Способ определения индивидуальной терапевтической дозы циклоспорина а при аллотрансплантации органов

 

Изобретение относится к медицине, в частности к трансплантации органов и тканей. Целью изобретения является повышение точности способа. Для достижения цели исследуют концентрации ионов кальция и калия и индексы подвижности данных ионов в эритроцитах крови. Достаточную дозу Цс А констатируют при концентрациях кальция более 10<SP POS="POST">-3</SP> Ммоль/л, концентрации калия от 80 до 100 Ммоль/л, индексе подвижности кальция от 0 до 0,8 усл.ед., индексе подвижности калия от 0 до 0,2 усл.ед. Недостаточность дозы определяют при индексе подвижности кальция более 0,8 усл.ед. и концентрации его менее 10<SP POS="POST">-3</SP> Ммоль/л. Токсичность использованной дозы определяют при индексе подвижности калия более 0,2 усл.ед. и его концентрации менее 80 Ммоль/л. Данный способ позволяет оперативно фиксировать изменения в характере действия препарата на организм и вовремя проводить коррекцию дозы. Способ может быть использован при сочетании лекарственной терапии. Использование данного способа позволяет улучшить результаты трансплантаций. Способ экономичен и пригоден для экспресс-анализа.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

COUHAËÈÑÒÈ×ЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (1) G О1 N 33 49

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСВ ГВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯ14

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4402767/28-14 1 (22) 10. 03. 88 (46) 23. 06. 90. Бюп. Р 23 (71) Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов (72) В А.Крюкова, Л.Б.Баева и Э.P Ëåâèöêèé (53) 615.475(088.8) ! (56) Тгапзр1апс. Proc. 1983, ч. 159 р. 446. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ДОЗь1 ЦИКЛОСПОРИНА

А ПРИ АЛЛОТРАНСПЛАНТАЦИИ ОРГАНОН (57) Изобретение относится к .медицине, в частности к трансплантации органов и тканей. Целью изобретения является повышение точности способа.

Для достижения цели исследуют концентрации ионов кальция и калия и индексы подвижности данных ионов в эритИзобретение относится к области медицины, в частности к трансплантации органов и тканей.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

У больного дважды в неделю в первые три месяца после операции и в дальнейшем не реже одного раза в месяц, берут 3 мп крови иэ вены до приема очередной дозы препарата. Кровь

2 роцитах крови. Достаточную дозу Цс А констатируют при концентрациях кальция более 10 .Имоль/л, концентрации калия от 80 до 100 Ммоль/л, индексе подвижности кальция от О до 0,8 усл. ед., индексе подвижности калия от О до 0,2 усл.ед. Недостаточность дозы определяют при индексе подвижности кальция более 0,8 усл.ед. и концентрации его менее 10 Ммоль/л. Токсичность использованной дозы определяют при индексе подвижности калия более

0,2 усл.ед. и его концентрации менее

80 Ммоль/л. Данный способ позволяет оперативно фиксировать изменения в характере действия препарата на организм и вовремя проводить коррекцию дозы. Способ может быть использован при сочетании лекарственной терапии., Использование данного способа позволяет улучшить результаты трансплантаций. Способ экономичен и пригоден для экспресс-анализа. помещают в пробирку с гепарином, немедленно центрифугируют при 1000 g, эритроциты отделяют от плазмы и дважды отмывают физиологическим раствором, центрифугируя суспензии при 3000 g.

Часть отмытых эрнтроцитов гемолизируют в деионизированной воде (в соотношении 1:10) и через 10 мин инкубации о при 37 С в гемолизированных эритроцитах проводят измерение концентрации кальция и калия при помощи ионоселективного анализатора электролитов. По1573423 лученные значения сравнивают с измере-, ниями по деиониэированной воде, после чего рассчитывают внутриэритроцитарное содержание этих ионов.

В другой части концентрированных отмытых эритроцитов определяют индексы подвижности ионов калия и кальция.

