Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита у детей

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к педиатрии и может быть использовано для дифференциальной диагностики пиелонефрита и гломерулонефрита у детей. Целью изобретения является повышение точности способа. Для этого в крови и моче больного определяют количество Т-лимфоцитов, рассчитывают их отношение и при значении этого показателя 1,5 и менее диагностируют гломерулонефрит, а при значении 4,5 и более - пиелонефрит. Забор крови в объеме 0,5-1,5 мл производят в пробирку, содержащую гепарин и среду 199. Мочевой осадок получают центрифугированием мочи при 3000 об/мин в течение 5-7 мин и отмывают средой 199. Затем в две пробирки вносят раствор фиколлверографина с плотностью 1,076-1,078 г/см<SP POS="POST">2</SP> и на их стенки наслаивают 1,0-1,5 мл крови и мочевого осадка, центрифугируют в течение 20-30 мин при 1500 об/мин. Интерфазный слой отсасывают пастеровской пипеткой и добавляют 1,5-2,0 мл среды 199. Отмывают полученные лимфоциты. Для определения количества Т-лимфоцитов в пробирки вносят по 0,1-0,2 мл 0,51 суспензии эритроцитов барана и добавляют равный объем взвеси лимфоцитов в концентрации 1-2<SB POS="POST">х</SB>10<SP POS="POST">6</SP> клеток/лм. Смесь инкубируют и охлаждают в течение 1 ч при 4°С. Осадок ресуспендируют и каплю суспензии переносят в камеру Горяева. Подсчитывают розеткообразующие клетки и расчитывают отношение количества Т-лимфоцитов в периферической крови к моче. Специфичность и чувствительность способа составляют соответственно 87 и 94%.

СОЮЗ СОВЕтСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (5114 С 0; э 48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕ ЕНИЯ

Н А BT0PCHGMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

CHAN

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

flO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4340416/28-14 (22) 08.12.87 (46) 30.12.89. Бкл . У. 48 (71) Киевский медицинский институт им. акад. А.А.Богомольца (72) В.Д.Чеботарева, В.Г.Майданник, В.Г.Бурлай и И.В.Багдасарова (53) 616.07(088.8) (56) Козловская Л.В. и др. — Урология и нефрология, 1975, У 1, с. 1620. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА И ПИЕЛОНЕФРИТА

У ДЕТЕЙ (57) Изобретение относится к области медицины, в частности к педиатрии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики пиелонефрита и гломерулонефрита у детей, Целью изобретения является повышение точности способа ° Для этого в крови и моче больного определяют количество Т-лимфоцитов, рассчитывают их отношение и при значении этого показателя 1,5 и менее диагностируют гломерулонефрит, а при значении 4,5 и более — пиелонефрит. Забор крови в объеме 0 5Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, и может быть использовано для диагностики пиелонефрита и гломерулонефрита у детей.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

„.80„„ : A 1

1,5 мл производят в пробирку, содер жащую гепарин и среду 199. Мочевой осадок получают центрифугированием мочи при 3000 об/мин в течение 57 мин и отмывают средой 199. Затем в две пробирки вносят раствор фиколлверографина с плотностью 1,076

1,078 г/см и на их стенки наслаива3 ют 1,0-1,5 мл крови и мочевого осадка, центрифугируют в течение 20- 10 мпн при 1500 об/мин. Интерфазный . .дu." этсасывают пастеровской пипеткой и добавляют 1,5-2,0 мл среды 199. Отмывают полученные лимфоциты. Для определения количеств» Т-лимфоцитов в ltpo бирки вносят по 0,1-0,2 мл 0,57-ной суспензии эритроцитов барана и добавляют равный объем вввесн лнмфолн- Я тов в концентрации (1-2) 10 клеток/мл

Смесь инкубируют и охлаждают в тече- ( о ние ч при +4 С. Осадок ресуспендируют и каплю суспенэии переносят в камеру Горяева. Подсчитывают розеткообразующие клетки и рассчитывают отношение количества Т-лимфоцитов в периферической крови к моче. Специфичность и чувствительность способа составляют соответственно 87 и 947.

Кровь из вены (или из пальца) в объеме 0,5-1,5 мл собирают в стекляь ную пробирку, содержащую гепарин в концентрации 20 ЕД/мл, и разбавляют средой 199 1:2. Мочевой осадок получают центрифугированием 5 мл мочи при 3000 об/мин в течение 5-7 мин и отмывают средой 199. Затем в две ро1532870 бирки с внутренним диаметром 1012 мм вносят по 1,0-1,5 мл раствора фиколл-верографина с плотностью

1,37б-1,078 г/см . устанавливают про3 бирки в наклонном положении под уго лом 45 и осторожно пастеровской пипеткой наслаивают по стенке в разные пробирки 1,0-1,5 мл разбавленной гепариниэированной крови и мочевого осад- 10 ка. После тщательного уравнонешина ния пробирку центрифугируют при ком-! натной температуре в течение 20l30 мин при 1500 o6/ìèí. После центри фугирования лимфоциты находятся в виде опалесцирующего кольца в интерфазе между плазмой и градиентом рабочего раствора фиколл-верографина. ,Интерфаэный слой отсасывают пастеров.ской пипеткой и переносят в отдельные 20 пробирки, добавляя 1,5-2 мл среды 199.

