Способ получения пептидов

 

Изобретение касается пептидов (ПТ), в частности соединений общей формулы H-Tyr-D-Ala-Phe-BrC-W, где B-Giy, Sar, Phe; C-Tyr, D-TyrJ Leu, Met, Met(O), Pro, Ser, Tyr(Bzl)-Pro, Tyr-Pro, Tyr-Ser, Pro-Ser, Tyr-Pro- Ser, Tyr(Bzl)-Pro-Ser, Tyr-Hyp-Ser, Tyr-Hyp-Ser(Bzl), Tyr(Bzl)-Val-Ser, Tyr-Gly-Ser, Phe-Hyp-Ser, Tyr-Pro- Ser, Phe-Pro-Ser, Phe-Hyp-Ser(Bzl), Gly-Pro-Ser, Tyr-Pro-Gly, Tyr(Bzl)- Pro-Ser(Bzl), Tyr-Pro-Ser(Bzl); W-OH, OCH,, NHj, NHR, , NH-NH, Ш- NHRj, где R, - GH,, C,H, ,, адамантил; R - бензилоксикарбонил или фенил, которые обладают анальгетической активностью и могут быть использованы в медицине. Цель - создание новых более активных пептидов. Получение ПТ ведут по следующей схеме: Вос-В-ОН + H.jN-NHZ- -(K)- Boc-B- -NH-NHZ - (ОТЩ)-H-B-NH-NHZ + Boc-Phe-OH- (К) -Boc-Phe-B-NH-NHZ- (ОТЩ)- H-Phe-B-NH-NHZ + Boc-D-Ala- ОН- (К) -Boc-D-Ala-Phe-B-NH-NHZ- - XOTDl)-H-Boc-D-Ala-Phe-B-NH-NHZ + Boc-Tyr-OH- Boc-Tyr-D-Ala-Phe-B-NH- -NHZ--(ГД)-- Boc-Tyr-D-Ala-Phe-B-NH-NHj + Н-Д-E-F(KA3), где К конденсация , которую проводят методом смешанных ангидридов в среде диметилфорнамида или тетрагидрофурана при (-15) - (+25)°G в присутствии этилхлорформиата; ОТЩ - отщепление защитной группы Z при обработке раствором ЙС1 в CHjCOOH или тетрагидрофуране; ГД - гидрогенолиз в присутствии 10%-ного Pd/G в среде метанола или диметилформамида; КАЗ - конденсация по азидному методу в присутствии н-бутилнитрита и HG1 в среде . диметилформамида или тетрагидрофураСУ ) со о: СП Од СП см

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

NW

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblT (21) 2983143/23-04 (22) 19.09.80 (31) 32590/79, 15412/80 (32) 20,09.79, 09.05.80 (33) IT (46) 07.06.87. Бюл. ¹ 21 (71) Фармиталия Карло Эрба С.п.А.(IT) (72) Роберто де Кастильоне, Фьоренцо

Фаоро, Джузеппе Персео, Сильвано

Пьяни и Франческо Сантанджело (IT) (53) 547.964.4.07(088.8) (56) Gyang E.А., Kosterlitz Н.W, Agonist and antagonist actions of

morphine-like drugs on the guineapig isolated ileum. — Brit. J.Pharmac. Chemother. 1966, v. 27, р.514.

Hughes J., Kosterlitz НЛ,, Lesli F.W. Effect of morphine and

adtenergie transmission in the

mouse vas diferens. Assessment of

agonist and antagonist potencies of

narcotic analgesics. — Br.J.Pharmac., 1975, v. 53, р. 371.

Chermant R., Simon P, Injection

intravertrieulaire cerebrale chez

les rat anasthesie. — J.Pharmac, Paris, 1975, v. 6, р. 489, D Amour F.Е., Smith D.L. А method

of evaluating analgisie activity in

the rat, — J.Pharmac. exp. Ther., 1941, v. 72, р. 74.

Ашмарин И.П. и др. Олигопептиды мозга — аналептики, стимуляторы памяти и сна. — Молекулярная биология, 1978, № 12, с. 965. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕПТИДОВ (57) Изобретение касается пептидов (ПТ), в частности соединений общей

„,SU„„1316565 А3 цу.4 С 07 К 7/06 А 61 К 37/02 формулы Н-Tyr-D-Ala-Phe-В-С-W где

В-Gly, Sar, Phe, С-Tyr, D-Tyr, Leu, Met, Met(О), Pro, Ser, Tyr(Bz1) -Pro, Tyr-Pro, Tyr-Ser, Pro-Ser, Tyr-ProSer, Tyr(Bzl)-Рго-Ser, Tyr-Hyp-Ser, Tyr-Hyp-Ser(Bz1), Tyr(Вг1)-VaI-Ser, Tyr-Gly-Ser, Phe-Нур-Ser, Туг-ProSer, Phe-Pro-Ser, Phe-Hyp-Бег(Вх1), Gly-Pro-Ser, Tyr-Pro-Gly, Tyr(Bzl)Pro-Ser(Bzl), Tyr-Pro-Ser(Bzl);

W-0Í, ОСН, NH NHR1, NH-NH Kадамантил R — бензилоксикарбонил г или фенил, которые обладают анальгетической активностью и могут быть использованы в медицине. Цель — создание новых более активных пептидов.

Получение ПТ ведут по следующей схеме: Вос-В-ОН + H N-МНŠ†(К) — Вос-B-NH-NHZ †(ОТЩ) — Н-В-NH-NHZ +

Вос-Phe-OH (К) «Вос-Phe;B-NH-МНЕ-» (0Tm} Н-Phe-В-NH-NHZ + Вос-D-Ala-OH â (К) — Вос-D-Ala-Phe-В-NH-NHZ

«(ОТЩ) Н-Вос-D-Ala-Phe-В-NH-NHZ +

4Вос-Tyr-OHBoc-Tyr-D-Ala-Phe-В- 1Н-NHZ (ГД) Вос-Туг-D-Ala-Phe-B-NH-ХН + Н-Д-Е-F (KA3), где К— конденсация, которую проводят методом смешанных ангидридов в среде диметилформамида или тетрагидрофурана при (-15) — (+25) С в присутствии этилхлорформиата; ОТ٠— отщепление защитной группы Z при обработке раствором НС1 в СН СООН или тетрагидрофуране; ГД вЂ” гидрогенолиз в присутствии 10Х-ного Pd/Ñ в среде метанола или диметилформамида; КАЗ вЂ” конденсация по азидному методу в присутствии н-бутилнитрита и НС1 в среде, диметилформамида или тетрагидрофурана при. (-30) — (+25) С, Вос — трет -бутилоксикарбонил; 2 — бензилоксикарбонил;  — указано выше; D-Tyr, D-Tyr, Leu, Met, Met(0), Pro, Ser, Tyr(Bzl), Gly, Phe, Trp; F — Ser, Ser(Bzl) Gly или простая связь;

Š— Pro, Ser, Нур, Gly, Ча1 или простая связь; W — указано выше. Получение фрагмента ведут по следующей схеме: Вос-Е-ОН + Н-F-W (К ). < Boc-Å-F-W (0Tfg ) H-Å-F-W +

Вос-D-OH — (К ) Вос-D-E-F-W (ОТЩ )-Н-В-Е-F-W, где К вЂ” конденсация методом смешанных ангидрицов в присутствии этилхлорформиата

1316565 или изобутилхлорформиата в среде диметилформамида или тетрагидрофуо рана при (-15) - (+25) С или карбоимидным методом в присутствии дициклогексилкарбодиимида и N-оксибензотриазола; ОТ٠— отщепление N-концевой трет-бутилоксикарбонильной группы обработкой НС1 в тетрагидрофуране или CF COOH при 0 С, причем если имеются боковые защитные группы, то их удаляют гидрогенолизом в присутствии 10 -ного Pd/Ñ в среде метанола или диметилформамида. Испытания

ПТ показывают высокую анальгетическую активность. 2 табл.

Изобретение относится к способу получения пептидов общей формулы

Н-Tyr-D-А1а-Phe-В-С-М, 5 где  — .Gly, $аг, Phe; .

С - Tyr, D-Tyr, Т.eu, Met, Met(0), Pro, Ser, Tyr-Pro, Tyr(Bzl)—

-Pro, Tyr-Ser, Pro-Ser,.

Tyr-Pro-Ser, Tyr(Bzj.)-Pro- tO

-Ser, Tyr-Hyp-Ser, Tyr-Hyp-Ser(Bzl), Tyr(Bzl) -Val-Ser, Tyr-Gly-Ser, Phe-Нур-Ser, Tyr-Pro-Бег, Phe-Pro-Ser, Phe-Hyp-Ser(Bzl), Gly-Pro-Бег

Tyr-Pro-Gly, Tyr-Pro-Ser(Bzl), Tyr(Bz1) -Pro-Ser(Bzl), W ОН ОСНз ИН2 NH R, NH NH

NH- NH-R где R — - CH» С Н, СН СГ, адамантил, R — бензилоксикарбонил, фенил, в виде хлоргидратов и/или трифторацетатов, которые могут найти применение в экспериментальной биологии и медицине.

Цель изобретения — способ получения новых пептидов, обладающих более высокой анальгетической активностью и низкой токсичностью.

В экспериментальной части исполь- ЗО зованы следующие сокращения: Ме — ме-, тил, Et — этил 2 — бензилоксикарбонил; Вос-трет-бутилоксикарбонил;

Bzl — бензил, Ad — адамантил, Met(0)метионин сульфоксид.

Значения R определяли на пластинках, покрытых силикагелем 60 F (Merck), толщина слоя 0,25 мм, длина пластинки 20 см, в следующих системах:

А Бензол — этилацетат — уксусная кислота — вода 10:10:2:1 (верхний слой)

Б Бензол — этилацетат — уксусная кислота — вода 100:100:

:40:15 (верхний слой)

В н-Бутиловый спирт — уксусная кислота — вода 4:1:1

Г Хлороформ — метиловый спирт—

32Х-ный гидроксид аммония

65:45:20

Д Хлороформ — метиловый спирт

8:2

Анализы методом ТСХ проводятся не в стандартных условиях, поэтому значения R> могут меняться, особенно при различных температурах. Температуру плавления определяют в открытых капиллярах без поправок. Большинство производных до плавления размягчается и разлагается. Растворители для кристаллизации, высаждения или смешения даны в скобках.

Бумажный электрофорез под высоким напряжением проводят на приборе феро раф Оридл инал-Франкфурт, тип 64

1316565

1О

15 (v) Вос-Phe-Gly-NH-NH-Z

35 (II) (vI) .Н-Phe-Gly-NH-NH-Z

3 на бумаге 11 - 2317 ф, "Гляген энд

Шулл" при напряжении 1600 В (40 В/см) и рН 1,2 (муравьиная кислота — уксусная кислота — вода 123:100:777), Значения электролитической подвижности (Е< ) приведены относительно этих величин для глутаминовой кислоты.

Пример 1. Н-Tyr-D-Ala-Phe-ь1у-Tyr-Prp -Ser-МН CF СООН.

Стадия

Вос-pro-Ser-NH (1) К раствору 1,00 г (4,65 ммоль)

Вос-Pro-NH в 10 мл безводного тетрагидрофурана последовательно прибавляют при -12 С 0,52 мл (4,65 ммоль)

N-метилморфолина и 0,45 мл 20 (4,65 ммоль) этилхлорформиата. Реакционную смесь перемешивают 2 мин при

-12 С и добавляют охлажденный раствор 0,48 г (4,65 ммоль) Н-Ser-NHz в 10 мл ДМФА. Реакционную смесь пе- 25 ремешивают при -10 С 3 ч и при 20 С

1 ч, осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме. Остаток кристаллизуют в системе метанол— эфир. 30

Получают 1,1 r (I) т.пя. 138 С, (е = -58,9 (С = 1, MeOH), К

0915; 0933 (В).

Стадия 2.

Н-Pro-Ser-NH СР СООН

1,0 г (3,3 ммоль) соединения (Т). растворяют при 0 .С в 10 мл трифторуксусной кислоты. Через 30 мин раст- 40 вор упаривают в вакууме. Продукт извлекают с помощью системы эфир— петролейный эфир.

Получают 1,0 г (II), т.пл. 48

50 С, В. = 0,10 (С) . 45

Стадия 3.

Вос-Tyr (Bz1) -Pro-Ser-NH z (III) К раствору 1,0 г (3, 2 ммоль) (II) 50 в 35 мл ДЕФА добавляют при 0 С 36 мл (3,2 ммоль) N-метилморфолина, 1,2 r (3,2 ммоль) Вос-Tyr(Bzl)-ОН, 0,43 г (3,2 ммоль) 1-оксибензотриазола и

0,73 r (3,2 ммоль) дициклогексилкар- 55 бодиимида. Реакционную смесь перемео шивают 1 ч при О С и в течение ночи при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, фильтрат

4 упаривают в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и раствор последовательно промывают насыщенным раствором NaC1 в 1 M лимонной кислоте, 1 М раствором NaHCO> и водой.

