Способ получения соединений гуанидина или их фармакологически совместимых солей

 

Способ получения соединений гуанидина общей формулы N X Я1 R2 Н где Ph - незамещенный фенил или фенил , замещенный С -С -алкилом, С -С -алкоксилом, гат логеном, трифторметилом; N, вместе пирролидоновое, пиперазиновое, 1шперндиновое или морфолиновое кольцо, не замещенное или же замещенное одним или двумя алкилами. С,-Cj,-an- коксикарбонилом, фенилом, или их фармакологически совместимых солей,о т л и ч а ю щ и и с я тем, что гуанидиновую соль общей структурной формулы .-Х где X - остаток кислоты; N, R, имеют указанные значения , подвергают взаимодействию с соединением структурной формулы -о N где V - С -С -апкоксил, В безводном .органическом растворителе при температуре от 20°С до темпе: ратуры кипения растворителя и полуденную соль в случае необходимости переводят в основание. i О) ю to

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТКИ ЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„SU „„1222191 (51)4 С 07 С 127 1

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

-4 З ИОЭ )., Ф

К ПАТЕНТУ

Ph-я=с-w х

Я вЂ” N Я

Ph-Ч=С вЂ” N

N

R1 R2 н (21) 2928398/23-04 (22) 27.05.80 (31) 4993/79 (32) 29.05.79 (33) СН (46) 30.03.86.Бюл.9 12 (71) Циба-Гейги АГ (СН) (72) Кришна Говиндарам Дев и Томас Джорж (IN) (53) 547.495.9.07 (088.8) (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОЕДИНЕНИЙ, ГУАНИДИНА ИЛИ ИХ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИ

СОВМЕСТИМЫХ СОЛЕЙ. (57) Способ получения соединений гуанидина общей формулы где Ph — незамещенный фенил илн фенил, замещенный С„ -Сц-алки" лом, С„-Сц-алкоксилом) га-, логеном, трифторметилом;

N,R„-R вместе пирролидоновое, пипераэиновое, пиперидиновое или морфолиновое кольцо, не замещенное или же эамещенное одним или двумя

С С алкилами) С1 С), ал коксикарбонилом, фенилом, или их фармакологически совместимых солей, отличающийся тем, что гуанидиновую соль общей структурной формулы где Х вЂ” остаток кислоты;

N, R„a R имеют укаэанные эначе- I ния) подвергают взаимодействию с соединением структурной формулы () где 7 — С, -С -алкокс ).

Ь))Ф в безводном,органическом растворите- 1Я пе при температуре от 20 С до темпе- фф ратуры кипения растворителя и полу- фф яенную соль в случае необходимости >, переводят в основание. Ж

)И)М

10 где Ph - незамещенный фенил или фенил, замещенный С„-Сц-алкилом, С -С вЂ” алкоксилом, галогеном, трифторметилом, N R„ R вместе — пирролидиновое пиперазиновоеэ пиперидиновое 15 или морфолиновое кольцо, не замещеннае или же замещенное одним или двумя С -С - алкилами, С -С -алкоксикарбонилом, фенилом, или их фармакологически совместимых солей.

Новые соединения указанной общей формулы и их фармакологически совместимые соли обладают ценными фармакологическими свойствами, в особенности гипогликемической активностью.

Снижение уровня сахара в крови не сопровождается гиперлактамией.Аналогичные действия обнаруживаются также в случае морских свинок, хомяков и обезьян. Фармакологические резуль30 таты исследований характеризуют новые соединения и их фармацевтически приемпемые соли так антидиабетические средства, которые могут применяться для перорального лечения гипергликемии в случае мпекопитаняцих в особенности Diabetes mellitus

Цель изобретения — изыскание новых соединений, обладающих улучшенными антидиабетическими свойствами.

Пример 1, Суспензию 8 г N-фе40 нил-1-пирр олидин-к ар бок симид-ами гидройодида в 30 мп ацетонитрила смешивают с 4 г 3,4,5,6,7,8-гексагидро-2метоксиаэоцина. Смесь нагревают на водяной бане при перемешивании в те45 чение 12 ч. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси этилацетата с ацетоном. Получают N-гексагидро-2 (1Н) -азоцинилиден-М-фенил-1-пирролидин-карбоксиимидамида-гидроиодид, который плавится при 242 С, выход

663 теорет.

