Способ получения 5- @ 3 -(2- @ 2,2,2-трифторэтил @ - гуанидино)-пиразол- 1- ил @ -валерамида или его малеината

 

Способ получе1шя (,2,2-трифторэтил -гуанидино )-пиразол- -1-ил} Еалерамида формулы г /(СН2)4-СОЪ Н2 тян,или его малеината, отличающийся тем, что 2,2,2 трифторэтилцианамид подвергают взаимодействию с 5-( З-аминоггиразол-1-Ил )-валерамидом при кипении реакционной массы в кислой среде, после чего реакционную массу обрабатывают водным щелочным раствором Ш и этилацетатом, органический слой отделяют и вьщеляют целевой продукт либо в свободном виде, либо в С виде соли с малеиновой кислотой.

СО103 СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51) 4 С 07 С .127/19

ВСЕСОМЗН Ч1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ЬКК,118 6 ",,К

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЬГТИЙ (21) 3506796/23-04 (62) 3411500/23-04 (22) 26.10.82 (23) 05.03.82 (3l) 8128179 (32) 17,09.81 (33) GB (46) 23.11 85. Бюл. Ф 43 (71) Империал Кемикал Индастриз ПЛС (GB) и Ай-Си-Ай Америказ Инк (US) (72) Тобиас Орегон Еллин(118)и Дэвид

Джон Гилман (GB) (53) 547.495.07(088.8) (56) Патент Великобритании

Ф 2052478А, кл. С 07 С,127/19, опублик. 1980. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 5-Р-(2-(2,2,2-ТРИФТОРЭТИЛ)-ГУАНИДИНО)-ПИРАЗОЛ-1

«ИЛ)-ВАЛЕРАМИДА ИЛИ ЕГО ИАЛЕИНАТА °

„„SU„„» 427 А (57) Способ получения 5-(3-(2-f2,2,2-трифторэтил)-гуанидино)-пиразол-1-ил -валерамида формулы

3 2

mn, ы с=, -(сн, -собак, или его малеината, отличающийся тем, что

2,2,2-трифторэтилцианамид подвергают взаимодействию с "-(3-аминопиразол-1-ил)-валерамидом при кипении реакционной массы в кислой среде, после чего реакционную массу обра" батывают водным щелочным раствором и этилацетатом, органический слой отделяют и выделяют целевой продукт либо в свободном виде, либо в виде соли с малеиновой кислотой, Цель изобретения — изыскание нового гуанидинового производного, проявляющего улучшенные свойства как антагонист гистамина Н-2 и ингибирующего секрецию кислоты желудочного сока.

Пример 1. 5-(3-(2-(2,2,2-Трифторэтил)-гуанидино)-пиразол-1-ил)-валеронитрил (13 г) добавляют в течение 10 мин к концентрированной серной кислоте (65 мм) при одновременном перемешивании.

Полученный раствор поддерживают при 20 С в течение 18 ч и затем о разбавляют льдом {300 мл) и подщелачивают посредством 10,8 н. гидрата окиси натрия до достижения величины рН 9. Смесь экстрагируют этилацетатом (Зх200 мл) и экстракт высушивают (над сульфатом магния) и выпаривают в вакууме до получения в остатке масла, которое кристаллизуется.

Сырой продукт перекристаллизовывают из EtOAc, в результате чего получается 5- 13-(2-(2,2,2-трифторэтил)-гуанидино)-пиразол-1-ил)-валерамид с о т.пл. 130 С. Соль малеиновой кислоты получают путем растворения продукта в ацетоне. Т.пл. получаемой соли

183-184 С.

Исходный материал может быть получен следующим образом. 45

Гидрид натрия.в виде пастообразной массы (6,16 r 61%-ной (вес/вес) суспензии в жидком парафине) вводят отдельными порциями в течение 30 мин в раствор 3-нитропиразола (17,4 r) 50 в обезвоженном диметилформамиде (Н1Ф) {150 мл) с внешним охлаядением льдом с целью поддержания температуры раствора 20-80 С, Смесь перемешии вают в течение 45 мин и к почти про- 55 зрачному раствору добавляют 5-бромвалеронитрил (25 r) в течение 30 мин о при 25-30 С. Смесь перемешивают в те1 1194

Изобретенйе относится к синтезу гуанидиновых производных, являющихся антагонистами гистамина Н-2 и ингибирующими секрецию кислоты желудочного сока, а именно к синтезу

5- 13- (2-(2,2,2-трифторэтил)-гуанидино)-пиразол-1-ил)-валерамида формулы

271 2 чение 4 ч. Добавляют воду (45 мл) и Е1ОАс (4 0 мл) и верхний слой отделяют, высушивают (над MgSOq) и выпаривают в вакууме до получения в остатке масла, которое представ.ляет собой смесь 5-(3-нитропиразол-1-ил)-валеронитрила и 5-(5-нитропиразол-1-ил)-валеронитрила. Это масло разделяют на две (по 15 rj порции, которые фракционируют, пропуская их .через колонку с силикагелем (диаметр

3,5 см, длина 100 см); элюирование осуществляют при давлении 2 атм сме-. сью этилацетат — петролейный эфир (т.кип. 60-80 С), взятой в соотношео нии (об/об) 3:7. Сначала элюируется 3:5 изомер, а затем 1:3 изомер.