Органический слой сушат над безводным Ха SO и упаривают в вакууме.

Остаток кристаллизуют в системе этилацетат-петролейный эфир. Получают 1,4 r (Ш), т.пл. 1154С; (еа)

= -22, 9 (С = 1, МеОН); R =О, 20 (А) .

Стадия 4, Н-Туг(Вк1)-Рго-Ser-NH ° CF СООН (IV) Из 1 0 r (1 8 ммол ) тодике, изложенной на стадии 2, получают 1,0 г (IV), т.пл. 54-57 С (разл,), (еа), = -7,4 (С =, 1 MeOH), R = 0,59 (С) .

Стадия 5.

К раствору 1,0 г (3,8 ммоль)

Вос-Phe-OH в 10 мл безводного .тетрагидрофурана последовательно добавляют при -12 С 0,42 мл (3,8 ммоль)

М-метилморфолина и 0,3 мл (3,8 ммоль) этилхлорформиата. Реакционную смесь о перемешивают 2 мин при -12 С и до- бавляют охлажденный раствор 0,95 г. (3,7 ммоль) Н-Gly-NH-NH-Z НС1 и

0,4 мл (3,7 ммоль) Я-метилморфолина в 15 мл ДИФА. Реакционную смесь пео ремешивают 3 ч при -10 С и 1 ч при о

20 С, отфильтровывают осадок, фильтI рат упаривают в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и несколько

pas последовательно промывают насыщенным раствором NaC1 в 1 М лимонной кислоте, 1 М раствором NaHCO> и водой. Органический слой сушат над безводным Na SO и упаривают в вакууме. Из остатка продукт извлекают с помощью системы метанол-диизопропиловый эфир.

Получают 1,4 r (V), т.пл. 143 С, (ос)„ = +5,6 (С = 1, МеОН), К

= 0,63 (А).

Стадия 6.

10 г (2,1 ммоль) (V) в течение

30 мин обрабатывают 10 мл 1,3 н. раствора НС1 в ледяной уксусной кислоте. Затем реакционную смесь упао ривают в вакууме при 30 С, остаток

S 131 растирают с эфиром. Получают 0,89 г (VI), т.пл. 178 С; (оЕ) = +45 (С

1, MeOH); R = О, 78 (С) .

Стадия 7.

Вос-D-Аlа-Phe-Gly-NH-NH-Z (VII)

Из 1,0 г (5,3 ммоль) Вос-D-Ala-OÍ и 2,09 г (5, 1 ммоль) (VI) аналогично ь стадии 5 получают 2,5 r (VII),ò.ïë.165 С

f<) z, = +8 (С = 1, MeOH),R =0,51 (A) Стадия 8.

Н-D-Аlа-Phe-Gly-NH-NH-Z НС1 (VIII)

Из 1,0 г (1,8 ммоль) (VII) аналогично стадии 6 получают 0,84 r (VIII) j т. пл, 180 С; (Ы) р = +О, 2 (С=

1, MeOH), Р = 0,75 (С).

Стадия 9.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX)

Из 1,0 г (3,5 моль) Вос-Tyr-ОН и

1,65 г (3,4 ммоль) (VIII) с помощью методики, изложенной на стадии S, получают 2,24 г (IX), т. пл. 148 С, job) = + 16,2 (С = 1, MeOH); R1

= 0,38 (АЭ.

Стадия 10.

6 вают три дня при -9 С, отфильтровывают осадок, фильтрат упаривают в вакууме, остаток перекристаллизовывают из системы метанол-этилацетатэфир. Полученный продукт подвергают хроматографической очистке на колонке с силикагелем "Мерк" 70-230 меш, с использованием в качестве элюента смеси этилацетат-метанол (8:2).

10 Получают 2,0 r (XI) т.пл. 135 С, (k) = -5,3 (С = 1; MeOH), Н

= 0,24 (В).

Стадия 12.

15 Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProSer-НН (XII)

1,3 r (1,3 ммоль) (XI) в 20 мл о метанола гидрируют при 35 С в при20 сутствии 0,30 г 107-ного Pd/С. Затем катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме, остаток растирают с эфиром. Получают 1,1 г (XII), т.пл. 160-163 С (разл.);(<)

= -7 5 (С = 1, MeOH), К = 0 11) (В), 0,80 (С) °

Стадия 13.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-РгоЗ0 Ser-NH CF СООН (XIII) Вос-Tyr-D-Ala-Gly-NH-ИН (Х)

1,0 r (1,4 ммоль) (IX) в 10 мл метанола гидрируют В присутствии

0,27 r 107-ного Pd/С.Катализатор отфильтровывают,.фильтрат упаривают в вакууме, остаток растирают с этилацетатом. Получают 0,64 r (Х), с т. пл. 148 С, (о ) = +26,6 (С = 40

1, MeOH); R = 0,34 (B).

Стадия 11.

Вос-Tyr-D-Alà-Phe-Gly-Tyr(Вzl)—

-Pro-Ser-NH (XI) 45

К раствору 2,0 r (3,5 ммоль) (Х) в 20 мл безводного диметилформамида добавляют при -30 С 2,18 мл (8;75 ммоль) 4 í. НС1 в безводном теФагидрофуране и 0,45 мл (3,85 ммоль) н-бутилнитрита. Яеако ционную смесь перемешивают при -30 С

30 мин, добавляют 1 мл (8,75 ммоль)

N-метилморфолина, а затем охлажденный до -30 С раствор 1,66 r (2,91 ммоль) (IV) и 0,33 мл (2,91 ммоль)

N-метилморфолина в 40 мл диметилформамида. Реакционную смесь выдержи21,0 r (1, 1 ммоль) (XII) обрабатывают 30 мин при 0 С 10 мл трифторуксусной кислоты. Затем реакционный раствор упаривают в вакууме, остаток растирают с эфиром. В итоге получают 0,90 г (XIII), т.пл. 159-160 С, („= +5,5 (С = 1, ИеОН), R<

= 0,51 (C) .

Аминокислотный анализ: Ser 0,95 (1); Pro 0,97 (1); Gly 1,00 (1), D-Ala 1,00 (1), Tyr 1,91 (2); Phe

1,03 (1).

Найдено, 7.: С 64,60;. Н 5,86;

N 12,10.

C«H«NeO„ Рз

Вычислено, : С 55,02; Н 5,61;

N 12,22.

Пример 2, Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ИН

xCF rOOH

Стадия 1.

Вос-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Туг-NH (XiV)

К 2,74 г (4,8 ммоль) (Х) в 50 мл безводного диметилформамнда последо16565 (XVIII) Н-Ser-ИНИН-Z ° HC1

40 (XIX) 45 50

Стадия 1, (XVII) Вос-Ser-NHNH-Z вательно добавляют при -30 С 2,0 мл (12 ммоль) 6 н. НС1 в безводном тетрагидрофуране и 0,63 мл (5,28 ммоль) н-бутилнитрита. Реакционную смесь пео ремешивают 30 мин при -30 С, добавляют 1,34 мл (12 ммоль) N-метилморфоо лина при -40 С, а затем охлажденный до -40 С раствор 0,865 г (4,0.ммоль)

Н-Tyr-NHz НС1 и 0,456 мл (4,0 ммоль)

N-метилморфолина в 50 мл диметилформамида. Реакционную смесь оставляют. о на 7 сут при -10 С, упаривают до минимального объема, отфильтровывают осадок и из фильтрата высаживают продукт добавлением хлороформа. Полученный сырой продукт кристаллизуют из смеси метанол-хлороформ.

Получают 2,0 г (XIV), т.пл. 127129ОС; C<) р = +19,9 (С = 1, MeOH);

В.1 = 0%15 (А); 0956 (В) .

Стадия 2 °

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ИН,х

CF, COOH (XV) 1,0 г (1,4 ммоль) (XIV) смешивают с 12 мл трифторуксусной кислоты.

Реакционную смесь выдерживают 30 мин о при 0 С, упаривают в вакууме, оста,ток растирают с эфиром, образовавшийся осадок отделяют и перекристаллизовывают из смеси изопропанол-эфир

Получают 0,94 r (XV) т.пл. 145—

146 С, (3z) = +25 ; C

Аминокислотный анализ: Gly 1,02 (1); D-Ala 1,00 (1); Tyr 1,96 (2);

Phe 1,00 (1).

Найдено, Ж: С 55,57; Н 5,35;

N 11,39; Р 7,65.

С Нз F N ь09

Вычислено, Х: С 55,73; Н 5,36;

И 11,47, F 7,78.

Пример 3.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProSer-NH-NH-Z (XVI) К 1,0 r (4,87 ммоль) Вос-Ser-ОН в 20 мл тетрагидрофурана последова- . тельно добавляют 0,55 мл (4,87 ммоль)

N-метилморфолина и 0,49 мл (4,87 ммоль) этилхлорформиата при о

-12 С. Реакционную смесь перемешивао ют при -12 С 2 мин и добавляют ох5

8 лажденный раствор 1,0 г (4,87 ммоль)

H N-NH-Z НС1 и 0,55 мл (4,87 ммоль)

N-метилморфолина в 20 мл ДМФА. Реакционную смесь перемешивают при

-10 С 3 ч и при 20 С 1 ч, отфильтровывают осадок, фильтрат упаривают в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и полученный раствор несколько раз промывают последовательно насыщенным раствором NaCI 1 М лимонной кислотой, 1 М раствором

NaHCO и водой, сушат над безводным

Na SO< и упаривают в вакууме. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем, используя в качестве элюента систему хлороформметанол 98:2. Фракции, содержащие однородный по данным тонкослойной хроматографии продукт, объединяют и упаривают в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из смеси эфир-петролейный эфир, Получают 1,4 г (XVII), т,пл. 4246 С, (о J = -25,8 (С = 1; МеОН), R< = 0,52 (А).

Стадия 2.

1,0 г (2,83 ммоль) (XVII) растворяют в 10 мл 4 н, раствора НС1 в безводном тетрагидрофуране, через 30 мин добавляют эфир, выпавший осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из смеси абсолютный этанол-эфир.

Получают О 7 г (XVIII), т.пл. 110115 С,(ь), =. +20,7 (С = 1, MeOH)

Rg = 0,49 (С), Е„= 1,16, Стадия 3.

Вос-Tyr(Bzl)-Pro-OH

1,0 (8,7 ммоль) Н-Pro-ОН растворяют в 4,35 мл 2 н. раствора NaOH. о

Раствор охлаждают до 0 С, разбавляют

10 мл ДИФА и упаривают в вакууме при

35 С. Остаток суспендируют в 10 мл

ДМФА и добавляют 4,3 r (8,7 ммоль)

Вос-Tyr(Bzl)-ONp. Реакционную смесь перемешивают 1 ч и упаривают в вакууме. Остаток растворяют в воде и несколько раз промывают этилацетатом.

Водный слой охлаждают до О С, подкисляют 5 н. соляной кислотой до рН 2,0 и экстрагируют этилацетатом.

Органический слой промывают до нейтральной реакции насыщенным раствором

NaCl в воде, сушат над безводным

Na SO< и упаривают, 1316565

Стадия 9.

5 (ХХ) Вос-Tyr-Pro-0H

1,0 r (2,13 ммоль) (XIX) в 15 мл метанола гидрируют в присутствии

0,27 r 10X Pd/С. Подле окончания гид- 10 рирования катализатор отфильтровывают, фильтрат разбавляют этилацетатом и упаривают в вакууме до образования осадка. Получают 0,7 г (ХХ),. т. пл. 136-138 С, $

Стадия 5 .. (XXI)

25

Н-Tyr-Pro-Ser-ИНИН-Z НС1 (XXII)

Из 1,0 r (1,63 ммоль) (XXI) по ме- : тодике, описанной на стадии 2 поо лучают 0,78 г (XXII), т.пл. 172-174 С (эфир); (a) -38,4 (С = 1,,MeOH), R(= 0,46 (С); Е, = 0,79. 35

Стадия 7.

Вос-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Tyr-ProSer-NHNH-Z (XXIX)

К раствору 1,0 г (1,75 ммоль) (ХХЧТИ) в 15 мл безводного ДМФА последовательно прибавляют 1,1 мл (4,38 ммоль) 4 н. НС1 в безводном тетрагидрофуране и 0,2 мл (1,93 ммоль) о н-бутилнитрита при -30 С. Реакционо ную смесь перемешивают при -30 С

30 мин, добавляют 0,5 мл (4,38 ммоль) . N-метилморфолина, а затем охлажденный до -30 С раствор 0,803 г (1,46 ммоль) (XXII) и. 0,16 мл (1,46 ммоль) N-метилморфолина в 15 мл безводного ДМФА. Реакционную смесь

Получают 3, 7 г (Х?Х), т пл. 97—

100 С (разл), Pot) р = -15,7 (С

1, MeOH) RI = 0,70 (А), Е =0,35.

