Способ диагностики заболеваний печени
Изобретение относится к медицине, в частности к иммунодиагностике заболеваний печени. Цель изобретения - повышение точности способа. У больного берут кровь, выделяют сыворотку и обрабатывают ею тимоциты мыши или крысы, добавляют к ним аутологичные эритроциты и подсчитывают количество аутологичных розеткообразующих клеток. При снижении их количества до 7-11% по сравнению с нормой диагностируют цирроз печени, а при повышении их числа до 28-31% - хронический гепатит. С помощью предлагаемого способа правильный диагноз был установлен в 44% случаях, в то время как по известному способу невозможно было установить правильный диагноз.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (5D 4 С 01 Х 33/53
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
llO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯ 4
ПРИ ГКНТ СССР
{21) 4187849/28-14 (22) 02.02.87 (46) 15.11.89. Бюл. V 42 (71) Курский государственный медицинский институт (72) А.И. Конопля, Н. Н. Прибылова и Л. Г. Прокопенков (53) 6 15.375(088.8) (56), Cnpa вочни к по гаст роз нт ерологии .
И.: Медицина, 1976, c. .283. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕ8АНИИ
ПЕЧЕНИ (57) Изобретение относится к медицине, в частности к иммунодиагностике
Изобретение относится к медицине, s частности к иммунодиагностике заболеваний печени.
Цел ью и зобрет ения я вля ется повышение точности способа..
Способ осуществляется следующим образом.
У больного берут 5-8 мл крови, получают из нее 2-3 мл сыворотки. Выделенные от мелкого лабораторного животного, например крысы, тимоциты (от одного животного тимоциты можно использовать в течение рабочего дня) инкубируют с сывороткой больного в течение ч при 37 С, встряхивал через 10-15,мин при этом соотношение компонентов равно 20х х10 тимоцитов/мл сыворотки. После инкубации клетки осаждают центрифугированием при 400дв течение 5 мин и
„„ЯУ„„1522104 А1
2 заболеваний печени. Цель изобретения - повышение точности способа. У больного берут кровь, выделяют сыворотку, обрабатывают ею тимоциты мыши или крысы, добавляют к ним аутологич" ные эритроциты и подсчитывают количество аутологичных розеткообразую" щих клеток. При снижении их количества до 7-111 по сравнению с нормой диагностируют цирроз печени, а при повышении их числа до 28-3 11 - хрони" ческий гепатит. С помощью предлагаемого способа правильный диагноз был установлен в 443 случаях, в то время как по известному способу невозможно было установить правильный диагноз. ресуспендируют в 1 мл среды 199. Параллельно приготавливают нативные кры- «ай синые эритроциты и тимоциты соответ- ф ( ственно в концентрациях 0 06 мл и
Э Щ
20х10 /мл среды 199. Необработанные сывороткой тимоциты (НТ) и эритроlack циты (НЭ), а та кже обработа нные с ывороткой больного тимоциты {OT) используют для постановки реакции ауто- @ розеткообразования (а-POK), которую проводят следующим образом: смешивают по 0,1 мп эритроцитов и тимоцитов из исходных приготовленных взвесей (соотношение 50:1), центрифугируют в течение 5 мин при 200.g
3» и инкубируют в течение 2 ч на холоду, после чего фиксируют глютаральдегидом и подсчитывают число à-POK. При постановке реа кции испол ьзуют следующее сочетание тимоцитов и эритро1 22104 цитов: 1,НТ+НЭ (контроль), 2. ОТ+НЭ, количество образующихся а-РОК расчитывают в 3 при подсчете на препарате не менее 300 тимоцитов. При использовании тимоцитов, обработанных сывороткой больных с хроническим гепатитом, число образующихся ауто-РОК существенно повышается по сравнению с контролем (до 28-314)..
Сыворотка больных с цирротическими изменениями печени оказывает Про-, тивоположнь1й эффект - снижается до
7-114 по сравнению с нормой.
Пример 1. Больной Б., 41 год 15 находился в клинике по поводу хронического персистирующего гепатита в стадии обострения. Предъявлял жалобы на ноющие боли в эпигастрии, иррадиирующие в поясницу при физической нагрузке. Болеет с октября 1984 г лечился в стационаре по поводу гепатита „
Обьективно - склеры субэктеричны, пониженного питания, живот болез- у ненный, в правом подреберье печень выступает на 2 см.
