Способ получения сложных эфиров @ -аминопенициллинов или их кислотно-аддитивных солей

 

Способ получений сложных, эфиров вб -амннопеницнллинов об1цей формулы (1) S 3 , - 1 Ri-cH-coim- СООЯу NH2 -фенил, ьксифенил, фторфенил, где R, фурил или тиенил; . «2 -группа формулы -СН-О-СО-ЕЗ СНз или -СН-0 СОО-Яз CHj где Rj - С(-С4-алкил, или их кислотно-аддитивных солей, отличаю щийся тем, что сложный эфир 6-аминопенициллинойой кислО|ТЫ формулы (II) н тг СНз , -где R, имеет указанные значения, подвергают взаимодействию с производным кислоты формулы (III) Rt CH-COD А . где R{ имеет указанные значения; А - аминогруппа, азидогруппа или группа формулы нин-с сн-е оснз Iи СНз О или -NH-S и у - атом галогена или группа формулы :л ©Ф -ONa или -О 1Ш2(СсН11)2 : 90 в среде этилацетата, диметилформами Э да или хлороформа в качестве растворителя при температуре от до комнатной с последующим, в случае необходимости, снятием заместителя сА-аминогруппы или в случае, когда А - азидогруппа, превращением ее в аминогруппу и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли. Приоритетно признакам:

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (!9) (I I) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н flATEHTY

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

AO- ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 1899287/23-04 (62) 1696133/23-04 . (22) 27. 03. 73 (23) 14. 09. 71 (31) 52688!70; 15720/70 (323 17.09.70; 20. 11.70 (33) Швеция (46) 30.04.85. Вюл. Ф 16 (72) Бертил Аке Экстрем и Берндт

Олоф Харальд Съеберг (Швеция) (71) Астра Лекемедел Актнеболаг {Hlseция) (53) 547.789.61.07(088.8) (56) 1. Патент Великобритании

Р 1017615, кл. С 2 А, опублик, 1966..

2. Патент C5)5A 1) 2985648, кл. 260-239. 1, опублик. 1961. (54) СПОСОБ HOnnmm СЛОЖНЬ0(ЭФИРОВ 05 -АИИНОПЕНИЦИ)ШИНОВ ИЛИ ИХ

5(ИСЛОТНО-АДЦИТИВНЫХ СОЛЕЙ. (57) Способ получения сломяых. эФиров

g -аминопеницнллинов общей формулы (I)

«

R1- СН- СОВАЯ СН

HH> О N «".gas где R — фенил,. оксифенил, фторфенил, фурил или тиенил;

R — группа формулы

-СН-О-Со-В

5 - СНЗ вЂ” сн- о-соо-я з

СН где R — С(-04-алкил, или их кислотно-аддитивных солей, отличающийся тем, что

4(5!) C 07 D 499/68; 499/70 //

А 61 5(31/43 слохный эфир 6-аминопенициллиновой кислоты формулы (II)

Сн сн

О С00"г .где К имеет указанные значения, подвергают взаимодействию с производным кислоты формулы (III)

R — cH- СО:)

А где К(имеет указанные значения;

А - аминогруппа, азидогруппа или группа формулы

«Н С 3

5 и У - атом галогена или группа формулы

99 ,-она ипи -î хн,(с,н !)! в среде зтилацетата, диметилформамида или хлороформа в качестве. растворителя при температуре от -15 С до комнатной с последующим, в случае необходииости, снятием заместителя се(,-аииногруппы или в случае, когда

А — азидогруппа, превращением ее в аминогруппу и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли.

Приоритет по признакам:

1153830

I 7.09,70. при R> — метил и А — ами- при R — С вЂ” С4 — алкил и Л вЂ” аминоЪ 2 ногруппа или аэидогруппа; 20.11.70. группа.

Изобретение относится к способу получения новых антибиотиков пенициллинового ряда, а именно сложных эфиров М -аминопенициллинов или их. кислотно-аддитивных солей, которые могут найти применение в медицине в качестве лекарственных веществ.

Известен способ получения биологически активных А-аминопенициллинов или их кислотно-аддитивных солей ацилированием 6-аминопенициллановой кислоты реакционноспособным производным соответствующей сс -амино-, w -замещенной амино- или М -азидокарбоновой кислоты в среде инертного органического растворителя при температуре от -50 до 40 С с последующим, в случае необходимости, снятием заместителя сс(. -аминогруппы или в случае использования в качестве ацилирующего агента Ф -азидопроизводкого переводом М -аэидогруппы в с -аминогруппу и выделением целевого продукта в свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли (1J .

Известные сС --аминопенициллины обладают широким спектром антибактериального действия (21, однако остается желательным повышение всасываемости пенициллиновых антибиотиков при оральном введении, распределения в тканях организма, метаболических свойств и скорости удаления.