Стадия 4.

Вос-Tyr-Pro-Ser-NHNH-Z

Из 1,0 г (2,65 ммоль) (ХХ) и

0,77 г (2,65 ммоль) по методике, описанной на стадии 1, получают 1,46 г (XXI), т.пл. 116-118 С (эфир-петролейный эфир); (о ) „ = -46,5 (С = 1, МеОН); R = 0,17 (А), 0,37 (В).

Стадия 6.

Вос-Phe-G 1 y-NHNH-Z (XXI И) Из 1,0 г (3,8 ммоль) Вос-Phe-OH и 0,95 r (3,7 osis) H-Gly-NHNH-Z > ,«НС1 по методике, описанной на стадии 1, получают 1,4 г (XXIII), т.пл. 143 С (метанол-изопропиловый эфир); fee) д = +5,6 (С = 1; MeOH);

R = 0,63 (А) .

Стадия 8.

H-Phe-Gly-NHNH-Z НС1 (XXIV)

1,0 r (2,1 ммоль) (XXIII) растворяют в 10 мл 1,3 н. раствора НС1 в ледяной уксусной кислоте, через

30 мин раствор упаривают в вакууме при 30 С. Остаток растирают с эфиром. Получают 0,89 г (XXIV) ò.ïë.

178 С; (

Вос-D-Ala-Phe-Gly-NHNH-Z (XXV) Из 1,0 r (5,3 ммоль) Boc-D-Ala-OÍ и 1,09 r (5,1 ммоль) (XXIV) по методике, описанной на стадии 5 полуФ чают 2,5 г (XXV), т.пл. 165 С, foLJ „= +8,0 (С = 1; MeOH); R<

= 0,51 (А) .

Стадия 10, Н-D-Ala-Phe-Gly-NÍNÍ-Е НС1 (XXVI) Из 1,0 г (XXV) по методике, описанной на стадии 6, получают 0,84 г (XXVI) т.пл. 180 C; (cC) =.+0,2 (С = 1, MeOH), К- = 0,75 (С); Е, =

= 0,80.

Стадия 11.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-ИНИН-Z (XXVII) Из 1,0 r (3,5 ммоль) Вос-Tyr-OÍ и 1,65 г (3,4 ммоль) (ХХЧТ) по методике, описанной на стадии 5 получао ют 2,24 r (XXVII), т. пл. 148 С (метанол-эфиР); (сс) = +16,2 (С = t;

MeOH) R = 0,38 (А) .

Стадия 12.

Вос-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-NÍNÍ (XXVIII) а

1,0 г (1,4 ммоль) (XXVII) в 10 мл метанола гидрируют в присутствии

0,27 r 10X-ного Pd/С. После окончания гидрирования реакционную смесь обрабатывают, как описано на стадии

4.Получают 0,64 r (XXVIII),ò.ïë.148 С;

fa) = +26,6 (С = 1; MeOH); R

=0 34 (В); E, = 0,57.

Стадия 13.

1316565 !2 о оставляют на два дня при -9 С, отфильтровывают образовавшийся осадок, фильтрат упаривают в вакууме и остаток смешивают с 107-ной лимонной кис° лотой, охлажденной до О С. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают до нейтральной реакции водой, высушивают в вакууме и перекристаллизовывают из смеси этилацетат-эфир.

Получают 1,15 г (XXIX) т.пл. 140150 С; (ос) = -20,3 (С = 1; MeOH), Rg = 0,17 (В); 0,92 (С).

Стадия 14. осаждают иэ изопропанола эфиром.

Получают 0,76 r (XXXII) т.пл. 103105 С; (оС) р = +48,8 (С = 1; MeOH), R = 0»70 (С)» Е,,г = 0»92 °

20 Стадия 3.

Из 1,0 г (0,95 ммоль) (XXIX) по методике, описанной на стадии 2, получают 0,89 г; т. пл. 170 С (разл., этилацетат); W = -1,8 (C = 1, MeOH); (М) = +1,0 (С = 1, AcOH);

R = 0,69 (С).

Аминокислотный анализ: Ser 0,97 (1), Pro 0,98 (1), Gly 1,01 (1);

D-Ala 0,99 (1); Tyr 1,95 (2); Phe

i 0 (1).

Найдено, Ж: С 58,21; Н 5,99;

N 12,69; Cl 3,63.

С в Н gs CINE 0

Стадия 1.

Вос-Tyr-NÍNÍ-Z (ХХХ1) К раствору 1,0 г (3,55 ммоль)

Вос-Tyr-OH в 20 мл безводного ДМФА тетрагидрофурана последовательно прибавляют 0,4 мл (3,55 ммоль) N-метилморфолина и 0,48 мл (3,55 ммоль) изобутилхлорформиата при -12 С. Реакционную смесь перемешивают 2 мин при -12 С, добавляют охлажденный раствор 0,72 r (3,5 ммоль) H N-NH-Z»

«НС1 и 0,4 мл N-метилморфолина в

20 мл ДЙФА. Реакционную смесь перео мешивают при -10 С 90 мин, отфильтровывают образовавшийся осадок, фильтрат упаривают в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и полученный раствор несколько раз последовательно промывают водным раст(ХХХ) Из 1,0 r по методике получают О, ацетат), т.

= +19,9 (С

Е, = 0,52 °

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProSer-ИНИН, НС1

Вычислено, X: С 58,32; Н 5,91;

N 12,75; Сl 3,51.

Пример 4.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-NÍNÍ-Z»

«НС1 (ХХХ) 25 30

50 вором 1 M лимонной кислоты, 1 M раствором. NaHCO и насьпценным раствором NaC1. Органический слой сушат над безводным Na,SO и упаривают.

Получают 1,3 r (XXXI) т,пл. 68-70 С; (N) „= -5,85 (С = 2; MeOH); R =

= 0,76 (А) .

Стадия 2.

Н-Tyr-ИНИН-Z"ÍÑ1 (XXXI I) 1,0 г (2,33 ммоль) (XXXI) растворяют в 10 мл 4 н. НС1 в безводном тетрагидрофуране, через 30 мин раствор упаривают в вакууме и продукт

Во с- Tyr-D-Ala-Phe-G1y- Ty rИНИН-Z (XXXIII) К раствору 1,0 г (1,75 ммоль) (XXVII) в 15 мл безводного ДМФА носледовательно добавляют 1,1 мл (4,39 ммоль) 4 н. НС1 в безводном тетрагидрофуране и О, 2 мл (1, 93 ммоль) о н-бутилнитрита при -30 С. Реакционную смесь перемешивают 30 мин при

-30 С, добавляют 0 5 мл (4,38 ммоль)

N-метилморфолина, а затем охлажденный до -30 С раствор 0,535 г (1,46 ммоль) (XXXII) и О, 16 мл (1,46 ммоль) N-метилморфолина в 15 мл безводного ДМФА. Реакционную смесь выдерживают в течение трех дней при о

-9 С, отфильтровывают образовавшийся осадок, фильтрат упаривают в вакууме. Остаток смешивают с охлажден-. ной до О С 10Х-ной лимонной кислотой, выпавший осадок отфильтровывают, промывают до нейтральной реакции водой, сушат в вакууме и перекристаллизовывают из смеси изопропанол-эфир. Получают 0,85 г (XXXIII), т.пл. 137

150 С; jk) a = +3,8 (С = 1, MeOH);

Rl = 0,27 (А), 0,52 (В).

Стадия 4.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-ТугИНИН-Z«HC1 (1,5 ммоль) (XXXIII. описанной на стадии 2, 83 r (ХХХ) (разл., этилпл. 190-192 С;(<3 и — 1, MeOH); R < — — О, 81 (С), 1316565

Стадия 1.

13

Аминокислотный анализ: Gly 1,03 .(1); D-Аlа 0,98 (1); Tyr 1,96 (2), Phe 1,00 (1).

Найдено, %: C 59,61; H 5,81;

N 12ю20; Cl 4в49

Вычислено, %: С 59,73; Н 5,76;

N 12,19; Cl 4,41

Пример 5.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Ъ1у-Tyr ProNHò HCl (XXXIV) Вос-Tyr(Bz 1) -Pro-ИН z (XXXV)

Получают путем конденсации ВосTyr(Bzl)-ОНс Н-Pro-NH в присутствии т дицикгексикарбодиимида и N-оксибензотриазола в среде ДИФА.

Стадия 2.!

С Н N О

Вычислено, %: С 62,98; Н 6,54;

N 10,49.

Стадия 5.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProNH Нсl (XXXIV) Из соединения (XXXVIII) путем обработки раствором НС1 в этилацетате получают (XXXIV), т. пл. 200 С (этилацетат); R(= 0,58 (С); E = 0,59.

Аминокислотный анализ: Pro 1,00 (1); Gly 1,00 (1); D-Аlа 1,0t (1);

Tyr 1,98 (2); Phe 1,00 (t) .

Найдено, %: С 58,97; Н 6, 15, N 13,00; Cl 4,77.

Вычислено, 7.: С 59,08; Н 6,16;

N 13,03; Cl 4,78.

Приме р 6.

НС1 Н-Tyr (Bz1)-Pro-Инт (XKXVI)

Из (XXXV) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (XXXVI), т,пл. 159-161 С (эфир), R4 = 0,5 (С).

Ст ия 3. ад

Вос-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Tyr (Bz 1)Рго ИН (XXXVI I) Из соединений (Х) и (XXXVI) по методике, описанной в примере 1 (ста- 35 дия 11), получают (XXXVII), т.пл, 143 С (эфир); RI = 0,47 (В).

Аминокислотный анализ: Pro 0,98 (1); Gly 1,00 (1); D-Ala 1,02 (1);

Туг 1,96 (2); Phe 1 ° 00 (1) . 40

Найдено, %: С 64,89; Н 6,66;

N 10,87

С Н N О

Вычислено, %: С 64,95; Н 6,56;

N 10,82. 45

Стадия 4.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-TyrPro-%12 (XXXVI I I) -Из (XXXVII) по методике, описанной

50 в примере 1 (стадия 12), получают (XXXVIII), т.пл. 170-175 С (раэл., диизопропиловый эфир), R =0,24 (В) .

Аминокислотный анализ: Pro 1,00

;;(1) т Gly 0 98 (1); D-Ala 0 97 (1);

Tyr 1,92 (2); Phe 1,02 (1).

Найдено, %: С 62,71; Н 6,45;

: N 10,41

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)Pro-ЫН Нсl (KXXIX) Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Ser-NH ° CF3 СООН (хт.) Стадия 1. (х1.1) Вос-Tyr-Ser-NH

Из Вос-Tyr-OH и Н-Ser-NH по методике, описанной в примере 1 (стадия 1), получают (XLI), т.пл. 88—

90 С (эфир-петролейный эфир); Г. =

0,20 (А).

Стадия 2.

Н-Tyr-Ser-NH НС1 т (хт.11) Из соединения (XLI) по методике, описанной в примере 2 (стадия 2),,получают (XLII), т.пл. 117-120 С (метанол-эфир), R = 0,27 (С).

Из соединения (XXXVII) по методике, описанной в примере 5 (стадия 2), получают (XXXIX), т.пл. 180 С (эфир), R = 0,63 (С); Ef, = 0,53.

Аминокислотный анализ: Pro 1,00 (1), Gly 1,01 (1); D-Аlа 1,02 (1);

Туг 2,00 (2); РЬе 1,00 (1).

Найдено, %: С 62,66; H 6,19;

N 11 60 Cl 4,25.

С Н5г С1ИтОв

Вычислено, %: С 62,73; Н 6,22;

К 11,63; Cl 4,20.

Пример 7.

1316565

16

Стадия 3.

Из Вос-Нур-OH и соединения (XLVI) методом смешанных ангидридов с ис- пользованием изобутилхлорформиата в тетрагидрофуране получают(Х1,Ч?1), т.пл. 111 С (эфир-петролейный эфир), 0 13 (А), () з = -34 3 (С

1, MeOH) .

Стадия 4.

Из соединения (XLVII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 2) получают (XLVIII), т.пл. 181-182 С (метанол-эфир); R = 0,32.(C}, Стадия 5.

Из Вос-Tyr(Bzl)-OH и (XLVIII) методом активированных эфиров получают (XLIX), т.пл. 130 С (метанол-этнлацетат-эфир); R = 0,46 (В); (сс) 9

= -5,7 (С = 1; МеОН) .

Стадия 6.

Н-Tyr(Bzl)-Нур-Ser(Bzl)-NH (Ь) Из соединения (XLIX) по методике, описанной в примере 1 (стадия 2), получают (LI) т.пл. 67-69 С (эфирпетролейный эфир); R< = 0,52 (C);

Е .,г

Стадия 7.

