Штамм а/ф/59/1 вируса гриппа,используемый для получения противогриппозной инактивированной вакцины

 

Штамм А/Ф/59/1 вируса гриппа ГКВ № 1872 (Государственная коллекция вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского), используемый для получения противогриппозной инактивированной вакцины. (Л С со О5 4 1

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3771623/28-14 (22) 19.07.84 (46) 23.03.86. Бюл. У 11 (71) Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины, Ленинградский научно-исследовательский институт вакцин и, сывороток и Московский научно-исследовательский институт вирусных препаратов (72) А.Ю Егоров, Т.Е.Медведева, Ф.И.Полежаев, Г.И. Александрова, В.К.Константинов, В.Г.Вишневский, И.З.Коневская, А.И.Климов и Ю.З.Гендон (53) 615.372(088 ° 8) (56) Авторское свидетельство СССР

У 1056636, кл. С 12 N 7/00, 1983.

„„SU 1219644 А

<51>4 С 12 N 7/00, А 61 К 39/145, С 12R1:91 (54) lllTAMM А/Ф/59/ i ВИРУСА ГРИППА, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВОГРИППОЗНОЙ ИНАКТИВИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ. (57) Штамм A/Ô/59/i вируса гриппа

ГКВ ll - 1872 (Государственная коллекция вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского), используемый для получения противогриппозной инактивированной вакцины.

1219644 2

10

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в области приготовления противовирусных вакцин.

Целью изобретения является штамм

A/Ф/59/1 вируса гриппа, предназначенный для получения противогриппозньгх инактивированных вакцин.

Для этого эталонный штамм А/Фи. — липпины/2/82,непригодный для производства вакцин вследствие низкой активности репродукции в куриных эмбрионах (инфекционный титр не превышает 7,0 1g ЭИД50/0,2 мл и гемагглютинирующий титр в пределах . 1:64-1:128), рекомбинируют с лабораторным штаммом — донором свойств. высокой репродуктивнасти в куриных эмбрионах А/РК/8/59/1. Лабораторный штамм А/PR/8/59/1 является халодоадаптированным вариантом известного штамма А/PR/8/34 и характеризуется высокими показателями репродукции .о в куриных эмбрионах при 34-36 С (инфекционный титр 10,0 1д ЭИД 50/0,2 мл и титр накопления гемагглютинина

1:2048), температурочувствительнас. тью репродукции (при 4-0 C инфекциана ный титр снижен на 8,0 1g ЭИД50) и пониженным уровнем патогенности для куриных эмбрионов.

Технология получения рекомбинантного вакционного штамма включает совместное культивирование в куриных эмбрионах эпидемического и лабо--. раторного штаммов, приводящее к обмену генетической информации между ними. В результате клонирования предельными разведениями выделен клон А/Ф/59/1, обладающий комбинацией полезных признаков, а именно антигенными свойствами современного ,возбудителя А/Филиппины/2/82 и репродукционной активностью лабораторного штамма.

Репродукционная активность штамма

А-Ф/59/1 в куриных эмбрионах после

0 их инкубации при 35 С в течение

48 ч характеризуется инфекционным титром вируса 9,5 — 10,5 1g

ЭИД50/б,2 мл и гемагглютинирующим титром 1:1024.

Рекамбинантный клон А/Ф/59,/1 унас ледовал также от лабораторного штамма высокий уровень температурачувствительности и низкий уровень патогенности для куриных эмбрионов (4, 0 1 g ЛД50)

Антигенная структура — НЗ№2. В перекрестной РТГА штамм взаимодействует с антисывороткой к вирусу

А/Филиппины/2/82 до гомологичного титра, сыворотка к штамму А/Ф/59/1 также реагирует с эпидемическим штаммом А/Филиппины/2/82 до гомологичного титра, В реакции подавления нейраминидазной активности со штаммом взаимодействует имунная сыворотка СДС-18 (Н ¹ 2) до титра

Ч

1:128 и не взаимодействует антисыворотка к штамму А/PR/8/59/1.

Штамм А/Ф/59/1 чувствителен к

Р-ингибиторам нормальной кроличьей сыворотки, ингибирующей вирус до титра 1:640.

Морфология штамма А/Ф/59/ !. Полимарфная структура, типичная для вируса гриппа.

Штамм проявляет стабильность основных генетических свойств на протяжении пяти пассажей на куриных эмбрионах.

Пример. Группе из десяти куриных эмбрионов вводят в аллантоисную полость вирус А/Ф/59/1, взятый в объеме 0,2 мл при концентрации

1 ЭИД 50„ Эмбрионы инкубируют при о

34 С в течение 48 ч. В аллантоисной жидкости, отобранной от каждого куриного эмбриона раздельно, гемагглютинин выявлен в разведении 1:2048 в трех пробах, 1:1024 в пяти пробах и 1. 512 в двух пробах. Инфекционный титр вируса в трех пробах дас..игает 10,5 18 ЭИД50/0,2 мл, в пяти пробах 10,0 1g ЭИД50/0,2 мл и в двух пробах 9,5 18 ЭИД50/0,2 мл.

Равноценной группе куриных эмбрионов в той же дозе и объеме вводят родительский вирус А/Филиппины/2/82.

Из десяти проверенных проб аллантоиснай жидкости в трех геммагглютинин содержится в титре 1-:128, в шести пробах — в титре 1:64 и в одной — в титре 1:32. Инфекционный титр вируса во всех пробах не превышал

7,0 1g ЭИД50/0,2 мл.

Штамм соответствует по антигенной структуре актуальным эпидемическим вирусам, чта позволяет создать более эффективную защиту против современного гриппа А при использовании штамма в качестве инактивираван,ной вакцины.