Лабораторные данные. кровь - эритроциты 4,0 (10 г/л) „гемоглобин
120, цветной показатель. 0,9, лейко" циты 7,1 (10 /л), эозинофилы 2, па" лочкоядсрные- 2, сегментоядерные 48, лимфоциты 40, моноциты 8, СОЭ 6мм/ч. . Общий белок 83,3 (г/л), альбумины
56,0, глобулины: и, 4,0, d .-. 7,0, 14,0, у- 19.0, соотношение.альбумин/глобулин 1,1, Билирубин общий
21,88 (ммоль/л), прямой 5,47, непрямой 16,41. Холестерин 3,64 {ммоль/л),. ферменты: аспарагинтрансфераза
0,7 ммоль (4 л), аланинтрансфераза
0,9, щелочная фосфатаза 0,5, тимоло" вая проба 2 ЕД.
У больного взято / мл-крови, получена сыворотка, которой обработали тимоциты крысы. и использовали их для постановки реакции ауто-РОК.
У этого больного с выраженной клинической картиной хронического гепа-. тита количество а-РОК после обработ,ки тимоцитов и эритроцитов существен-. но повышалось (ОТ+НЭ-303 по сравнению с контролем: НТ+НЭ-184). Таким обра" зом, у него подтверждается диагноз хронического гепатита .
Il p и м е р 2. Больной B., 55 лет, 55 находился в клинике по поводу портального цирроза печени, стадия сформировавшегося цирроза. Синдром высокой портальной гипертензии, хрон"ческая печеночная недостаточность и.. смешанно-клеточному типу. Предъявлял, жалобу на ноющие боли в правом под" реберье, вздутие живота, слабость, темный цвет мочи, желтуху.
Болеет 5 лет, когда появились боли. в пра вом подребер ье. Объекти вно: склеры и кожа с желтушным оттенком, на коже сосудистые звездочки, печень + 3 см, плотная.
Лабораторные данные: кровь - эритроциты 4,1, гемоглобин 130, цветной показатель 0,9, лейкоциты 6,4, эозинофилы 1, палочкоядерные 4, сегменто." ядерные 64. лимфоциты 29, моноциты 2, СОЭ 5 мм/ч.
Общий белок 81,7, альбумины 43,6, глобулины: „3,9 Aà 12975 / 19ф
"- 20,8, соотношение альбумин/глобулин — 0,7. Билирубин.общий 24,62, прямой 5,47, непрямой 19,15, холестерин 4,81. ферменты: аспарагинтрансфераза 0,65, ала нинтрансфераза О, 7, щелочная Фосфатаза 0,8, тимоловая проба 2 ЕД.
У больного взято 8 мл крови, получена сыворотка, которой обработали тимоциты крысы и использовали их для постановки реакции а-РОК, получены следующие результаты: ОТ + НЭ-7, HT+
+НЭ" 1 7. Та ки м обр а зом, у да н ног о 6ол ь" ного подтвердился цирроз печени.
Предлагаемый способ диагностики заболеваний печени позволяет досто" верно осуществлять дифференциальный диагноз между хроническим гепатитом и циррозом печени, При этом сокращается время для исследования, отпадает необходимость в дорогостоящих, дефи цит ных реа кти вах по сра в нению с прототипом. Техника выполнения предлагаемого способа значительно доступнее по сравнению с прототипом. Ис" пользуемые в настоящее время в большинстве лечебных учреждений способы диагностики при нетипично протекающих формах хронических поражений печени не позволяют четко разграничить хронический гепатит и цирроз печени, поэтому не приводится сравнение с об" щепринятыми в клиниках способами ди" агностики.
С помощью предлагаемого способа правильный диагноз был установлен в
443 (из 50 обследованных - 22 боль"
15221 ных с правильно поставленным диагнозом) .
Составитель В. Литовченко
Редактор К. Крупкина Техред Л.Олийнык Корректор Э. Лончакова
Заказ 6853/01 Тираж 789 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
1.13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул. Гагарина,101
В сравнительных же экспериментах по исследованию активности ферментов у людей (прототип), сыворотка которых использовалась для постановки а-РОК, было выявлено, что активность аспарагинтрансферазы, аланинтранс!
О феразы и щелочной трансферазы повышалась (причем одинаково) не только у больных хроническим гепатитом и циррозом печени, но и у людей, отра вленных ядохимикатами, и с функциональной гипербилирубинемией. Отмечен также большой разброс показателей (по прототипу) у отдельных людей, 04 6
Формула и з обретения
Способ диагностики заболеваний печени путем выделения сыворотки из крови больного с.последующим ее исследованием, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, после выделения сыворотки, ею обрабатывают тимоциты мыши или крысы, добавляют аутологичные эритроциты этих животных и подсчитывают количество аутологичных розеткообра" зующих клеток и при снижении количества розеткообразующих клеток до 7".
11ь по сравнению с нормой, диагностируют цирроз печени, а при повышении их числа до 28-313 диагностиру" ют хронический гепатит.