Цель изобретения — получение новых у, -аминопенициллинов, которые обладают улучшенными свойствами.

Цель достигается основанным на известной реакции N-ацилирования

6-аминопенициллиновых кислот способом получения сложных эфиров аС -аминопенициллинов общей формулы

S CH3 i- CH- C0NH сн, ХН2 Ог и СООИ2 где й1 — фенил, окгифенил, фторфенил, фурил или тиенил; группа формулы — сн-о — со-а>

СН или

-СН-О-СОО-Я ! сн, где R — С«-С4-алкил, или их кислотно-аддитивных солей, который заключается в том, что сложный эфир 6-аминопенициллановой кислоты формулы 3 сн3

Соов, где К имеет указанные значения, О подвергают взаимодействию с производным кислоты формулы

Rl — СН вЂ” СОЗ .„-, А

2З где .R имеет указанные значения;

А - аминогруппа, азидогруппа или группа формулы

-мн- с = сн- с — оснз

« н 3

2 и У вЂ” атом галогена нли группа формулы

«р9

4о -Ока или — О МН (С К 1)2 в. среде этилацетата, диметилформамида или хлороформа в качестве растворителя при температуре от -15"С до

45 комнатйой с последующим в случае

Э необходимости, снятием заместителя с

CC -аминогруппы или в .случае, когда

А-аэидогруппа, превращением ее в аминогруппу и выделением целевого про1153830 дукта н свободном виде или в виде кислотно-аддитивной соли.

Соединения общей формулы (l) хорошо всасываются лри оральном применении и дают более высокую концентрацию в крови. Сложные эфиры подвергаются гидролизу в водной среде, но такой гидролиз происходит интенсивнее при подвергании их влиянию гидролитических ферментов, например, при- 10 сутствующих в сыворотке крови или других жидкостях организма человека, Это свойство сложных эфиров имеет очень большое значение, поскольку оно приводит к быстрому освобождению противобактерийных аминопенициллинов из сложных эфиров при всасывании из кишечного тракта или вводимых другим образом в поток крови или в тканевые жидкости, 20

Соединения формулы (Z) хорошо переносятся организмом и предпочтительно применяются перорально либо в свободном виде, либо в виде их со-. лей, их можно смешивать с твердыми 2S носителями или с вспомогательными веществами, или с обоими типами указанных веществ. В таких препаратах соотношение между лекарственным веществом и носителями или вспомогательными веществами можно варьировать от 1 до 95Х. Препараты могут быть преврацены, например, в таблетки, пилюли или драже, они могут быть заключены в емкости, например в капсулы, а при З наличии смесей налиты в бутыли. Yoæно применять фармацевтически приемлемые органические или неорганические, твердые или жидкие носители, подходящие для перорального, парентерального или местного применения для приготовления препаратов. Походящими для приготовления препаратов из соединений согласно изобретению являются желатин, лактоза, крахмал, сте- арат магния, тальк, жиры и масла растительного или животного происхождения, натуральный каучук и полиэтиленгликоль. Предпочтительной солью сложных эфиров является гидрохлорид, >0 но можно применять также соли с другими неограническими или органическими кислотами, Кроме того, препараты могут содержать другие фармакологически активные компоненты, подходяшие для применения вместе с указанными сложными эфирами при лечении йнфекционных заболеваний, например с другими подходящими антибиотиками °

Для лечения бактериальных инфекционных заболеваний у людей соединения согласно изобретению -назначают, например, в количестве, соответствующем 5-200 мг/KI/день, предпочтительно в интервалах 10 — 100 мг/кг тельно в интервалах 10 — 100 мг/Kl /день при разделенных дозах, например два, три или четыре раза в день. Их назначают в дозах, содержащих, например, 175, 350, 500 и 1000 мг соединения.

Пример 1. 1 -АцетоксиэтилI

6-(D-g-азидофенилацетамидо)пеницилланат.

I а) 1 -Ацетоксиэтил-6-(D-, -азидофенилацетамидо)пеницилланат (58X, 2,8 г), растворенный в этилацетате (40мл), обрабатывают 0,2 Ммононатрийфосфатом (ч0 мл), подкисляют po pH 2,2

2 И раствором соляной кислоты и гидрируют над палладием на угле (катализатор) при условиях окружающей среды в течение

2 ч, Катализатор удаляют фильтрованием и промывают этилацетатом и буфером. Органическую фазу соединенных фильтратов отделяют и экстрагируют водой при рН 2,1. Соединенные кислые водные фазы промывают эфиром, отделяют слой этилацетата и нейтрализуют добавлением 2 н.растворов гидроокиси натрия при перемешивании.

Водную фазу отделяют и снова экстрагируют этилацетатом. Соединенные этилацетатные водные растворы промывают рассолом и водой и экстрагируют дважды водой при рН 2,5 добавлением 2 М раствора соляной кислоты..

