Способ стимулирования укоренения микропобегов вишни in viтrо
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к ускоренному размножению оздоровленного посадочного материала вишни и может найти применение в сельском хозяйстве /садоводстве/. Цель изобретения - повышение интенсивности корнеобразования IN VITRO. Способ состоит в том, что микропобеги вишни выращивают на среде Мурасиге-Скуга с добавлением в нее в качестве стимулятора корнеобразования ди/β-хлорэтил/-β-/2-бензил-бензимидазолил/этилфосфоната в количестве 4-6 мг/л, при этом культивирование осуществляют при 18-26°С в течение 25-30 дн. при 16-часовом фотопериоде и освещении 4000-5000 лк. 2 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (!9) (!!) 4 А1 (51)5 С !2 N 5/00
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А BTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ циях, ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (2l) 4458324/30-13 (22) 23.05 .88 (46) 23.03.90. Бюл. N" 11 (71) Ленинградский сельскохозяйственный институт и Латвийская сельскохозяйственная академия (72) Я.Я.Плисис и Г.Л.Матевосян (53) 578.085.23(088.8) (56) С. Snir. Micropropagation system for sour cherry. — Scientia
Horticultural, 1983, 1)) 19, р. 85-90. (54) СПОСОБ СТИИУЛЕРОВАН1И УКОРЕНЕНИЯ
МИКРОПОБЕГОВ ВИШНИ IN VITRO (57) Изобретение относится к биотехнологии, а именно к ускоренному разИзобретение относится к биотехнологии, а именно к ускоренному размножению оздоровленного посадочного материала- вишни,и может найти применение в растеневодстве.
Целью изобретения является повышение интенсивности корнеобразования.
Способ состоит в том, что укоренение микропобегов различных сортов и клонов вишни проводят на питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением в качестве стимулятора корнеобразования ди(-хлорэтил)-P-(2-бензилбензимидазолил)этилфосфоната (ЭБФ-5).
При этом наиболее эффективное укоренение микропобегов вишни достигается на агаровых средах, содержащих 46 мг/л ЭБФ-5, при 2214 С в течение
25-30 дн при 16-часовом фотопериоде и освещении 4000-5000 лк.
2 множению оздоровленно ro посадочно ro материала вишни, и может найти применение в сельском хозяйстве (садоводстве). Цель изобретения — повышение интенсивности корнеобразования in
vitro. Способ состоит в том, что микропобеги вишни выращивают на среде
Мурасиге-Скуга с добавлением в нее в качестве стимулятора корнеобразования ди(-хлорэтил)-P-(2-бензил-бензимидазолил)этилфосфоната в количестве
4-6 мг/л, при этом культивирование о осуществляют при 18-26 С в течение
25-30 дн. при 16-часовом фотопериоде и освещении 4000-5000 лк. 2 табл.
Схема опыта включает: контроль укоронение микропобегов на агаровой питательной среде, содержащей 0,5 дозы минеральных солей по РурасигеСкугу, сахарозу 20 г/л, тиамин гидрохлорид 0,8 мг/л базовый вариант инозитол 100 мг/л и бактоагара 7 г /л (pH среды 5,8-6,0); предлагаемые вариаиты — укоренение микропобегов на агаровой питательной среде базового варианта с добавкой стимулятора роста ЭБФ-5 в различных концентраПример 1. Укоренение микропобегов вишни длиной 1,2-2,0 см проводят в сосудах-пробирках 220х20 мм на 10-11 мл среде, закрытых колпаками из фольги в течение 28 дней при
22 С при 16-часовом фотопериоде в люминисцентном освещении интенспв1551740
»»остью 4000 лк. В каждом варианте используют 12 микропобегов.
Формирование корневой системы пробирочных растений оценивают по пятибальной шкале с учетом общего сос5 тояния развития микрорастений, роста микропобегов в длину, формирования зачатков корней, роста корней в длину и развития боковых корней. Выход полученных пробирочных растений определяют от общего количества экспериментальных микропобегов в каждом варианте.
Остальные примеры выполнения спо5 соба аналогичны примеру 1, изменены лишь количество ЭВФ-5 и режимы культивирования.
Анализ табл. 1-2 показывает высокую эффективность стимулятора роста
ЭБФ-5 при концентрации 6 мг/л у клонов LA u 1»В, где выход пробирочных растений с хорошо развитой корневой системой превосходит базовые варианты на 17-507 и достигает 83-1007..
Для клона SP наиболее эффективной оказалась концентрация ЭЕФ-5 4 мг/л, которая увеличивала выход пробирочных растений íà 507.. В этих вариантах отмечено общее состояние жизнеспособ- 30 ных микрорастений 4,3-4,6 балла, формирование зачатков и рост корней в длину превышали базовые варианты на
0,4-2,3 балла в зависимости от клона.
