Способ получения замещенных андроста - 1,4-диен-3,17-дионов

 

Изобретение касается стероидных производных , в частности, получения 4-галогензамещенных андроста-1,4-диен-3,17-дионов - биологически активных стероидов. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут обработкой 4,5-эпокси-6-метиленандрост-1-ен-3,17-диона в среде органического растворителя при 0-40°С гидрогалогенидом, например HCL, в среде ледяной CH<SB POS="POST">3</SB>C(O)OH. Брутто=ф-ла

т.пл., °С: а) C<SB POS="POST">20</SB>H<SB POS="POST">23</SB>CLO<SB POS="POST">2</SB>

148-150

б) C<SB POS="POST">20</SB>H<SB POS="POST">23</SB>BRO<SB POS="POST">2</SB>

нет

в) C<SB POS="POST">20</SB>H<SB POS="POST">23</SB>FO<SB POS="POST">2</SB>

нет. Новые вещества оказывают ингибирующее действие ароматазы яичников при дозе 30 мг/кг, например для соединения а оно составляет 57% при токсичности LD<SB POS="POST">50</SB> 800 мг/кг (орально). 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ.

СОЦИАЛИСТЬИЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (50 4 С 07 7 1/00

ВЕ:0ЮЗИАЯ

; аТ): T." 1л",йЧЕСН1Л ;, 1(3,т-, Д

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К flATEHTV

О струк туры.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4203488/23-04 (62) 4027793/04 (22) 15. 10.87 (23) 08.07.86 (31) 8517360 (32) 09.07.85 (33) СВ (46) !5.08.89 ° Бюп. И 30. (71) Фармиталиа Карло Эрба С.P,Ë. (?Т) (72) Франко Буэзетти, Натале Бар-, бугьян, Паоло Ломбарди и Энрико Ди

Салле (1Т) (53) 547.689.6.07(088.8) (56) Патент США Ф 2744 120, кл. 260-344 ° 2, 1957.

Патент Великобритании

У 2100601А, кл. А 61 К 31/565, 1973.

Brody Е.М.С. Cancer Research (Application), ч. 42, 1982, р. 3312 °

Изобретение относится к способу получения новых стероидных производных, а именно эамещенных андроста-1,4-диен-3 17-дионов.общей формулы (:Н,о где R„- галоген, которые, помимо сильного ингибирующего действия на ароматаэу в лабора„„вез„„(ЩШд А 3

2 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЗАМЕЩЕННЫХ

АНДРОСТА-1,4-ДИЕН-3 17-ДИОНОВ (57) Изобретение касается стероидных производных, в частности получения

4-галогензамещенных андроста-1,4-диен-3, 17-дионов — биологически активных стероидов. Цель — создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут обработкой 4,5-эпокси-б-метиленандрост-1-ен-3, 17-диона в среде органического растворителя при 0-40 С гидрогалогенидом, например НС1, в среде ледяной

СН С(О)ОН. Брутто-ф-ла, т.пл., С: а) С20Н. Clo. 148-150 б) Сд Н.„вг02 нет, в) С „ Н FO ; нет. Новые вещест- а ва оказывают ингибирующее действие ароматазы яичиикои при дозе 30 мг/кг, (/) например для соединения а, оно составляет 577. при токсичности 1.Р

800 мг/кг (орально). 1 табл. торных условиях, обладают также высокой эффективностью действия в живом организме по сравнению с известными структурными аналогами.

Цель изобретения — получение новых стероидных производных ряда андростана, обладающих преимуществами в фармакологическом отношении перед известными соединениями подобной

Пример 1. а). Раствор 4,5-эпокси-б-метиленандрост-1-ен-3, 17-диона (1,0 г) в ледяной уксусной кислоте (10 мп) обрабатывают газооб-.

Пример 2. Раствор 4, 5-эпокси-6 — метиленандрост-1-ен-3 17-диона

35 (1,0 r) в диэтиловом простом эфире (100 мп) обрабатывают трифторидом этерата бора (1,4 мл) в течение 3 ч при О С. Затем раствор промывают

57.-ным раствором карбоната натрия, 40 водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают под вакуумом. Остаток растворяют в пиридине (20 мл) и при 0 С добавляют 0,4 мл тионил хлорида. Спустя 5 мин добавляют воду и продукт 45 изолируют при помощи простого эфира °

Эфирные экстракты промывают 2N раствором хлористоводородной кислоты, водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают. Полученный в результате

50 неочище н ный пр одук т под в ер г ают хр оматографии на силикагеле, используя смесь гексан-этилацетат в качестве элюента, в результате чего получают

0,6 r чистого 4-фтор-6-метиленандрос55 та — 1,4-диен-3, 17-диона.

Найдено, 7.: Г 76 30; Н 7 35;

F 5,91

С„Н„РО, 3 1501923 разншм хлористым водородом в течение

30 мин при 40 С. Осадок отделяют. фильтрацией, промывают диэтиловым простым эфиром, сушат и подвергают хроматографии на силикагеле, используя смесь гексан-этилацетат с тем, чтобы получить в результате 0,8 r чистого 4-хлор †6 †метиленандроста— 1,4-диен-3 17-диона, т.пл. 148-150 Г.10 . Найдено, 7.: С 72 40; Н 6,91

С1 10,53.

С, 11„С10, Вычислено, 7: С 7261," Н 701,"

С1 10,7? ° 15

ЯИР 3, долей на миллион: 0,84 (ЗН, синглет), 1,24 (ЗН, синглет), 5,13 (1Н, синглет), 5,43 (1H, синглет), 6,37 (1Н, дублет), 7,08 (1Н, дублет). (м/Z): 330. в) Следуя описанной процедуре и исходя из соответствующего 4, 5-эпокси производного и используя соответствующую галоидоводородную кислоту, были 25 получены соединения 4-бром-6-метиленандроста-1,4-диен-3, 17-диона.