Соединенные кислый водные экстракты промывают эфиром и концентрируют под вакуумом при 25 С, что приводит к образованию маслянистого остатка, который растворяют в изопропаноле и упаривают под вакуумом. Получают хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-6-(П-a!— аминофенилацетамидо)пеницилланата (1,1 г) в виде слегка окрашенного порошка чистотой 1007 (гидроксиламиновая проба).

Продукт задерживает рост микроорганизмов вида Staphylococcus aureus, Оксфорд, при концентрации 0,32 мгlмл, а Escherihia Goli u Proteus mirabilis — при 50 мг/мл. б) Азидопроизводное сложного эфира в этинацетате (800 мп) гидрируют в

115.<830 условиях окружающей среды над катали.« «тором, содержащим палладий (5%) на угле (25 г). Катализатор удаляют фильтрованием и промывают этилацетатом. Соединенные фильтраты экстраги- 5 руют водой при рН 2,5 в присутствии соляной кислоты. После лиофилизации водной фазы получают хлоргидрат t а« етоксиэтил-6-(D а -аминофенилацетамидо)пеницилланата (110 г). Т.пл. 160-10

164 C (с рази.), (м) в +1 4 С (С = 1, СНС1,); +179,9 (С = 1, 50% изопропанол).

Найдено, %: С 50, 78; Н 5,49;

N 8,7Ü; 0 20,22; S 6 58; С1 7,39. >S

Вычислено, %: С 50,90; Н 5,55;

Яэ90 0 20 34; S 6 79; С2 7 51 °

Продукт имеет сильное ИК-поглощение при 1780-1744 см, что показы- 211 вает на напичие (3 -лактама и карбоиильных групп сложного эфира. Найдено, что продукт задерживает рост

Staphylococcus aureus, Оксфорд, при концентрации 0,25 мг(мл, 25

Пример 2. 1 -Ацетоксиэтил6 вЂ(D-a -аминофенилацетамидо)пеницилланат

С ус пе««зи««> о - (о-нитрофенилсульфенил)-аминофенилацетата дициклогексил-gg аммония (4,9 r 0,01 моль) и хлоргидE рата 1 -ацетоксиэтил-6-аминопеницилланата (3,4 г, 0,01 моль) в хлороформе (60 мл) перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют дициклогексилкарбодиимид (2,2 г 0,01 моль) и перемешивание продолжают еще 6 ч. Реакционную смесь фильтруют и промывают водой, разбавленной серной кислотой,1 н.раст-4g вором бикарбоната натрия и водой, высушивают и упаривают досуха под вакуумом. Желтый остаток обрабатывают этилацетатом, фильтруют и снова упаривают с образованием остатка, 45 который перекристаллизовывают из смеси этилацетата и петролейного эфира.

Получают 1 — ацетоксиэтил-6-(D-М -(о-

« нитрофенилсульфенил)аминофенилацетамидо)пеницилланата (1,5 г). Т.пл. 122-уб

5 С.

Продукт имеет сильное ИК-поглоще-« ние при 1780-!750 см, что показывает на присутствие /3 -лактама и карбонильных групп сложных эфиров. 55 о-Нитрофенилсульфениламинопроизводное сложного эфира (1,2 r, 0,02 моль) растворяют в 75% диоксана и доводят рН до 3 добавлением 2 н.раствор» соляной кислоты. Добавляют йодистый натрий (1,2 г, 0,008 моль), смесь перемешивают и доводят рН смеси до

3 добавлением кислоты. Через 20 мин образующийся йод уменьшают добавлением 2 н.раствора тиосульфата натрия, смесь нейтрализуют и экстрагируют этилацетатом после добавления воды.

Соединенные органические экстракты промывают водой и экстрагируют водой при добавлении 2 н.раствора соляной кислоты до рН 2. Водную фазу промывают этилацетатом и лиофилизируют с получением хлоргидрата 1 -ацетоксиэтил-6-(D-М -аминофенилацетамидо) пеницилланата (О, 15 г). Продукт идентифицируют по методике идентификации продукта, полученного в примере 1б, с помощью ИК-спектра.

Пример 3. 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-6-(D ««! -аминофенилацетамидо)пеницилланата.

