Способ получения производных 4-замещенного андростендиона, или их фармацевтически приемлемых солей

 

Изобретение относится к производным стероидов, в частности к получению производных 4-замещенного андростендиона ф-лы @ где ( @ ) означает, что (X) и (Y) независимо означают ординарную связь или двойную связь

или их формацевтически приемлемых солей, обладающих ценными фармакологическими свойствами. Цель - разработка способа получения более активных соединений указанного класса. Получение ведут восстановлением соответствующего 4-азидоандростендиона, получая соединение ф-лы 1 и, если необходимо, соединение ф-лы I, где (X) - ординарная связь, а (Y) - двойная связь, подвергают восстановлению, получая соответствующее соединение ф-лы I, где (X) и (Y) - оба ординарная связь, и, если необходимо, соединение ф-лы I, где (X) - ординарная связь, подвергают окислению, получая соответствующее соединение ф-лы I, где (X) двойная связь, если необходимо, полученные соединения ф-лы I подвергают солеобразованию. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СО(!ИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (1!) (g1)g С 07 3 1/00

1 )ИИ3

БИБДц

Н llATEHTY.фД хн, (?) О

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21 ) 4021 024/23-04 (22) 14.02.85 (31) 8503940 (32) 15.02.85 (33) СВ (46) 23.06.90. Бюл. Ф 23 (71) Фармиталиа Карло Эрба С.P.Ë.(IT) (72) Франко Фаустини, Роберто д Алессио, Виттория Вилла, Энрико ди Салле и Паоло Ломбарди (IT) (53) 547.689. 6.07 (088.8) (56) Кэмпбелл Дж.А., Бэбкок Дж.К., I. An, Chem. Бос., 81, 4069, 1959.

Djerassi. "Stегоids" San Fran, 1963, р.232. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЬЖ

4-ЗАМЕЩЕННОГО АНДРОСТЕНДИОНА ИЛИ HX

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕ1(ЛЕВЫХ СОЛЕЙ (57) Изобретение огносится к производным стероидов, в частности к полу-. чению производных 4-замещенного анд- ростендиона ф-лы о

Изобретение относится к способу получения новых производных 4-замещенного андростендиона, формулы

2 где — — — — означает, ч то (Х) и (Y) независимо означают, ординарную связь или двойную связь, или их фармацевтически приемлемых солей, обладающих ценными фармакологическими свойствами. Цель — разработка способа получения более активных соединений указанного класса. Получение ведут восстановлением соответствующего 4-азидоандростендиона (II), получая соединение ф-лы (I) и, если необходимо, соединение ф-лы (I), где (Х) — орди,нарная связь, а (7) — двойная связь, подвергают восстановлению, получая соответствующее соединение ф-лы (I), где (Х) и (Y) — оба ординарная связь, и, если необходимо, соединение

Ф-лы (I), где (Х) — ординарная связь, подвергают окислению, получая соответствующее соединение Ф-лы (I) где (Х) — двойная связь, если необходимо, полученные соединения ф-лы (I) подвергают солеобразованию . 1 табл. где — — — и (X) (Y) osначают ординарную или двойную связь, или их приемлемых для фармацевтики солей, обладающих ценными фармакологическими свойствами. . Цель изобретения — получение новых производных андростендиона, обладающих преимуществами в сравнении

I с известными, например А -тестоло .лактоном..

15741 78

Пример 1. 4-Азидоандрост-4, ен-З, 17-дион (формула (II), гпе (Х) = (Y) — ординарная связь).

К перемешиваемому раствору, состоящему из 1,0 г 4-метансульфоцилоксиандрост-4-ен-3,17-диона в 5 мл диметилформамида, добавляют 220 мг растертого в порошок азида натрия, I растворенного в 3 мл воды. Получив- 10 ,шуюся смесь нагревают при 60 С в те-

:чение 1 ч, охлаждают, приливают к

250 мл холодной воды, и экстрагируют этилацетатом (4150 мл). Перемешанные ,экстракты промывают насыщенным вод- 15, ым. раствором NaC1, сушат над На 80,1, Подвергают вакуум-выпарке, чтобы поЛучить остаток, который очищают эксЛресс-хроматографией на нейтральном

Аl 0 . Элюирование смесью н-гексан:

fIpocToH диэтиловый эфир дает 0,52 г соединения, т.пл. 142 -143 С.:

УФ (95 ; EtOH) ю 1 макс = 284 нм, 9,844.

HK (Nujol); % макс = 2) 00, 1730, 25 1670, 1590 см

ЯМР (CDCly + DN CO), 8 : 0,91 (ÇH, 6), 1,21 (ЗН, s), 3,10 (1Н,6) °

Пример 2. 4-Аэицоандрост -4-ен-3,17 дион (Формула (II), где 30 (Х) = (Y) — ординарная связь).