,Отмынают полученные лимфоциты, центрифугируя при 1000-1500 об/мин в те чение 5-10 мин. Эту процедуру повто ряют дважды. После отмывания лимфо циты ресуспендируют в среде 199 н объеме 0,2-0,5 мп в зависимости от их количества.

Для определения количества Т-лимфоцитон в периферической крови и моче н пробирки вносят по 0,1-0,2 мл

0,5Х-ной суспензии эритроцитов барана (ЭБ) и добанляют равный объем взвеси лимфоцитов в концентрации (1-2) 10 клеток/мл. Инкубируют смесь в течение 5 мин при 37 С, затем пробирки центрифугируют 5 мин при 5001000 об/мин и переносят в холодильник, о где выдерживают н течение 1 ч при 4 С.

После инкубации осторожным вращением

40 ресуспендируют осадок клеток и пипеткой Пастера каплю суспензии переносят н камеру Горяева. При увеличении микроскопа 400 (объектив -40, окуляр — 10) подсчитывают розеткообразующие клет- 45 ки (лимфоциты, которые прикрепили не менее трех эритроцитов) и лимфоциты, неприкрепившие ЭБ. Вычисляют процент

Т-лимфоцитов, просматривая не менее

200 лимфоцитон, в препаратах крови и мочи. Вычисляют отношение количества

Т-лимфоцитон в периферической крови и моче и при его значении 4,5 и более диагностируют пиелонефрит, а при значении 1,5 и менее — гломерулонефрит.

П р и и е р 1. Больная Б., 10 лет, поступила с диагнозом инфекции мочевых путей. При поступлении жалоб не предъявлял и поводом для госпитализации послужило обнаружение в общем анализе мочи лейкоцитурии и микропротеинурии после перенесенного гриппа, когда отмечалась также дизурия.

Данные общепринятых клинических исследований не позволили установить локализацию патологического процесса.

В периферической крови обнаружено

45Х Т-лимфоцитов, а в мочевом осадке

10Х Т-лимфоцитов, что указывало на наличие у больной пиелонефрита (соотношение Т-лимфоцитов в крови и моче 4,5) ° Этот диагноз был подтвержден данными рентгенорадиологическоro и функционального обследования.

Пример 2. Больная Н., 8 лет, диагноз: ле9коцитурия неясного генеза. После перенесенной в июле острой распираторной вирусной инфекции в общем анализе мочи выявлена лейкоцитурия. Результаты клинического и общелабораторного обследования не позволили уточнить диагноз заболевания, При исследовании в периферической крови обнаружено 52Х Т-лимфоцитов, а н мочевом осадке бХ Т-лимфоцитов. Со- отношение Т-лимфоцитов в крови и моче равно 8,7 ° Данные определения Тлимфоцитов в периферической крови и мочевом осадке были характерны для пиелонефрита, Применение функциональных тестов, обзорной и экскреторной урографии, радиоызотопной ренографии позволило выянить изменения, которые были оценены как прявления острого необструктивного пиелонефита.

Пример 3. Больной К., 7 лет, поступил с жалобами на боль в поясничной области, субфебрильную температуру, мочу темного Цвета. В анализе мочи обнаружены лейкоцитурия, эритроцитурия и микропротеинурия.

По данным определения Т-лимфоцитов в периферической крови и мочевом осадке был устанонлен диагноз — гломерулонефрит, так как н периферической крови было обнаружено 45Х Т-лимфоцитов, а н мочевом осадке ЗОХ Т-лимфоцитов. Соотношение Т-лимфоцитов в крови и моче равно 1,5. В результате проведенного комплексного клинического, лабораторного, рентгенорадиологического и урологического обследования диагноз был подтвержден.

Окончательный диагноз: острый гломерулонефрит с изолированным мочевым синдромом, активная стадия, без нарушения функции почек.

Составитель Н.Валеева

Техред Д.Олийнык

Корректор М.Шароши

Редактор Л.Веселовская

Подписное

Заказ 8094/51 Тираж 789

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 й»

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óïãoðoä, ул. Гагарина, 101

5 ! 5328

Предлагаемый способ диагностики ! заболеваний почек является наиболее эффективен. при установлении диагноза у больных пиелонефритом, особенно при его хронических, латентных формах, и больных гломерулонефритом с изолированным мочевым синдромом, когда клиническая симптоматика весьма скудная, а данные лабораторнобиохимических методик противоречивы и непостоянны. При этом специфичность и чувствительность составляют соответственно 87 и 94Х.

70 6 формулаизобретения

Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита у детей путем исследования биологической жидкости, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения точности способа, в крови и моче больного определяют количество Тлимфоцитов, рассчитывают отношение первого показателя к второму и при

его значении .1,5 и менее диагностируют гломерулонефрит, а при значении

4,5 и более — пиелонефрит.