1 -Этоксикарбонилоксиэтиловый ( эфир 6-(D-K -азидофенилацетамидо)— пенициллановой кислоты (2,5 г), растворенный в этилацетате (40 мл), и 0,4 моль мононатрийфосфата подкисляют до рН 2,2 2 M раствором соляной кислотой кислоты (40 мл), добавляют применяемый в качестве катализатора 10%-ный палладий на угле (4 г) и проводят гидрирование при атмосферном давлении в течение 30 мин. Катализатор отделяют фильтрованием и промывают этилацетатом и буферным раствором. Фильтрат отделяют и органическую фазу экстрагируют водой при рН 2, 1. Соединенные подкисленные водные фазы промывают эфиром, добавляют этилацетат и проь.>дят нейтрализацию при перемешивании с использованием

2 моль едкого натра. Фазы разделяют и водный раствор снова экстрагируют этилацетатом. Два этилацетатных экстракта соединяют, промывают рассолом и водой и экстрагируют водой при рН 2,5 при добавлении 2 моль хлористоводородной киспоты. Гоединенные подкисленные водные экстракты промывают эфиром и концентрируют под вакуумом при 25"С. Полутвердый остаток растворяют н изопропаноле, снова концентрируют и еще раз повторяют эту методику. Остаток перемешивают с эфиро.« il «н «у «ают

7 !!53830 8 хлоргидрат 1 -этоксикярбонилоксп1 этилового эфира 6-(D-<6 -аминофенилацетамидо)пеницилланоной кислоты (0,8 г) в виде желто-белого порошка с содержанием 86,4Х (гидроксиламиновая проба).

Продукт задерживает рост StaphylococcUs ацгепв, Оксфорд, при концентрации 0,13 г/мл Escherihia coli npu концентрации 125 мг/мл (раствор испы-.!0 тывался на arape) и дает сильное поглощение ИК-спектра при 1750 сМ

-I что показывает присутствие /3 -лактамного кольца и функциональной группы сложного эфира.

Азидопроизводное сложного эфира (3,2 r) получают обработкой хлоргид1 рата 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6аминопеницилланата (3,3 r 0,01 моль) в сухом диметилформамиде (50 мл) хлорангидридом ot, -азидофенилуксус.ной кислоты (2 r, 0,01 моль) в присутствии триэтиламина (2 г, 0,01моль).

После разбавления реакционной смеси водой выделяют сложный эфир экстраги-5 рованием зтилацетатом.

Пример 4. 1 -Этоксикарбонил-! оксиэ тип-6- (D- -аминофенилацетамидо)пеницилланат. а) К суспензиихлоргидрата хлоргид — 30 рина o(, -аминофенилуксусной кислоты (2,6 г, 0,0125 моль),. перемешиваемой в сухом хлороформе (50 мл) в токе сухого азота при охлаждении льдом добавляют бикарбонат натрия (1,1 r, 0,0125 моль) и хлоргидрат 1 -этокси-. карбонилоксиэтил-6-аминопеницилланата (3,3 г, 0,01 моль). После перемешивания в течение 90 мин смесь фильтруют и к фильтрату добавляют изопропа- 40 нол (15 мл). После упаривания под вакуумом при комнатной температуре получают маслянистый остаток, который при разбавлении петролеиным эфиром образует остаток хлоргидрата 45

1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(D- 4.— аминофенилацетамидо)пеницилланата (1,5 г). Продукт очищают осаждением из смеси ацетона и петролейного эфира. 50

Идентичность продукта устанавливают по его ИК-спектру. б) N-(1-Метоксикарбонилпропан-2ил)-4 --амипофенилацетат натрия (2,5 г, 0,0092 моль) и N-метилморфо- 55 лин (0,05 мл) в сухом этилацетате (40 мл) перемешивают и обрабатывают при -!5 С изобутилхлороформиатом (1,4 г, 0,01 моль). Через 6 мин по

Э каплям добавляют 1 -этлксикарбонплокспэтил-6-аминопеницилланат» (0,.01 моль) в этилацетгте (20 мл) при продолжающемся иеремешиванни и температуре — 15 С. Через 10 мин после прекращения добавления охлаждающую баню удаляют и перемешцвание продолжают еще 45 мин. Реакционную смеcl промывают водой, 0,5 моль бикарбоната натрия и снова водой, высушивают и концентрируют под вакуумом до образовавия маслянистого остатка, который обрабатывают тетрагидрофураном (20 мл) и водой (20 мл). Смесь подкисляют до рП 2,5 добавлением 2 и. раствора соляной кислоты. Через

30 мин большую часть тетрагидрофурана удаляют под вакуумом и подкисленную водную фазу промывают этилацетатом и упаривают. !!олучают хлоргидрат

1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(D-0C— аминофенилацетамидо)пеницилланат (0,35 r) в виде аморфного твердого вещества, идентифицируемого по его

ИК-спектру.

Пример 5. 1 -Ацетоксиэтил-!

Ь-(D-X -амино-и-фторфенилацетамидо)пеницилланат.

Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-6-аминопеницилланата (3,4 г, 0,01 моль) в сухом димстилфориамиде (50 мл) перемешивают на ледяной бане и .обрабатывают И,N-диметиланилином (2,4 r, 0,002 моль), а затем раствором хлорангидрида р6 -азидо-м-фторфенилуксусной кислоты (2, 1 r 0,01моль) в сухом эфире (5 мл). После перемешивания в течение -1 ч добавляют воду (100 мл), доводят рН смеси до

6,5 и экстрагируют трижды этилацетатом. Соединенные органические экстракты промывают водой и рассолом, высушивают и упаривают под вакуумом.