К перемешиваемоу раствору из 1,5 r

;4,5-эпоксиандроста-3,17-диона в 26 мл диметилсульфоксида и 0,35 мл концентрированной серной кислоты добавляют

5,2 r порошкообразного азида натрия.

Смесь нагревают при 40 С в течение

40 мин, охлаждают, приливают к 250 мл ледяной воды и экстрагируют этилацетатом (4И 00 мл). Перемешанные экст- 40 ракты обрабатывают. Получают 115 r соединения, т.пл. 142-143 С.

Пример 3. 4-Азидоандрост-4-ен-3,17-дион (формула (II), где (Х) (7) — ординарная связь).

К перемешиваемому раствору из 1,1 r бромоандрост-4-ен-3,17-диона в

57,4 мл диметилформамида добавляют

0,250 г азида натрия. Получающуюся смесь нагревают при 30-350С в тече50 ние 72 ч, охлаждают и обрабатывают.

Получают 0,467 r соединения, т.пл. (NeOH) 143-1 44О С (разл.) . (К3„ = +237 (C = 1, СНС1 ), УФ (95 EtOH) 1 мокс = 284 нм, 55

Пример 4. 4-Азидоандрост-1,4,6-трией-3,17-дион (Формула (II), где R N, Rq=R@=H, (Х) = (Х) двойная связь).

К перемешиваемому раствору из

0,5 r 6-бром- 7-ацетоксиандрост-1,4-диен-3,17-диона в 30 мл диметилформамида и 1,2 мл воды добавляют 0,11 r азида натрия. Реакционную смесь нагревают при 1 00 С в течение 45 мин, охлаждают, приливают к 500 мл ледяной воды и экстрагирук1т этилацетатом .

Перемешанные экстракты промывают водой, сушат над сульФатом натрия, фильтруют и выпаривают в вакууме, чтобы получить остаток, который очищают с помощью капиллярной хроматографии на силикагеле, Элюиров ание смесью н-гексан: этилацетат в соотношении

30-70 дает 0,28 г соединения, т.пл.

1.23-1 25 С (разл.).

СК (= +155 î (С = 0,5, СНС1 э)

ИК (Nujpl);g мс кс = 2120, 1740ь

1650, 1630, 1605, 1575 см " .

ЯМР(СПС1 ), 8 : О, 92 (ÇH,s), 1,18 (3H,s), 6,22 (1Н,dd), 6,26 (1Н,d), 6,66 (1Н,dd) 7,29(1Н,d)

Поступая аналогичным образом получают соединение и из бр, 7 -дибромандрос т- l, 4-диен-3, 1 7-диона .

Пример 5. 4-Азидоандрост-1 4диен-З, 1 7-дион (Формула .(II), где

= Ry = Н, (Х) — двойная, связь, (Y) — ординарная связь).

Соединение получают из 4-метансульфонил-оксиандрост-1,4-диен-3,17-диона и азида натрия по процедуре примера 1.

По другому варианту соединение получают из 4,5-эпоксиандрост-l-ен-3,17-диона и азида натрия, следуя примеру 4, т.пл.144-146 С (раэл.).

УФ (95% Е ХН): Ф »« = 239 нм, E= 15, 945, 9, „,окс = 303 нм, б

=. 4,490.

ИК (Nujol): 0 мок,= 2110, 1730э

1650, 1630, 1595 см .

ЯМР (СРС1 ), 8: 0,93 (ЗН, s); 1,25 .(ЗН,s) 3,15 (1Н,m) 6,27 (1Н,d);

:7,08 (1Н,й).

Пример 6. 4-Аминоандрост-4-ен-3,17-дион (формала (I), где (Х) = (Y) — ординарная связь).

К суспензии, состоящей из 3,83 г

4-азидоандрост-4-ен-3,17-диона в

600 мл свежедистиллированного безводного метанола, добавляют 9 мл пропан-l,3-дитиола и 12 мл триэтиламина. Получившуюся желтую смесь перемешивают при комнатной темпера25

5 1 5741 туре в атмосфере азота в течение 7 ч приливают в воду, повьппают рН до 2, добавляя 1 н, водный раствор НС1, промывают простым диэтиловьпч эФиром.

Водную фазу нейтрализуют 2 н.вод" ным раствором NaOH, получившийся осадок отФильтровывают, сушат и кристаллизуют из этилацетата. Получают

2,60 г соединения, т.пл.186-188 С. сЛв= +)670 (С = 1, СНС1п).

УФ (95 EtOH) 7 макс = 294 нм, 7, 354 °

SIMP (CDC1 ), о : О, 93 (ЗН, s), 1,20 (2Н, s) 290 (2Н,m) . 15

Используя методику примера 6 получены следующие соединения:

4-аминоандрост-4,6-диен-3,17-дион.(),R = НН,, R, В =Н, (Х) — ординарная связь, (Y) — двойная связь), в виде твердого вещества желтого цвета, т.пл. 148-) 50 С (разл.) . (ос), = + 199,1 (С = 1, СНС1З) .

