Способ стимуляции роста культивируемых клеток млекопитающих

 

Изобретение относится к медици не и биологии, а именно к биотехнологии приготовления диагностических и профилактических препаратов. Целью изобретения является увеличение выхода клеточной биомассы. Для этого суспензии клеток культивируют в ростовой среде, содержащей эмбриональный белок альфа-фетопротеин.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН цр 4 С 12 Н 5/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4088230/31-13 (22) 02.07.86 (46) 30.10.88. Бюл. Ф 40 (71) Астраханский государственный медицинский институт им. А.В.Луначарского (72) В,М.Мирошников и P.Ô.Âèþíåâåöêèé (53) 578.085.23(088.8) (56) Голубев Б.Д. и др. Влияние сывороток крови лиц с различным онкологическим анамнезом на размножение клеток в культуре ° — Лабораторное дело, 1972, Ф 5, с. 282-285.

„Л0„„1433976 A 1 (54) СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ РОСТА КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАКЩИХ (57) Изобретение относится к медици-. не и биологии, а именно к биотехнологии приготовления диагностических и профилактических препаратов. Целью изобретения является увеличение выхода клеточной биомассы. Для этого суспензии клеток культивируют в ростовой . среде, содержащей эмбриональный белок альфа-фетопротеин.

1433976 формула и з обретения

Составитель С.Светлышев

Редактор М.Петрова Техред N.Õoäaíè÷ Корректор О.Кравцова

Заказ 5517/28 Тираж 520 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва,, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, и биологии„ а именно к биотехнологии приготовления. диагностических и профилактических препаратов.

Цель изобретения — увеличение вы., хода клеточной биомассы.

Пример 1. Для стимуляции роста культуры фибробластов эмбрионов ,человека производят общеизвестную по-;, 1Г, этапную обработку абортивного матери ала, включающую механический отбор ,кожно-мьппечной ткани зародыша, ее измельчение и многократное (5-6 раз)

;промывание раствором Хенкса с анти биотиками, трипсинизацию ткани через

3 дня после ее предварительного посе": ва на питательных сре,цах и приготов,ление клеточной суспензии.

Полученную суспензию клеток поме щают в ростовую среду, содержащую 0,5Х гидролизата лактальбумина на растворе Хенкса с 107 бычьей сывороткой (ростовая среда Р 1) из такого расчета, чтобы в 1 мл смеси содержалось

500-600 тыс. клеток. В качестве рос,товой среды можно использовать соле вой раствор Хенкса с l0X аминопептида

,и 107. стерильной лошадиной сыворотки

;(ростовая среда Ф 2).

Перед разливом в матрасы в росто;вую среду с клетками добавляют лиофи1пизированный препарат альфа-фетопроте ин, разведенный на 2 мл того же растisopa из расчета 1 ампула эмбриональ, ного белка на 250 мл среды. Матрасы

;,помещают в термостат и клетки выращи- . вают в общепринятых условиях.

Пример 2. В гинекологическом .отделении больницы в стерильные баночки получают эмбриональный материал от абразий на сроках 8-10 недель беременности. Производят отбор и из" мельчение кожно-мьппечной ткани зародьппей для извлечения фибробластов.

Ткань неоднократно тщательно промывают раствором Хенкса с добавлением антибиотиков и подвергают трипсинизации до полного ее расслоения, Из трипсинизированной ткани гoTQRHT клеточные суспензии и переносят их в

250 мл ростовой среды Ф 1 с добавлением 1 ампулы коммерческого альфафетопротеина. Матрасы с биоматериалом после инкубации в термостате содержат сплошной монослой фибробластов эмбрионов человека через 32-36 ч.

Пример 3. Готовят клеточные суспензии из эмбрионального материала по примеру 2. Полученные из трипсинизированной ткани суспензии клеток добавляют в тот же объем ростовой среды Ф 2, куда внесен разведенный в той же среде промышленный альфа-фетопротеин, Далее по примеру 2.

Предлагаемый способ стимуляции роста культуры клеток позволяет сократить время выращивания биоматериала до 32-36 ч, что в 1,5-2 раза быстрее по сравнению с известным. Исполь" зование в качестве биостимулятора выпускаемого нашей промышленностью препарата альфа-фетопротеина делают предлагаемую технологию общедоступной для всех лабораторий, работающих с культурами клеток и тканей.

Способ стимуляции роста культивируемых клеток млекопитающих, включающий выращивание культуры клеток в питательной среде со стимулятором роста, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода кле( точной биомассы, в качестве стимулятора используют эмбриональный белок альфа-фетопротеин в концентрации 0,30,5 мкг/мл.