Получают 1 -ацетоксиэтил-6-D- об -азидо-м-фторфенилацетамидо)пеницилланат (1,5 r) в виде маслянистого остатка.

Этот продукт дает сильное ИК-поглощение при 2110 и 1780-1750 см, указывающее на присутствие азидогруппы, /3 -лактамного кольца и карбонильных групп сложных эфиров.

Азидозамещенное сложного эфира (0,7 r) растворяют в 60Х.-ном этаноле (7 мл) и добавляют к предварительно гидрированному каталитическому никелю Ренея (0,7 r) в 80Х-ном этаноле (5 мл). Гидрирование про1153830

l0 исходит в течение 30 мин в условиях окружающей среды. Катализатор удаляют фильтрованием и промывают этанолом. Соединенные фильтраты концентрируют под вакуумом при 35 С до 5 маслянистого остатка„ которь1й растворяют в этйлацетате. Добавляют воду (20 мл) и доводят рН до 1,6 добавлением 2 н.раствора соляной кислоты K перемешиваемой смеси. Водную фазу отделяют и упаривают под вакуумом при 35 С. Получают хлоргидрат

1 -ацетоксиэтил-6-(D-C -амино-мl фторфенилацетамидо)пеницилланат (0,4 r) в виде кристаллического

15 остатка.

Продукт задерживает рост Staphylococcus aureus Оксфорд, при концентрации 0,25 г/мл и дает сильное

ИК-поглощение при 1760 см, свойственное / -лактаму.

Пример 6. 1 -Ацетоксиэтил6-(D- -амино-п-оксифенилацетамидо)пеницилланат. (-) N-(1-Метоксикарбонилпропен2-ил)- -амино-п-оксифенилацетат натрия (2,9 r, 0,01 моль) в сухом этилацетате (40 мл) перемешивают и обрабатывают при температуре от — 15 до -20 С N-метилморфолином ЭО (несколько капель), а затем изобутилхлорформиатом (1,4 r, 0,01 моль).

Через 5 мин быстро добавляют раствор

-ацетоксиэтил-6-аминопеницилланата (3 r, 0,01 моль) в этилацетате Э5 (20 мл), охлажденном до -15 C. После перемешивания в течение 1 ч без наружного охлаждения реакционную смесь промывают водой, 0,5 М раствором бикарбоната калия, высушивают и упари- 40 вают под вакуумом при комнатной температуре досуха. Остаток растворяют в смеси (1:t) тетрагидрофурана и воды (50 мл), перемешивают и выдерживают в течение 30 мин при рН 2,5, 45 добавлением 2 N. раствора соляной кислоты. Тетрагидрофуран упаривают под вакуумом, а остающуюся водную фазу промывают этилацетатом, разбавляют изопропанолом и упаривают под 50 вакуумом при комнатной температуре.

Получают хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил6-(D-g -амино-и-оксифенилацетамидо)пеницилланата (2,3 r) в виде белых кристаллов, Продукт дает сильное

-I

ИК-поглощение при 1760 см, свойственное 3 -лактаму и карбонильным группам сложных эфиров. Он, как было найдено, ингибирует рост Staphylococcus

aureus Оксфорд, при концентрации

0,25 мг/мл.

Применяемый раствор 1 --ацетоксиl этил-б-(D-

Пример 7. 1 -Этоксикарбонилt оксиэтил-6-(D- C -амико-и-оксифенилацетамидо)пеницилланат.

Согласно методике примера б получают 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(D о -амино-и-оксифенилаце гамидо)пенцилланата, выделяемый в виде его хлоргидрата (1,4 г) из (-) N-(1-метоксикарбонилпропен-2-ил)- с --амико-л-оксифенилацетата натрия (2,8 г, 0,01моль) и 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-аминопеницилланата (0,01 моль).

Продукт дает сильное ИК-поглощение при 1760 см, показывающее. на присутствие /3-лактама и карбонильных групп сложных эфиров. Было найдено, что он задерживает рост микроорганизмов вида Stgyhylococcus aureus, Оксфорд, при концентрации 0,25 мг/мл.

Пример 8. 1 -Ацетоксиэтил6-(ot, -амико-3-фурилацетамидо)-пеницилланат.