Для определения индексов подвижности используют скорость нарастания потек- 10 циала на ионоселектинном электроде данного типа иона, которая при отсутствии этого иона в отмывающей среде характеризует скорость его выведения

««з эритроцита. Измеряют потенциометрически нарастание потенциапа на .электроде, помещенном н суспензию отмытых н физрастворе (при отсутствии калия и кальция) концентрированных эритроцитов, через каждые 2 с в, течении 1 мин. По кривой нарастания потенциала определяют среднюю скорость и считают ее индексом подвижности данного иона в суспензиях (в усл.ед.) . 25

Таким образом, в качестве критериев направленного эффекта препарата используют показатели внутриклеточной концентрации кальция и индекса его подвижности в концентрированных эритроцитах, так как циклоспорин А (Цс А) вызывает замедление выведения кальция из клеток. И качестве критериев токсического эффекта препарата используют показатели внутриэритроци- 35 тарной концентрации калия и индекса его подвижности в концентрированных суспензиях эритроцитов, так как они характеризуют появление патологической калиевой утечки. 40

На основании полученных данных по укаэанным измерениям определяют адекватность дозы Цс А. Дозу считают достаточной, если концентрация кальция более 10 Ммоль/л, концентрация калия 45 от 80 до 100 Ммоль/л,индекс подвижности кальция от 0 до 0,8 усл.ед., ин-. декс подвижности калия от 0 до

0,2 усл.ед. В случае, если индекс по- движности кальция превышает 50

0,8 усл.ед. и концентрация кальция имеет значение менее 10 Ммоль/л действие дозы Цс А считают недостаточным, а если индекс подвижности калия превышает 0,2 усл.ед. и концентрация калия снижается менее 80 Ммоль/л, ro55 норят о токсичности дозы Цс А.

Пример 1. Больной Х., 28 лет, произведена аллатрансплантация сердца.

Назначен Цс А в дозе 600 мг в сутки.

На четвертые сутки после операции состояние больной средней тяжести, признаки криза отторжения трансплантата отсутствуют. По предлагаемому способу доза Цс А достаточна: концентрация кальция 10 Ммопь/л, индекс подвижности кальция 0,2 усл.ед., концентрация калия 100 Ммоль/л, индекс подвижности капия 0 усл.ед. По известному способу концентрация Цс А в крови, измеренная методом РХА, составляет 535 нг/мп, т.е ° так же соответствует достаточной дозе, через

5 сут при определении предлагаемым способом доза препарата достаточна: концентрация кальция 10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 0 усл.ед., концентрация калия 95 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0,2 усл .ед.

По известному способу концентрация препарата в крови в удовлетворительных пределах 480 нг/мл. Состояние больной без осложнений, признаков криза отторжения трансплантата или токсичности Цс А нет.

Еще через 3 сут предпагаемым способом определены следующие значения показателей: концентрация кальция з

10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 0,8 усл .ед., концентрация калия

80 Ммоль/л, индекс подвижности калия

0,1 усл.ед. При этом концентрация Цс А в крови 200 нг/мп. Состояние больной удовлетворительное, признаков токсического действия трансплантата нет, иммунологические исследования и данные биопсии трансплантата показывают отсутствие криза отторжения трансплантата, функция его удовлетворительна.

По данным всех исследований доза препарата достаточна.

Вывод: на протяжении всего периода обследования предлагаемым способом определяли достаточность дозы Цс А, что соответствовало дан«п«м о клиническом состоянии больной и результатам измерения концентрации препарата в крови.

Пример 2. „Больному М., 50 лет, произведена аллотрансплантация почки.

Назначен Цс А в дозе 700 мг в сутки.

Состояние больного после операции и функция трансплантата удовлетворитель««ЬИ е

На шестые сутки после трансплантации у больного были отмечены признаки

73423

5

10 тенденцию к недостаточности иммуносупрессивного действия Цс А: по анализу крови был определен лимфо- и лейкоцитоз. Однако по известному способу недостаточность действия данкой дозы препарата не выявляли, так как концентрация его в крови была

470 нг/мл.

Через 3 сут по предлагаемому способу определили следующие значения параметров: концентрация кальция

10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 0,2 усл.ед., концентрация калия

80 Ммоль/л, индекс подвижности калия

0,1 Ммоль/л, что соответствовало достаточности дозы Цс А. В клиническом состоянии больного признаков токсического действия Цс А или криза отторжения трансплантата не наблюдали.

Вывод: в примере показано, что предлагаемым способом можно зарегистрировать изменения в индивидуальной чувствительности больного к действию данной дозы Цс А, т.е. имеется повышение точности, по сравнению с известным способом (измерением концентрации Цс А в крови).

