтерохромофинных клеток желудка и кишечника, что вле- 4> чет за собой десквамацию покрывающего эпителия, изъявлению слизистой и

->TeK подслизистого слоя, и в некото" ых случаях могут приводить к гибели животного.

Цель изобретения — сокращение сро-* ков введения в гипобиоз и удлинение периоца поддержания гипобиоза.

Поставленная цель достигается тем, 50 что согласно способу моделирования гипобиоза у теплокровных животных путем введения рауседила и последующей иммобилизацией животного, дополнительно. вводят 5-окситриптофан в дозах 75-125 мг/веса и лоддержиSS вают температуру окружающей среды на

3-8 С ниже температуры тала животного.

Способ осуществляют следующим образом, Животным (крысам, кроликам, хомя 1 кам в активный период жизнедеятельности. весна-лето) внутримышечно вводят рауседил из расчета 0,4-0,8 мг/кг массы. Затем вводят 5-HTP в дозе 75125 мг/кг массы внутрибрюшинно, непосредственно после премедикации животных иммобилизируют и оставляют при комнатной температуре. В этом случае происходит постепенное равномерное снижение температуры тела и к 15-20 ч теплообмен стабилизируется на необходимом уровне. Этот способ обычно используется при получении поверхностного гипобиоза или гипобиоза

О средней глубины (35-36, 26-34 С соответственно .

Дпя получения гипобиоза с более низкими температурами или при необходимости быстро снизить температуру те ла после премедикации рауседилом животных ос авляют при комнатной температуре íà 15-20 ч без фиксации, при свободном доступе к пище и воде.

За этот период истощение КА резервов достигает необхоцимого уровня и, хотя температура тела снижается иео, значительно 11,0-1,5 С/, организм уже приобретает свойства пойкилотермности. После чего животным вводят

5-HTP в тех же дозах, иммобилизируют их и помещают в.герметическую термоо камеру при температуре среды 15-5 С или сохраняют комнатную температуру (20 ()

В любом случае через 2-3 ч температура тела снижается до заданного уровня и животных переводят на режим пролонгирования, в котором тем,пературу среды восстанавливают до необходимого уровня (температура среды 20 С, а умеренную иммобилизаО 1 цию сохраняют в течение 1-2 сут для исключения произвольных движений животного. Таким образом поддерживают гипобиоз в течение 3-5 сут (a в отl дельных случаях у кроликов до 9/ °

При необходимости в ходе эксперимента можно изменять температурный режим: повышать температуру тела, соответственно повышая температуру среды или устраняя иммобилизацию, или переводить на более низкий температурный уровень, кратковременно понижая температуру среды.

Восстановление жизнедеятельности животных проводится повышением

1091

Составитель О.Макаренко

Редактор A.Ìîòûëü Техред Ж. Кастелевич Корректор О.Билак, Заказ 3086/48 Тираж 447 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная. 4 температуры среды до уровня температуры тела, после чего животное поднимает свою температуру, восстанавливая температурный градиент. При гипобизе средней глубины f28-30 С пролонгируемом не более 2 сут, после прекращения иммобилизации животное согревается за 5-6 ч.

Доза рауседила 0,1-0,35 мг/кг массы не вызывала у животных стойкого 10 гипотермического эффекта.

Пример 1. В опыт .взято 5 белых беспородных крыс 00 массой 2101

+16 г и температурой тела (Т ) 38+

+ o

0,2 С. В 17 ч животным введен рау- 15 оо седил из расчета 0,4 мг Rг массы, после чего их оставили в клетке на ночь при температуре среды (Т р) +21 С и свободном доступе к пище и воде. В оо

9 ч следующего дня внутрибрюшинно 20 введен 5-HTP: l-й крысе 75 мг/кг;

2-й 100 мг/кг; 3-й 125 мг/кг, 4-й

150 мг/кг; 5-й 200 мг/кг массы; Жинотные фиксированы к доскам с помощью металлических дужек, одеваемых на шею и спину. Т р 20 С. Через 2 ч ото мечалось максимальное снижение Тт у 1-й 35 2 С; 2-й 29,8 С; 3-й 25,0 С;

4-й 22,5 С, 5-й 21 . Еще через 2 ч (через 4 ч после введения 5-НТР) Т> 30 стабилизировалась у 1-й на 37,0 С;

2-й 30,2 С; 3-й 26,0 С; 4-й 23,0ОС .

5-й 21,5 С.

Однако 5 и 4 крысы погибли через

36 и 40 ч после введения 5-HTP co35 ответственно, 3-я держала Т стабиль но в течение 2 сут, но быпа слабой и медленно восстанавливалась при выведении из гипобиоза. Наилучшим вари. антом были дозы рауседила 0,4 и

5-HTP 100 мг/кг веса, крыса находилась в состоянии гипобиоза в течение 3 сут и хорошо восстанавливала физиологические функции.

Пример 2. 3 крысам с сред- ц ним весом 220+25 r u Tr 37,8 «+ 0,3 С введен рауседил из расчета 0,3 мг/кг массы, а через 16 ч 5 HTP в дозе:

213 4

6-й 75 мг/кг; 7-й 100 мг/кг; 8-й

125 мг/кг по схеме, описанной в примере 1. Через 2 ч после иммобилизации 7 и 8 крыс Т„- упала до 19 и 18 С соответственно при Т р 17 С и стабио лизировалась на 20,8 С через I ч.

Однако крыса 7 погибла через 2 сут пролонгирования, 8 — .через 40 ч. Оптимальными в этом сочетании оказались доза 0,8 и 75 мг/кг массы. Однако при длительном (более 2 сут) поддержании гипобиоза эта дозировка рауседила довольно часто 453 случаев) оказывала ульцирогенное действие.

Аанализ проведенных исследований показал, что наиболее оптимальным сочетанием доз рауседила и 5-НТР являются дозы 0,4 и 100 мг/кг массы соответственно. При этом гипобиоз средней глубины (T> 30 С ) достато;:о фиксировать животных при Т 19-20 С а о для глубокого гипобиоза (Т 20 С) на время охлаждения необходимо снижать

О, Тср до 1 5-5 С с последующим восстановленнем до 17 С.

О, Для быстрого введения в состояние гипобиоза и поддержания его не более 2 сут возможно использова-, ние доз 0,8 и 75 мг/кг или 0,4 и

125 мг/кг массы.

Таким образом, предлагаемый способ моделирования гипобиоза у теплокровных животных позволяет переводить организм в состояние пойкилотермии, быстрее снижать Тт до желаемого уровня, длительно поддерживать гипобиоз на заданном температурном уровне с помощью однократного введения рауседила и 5-НТР, иммобилизации и поддержания необходимого температурного градиента (3-8 С). Получено ное предлагаемым способом состояние сниженной жизнедеятельности по физи ологическим механизмам развития в значительной степени приближается к естественному гипобиозу гетеротермов.