Среда для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных

 

СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ И ЗАМОРАЖИВАНИЯ СЕМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ, преимущественно хряков-производителей, включающая сахарозу, глюкозу, фруктозу, трилон Б, 11итрат натрия 5,5 водный, сульфат аммония, трис (оксиметил) аминометан, глицерин, желток куриного яйца и воду, отличающаяся тем, что, с целью улучщения сохранности семени при криоконсервации путем ингибирования процесса перекисного окисления липидов, среда дополнительно содержит бакланозид - природный триозид

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СО14ИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

4(Я) А 61 D 702

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 13.

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3645897/30-15 (22) 27 .09.83 (46) 07.02.85. Бюл. № 5 (72) В. А. Наук, А. М. Гуськов, В. Ф, Калистру, П. К. Кинтя и С. А. Швец (71) Институт зоологии и физиологии АН

Молдавской CCP и Отдел генетики растений.

АН Молдавской CCP (53) 636.082.453.5 (088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР № 626773, кл. А 61 D7/02,,23.03.77.

Авторское свидетельство СССР № 698617, кл. А 61 D 7/02, 24.07.78.

3. Авторское свидетельство СССР № 852324, кл. А 61 D 7/02, 31.08.79.

4. Кононов В. П. Голышев Н. А. Хачапуридзе Э. А. Среда для замораживания спермы хряка. — «Свиноводство», 1975, № 11, с. 25 — 26 (прототип). (54) (57) СРЕДА ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ

И ЗАМОРАЖИВАНИЯ СЕМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯИСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ, преимущественно хряков-производителей, вклю„,SU„„1138149 А чающая сахарозу, глюкозу, фруктозу, трилон Б, цитрат натрия 5,5 водный, сульфат аммония, трис (оксиметил) аминометан, глицерин, желток куриного яйца и воду, отличающаяся тем, что, с целью улучшения сохранности семени при криоконсервации путем ингибирования процесса перекисного окисления липидов, среда дополнительно содержит бакланозид — природный триозид ((25R) -фурост-5ен-ЗЯ, 22 „26 триол) -26-0-,Р-Д глюкопиранозид при следующем соотношении ингредиентов, мас. %:

Сахароза 3,5 — 4,5

Глюкоза 0,6 — 0,7

Фруктоза 0,6 — 0,7

Трилон Б 0,3 — 0,4

Цитрат натрия

Ф

5,5 водный 0,2 — 0,3

Сульфат а м монн я 0,1 — 0,2

Трис (оксиметил} аминометан 0,04 — 0,06 С

Глицерин 3,0 — 4,0

Желток куриного яйца 4,0 — 5,0

Бакланозид 0,00003-0,00006

Вода бидистиллированная Остальное и

1138149

Изобретение относится к искусственному осеменению животных, в частности к синтетическим средам для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных. 5

Известна среда для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных, включающая в свой состав липидные антиоксиданты 2,6-дибутил-п-крезол (бутилгидроокситолуол, БОТ), либо

2- (и3) -бутил-4-гидрооксианизол (бутилгид1О рооксианизол, БОА) (1).

Однако эта среда не обеспечивает продолжительной жизнедеятельности спермиев при замораживании-оттаивании вследствие ее низких защитных свойств. 15

Известна также среда для замораживания и хранения спермы баранов, в состав которой входит антиоксидант токоферолацетат (2).

Известна также среда для замораживания спермы животных, в которую в качестве липидного антиоксиданта включен 2,6-дитрет-бутил-1,4-крезол (3).

Недостатком известных сред для разбавления и замораживания семени с/х животйых является то, что входящие в их состав 2S антиоксиданты (БОТ, БОА, 2,6-ди-трет-бутил-1,4-крезол, токоферолацетат) не растворимы в воде, недостаточно ингибируют окислительные процессы в семени в процессе его подготовки к криоконсервации, в результате чего происходит накопление вредных продуктов перекисного окисления липидов, что при их высокой концентрации приводит к повреждению биомембран и акросом, а также к снижению функциональной полноценности спермы.

