Способ диагностики лекарственной аллергии

 

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ АЛЛЕРГИИ путем исследования биохемилюминесценции сыворотки крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, к опытной пробе добавляют испытуемый аллерген, инкубируют при физиологических условиях, далее определяют интенсивность спонтанного сверхслабого свечения и после добавления перекиси водорода - максимум интенсивности сверхслабого свечения, а также в течение 4,5-5 мин - светосумму и при изменении этих показателей на 40-300% после индуцирования перекиськ) по сравнению с контролем диагностируют лекарственную аллергию. а с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН з(я) А 61 В 10/00

b8

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЙ

К А ВТОРСКОМЪГ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Ч

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3484776/28-13 (22) 22.06.82 (46) 30.10.84. Бюл. № 40 (72) Э. Н. Солошенко, И. И. Мавров, В. М. Медведев, Н. Ф. Северин, А. И. Журавлев и Я. Ф. Кутасевич (71) Харьковский научно-исследовательский институт дерматологии и венерологии, Харьковский ордена Ленина физико-технический институт АН УССР и Московская ордена

Трудового Красного Знамени ветеринарная академия им. К. И. Скрябина

i (53) 616.07 (088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР № 660668, кл. А 61 В 10/00, 1979.

2. Авторское свидетельство СССР № 833209, кл. G 01 N 33/16, 1981.

3. Зелинский Ю. Г., Куликова Л. А.

Хемилюминесценция сыворотки крови в диагностике лекарственной аллергии. Проблемы туберкулеза, 1978, № 5 (прототип).,.SU„„1120967 А (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ АЛЛЕРГИИ путем исследования биохемилюминесценции сыворотки крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, к опытной пробе добавляют испытуемый аллерген, инкубируют при физиологических условиях, далее определяют интенсивность спонтанного сверхслабого свечения и после добавления перекиси водорода — максимум интенсивности сверхслабого свечения, а также в течение 4,5 — 5 мин — светосумму и при изменении этих показателей на 40 — 300% после индуцирования перекисью по сравнению с контролем диагностируют лекарственную аллергию.

112096?

Изобретение относится к медицине, в частности к диагностике лекарственных аллергических реакций.

Известен способ диагностики лекарственной аллергии, основанный на данных аллергологического анамнеза, клинических проявлениях и течении заболевания.

Однако распознать лекарственную аллергию при ее даже типичной клинической картине и характерном аллергологическом анамнезе сложно, несмотря на то, что подтверждением диагноза служит сравнительно быстрое исчезновение клинических проявлений после отмены медикаментов, подозре. вавшихся в развитии аллергии. Основываясь только на клинике и течении заболевания, диагноз лекарственной аллергии можно поставить не сразу при осмотре больного, а в процессе наблюдения за ним, что создает определенные трудности, особенно на поликлинических приемах, когда требуется установить диагноз в течение короткого промежутка времени и срочно назначить больному лечение, которое различно при лекарственной аллергии, протекающей по типу любого заболевания (различные дерматозы, поражения дыхательной, сердечно-сосудистой системы, желудочнокишечного тракта и т. д.) и аналогичной заболеваниям нелекарственного генеза.

Кроме того, этот способ не позволяет выявить медикаменты (при одновременном употреблении более двух лекарственных пре паратов), виновные в развитии аллергической реакции, т. е. установить этиологический диагноз лекарственной аллергии и тем самым определить дальнейшую тактику терапии больного.

Особенно большие диагностические трудности возникают на ранних стадиях раз вития лекарственной аллергии из-за разнообразных и мало специфичных симптомов (недомогание, субфибрилитет неясной этиологии, необъяснимое течение основного заболевания, на фоне которого развивается лекарственная аллергия и т. д.). Эти же трудности имеют место и при диагностике лекарственной аллергии в анамнезе, когда у больных, перенесших лекарственную аллергию на какой-либо медикамент или группу медикаментов, при отсутствии клинических проявлений ее в момент обследования, имеется боязнь приема любого лекарственного препарата по поводу соматической патологии даже по жизненным показаниям.

Еще более сложна диагностика лекарственной аллергии, протекающей с кожными проявлениями, в стадии полного развития лекарственных дерматозов, клиническая картина которых может напоминать почти все известные кожные заболевания, например, крапивницу и отек Квинке, экзему, мно5

Зо

so

55 гоформную экссудативную эритему, дерматит Дюринга, пузырчатку, красную волчанку, дерматомиозит, ретикулез и т. д.

Нередки диагностические ошибки при развитии лекарственной аллергии на фоне течения хронических дерматозов (экзема, пузырчатка, псориаз, красная волчанка и т. д.), когда только по клинике и аллергологическому анамнезу невозможно отдифференцировать лекарственное осложнение от очередного рецидива заболевания.