Стадия 1.

Вос-Ser-NH, Вос-Ser (Bzl)-NHz (нл) (Х? Ч) Из Вос-Ser(Bzl)-OH и NH> методом 45 смешанных ангидридов с использованием этилхлорформиата в тетрагидрофуране получают (ХТЧ), т.пл. 97 С (этипацетат-эфир) Rg = 0,82 (В);

5 3 = +19,9 (С = 1; МеОН). 50

Стадия 2.

Вос-Туг-0-Аlа-Phe-Gly-TyrSer-NHz (XLIII)

Иэ соединений (Х) и (XLII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (XLIII), т.пл.110 С (этилацетат); R g = О, 15 (В), О, 83 (С) .

Аминокислотный анализ: Ser 0,99 (1); Gly 1,00 (1), D-Аlа 1,02 (1);

Tyr 1,98 (2); Phe 0,99 (1) .

Найдено, Х: С 59,70, Н 6,43, N 12,20.

4оНя И О<

Вычислено, X: С 59,64; Н 6,38;

N 12,17.

Стадия 4.

Н-Tyr-0-Аlа-Phe-Gly-Tyr БегСР СООН (Х1.)

Из соединения (XLIII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 12), получают (XL) т.пл. 150-153 С (эфир)

Rg = 0,59 (C); E, = 0,57; joc7

= +25,6 (С = 1; 11еОН).

Аминокислотный анализ: Ser 0,9? (1), Gly 1,00 (1); D-Ala 1,01 (1);

Tyr 2,00 (2); Phe 1,03 (1) .

Найдено, .7.: С 54,12; Н 5,30;

N 11 83 Р 6,90.

С Н Р, Nz 0«

Вычислено, Х: С 54, 21; Н 5, 41;

N 11,96, F 6,95.

Пример 8. 35

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-HypSer-NH НС1 (Х1ЛЧ) г

Н-Sei(Bzl)-МНг СР СООН (XLVI) Из соединения (XLV) по методике, описанной в примере 1 (стадия 2) е

Ф получают (XLVI) т.пл. 98 С (эфирдиизопропиловый эфир); R> = 0,44 (С);

Е„ = 1.33.

Стадия 3.

Вос-Нур-Ser(Bzl)-NHг (XLVII) Н-Нур-Ser(Bzl)-NHz CF COOH (XLVIII) Вос-Tyr (Bz1) -Hyp-Ser (Bz 1) -NH (XLIX) Вос-Tyr-D"А1а-Phe-Gly-Tyr Нур-Ser-NHz (LII) Из (LI) по методике, описанной в примере 1 (стадия 12), получают (LII), т.пл. 156-160 С (этилацетатэфир); R = 0,75 (С); (ос) = -1,4 (С = 1, MeOH).

Аминокислотный анализ: Нур 0,98 (1); Ser 0,98 (1); Gly 1,05 (1);

D-Ala 1,01 (1); Tyr 1,97 (2); Phe

1,00 (1).

Найдено, X: С 5863; Н 6,15;

N 11,90.

C sHse Ne0 ç

Вычислено, 7: С 58, 81; Н 6, 36;

N 12,19.

Стадия 8.

НС1 Н-Tyr-D-А1а-Phe-Gly-Tyr-Нур-Ser-МН (LIII) 17

1316565

Стадия 1. (LVI) Вос-Tyr-Ual-OMe

Стадия 1. (LVII) Вос-Tyr-Val-ОН

Вос-Tyr-Val-Ser NH

2 (LVIII) Из (LII) обработкой раствором

НС1 в тетрагидрофуране получают . (LIII), т.пл. 210-220 С (изопропанол-эфир); Р Z = 0,44 (C) 0,66 (D)

Е,. = 0,51; (ы) „= +10,1 (С = 1;

МеОН).

Аминокислотный анализ: Нур 0,96 ,(1), Ser 0,96 (1); Gly 1,07 (1);

D-Ala 0,97 (1), Tyr 1,97;Phe 1,00 (1)

Найдено, %: С 55,72; Н 5,86;

N 12,82.

С„Н, С1НвО„

Вычислено, %: С 56, 17; Н 6,01;

N 13,10.

Пример 10.

Н-Tyr-D-Аl а-Phe-Gly-Tyr (Bz 1)—

Нур-Ser(Bzl)-ИН НС1 (1ЛЧ) Из (LII) по методике, описанной в примере 8 (стадия 8), получают (LIV), т.пл. 175-180"C (метанол-эфир); R> =

= 0,67 (С), E,2 = 0,44; о ) =+10,3 (С = 1, NeOH) .

Аминокислотный анализ: Нур 0,97 (1); Ser 0,95 (1); Gly 1,03 (1);

D-Ala 0,98 (1); Tyr 1,96 (2); РЬе

1,00 (1) .

Найдено, %: С 62,04; Н 5,89;

N 10,61.

С„Н, С1пвО„

Вычислено, %: С 62 63 Н 6,13;

N 10,82.

Пример 11.

CF СООН Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly- з

Tyr-Чаl-Ser-NH2 (1.Ч) Из Вос-Tyr-OH и НС1 Н-Val-OMe методом смешанных ангидридов с использованием этилхлорформиата в диметилформамиде получают (LVI).

Стадия 2.

Иэ (LVI) путем обработки 1 н. раствором NaOH получают (LVII).

Стадия 3.

Из Н-Зег-ИН2 и (LVII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 1), получают (IVIII), т.пл. 190-195 С (метанол-диизопропиловый эфир).

l8

Стадия 4.

CF COOH Н-Tyr-Val-Ser-NH (LIX)

3 г

Из (LVIII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 2), получают (LIX), т. пл. 114-116 С (изопропанолэтилацетат).

Стадия 5.

Вос-Tyr-D-Ala-РЬе-С1у-Tyr-ValSer-ИН2 (1.Х)

Из соединений (Х) и (?.?Х) по методике, описанной в примере 1 (ста15 дия 11), получают (LX), т.пл. 230 С (диизопропиловый эфир);2 =0,47 (Е).

Аминокислотный анализ: Ser 0,97 (1); Gly 1, 05 (1), D-Ala 1,00; Val

0,95 (1); Tyr 1,94 (2); Phe 1,04 (1).

Найдено, %: С 59,61; Н 6,57;

N 12,30.

С45 НьФ И8012

Вычислено, %: С 59,72; Н 6,68;

N 12,38.

Стадия 6.

CF СООН Н-Туг-D-Ala-Phe-Gly3

Tyr-Чаl-Ser-ИН2 (LV) Из соединения (LX) по методике, описанной в примере 1 (стадия 13), получают (LV), ò.ïë.203-206 С (эфир), E

Аминокислотный анализ: Ser 0,95 (1); Gly 1,00 (1), D-Аlа 1,07 (1);

35 Ча1 0,95 (1); Tyr 1,95 (2); Phe

1,00 (1) .

Найдено, %: С 54,66; Н 5,71;

N 12,15; F 6,05.

С Н F NaO<2

Вычислено, %: С 54,89; Н 5,81;

Н 12,19, F 6,20, Пример 12.

СР СООН Н-Tyr-D-Ala-РЬе-Gly45

Tyr-Gly-Ser-NH

2 (LXI) Вос-Gly-Ser-NH2 (1.XII)

Из Вос-Gly-OÍ и H-Ser-NH по методике, описанной в примере 1 (стадия 1), получают. (LXII).

Стадия 2.

HCl Н-Gly-Ser-NHi (LXIII) Из (LXII) обработкой раствором

НС1 в тетрагидрофуране получают (LXIII).

1316565

Стадия 3.

Вос-Tyr-Gly-Ser-NH г (LXIV) Стадия 1; (ьхч1п) Вос-Phe-Pro-Ser-NH г

Из Вос-Tyr-ÎÍ и (LXIII) по методике, описанной в примере 1 (стадия

1), получают (LXIV), т.пл, 66-68 С (этилацетат-эфир); R = 0,57 (С).

Стадия 4 °

НС1 Н-Tyr-Gly-Ser-МН (LXV) Из (LXIV) обработкой раствором

НС1 в тетрагидрофуране получают (LXV), т.пл. 84-86 С; R =0,16 (0).

Стадия 5.

Во с- Tyr- D-Al a-Phe-G ly- TyrGly-Ser-ИН (LXVI)

Из соединений (Х) и (ЬХ7) по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (LXVI), т.пл.245250 С (эфир-петролейный эфир); К

= 0,79 (С), 0,15 (В).

Аминокислотный анализ: Ser 0,96 (1), Gly 2,04 (2); D-Ala 1,00 (1);

Tyr 1,96 (2); Phe 1,03 (1) .

Найдено, 7.: С 58,41; Н 6,29, N 13,02 °

С гН Ив О, Вычислено, 7.: С 58 48; g 6,31;

N 12,99.

Стадия 6.

CF> СООН Н-Tyr-D-Alа-Phe-GlyTyr-Gly-Ser-ИНг (LXI) Из соединения (LXVI) по методике, описанной в примере 1 (стадия 13), получают (LXI) т.пл. 180-190 С (эфир); R = 0,51 (С), 0,73 (D), Е,г = 0,52, (<1 = +29,7 (С = 1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Ser 0,97 (1), Gly 2,04 (2); D-Ala 1,05 (1);

Tyr 2,00 (2); Phe 1,00 (1) .

Найдено, 7.: С 53,54; Н 5,57;

N 12,74; F 6,39.

М 47 3 8

Вычислено, 7: С 53 45; Н 5,41;

N 12,79; F 6,50.

Пример 13.

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Phe-ProSer-ИН НС1 (LXVII) 20

Из Вос-Phe-ОН и соединения (II) по методике, описанной в примере 5 (стадия 1), получают (LXVIII) т.пл.

140-142 С (этилацетат-эфир).

5 Стадия 2

CF COOH H-Phe-Pro-Ser-NH (LXIX) 1 г

Из (LXIX) по методике, описанной в примере 1 (стадия 2), получают (LXIX), т.пл. 93-96 С (этилацетатэфир).

Стадия 3 °

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Phe-РгоБег-NHг (т.хх) Из соединений (Х) и (LXVIII) по методике, описанной в прийере 1 (ста дия 11), получают (LXX), т.пл.155- . !

160 С (метанол-этилацетат), R =0,16 (В), 0,80 (С).

Аминокислотный анализ: Ser 0,98 (1), Pro 1,04 (1); Gly 1,03 (1);

D-Аlа 1,02 (1); Tyr 1,03 (1); Phe

2,00 (2).

Найдено, 7.: С 60,41; Н 6,35;

N 12,31.

Вычислено, Ж: С 60,94; Н 6,59;

N 12,63.

Стадия 4.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Phe-ProSer-NH HCl (LXVlI) Из соединения (LXX) по методике, описанной в примере 8 (стадия 9), 4р получают (LXVII), т.пл. 190-195 С (метанол-эфир), R< = 0,39 (С), E,,z =, = 0,52; () = +4,4 (С = 1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Ser 0,94 (1), Pro 1,04 (1), Gly 1,02 (1);

D-Ala 1,03 (1); Tyr 1,03 (1); Phe

2,00 (2) .

Найдено, 7.: С 57,98; Н 6,33;

N 13,15; Cl 4,18.

Вычислено, 7 : С 58,35; Н 6,24;

N 13,61; Cl 4,31.

Пример 14, НС1 Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-PheHyp-Ser-NHz (LXXI ) Стадия 1.

Вос-Phe-Нур-Ser(Bz1) -NH (LXXII) 13

Из Вос-Phe-OH и соединения (XLVIII) по методике, описанной в примере 5 (стадия 1), получают (LXXII), т.пл. 143-146 С (этилацетатпетролейный эфир).

Стадия 2.

Н-Phe-Hyp-Ser(Вк1)-NH x

АССР СООН (LXXII I) Из соединения (LUII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 2), получают (LXXIII) т.пл. 70-72. С (метанол-эфир).

Стадия 3.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Fhe-HypSer(Bz1)-ИН (ЬХХТЧ) Из соединений (Х) и (LXXII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (LXXIV), т.пл.140145 С (изопропанол-этилацетат); R

= 0,25 (В); 0,90 (С).

Аминокислотный анализ: Нур 0,96 (1), Ser 0,96 (1); Gly 1,01 (1); 1D-.Ala 0,99 (1), Tyr 0,98 (1); Phe

2,00 (2).

Найдено, : С 62,53, Н 6,61, N 11,37. Свгна4И80%4

Вычислено, : С 62,89; Н 6,50;

N 11,28.

Стадия 4.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-PheHyp-Ser H (т.ххч) 16565 22 нол-этилацетат); R = 0,47 (С); Е, = 0,51; (е ), =+1,8 (С = 1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Нур 0,97

5 (1); Ser 0,98 (1); Gly 1,04 (1);

D-Ala 0,98 (1); Tyr 1,01 (1); Phe

2,00 (2).