Исходное вещество указанного синтеза получают следующим образом: сус- S5 пензию 15 r гидройодида N-фенил-Sметил-изотиомочевины в 50 мл ацетонитрила смешивают с 7 г пирролидина.

Изобретение относится к способу получения производных гуанидина структурной формулы

1222191 2

Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 15 ч. Ацетонитрил удаляют при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают иэ смеси изопропанола с этилацетатом. Получают. N-фенил-1-пирролидин-карбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 165 С.

Пример 2. Суспензию 6 г М"фенил-1-пиперидин-карбоксимидамид"гидройодида в 20 мп ацетонитрила смешивают с 3 г 3,4,5,6,7,8-гексагидро-2метоксиазоцина. Смесь кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 12 ч и интенсивно перемешивают. Ацетонитрил удаляют при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси иэопропанола с этилацетатом. Получают N-гексагидро-2(1Н)-азоцинилиден-N-фенилl-пиперидин-карбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 205 С выход 58 .

Исходное вещество получают следующим образом: суспензию 15 r гидройодида N-фенил-S-метил-изотиомочевины в 50 мп ацетонитрила смеши" вают с 8 г пиперидина. Смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 15 ч.. Ацетонитрил удаляют при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси изопропанола с этилацетатом. Получают N-фенил-1-пиперидин-карбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 135 C..

Пример 3, Суспензию 10 г

N-фенил-4-морфолин-карбоксиимидамидгидройодица в 15 мп ацетонитрила смешивают с 5,6 г 3,4,5,6,7,8-гексагидро-2-метоксиазоцина. Смесь нагревают в течение 12 ч при интенсивном перемешивании на водяной бане. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси ацетона с этилацетатом.

Получают N-гексагидро-2(lH)-азоцинилиден-Ы-фенил-4-морфолинкарбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 260 С, выход

65 .

Соответствующее основание и его соли получают следующим образом. суспензию 4 г N-гексагидро-2 (1Н)азоцинилиден-N-фенил-4-морфолинкарбоксимидамид-гидройодида в 50 мл хлористого метилена при перемешивании смешивают с 10 мл 10 -ного водного раствора гидроокиси натрия. Органический слой отделяют и выпаривают при пониженном давлении. Получают свободное основание, которое после перекристаллизации из смеси хлорис1222191 того метилена с гексаном плавится при 130 "С.

Тартрат. ,Раствор 3,1 г свободного основания в 30 мл ацетона смешивают с 2 r предварительно высушенной и очищенной a(-винной кислоты в ацетоне. Выпавший в осадок продукт проминают многократно диэтиловым эфиром и ацетоном. Остаток перекристаллизовывают из ацетона. Получают И-гексагидро-2(1Н)-азоцинилиден».К-фенил-4морфолин-карбоксимидамид-тартрат, т.пл. 105 С.

Сульфат.

Раствор 3 r свободного основания в 30 мл смеси хлористого метилена с ацетоном при перемешивании смешивают с 10 г серной кислоты в хлористом метилене. Продукт осаждается в виде кристаллов белого цвета.. После перекристаллизации из смеси изопропанола с ацетоном получают Я-гексагидро-2(1Н)-азоциннлиден-N-фенил-4морфолин-карбоксимидамид-сульфат, т.пл. 210 С. п-Толуолсульфонат.

Раствор 3,2 r свободного основания в 30 мп смеси хлористого метилена с ацетоном при перемешивании смешивают с 1,8 г п-толуолсульфокислоты. Продукт осаждается в виде бесцветных кристаллов. После перекристаллизации из изопропанола получают N-гексагидро-2(1Н)-азоцинилиден, N-фенил-4-морфолин-карбоксимипамидп-толуолсульфонат, т.пл. 198 С.

Гидрохлорид.

Раствор 4 г свободного основания в 40 мл изопропанола подкисляют соляной кислотой в изопропаноле. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси изопропанола с ацетоном. Получают И-гек агидро-2(1Н) азоцианилиден-И-фенил-4-морфолин-карбоксимидамид-гидрохлорид, т.пл.

210 С.

