5-йод-1-карбокси-2-фениллаурат,меченный радиоизотопами йода, в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности эстеразы в организме и промежуточный продукт для его получения

 

Изобретение касается арилпроизводных лауриновой кислоты, в частности 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата меченного радиоизотопами йода (I), который может быть использован в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности эстеразы в организме, и 5-йод-1-карбокси-2-фениллаурата (II), являющегося промежуточным продуктом для получения I. Для выявления соединений, обеспечивающих точность определения ферментативной активности эстеразы, а также для выявления соединений, позволяющих получить I с высоким выходом , получены новые I и II. Синтез II осуществляют взаимодействием 5- -йодсалициловой кислоты с лауроилхлоридом при 50-60 с в среде бензола в.присутствии пиридина. I получают радиоизотопным обменом радиойодида натрия с II. Получают I с радиохимической чистотой 97-98%, что дает возможность проводить с повышенной точностью оценку активности .эстеразы (различия в накоплении в моче между здоровыми людьми и больными с выраженной патологией поджелудочной железы при использовании I составляют 1,75 раз против 1,25-1,5 раза с использованием дилаурата флуоресцеина). 2 с.п. ф-лы, 2 табл. оо о со ел со

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н A ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

,ч

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

Г)О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3829698/23-04 (22) 25.12 ° 84 (46) 15.04.87. Бюл. И 14 (72) И.Н. Кендьпп, В.А. Братцев и А.И. Климова (53) 547.295.72(088.8) (56) Pointer Н. Neuere Methoden dev

Pankreasfunktionsdiagnostik. — Ned.

Lab, 1981, 34, 1(- 2, р. 40-45.

Bruhn Н.D. — Diagnostik, 1982, v. 15, )1 9, р. 212-213. (54) 5-ИОД- 1-КАРБОКСИ-2-ФЕНИЛЛАУРАТ, МЕЧЕННЫЙ РАДИОИЗОТОПАМИ ИОДА, В КАЧЕСТВЕ РАДИОАКТИВНОГО СРЕДСТВА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ

ЭСТЕРАЗЫ В ОРГАНИЗМЕ И ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ

ПРОДУКТ ДЛЯ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ (57) Изобретение касается арилпроизводных лауриновой кислоты, в частности 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата, меченного радиоизотопами йода (I), который может быть использован в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности (Я) 4 С 07 С 69/017, А 61 К 49/02, эстеразы в организме, и 5-йод-1-карбокси-2-фениллаурата (II), являющегося промежуточным продуктом для получения I. Для выявления соединений, обеспечивающих точность определения ферментативной активности эстеразы, а также для выявления соединений, позволяющих получить I с высоким выхо дом, получены новые Е и II. Синтез

II осуществляют взаимодействием 5-йодсалициловой кислоты с лауроилхлоридом при 50-60 С в среде бензола в,присутствии пиридина. I получают радиоизотопным обменом радиойодида натрия с II ° Получают I с радиохимической чистотой 97-98%, что дает возможность проводить с повышенной точностью оценку активности,эстеразы (различия в накоплении в моче между здоровыми людьми и больными с выраженной патологией поджелудочной железы при использовании I составляют

1,75 раз против 1,25-1,5 раза с использованием дилаурата флуоресцеина).

2 с.п. ф-лы, 2 табл.

1 13035

Изобретение относится к органичес- кой химии, конкретно к новым химическим соединениям — 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурату, меченному радиоизотопами иода, формулы I . 5

С00Н

О ceo(cz,1, сн (р и промежуточному продукту для его получения S-иод-1-карбокси-2-фениллаурату формулы II

СООИ.

О О ОМ7 10сн3 (11)

t5

Меченое соединение может найти применение как средство определения ферментативной активности эстеразы в организме, что дает возможность исследовать нарушения способности поджелу- 20 дочной железы секретировать эстеразу.

Цель изобретения — выявление соединений, обладающих повышенной точностью при определении ферментативной активности эстеразы в организме, 25 а также выявление соединений, позволяющих получить соединение формулы I

С ВЫСОКИМ ВЫХОДОМ в

Получение промежуточного продукта

5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата фор- 30 мулы II проводят по известной реакции ацилирования фенолов хлорангидридами кислот, взаимодействием 5-иодсалициловой кислоты с лауроилхлоридом в бензольном растворе в присутствии пиридина с последующим нагреванием реакционной смеси при 50-60 С в течение 4 ч, подкислением и выделением в

5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата.

Меченный радиоизотопами иода целе- щ вой продукт получают реакцией изотопного обмена радиоиодида натрия с

5-иод-1-карбокси-2-фениллауратом в этиловом спирте в присутствии одновалентной меди. 45

Поскольку эстераза вырабатывается поджелудочной железой, 5-иод-1-карбоксп-2-фениллаурат, меченный радиоизотопами иода, может. быть использован для исследования внешнесекреторной функции поджелудочной железы как в физиологических, так и патологических условиях.

Применение 5-иод- 1-карбокси-2-фениллаурата, меченного радиоизотопами иода, значительно упрощает методику и уменьшает время исследования, а также позволяет проводить прижизненные динамические исследования с

97 2 помощью наружной регистрации гаммаизлучения радиоизотопов иода стандартной аппаратурой, применяемой в медицине и биологии. Методика исследования заключается в сравнительном измерении радиоактивности в моче и в эталоне и может быть выполнена с помощью простейшего радиометрического прибора. Кроме того, предлагаемое соединение может найти применение в исследованиях на человеке, так как оно содержит радиоизотопы иода, разрешенные к использованию в практической медицине.

Пример 1. 5-иод-1-карбокси-2

-фениллаурат.