N-(1-Иетоксикарбонилпропен-2-ил)-амино-3-фурилацетат натрия (2,5 r, 0,0095 моль) и N-метилморфолин (0,05 мл) в сухом этилацетате (40 мл) перемешивают и обрабатывают при -15 С изобутиловым эфиром хлормуравьиной кислоты (1,4 r, 0,01 моль). Через 5 мин добавляют

1 -ацетоксиэтил-6-аминопеницилланат в этилацетате (20. мл) при продолжении перемешивания и при -15 С, Через

10 мин после прекращения добавления охлаждающую баню удаляют и перемешивание продолжают еще 45 мин. Реакционную смесь промывают водой, 0,5 моль бикарбоната натрия и снова водой, высушивают и концентрируют под вакуумом до маслянистого остатка, который обрабатывают тетрагидрофураном (20 мл) и водой (20 мл) и доводят рН до 2,5 в течение 30 мин добавлением разбавленной соляной кислоты. Большую часть тетрагидрофурана упаривают под вакуумом и водную фазу промывают этилацетатом и лиофи-"

I лизируют. Получают хлоргидрат 1 -ацетокси-6-(М -амино-3-фурилацетамидо)—

1153830

12 пеницилланата (1,9 г) в виде белой стекловидной массы.

Продукт, как было найдено, задерживает рост микроорганизма вида

Staphylococcus aureus, Оксфорд при концентрации 0,63 мг/мл и дает сильное ИК-поглощение при 1760 см, свой- ственное Р -лактамному кольцу и группам сложных эфиров.

Пример 9. 1 -Этоксикарбоf 10 нилоксиэтил-6-(М -амино-3-тиенилацетамидо)пеннцилланат.

По методике, описанной в примере 8, получают хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(å6-амино-3-тиенил-1 ацетамидо)пеницилланат из 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-аминопеницилланата и N-(1-метоксикарбонилпропен-2ил)-g -амико-3-тиенилацетата натрия.

Продукт, как было найдено, дает сильное ИК-поглощение при 1760 см

1 что показывает на присутствие Р -лактамного кольца и остатков сложных эфиров.

Пример . 10. 1 -АцетоксиэтилI

6-(D- C -амино-3-тиеиилацетамидо)пеницилланат.

Хлоргидрат 1 -ацетоксиэтил-6- — амино-3- тиенилацетамидо)пеницилла- ЗО нага (1,2 г) получают по методике примера 8 из N-(1-метоксикарбонилпропен-2-ил)-0L -амино-3-тиенилацетата натрия (2,8 г, 0,01 моль) и 1 -ацетоксиэтил-6-аминопеницилланата (О 01 моль).

Продукт дает сильное ИК-поглощение, свойственное Р -лактаму и группе сложного эфира (при 1760 съ -).

Пример 11. Свободное осно- 40

I ванне 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6(D-Ф, -аминофенилацетамидо)пеницилланата.

Гидрохлорид 1 -Этоксикарбонилоксиэтил-6-(Р-s6 --аминофенилацета- 45 мидо)пеницилланата (5,4 г, О, 11ìoëü) растворяют порциями в 100 мл охлаждаемой льдом воды при перемешивании на ледяной бане. При энергичном перемешивании добавляют 200 мл диэти- 50 лового эфира с последующим добавлением 5 г бикарбоната натрия. Смесь поддерживают при энергичном перемешивании в течение i мин, когда весь бикарбонат натрия растворяется. Орга-55 ническую фазу отделяют и промывают

125 мл ледяной воды, а затем сушат с помощью перемешивания в течение

15 мин на ледяной бане с г бе. подпого сульфата магния и фильтруют.

При перемешивании прн 0 С добавляют

100 мл петролейного эфира по каплям ло тех пор, пока не получают мутный раствор. Последний затем хранят при -25 С в холодильнике в течение ночи, давая кристаллический осадок из пластин и длинных игл (5-10 мм).

Осадок декантируют и сразу же помещают под высоким вакуумом над пятиокисью фосфора, получая белый продукт из микрокрнсталлических пластинок и иголок 1,5 г (307) свободного основания 1-зтоксикарбонилокснэтил-6-(D- gf, -аминофенилацетамидо)-пеницилланата с точкой плавления 4849 С.

Данные йодометрического анализа показали чистоту 87 н 5,83 пенициллановой кислоты.

Кривая ИК-спектра имеет сильную полосу при 1780 см для /3 -лактама

-l и при 1760 см для группы сложного эфира карбоновай кислоты.

Н-ЯМР DNCO d6, 6 млы. долей, ТМС в качестве внутреннего стандарта): 1,22 (т., ЗН, J = 7 Гц) 1 1,44 (д., ЗН); 4,15 (кв., 2Н, J = 7 Гц);

6,62 (кв., 1Н, J = 5 Гц) для группы сложного эфира карбоновой кислоты и 5,41 (д., 1Н, 1 = 5 Гц) и 5,51 (д., 1Н, J = 5 Гц) для /3 -лактамных протонов. Кривая ЯМР показала резонанс для сложного эфира в смеси эпимеров сложноэфирной группы в соотношении 65:35 при 3 4,34 и 4,37 (с., 1Н) С, -протон.