Найдено, : С 57 00; Н 6,19;

К 12,21; Cl 4,29.

Вычислено, .: С 57,24; Н 6,12;

N 13 35 Cl 4,22.

Пример 15, H-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Phe-HypSer(Bzl)-НН НС1 (LXXVI) Из соединения (LXX) по методике, описанной в примере 2 (стадия 5), получают (LXXVI), т.пл. 160-170 С (изопропанол-этилацетат); Rf = 0,65 (С); Е, = 0,50.

Аминокислотный анализ: Нур 0,98 (1); Ser 0,96 (1); Gly 1,03 (1);

D Ala 0,97 (1); Tyr 1,02 (1); Phe

2,00 (2).

Найдено, : С 60,47; Н 6,23;

N 12,13; Cl 3,95.

C„i H s C1Ne0„o

Вычислено, %: С 60,74; Н 6, 18; К 12,06; Cl 3,81.

Пример 16.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Trp-ProSer-NH -НС1 (LXXVII)

Стадия 1.

Из соединения (LXXIV) по методике, описанной в примере 1 (стадия

10), получают (LXXV), т.пл. 165

170 С (метанол-эфир); Rf= 0,75 (С).

Аминокислотный анализ: Нур 0,96 (1); Ser 0,98 (1); Gly 1,03 (1);

D-Ala 1,01 (1); Tyr 1,02 (1); Phe

2,00 (2.) .

Найдено, : С 59,63; Н 6,55;

N 12,49.

СФ Н Ив 012

Вычислено, : С 59, 86; Н 6, 47;

N 12,41.

Стадия 5.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Phe HypSer-NH ° HCl (LXXI)

Иэ соединения (LXXV) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (LXXI), т.пл. 300 С (метаВос-Trp-Pro-Ser-NH (LXXVIII)

Из Вос-Trp-OÍ и соединения (II) по методике, описанной в примере 5 (стадия 1), получают (LXXVIII), о т. пл. 133-136 С (изопропанол-диизо45 пропиловый эфир) .

Стадия 2.

Н-Trp-Pro-Ser-NH ° НС1 (LXXIX)

Из соединения (ЬХХЧШ) по методике, описанной в примере 3 (стадия

2), получают (LXXIX), т.пл. 174—

176 С (метанол-этилацетат).

Стадия 3.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Trp-ProSer-NH (тххх)

Из соединений (Х) и (1,ХХХХХ) по методике, описанной в примере 1 (ста565 24 дня 11), получают (LXXXIII),т.пл. 180о

183 С (метанол-этилацетат); R> =

= 0,34 (В).

Стадия 3.

Н-Tyr-D-Ala Phe-Phe-Tyr-Pro- 35

Ser-NH НС1 (LXXXI)

Стадия 1 °

23 1316 дня 11), получают (LXXX), т.пл.175180 С (метанол-этилацетат); R

= 0,12 (В); 0,81 (С); 0,86 (D).

Аминокислотный анализ: Ser 0,96 (1); Pro 0,97 (1); Gly 1,00 (1); 5

D-Ala О, 99 (1); Tyr О, 97 (1); Phe

1,00 (1) .Найдено, 7.: С 60,57; Н 6,61;

N 13,53.

С H so М 0 н

f0

Вычислено, %: С 60,96; Н 6,42;

N 13,61.

Стадия 4.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Trp-Рго-, т-ННг НС1 (LXXVII) Из соединения (LXXX) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (LXXVII), т.пл. 210-220 С, 20 (изопропанол-этилацетат); R$=0,54 (С), 0,79 (Д), E,,z = 0,50,(юС1, = +3,,8 (С = 1, MeOH) .

Аминокислотный анализ: Ser 0,98 (1), Pro 0,97 (1), Gly 1,03 (1);

D Ala 0,97 (1); Tyr 1,02 (1); Phe

1,00 (1) .

Найдено, 7: С 58,21; Н 6,23;

N 14,45, Cl 4,21.

Вычислено, %: С 58,50; Н 6,08;

N 14,62; Cl 4,11.

Приме р 17.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-PheNH-NH (т.xxxll) 4о

Из соединения Вос-Tyr-D-Ala-PhePhe-NH-NH-Z по методике, описанной в примере 1 (стадия 10), получают (LXXXII), т.пл. 180-183 С (этипацетат); Rf = 0,54 (В); E, = 0,49. 45

Аминокислотный анализ: D-Ala

1,00 (1); Tyr 0,99 (1), Phe 1,98 (2).

Найдено, 7.: С 63,70; Н 6,75;

N 12,66.

Вычислено, 7: С 63,62; Н 6 71;

N 12,71.

Стадия 2.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Phe55

Tyr(Bz1) -Рго-Ser-NH > (LXXXIII) Из соединений (LXXXII) и (IV) по методике, описанной в примере 1 (стаВос-Tyr-D-Ala-Phe-Phe-TyrPro-Ser-ИН (L XXXIV) Из соединения (LXXXIII) по методике, описанной в примере 1 (стадия

12), получают (LXXXIV), т.пл. 140145 С (эфир); Rf = 0,18 (В);0,88 (С).

Аминокислотный анализ: Ser 0,95 (1) Pro 1,01 (1), D-Ala 1,00 (1);

Tyr 1,98 (2), Phe 2,02 (2).

Найдено, %: С 62,78; Н 6,52;

N 11,29.

С Н N Oqq

Вычислено, %: С 62,89; Н 6,49;

Н 11,28.

Стадия 4.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Phe-Tyr-Pro5er-NH НС1 а (т.хххт) Из соединения (LXXXIV) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (LXXXI), т.пл. 195-200 С (эфир); В = 0,66 (С); 0,82 (D), E, = 0,50; (ос) = +3,8 (С=1;МеОН).

Аминокислотный анализ: Ser 0,96 (1); Pro 1,01 (1); D-Аlа 1,00 (1);.

Tyr 2,03 (2); Phe 2,00 (2) .

Найдено, 7.: С 60,60; Н 6,11;

N 11,97; Cl 3,78.

С,ц Мд GIN 0 «o

Вычислено, %: С 60, 73; Н 6, 1 8;

N 12,05; Cl 3,81.

Пример 18.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Phe-Tyr(Bzl)Pro-Ser-NH НС1 (LXXXV) Из соединения (1.ХХХ?ТТ) по методике, описанной в примере 3 (стадия

2), получают (LXXXV) .т. пл. 168-180 С (этанол-эфир); Rf = 0,90 (D); Е<

= 0,46; Pot) = +0,9 (С = 1; MeOH).

Аминокислотный анализ: Ser 0,98 (1); Pro 1,02 (1); D-Ala 1,03 (1);

Tyr 1,98 (2); Phe 2,00 (2) .

Найдено, %: С 63,49; H 6,14;

N 10,83, Cl 3,48.

С 1Н С1НзО io

Вычислено, %: С 63,61) Н 6,22;

N 10,99; Cl 3,47.

Пример 19.

Н-Tyr-D-Аlа-Phe- Gly-LeuNH1 Нсl (LXXXVI) 1316565

25

Стадия 1.

Пример 21, (ХС) Стадия 1.

Вос-Tyr-D-А1а-Phe- Gly-LeuИН (LXXXVI I) Из соединений (Х) и Н-Leu-ИН НС1

2 по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (LXXXVII).

Стадия 2.

Н-Tyr-D-А1а-Phe-Phe-Gly1. -ИХ, НС1. (LXXXVI) Из соединения (LXXXVII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (LXXXVI)., т.пл. 143-147 С (иэопропанол-эФир); R< = 0,73 (С);

Е, = 0,62; (с )р =+8,1 (С = 1;

МеОН).

Аминокислотный анализ: Gly 1,04 (1), D-Ala 0,99 (1); Leu 1,02 (1);

Tyr 1,01 (1); Phe 1,00 (1) .

Найдено, Х: С 57,27; Н 6,91;

N 13,70 С1 5,97.

С 9Н 1 C1NsOe

Вычислено, 7.: С 57,56; Н 6,83;

N 13,89; Cl 5,86.

Пример 20.

Н-Tyr-D Ala-Phe-Gly-MetNH г. H C l (LXXXVII I) Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-MetИ 4 (ЬХХХ1Х) Из соединения (Х) и Н Met-ИН ° НС1 по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (LXXXIX).

Стадия 2.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-MetИН НС1 (т.ХХХЧттт)

Из соединения (LXXXIX) по мето дике, описанной в примере 3 (стадия

2), получают (LXXXVIII) т.пл. 220-

225 С (изопропанол-диизопропиловый эфир)э Rf = Оэб8 (С); Eqz = 0,63; (ос = +13,5 (С = 1; МеОН).

Аминокислотный анализ: 61у 1,01 (1); Р-А1а 1,01 (1); 1et 0,97 (1), Tyr 1,03 (1); Phe 1,00 (1).

Найдено, Х: С 53,45; Н 6,45;

N 13,32; Cl 5,73.

С „Н„CINeOe S

Вычислено, : С 53,97; Н 6,31;

N 13,49; Cl 5,73.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Sar-TyrPro-Ser-NH . НС1

Стадия 1.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Sar-ИНИН (XCI)

Из Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Sar-NHNH-Z по методике, описанной в примере 1 (стадия 10), получают (XCI) т.пл.110115 С (этилацетат); R< = 0,32 (В);

E,,z = 0,57.

Аминокислотный анализ: Sar 0,97 (1); D-Ala 1,00 (1); Tyr 0,98 (1);

Phe 1,02 (1).

Найдено, Е: С 59,36; Н 6,80;

N 14,32.

Cz4 Н И60

Вычислено, 7.: С 59,59; Н 6,89;

N 14,З7.

Стадия 2.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-SarTyr(Bzl)-Pro-Ser-NHz (XCII) Из соединений (IV) и (ХСЕ) по методике, описанной в примере 1 (ста30 дия 11), получают (XCII), Стадия 3.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe=Sar-Tyr-ProSer-ИН (XCIII) Из соединения (KCII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (XCIII) R = 0,18 (В), 0,71 (С) .

Стадия 4.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Sar-Tyr-ProSer-NH< НС1 (ХС) 45 Из соединения (XCIII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (ХС), т.пл. 195-200 С (эфир); Е,л = 0,49; (eL) =+18,0 (С = 1; МеОН).

Аминокислотный анализ: Sar 1,10 (1); Ser 0,94 (1); Pro 1,02 (1); р-А).а 0,97 (1); Tyr 1,98 (2);- Phe

1,00 (1) .

55 Найдено, Ж: С 57,65; Н 6,20;

N 13,14, Cl 4,22

Вычислено, Х: С 57,71; Н 6,26;

N 13, 13 ; Cl 4, 15.

27

Пример 22.

Стадия 1. (XCV) Вос-Gly-Pro-Ser-NH г

Н-Tyr-D-Ala-Phe -Gly-ProSer-NH HCl (ХСТУ) Из Вос-Gly-ОН и соединения (II) по методике, описанной в примере 1 (стадия 2), получают (XCV).

Стадия 2.

H-Gly-Pro-Ser-NH НС1 (XCVI) 16565 28 мере 1 (стадия 1), получают (XCIX), т.пл. 124-126 С (эфир).

Стадия 2.

Вос-Tyr(Bz 1) -Pro-Ser-NH-Me (С) Из соединения (XCIX) и метиламина в диметилформамиде получают соединения (С), т.пл. 179-181 С (этилаце10 тат); R< = 0,46 (A).

Стадия 3.

Н-Tyr (Bz 1)-Pro-Ser-NH-Me >

> НС1 (CI) !

Из соединения (XCV) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (XCVI), т.пл. 119-121 С. (метанол) (oLJ = -68,2 (С = 1;

MeOH).

Стадия 3.

Вос-Tyr-D-Аlа"Phe- Gly-ProSer-ХН (XCVII)

Из соединений (Х) и (XCVI) по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (XCVII), т.пл. 143о

146 С (метанол-этилацетат-диизопропиловый эфир); К = 0,58 (С); (ы)

= -10,7 (С = 1; МеОН).

Стадия 4.

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-GlyPro-Ser-НН НС1 (XCIV)

Из соединения (XCVII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (XCIV) т.пл. 180 С (эфир), Rg = 0,32 (С); Е,, = 0,58.

Аминокислотный анализ: Ser 0,99;

Pro 1,00 (1); Gly 2,00 (2); D-Ala

1 00 (1); Tyr 1,01 (1); Phe 1,00 (1).

Найдено, Х: С 53,89; Н 6,00;

N 15,09; Cl 4,85.

С„Н„С1 1,0, Вычислено, Ж: С 54,05; Н 6,18;

N 15,28; Cl 4,83.