Дальнейший же прием медикаментов при уже развившейся, но не распознанной лекарственной аллергии, приводит к тяжелым последствиям, вплоть до летального исхода.

Известен способ лабораторной диагностики лекарственной аллергии. Это специфический иммунологический метод, использующийся в этиологической диагностике (тест лимфобластической трансформации, ингибиция миграции лейкоцитов, показатель повреждаемости нейтрофилов, тест Шелли, дегрануляция тучных клеток соединительной ткани, реакции агломерации и альтерации лейкоцитов, тест специфического подавления ретракции кровяного сгустка, реакция микропреципитации Уанье, тромбоцитопенический тест, реакция пассивной гемагглютинации и т. д.) (1).

Известен способ определения непереносимости к нестероидным препаратам путем исследования плазмы венозной крови больного, которую инкубируют в течение 20—

40 мин с равными количествами исследуемого препарата и физиологического раствора при 15 — 38 С, определяют содержание простогландинов серии Е и F, при повышении которых по сравнению с исходным диагносцируют эту непереносимость (2).

Однако почти все указанные тесты трудоемки, требуют продолжительного времени для постановки (например, тест лимфобластической трансформации — 3 — 5 сут), стерильных условий, нередко дефицитных реактивов (фитгемагглютинин, порошкообразный гепарин, фиколл и т. д ), оборудования (люминесцентный микроскоп для реакции альтерации лейкоцитов), вивария (тест Шелли, дегрануляция тучных клеток соединительной ткани и т. д.). Поэтому специфические иммуно-биохимические методы мало приемлемы для экспресс-диагностики лекарственной аллергии в широкой клинической практике, тем более в поликлинических условиях, при массовых обследованиях лиц, занятых в производстве лекарственных препаратов, медицинских работников, контактирующих с лекарственными препаратами и т.д.

Известны провокационные пробы {кожные, подъязычные и т. д.) в диагностике лекарственной аллергии, от которых, однако, отказывается большинство исследо1120967 вателей из-за их опасности для жизни больного (развитие анафилактического шока даже на ингаляцию лекарства) и большой частоты ложноположительных и ложноотрицательных результатов.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ диагностики лекарственной аллергии путем биофизического анализа, основанный на измерении сверхслабого свечения сыворотки крови больных туберкулезом легких с явлениями непереносимости у них лекарственных препаратов с добавлением и без добавления последних в исследуемом образце сыворотки крови. По разности интенсивности свечения в первом и втором экспериментах судят об аллергенности препарата, находя повышение уровня сверхслабого свечения сыворотки крови у больных туберкулезом легких с лекарственной аллергией 13).

Однако и этот способ не. позволяет точно диагностировать лекарственную аллергию. Это связано с тем, что при данном способе диагностики регистрация сверхслабого свечения затруднена слабой интенсивностью свечения сыворотки крови, низ ким коэффициентом отношения сигнала к шуму, что приводит к необходимости на бора большой статистики для выявления отличий. Не исключена недостоверность отдельных измерений в малых сериях. Кроме того, обследование данным способом больных- туберкулезом легких с лекарственной аллергией не позволяет делать четкие и категоричные выводы, как изменяется уровень сверхслабого свечения сыворотки крови при лекарственной аллергии и следует ли расценивать повышение интенсивности свечения сыворотки крови за счет процессов, связанных с повышенной чувстви. тельностью к лекарствам или за счет воспалительного легочного процесса.

Цель изобретения — повышение точности диагностики лекарственной аллергии.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу диагностики лекарственной аллергии путем исследования биохемилюминесценции сыворотки крови, к опытной пробе добавляют испытуемый аллерген, инкубируют при физиологических условиях, далее определяют интенсивность спонтанного сверхслабого свечения и после добавления перекиси водорода — максимум интенсивности сверхслабого свечения, а также в течение 4,5 — 5 мин — светосумму и при изменении этих показателей на 40 — 300О/р после индуцирования перекисью по сравнению с контролем диагностируют лекарственную аллергию.

Способ осуществляют следующим образом.

Используют сыворотку крови, полученную известным способом. Готовят несколько

5 !

О

55 ее образцов, в первый из которых добавляют физиологический раствор (контроль), а в остальные (количество их может быть различным в каждом конкретном случае)— лекарственные аллергены в концентрации

250 мкг/л (опыт), подозревающиеся в развитии аллергического состояния в равных количествах (по 0,5 м) . Смесь выдерживают в термостате при 37 С 15 мин, затем ставят кювету вначале с контрольным, а потом опытными растворами в теиновую термостатированную камеру торцом на

ФЭУ-42. Измеряют интенсивность спонтанного свечения, после чего добавляют 0,5 мл

3O/р-ного раствора перекиси водорода, предварительно нагретой до температуры объекта. Вспышку хемилюминесценции регистрируют на автоматическом потенциометре

ЭПР-09. Определяют максимум интенсивности свечения, а также по графику свечения — светосумму, как площадь под кривой в течение 5 мин от момента добавления перекиси водорода. Находят разницу между контрольными и опытными образцами сыворотки крови, а также разницу этих показателей у исследуемого и здоровых лиц.

