5 вЂ” СН (СН,),СО 8 (21 ) 3 35 7 199/23-04 (22) 27. 11.81 (31) 8025276 (32) 28.11.80 (33) Франция (46) 15.03.85. Бюл. У 10 (72) Робер Буажегрэн, Жан-Пьер Маффран (Франция), Норио Суцуки, Киуичи

Матсубайаши и Шиничиро Ашида (Япония) (71) Санофи (Франция) .(53) 547,738.07(088.8) (56) 1. Эльдерфилд P. Гетероциклические соединения. М., изд. "ИЛ", 1953, т. 1, с. 174.

2. Там же, с. 188.

3 ° Там же, с. 180.

4. Там же, с. 183. (54) .СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

5,6,7,7а-ТЕТРАГИДР0-4Н-ТИЕНО(3,2-с)ПИРИДИНОНА-2 ИЛИ ИХ СОЛЕЙ. (57) Способ получения производных

5, 6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)пиридинона-2 общей формулы Е где R вЂ” фенил, незамещенный или замещенный галогеном, алкилом с 1-4 атомами углерода, нитро- нли цианогруппой;

R â€ :водород или алкил с 1-4 атомами углерода,, или их солей, о т л и ч а.ю щ и и " с я тем, что соединение общей формулы II

4is>> С 07 D 495/04// А 61 К 31/38 где R u R имеют указанные значе1 ния, подвергают взаимодействию с водноспиртовым раствором перекиси водорода, содержащим 30 об.X метанола, в смеси 48Х-ного водного раствора бромистоводородной кислоты и уксусной. кислоты при их объемном соотно шении i: 1, и полученное соединение общей форм лы III где Н и К -имеют указанные значения, обрабатывают магнием в присутствии бромистого изопропила в безводном тетрагидрофуране при кипячении и образовавшееся при этом магиийорганическое- соединение конденсируют с тРет -бутилпербензоатом с последующим нагреванием полученного соединения об ей рмулы IU где R и К имеют указанные эначе1 ния, при 150 С в присутствии ароматичес-: кой сульфокислоты и выделением целевого продукта в свобддном виде или в виде соли.

Изобретение относится к способу получения производных 5,6,7,7е(-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)-пиридицона-2 общей формулы I

145931 2 да, содержащим 30 об.7 метанола, в смеси 48%-ного водного раствора бромистоводородной кислоты и уксусной кислоты при объемном соотношении

1: 1„ и полученное соединение общей формулы III фЕЦИ(1, НЕЭЯМЕЩЕНЦЫЙ ИЛИ -ЭЯмещеццый гало геном, алкилом с 1-4 атомами углерода, нитро- или цияногруппой," во;ео";>О или ялкил с 1" 4 гд е i » ятомамл углерода„ или их солей, Обладающих (12арм ах Оло

ГИЧЕСКОй,Ктивностъш.

Из(зертцы реакции бромирования

«(;. Оиэ вот"ных 1 ио(ре((;: бромистым ВОДО родом н вод(- -щелочцоЙ r.oåttå (((, Об Язонация ма гцийор(Яц(г(еских прО ионов(-,ы-,(тчофе(-а ц «((мо действ((ем

Оромэя(ещенцых тиофеця с реактивами Грицьяра l 2 I., Образования эфиров тиофенкярбоцаных кислот путем нзаи,вЂ”

МО(Ей тз1-Я СОСТ--Я""тн"."ЮЩик»(ЯГИ1(ЙОр(я : ((час((их 1(ро. (э-,.одкых тиофеца с эфира(.(и t(-;.ð3h.-,tç t,(кислот (3 ) (1(y T (i (с, " ИО, (К -(OJJ .-(у (Pi i,- Идооли за эф(„-Оон -1 (=..-,фе" ;3. )(:;,.;(: (>(х ки(ло 1: (4 j o

0ц Яко ие.".(эн е(теi(е1яе сг(особ ЛО лучеция фармяк: r(tñ:" v. :- ески яктин ныл( производных ., 6, 7, 7":--тегрягидро-4Нтиецо(3 2-с)-- иницицоца-2 Общей формулы .(ил((их сОлей