П р и и е р 23.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-TyrPro-Ser-NH-Me НС1 (ХСУП1)

Стадия 1.

Вос-Tyr(Вг1)-Pro-Ser-ONe (XCIX)

Из соединений (XIX) и Н-Ser-ОМе хНС1 по методике, описанной в приИз соединения (С) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CI).

Стадия 4.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-GlyTyr(Bzl)-Pro-Ser-NH-Me (CII)

Из соединений (Х) и (CI) по ме25 тодике, описанной в примере 1 (ста дия 11), получают (CII), т.пл. 179181 С (изопропанол-эфир);К =0,26 (В).

Стадия 5.

30 Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-TyrPro-Ser-NH-Me (CIII)

Из соединения (CII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 12), 35 получают (CIII), т.пл, 213-216 С (изопропанол-эфир); R y = 0,1 (В);

0,8 (C);$6) D = -8,1 (С = 1, MeOH).

Стадия 6.

40 Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProSer-NH-Ме НС1 (ХСУ111)

Из соединения (Clll) по методике описанной в примере 3 (стадия 2), Р

45 получают (XCVIII), т. пл. 240 С (эфир), К = 0,55 (С); Е(= 0,52, Аминокислотный анализ: Ser 0,97 (1); Pro 1,01 (1); Gly 1,02 (1);

D-Аlа 1,00 (1); Tyr 1,96 (2); Phe

5Р 1 03 (1) .

Найдено, 7: С 57,63; Н 6,31;

И 13,04; Cl 4,27, Вычислено, Х: С 57,70, Н 6,26;

N 13,13; Cl 4,15.

Пример 24.

Н-Tyr-D-Alà-Phe-Gly-TyrPro-Ser-NH-Et HCl (CIV) 13) 6565

Стадия 1.

Стадия 1.

Из соединения (CVIII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CIV), т.пл. 235 С (эфир), Rg = 0,62 (С) E,ä = 0 52; (есj

-3,54 (С = 1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Ser 0,96 . (1), Pro 1,01 (1); Gly 1,01 (1);

D-Аlа 0,99 (1); Tyr 2,00 (2); Phe

1,00 (1).

Найдено, 7.: С 58,37; Н 6,43; . М 12,90; Cl 4,21.

С „Н „С 1 11, О „

Вычислено, Ж: С 58,15; Н 6,39;

И 12,91; Cl 4,08.

Пример 25.

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Pro50

ИН НС1

Стадия 1. (CXIII) 55

Вос-Tyr (Bz 1) -Pro-Ser-NH-Et (CV)

Из соединения (XCIX) и этиламина по методике, описанной в примере

23 (стадия 2), получают (CV) ò.ïë.

179-181 С (этилацетат); R = 0,58 (A); (Ы) = -28,4 (С = 1; МеОН).

Стадия 2.

К-Tyr-(Bz 1)-Pro-Ser-NHEt НС1 (CVI)

Из соединения (CV) по метод1псе, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CVI), т.пл. 169-170"С (метанол-эфир); R< = 0,50 (С);j<) =-19,1 (С = 1; MeOH).

Стадия 3.

Вос-Tyr-D-Аlа-Phe-GlyTyr(Bz1)-Pro-Ser-NH-Et (CVII) Из соединений (Х) и (CVI) по методике, описанной в примере 1 (стадия 11)9 получают (CVII)у ТФПЛФ 190200 С (изопропанол-эфир); R = 0,36 (В).

Стадия

Вос-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-TyrPro-Ser-NH-Et (CVIII).

Из соединения (CVII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 12), получают (CVIII), т.пл. 200-215 С (изопропанол-эфир); R = 0,10 (В);

0,81 (С) .

Стадия 5.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProSer-NH-Et НС1 (CIV) Н Tyr-D-Аlа-Phe-Gly Tyr ProSer-ОМе НС1 (CIX) Н-Tyr (-Bz 1) -Pro-Ser-ОМе HCl (СХ) 5 Из соединения (XCIX) по методике„ описанной в примере 3 (стадия 2), получают (СХ).

Стадия 2.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-GlyTyr(-Bzl)-Pro-.Ser-ONe (CXI) Из соединений (Х) и (СХ) по методикев описанной В примере 1 (стадия

11) получают (CXI), т.пл. 175180 С (хлороформ-изопропанол-эфир), R y =- 0,47 (В) .

Стадия 3. го

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly Tyr(Âã 1)Pro-Ser-0Me, (CXII) Из соединения CXI bio -методике, 5 описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CXII), т.пл. 190 С (эфир);

R< = 0,72 (С).

Стадия 4.

Х

Н-Tyr"D-Ala-Phe Gly-Tyr-ProSer-OMe.НС1 (CIX) Иэ соединения (CXII) по методике, описанной в примере 1 (стадия 12), получают (CIX), т.пл. 240 С (эфир), R 0,66 (С); Е,, = 0,55, (ес)

= -4,5 (С = 1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Ser 0,98 (1), Pro 1,03 (1), Gly 1,01 (1), D-Ala 1, 05 (1 ), Tyr 2, 00 (2); Phe

1,04 (1) .

Найдено, Ж: С 57 ° 70; Н 6,25;

N 11 51; Cl 4,23.

С 4,Н С1И О

Вычислено, Х: С 57,64; Н 6,13;

N 11,47; Cl 4,15.

Пример 26.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly

Pro NH (CXIV) Из соединений (Х) и Н-Pro-ЫН по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (CXIV),$ 3

-16,0 (С = 1, MeOH).

1316565

31

Стадия 2.

Стадия 1.

Стадия 1.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-РгоБнг НС1 (CXIII) Иэ соединения (CXIV) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CXIII), т.пл. 235 С (эфир);

R = 0,46 (С), Е, = Ов64 М о

= +2,5 (С = 1, МеОН) .

Аминокислотный анализ: Pro 1,01

1(1), Gly 1,01 (1); D-Ala 1,00 (1);

Tyr 1,02 (1); Phe 1,00 (1) .

Найдено, Ж: С 57,00; H 6,39;

N 14,35; Cl 6,12.

C s H, ClN Оь, Вычислено, X: С 57,09; Н 6,33;

N 14,26; Cl 6,02.

Пример 27.

Н- Tyr-D-A1 à-Phe-Gly- Ser-,NH x HC1 (CXV)

Стадия 1.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-GlySer-NH (CXVI)

Из соединений (Х) и Н-Бег-ЯН по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (CXVI), т.пл, 147152 С (этилацетат-эфир диизопропиловый эфир).

Стадия .2.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Ser-NH x

«НС1 (CXV) Иэ соединения (CXVI) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CXV), т.пл. 100 С (изопропанол-диизопропиловый эфир); R< =

= 0,52 (С), Е,,г = 0,65; оС)

= +40,7 (С = 1, MeOH).

Аминокислотный анализ: Ser 0,97 (1) 1 Gly 1,01 (1), D-Ala 1,02 (1), Tyr 1,00 (1), Phe 1,00 (1) .

Найдено, 7: С 57,71.; Н 6,17;

N 14,63; Cl 6,25.

С„Н„CINqOz

Вычислено, 7.: С 53,09; Н 6,09;

N 14,51, Cl 6,12.

Пр.им е р 28.

Н-Tyi-D-Ala-Phe-Gly-D-TyrНН, НС1 . (CXVII) Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-DTyr-NHг (CXVIII)

Из соединений (Х) и .Н-D-Tyr-NH;Hcl по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (CXVIII).

Стадия 2.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-D-ТугИН ° НС1 (CXVII) Из соединения (CXVIII) по методике описанной в примере 3 (стадия 2), Ф о получают (CXVII) т.пл. 230 С (эфир);

Rg = 0,76 (С); E(= 0 57, Ген

= +49,4 (С = 1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Gly 1,00 (1); D-Ala 1,00 (1); Tyr 1,92 (2);

Phe 1,00 (1) .

Найдено, X: С 58,53; Н 6, 10;

N 12,71; С1 5,52 °

С Н С1М О т

Вычислено, %: С 58,66; Н 6,00;

N 12,82; С1 5,41.

Пример 29.

25 . Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-TyrPro-Gly-NHz НС1 (CXIX) 30

Вос-Tyr (Bz I) -Phe-Gly-NH (CXX) г

Из соединений (XIX) и H-Gly-NH "

«НС1 по методике, описанной в примере 3 (стадия 1), получают (СХХ), т.пл. 70 С (эфир-петролейный эфир).

35 Стадия 2, l

Н-Tyr- (Bz 1) -Pro-Gly-ИН

"HCl (CXXI) 40 Иэ соединения (СХХ) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CXXI), т.пл. 235 С (изопропанол-эфир).

Стадия 3.

Вос-Туг-D-Ala-Phe-Gly-Tyr(Вг1)—

Pro-Gly-NH (CXXI I) Из соединений (Х) и (CXXI) по ме50 тодике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (CXXII), т.пл.135о

143 С (изопропанол-эфир).

Стадия 4.

55 Boc-Tyr-.D-Ala-Phe-Gly-TyrРго-С1у-11Н, (CXXIII) Из соединения (СХХ1Т) по методике, описанной в примере 1 (стадия 12), Стадия 1.

33 . 13!6 получают (CXXIII), т.пл. 165 С (изопропанол-диизопропиловый эфир).

Стадия 5.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProGly-NH ° Htl (CXIX) Иэ соединения (CXXIII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получайт (CXIX), т. пл. 179-185 С (ме- 10 танол-диизопропиловый эфир); К

- 0,57 (C); E „ë = 0151; )<3

+14,8 (С = 1, MeOH) .

Аминохислотный анализ: Pro 1,01 (1), Gly 1,94 (2); D-Ala 1,04 (1); 15

Tyr 2,00 (2); Phe 1,04 (1).

Найдено, .: С 57 71, Н 6 17, N 13,79, C l 4,51.

С Н C1NgOg

Вычислено, : С 57 88; Н 6,10; 20

N 13,86; Cl 4,38 °

Пример 30.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)Pro-Ser(Bz1)-ИНг. HCl (CXXIV) Вос-Tyr(Bzl)-1 ro-Ser(Bzl)NH (cxxv) Из соединений (Х1Х) и (ХТЛ?) по методике, описанной в примере 8 (стадия 3), получают (СХХЧ), т.пл. 6070 С (вода). 35

Стадия 2.

Н-Tyr(Bzl}-Pro-Ser(Bzl)НН НС1 (CXXVI)

40 Из соединения (СХХЧ) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CXXVI).

Стадия 3.

45.

Boc-Tyr-D-Ala-Phe-Gly1

Tyr(Bzl)-Pro-Ser(Bzl)-ЫН (CXXVII) Из соединений(Х) и (CXXVI) по методике, описанной в примере 1 (стадия 1 1), получают (CXXVII),ò.ïë. 169171 С (изопропанол-этилацетат-эфир). о

Стадия 4.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Tyr(Bzl)Pro -Ser(Bzl) НН ° НСl (CXXIV) Из соединения (CXXVII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), 565 34 получают (CXXIV), т.пл. 160 С (изопропанол-эфир); К = 0,81 (С); Е <д =

0,44; (oL)в = +9,9 (С = 1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Ser 0,97 (1); Pro 0,99 (1); Gly 1,03 (1);

D-Ala 1,02 (1); Tyr 1,94 (2); Phe

1,00 (1) .

Найдено, : С 63 57; Н 6, 19;

N 10,82; Cl 3,49.

Су Не3 C1NaO

Вычислено, %: С 63,61; Н 6,22;

N 10,98; Cl 3,47 °

Приме р 31.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProSer(-Bzl)-NH ° HCl (CXXVI I I) Стадия 1.

Вос-Tyr-Pro-Ser (Вгl)-NH (CXXIX) Из соединений (ХХ) и (XLVI) по методике, описанной в примере 8 (стадия 3), получают (CXXIX).

Стадия 2.

Из соединения (CXXIX) по методике, описанной в примере 3 (стадия

2), получают (СХХХ);Н. =0,47 (С).

Стадия 3.

Вос-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Tyr-ProSer(Bzl)-NH (cxxxI) Иэ соединений (Х) и (СХХХ) по ме- тодике, описанной в примере 1 (стадия 11),получают (CXXXI) °

Стадия 4.

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Tyr-ProSer(Вг1)-ИН НС1 (CXXVIII) Иэ соединения (CXXXI) по методике, описанной в примере 3 (стадия

2), получают (CXXVIII), т.пл. 174 С (эфир); Ry = 0,79 (С); Е1 = 0,48;

jog„= +4,8 (С = 1; МеОН).

Аминокислотный анализ: Ser. 0,96 (1); Pro 0,98 (1); Gly 1,02 (1);

D-Ala 1,00 (1); Tyr 2,02 (2); Phe

1,00 (1) .

Найдено, Х: С 60,65; Н 6,22;

N 11,97; Cl 3.90.