Пример 1. Больная К. 54 лет, страдает около 4-х лет, когда впервые на фоне лечения нарушений мозгового кровообращения, появились петехиальные высыпания в области туловища, плеч, предплечий.

Из анемнеза удалось установить, что кожный процесс периодически регрессирует и вновь обостряется после очередного приема медикаментов (каких точно больна я не значет). В прошлом перенесла энцефалит, гепатохолецистит, колит..

Последнее обостроение 1 — 2 нед назад после приема медикаментов по поводу соматической патологии. При обследовании кожный процесс носит диффузный характер, захватывая туловище и конечности с мелкой петихиальной сыпью. У больной была заподозрена лекарственная аллергия, протекающая по типу геморрагического васкулита. Обследована по иммунологическим методам. В частности, больной была поставлена реакция агломерации лейкоцитов, которая не выявила сенсибилизации к подозревающимся медикаментам. Обследована по предлагаемому способу. Максимум .интенсивности индуцированного свечения составлял с новокаином 234О/р от контрольного уровня (образец сыворотки без аллергена) и 9О/О с сульфадимезином, светосумма соответственно 233 /о и 24 /o.

Отклонение максимума интенсивности свечения сыворотки крови больной с новокаином от уровня интенсивности свечения сыворотки крови, индуцированной перекисью водорода здоровых лиц (доноров) с медикаментами было равно 63 /о, отклонение светосуммы 67О/О. Поставлен диагноз ле1120967

Составитель Н. Хрусталева

Редактор И. Касарда Техред И. Верес Корректор О. Луговая

Заказ 7602/3 Тираж 687 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП <Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4 карственной аллергии по типу геморрагического васкулита на новокаин, что позволило внести коррекцию в терапию и предотвратить нежелательные для больной последствия введения новокаина.

Пример 2. Больная В., 38 лет, страдает непереносимостью лекарств с 1978 г., когда стала появляться уртикарная сыпь и зуд на фоне лечения сахарного диабета и вегетососудистой дистонии. В анамнезе сахарный диабет с 1955 г, болезнь Боткина, гастрит, колит, хр. ларингит. Последний рецидив кожного процесса — 2 дня назад на фоне приема В-инсулина, витаминов группы В, АТФ. Поставлена реакция агломерации лейкоцитов РАЛ с лекарственными аллергенами, которые по анамнезу предполагались «виновниками» развития крапивницы лекарственного генеза. РАЛ выявила сенсибилизацию к В-инсулину и Суинсулину. Больная обследована предлагаемым способом. Интенсивность максимума свечения составляла с В-инсулином 300 /o от контрольного уровня, с Су-инсулином

390 /о, светосумма соответственно 333 /o и 360о/о. Отклонение максимума интенсивности свечения сыворотки крови больной с В-инсулином от уровня интенсивности свечения сыворотки здоровых лиц с медика мента ми равно 64о/р, с С у-инсулином

53о/о, отклонение светосуммы соответственно 75 /и и 61 /o.

Поставлен диагноз поливалентной лекарственной аллергии по типу крапивницы на

В-инсулин и Су-инсулин. Это позволило больной продолжить лечение вита минами группы В, АТФ и заменить введение Винсулина на другой вид инсулина, необходимый больной по жизненным показателям.

Предлагаемым способом было обследовано 19 доноров и 42 больных лекарственной аллергией.

У здоровых лиц в образцах сыворотки с добавлением лекарственных препаратов изменение максимума интенсивности сверхслабого свечения и светосуммы относительно нормы (образцов сыворотки без добавления лекарственных препаратов) не превышает 25 /o.

У больных лекарственной аллергией это изменение интенсивности свечения в образцах сыворотки крови с добавлением неспецифических лекарственных препаратов (не вызывающих лекарственную аллергию у данного больного) также не превышает 20—

35 /o. В образцах же сыворотки крови с добавлением специфических лекарственных аллергенов, вызывающих у больного аллер20 гическую реакцию, изменение максимума интенсивного свечения и светосуммы относительно нормы на 40 /о и более.

Предлагаемый способ прост в осуществлении, существенно улучшает диагностику, обеспечивает высокую точность и значительную экономию во времени при постановке диагноза по сравнению с известными способами иммунологического и биохимического анализа, а также по сравнению с способом-прототипом. Результаты клиничесЗo кого испытания способа диагностики лекарственной аллергии говорят о высокой практической ценности предлагаемого способа, что позволяет рекомендовать его для широкого внедрения в практическое здравоохранение, как экспресс-метода диагностики.