Способ постановки реакции пассивной гемагглютинации

 

Изобретение относится к микробиологии , иммунологии, предназначено для оценки титров иммунных сьгеороток. Цель изобретения - повышение чувствительности реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), в частности при падении титров иммунных сывороток при превышении срока хранения препаратов. Проводят параллельные постановки РПГА с 6 сальмонеллезными диагностикумами, инкубируя эритроцитарный диагностикум, сенсибилизированный бактериальными антигенами с иммунными сыворотками в изотоническом растворе хлорида натрия. В изотонический раствор добавляют полиэтиленгликоль 6000 до конечной концентрации 1,5%. Учет результатов реакции проводят через 2-2,5 ч инкубации. Титром реакции считают наибольшее разведение иммунной сьторотки, при котором наблюдается полная агглютинадия зритроцитов. i (Л С

СО}03 СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

А1 (192 (112 (512 4 А 6) К 39/02

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

f10 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

К A BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3924477/28-14 (22) 03.07.85 (46) 30.03.87. Вюл. В 12 (71) Азербайджанский чаучно-исследо- . вательский институт вирусологии, микробиологии и гигиены им. Г.N.Ìóñàáåкова (72) В.10.Ахундов, Н.А.Лялякин, Л.N,Ëópüå и Р.К.Таги-Заде (53) 6}5.373(088.8) (56) Наставление по применению диагностикумов сальмонеллезных 0-эритроцитарных, жидких и сухих:. Выписка из

ТУ 42.)4.119-77. (54) C11OCOS ПОСТАНОВКИ PEAKqm niCСИВНОИ ГЕИАГГЛ1(1ТИНА11ИИ (57) Изобретение относится к микробиологии, иммунологии, предназначено для оценки титров иммунных сывороток.

Цель изобретения — повышение чувствительности реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), в частности при падении титров иммунных сывороток при превышении срока хранения препаратов.

Проводят параллельные постановки

РПГА с 6 сальмонеллезными диагностикумами, ннкубируя эритроцнтарный диагностикум, сенсибилизированный бактериальными антигенами с иммунными сыворотками в изотоническом растворе хлорида натрия. В изотонический раствор добавляют полнэтиленгликоль 6000 до конечной концентрации

1,5Х. Учет результатов реакции проводят через 2-2,5 ч инкубацни. Титром реакции считают наибольшее разведение иммунной сыворотки, при котором наблюдается -полная агглютинация эритроцитов.! 1299585 2

Изобретение относится к микробио- Повышение чувств логии и иммунологии и может быть ис- в!7разивг!ееся в увел пользовано в оценке титров иммунных следованных cbIBopoT сывороток. для диагностикума с

Целью изобретения является повьш!е- 5 геном К2138 от 4 ра ние чувствительности реакции пассив- групп С, и А до 16 ной гемагглютинации (РПГА), в част- группы F,); для диаг ности при падении титров иммунных сы- геном К от 2 раз Э вороток вследствие хранения препара- групп Е, С„, С )о до тов свыше установленного срока, 10 сыворотки группы А) Пример 1. Проводилась парал- ма с антигеном гру лельная постановка РПГА с шестью саль- ля иагностик ма с

Таким образом, при постановке ормула изобретения монеллезными диагностикумами известным и предлагаемым способами, Реакцию проводили микрометодом с использованием микротитратора Такачи при

37 С, Использовали сальмонеллезные эритроцитарные диагностикумы со следую щими антигенами: комплексный К2138; комплексный К; группы С вЂ” 6,8 К 1783; группы А — 1,9,12 К 1892; группы Е

К 1853; группы Д вЂ” К 1854, Реакцию ставили через год после истечения срока хранения эритроцитарных диагностикумов. Диагностикумы хранили о при 4 С, согласно инструкции, В РПГЛ также использовали стандартные иммунные сыворотки групп Д, С $ 9 Ся р А (рабочий титр 1: 6400), А (рабочий титр 1:3200) и Е.

В известном способе сыворотки развОДили 0„85%-нь7м (0,15 М) рас 7вор051 хлорида натрия рН 7,2-7,4.

В предлагаемом способе сыворотки разводят 0,85%-ным (0,15 И) раствором хлорида натрия, в которои вводят полиэтиленгликоль 6000 мМ до концентрации — 2% (2 г полиэтиленгликоля разводят 0,85%-ным хлоридом натрия 7л доводят объем до 100 мл). Окончательная концентрация полиэтиленгликоля в системе после внесения диагностикума составила 1,5%.

Постановку реакции осуществляли сигласно наставленив по использованию диагностикумов.

Учет результатов реакции проводят после 2,0-2,5 ч инкубации в термостао те (37 С) Общепринятым методом.

Повышение титров реакции при введении полиэтиленгликоля в конечной концентрации 1,5% наблюдали со всем7л указанными антигенами. Титром реакции считали наибольшее разведение иммунной сыворотки, при котором еще наблюдалась полная агглютинация эритроцитов. ительности РПГА, ичении титров исок, составило: комплексным антиз Здля сывороток (для сыворотки ностикума с антидля (дЛя сывороток

8 раз Эдля (для для диагностикуппы С вЂ” в 5 раз„ д д у антигеном группы

А — в 3-5 раз; для диагностикума с антигеном группы Š— в 2 раза, для диагностикума с антигеном группы Д— в 16 раз.

Пример 2, Реакции проводят, как описано в .примере 1, но сыворотки разводили 0,85%-ным раствором хлорида натрия с введением полиэтиленгликоля 6000 мМ до концентрации 1% (окончательная 7(7гцентрация полиэтиленгликоля в системе 0,75%) . Введение полиэтиленгликоля в конечной концентрации 0,75% практически не изменяет титра реакции.

Пример 3, Реакцию проводят, как описано вьш!е, но сыворотки разводили 0,85%-ньпл раствором хлорида натрия с введением пол!7этиг!енгликоль

6000 до концентрации 3% (окончательная концентрация полиэтиленгликоля в системе 2,5%). Увеличение концентрации полиэтиленгликоля в системе к дальнейшему повышению титров реакции не привело, однако при этом наблюдалось спонтанная агглвтипация контрольных образцов.

Положительные результаты с сыворотками других групп (антиген группы

Л 1, 2, 12 К 189?) с сывороткой группы Д связаны с наличием общих рецепторов 1,12 в группе A и 1,12 в группе Д.

РПГА с иммунными сальмрнеллезными сыворотками в присутствии 1,5 ПЭГ

6000 приводит к првышен77в чувствительности способа в 2-16 раз. Кроме того, этот прием позволяет использовать для анализа ко7лмерческие сыворотки со сроком хранения cBb7777e установленного времени.

Способ постановки реакции пассивной гемагглвтинации путем инкубации эритроцитарного диагностикума, сенсиСоставитель Л. Подюков

Редактор М, Циткина Техред В.Кравчук Корректор Л. Патай

Заказ 957/3

Тираж 596 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5.Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 !299585 4 билиэированного бактериальными анти- целью повышения чувствительности спогенами с иммунными сыворотками в изо- соба, в изстонический раствор добавтоническ м растворе хлорида натрия, ляит полиэтиленгликоль 6000 до конечо т л и ч а м шийся тем, что, с ной концентрации 1,57. °