САУН5, С11 1во!О

Вычислено, X: С 60,74; Н 6,18;

N 12,05; Cl 3,81.

Пример 32, Н-Tyr-D-Ala-Phe-Glу-Tyr-NH

АЙ НС1 (CXXXI I) 1316565

36

Стадия 2.

Стадия 1 °

Вос-Tyr-NHAd

Н Tyr NHCH СР НС1 (CXXXVIII) (CXXXIII) 20

Стадия 4.

Стадия 1.

Из Вос-Tyr-OÍ и AdNH с использованием дициклогексилкарбодиимида с добавкой И-оксибензотриазола в качестве конденсирующего агента по методике, описанной в примере 5 (стадия 1), получают (CXXXIII), т.пл.128131 С (петролейный эфир);(,с)

= +6,7 (С = 1, MeOH)

Стадия 2.

Н-Tyr NHAd НС1 (СХХХ1Ч) Из соединения (CXXXIII) по методике, описанной в примере 3 (стадия

2), получают (CXXXIV).

Стадия 3.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-TyrNHAd (CXXXV) Из соединений (X) и (CXXXIV) по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (CXXXV) .

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-TyrNHAd HCl (CXXXII) Из соединения (CXXXV) по методике, описанной в примере 3 (стадия

2), получают (CXXXII) т.пл. 160 С (эфир); R = 0,90 (С), Е „= 0,52," (ей = +17,2 (С = 1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Gly 0,98 (1), D-Ala 1,00 (1); Tyr 1,96 (2);

Phe 1,00 (1).

Найдено, : С 63,79; Н 6,75;

N 10,59 Cl 4,60.

С4»,Н ) C1NqOq

Вычислено, .: С Е3»90; Н 6,76;

N 10,64; Cl 4,49.

Пример 33.

Ч-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-TyrNHCH CF, НС1 (CXXXVI) Стадия 1.

Вос-Туг- ННСН, СРз (CXXXVII) Из Вос-Туг-ОН и СР СН }}Н по методике, описанной в примере 8 (стадия 1), получают (CXXXVII).

5 Из соединения (CXXXVII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CXXXVIII).

Стадия 3.

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-ТугИНСН СР (CXXXIX) Из соединений (Х) и (CXXXVIII) по методике, описанной в примере 1 (ста15 дня 11), получают ХХХХХ.

Стадия 4, Н-Туг-D-Ala-Phe-Gly-TyrNHCH CF ° НС1 (CXXXVI) Из соединения (СХХХТХ) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CXXXVI) т.пл, 200-230 С (хлороформ-эфир-петролейный эфир), 25 К = 088 (С); E, = 057; fgg

+32,4 (С = 1, MeOH) .

Аминокислотный анализ: Gly 1,02 (1); D-Ala 1,00 (1); Tyr 1,98 (2);

Phe 0,99 (1) °

Найдено, : С 55 70; Н 5»53»

N 11,36; Р 6,85; Cl 4,97.

Вычислено, .: С 55 85; Н 5 51;

N 11,49; F 6,97; Cl 4,85.

Пример 34.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-D-Тугинин-z (CXL) Вос-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-DTyr-ИНИН-Z (CXLI) Из соединений (Х) и Н-D-Tyr-NHNH-Z НС1 по методике, описанной в примере 1 (стадия II), получают (CXLI), т.пл, 193-195 С (эфир);

P J р = -16,7 (С = 1; }leOH), Стадия 2.

Н-Tyr-Р-А1а-Phe-Gly-D"TyrNHNH-Z»HCl (CXL) Из соединения (СХЫ) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (СМ.), т.пл. 225 С (эфир), Rg = 0,85 (C); Е», = 0,50, (eL), = +48,1 (С = 1; MeOH).

1316565 38 получают (CXLVI), т.пл. 117+120 С (изопропанол-этилацетат).

Стадия 3.

Стадия 1.

Из соединений (XCI) и (XXXII) по методике, описанной в примере 1 (ста- 20 дия 11), получают (CXLIII).

Стадия 2.

Из соединения (CXLIII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CXLII); Ry = 0,90 (С), 0,15 (В); Еь2 = 0,53; )eLJ в =+30,6 (С = 1, МеОН) .

Аминокислотный анализ: $аг 1,04 (1) 9 D-Ala 1,О0 (1), Tyr 1,99 (2);

Phe 1,03 (1) . ,Найдено, 7: С 62 85; Н 6,09;

И 12,51, С, H48ClNz О

Вычислено, 7.: С 62,98; Н 6,06;

И 12,54.

Пример 36.

Стадия 1.

45 (CXLVI)

Н-Tyr-NHNH-Ph НС1

37

Аминокислотный анализ: Gly 0,99 (1); D-Ala 1,02 (1); Tyr 1,95 (2);

Phe 1,00 (1) .

Найдено, Ж: С 59,61; Н 5,78;

И 12,21; Cl 4,51.

С ОНчь С1И О

Вычислено, 7: С 59,73 Н 5,76;

И 12,19; Сl 4,41.

Пример 35, Н-Tyr-D-А1а-Phe-Sar-TyrNHNH-Z HÑ1 (CXLII) Вос-Tyr-D-Аlа-Phe-SarNHNH-Z (CXLIII) Н-Tyr-D-Ala-Phe-SarTyr-ИНИН-Z НС1 (СХЫI)

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-

NHNH-Ph HCl (CXLIV) Стадия 1.

Вос-Tyr-NHNH-Ph (СЫЧ) Из Вос-Tyr-ОН и Н N-NH-Ph по ме2 тодике, описанной в примере 8 (стадия 1), получают (CXLV), т. пл. 171173 С (изопропанол-дииэопропиловый эфир-петролейный эфир).

Стадия 2.

Иэ соединения (CXIV) по методике, описанной в примере 3 (стадия, 2), Вос-Tyr-D-Ala-Phe-GlyTyr-NHNH-Ph (CXLVI I) Иэ соединений (Х) и (CXLVI) по методике, описанной в примере 1 (стадия 11), получают (СХ1.7??).

Стадия 4.

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-TyrNHNH-Ph НС1 (CXLIU)

Из соединения (CXLVII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CXLIV) т. пл. 220 С (изопропанол-диизопропиловый эфир); R

= 0,85 (С); Е . = 0,52;(м) = +8,6" (С = 1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Gly 1,00 (1), D-Ala 0,99 (1); Tyr 1,97 (2);

Phe 1,00 (1) .

Найдено, 7.: С 60,92; H 5,99;

N13,О7,,Cl 4,81.

С, Н„„С1И О, Вычислено, Ж: С 61,16; Н 5,94;

N 13 14, Cl 4,75.

Пример 37.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-ProSer-NH ° HCl (CXLVI II) Вос-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-РгоБег-ИН2 (CXLIX) Из соединений (Х) и (II) по методике, описанной в примере 1 (стадия ,1), получают (CXLIX), т.пл. 153— .155 С (метанол-диизопропиловый эфир) .

Стадия 2.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-ProSer-ИН Нсl (CXLVIII) Из соединения (СХЫХ) по методике, описанной в примере 3 (стадия

2), получают (CXLVIII); Rg = 0,32 (С), E„,= 0,67.

Амннокислотный анализ: Ser 0,96 (1); Pro 1,01 (1); Gly 1,00 (1);

D-Ala 1,02 (1); Tyr 1,02 (1); Phe

1,00 (1) .

Найдено, Ж: С 54,91; Н 6,35;

И 14,44; Cl 5,35.

С Н 2С1И О

1316565

Стадия 1, Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Net(0)ИН, НС (CLII)

Стадия 1.

Периферическая анальгетическая активность описываемых пептидов бы55 ла изучена в опытах in vitro на препарате продольная мьппца — мелмьппечное сплетение подвздошной мьппцы морской свинки (ПММС) и на сосудистом пучке мьппи (СПМ).

39

Вычислено, /: С 55,06; Н 6,26;

N 14,50; Cl 5,24, Пример 38.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr (Bz1)—

Pro-Ser-NH НС1 (CL) Из соединения (XI) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CL), т.пл. 169 С (метанолэтилацетат); Rg = 0,65 (С), Е„д

= 0,46, (ос) = +5,4 (С = 1;МеОН).

Аминокислотный анализ: Ser 0,99 . (1); Pro 0,99 (1); Gly 1,03 (1);

D Ala 1,00 (1); Tyr 1 96 (2); Phe

1,02 (1) .

Найдено, 7: С 63,05; H 6,51;

И 12,65; Cl 4,05.

С Н CINgO о

Вычислено, Х: С 63,22; Н 6,43;

N 12,55; Cl 3,97.

Пример 39.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProSer-ИНИН 2НС1 (СЫ)

Из соединения (XVI) путем каталитического гидрирования в метаноле над 107.-ным палладием на угле в присутствии эквимольного количества

НС1 получают (CLI), т.пл.198-200 С (изопропанол-этилацетат)g R = 0,52 (С); Е, = 0,86; (oat = -1,4 (С =

1, МеОН).

Аминокислотный анализ: Ser 0.96 (1), Pro 0,97 (1), Gly 1,02 (1), D-Ala 1,03 (1); Tyr 2,01. (2); Phe

1,00 (1) .

Найдено, /.: С. 53 85, Н 6,08, N 14,14, Cl 8,09.

С„Н С1И

Вычислено, Е: С 53,93; H 5,99;

N 14,15; Cl 7,96.

Пример 40.

Boo-Tyr-D-А1а-Phe-Gly-Met(0)ИН (Ст.III)

Из соединения (LXXXIX) путем обработки ИаЭО в водном метаноле полу4 о чают (CLIII) т. пл. 159-161 С (этилацетат).

Стадия 2.

Н- Tyr-D-А1а-Phe-G 1 y-Me t (0)—

NH НС1 (CLII) 40

Из соединения (CLII) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), получают (CLII), т.пл. 125 С (диизопропиловый эфир); Ry = 0,37 (С).

5 Аминокислотный анализ: Gly 1,03 (1); D-А1а 0,98 (1); Met(0) 1,03 (1);

Tyr 0,99 (1); Phe 1,00 (1) .

Найдено, X: С 52,58; Н 6,16;

N 13,13, S 4,97; Cl 5,58. !

О

С п Нн C1N60 S

Вычислено, X: С 52,62; Н 6,15;

N 13,15, S 5,02; Cl 5,55.

Пример 41.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProSer-OH НС1 (CLIU) 20

Н-Tyr-D-Ala-Phe-G ly-Tyr (Bz1)—

Pre-Ser-OÍ (Стя) Из соединения (CXI) путем обработки 1 н. раствором NaOH получают (CLV)

Стадия 2.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly -Tyr (Bzl)—

Pro-Ser-.OÍ НС1 (CLVI) 30

Из соединения (CLV) по методике, описанной в примере 3 (стадия 2), пол чают (CLVI).

Стадия 3.

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ProSer.-OH- HCl (CLIV) Из соединения (CLVI) по методике, описанной в примере 1 (стадия 10), 40 получают (CLIV) т. пл. 215 С (изоо пропанол-эфир), R = 0,57 (С); Е

= 0,50;$

Аминокислотный анализ: Ser 0,96 (1); Pro 1,03 (1); Gly 1,02 (1);

D-Ala 0,98 (1); Tyr 2,04 (2), Phe

1,00 (1).

Найдено, Е: С 57,21; Н 5,87;

N 11,60; Cl 4,28.

С oHso C1N>0, Вычислено, /: С 57 17; Н 5,99, N 11,66; Cl 4,21.

1316565 42 от активности Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH СГ СООН, принятой за 100Х. Для Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NHz CF>СО0Н на препарате ПММС ICq = 3,3 нМ, а на СМП

1С = 29 HM (IC () — концентрация препарата, вызывающая ослабление сокращения препаратов гладких мьппц на 50X).

Центральная анальгетическая активность описываемых соединений была изучана в опытах in vivo на крысах по тестам "отдергивание хвоста".и

"горячая пластинка". Крысам линии

15 Wistar мужского пола вводили исследуемые соединения интрацеребровентрикулярно в 10 мкл физиологического раствора по известной методике. В тесте "отдергивание хвоста" латентный период при воздействии излучаемого тепла измеряли автоматически с точностью до 0,1 с. В каждом эксперименте использовали группы, содержащие 10 животных. 25

Время реакции на воздействие излучаемого тепла и горячей пластины измеряли за 30 и 15 мин до введения препарата и затем каждые 15 мин в течение первого часа после введения препарата и далее каждые 30 мин в течение следующих 3 ч. Рассчитывали эффективную дозу (ЭД,) и 957-ные доверительные пределы.

Для Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro35 -Ser-NH СГ СООН, активность которого принята 100, по тесту "горячая пластинка" ЭД = 13,3 пмоль, по тесту "отдергивание хвоста" 23 пмоль.Полученные результаты представле40 ны в табл. 2.