УФ (95 EtOH): Ъм,= 347 нм, 12, 395.

ЯМР (CDC1 ), 0: 0,87 (ÇH,s); 1,00 (3H,s); 4,46 (2Н,ds), 6,01 (1Н,dd); . 6, 40 (1Н, <Ы)

4-аминоандрост-1,4-диен-3,17-дион с т.пл. 162-9 С.

ИК (KBr) макс= 3460э3370 1735»

1 665, 1 620, 1 580 см

УФ (95% ЭСОН):Ъм с = 226, K

15,509, 332, 3,293.

SIMP (СРС1. ), 8: 0,94 (ЗН,с); 1,23 35 (3H,с) 3,65 (2Н,с), 6,32 (1Н,d), 7,10 (lH d), 4-аминоандрост-1,4, б-триен-3 17дион с т.пл.206-8 C.

ИК (КВг):Я „ù,„„,= 3460, 3380, 1730, 1645, 1620, 1560 см

ЯМР (CDC1));5: 1,00 (ЗН,с); 1,19 (ЗН,с); 4,OU (ЗН,с), 5,93 (IН,дд), 6,33 (IН,д), 6,52 (1Н,дд); 7,10 (IИ, д) )

Пример 7. 4-Аминоандрост-4-ен-3,17-дион (Формула (1), где (Х)= (Y) — простая связь).

К перемешанному раствору 0,45 r

4-аминоандрост-4,б-диен-3,17-диона 50 в 20 мл простого диэтилового эфира и

40 мл жидкого аммиака небольшими порциями добавляют 0,28 г металлического лития. Полученную реакционную смесь голубого цвета перемешивают дополнительно в течение 30 мин, гасят абсолютным этиловым спиртом до исчезновения голубого цвета и дают достичь комнатной температуры. Полу78 6 ченный осадок растворяют в воде, экстрагируют простым диэтиловым эфиром и очищают. Получают 0,280 r соединения, имеющего т.пл.185-187 С.

Пример 8. 4-Аминоандрост-1,4,б-триен-3,)7-дион (Формула (I), где (Х) = (7) = двойная связь).

Раствор 0,400 r 4-аминоандрост -4,6-диен-3,17-диона в 25 мл обезвоженного бензола обрабатывают 0,400 г 2,3-дихлор-5,6-дициано-),4-бензохи ноина и нагревают при температуре дефлегмации. Реакционной смеси дают отстояться при 80 С в течение 20 ч . затем охлаждают до комнатной температуры, Фильтруют и твердую Фракцию промывают этилацетатом.

Отобранные органические фазы промывают 5 -ным раствором NaHCO, насьпценным водным раствором Нг01 и затем растворитель удаляют нри пони женном давлении. Сырой продукт очищают хроматографически на силикагеле, t используя смесь этилацетата: метанол (95:5), чтобы получить 0,180 г чистого соединения.

Я1)Р (CDC1 ), 8 : 1,00 (ЗН,C); 1,19 (3H,С); 4,00 (ÇH,С); 5,93 (1Н,дд), 6,33 (1Н,д); 7,1 0()Н,д).

ИК (KHr):9»кс = 3460 3380, 1730, 1645, )620, )560 см.

Пример 9. 4-Аминоандрост— 4,6-диен — 3,17-дионгидрохлорид (формула (I) где (Х) — простая связь, (Y) — двойная связь, как гидрохлорид) .

Раствор 0,5 г 4-аминоандрост-4,6— диен-3,17-диона в 20 мл этанола обрабатывают 16,7 мл 01 н. водным раствором НС1.Затем желтый раствор обрабатывают 0,02 г углерода, фильтруют и спирт дистиллируют при пониженном давлении. Получившийся водный раствор лиофилизуют, чтобы получить

0,54 г сухого соединения в виде порошка слегка желтоватого цвета.

По аналогичной процедуре начиная с других 4-аминовых соединений (примеры 7 и 8) получают соответствунщие гидрохлориды.

Пример 10. Таблетки, каждая весом 0,150 r, содержащая 25 мг активных веществ, выпускают со следующим составом (для 10000 таблеток),г:

4-Аминоандрост-4,6-диен-3,17-дион 250

Лактоза 800

Кукурузный крахмал . 415

1574178

Тальковый порошок 30

Стеарат магния 5

Смешивают 4-аминоандрост-4, 6-диен-3, 1 7-дион, лак тозу и половину куку рузного крахмала, Смесь затем пропускают через сито с размером 0,5 мм меш. Кукурузный крахмал (10 r) суспендируют в теплой воде (90 r), по,лучившуюся пасту используют для гра-, 10 нулирования порошка. Гранулят сушат, I пропускают через сито с размером

1,4 мм меш, затем добавляют оставшееся количество крахмала, талька и стеарата магния, тщательно перемешивают и превращают в таблетки.