К маточной жидкости добавляют дополнительно 50 мл холодного (-20 С) нетролейиого эфира. Раствор выдерживают в течение ночи при -25 С, получая кристаллический продукт из длинных игл, которые отфильтровывают на холодном стеклянном фильтре С и промывают 5 мл холодного петролейного эфира. Фильтр с кристаллическим продуктом сразу же сушат в холодном эксикаторе, получая кристаллический продукт из длинных игл (10-15 мм) весом 0 5:г (107) с точкой плавления

48-51 С.

Данные йодометрического анализа показали чистоту 877 °

Пример 12. Свободное основание 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6(D- -аминофенилацетамидо)пеницилланата.

30

Кукурузный крахмал

Стеарат магния

101 102

10 10

Гидролиз сложных эфиров аминопенициллинов, полученных согласно изобретению, определяют в буферном растворе в присутствии и отсутствии сыворотки крови человека. Сложные эфиры выцерживают в течение 30 мин при

37 С при концентрации 10 г/мл в фосфатном буфере Серенсена (рН 7,4), а в другом опыте — в таком же буфере, содержащем 10Х сыворотки крови человека. Испытуемые растворы экстрагируют этилацетатом для удаления негидролизованных сложных эфиров и подвергают микробиологическому анализу на содержание аминопеннциллинов, контрольные величины были получены при растворении сложных эфиров в фосфатном буфере при тех же концентрациях и непосредственно перед зкСтрагированием. Величины в табл.2 скорректированы.

Как видно из приведенных данных, новые соединения проявляют высокую скорость их всасывания н гидролиза при повышенном максимальном сывороточном уровне и более коротком времени его достижения.

13 11538

3,2 г (0,006 моль). гидрохлорида

1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(D-ofаминофенилацетамцдо)пеницилланата растворяют порциямн в 150 мл холодной воды при +1 С и промывают три раза .диэтиловым эфиром. ВоднУю фазу освобождают от эфира уиариванием в вакууме и добавляют по каплям к

150 мл холодной воды при охлаждении льдом, при этом в это же самое время 10 непрерывно из автотитратора добавляют 2,0 н.гидроокись натрия (0,0066 моль) с такой скоростью, . чтобы рН поддерживать постоянным на уровне 9-9 5 что во время реакции 1з составляет до 10 мин. Добавление .

2 н.раствора гидроокиси натрия начинают, когда к реакционному раствору добавлено 10Ж раствора гидрохлорида.

Выпавший в оеадок продукт Фильт- 30 руют на холодной (-10 С) воронке

Бюхнера, промывают 2х5 мл холодной воды (+О С) и быстро переносят в зксикатор для сушки s вакууме при

1 мм рт.ст., получая 2, 10 г (75,3X) М свободного основания 1 -зтоксикарбонилоксиэтил-6-(В-е -аминофенилацетамидо)пеницилланата.

Чистота по данным меркуриметрического анализа (ртутный анализ) состав»3о ляет 96,47.

Н-ЯИР (0ИСО d6, о млн долей, ТИС в качестве внутреннего стандарта):

1,22 {т., ЗН, J = 7 Гц), 1,44 (д., ЗН); 4, 15 (кв. 2Н, J 7 Гц) 6,62 35 (кв., 1Н, J = 5) для группы карбонатного сложного эфира и 5,41 (д., 1Н, J = 5 Гц) и 5 51 (д., 1Н, J =

= 5 Гц) для f3 -лактамных протонов.

Пример 13. Оральное всасывание 1 -ацетоксизтил-(соединение I) и 1 -ацетоксикарбонилоксиэтил-(соединение II}-6-(D-g --аминофенилацетамидо)пеницилланата у человека.

Изучают оральное всасыванне 43

1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(9-e6— аминофенилацетамидо)пенициллаиата (l) и 1 -ацетоксиэтил-6-(D- М -амино1 фенилацетамидо)пеницилланата (IE) на опытах с 9 здоровыми доб1оволь- SO цами мужского пола с применением

6-(D-g -аминофенилацетамидо)пенициллановой кислоты — ампициллин Ц в качестве контроля. Соединения вводят в виде таблеток следующего состава, мг; I II

Сложный эфир пенициллина 359 338

Количество сложных эфиров соответствует 250 мг свободного ампициллина. В качестве контроля применяют имеющиеся в продаже таблетки (доктациллин 0,25 г), содержащие 250 мг свободного ампицнллнна. Таблетки принимают натощак. Берут образцы крови в определенные интервалы времени и подвергают их анализу íà определение содержания ампицнллина с применением микробиологических проб.

В табл. 1 приведены концентрации антибиотика в сыворотке со средней стандартной ошибкой.

Средние кумулятивные выделения с мочой через 8 ч следующие, Х к дозе:

Соединение Х 53 4+2 5

Соединение IE 53,7+4,9

Амиициллин 34,5+2,8

П р и и е р 14. Гидролиз сложных эфиров аииноиенициллина в соответстеующие аминопеиициллины в буФере и s присутствии сыворотки крови человека.