Цель изобретения вЂ” способ полуi1еция цoн((х фармяколОгически якtинвЂ” ных производных 5,6, 7,7с(-тетрагидро-4Н-тиецо(3,2-с)-пири;.;Инсца-2 общеи формулы I или их сот(еи„

Поставленная цель достигается способом, который Основан ця изнествЂ” ных, описанных реакциях, Предлагаемый способ получения производных

5,,6,7,7c("-òåòрягидро-4Н-тиецо(3.,2-с)вЂ” пиридицоца-2 общей формулы I или их

1 солей заключается н том, что соедицецие Общей фор((улы I(5О где Н и Е, имеют указанные зцаче- 55

1 ция ,подвергают взаимоцействию с нодцоспиртовьп(раствором .перекиси нодоро где КИК„ имеют укаэанные значения, Обрабатывают магнием в присутствии бромистого иэопроцила в безводном тетрагидрофуране при кипячении и образовавшееся при этом магнийорганическое соединение конденсируют с (рет-бутилпербензоатом с последующим нагреванием полученного соединения общей формулы IV где R и R, имеют указанные значения, при 150 С н присутствии арома тической сульфокислоты и выделением целевого продукта в свободном ниде или н виде соли.

Для превращения соединения общей формулы III в магнийорганическое соединение целесообразно использовать магцийорганическое соединение, полученное иэ металлического. магния и алкилгалогенида, например изопропилбромида.

Получение магнийорганического соединения и конденсацию его с трет -бутил((ербецэоатрм проводят предпочтительно в одном реакционном сосуде и без выделения магнийоргацического соединения.

В качестве органической кислоты используют п-толуолсульфокислоту, Пример 1 ° 5-(2-Хлор-бензил)5,6,7,?(1(-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)пиридинон-2.

Добавляют по каплям смесь 30Х-ной перекиси водорода и метанола (3 см /10 cn ) к охлажденному до

О(С раствору 2,63 г 5-(2-хлор-бензил)-4,5,6,7 -тетрагидро-тиено(2,3-с)пиридина в 10 см уксусной кислоты и 6 см 48Х-ной бромнстоводородной кислоты, 931 4

Основание: т.пл. = 73-74,5 С (этанол).

П р и и е р 2. 5-Бензил-5,6,7, ?м-тетрагидрс-4Н-тиено(3,2-с)-пиридинон-2 получают по примеру 1 из

5-бензил-4,5,6,7-тетрагидро-тиено(3„2-с)-лиридина. Выход 30Х.

Малеат: бежевые кристаллы; т.пл. = 132- 134 С (изопропанол).

Пример 3. 5-4-Хлор-бензил5,6,7,7п=тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)пиридинон-2 получают по примеру 1 из 5-(4-хлорбензил)-4,5,6,7-тетрагидро-тиено(3,2-с)-пиридина. Выход 292.

Малеат: бежевые кристаллы: т.пл. = 158-160 С (этанол).

Пример 4. 5-(2-Метил-бензил)-5,6„7,74-тетрагидро-4Н-тиено(3,2 c) пиридинон-2 получают по примеру 1 из 5-(2-метил-бензил=4,5,6,7-тетрагидро-тиено(3,2-с)вЂ” пириднна. Выход 43Х.

Оксалат: бежевые кристаллы; т.пл. = 195-197 С (метанол).

Пример 5. 5- (1-(2-Хлорфенил)-этил)-5,6,7,7@-тетрагидро4Н-тиено(3,2-с)-пиридинон-2.получают ло примеру 1 из 5- 1-(2-хлорфенил)-этил)-4,5,6,7-тетрагидротиено(3„2-с)-пиридина. Выход 18Х.

Хлоргидрат . желтые кристаллы, т,пл, = 140-1420С.

Пример 6. 5-(1-(2-Хлорфенил) -пропил1-5, 6, 7, 7й-тетрагидро4Н-тиено(3,2-с)-пиридинон-2 получают цо примеру 1 из 5-(1-(2-хлорфенил)-пропил)-4,5,6,?-тетрагидротиено(3,2-с)-пиридина. Выход 277 °

1145

Органические экстракты промывают водой, сушат сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Маслянистый остаток очищают 35 хроматографически на колонке с двуокисью кремния. Получают 0,25 г желтого масла.