Иетансульфонат.

Раствор 1,6 г свободного основания в хлористом метилене смешивают с 0,5 г метансульфокислоты в хлористом метилене . Продукт осаждается в виде бесцветных кристаллов. После перекристаллизации из смеси метанолас ацетоном получают N-гексагидро-2 (1Н)-азоциннлиден-Н-фенил-4-морфолинкарбоксимидамид-метансульфонат,т,пл.

212 С.

Используемое в этом синтезе исходное вещество получается следующим образом. Суспецзию 29 г гидройодида

N-фенил-S-метил-изотиомочевины в

90 мл ацетонитрила смешивают с 11 г морфолина. Смесь перемешивают и кипятят в течение.15 ч с обратным холодильником. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перек ð ристаллизовывают из смеси хлористого метилена с этилацетатом.- Получают

1-(4-морфолинил)-N-фенил-карбоксимидамид-гидройодющ, т.пл. 182 С.

Пример 4. Суспензию 4 г 4, 1 N-дифеннлпиперидин-карбоксимидамидгидройодида в 15 мл ацетонитрила при перемешивании смешивают с 2 г 3,4, 5,6,7,8-гексагидро-2-метоксиазоцина. Смесь нагревают на водяной бане щ в течение 12 ч и интенсивно перемешивают. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси ацетона с этилацетатом. Получают. N-гекса-!

25 гидро-2 (1Н) -азоцинилиден-4., N -дифенил-пиперидинкарЬоксимщамид-гидройодид, т.пл. 228-230 С, выход 43 X.

В Исходное вещество этого синтеза

30 поуыт следу щим образом Суспензию 10 r гидройодида N-фенил-S-метил-иэотиомочевины в 30 мп ацетонитрила при перемешивании смешивают с

7 r 4-фенил-пиперющина. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 15 ч. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллйзовывают из смеси изопропанола с этилацетатом. Получают

4, N-дифенилпиперидин-карбоксимида40 мид гидройрдид, т,пл.-:.151 С.

Пример 5. Суспензию 3,5 r Nфенил-2,6-диметил-4-морфолин-карбок- симидамид-гидройодида в 10 мл ацето45 нитрила при перемешивании смешивают с 1,5 г 3,4,5,6,7,8-гексагидро-2метоксиазоцина. Смесь нагревают на водяной бане в течение 12 ч при интенсивном перемешивании. Ацетон выпа50 ривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают иэ смеси ацетона с этилацетатом. .×îëó÷àþò

N-гексагидро-2(1Í)-аэоцииилиден-0—

t фенил-2, 6-диме тыл-4-морфолы -карбок55 симидамнд-гидройодид, который после перекристаллиэации из смеси изопропанола с этилацетатом плавится при

235 С, выхсд 48 X.

1222191

1О

Исходное вещество этого синтеза получают следующим образом. Суспензию 15 г гидройодида N-фенил-S-метил-изотиомочевины в 50 мл ацетонитрила смешивают с 9 r 2,6-диметилморфолина. Смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 1 5 ч. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси хлористого метилена с этилацетатом.

Получают N-фенил-2,6-диметил-4-морфолинокарбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 208-210 С.

П р и м .е р 6. Суспензию 3 5 r

Ы. †(п-фторфенил)-4-морфолин-карбоксимндамид-гидройодида в 10 мл ацетонитрила при перемешивании смешивают с

2,5 r 3,4,5,6,7,8-гексагидро-2-метоксиазоцина и смесь нагревают на водяной бане в течение 12 ч и при ин тенсивномм перемешивании. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси изопропанола с ацетоном. Получают N-гексагидро-2-(1Í)-азоцинилиГ ден-И вЂ” (п-фторфенил) -4-морфолин-карбоксимид амид-гидр ойодид, т. пл. 245 С, выход 59 ..

Используемое в этом синтезе исходное вещество получают следующим образом. Суспензию 7,5 г гидрохлорида N-(п-фторфеннл)-S-метилизотиомочевины в 30 мп ацетонитрила смешивают с 3 r морфолина. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 15 ч при перемешивании. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси ацетона с этилацетатом. Получают

N-(п-фторфенил)-4-морфолин-карбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 210 С.