Таким образом, результаты выполненных исследований подтверждают высокую
35 эффективность препарата ЭБФ-5 в качестве стимуляторной добавки к питательной среде для укоренения микропобегов вишни, полученных на среде пролиферации ипоказывают возможность интенсивного размножения корнесобственного оздоровленного посадочного материала вишни in vitro для создания суперэлитных маточных насаждений, 45
Для интенсивного размножения пробирочных растений вишни наиболее эффективным способом является стимулирование корнеобразования, роста и развития корневой системы микропробегов на агаровой среде с добавкой активнодействующего препарата ЭБФ-5 в концентрациях 4-6 мг в сосудахпробирках в течение не более 25-30 дн, при 22+4 С, 16-часовом фотопериоде и освещении интенсивностью 40005000 лк.
Результаты влияния фитостимулятора
ЭБФ-5 на корнеобразован»»е, рост и развитие корневой систе,.»ы пробирочных растений вишни сорта Латвийская низкая (LA, SP z» MB) приведены в табл. 1.
Результаты влияния условий проращивания микропобегов на корнеобразование, рост и развитие пробирочных растений вишни при укоренении микропобегов на питательной среде с добавкой 6 мг/л ЭБФ-5 (клон 1.А) приведены в табл, 2 °
Разработанный способ стимулирования укорепения.микропобегов вишни
in vitro позволяет получить пробирочные растения, пригодные для пересадки в субстрат с выходом 83-1007., от количества использованных микропобегов, что превышает базовый вариант на 17-507 в зависимости от клона.
Формула изобретения
Способ стимулирования укоренения микропобегов вилни in vitro, включающий культивирование на питательнсй среде Мурасиге-Скуга с добавлением стимулятора корнеобразования, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повьпвения интенсивности корнеобразования, в качестве стимулятора используют ди(-хлорэтил)-8-(2-бензил-бензимидазолил)этилфосфоната в концентрации 4-6 мг/л и культивирование осуществляют в течение 25-30 дн при 18-26 С при 16-часовом фотопериоде и освещении интенсивностью
4000-5000 лк.
Таблица!
1551740
Оценка пробирочных растешп, балл
Выход пробиОпыт
Количество, шт. полученных прочэкспериментальных микропобегов рочных
Рост корней
Рост Формиропробе- вание зага в чатков длину корней
Общее состоя растений, 7 ных растений в дли— ние растений ну
3,0
2,8
2,9
2,9
2,7
2,5
2,8
2,6
2,5
3,2
3,0
2,4
2,0
1,2
0,8
1,3
1,0
1,0
4,1
4,0
4,3
4,3
4,1
3,6
Контроль 12
ЭБФ-5 (2) 12
ЭБФ-5 (4) !2
ЭБФ-5 (6) 12
ЭБФ-5 (8) 12
ЭБФ вЂ” 5 (10) 12
8
2,1
3,6
4,3
3,9
2,3
2,2
2,1
2,9
3,9
3,8
2,4
2,0
1,0
1,2
1,3
1,4
1,0
1,0
3,9
4,1
4,6
4,4
3,6
3,4
Контроль 12
ЭЕФ-5 (2) 12
ЭБФ-5 (4) 12
ЭБФ-5 (6) 12
ЭБФ-5 (8) 12
ЭБФ-5 (10) 12
7
12
6
2,0
2,7
3,7
4,2
3,6
3,3
2,1
3,1
3,6
4,4
3,8
2,2
3,2
3,8
4,2
4,4
4,0
3,0
1,3
1,2
1,4
1,2
1,2
l,0
7
12
Контроль 1 2
ЭБФ-5 (2) 12
ЭБФ-5 (4) 12
ЭБФ-5 (6) 12
ЭБФ-5 (8) 12
ЭБФ-5 (10) 12
П р и м е ч а н и е: В скобках концентрация ЭБФ-5 в мг/л.
Таблица 2
Оценка пробирочных растений, балл
Условия
Выход пробирочных
Формирование заОбщее состоя
Рост побеРост корней в длину растений,.Е ние га в длину чатков корней растения
Интенсивность
2,0
2,9
2,7
3,6 1,0 2,7
4,3 I 3 3,2
4,0 1,3 3,2
66
83
83 освещения, лк, при 16-часовом фотопериоде:
Продолжительность фотопериода, ч, при освещении интенсивностью
4000 лк:
Клон LA
66
66
66
83
66
Кло н SP
58
66
Клон УВ
58
I00
66
1551740
Продолжение табл.2
Оценка пробирочных расте— ний, балл
Условия
Выход проби— рочных
Рост побега в длину
Рост корней
Формирование заОбщее состоя растений,.Х в дличатков корней ние растену нин
4,2 1,4 3 0
4 3 1,3 32
12
16
Сроки проращивания, дн. при 16-часовом фотопериоде с освещением
4000 лк:
28
2,9
2,9
83
83
3,9 1,0 2,9
4,3 1,3 3,2
4 3 1,3 3 2
4,4, 1,2 3,0
2,0
2,8
2,9
2,8
П р и м е ч а н и е: 1" икропобеги выращивают при
?2+4 С.
Составитель В.Демкин
Редактор Н.Рогулич Техред M.Äèäûê Корректор Н.Король
Подписное
Тираж 484
Заказ 309
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101