Нагревают при 150 С в течение

9 мин 100,мг этого вещества и 100 мг 4О .п-толуолсульфокислоты, после быстрого охлаждения выливают в смесь:

О, 15 М буферный фосфатный раствор (рН 5,5) вЂ” бутиловый спирт (20 см /

/20 см ). 45.

Органическую фазу декантируют при пониженном давлении. Очистка остатка при помощи хроматографии на колонке с двуокисью кремния приводит к

5-(2-хлор-бензил)-5,6,7,?ц-тетра- 50 гидро-4Н-тиено(3,2-с)-пиридинону-2.

Выход 367, т.пл. = 73-74,5 (этанол).

Оксалат: т. пл. = 168-170 С (этанол);ИК(КВг)".1СО = 1660 см " (ши,рокая). Я

Хлоргидрат полугидрата: т.пл разложение около 180 С (осаждение ацетоном).

По окончании добавления смесь перемешивают 10 мин при комнатной температуре, добавляют раствор гидросульфита натрия, затем раствор едкого натра и экстрагируют смесью бензола с хлороформом. Органические экстракты промывают водой, сушат сульфатом натрия и. фильтруют. К фильтрату добавляют раствор газообразного хлористого водорода в метаноле и кон- 10 центрируют в вакууме.

Перекристаллизация твердого остатка из этанола дает 2 г бежевых кристаллов плоской формы хлоргидрата 2-бром-5(2-хлорбензил)-4,5,, 6,?-тетрагидро-.тиено(3,2-с)-пиридина. Т.пл. (разложение) около 180 С.

Смесь свободного основания (1,075 r), магния (0,19 г), бромистого изопропиЛа (0,57 r) и безводно- >0 го тетрагидрофурана (10 см ) кипятят с обратным холодильником 2 ч в атмос фере азота.

После охлаждения добавляют 1,5 r трет -бутилпербензоата, перемешивают 25

15 ч при комнатной температуре, затем 1 ч при температуре кипения с обратным холодильником, выливают в водный раствор лимоннокислого натрия и едкого натра и экстрагируют бензолом. M

Хлоргидрат: бежевые кристаллы, т.пл. =. 124-126 С.

П р и и е р 7. 5-(2-Циано-бензил)

5,6,7,?о-тетрагидро-4Н-тиено(2,3-с)пиридинон-2 получают по примеру 1 из

5-(2-циано-бензил)-4,5,6,7-тетрагидро-тиено(3,2-с)-пиридина. Выход 10Х.

Оксалат: бежевые кристаллы, т.пл. = 176-178 С (ацетонитрил).

Н р и м е р 8. 5-(2-нитро-бензил).

5,6,7,?ь-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)пирндинон-2 получают по примеру 1 из 5-(2-нитро-бензил) вЂ” 4,5,6,7-тетрагидро-тиено(3,2-с)-пиридина..Выход

127.

Оксалат: бежевые кристаллы; т.пл. = 186-188 С (изопропанол-этао нол) .

1145931

Продолжение табл. 1

Соединение примера

278

Сравнительное соединение Л

Сравнительное соединение В 45

Таблица 1

LD3, мг

Соединения примера

113

116

125

110

286

121

254

Пример 9. 5-(2-бром-бензил)5,6,7,7 -тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)вЂ” пиридинон-2 получают по примеру 1 из 5-(2-бром-бензил)-4,5,6,7-тетрагидро-тиено(3,2-с)-пиридина, Выход 217.

Оксалат: бежевые кристаллы, т.пл. = 151-153 С (изопропанол).

Соединения общей формулы I и их соли обладают антиагрегирующим действием в отношении тромбоцидов, а также антитромботическими свойствами.

Проведены исследования в сравнении с аналогами по строению вЂ” (хлор2-бензил)-5-тетрагидро"4,5,6,7-тиен (3,2-с)-пиридином (далее сравнительное соединение А) и (циано-2бензин)-5-тетрагидро-4,5,6,7-тиен(3,2-, с) пиридином (далее соединение В) .