Найдено, 7.: С 63,90; Н 6,03;

Br 21,15.

С р Н 3 ВгО< 30

Вычислено, 7.: С 64,00; Н 6, 18, Вг 21,29.

Вычислено, 7.: С 76,40 Н 7,37, F 6,04.

Пример 3. Ь-Иетиленандрост-4-ен-3,17-дион (5 г) растворяют в

200 мл метанола и охлаждают до О С.

Затем добавляют охлажденную льдом

36!. Н<О (17 мл) и 27. NaOH (9 мл) .

Смесь перемешивают 1 ч, затем выдерживают при 5 С в течение 20 ч и сливают в 1400 мл ледяной воды при энергичном перемешивании, продукт отделяют фильтрацией, промывают водой и сушат, в результате чего получают 4,2 r (807.) 4,5-эпокси-6-метилендроста-3, 17-диона/ Ы /(3-эпоксидной смеси, ЯИР 8, долей на миллион: О 90 (3H, синглет); 0,97 (ЗН, синглет); 3,52 (1Н, синглет), 4,92 (1Н, широкий);

5, 06 (1Н, широкий) °

4,5-Эпокси-б-метиленандроста-3,17-дион (3 г) и дихлордицианобензохинон (1,7 г) растворяют в 60 мл безводного диоксана и нагревают до температуры дефлегмации в течение 15 ч °

Охлажденный раствор фильтруют через окись алюминия и растворитель выпаривают под вакуумом. Остаток переносят в этилацетат, органический слой промывают водой, сушат и растворитель удаляют под вакуумом. Неочищенный продукт подвергают хроматографии на силикагеле, используя смесь гексаацетат 10-407 с тем, чтобы получить в результате 1,5 r чистого 4,5-эпокси-б-метиленандрост-1-ен-3,17-диона.

ЯИР о, долей на миллион: 0,93 (3Н, синглет); 1, 13 (ЗН, синглет);

3,71 (1H, дублет), 5,03 (2Н, мультиплет), 5,86 (1Н, дублет); 6,78 (1Н, дублет).

Ингибирование ароматазы в живом организме — на крысах (in vivo) .

Взрослых самок крысы дважды обрабатывали подкожным способом при помощи 100 м. е. гонадотропного гормона сыворотки беременных лошадей (ГСБЛ) с интервалом в 4 дн. с тем, чтобы увеличить активность ароматазы яичников в соответствии с процедурой, описанной в прототипе. Через 3 дн. после второй обработки при помощи ГСБЛ группам по 6 животных в каждой давали стоматическим способом растворитель (0,57. — ный метосел) или ингибитор в концентрации 30 мг/кг. Животных усыпляли, спустя 24 ч микросомы извлекали из яичников и их активность

15019 ароматаэы определяли с использованием приема, аналогичного тому, что был описан в Q ..

Инкубацию осуществляли в течение

30 мин в 1 мл объема инкубации, со— держащем О, 1 мг микросомальных протеинов, 100 нМ 4-(Эн) андростендиона и 1.00 р М NADRH. Ингибирование в процентах активности контролируемой аро- 10 матазы рассчитывали на основе полученных данных.

Результаты ингибирования ароматаэы человеческой плаценты в лабораторных условиях и ароматазы яичников 15 крысы в живом организме приведены в таблице.

Из таблицы видно, что новое соеди-, нение 4-хлор-б-метиленандроста-1,4-диен-3 17-дион (FCE 24919) является

Э 20 очень сильным ингибитором ароматазы как при испытании в лабораторных условиях, так и при испытании на живом организме.

IIpH opRJIBHoM испытании 1п v1vo 25 новое соединение было очень эффективным, что являлось следствием его уникальной стойкости относительно эпатического обмена веществ в то время, как соединение 4-ОН-A оказывалось не30 эффективным.

Ь

Ц1 С(!2 тем, что cot

35 подвергают взаимодействию с гидрогалогенирующим агентом в среде органио

4п ческого растворителя при 0-(+40) С.

В живом организме

В лабораторных условиях

Соединение

ИК (относи тельная активность), нМ

Ингибирование ароматазы в дозе 30 мг/кг через рот, 7

44 (1,00) по определению

8240 (0,005) Неактивный

Неактивный

74 (0,59)

112 (0,39) Неактивный

57

Основным недостатком терапевтичес кого использования соединения 4 — ОН-А в качестве противоопухолевого агента при лечении женщин является необходимость его парентерального применения, так как это соединение очень интенсивно разлагается после стоматического применения.

4-Окси-андр ост-4-ен-3 17-дион (4-ОН-А)

Ь -тестололактон .! (тестолактон)

6-Метиленандрост-4-ен-3,17-дион

Андрост-1,4-диен-3,17-дион

4-Хлор-6-метил е на ндр оста-1,4-диен-3 17-дион

F 1

Ввиду высокого терапевтического показателя, предложенные соединения можно без опасений применять в медицинских целях ° Например, приблизительная острая токсичность (ЛД ) этих соединений при применении к мышам, определенная в результате разового применения возрастающих доз и измеренная на 7-й день после применения, оказалась пренебрежимо малой. Например, значение !.D о для описанного соединения (FCE 24919) выше, чем 800 мг/кг при оральном применении на людях.

Формула и з о б р е т е н и я

1. Способ получения замещенных андроста-1,4-диен-3 17-дионов общей формулы где R — галоген, отличающийся единение формулы