Способ получения 5-пиперидино-7- @ n-(н-пентил)-n-( @ - оксиэтил)-амино @ -s-триазоло (1,5- @ ) пиримидина

 

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности полу 5--пиперидино-7 (н-пентил)- N (-ОКСИЭТИЛ )-аминоЗ-8-триазоло

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНЯТИЙ (21) 3884 102/23-04 (22) 16.04.85 (31) MP С 07 D/262043.8 (32) 17.04.84 (33) DD (46) 23.03.89. Бюл. ¹ 11 (71) ФЕБ Дойчес Хюдрирверк Родлебен (DD) (72) Мартина Баллнус, Эрнст Тенор, Экехард Томас, Руди Паше, Хас-10рген Мест, Ханс-Ульрих Блок, Петер Ментц и Ингрид Хайнрот (DD) (53) 547. 791.07(088.8) (56) Патент ГДР № 61269, кл. 12р 10/10, опублик. 1968.

Патент РДР № 70885, кл. С 07 д 57/18, опублик. 1970. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 5-IIHIIEPKIHHO7-1.11-(IIEHTHJI)-N-(P-OKCH3THJI)АМИН01-S-ТРИАЗОЛО(1,5-а)ПИРИМИДИНА (57) Изобретение касается гетероциклическнх веществ, в частности полу1

Изобретение относится к способу получения нового прочзводного триазолопиримидина, конкретно к способу получения 5-пиперидино-7-IN-(нпентил)-N-(P-оксиэтил)-амино3-Sтриазоло(1,5-а)пиримидина, обладающего сосудорасширяющим, инотропным, антиаритмическим действием.

Цель изобретения - получение нового производного триазолопиримидина, обладающего большей активностью, чем структурный аналог подобного действия — трапидил.

Пример 1. 18,9 г 5,7-дихлорБ-триазол(1,5-а)пиримидина раство„SU„,, 14 42 сю 4 С 07 D 487/04, А 61 K 31/395 ч ения 5-пил ериди н о- 7 L(N- (н-и ентил)—

М- (У-оксиэ тил )емин о) — S-три а зол о (1, 5-а) пиримидина, обладающего сосудорасширяющим, инотропным и антиаритмическим действием, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения - создание нового более активного соединения указанного класса. Его синтез ведут реакцией 5,7дихл ор- S-триа зол (1, 5-а) пиримидина о с н-пентилэтаноламином при 10-15 С с последующим добавлением пиперидина о при 40-50 С с проведением процесса и среде низшего спирта — этанола и выделением целевого продукта с 80Хным выходом и т. пл. 117-118 С. Новое вещество по сравнению с трапиI дилом оказывает большее торможение агрегации тромбоцитов и лучшее вли- . яние на силу сокращения сердца при токсичности LD = 230 мг/г против

150 мг/кг. 6 табл.

2 ряют или суспендируют в 50 мл этанола и при. 278-283 К медленно (при пе= ремешивании) смешивают с раствором

26,1 r н-амилэтаноламина в 25 мл этанола. После окончания добавления смесь выдерживают в течение 1 ч при 10-15 С и затем добавляют к образующейся суспензии при 20-25 С раствор 17,0 г пиперидина в 20 мл этанола. Смесь выдерживают в течение 3 ч при 40-50 С, упаривают, растворяют в 100 мл метиленхлорида, трижды промывают водой порциями по

75 мл и отделяют воду. Метиленхлорид отгоняют, а остаток подвергают кри1468423 сталлизации. После перекристаллизации из бензина получают 26,5 r 5-пипередино-7-lN-(н-пентил)-N- Q -оксиэтил)-амино)-S-триазол(1,5-..а)пирими- дина — соединение В (80 . от теоретио ческого выхода) с т. пл. 117-118 С.

Следующие примеры иллюстрируют биологическое действие полученного соединения. 10

Пример 2. Агрегация кровяных пластинок человека арахидоновой кислотой (AA) или U-46619.

9 объемов крови доноров, которые в течение 10 последних дней не принимали никаких медикаментов, обрабатывались 1 объемом 3,8 -ного раствора тринатрийцитрата и подвергались центрифугированию при 200 g при комнатной температуре в течение 10 мин.