Пример 7, Суспензию 2,5 г

N-(м-трифторметилфенил)-4-морфолинкарбоксимидамид-гидройодида в 15 мл ацетонитрила при перемешивании смешивают с 1,5 г 3,4,5,6,7,8-гексагидро2-метоксиазоцина. Смесь перемешивают на водяной бане и в течение 12 ч кипятят с обратным холодильником.

Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси диэтилового эфира с этилацетатом. Получают N-гексагидро-2(1Н)-азоцинилиден-N †(м-трифторметилфенил)-4-морфолин-карбоксимидамид-гидройодид, который превращают в свободное основание и затем в п-то20

55 луолсульфонат. После перекристаплизации из ацетона продукт плавится при

202 С, выход 58 .

Исходное вещество этого синтеза получают следующим образом. Раствор

11 r N-(м-трифторметилфенил)-тиомочевины в 30 мп диоксана смешивают с

8 г йодистого метила в 20 мл диоксана. Реакционную смесь нагревают на водяной бане в течение 3 ч. Диоксан выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси изопропанола с этилацетатом.

Получают гидройодид N-(м-трифторметилфенил)-S-метил-изотиомочевины, т.пл. 220 С.

Суспензию 9 г гидройодида N-(итрифторметилфенил)-S-метилизотиомочевины в 30 мл ацетонитрила смешивают с.3 г морфолина.

Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 15 ч. Ацетоиитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси ацетона с этилацетатом. Получают (м-трифторметилфенил)-4-морфолинкарбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 220 С.

Пример 8. Суспензию 3,5 г

N-п-толил-4-морфолин-карбоксимидамидгидройодида в 15 мл ацетонитрила при перемешивании смешивают с 2 r 3,4,5, 6,7,8,-гексагидро-2-метоксиазоцина.

Смесь нагревают на водяной бане в течение 12 ч при интенсивном перемешивании. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси ацетона с этилацетатом. Получают N-гексагидро-2(1Н)-азоцинилиден-N -п-толил4-морфолин-карбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 240 С, выход 54 .

Исходное вещество указанного синтеза получают следующим образом. Суспензию гидройодида N-п-толил-S-метилизотиомочевины в 30 мл ацетонитрила смешивают с 3,5 r морфолина. Смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 15 ч.

Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси изопропанола с этилацетатом. Получают N-п-толил-4морфолин-карбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 218-220 С, Пример 9 СУспензию 3 г Nфенил-1-(4-карбоэтоксипиперазин)-карбоксимидамидгидрохлорида в 200 мл ацетонитрила смешивают с 2,8 г 1-аза1222191

2-метокси-1-циклооктена и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток порошкуют с этилацетатом. Получают в виде бесцветного твердого продукта

N - гексагидро-2(1Н)-азоцинилиден-N — фенил-1-(4-карбэтоксипиперазин)-карпосле перекристаллизации из ацетонитрила плавится при 248-249 С, выход

64 X.

Исходное вещество указанного синтеза получают следующим образом.

Раствор 8,7 г гидройодида S-.метилфенилизотиомочевины в 30 мп изопропанола смешивают с 9,6 г N-карбэтоксипиперазина в 15 мл изопропанола и раствор кипятят с обратным холодильником в течение 18 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток промывают петролейным эфиром. Получают N-фенил-1-(4карбэтокси-пиперазин)-карбоксимидамнд-гидройодид, который после перекристаллизации из смеси изопропанола с этилацетатом плавится при 2182!9 С.

Указанный продукт обрабатывают

30 насыщенным водным раствором карбоната калия и смесь экстрагируют хлористым метиленом. Экстракт сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Полученный остаток

35 обрабатывают хлористым водородом в изопропаноле. Получают Н-фенил-1(4-карбэтоксипиперазин)-карбоксимндамид- гидрохлорид, который после

40 перекристаллизации из смеси метанола с этилацетатом плавится при 251-251С.

Пример 10. Смесь 2,2 г И(п-метоксифенил)-l-(4-карбэтокси-пи45 перазин)-карбоксимидамид-гидройодида и 1,4 г 3,4,5,6,7,8-гексагидро-2метоксиазоцина растворяют в 7 мл ацетонитрила и раствор кипятят с обратным холодильником в течение 10 ч.