Пример 3. Больной H. 24 лет, быпа произведена аллотрансплантация почки. Назначен Цс А в дозе 600 мг в сутки. Состояние больной после операЪ 15 токсического действия Цс А. По предлагаемому способу были определены следующие значения параметров: концентрация кальция 10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 0,2 усл.ед., концентрация калия 75 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0,8 усл.ед. Это соответствовало проявлениям токсического действия препарата в клиническом состоянии больного: гипертоническому книзу, резкому подъему калия крови.

Однако по известному способу концентрация Цс А в крови у больного имела значение 410 нг/мп и не могла быть от несена к токсическим (более 700 нг/мп значениям.

На одиннадцатые сутки после операции предлагаемым способом были определены следующие значения параметров: концентрация кальция 10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 1, 0 усл.ед., концентрация калия 85 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0,15 усл.ед.

Таким образом, по предлагаемому способу зарегистрировали недостаточность действия Цс A. В клиническом состоянии больного также отметили ции и функция трансплантата удовлетворительные.

Через две недели после операции у больной предлагаемым способом определили следукяцие показатели: концентрация кальция 10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 0,3 усл.ед., концентрация калия 65 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0,25 усл.ед.

По данным значениям определили, что доза Цс A токсична. В клиническом состоянии больной также отмечали признаки токсичности: постоянное повышение артериального давления, не поддающееся коррекции лекарственной терапией. Однако по значению концентрации Цс А в крови 400 нг/мл (известный способ) токсичность данной дозы препарата не отметили

Еще через 6 сут по предлагаемому способу токсичность дозы препарата была подтверждена: концентрация калью царя 10Г Ммоль/л „индекс подвижности кальция 0,3 усл.ед., концентрация калия 50 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0,25 усл.ед. Одновременно отметили ухудшение в клиническом состоянии больной: развился гипертонический криэ (Я-210/110 мм рт.ст.) и появились боли в области сердца. Концентрация Цс А в крови повысилась до

620 нг/мл, но не имела значения, соответствующего по известному способу токсической дозе препарата. Дозу Цс А с этого момента больной стали снижать.

Вывод. при определении токсичности выбранной дозы препарата предлагаемый способ позволил своевременно решить вопрос о снижении дозы Цс А, несмотря на то, что концентрация его в крови не соответствовала характерным для токсической доэы значениям.

Пример 4. Больной Ч., 33 лет, бып обследован после повторной аллотрансплантации почки. Первая аллотрансплантация ему была произведена

14 лет назад. После второй трансплантации состояние больного и функция трансплантата были удовлетворительны.

Доза Цс А составила 600 мг/сутки.

Через семь дней после операции

;предлагаемым способом у больного определили следующие показатели: концентрация кальция 10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 1,4 усл. ед., концентрация калия 90 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0,1 усл.ед., что соответствовало недостаточности дозы

1513423

Цс А. Клинически у больного отметили увеличение числа лейкоцитов крови.

Однако по известному способу при концентрации Цс А в крови 9 10 нг/мл от5 мечали токсичность данной дозы препарата.

Через 3 сут исследования по предлагаемому способу подтвердили недостаточность дозы Цс А для больного. кон- 10 центрация кальция 10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 1,9 усл.ед., конЦентрация калия 100 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0 усл.ед. Клинически у больного сохранялся лейкоцитоз„ отметили уменьшение диуреза. Однако концентрация Цс А в крови (известный

Способ) по прежнему не соответствовала недостаточности дозы препарата.

В следующие 2 сут у больного были, отмечены клинические признаки криза отторжения трансплантата, нарастание уремической интоксикации, дальнейшее снижение диуреза, гиперкалийемия. .увеличение и уплотнение транспланта- 25 та. Больной был переведен на лечение гемодиалиэом. По предлагаемому способу на этот момент имели следующие значения исследуемых параметров: концентрация кальция 10 Ммоль/л, индекс О с ,подвижности кальция 2,0 усл .ед., концентрация калия 110 Ммоль/л, индекс .:подвижности калий О, 1 усл.ед., что подтверждало недостаточность действия препарата в данной дозе.

Вывод: предлагаемым способом недоcTBTo÷Hîñòü дозы Цс А, которая привела к необратимому кризу отторжения трансплантата у больного., была определена ранее клинических признаков этого криза, в то время как по известному способу действие даннои дозы Цс А оценивали, как токсическое.

Таким образом может быть достигнуто повышение точности в определении дозы 45 препарата.