Получаемый 5-(4-нитропиразол-1-ил)-валеронитрил имеет т.пл. 32-33 С. о

К раствору 5-(3-нитропиразол-1-ил)-валеронитрила (9,16 r) в обезвоженном тетрагидрофуране {200 мл) добавляют палладий (5% вес/вес) на угле (1,8 r). Смесь перемешивают при

20 С в атмосфере водорода. В течение о

4 абсорбируется 3,2 л водорода.

Катализатор отфильтровывают и фильтрат выпаривают в вакууме, в результате чего получается 5-(3-аминопиразол-1-ил)-валеронитрил в виде масла.

В раствор 5-(3-аминопиразол-1-ил)-валеронитрила (7,0 r) в апетонитриле (25 мл) вводят 2,2,2-трифторэтилизотиоцианат (6,02 r). Спустя

15 мин растворитель выпаривают в вакууме, в результате чего получается 5-(3-(3-(2,2,2-трифторэтил)-тиоуроидо)-пиразол-1-ил -валеронитрил в виде белого кристаллического твердого вещества, с т.пл. 96-98 С.

Указанную тиомочевину (12, 5 г) растворяют в 8-молярном растворе аммиака в EtOH (120 мл). К раство- . ру добавляют окись ртути (12,8 r} и смесь перемешивают при 20 С в тео чение 30 мин. Полученную смесь фильтруют и фильтрат выпаривают в вакууме, в результате чего получается 5".(3-1,2-(2,2,2-трифторэтил -гуанидино)-пиразол-1ил)-валеронитрил в виде масла. Образец этого масла растворяют в ацетоне и добавляют 5молярные эквиваленты малеиновой кислоты. К образующемуся прозрачному раствору .добавляют диэтиловый эфир, в результате чего получается кристаллический малеат с т.пл. 123125 С.

3 ll94

Кроме этого, 5-(3-(2-(2,2,2-трифторэтил)-гуанидино)-пиразол-1-ил)валеронитрил может быть получен в результате реакции 3-аминопиразола с 2,2,2-трифторэтилизотиоцианатом реакции полученной тиомочевины с аммиаком в присутствии окиси ртути, и алкилирования у азота в 1-положении 3- (2,2,2-трифторэтил) -гуанидино)-пиразола с 5-бромвалеронитрилом. !О

Пример 2. В раствор 2,2,2-трифторэтилцианамида (0,65 г) и

5-.(3-аминопиразол-l-ил)-валерамида (0,87. r) в KtOH (10 мл) вводят концентрированную соляную кислоту (5 капель). Полученную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 5 ч. В течение этого периода периодически добавляют концентрированную соляную кислоту в виде капель с целью поддержания величины рН 4. Летучий материал выпаривают в вакууме, и остаток после выпаривания взбалтывают вместе с 2 н, водным раствором гидрата окиси натрия 25 (10 мл) и EtOAc (35 мл). Органический слой отделяют, и водную фазу снова экстрагируют этилацетатом (2х35 мл). Объединенные экстракты высушивают (над Мд$0 ) и добавляют малеиновую кислоту, растворенную в ацетоне, в результате чего полу» чается малеат 5-(8-(2-(2,2,2-трифторэтил)-гуаиипиио1-пираэол-\ mrjo

-валерамида с т.пл. 180-182 С.

Альтернативно объединенные экстракты можно выпарить и остаток перекристаллизовать из этилацетата, получая при этом продукт в виде свободного основания. Т.пл. 130 С. о

2,2,2-Трифторэтилацианамид, используемый в качестве исходного материала, может быть получен следующим образом.

Цианогенбромид (1,06 г) раство- 45 ряют в холодном диэтиловом эфире (5 мл) и добавляют к раствору 2,2,2-трифторэтиламина (1,98 г) в холодном диэтиловом эфире (5 мл). Смесь нагре— о вают до 20 С в течение 30 мин, затем 50 фильтруют. Осадок на фильтре промывают диэтиловым эфиром и соединенные фильтраты выпаривают в вакууме при о

20 С, в результате чего получается

2,2,2-трифторэтилцианамид в виде те- SS кучего масла, которое отверждается . о при выдержке при -15 С. Инфракрасный эа спектр показывает полосу при 228 см

271 4 (которая соответствует -СИ,1 . Спектр ядерного магнитного резонанса (Я1"1Р) в Э-метаноле с тетраметилсиланом, служащим в качестве внутреннего стандарта (S=0) показывает резонанс (8) 3,65 (квартет).

Активность антагонистов гистамина

Н-2 была испытана посредством стандартных испытаний, например, по способности соединения формулы 1 ингибировать вызванную гистамином положительную хронотропную ответную реакцию при спонтанном биении правого предсердия морских свинок, или по, способности этого соединения ингибировать вызванное гистамином поглощение аминопирина в кислотное пространство париетальных клеток (т,е. обкладочных клеток желез желудка).

