Способ определения дифференцирующихся клеток на препарате

 

Изобретение относится к медицине , точнее к гистологии. Цель изобретения - уменьшение травматичности способа путем помещения гистологических срезов в 5%-ный раствор азотнокислого серебра, обработки клеток трилоном В с последующей реакцией с сывороткой крови и определением потенции к дифференцировке клеток по степени адсорбции соединений кальция из сыворотки крови ядрами клеток. Дифференцирующиеся клетки определяют по содержанию гранул серебра в клетках . 00 о СЛ ел СЛ 35

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (19) (И) (51)4 G 01 N 1 28

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (2l ) 3 83186/28-!4 (22) 18.04.83 (46) 23.04.87. Бюл. Ф 15 (7!) Киевский научно-исследовательский институт туберкулеза и грудной хирургии им. Ф.Г.Яновского (72) E.È.Ñóñëîâ (53) 616-0.88.8(088.8) (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИФФЕРЕНЦИРУЮЩИХСЯ КЛЕТОК НА ПРЕПАРАТЕ (57) Изобретение относится к медицине, точнее к гистологии. Цель изобретения — уменьшение травматичности способа путем помещения гистологических срезов в 57-ный раствор азотнокислого серебра, обработки клеток трилоном Б с последующей реакцией с сывороткой крови и определением потенции к дифференцировке клеток по степени адсорбции соединений кальция из сыворотки крови ядрами клеток.

Дифференцирующиеся клетки определяют по содержанию гранул серебра в клетках.

1305556

Составитель Л. Соловьев

Редактор А, Козориз Техред Н.Глущенко . Корректор A. Зимокоспв

Закаэ 14?l/40 тираж 777 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, 11(-35, Раушская наб,, д. 4/5

Лроизводственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологии.

Цель изобретения — уменьшение травматичности способа путем обработки клетки трилоном Б с последующим 5 воздействием сывороткой крови и опре. деления потенции к дифференциройке > по степени адсорбции соединений кальция из сыворотки крови ядрами клеток, Пример. Ткань опухоли у боль- 10 ного К. подвергают исследованию с целью диагностики заболевания. Для этого берут ткань во время оперативного вмешательства, фиксируют в

12 -ном формалине в течение 24 ч, t5 удаляют остатки формалина с их поверхности многократным погружением в дистиллированную воду. Затем погружают и 12 .-ный раствор трилона Б на

24-48 ч при рН 7,2-7,4, после этого повторно промывают дистиллированной водой. Затем ткани обрабатывают в спиртах восходящей концентрации, :

70, 80, 90, 96, 100, причем в каждом из спиртовых растворов выдерживают

25 по 2 ч. После этого ткань погружают в хлороформ с выдержкой 30 мин, а затем обрабатывают смесь хлороформа и парафина в соотношении 1:1 в течение

30 мин и заключают в расплавленный 0 парафий при 56-60 С с йоследующим

О

t охлаждением до 20 С. Изготовляют гистологические срезы, которые укрепляют на предметных стеклах, депарафинируйт s ксилоле и спирте по общеприня- 35 тым методам. На срезы наливают сыворотку, после этого предметные стекла со срезами помещают в чашки Петри, содержащие на дне фильтровальную бумагу, смоченную дистиллированной во- 40 дой. Гистологические срезы инкубируют с сывороткой в течение 22-24 ч о при 37 С, после этого их промывают дистиллированной Водой и погружают в раствор азотно-кислого серебра (5%-ный раствор) на ярком свету на

1,5 — 2 ч до почернения. Затем срезы вновь промывают дистиллированной водой, обрабатывают спиртом, ксилолом, заключают в канадский бальзам и просматривают в световом микроскопе. Результаты оценива от по отложению гранул серебра, которые избирательно откладываются в местах локализации кальция в ядрах клеток. Клетки, содержащие ядра с интенсивными отложениями гранул серебра, обладают высокими потенциями к дифференцировке.

Для объективной оценки подсчитывают количество клеток, содержащих гранулы серебра на 100 однотипных клеток.

Исследование позволило установить, что потенции клеток опухолевой ткани весьма снижены, только 1,5 клеток в опухолевой тки «и обладают потенцией к дифференцировке, при этом установлен диагноз злокачественной опухол и — с ар комы, Формула изобретения

Способ определения дифференцирующихся клеток на препарате путем фиксации ткани, приготовления срезов и исследования клеток, о т л и ч а ю-

vr, и и с я тем, что, с целью уменьшения травматичности способа, ткань перед фиксацией обрабатывают 12%-ным раствором трилона при рН 7,2-7,4 в течение 24-48 ч, далее срезы инкубируют с сывороткой крови при 37 С в течение 22-24 ч после чего срезы поЭ мещают в 5 -ный раствор азотно-кислого серебра, а дифференцирующиеся клетки определяют по содержанию гранул серебра в клетках.