1153830

15 ны товлены препараты по следующей рецептуре: исахаридов 4,0 г рия 0,1 г

До 100 г

Табли а 1

Концвитрации антибиотика в

Соединение

4,79 3,47

+0 35 «+0 32

5,38 3,88

«+0, 38 «+0, 33

5,99

+0,90

7,48+0,86

2,51

«+0, 16

2,80

«+0,38

1 ° 14

+О, 13

1,17

+О, 18

О,?1

+0tt0

0,68

é0,tt

0,20

+0,026

0,19

«+О, 035

0,069

«+0,01 t

0,065

+0,016

Ампициллин

1 66

+0,25

0,48

«+О, 17

1,49 2 30

«+0,29 «+0,32

2,28

+О 31

Пример 15. Токсичность сложных эфиров аминопенициллинов при внутривенном введении мышам.

Исследовалась острая токсичность соединений согласно изобретению при 5 внутривенном введении их мьппам. Каждая доза испытывалась на группе из

10 животных и такие соединения как гидрохлориды растворялись в физиоло.гическом растворе и вводились в боковую копчиковую вену мышам, за которыми после введения устанавливалось наблюдение в течение 7 дней. Во всех случаях смерть наступала через 2 ч после введения, Результаты даны в табл. 3. . Пример 16. Лекарственные препараты.

Для получения таблеток составлены препараты но следующей рецептуре: а) Хларгидрат 1 -ацетоксиэтил-6-(П-g -аминофенилацетамидо)-пеницилланата 338 мг

Крахмал 1О0 мл 25

Стеарат магния 10 мг б) Хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(D-dаминофенилацетамиио)пеницилланата 359 мг 30

Крахмал 100 мг

Стеарат магния 10 мг

s) Хлоргидрат этоксикарбонилоксиметил-6(D-ef - амииофенилацетамидо)пенициллината 350 мг

Карбонат кальция 100 мат

Стеарат магния . 10 мг

r) Хлоргидрат 1 -этокси-! карбонилоксиметил-6-{В- 40 о -амияофенилацетамидо).пенициллината 359 мг

Лактоза 100 мг

Стеарат магния 10 мг д) Хлоргидрат 1 -этокси-. 4S карбонилоксиметил-6-(D->

0 5 1 1 5. 2

-амино-м-фторфенилацетамидо)пенициллината 370 мг

Иикрокристаллическая целлюлоза Авицель 100 мг

Стеарат магния 10 мг е) Хлоргидрат 1 -ацетоl ксиэтил-6-(D-a -аминофенилацетамидо)пеницнллината 338 мг

Карбонат кальция 100 мг

Лактоза 100 мг

Стеарат магния 10 мг

Для заполнения в капсулы составлеследующие рецептуры:.ж) Хлоргидрат 11 -ацетоксиэтил-6- (D- K-аминофенилацетамидо) пенициллината

Стеарат магния

4 з) Хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(D-к — аминофенилацетамидо)пенициллината 350 мг

Лактоза 40 мг

Стеарат магния 5 мг

Для пероральных суспензий пригои) Хлоргидрат 1 -ацетоксизтил 6 (Э- K аминофенилацетамидо) пенициллинат 34 мг

Ионостеарат алюминия 50 мг

"Танин-80" 1,2 мг

Арахисовое масло До 1000 мг к) Хлоргидрат 1 -этоксикарбонилоксиэтил-6-(D-Ф

-аминофенилацетамидо)пенициллината 36 уВензонат натрия 0,48 r.

Хлористый натрий 0,75 г

Отдушка 4,7 г

"Аэросил" 0,3 г

"Антифоам" О, 0375 г

Соли щелочного металла сульфатов пол

Сахаринат нат

Сорбит сыворотке, г/мм, за время, ч

3 4 6. 8

1,52 0,35 О, 12

«+0,25 +О 062 0,026

1153830

Таблица сн, к; сн- со- сн-сн- сн сн, хи, со ж сн-ссор, R(Rz и-НО-С Н46 4

2,5

6,8

5 0

33,1

-сн(сн,)осоосн, 3,5

12,4

Фурил

-сн(сн,)ососн, 35 2

Тиенил

-сн(сн, )ОсООс,н

?,0

35,2

Тиенил

Таблица 3

Данные по изучению острой токсичности

Шз

Rg-Ñé-C0 HH- CH- CH ! снз

lIHg Hcl сО-м Сн — cooRg

R)

200 с 400 сн с н

200 < 400

I сн-осоос н

Значения Jg ц находятся между указанными пределами, Составитель 3. Латыпова

Редактор Л. Алексеенко Техред О.Ващишина

Корректор С. Черни

Заказ 2535/45 Тираж 384 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

-сн(сн,)ососн, -сн(сн, ) осоос, н, содержание гидролизованных зфиров через 30 мин при 37 С, 7

Фосфатный буфер Фосфатный буфер

10Х сыворотки