Обогащенная пластинками плазма (ОПП) отбиралась пипеткой, покрытой сили.коном, и в течение эксперимента (максимум в течение 3 ч) хранилась при комнатной температуре. 25

Соединение В растворялось в смеси растворителей из этанола и хлороформа (1:1), одинаковые части вводились в измерительные кюветы и смесь органического растворителя вливалась в токе азота. После добавления 0,3 мм

ОПП и 0,1мл физиологического NaClраствора и предварительного выдержио вания в течение 2 мин при 37 С производилось разъединение агрегатов посредством арахидоната натрия (0,40,7 ммоль/л) или посредством ТХА .агониста U-46619 (0,2-0,8 ммоль|л).

Измерение хода агрегации производилось в соответствии с методом

Борна (Born 9.V.R. U Cross, UI:

I Physiol, 1963, 168, 178) °

Получены необходимые для 50 -ного торможения агрегации концентрации, исследуемого соединения в непосредственном сравнении с трапидилом.

В табл. 1 показано воздействие на агрегацию тромбоцитов ОПП человека соединения В по сравнению с трапидилом (PIC — равно отрицательМ ному логарифму средней молярной кон- 50 центра ции т орм ожени я ) .

Как показывают результаты табл,1, . производные обладают значительно более сильным антиагрегативным действием по сравнению с трапидилом.

Пример 3. Торможение агрегации тромбоцитов на кроликах и крысах.

Обогащенная пластинками плазма получена из цитратной крови кроликов и крыс посредством центрифугирования при 200 g при комнатной температуре. и в течение эксперимента хранилась в полимерных шприцах при комнатной температуре. При исследованиях на кроликах к 0,4 мл ОПП добавлялось к гомологичной плазме проверяемое вещество в 0,9 -ном растворе NaCl (50 мкл) и через 3 мин предварительной выдержки при 37 С вызывалась агрегация посредством арахидоновокислого натрия (75-210 ммоль/л).

Пластинки крыс подвергались сепарированию и суспендировались в буфере,Михаелиса (рН 7,4) и дефибринированной гомологичной плазме (1:1).

К 1,2 мл этой суспензии пластинок добавлялись 10 мкл раствора препарата в этаноле и через 2 мин предварительо ной выдержки при 37 С начиналась агрегация путем добавления арахидоновой кислоты (2 ммоль/1 конечную концентрацию в кюветке) . Измерение агрегации производилось нефелометрически по методу Бориа (Born 9. VR.U.Cross, UI, 1. Physiol, 1963, 168, 178) .

В табл. 2 показано торможение агрегации тромбоцитов, вызываемое арахидоновой кислотой, на кроликах и крысах in vitro., Сравнение средних молярных тормозящих концентраций (табл. 2) показывает также в этих экспериментах существенно более сильно выраженное противоагрегационное действие нового соединения о сравнению с трапидилом.

Пример 4. Воздействие на агрегацию тромбоцитов in vivo.

Интравенозная аппликация арахидоновой кислоты у кроликов вызывает агрегацию тромбоцитов, в особенности в сосудах легких,. симптомы удушья и летальный эффект. Уже в низких бессимптомно протекающих концентрациях арахидоновой кислоты агрегационное действие на основании (transienten) непосредственно после инъекции доказуемого количества свободно циркулирующих тромбоцитов в периферийной крови может быть установлено количественным путем и доказана эффективность вводимых до этого лекарственных препаратов. У ненаркотизированных кроликов обоего пола после отбора пробы из ушной вены определялось количество кровяных пластин посредством фазовоконтрастного микроскопа.

Затем вводился арахидоновокислый натрий в дозе 0,1 мг/кг ii.v.) и количество тромбоцитов после этого определялось снова через 1/2, 1, 2, 3, 5 и 10 мин. В качестве количественного критерия для вызываемой арахидоновой кислотой тромбоцитопении использовалась. площадь, ограниченная процентным снижением количества пластинок, и ее значение для животных контрольной группы принималось за

100Х. Для проверки in vivo эффективности проверяемых препаратов последние после определения индивидуальной АА-реакции невоэбудимости в виде суспензии в сверхбыстронабухающей целлюлозе вводились посредством мягкого зондд pez ога1 и описанным порядком степень тромбоцитопении снова определялась после инъекции арахидоновой кислоты через 21, 2, 4, 6 и 24 ч после введения препарата.