Наиболее близкой по технической сущности к изобретению является синтетическая среда для разбавления и замораживания семени хряка, включающая сахарозу, глюкозу, фруктозу, этилендиаминтетраацетат двунатриевый двуводный, цитрат натрия 4О

5,5 водный, сульфат аммония, трис (оксиметил) аминометан, глицерин, желток куриного яйца и воду дистиллированную (4).

Недостатком известной среды является отсутствие в ней природных компонентов, 0,2 — 0,3

0,1 — 0,2

0,04 — 0,06

3,0 — 4,0

4,0 — 5,0

0,00003 — 0,00006 ингибирующих процесс перекисного окисления липидов в семени. Отсутствие таковых ведет к уменьшению антиокислительной активности липидов мембран, акросом, снижению функциональной полноценности сперм иев.

Целью изобретения является повышение жизнеспособности спермиев при криоконсерации семени животных путем ингибирования процесса перекисного окисления липидов.

Указанная цель достигается тем, что известная среда дополнительно содержит бакланозид — природный триозид ((25R ) -фурост-5ен3у, 224, 26 триол) -26-0-P.Ä глюкопиранозид при следующем соотношении ингредиентов, мас. О/o.

Сахароза 3,5 — 4,5

Глюкоза 0,6 — 0,7

Фруктоза 0,6 — 0,7

Этилендиаминтетраацетат двунатриевый двуводный (трилон Б) 0,3 — 0,4

Цитрат натрия

5,5 водный

Сульфат аммония

Трис(оксиметил) аминометан

Глицерин

Желток куриного яйца

Бакланозид

Вода бидистиллированная Остальное

Пример. Среду для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных готовят следующим образом.

Кипятят бидистиллированную воду и охлаждают ее до 40 С. В 1 мл этой воды растворяют соответствующее количество бакланозида. В оставшемся количестве воды (999 мл) растворяют остальные компоненты, добавляют растворенный бакланозид, после чего в полученный раствор вводят желток куриного яйца. После этого среду делят пополам и во вторую часть добавляют глицерин.

Оптимальный состав среды для разбавления и замораживания семени хряковпроизводителей приведен в таблице.

1138149

Содержание на 1 л бидистиллированной воды

Ингредиенты

Вес. Х

4,29

50 г

Сахароза

0,69

8,0 г

8,0 г

Глюкоза

0,69

Фруктоза

0,34

0,26

Сульфат аммония

0,17

0,05

3,43

Глицерин

4,29

Желток куриного яйца

0,00004

Бакланозид

Составитель И. Марченко

Техред И. Верес Корректор А. Обручар

Тираж 722 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент>, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор В. Иванова

Заказ 10584/5

Этилендиаминтетраацетат двунатриевый двуводный

Цитрат натрия 5,5 водный

Трис(оксиметил)аминометан

Полученное семя выдерживают в течение 1 ч при комнатной температуре и разбавляют на половину конечной степени синтетической средой без глицерина в зависимости от концентрации семени в эякуляте. Приготовленную среду хранят нри комнатной температуре. Разбавленную сперму охлаждают равномерно-замедленным способом до +15 С и выдерживают при такой температуре 3 — 4 ч, затем охлаждают в те- 40 чение 1 ч до +4 С. Добавляют вторую среду, содержащую глицерин. После этого размешивают и замораживают сперму в форме гранул на фторопластовой пластине, предварительно охлажденной в жидКом азоте. Оттаивание семени проводят в во- 45 дяной бане при +50 С.

Результаты испытаний показывают, что после оттаивания подвижность спермато4,0 г

3,0 г

2,0 г

0,6 г

40 мл

50 мл

0,0005 г зондов увеличивается на 50 /в, выживаемость в часах при 37 С вЂ” на 37,5о/о по сравнению с известной средой. Перекисное окисление липидов снижается на 9 /..

Высокая антирадикальная активность бакланозида объясняется большой подвижностью атома водорода гемикетальной гидроксильной группы при С-22 агликона и образованием стабильного промежуточного радикала-ингибитора.

Оплодотворяемость свиноматок при использовании спермы хряков-производителей, разбавленной предлагаемой средой, по сравнению с известной повышается на 23в/о.

Ожидаемый экономический эффект от внедрения предлагаемой среды составит 14,4 тыс. руб. на каждую 1000 свиноматок.