Способ получения производных 6-метиленандроста-1,4-диен-3, 17-диона

 

Изобретение касается стероидных замещенных, в частности получения производных 6-метиленандроста-1,4-диен-3,17-диона общей фор-лы I, где R<SB POS="POST">1</SB>-H или C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил, R<SB POS="POST">2</SB>-C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил, которые обладают способностью ингибировать ароматазу, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут дегидрированием соединения ф-лы II с помощью дегидрирующего агента в среде органического растворителя (диоксана) при кипении. Новые вещества пригодны для лечения и профилактики различных эстрогензависимых заболеваний, т.е. эндометриального, яичкового и панкреатического рака молочной железы, гинекомастии, эндрометриоза, преждевременного полового созревания, мужского бесплодия, ассоциируемого с олигоспермией, и др. Токсичность LD<SB POS="POST">50</SB>*98800 мг/кг. Ингибирование ароматазы при 30 мг/кг составляет 23-71% против 7% для 4-гидрокси-4-ен-3,17-диона. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 С 07 У 1/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ПАТЕНТ У

СН2

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21 ) 4202950/23-04 (22) 13.07.87 (31) 8617107 (32) 14.07.86 (33) СВ (46) 07.03.90. Бюл. Ф 9 (7l) Фармиталиа Карло Эрба С.п.А. (IT) (72) Франко Буццетти, Натале Барбуджан, Паоло Ломбарди и Энрико ди Салле (IT) (53) 547.689.6.07 (088.8) (56) Цртент США В 4235893, кл. С 07 Х 1/00, 1983.

Cancer Res (Suppl.) 1982, 42, 3327.

Аппеп К. et al. Synthesis

1982, 34.

Brodie A.М.Н. et al. Stегоids.

1981, 38,693. .(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

6-ИЕТИЛЕНАНДРОСТА-1,4-ДИЕН-3 17ДИОНА (57) Изобретение касается стероидных замещенных, в частности получения производных 6-метиленандроста-1,4-диен3,17-диона общей фор-лы Г, Изобретение относится к способу получения новых производных 6-мети..Я0„„1549485 Д 3

2 где Б Н или С -С -алкил, R - C -С, алкил, которые обладают способностью ингибировать ароматозу, что может быть использовано в медицине. Цель— создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут дегидрированием ф-лы II с помощью дегидрирующего агента в среде органического растворителя (диоксана 1 при кипении. Новые вещества пригодны для лечения н профилактики различных эстрогензависимых заболеваний, т.е ° зндометриального, яичникового и панкреатического рака молочной железы, гинекомастии, эндометрио- р за, преждевременного полового созрева- © ния, мужского бесплодия, ассоциируемого с олигоспермией, и др. Токсичность

LDqp ) 800 мг/кг. Ингибирование арома- О© тазы при 30 мг/кг составляет 23-71Х против 77 для 4-гидрокси-4-ен-3;17f»

Диона. 1 табл. ленанДроста-l,4-диен-3,17-диона общей формулы

1549485

О

10 где Н„- водород С -С вЂ” или алкил, R — С„-С,1-алкил, обладающих фармакологическими свойст вами.

Цель изобретения — получение новых производных андроста-1,4-диен3,17-диона, обладающих способностью в большей степени ингибировать ароматозу в сравнении с известными структурными аналогами. 20

II р и м е р 1. Смесь ацетата натрия (1 Г)р хлоройорма (30 мл)р ð мальдегида диэтилового ацеталя (30 мп, 0,24 моль), хлорида фосфорила (3,8 мл, 0,04 моль) и 1Р, 7<-диметиландрост-4-ен-3,17-дион (0,849 r, 2,7 ммоль) перемешивают при температуре кипения в течение 5 ч, т.е. до исчезновения исходного вещества.

Суспензию охлаждают и при интенсивном перемешивании добавляют по каплям насыщенный раствор карбоната натрия до тех пор пока рН водного слоя не стал щелочным. Отделяют органический слой, промывают до нейтральности и высушивают сульфатом натрия. После концентрации при пониженном давлении очищают маслянистый остаток силикагелевой хроматографией с использованием смеси гексана и этилацетата в качест40 ве элюента. Таким образом, получают чистый )p,7à(-диметил-б-метиленандрост-i

4- ен-З, 1 7-дион с 60% выходом (О, 5 3 О г f, 0,530 r 1, 7g-диметил-6-метиленандрост-4-ен-3,17-диона и 0,59 г дихлордицианбензохинона нагревают с обратным холодильником в 20 мп безводного диоксана. около 15 ч. Реагирующую смесь фильтруют, удаляют в вакууме растворитель, остаток растворяют в этилацетате, органический слой промывают водой, высушивают над сульфатом натрия и растворитель выпаривают в вакууме. Сырой продукт подвергают силикагелевой хроматографии

55 с использованием 407. смеси гексана и этилацетата в качестве элюента, что дает 0,42 г чистого 1,7 -диметил-6метиленандроста-1,4-диен-3,17-диона.

HK-спектр, (KBr), см ": 3070 (=СН );

1735 (17-оксо); 1655 (3-оксо);.1625, 1595 (сопряжение: двойные связи) .

Масс-спектр 310.

Пример 2. Таблетки каждая весом по 0,150 r и содержащая 25 мг активного вещества производят следующим образом.

Состав (для 10000 таблеток), г.

M-Метил-б-метиленандроста-1,4-диен3,17-дион 252

Лактоза 800

Кукурузный крахмал 415

Порошок талька 30

Стеарат магния 5

Смешивают 7o(-метил-6-метиленандроста-1,4-диен-3 17-дион, лактозу, половину кукурузного крахмала, Смесь пропускают через сито размером 0,5 мм меш. Кукурузный крахмал (10 г) суспендируют в теплой воде (90 мл), и полученную пасту иснользуют для гранулирования порошка. Гранулят высушивают, дробят на сите с размером 1,4 мм меш, затем добавляют оставшееся количество крахмала, талька и стеарата магния, тщательно перемешивают и изготавливают таблетки.

