Способ получения иммуноглобулина

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЖНА из сыворотки крови путем последовательного осаждения этанолом на холоде с очисткой в изоэлектрической точке, отличающийся тем что, с целью повьшения степени очистки целевого продукта от гемпигментов, осадок после второй обработки этанолом обрабатывают полиэтиленгликолем концентрации 10-12% при 10-20 С и рН 5,6-6,0. i

сОюэ ссветсних

РЕСПУБЛИК,SU„„109170 А зЮ А 61 К 39/395

ОПИСАНИЕ . ИЗОБРЕТЕНИЯ1 "

"::.КТВД ВВ

К ILO TOPCIIONIV СВСВТЮЪСТВТ госудАрственный комитет ссср

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И 01МРЫТИЙ (21) 3441323/28-13 (22) 30. 03. 82 (46) 23.08.84. Бюл. У 31 (72) В.Н.Мигунов, И.М.Позина, Л.P Êóòèìîâà, Ф.Л.Миниович, С.А.Лобань, Т.Д.Ляхова и Т.С.Котова (71) Московский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова (53) 615.361.018.51/55 (088.8) (56) 1. Регламент производства иммуноглобулина человеческого нор» мального. 1979, В 131 (прототип). (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИИИУНОГЛОБУЛИНА из сыворотки крови путем последовательного осаждения этанолом на холоде с очисткой в изоэлектрической точке, о т л и ч а ю щ и й— с я тем, что, с целью повышения степени очистки целевого продукта от гемпигментов, осадок после второй обработки этанолом обрабатывают полиэтиленгликолем концентрации

10-12Х при 10-20 С и рН 5,6-6,0.

1109170

Составитель E.Êîë÷èíà

Редактор О.Бугир Техред Л. Коцюбняк Корректор Л.Пилипенко

Заказ 5970/5 Тираж 688 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35„ Раушская наб., д. 4/5

Филиал ПНП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения иммуноглобулина из сыворотки крови, и может быть использовано в

Вакцино-сывороточном. производстве. 5

Известен способ получения иммуноглобулина путем последовательного фракционирования белковых фракций сыворотки крови этиловым спиртом при отрицательных температурах $1 ).

Недостатком известного способа получения иммуноглобулина является значительное содержание гемпигментов.

Цель изобретения — повышение степени очистки иммуноглобулина от гемпигментов.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу получения иммуноглобулина из сыворотки крови путем последовательного осаждения 20 этанолом на холоде с очисткой в изоэлектрической точке, осадок после второй обработки этанолом обрабатывают полиэтиленгликолем концентрации 10-12Х, при 10-120 С и рН 25

5,6-6,0.

Пример. Сыворотку крови обрабатывают этиловым спиртом концентрации SX, рН 7,0 и температуре 2 С.

Надосадок охлаждают до 50С. Проводят осаждение глобулиновой фракции этанолом при концентрации 26Х, рН 7,2.

Полученный осадок глобулинов растворяют в 0,15 М хлористом натрии в соотношении 1:30 при 1 С и применяют предлагаемый способ удаления гемпигмента. Для этого к суспендированному осадку глобулинов добавляют сухой полиэтипенгликоль (мол.вес 4000-6000) до конечной концентрации 11Х при 15 С и рН 5,8, Очищенный от гемпигментов осадок глобулинов отделяют центрифугированием, растворяют в 20-кратном объеме хлористого натрия и осаждают балластные фракции при рН 5,1, концентрации этанола 13Х и температуре

3 С. Очищенный иммуноглобулин осаждают из центрифугата при концентрации этанола 26Х, рН 7,2 и темперагуре 5оС.

Предлагаемый способ позволяет получать иммуноглобулин, очищенный от гемпигиента до показателя оптической плотности 0,140, по сравнению с показателем оптической плотности

0,310 (А 0>, ФЭК), достигаемым в известном способе.