В табл. 3 показано. воздействие на агр егацию инъецированием арахидоновой кислоты у кроликов in vivo, Результаты табл. 3 показывают в сравнении с трапидилом превосходящую эффективность по торможению агрегации нового соединения и одновременно доказывают также er o. эффектив68423

6 индуктивного преобразователя. По сравнению с трапидилом новое производное отличается более интенсивным

5 торможением боксов тромбов.

В табл. 4 показано образование

ТХА в стимулированных арахидоновой кислотой кровяных пластинках кролика при воздействии нового соединения.

10 Пример 6. Инотропное действие.

Влияние силы сокращения сердца исследовалось на изолированном предсердии морской свинки (Rechle) . Спон15 таино действующие сердечные препараты суспендировались в 25-миллилитровых ванночках для органов с протекающим через тиродный раствор 0, а сокращения измерялись посредством механико-электрических преобразователей полуизометрически.

Новое соединение отличалось положительной изотропной эффективностью на изолированном препарате предсер25 дия морской свинки.

Необходимые для 507-ного усиления силы сокращения дозы в виде отрицательного логарифма соответствующих молярных концентраций показаны в

З0 табл. 5 и подтверждают превосходящую по сравнению с трапидилом эффективность.

:ность in viva, Пример 5. Образование ТХА2 и ее воздействие на пластинки кроликов после вызывания агрегации исследовалось с помощью арахидоновой кислоты. Получение ОПП и вызывание агрегации проводилось в условиях примера 2. Через 90 с после введения АА равные части содержимого кюветок использовались для биологического определения содержания ТХА . Определение содержания тромбоксана А производи-. лось на спирально вырезанной полоске сосуда А. Nesentezica кролика посредством суперфузионной техники. В качестве суперфузионной жидкости испо- ° льзовался раствор тирода, который для повышения селективности Blockersubstanzen веществ содержал пропранолол (5 мг/мл), пентоламин (1 мкг/мл), атропин (0,25 мкг/мл) . Чувствительность полоски сосуда определялась посредством ЕМА (9,11-эноксиметано15-LS3-гидрокси-проста-5,13-динновая кислота U-44069) в диапазоне доз 125 мг, а сокращения регистрировались на самопишущем приборе посредством

Пример 7. Острая токсичность.

Острая токсичность нового соедиЗ5 нения проверялась на самцах NMRI мышей после интраперитональный или интравенозных применений. Соединения суспендировались в быстро набухающей целлюлозе (i,р.) или растворялись в винной кислоте (i.v.) и вводились.

Определение LD fg производилось по способу Zitchf ield .и И1сохоп.

В табл. 6 показана острая токсичность на мышах ЕЭ „ .

Формула и з обр ет ения ,Способ получения 5-пиперидино-7-, t.N-(н-пентил)-N-(P-оксиэтил)-амико)— ц S-триазоло(1,5-а)пйримидина, о т л ич а в шийся тем, что, 5,7-дихлор-S-триазол(1,5-а)пиримидин подвергают взаимодействию с н-пентилэтаноламином при 10-15 С,а затем с пипери55 дином при 40-50 С, причем весь про цесс проводят в низшем спирте, предпочтительно в этаноле, с последующим выделением целевого продукта известным способом.

1468423

Таблица 1

Таблица

Соединение Доза, Тор м ожени е образоания ТХА

РIcбо

Торможение агрегации тромбоцитов (PIC ) Соедин ение

АА U-46619

50 23,8

100 52,8

150 75,2 Тр апидил

4,66

3,75

Таблица 2

РТС уд

5,09

С о един ени

Кролики Крысы

Таблица 5

4,05 2,49

4,97 3,75

Трапидил

Соединение Усиление сокращений на изолированном препарате и р едс ердия (р ED ) Таблица 3

Трапидил

Соединение Доза, мг /кг орможение вызываеой АА-тромбоцитопеии, Е, через, ч 25

Таблица 6

2 4 6 24

Соединение z.p.!

Тр апиднл 20 14 24 6 0 0

50, 90 96 74 72 17

В 10,45 67 71 48 41

150(124-194) 115(104-127)

230(193-274) 62 (62-75) Трапидил

Составитель Г. Коннова

Техред Л.Сердюкова Корректор Л. Пилипенко

Редактор С. Пекарь

Заказ 1220/59

Тираж 352

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

В

Трапидил

5,09

3,74

10 25

3,84

4,20

22,6

62,4

94,9

4,03

5,01