Критерием активности пептидов на препаратах гладкой мышцы при электрическом раздражении служило максимальное ослабление подергиваний, наблюдаемое в течение 5 мин контакти рования с исследуемым соединением.

Препарат IIMMC готовили по известной методике и помещали в ванночку емкостью 15 мл с модифицированным раствором Кребса, содержащим, ммоль:

NaCl 118; КС1 4,75; СаС1 2,54, КН РО 1,19; М $0 0,12; NaHCO 25; глюкоза 11, гексаметохлорид 0,069; мепираминмалеат 0,125 мкМ; О, 957. и СО 57. Температура раствора 36 С.

Похожие на подергивания сокращения продольной мышцы фиксировали изометрически с помощью датчика, измеряющего растяжение (DY I, Basile, Milan), и демонстрировали на записывающем микродинамометре (Basile, Milan). Интрамуральные нервы раздраж:ли прямолинейными импульсами длительностью 0 5 мс с интервалами 10 с используя надмаксимальное напряжение. Обычно подвздошную мьппцу подвер гали воздействию опсоидных пептидов в течение 3-5 мин до тех пор, лока ослабление подергиваний не становилось максимальным.

Препарат СПМ готовили о известной методике и помещали в ванночку емкостью 8 мл с модифицированным раствором Кребса, содержащим, ммоль:

NaC1 118; КС1 4,75; СаС1 2,54;

КН РО 0,93, NaHCO 25; глюкоза 11; аскорбиновая кислота 0,1; натриевая соль.этилендиаминтетрауксусной кислоты 0,027; 0 95Х и СО 57. Темпео ратура раствора 36 С. Продольные сокращения записывали так же, как описано для случая с подвздошной мьппцей морской свинки.

Интрамуральные нервы раздражали сериями прямолинейных Импульсов длительностью 1 мс ° Серии импульсов подавали с интервалами 15-20 с, и они состояли из 6-7 раздражений с интервалами 100 мс. Импульсы проходили между платиновым точечным источником, находящимся в донной части ванночки, и вертикальным кольцом (высота 5 мм, ширина 10 мм) иэ платиновой фольги, закрепленным на верхней части ванночки с органическим раствором, 50

Полученные результаты представлены в табл. 1, где активность изученных соединений выражена в процентах

Формула изобретения

Способ получения пептидов общей

45 формулы

Н-Tyr-D-Ala-Phe-В-С-W, где  — Gly Ser Phe, С вЂ” Tyr, D-Tyr, Leu, Met, Met(0), Pro, Ser, Tyr-Pro, Tyr(Bz1)—

-Pro, Tyr-Ser, Pro-Ser, Tyr-Pro-Ser,Tyr(Bzl)-Pro-Ser, Tyr-Нур-Ser, Tyr-Hyp-Ser{Вг1), Tyr{Bz1)-Val-Ser,Tyr-Gly-Ser, Phe-Hyp-Ser, Tyr-Pro-Ser, Phe-Pro-Ser, Phe-Hyp-Ser(Bzl), Gly-Pro-Ser, Tyr-Pro-Gly, Туг-Pro-Ser(Bzl), Tyr(Bz1)-Pro-Ser(Bzl), )3)6565

44

Boc-D-Ala-0Í, 15

2Р

Вос-В-NH-NH-Z

Вос-Туг-ОН, Н-В-NH-NH-Е, Вос-Phe-OH, 45

Вос-Phe-В-NH-NH-Z, Н-D-E-F-W, Н-Phe-В-NH-NH-Z, 55

W — ОН, ОСН, NH, NH-R, NH-NH

NH-NH-В,, где К вЂ” СН, С Н, СН CF>, адамантил;

R, — бенэилоксикарбонил, фенил, в виде хлоргидратов и/или трифторацетатов, отличающийся тем, что соединение формулы:

Вос-В-ОН, t0 где Вос — трет-бутилоксикарбонил, В имеет указанные значения, конденсируют с соединением формулы

НР-NH-К, где Z — бензилоксикарбонил, методом смешанных ангидридов в среде диметилформамида или тетрагидрофурана при (-15) — (+25) С в присутствии этилхлорформиата и полученное соединение формулы где Вос, В и Z имеют указанные значения, обрабатывают раствором НС1 в уксусной кислоте или тетрагидрофуране с образованием соединения общей формулы Зр где В и Z имеют указанные значения, которое конденсируют с соединением формулы где Вос имеет укаэанное значение, методом смешанных ангидридов в при- 4р сутствии этилхлорформиата в среде ди-. метилформамида или тетрагидрофурана при (-15) — (+25) С и от полученного соединения формулы где Вос, В и Z имеют указанные значения, отщепляют N-концевую защитную группу 5р обработкой раствором НС1 в уксусной кислоте или тетрагидрофуране с получением соединения формулы где В и Z имеют указанные значения, которое конденсируют с соединением формулы где Вос имеет указанное значение, методом смешанных ангидридов в присутствии этилхлорформиата в среде диметилформамида или тетрагидрофурана при (-15) — (+25) С и полученное производное защищенного трипептида формулы

Вос-D-Ala- Phe-В-NH-NH-Z, где Вос, В и Z имеют указанные значения, обрабатывают раствором НС1 в уксусной кислоте или тетрагидрофуране с образованием соединения формулы:

Н-D-Ala-Phe-В-NH-NH-Z, где В и Z имеют указанные значения, которое конденсируют с соединением формулы где Вос имеет указанное значение, методом смешанных ангидридов в присутствии этилхлорформиата в среде диметилформамида или тетрагидрофурао на при (-15) — (+25) С и полученное производное защищенного тетрапептида формулы:

Вос-Tyr-D-Ala-Phe-В-NH-NH-Z, где Вос, В и Z имеют укаэанные значения, подвергают каталитическому гидрогенолизу в присутствии 10Х-ro Pd/Ñ в метаноле или диметилформамиде с образованием соединения общей формулы

Вос-Tyr-Р-Ala-Phe-В-NH-NH где Вос и В имеют указанные значения, которое конденсируют азидным методом в присутствии н-бутилнитрита и HCI в среде диметилформамида или тетрагидо рофурана при (-30) — (+25) С с соединением общей формулы где D — Tyr, D-Tyr, Leu, Met, Met(0), Pro, Ser, Tyr(Bzl), Gly, Phe, Тгр;

F — Ser, Ser(Bzl), Gly или простая связь;

16565 46 ной группы от полученного соединения общей формулы

Во с-Е-F-W

S где Вос, E F u W имеют указанные значения, обработкой НС1 в тетрагидрофуране и от полученного соединения общей

1О ф„мулы

B8c-D-OH, Boc-D-E-F-W, где Вос, D, Е, F и И имеют указан15 ные значения, отщенляют N-концевую трет-бутилоксикарбонильную защитную группу обработкой НС1 в тетрагидрофуране и от полученного соединения общей формулы

Н-Е-F-W где Вос, В, С и W имеют указанные значения отщепляют N-концевую трет-бутилоксикарбонильную защитную группу обработкой НС1. в тетрагидрофуране или трифторуксусной кислотой при 0 С и, если имеются боковые защитные груп- ©,пы, то их, в случае необходимости, удаляют гидрогенолизом в присутствии 10Х-ного Pd/С в метаноле или диметилформамиде.

Приоритет по приз35 накам:

Вос-Е-ОН, Н-F-Wy

20.09.79 при W — OH, OCH, NH, МН-R> где R — - СН, С Н, СН Су адамантил.

09.05.80 при W — NH-NH, NH-NH-R, где R< — бенэилоксикарбонил, фенил.

Таблица

Соединение

Анальгетическая активность, 7. Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-БН CF>COOH

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-Ие.HCl

100

100

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-Et НС1

70-80 90

80-90 70-80

Н-Tyr-Р-Аlа-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-АНИН 2НС1

Š— Pro, Ser, Нур, Gly, Val или простая связь,.

W имеет указанные значения, получаемым путем конденсации соединения общей формулы где Вос и D имеют указанные значения, методом смешанных ангидридов в присутствии этилхлорформиата или изобутилхлорформиата в среде диметилфор-. мамида или тетрагидрофурана при (-15) — (+25) С или карбодиимидным методом в присутствии дициклогексилкарбодиимида и М-оксибензотриазола с соединением общей формулы где Е F W имеют указанные значения, Э Э которое, в свою очередь, получают, если Š— Pro, Ser, Нур, Gly, Val, путем конденсации соединения общей формулы где Вос имеет указанное значение, Š— Pro, Ser, Нур, Gly, Val, с соединением общей формулы где F u W имеют указанные значения, методом смешанных ангидридов в присутствии этилхлорформиата или изобутилхлорформиата в среде диметилформамида или тетрагидрофурана при (-15)-(+25) С с последующим удалением

Н-концевой трет-бутнлоксикарбонильВос-Tyr-D-Ala-Phe-В-С-М, ) 316565

Продолжение табл. 1

Соединение

Аиальгетическая активность, Х

ПММС СПМ

120-160

80

70-90

70-80

85-90

40-50

50-60

110-140

25-30

70-80 50

12-18 300-1500, 70-80

44-52

2-4 е

30-40

3-6

50-60

12-17

17-19

15-17

14-16

190-230

150-190

33-36

8-12 25-32

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-ИНИН-Z.НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-OMe HCl

Н-Tyr-Р-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser (Bz 1) -NH НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Gly-NH НСl

Н-Tyr-D-Al à-Phe-С ly-Tyr-Hyp-Ser-NH НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Gly-Ser-ИН CF СООН

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Pro-Ser-NH НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Phe-Pro-Ser-NH НС1 г

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Trp-Pro-Ser-NH НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Phe-Tyr-Pro-Ser-ИН НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Pro-$ег Bzl)-ИН НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Phe-Hyp-Ser-ИН НС1

Н-Туг-9-Ala-Phe-Gly-Tyr (Bzl) -Нур-Ser (Bz1) -ИН . НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-.Gly-Phe-Hyp-Ser(Bzl)-ИН НС1

Н- Tyr-D-Ala-Phe-G l y- Ty r-Pro-NH ° CF> COOH

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Pro-ИН СН COOH

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Ser-NH . СР СООН

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Tyr-NH-Ad ° НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-ИНИН-Z ° HCl

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-NHNH-Ph йС1 й- yr-9-А1а-Phe-Gly-D-Tyr-NH НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Leu-ИН НС1

Н-Туr-D-Ala-Phe-Gly-Met-NH НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-0-Туг-NHNH-Z HC1

270-300

65-70

85-90

12-15

40-50

50-55

50-60

110-120

25-30

250-500

80-85

35-40

40-60

35-50

35-40

70-75

60-110

1316565

49.50

Продолжение табл.!

Соединение

Анальгетическая активность, 3

HHMC СПИ

Т а б л и ц.а 2

100

100

70-80 7-15

25-30

120

20

90-1 10 70-80

10-20

3-5

70

100

70

55

25

Н-Туг-D-Alà-Phe-Sar-Tyr-ЯНИН-Z HCl

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-NH СР СООН

Н-Тук-D-Al à-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-ЯН ° СН > COOH

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-Ме НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-.NH-Et НС1,Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Òór-Pro-Бег-NHNH 2НС1

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NÍNÍ-Z HGl

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser(Bzl)-ЯН ° HCl

Н-Tyr-D-Аlа-Phe-Gly-Tyr-Pro-Gly-ЯН .HCl

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Ча1-Ser-ИН СУ СООН

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-Gly-Ser-ИН CF> COOH

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Phe-Pro-Ser-ЯН НС1

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Trp-Pro-Ser-ЯН НС1

Н-Tyr -D-Ala-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH HC1

Н-Tyr-D-А lа-Phe-Phe- Tyr-Pro-Ser-NH HCl

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Phe-Hyp-Ser-ИН HCl

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Нур-Ser(Виl)-ИН ° НС1

H-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Phe-Hyp-Ser(Bzl)"NÍ НС1

Н- Tyr-D-Al a-Phe-С1у- Tyr-Pro- NH СР,СООН

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Pro-ИН СГ, СООН

55-70

40-45

80-350

54-62

52

Продолжение табл. 2

1316565

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-NH CF, COOH

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-NHNH 2НС1 т

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Tyr-NHNH-Z-HCl

Н-Tyr-.D-А1а-Phe-Gly-D-Tyr-NH HC1.

1,5

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-Leu-МН НС1

0,5

20-40

Н-Tyr-D-Ala-Phe-Sar-Туг-NHNH-Z НС1

Составитель В.Волкова

Техред В.Кадар . Корректор С.Шекмар

Редактор В.Петраш

Заказ 2375/58

Тираж 347 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Н"Tyr-В-Al à-Phe-Gly-Tyr-Ser-NH СР COOH

20-30

20-40