Токсикологическое исследование.

Изучены острая, хроническая, субхроническая и замедленная токсич" ности. Опыты, проведенные на различных видах животных: мышах, крысах и кроликах, свидетельствуют о слабой токсичности соединений общей формулы I а также об их хорошей толерантности.

В табл. 1 приведены LD (24 ч) веса тела, вычисленные йо методу

Миллера и Тентера при внутривенном введении мышам, а также результаты, полученные для производных общей формулы Х и для сравнительных соеди- нений А и И.

Результаты табл. t показывают, что токсичность производных общей формулы Т по меньшей мере вдвое меньше токсичности сравнительных соединений А и В, Кроме того, опыты показывают, что производные общей формулы I не вызывают у животных различных видов в ходе разных опытов местных илн общих реакций нарушений показаний регулярно проводившегося биологичесЗО кого контроля и расстройств микроили макроскопического характера.

Исследование потомства не обнаруживает тератогенного действия испытуемых соединений.

Фармакологическое исследование.

Изучена способность подавлять агрегацию тромбоцитов и противотромбозную активность по сравнению с соединениями А и, В.

40 i. Подавление агрегации тромбоцитов..

У крыс Mistar, предварительно обработанных испытуемым соединением, берут кровь иэ, яремной вены.

45 Иэ этой крови„ после обработки цит/ ратом и центрифугирования, получают плазму, содержащую 600000 ?0000 тромбоцитов в 1 ммз,.котерую приФ меняют в дальнейшем для всех опреSO делений агрегации тромбоцитов. а. Определение аггрегации тромбо-. цитов при помощи АДФ.

Помещают 0,4 мд плазмы в силиконовую трубку, снабженную намагниченным силиконовым прутком. Трубку помещают в агрегометр, соединенный с прибором, позваляющим регистрировать

1145931. Соединение ,общей формулы I no примеру

Процент подавления при дозе, мг/кг

12,5

84,1

84,0 ь

83,7

5f,0

83,.6

83,1

47,8

82,6

83,6 48, 1

82,4

83,0

83,5

82,9

82,8

48,0

81,9

82,1

83 5

82,0

82,4

83,2

83,9

83,4

83,9.48, 7

83,0

83,2

82,9

83,1

47,6

82,7

48,0

48,4. 83,4

83,1

83,3

82,8

84,4

83,7

84,9

83,1

Сравнительное соединение К

63,2

Сравнительное соединение В

63,8

35 5

0 изменения оптической плотности. КотI да прохождение света достигает постоянного значения, в трубку вводят

0,5 мл раствора, содержащего

10 мкмоль АДФ (аденозиндифосфата).

Агрегйция тромбоцитов вызывает повышение пропускаемости света, которое сопровождается последующим понижением пропускаемости на фазе разъединения.

Максимальное изменение оптической плотности, определенное по отношению к плазме, не содержащей тромбоцитов, характеризует интенсивность соединения.

Определения выполняют в течение

2 ч после обработки испытуемым соединением. б. Определение соединения тромбоцитов при помощи коллагена.

Раствор ЛДФ заменяют раствором

4 коллагена, взятого из бычьих сухожилий. в. Результаты.

5 Были применены различные партии по 20 крыс каждая. Каждая партия получала одну дозу испытуемого. производного орально, причем то же самое производное давали в разных дозах 5-100 мг/кг.

Значительная активность производных общей формулы I появляется при дозе 12,5 мг/кг, тогда как для сравнительных соединений А и В для полу15 чения такой же активности требуются дозы 100 мг/кг.

Результаты сведены в табл. 2 и 3, где показано процентное подавление соединения тромбоцитов, достиг20 нутое по сравнению с контрольным опытом, через 3 ч после обработки испытуемым соединением.