К раствору 15,8 г (0,06 моль) 5-иодсалициловой кислоты в 100 мл сухого бензола и 10 мл свежеперегнанного пиридина прибавляют при комнатной температуре раствор 22 г (0,1 моль) лауроилхлорида в 30 мл бензола, затем нагревают реакционную смесь при перемешивании 50-60 С в течение 3 ч.

После охлаждения выливают в ледяную воду (250 мл), подкисляют уксусной кислотой (50 мл) и все трижды экстрагируют эфиром. Эфир испаряют и продукт перекристаллизовывают из гексана.

Выход 17,6 г (66 от теор.) С, Н,10„.

Найдено, : С 51,03, Н 6,10, 3 28,36.

Вычислено, С 51,12, Н 6,05, J 28,48.

Пример 2. 5-иод-1-карбоксы-2-фениллаурат, меченный радиоизотопами иода.

В колбу объемом 10 мл помещают 50м

5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата, 3 мл этилового опирта и 2 мг свежеприготовленной однохлористой меди. Колбу устанавливают в тяжелый защитный "шкаф, прибавляют 0,2 мл раствора иодида натрия-иод-125 (или -иод-131) без носителя общей активностью 50 МКи, снаб жают обратным холодильником и нагревают на водяной бане 4 ч при 90 С, оставляют на ночь. На следующий день фильтруют, спирт упаривают, осадок обрабатывают 5 мл горячего гексана, отфильтровывают, гексан упаривают, выпавший целевой продукт растворяют в подсолнечном масле до требуемой радиоактивной концентрации.

Идентификацию меченного радиоизо-топами, иода целевого продукта и определение его радиохимической чистоты проводили методом бумажной хроматографии в системе бутанол: 20 -ный аммиак : вода 45:1 5.

97 4 этих условий, время анализа — несколько минут. Простота, доступность и точность при применении этого соединения и отсутствие противопоказаний делают возможным массовые скрининговые исследования, что и составляет его основное преимущество.

Различия в накоплении в моче дилаурата флуоресцеина между здоровыми людьми и больными с выраженной патологией поджелудочной железы не превышают фактора 1,25-1,5, Через

3 ч после введения крысам с аналогичной по степени выраженности патологией поджелудочной железы предлагаемого соединения разница между контролем и опытом составляет 1,75 раза.

Таким образом, предлагаемое соединение в диагностическом отношении эффективнее известного соединения °

Формула и з обре т е н и я

1. 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурат, меченный радиоизотопами иода, формулы I

СООН

0 OCO(CHg)рСН (О в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности эстеразы в организме.

2. 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурат формулы II

ООН ос о(сн „сц, Сц в качестве промежуточного продукта для получения 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата, меченного радиоизотопами иода.

Таблица выход и радиохимическая урата, меченного радиоУсловия получения, радиохимический чистота 5-иод-1-карбокси-2-фенилла изотопами иода

Радиохимический Радиохимическая выход, % чистота,7.

Ката- Изо- Активсловия реакции

С Время, ч лиза- топ тор иода ность, мКи

CuCI J 30

СиС1 J 50

85

98

80

3 13035

Пример 3. С целью уменьше— ния выделения эстеразы из поджелудочной железы в кишечник у крыс оперативным путем перевязывают протоки поджелудочной железы. Контролем служат интактные (нормальные) крысы.Крысам обеих групп внутрижелудочно вводят 5-иод-1-карбокси-2-фенил-2-лаурат, меченный иодом-131, в 0,2 мл растительного масла и в дозе 10 мкКи 10 по радиоактивности, животных забивают через 1-24 ч, отбирают пробы мочи и органов и радиометрируют их сравнительно с эталоном, содержащим равное введенному количество радиоактив" 15 ности.

Экспериментально вызванная недостаточность поджелудочной железы обусловливает понижение накопления метки в моче в период 1-6 ч вследствие

0 уменьшения поступления эстеразы в кишечник и расщепления меченого соединения. Об этом же говорит увеличение выделения метки с калом при данной экспериментальной патологии — 6,60+

0,30% при операции против 2,65+0,20% в контроле за 24 ч, При изучении острой токсичности

5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата установлено, что при внутрижелудочном З0 введении мышам максимально возможная доза (400 мг/кг) не вызывает признаков токсичности и гибели животных.

Эта доза в 10000 раз превышает потенциальную клиническую дозу.

Определение активности эстеразы с помощью перорально вводимого дилаурата флуоресцеина требует специальной биохимической обработки мочи, подчас трудно выполнимой, для ур измерения флуоресценции — сложной аппаратуры, анализ занимает несколько часов. Преимущества предлагаемого .меченого соединения перед прототипом состоят в том, что оно не требует

1303597

5 6

Т а б л и ц а 2

Динамика радиоактивности в моче и щитовидной железе после введения

5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата, меченного иддом-131. Средние величины из 8 крыс на точку.

Радиоактивность, от введения

Время после введения вещества, ч

Опыт (операция) Контроль

Щитовидная железа

Моча

Моча

Щитовидная железа

0,20+0,02

1, 15+0, 10

1, i 0+0, 10

1, 15+0, 12

1, 50+0, 17

15,00+1,20 2,10 0,10

41, 38+3, 50 2, 40+ О, 22

Составитель А. Евстигнеев

Техред Л. Олейник Корректор А. Ильин

Редактор В. Ковтун

Заказ 1277/28 Тираж 372

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

2,50+0,20

4,75+0,40

6,50+0,60

7, 15+0, 72

10,60+1, 05

1, 70+0, 10

3, 15+0,30

3, 70+0,40

4,85+0, 45

6,92+0,50

14, 50+1, 60

47, 00+4, 50

О, 15+0,02

0,85 0,09

1,00+0 10

1, 00+0, 10

1, 00+-О, 10

2, 00+0, 20

2, 25+0, 10