Способ серологической диагностики бруцеллеза у крупного рогатого скота
(19) (11) СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
3(51) А 61 B 10/00
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ к автореномУ СвидкткпьСтв
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3469494/30-15 (22) 12.07.82 (46) 15.05.84. Бюл. 9 18 (72) Т.С.Сайдулдин (71) Семипалатинский зоотехническоветеринарный институт (53) 576.8.077 (088.8) (56) 1.Лабораторные исследования в ветеринарии. N., "Колос", с, .68-77. (54 ) (5 7) СПОСОБ СЕРОЛОГИЧЕСКОЯ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА, включающий инактивацию испытуемой сыворотки путем ее нагревания, добавление бруцеллезного антигена и сыворотки крови, содержащей ком лемепт и конглютинин, инкубацию полученной смеси, последующее добавление сенсибилизированных гемолизином эритроцито в барана и анализ ре акции по степени агглютинации эритроцитов, отличающий сятем,что,с целью повышения чувствительности способа, к образовавшимся агглютинатам эритроцитов дополнительно добавляют 0,0?-0,05 мл 1Ъ-ного раствора трилона Б и анализ ведут по степени распада агглютината эритроцитов под действием трилова E.
10e1Э08
Со<-..; витель С. Светлышев
" ехред
Корректор I Огар
Редактор Т,Иитейко
Эаказ 3161/3
Тир;.цк 6 88 Подписное
3НИИПИ 1,"осударственногс комитета СССР па делам изобретений и открытий ...=3035, Ioc Ф;; —.и —.. ППП "П-.тая-..., г. уж -Dpop ул. Проектная, 4 Изобретение относится к ветеринарии, в частности к диагностике инфекционных болезней животных. Известен ряд способов серологической диагностики бруцеллеза у крупного рогатого скота, например, в реакциях агглютинации, связывания комплемента, кольцевой реакции с мо. лохом, а также в реакции связывания комплемнта, При этом к инактивированной испытуемой сыворотке добавляют антиreн и комплемент, а после определенного времени сенсибилизированные гемолиэином эритроциты барана. По гемолизу эритроцитов судят о наличии бруцеллезных антител в ис- 15 пытуемой сыворотке крови (1) Однако известные методы характеризуются недостаточной чувствительностью, что обусловливает необходимость многократного исследования животных 20 для полного выявления всех заболев-ших. Целью изобретения является повы-шение чувствительности способа серологической диагностики бруцеллеза у Крупного рогатого скота. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу серологической диагностики бруцеллеза у крупного рогатого скота, включающему инактивацию испытуемой сыворотки путем ее нагревания, добавление бруцеллезного антигена и сыворотки крови, содержащей комплемент и конглютинин, инкубацию полученной смеси, последующее добавление сенсибилизированных гемолизином эритроцитов барана и анализ реакции по степени агглютинации эритроцитов, дополнительно добавляют 0,02-0,05 мл 1В-но(го раствора трилона Б и анализ ведут по степени распада агглютината эритроцитов под действием трилона Б. Пример. Испытуемую сыворотку крови в объеме по 0,25 мл н разведениях 1:5 (контроль), 1:5„ 1:10 и т, д. (опытные) инактивируют в водяной бане при 58-60 С 30 мин. В опытные пробирки вносят по 0,25 мл бруцеллезного антигена в титре, указанном на этикетке, а в контрольную пробирку — такой же объем физиологического раствора. Во все пробирки добавляют нормальную конглютинирующую сыворотку крупного рогатого скота, содержащую комплемент и конглютинин, Смесь выдерживают в водяной бане при 37 С 30 мин, после чего добавляют по 0,25 мл индикаторной система, приготовленной из равных объемов 2Ъ-ной взвеси эритроцитов барана и гемолизина в двойном титре. Пробирки выдерживают 1 ч в водяной бане и еще 16 ч — при комнатной температуре. Добавляют по 0,02-0,05 мл 1Ъ-ного раствора трилона Б и энергично встряхивают. Полный распад конглютината с образованием гомогенной взвеси эритроцитов принимают за отрицательный результат, а сохранение мелких комочков склеенных зритроцитов с просветлением основного фона — за положительный. Использование предлагаемого способа существенно повышает эффективность серологических исследований на бруцеллез, позволяет за короткие сроки наиболее полно выявить больных животных в неблагополучном стадЕ.
