Способ определения повреждений клеток экстремальным физическим воздействием

 

Изобретение относится к радиобиологии , медицине, селекции, касается определения степени повреждения и относительной устойчивости к действию радиации и других экстремальных факторов; С целью упрощения и ускорения способа, а также для раннего определения степени повреждения нативных клеток радиацией и другими экстремальными воздействиями путем оценки их биоэлектрических показателей для повышения точности используют для определения минимальный ток смещения (1„им ) ядер и ядрьшек до и после воздействия и по изменениям показателя судят о степени повреждения и о различиях в устойчивости объектов в к экстремальшлм воздействиям . Способ позволяет значительно ускорить исследование клеток и тканей с помощью мнкроэлектрофореза. о $ (О

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК ц 4 С 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТЙЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4181250/28-14 (22) 14.91. 87 (46) 15. 0) . 89. Бюл. И 2 (71) Харьковский государственный университет им. А.М. Горького (72) В. Г.П1ахбаэов, Т.В.Колупаева, А.Л.Набоков, Ю. Г.Шкорбатов и В.Ю.Страшнюк (53) 611.015 (088.8) (56) Бочков Н.Б. Хромосомы человека и облучение. М.: Атомиздат, 1971. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИИ

КПЕТОК ЭКСТРЕМАЛЬНЫМ ФИЗИЧЕСКИМ ВОЗДЕЙСТВИЕММ (57) Изобретение относится к радиобиологии, медицине, селекции, касается определения степени повреждения

„„SU„„1451600 A 1 и относительной устойчивости к действию радиации и других экстремальных факторов. С целью упрощения и ускорения способа, а также для раннего определения степени повреждения нативных клеток радиацией и другими экстремальными воздействиями путем оценки их биоэлектрических показателей для повышения точности используют для определения минимальный ток смещения (?„„„) ядер и ядрьппек до и после воздействия и по изменениям показателя ? „„судят о степени повреждения и о различиях в устойчивости объектов в к экстремальным воздействиям. Способ позволяет значительно а ф ускорить исследование клеток и тканей с помощью микроэлектрофореэа.

1451600

Изобретение относится к радиобиологии, медицине, селекции и может быть использовано для определения повреждения и относительной устойчивос5 ти организма к действию радиации, и других экстремальных факторов.

Цель изобретения —. упрощение и ускорение способа, а также раннее определение повреждений клеток. 10

Цель достигается тем, что, в пробах нативных клеток до и после воздействия радиации и других повреждающих факторов в процессе микроэлектрофореэа определяют минимальный ток—

Т „„смещения 10 ядер и ядрышек и по изменениям показателя Т. „„судят о степени повреждения и о различии в устойчивости объектов к экстремальным во з дей ст виям. 20

Объектами оценки повреждения являются клетки человека, растений, животных

Способ осуществляется следующим образом, Для анализа берут соскоб клеток эпителия внутренней поверхности щеки, наносят его на покровное стекло с добавлением одной капли воды и накрывают вторым покровным стеклом. Все дальнейшие исследования провбдят in

vitro. Пробы клеток буквального эпи. телия, заключенные между двумя пок ровными стеклами, подвергают действию ! высокой температуры для чего помещаУ

35 ют их во влажную камеру и погружают в водный термостат (или облучают их гамма-лучами Со, или подвергают их бо действию УФ-излучения) . Далее препа рат помещают в камеру для микроэлект-4 рофореза, представляющую собой предметное стекло, на котором на расстоянии 20 мм друг от друга укреплены платиновые электроды. Камеру устанавливают под объективом микроскопа

МБИ-3 наблюдение ведут при увеличении х 400. Выводы электродов камеры подключают к прибору для электрофореза и включают прибор. Плавно увеличиВ ая TQK определяют минимальный ток

I «, при котором 10 клеточных

50 ядер или ядрышек начинают смещаться, Пример 1. Клетки буккального эпителия человека, двух доноров воз-

55 раста 20 лет и 40 лет прогревают в о течение 20 мин при 70 С. До прогрева минималь п. и ток смещения клеточных ядер со ст авля ет для перво го донора 70 мкА, для второго 100 мкА. После прогрева I „„ — 140 мкА и 190 мкА.

Пример 2. Клетки буккального эпителия тех же доноров подвергают

60 облучению гамма-лучами Со мощностью

8 мкр/с. В контроле I „„20-летнего донора 70 мкА, 40-летнего 100 мкА.

При экспозиции 1 мин минимальный ток смещения после облучения у первого донора составляет 240 мкА, у второго

310 мкА, при экспозиции 10 мин.

I у первого донора 420 мкА, у второго 500 мкА.

Пример 3. Эпидермис 7-дневных проростков гороха берут на расстоянии

10 мм от меристемы стебля. Определяют минимальный ток смещения ядрьппек в ядрах клеток эпидермиса до и после

20-минутного прогрева. проростков при о

40 и 42 С в водном термостате. До прогрева минимальный ток смещения ядрышек составлял 150 мкА; после прогрева — 340 мкА и 420 мкА.

Пример 4. Проростки гороха подвергают облучению гамма-лучами

Со мощностью 8 мкр/с. В контроле

I 150 мкА. При экспозиции 1 мин минимапьный ток смещения после облучения составляет 290 мкА, при экспозиции 10 мин и 60 мин 380 мкА и

460 мкА.Пример 5. Проростки гороха подвергают облучению УФ-лучами.. Источник излучения — лампа ПРК-2, мощностью 375 Вт, спектр лампы 220—

380 мм, Минимальный ток смещения ядрышек в контроле составляет 120 мкА.

При экспозиции 1 мин Т „„после облучения составляет 280 мкА, при экспозиции 5 мин и 10 мин — 420 мкА и

670 мкА.

Пример 6. Минимальный ток смещения клеточных ядер слюнных желез дрозофилы определяют и норме и после прогрева в термостате при 37

D и 40 С в течение 20 мин. До прогрева минимальный ток смещения ядер слюнных желез дрозофилы составлял

220 мкА, после прогрева — 300 мкА и

340 мкА.

Фор мула изобретения

Способ определения повреждений клеток экстремальным физическим воздействием, включающий микроскопирование до и после воздействия, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, Составитель С.Рыбалкин

Т ехр ед А. Кравчук Корректор М.Демчик

Редактор И. Сегляник.

Заказ 7073/42 Тираж 788 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

1451600 а также раннего определения поврежде- рой наблюдается смещение 10 ядер ний, в процессе микроскопирования и/или ядрьппек, и при увеличении ее клетки подвергают электрофорезу, ре- значения после воздействия определягистрируют величину тока, при кото- ют повреждение.