Пример 5. Больной Ш., 26 лет. быпа произведена операция аллотрансплантации сердца. Функция трансплантата и состояние больной после операции удовлетворительное.

Через месяц после операции состояа ние больной ухудшилось: отмечали резкую анемию, развитие язвенного гастри55 та с последующим желудочно-кишечным кровотечением. Доза Цс А составляла

600 мг/сут. Концентрация Цс А в крови

480 нг/мл. По предлагаемому способу определили токсичность дозы Цс A: концентрация кальция 10 Ммоль/л, инФ декс подвижности кальция 0,9 уел.ед., концентрация калия 55 Ммоль/л, индекс подвижности калия 1, О усл.ед.

В связи с эрозивным. гастритом, для уменьшения протеолиза больной назначили тиреокачьцийтонин,- который она получала в течение 4 сут. На следующий день после начала приема тиреокальцийгонина (ТКТ) предлагаемым способом определили параметры: концентрация

-3 кальция 10 Ммоль/л, индекс подвижнос— ти кальция 0 85 усл.ед., концентрация калия 60 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0,45 усл.ед.

Через 2 сут после начала приема

ТКТ: концентрация кальция 10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 1,7 усл.ед.,„ концентрация калия 80 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0,2 усл.ед. По данным значениям видно, что к этому моменту их токсического действия Цс А стало недостаточно. Концентрация

Цс A в крови имела значение 515 кг/мл, доза препарата не изменялась.

На следующий день предлагаемым способом определили ".ледующие значения показателей: концентрация кальция

10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 1,9 усл .ед., концентрация калия

100 Ммоль/л, индекс подвижности калия

О, 1 усл .ед,, что подтверждало недостаточность дозы Цс А B данных условиях.

Поэтому было рекомендовано прекратить прием тиреокальцийтонина.

Через 4 сут после отмены TKT и снижения дозы Цс А до 500 мг в сутки определили адекватность дозы препарата: з концентрация кальция 10 Ммоль/л, индекс подвижности кальция 0,8 усл.ед., концентрация калия 100 Ммоль/л, индекс подвижности калия 0,2 усл.ед.

Вывод: предлагаемый способ позволяет определять модулирование действия Цс А другими лекарственными агентами при неизменной дозе его, которое проявляется как изменение индивидуальной чувствительности к нему в данной клинической ситуации, чем отличается от всех других известных способов.

Использование предлагаемого способа позволяет проводить динамический контроль эа действием Цс А в клинике при трансплантации органов. При этом разработаны критерии для определения характера действия Цс A (недостаточ10

1573423

Формула изобретения

Составитель П.Бонарцев

Редактор Н.Яцола Техред M.Õîäàíè÷ Корректор M.Максимишинец

Заказ 1641 Тираж 511 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент". r.ужгород, ул. Гагарина, 101 ное, токсическое, удовлетворительное), которые позволяют по результатам исследования у конкретного больного провести подбор индивидуальной дозы препарата. Способ позволяет прогнозировать появление побочных эффектов от действия препарата при его передозировке (токсическое действие) и кризов отторжения трансплантата при индивидуальной нечувствительности к дан ной дозе (недостаточное действие), учитывает модулирование действия Цс А другими лекарственными средствами и может быть использован при сочетании с лекарственной терапией. Для получения информации о действии препарата не требуется использование длительных, сложных и дорогостоящих методов, что позволяет использовать его для экспресс-диагностики.

В целом способ позволяет улучшить качество проведения. иммуносупрессивной терапии и продлить функцию трансплантированного органа. Это в свою оче- 25 редь сокращает время нахождения больных в клинике в послеоперационный период, а также предотвращает необходи- . мость повторной трансплантации. Использование предлагаемого способа снижает необходимость применения больным дорогостоящих методов лечения (искусственные органы), обследования (определение концентрации препарата, биопсийные исследования, ангиография и т.д.), а также сократить расходы на лекарственные препараты.

Способ определения индивидуальной терапевтической дозы циклоспорина А при аллотрансплантации органов путем динамического контроля за дозой препарата в крови больного, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности способа, контроль осуществляют по определению концентрации и подвижности ионов калия и кальция в эритроцитах крови и при значениях концентрации соответственно

80-100 и 10 и более Ммоль/л, а индексов подвижности 0-0,2 и 0-0,8 усл. ед. определяют дозу препарата терапевтической.