Испытания на морских свинках осуществляют следующим образом. Правое предсердие морской свинки подвеши вают с натяжением 1 г (изометрическое натяжение) в тканевой ванне с термостатическим регулированием (80 С, емкость 25 мм), содержащей насыщенный кислородом (957 О, 5Х

СО ) буфер Krebs Henseleit (рН 7,4).

Ткань стабилизируется в течение 1 ч„ и в течение этого времени она промывается 2-4 раза; Отдельные сокращения регистрируются посредством датчика силового смещения с использованием измерителя деформации, а мгновенные частоты сокращения регистрируются посредством кардиотахометра, Получают значение контрольной ответной реакции на 1 мкмоль гистамина, после чего ткань промывают три раза и снова приводят в равновесное состояние до основного показателя частоты. После установления равновесия, длящегося 15 мин, вводят испытываемое соединение до желаемой конечной концентрации. Через !О мин после введения соединения снова вводят гистамин (1 ммоль), и ответную реакцию на гистамин в присутствии антагониста сравнивают с контрольной ответной реакцией на гистамнн. Результат выражен в процентах от контрольной ре-. акции на гистамин. После этого стандартными методами определяют кажущуюся константу диссоциации антагониста гистамина Н-2.

Испытание с аминопирином осуществляют следующим образом. Удаляют слизистую оболочку желудка из

1194271

Составитель В. Сапунов

Редактор Е. Папп ТехредА.Бабинец Корректор Л. Патай

Заказ 7330/62 Тираж 383 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета-СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 мышцы дна желудка и промывают ее в буфере I (содержащем íà 1 л раствора, г: NaCI 8,007; КСI 0,201;

Na НРО 0,113; КН РО 0,204; СаСI 2Н О 0,1 32; М Сl О, 101 и глюкоz за 1, с регулированием величины рН до 7,4 посредством NaOH). Ткань тонко измельчают, суспендируют в .буфере I.è промывают три раза буфером 1.

Затем ткань суспензируют в диспергирующей среде: коллагеназа (Sigma

СЬегпса1 Со Тип У; 100 мг) и альбумин коровьей сыворотки (Miles Laboratories Ltd, фракции У; 100 мг в буфере 1 (100 мл); 50 мл на 10 r чистого веса ткани и термостатируо

Э ют при 30 С и величине рН 7,4 (поддерживаемой путем непрерывного регулирования) при перемешивании в атмосфере кислорода. По прошествии

0 мин ткани дают возможность осесть и поверхностный жидкостный слой удаляют. Вводят свежую порцию диспергирующей среды и продолжают термостатирование с использованием ткани, которая в большей своей части диспергируется в железы и целые клет-; ки по прошествии 40-60 мин. Любые оставшиеся большие кусочки ткани удаляют путем фильтрации через нейлоновую сетку. Смесь желез и клеток извлекают путем центрифугирования при 200 х г, и суспензируют в буфере 1, содержащем l альбумина коровьей сыворотки (Miles Laboratori:

Ltd, фракция У).,И, наконец, железы и клетки промывают три раза буфером

1, и суспензируют в буфере 2 (содержащем bagles МЕМ (500 мл), Апротин (Sigma Chemical Co 10 мг), и

HEPES (т.е. 2-1,4-(2-оксиэтил) -пиперазин-I-ил1-зтаноульфокислоты) (150 ммоль; 20 мл), при поддержании величины рН 7,4 посредством МаОН;

150 мл на 10 г чистого веса ткани, Эту тканевую суспензию перемешивают

5 6 в атмосфере кислорода при 32 С в течение по меньшей мере 1 ч, после чего ее можно использовать. Тканевую суспензию термостатируют вместе с испытываемым соединением и амиИ нопирином (10 мкмоль), меченым С в диметиламиновой группе (0,1 мк х хдюйм /мл), в течение 20 мин. Затем

Ч поглощение аминопирина стимулируют путем добавления гистамина и инги» битора фосфодизстеразы 1Сl 63197

-5 до конечных концентраций 10 моль и 5х10 моль соответственно. По прошествии 18 мин клетки (железы) извлекают из термостатированной среды путем фильтрации суспензии через стеклянный микрофибрильный фильтр. (Клетки (железы) быстро (в течение менее чем 10 с) промывают три раза

2S охлажденным льдом буфером 1. Амино(4 пирин, меченый С, удерживаемый тканью, измеряют с помощью сцинтилляционного счетчика и степень ингибирования поглощения испытываемым соединением рассчитывают путем сопоставления с контрольным образцом.Затем с помощью графиков, полученных в ряде испытаний, проводимых при различных концентрациях, рассчитывают концентрацию испытываемого соединения, дающую ингибирование на 50 .

Соединение формулы f u его соли бьг.ли активными в опыте в концентрации

0,0036 мкмоль.

Активность известного вещества

3-(2-гуанидинотиазол-4-илметилтио)»

-пропионамида в 100 раз меньше, чем соединения формулы