Прозрачный раствор охлаждают и отфильтровывают полученный осадок. Получают N-гексагидро-2(lH)-азоцинилиден-N -(п-метоксифенил)-1-(4-карб-! этокси-пиперазин) -карбоксимидамндгидройодид, который после перекрис55 таллизации из смеси ацетонитрила с этилацетатом плавится при 241-242 С, выход 52 X.

Исходное вещество для укаэанного продукта получают следующим образом.

Смесь 10 r п-анизидин-гидрохлори5 да и 12,25 r тиоцианата калия в 100 мп этанола нагревают в течение 16 ч.

Реакционную смесь охлаждают и фильтруют. Остаток промывают водой и пе" рекристаллизовывают иэ метанола. Побоксимидамид-гидрохлорид, который 10 лучают твердый, плавящийся при 226 С продукт, который состоит иэ п"метоксифенилтиомочевины. 5,8 г указанного последним соединения нагревают с

10 мп йодистого метила в 20 мл ацетона в течение 8 ч при 50 С. Реакционную смесь охлаждают, осадок отфильтровывают и промывают ацетоном. Получают гидройодид S-метил-М-(метоксифенил)-изотиомочевины, т.пл.165-166 С.

Смесь 6,4 г гидройодида S-метил-N(и-метоксифенил)-изотиомочевины и

6,2 г Н-карбэтокси-пиперазина в 50 мп ацетона, кипятят с обратным холодильником в течение 10 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и к остатку добавляют этилацетат. Получают N-(п-метоксифенил)-i-(4-карбэтокси-пиперазин)-карбоксимидамидгидройодид, который после перекристаллизации из ацетонитрила плавится при

156-157 С.

Пример 11. А. Раствор 2,4 r

N-фенил-1-(4-метил-пиперазин)-карбоксимидамид-гидройодида в 6 мп ацетонитрила при перемешивании смешивают с 2,3 r 3,4,5,6,7,8-гексагидро2-метоксиазоцина и кипятят с обратным холодильником в течение )2 ч.

Реакционную смесь охлаждают и разбавляют 10 мл этилацетата. Образуется аморфный твердый продукт, который после добавления ацетона становится кристаллическим. Получают Nгексагидро-2(1Н)-азоцинилиден-Nфенил-1 †(4-метил-пиперазин)-карбоксимидамид-гидройодид, который после перекристаллизации из ацетонитрила плавится при 222-223 С, выход 57 X.

Б. Используемое дпя синтеза указанного продукта исходное вещество получают следующим образом.

Смесь 10 r гидройодида S-метилфенилизотиомочевины с 7,6-метилпиперазина растворяют в 50 мл изопропанола и раствор кипятят с обратным холодильником в течение 10 ч. Раст.воритель выпаривают при пониженном давлении. Обрабатывают остаток петролейным эфиром. Получают 1-(4-ме10

12221

10 тилпиперазин) -фенил-карбоксимидамид- . гидройодид, который после перекристаллизации из смеси ацетонитрила с этилацетатом плавится при 231-232 С.

В. Как описано в примере 11А, при применении N-фенил-4-морфолинкарбоксимидамид-гидройодида и 1-метил-гексагидро-2-метоксиазоцина получают

N †(1-метил-гексагидро-2(1Н)-азоцинилиден)-И-фенил-4-морфолин-карбоксимидамид-гидройодид с т.пл. 198 С.

Пример 12., Суспензию 8 r

N-фенил-1-пирролидин-карбоксимидамидгидройодида в 30 мл ацетонитрила смешивают с 4 r 3,4,5,6,7,8-гексагидро-2-метоксиазоцина. Смесь при

20 С интенсивно перемешивают в течение 48 ч. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток пере- кри" таллизовывают из смеси этилацетата- с ацетоном. Получают N-гексагидро-2 (1H) -азоцинилиден-N -фенил-1пирролидин-карбоксимидамид-гидройодид, т.пл. 242 С.