Пример 3. Капсулы каждая по

0,2000 r и содержащая 20 мг активного вещества получают следующим образом.

Состав для 500 капсул, г:

74-Метил-6-метиленандроста-1,4-диен-3,17дион

Лактоза

1О

Найдено,7: С 81,35; Н 38,09.

С„Н е80

Вычислено,X: С 81, 44; Н 28,22.

ЯМР 0д, млн,д. . 0,90 (ЗН,д); 0,93 (ЗНс); 1,15 (3Hc); 2 31 (3H, ширс)

4,98 (2Н,M); 6,10 (1Н,д); 6,25 (1Н,д);

7,10 (1н,д).

ИК-спектр, (KBr), см 1: 3080(-СН );

1730 (17-оксо), 1650 (З-оксо), 1620, 1590 (сопряжение: двойные связи).

Масс-спектр (m/Z) 324.

В соответствии с описанной методикой и начиная с соответствующего сое- динения, можно получить 7-метил-бметиленандроста-l,4-диен-3,17-дион.

ЯМР a, млн.д.: 0,91 (ЗН,д); 0,94 (ЗН,с); 1,16 (ЗН,с);,4,97 (2Н,м);

6,14 (1Н,д); 6,27 (lH,ä); 7,08 (1Н,д).

1549485 6 доброкачественной опухоли молочной железы, эндометриоза, поликистоэной яичниковой болезни и преждевременно, го полового созревания. Другим при5 менением предлагаемых соединений является терапевтическое и/или профилактическое лечение простатической гиперплазии, болезни эстроген-зависимой ткани стромы. Новые соединения могут также найти использование для: лечения мужского бесплодия, ассоциируемого с олигоспермией, и для регулирования женской фертильности, в силу их способности ингибировать овуляцию и нидацию яйцеклетки.

В свете их высокого терапевтического индекса предлагаемые соединения могут использоваться безопасно в

20 медицине. Например, приблизительная острая токсичность (?Э д, ) предлагаемых соединений у мыши, определенная однократным введением возрастающих дозировок и измеренная на седьмой день после лечения, составляет, незначительную величину.

Например, значение Ю для пред" лагаемых соединений; 7-метил-6-метилен-1,4-диен-3 17-дион-и 1,74-диме30 тил-б-метилен-1,4-диен-3 17-дион.составляет вьппе 800 мг/кг при пероральном введении мьппи.

О

45 СН

СН 2, 5

Кукурузный крахмал 5

Стеарат магния 5

Этот состав заключают в капсулу> состоящую из двух твердых желатиновых капсул с дозой по 0,200 r каждая капсула.

Предлагаемые соединения являются ингибиторами биотрансформации мужских половых гормонов в фолликулин, т.е. они являются стероидными ингибиторами ароматазы °

Ингибирование ароматазы.предлагае мыми соединениями определяли, например, in vivo (активность яичниковой ароматазы) на крысах. Активность предлагаемых соединений: 7-метил-6метиленандроста-1,4-диен-1,17-дион и

1, R. — диметил-б-метиленандроста-1,4диен-1,17-дион, сравнивают с активностью хорошо известного ингибитора ароматазы, 4-гидроксиандрост-4-ен

3,17-дион и с активностью 7о .-метилб-метилен-1,2Р-циклопропаноандрост4-ен-3,17-дион в соответствии со сле дующей методикой.

Взрослых самок крыс дважды обрабатывали подкожно с применением 100 международных единиц гонадотропина сыворотки беременной кобылы (РМБ6) при 4-дневном интервале для того, чтобы повысить активность яичниковой ароматазы в соответствии с методикой Brodie. Через три дня после второй обработки РМЯ6 группам из 6 животных в каждой вводили перорально носитель (0,5Х метилцеплюлоза) или ингибитор в количестве 30 мг/кг, Животных убивали через 24 ч, микросомы выделяли из яичников и их ароматаза— активность определялась с использованием метода, аналогичного описанному.

Инкубации осуществляли в течение

30 мин в 1 мл инкубационного объема, содержащего 0,1 мг микросомных белков, 100 нМ 4- j Н) андростендиона и 100 мкМ NADPH. Затем вычисляли Ж ингибирования контрольной ароматаэа-активности.

Ингибирование ароматазы яичника крыс in vivo показано в таблице.

В силу их способности ингибировать ароматазу и, следовательно, . снижать уровни эстрогена, новые соединения пригодны в лечении и предупреждении различных эстроген-зависимых болезней, т.е. эндометриального яичникового и панкреатического раков молочной железы, гинекомастии, Фо р мул а из о б р е т ения

Способ получения производных 6метиленандроста-1,4-диен-3,17-диона общей формулы где R< — водород или С„-С -алкил;

С -С -алкил

4 э отличающийся тем; что проводят дегидрирование соединения

50 общей формулы

1549485 где R< и Н имеют указанные значения

3 обработкой дегидрирующим агентом в ор-! ганическом растворителе при температуре дефлегмации.

Соединение

Ингибирование ароматазы при

30 мг/кг, перорально, %

4-Гидроксиандрост4-ен-3,17-дион

74-Метил-6-метилен1 2Р-циклопропанандрост-4-ен-3 1?дион

7-Метил-6-метилен1,4-диен-3,17-дион

1,7(-Диметил-б-метилен-1,4-диен-3,17дион

71

Составитель И. Федосеева

Редактор М. Бланар Техред Л.Сердюкова: Корректор Н. Король

Заказ 147 Тираж 283 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101