Таблица. 2

1145931

Таблица-"3

Процент подавления при дозе, мг/кг

Соединение общей формулы I . по примеру

12,5

46,8

86,7

89,6

89,8

44,2

87,0

87,8

17,4

86,5

88,1

88,2

87,8

88,0

44,4

85 7

89,2

86,2

88,7

17,0, 86,2

88,2

44,9

88,6

87,6

Сравнительное соединение А

46,8

80,1

Сравнительное соединение В

51,2

78,8 г. Исследование кинетики агрегации тромбоцитов.

Проведен эксперимент., относящий-:, Время, ся к исследованию кинетики соедине- мин ний формулы Х. Производное 1 и срав40 нительное соединение А растворяют в нропиленгликоле и дают крысам интраперитонально в дозе 100 мг/кг веса тела тог а как конт ольные мыФ

Таблица 4

Контроль" ный опыт (пропиленгликоль) Производное il согласно изобретению

Сравнительное соединение А

9 р ши получали интраперитонально, только 1 мл/кг пропиленгликоля. 10

Кровь отбирают через 10 и

60 мин после введения, затем ее 60 центрифугируют для получения обогащенной тромбоцитами плазмы. Аг50 регацию тромбоцитов в плазме, вызванную АДФ, определяют при помощи агрегометра Брайстона по нефелометрическому методу Борна."

Зависимость процента подавления

39 от времени, полученная в результате этого эксперимента, представлена в табл. 4.

Табл. 4 показывает, что по отношению к сравнительному соединению А производное 1 общей формулы I значительно больше подавляет агрегацию

55 тромбоцитов и эта активность проявляется гораздо быстрее. Эксперимент подтверждает описанные результаты.

1145931 ъ.

Средйий вес одной влажной шелковой нити по предварительному определению составляет 5-10 мг.

Обработку проводят за 48, 24 и

5 2 ч до начала кровообращения по шпунту.

Продукты вводят per ов различными партиями, состоящими из 20 животных каждая, в виде суспензии в

10 мл/кг 57.-ного гуммиарабика в дозах 12,5, 25, 50, 100 и 200 мг/кг. вают, Таблица 5

Продукты

Средний вес тромбов мг

12,5

100

Производное 1

Производное 3

27,45

26,72

12,21

12,04.

4,76

6,01

5,97

4,62

Сравнительное соединение А

30,45

30,9

28,86

23,04

23,13

Контрольный опыт с 5Х-ным гуммиарабиком

30,41

Этот опыт иллюстрирует активность соединений общей формулы I, которые вызывают значительное уменьшение 40

1 среднего веса тромбов начиная с доУ зы 25 мо/кг, тогда как сравнительное соединение А совершенно не проявляет противотромбозного действия даже при повышенных дозах.

Кроме того, опыты показывают, что в противоположность соединениям А и В производные общей формулы I совершеино не обладают противовоспалительными свойствами и не оказывают соаудорасширяющего действия. Сле" довательно, они обладают гораздо более избирательными свойствами, что придает им большой интерес с точки зрения терапии, когда дополнительная 55

ВМИИПИ Заказ 1205/46 Ти аж 384 Подписное

2. Противотромбозная активность испытуемых соединений изучена по методу экспериментального тромбоза путем экстракорпорального кровообращения.

У крысы, анестезированной путем интрапернтонального введения пентобарбитала, обнажены левая яремная и правая внешняя сонная артерия. Шунт составлен из одного центрального и двух боковых катетеров; белую нить из натрульного шелка вводят в центральную часть и кровообращение восстанавливается в течение 20 мин.

После остановки кровообращения путем наложения зажима нить осторожно вытягивают и немедленно взвешиВ табл. 5 сведены результаты опы" тов с производными 1 и 3 общей формулы Е и сравнительным соединением

А, представленные в виде средних значений, вычисленных для каждой партии. активность, если она не требуется, может повредить больному.

Описанные токсикологические и фармакологические исследования свидетельствуют о слабой токсичности соединений общей формулы 1 и их хорошей толерантности, а также об их способности подавлять соединение тромбоцитов и противотромбоэных свойствах, которые обуславливают целесообразность их применения при лечении человека и животных.

Соединения общей формулы Х могут быть выпущены для орального приема в виде таблеток, драже, капсул, капель, для перентерального приема в виде растворов для инъекций и для ректального введения вЂ” в виде свечей.