Пример 13. Суспензию 10 г

N-фенил-4-морфолин-карбоксимидамидгидройодида в 15 мл ацетонитрила смешивают с 5,6 г 3,4,5,6,7,8-гексагидро-2-метоксиазоцина. Смесь нагревают в течение 24 ч при интенсивном перемешивании на водяной бане при 40 С. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из смеси ацетона ,с этилацетатом. Получают N-гексагидI ро-2 (1Н) -азоцинилиден-N -фенил-4морфолинкар боксимид амид-гидр ойодид, т. пл. 260 С, Для доказательства положительного эффекта приведено сравнение некоторых данных соединений с известным соединением N-(1-метил-2-пирролидинилиден)-N -фенил-1-пирролидин-карбоксимидамидом — соединением аналогичного действия. Сравнительные опыты доказывают, что данные соединения (1-1У) приводят к более сильному процентному понижению содержания сахара в крови при дозе 200 мг/кг, чем .известное соединение (У).

Испытывают гипогликемическое деиствие следующих соединений на крысах с диабетом, вызванным стрептозотоцином:1. N-Гексагидро-2 (1Н) -азоцинилиден-N -фенил-1-пиперид н-карбоксимиI

91 дамид — гидройодид (согласно примеvv 2)

11. N-Гексагидро-2(1Н)-азоцинилиден-N -фенил-4-морфолин-карбоксимида1 мид-гидройодид (согласно примеру 3) .

11 1.N - (1-Метил-гексагидро-2 (1Н)азоцинилиден-N -фенил-4-морфолин-карбоксимидамид-гидройодид (согласно примеру 11а) .

1У, N-Гексагидро-2 (1Н) -азоцинили ден-N -р-толуол-4-морфолин-ка.рбоксиI мидамид-гидройодид (согласно примеру 8) .

У. N-(1-метил-2-пирролидинилиден)N — фенил — 1 — пирролидин — карбокси-! мидамид.

Стреп тозотоцин впрыскивают крысамсамцам штамма Чарльса Фостера с весом тела приблизительно 180-200 г в дозе 50 мг/кг. Впрыскивание приводит к метаболизму, сходному с диабетом, который характеризуется: высоким уровнем сахара в крови (350-500 мл7 по сравнению с 100-115 нормально); высоким выделением глюкозы в моче (приблизительно на 100 мл/сут); от сутствием кетоновых тел в моче (кетостикс); почти нормальным содержанием плазмаинсулина; значительно пониженным содержанием инсулина в поджелудочной железе (приблизи.тельно 2 содержания контрольных животных).

Следовательно, обработанные с стрептоэотоцином подопытные животные производят еще достаточный для жизнедеятельности инсулин, но не обладают резервным инсулином в поджелудочной железе, который мог бы освобождаться при нагрузке. В течение 4-6 нед.после впрыскивания стрептозотоцина этих крыс используют несколько раз, однако не более одного раза в день и пять раз в неделю для определения гипогликемического воздействия испытуемых веществ. Испытуемые вещества вводят орально в виде раствора йли суспензии в 0,2Х-ном агаровом растворе. Крысам контрольной группы дают орально только 0,2Х-ный агаровый раствор. Использованная для опыта группа животных и группа контрольных животных состоит из 8 крыс.

Кровь берут из ретроорбитального венозного сплетения под легким наркозом. Ввиду повторного .использования диабетических животных эти запоры

1222191

200

200

200

tO

1У

200

У . 200 22

Составитель Н.Гозалова

Редактор О. Колесникова Техред i Г. Гербер Корректор А.Фереущ„

Заказ 1623/61 Тираж 379 Нодписное

ВНИИ11И Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал.ППП "Патент", г ° Ужгород, уа.Ïðîåêòíàÿ, 4 крови ограничивают двумя в день: непосредственно перед вводом испытуемых веществ (для определения исходного уровня сахара в крови) и через

3 ч после ввода (для определения активности испытуемого вещества).Между двумя запорами крови животных не кормят. Уровень сахара в крови определяют в автоанализаторе по феррицианидному методу, а перед этим кровь депротеинизируют с 39об 3 -ной трихлоруксусной кислоты.

В таблице приведено понижение содержания сахара в крови по сравнению с контрольными животными, которые не получили испытуемого вещества.

При дозе 200 мг/кг соединения

1-1У показывают более сильное понижение содержания сахара в крови,чем известное соединение У.