Пример 11. Гоговят капсулы каждая весом 0,200 r, содержашие

20 мг активного вещества.

Состав 500 капсул, г: 20

4-Аце тиламиноандрост-4,6-диен-3 р 1 7-дHGH 10

Лактоза 80

Кукурузный крахмал 5 25

Стеарат магния 5

Эти формы выпуска помещают в твердые желатиновые капсулы, состоящие из двух частей, доза в каждой капсуле составляет 0,200 r. 30

Соединения изобретения представ ляют собой ингибиторы биотрансформации эндогенных андрогенов, т.е. стероидные ингибиторы ароматазы.

Ароматаза (эстрогенная синтетаза) — фермент, отвечающий за послед нюю ступень биосинтеза эстрогенов, превращение андрогенов в эстрогены, например андростендиона и тестосьерона в эстрон и эстрадиол соответст- 40 пенно. Ароматаза — микросоматичеслий комплекс Фермента Р450, который действует на андрогенный субстрат °

11оскольку продукты действия ароматазы, т.е. эстрогены, ответствены за рост опухолей, вызываемых действием гормонов, то соединения — ингибиторы

«роматазы изобретения можного испольэовать для лечений этих опухолей. Учитывая сказанное соединение изобрете- 5 ния можно использовать в качестве альтернативы удалению эндокринных желез, например овариэктомии, гипоФизэктомии или андренаэлектомии при лечении уже развившихся опухолей, ин- дуцируемых гормонами, например, молочной железы, поджелудочной железы, рака эндометрия и яичников, в особенности рака молочной железы. Ингибиторы ароматазы формулы (I) можно также использовать для контроля репродуктивности. Снижение уровней экстрогенов

in vivo приводит к подавлению гонадной активности и недостаточному развитию матки, ингибиторы ароматазы могут одновременно быть ингибиторами имплантации. Другая область применения соединений изобретения за ключается в лечении гипертрофии про-< статы или гиперплазии, относящейся к избыточному продуцированию эстрогена и к сдвигу отношения зстроген/андроген к более высоким показателям.

Соединения изобретения, вызывающие уменьшение образования экстрадиола, можно испольэовать для лечения нарушений фертильности у мужчин (Drugs

28,263, 1 984) . Известно, что эстрадиол может регулировать сперматогенез, а также может непрямо подавлять сперматогенез, препятствуя клеткам

Лейдига продуцировать тестостерон в большом количестве, реагируя на действие ЛГ. Соответственно уменьшенное образование эстрадиола, достигнутое путем соединений изобретения, приводит как к увеличению количества сперматозоидов, так и повышению Фертильности у больных, страдающих бесплодием из-за олигозооспермии. Степень подавления ароматазы соединениями изобретения определяют, например, как in vitro (ароматаза плаценты человека), следуя следующему способу исг ытаний.

При подавлении ароматазы Фермент-; ную систему выделяют из микросоматической Фракции ткани плаценты человека в соответствии со стандартным способом. Использовали статью

Thompson u Siiter (Thompson Е.А. и

Siiter P.Ê., I.Biol. Chem., 249, 5364, 1974), где определяют степень ароматизации, как установлено при высвобождении ЗН 0 из 4-(1Р, 2Р- Н) андростен-3,17-диона. Зсе случаи инкубирования в перемешиваемой водяной бане при 37 С в воздушной атмосфере в буферном растворе 10 М Фосфата калия при рН 7,5, в котором 100 мМ КС1 ЭДА и 1 мМ дитиотреитола. Эти эксперименты проводят в инкубационном объеме в 1 мл, содержащем 50 нИ 4-(Н) андроЭ стендиона, ингибиторы в различных концентрациях, 1QQ м1 НАДФ и 0,05 мг микросоматических белков. После инкубирования в течение 15 мин реакцию

1574178

10 прекращают путем добавления хлороформа (5 мл) . После центрифугирования при 1500 об. в течение 5 мин удаляют аликвоты (О, 5 мл) из водной Фазы для того, чтобы определить количество образовавшегося Р О. Концентрацию

5 каждого соединения, необходимого для снижения уровня контрольной ароматаэы на 50X (HK > ), определяют по 10 графику процента подавления от 1 до концентрации ингибитора. Так, в част-. ности, четыре соединения по изобретению испытаны под кодовыми номерами

FGE 24210, FGE 24566, FGE 24661 z» FGF Ф5

24928 по описанной выше процедуре с известным ингибитором ароматазы

I тестололактоном (Cancer Research

Suppe, 42, 3327S — 3333S, 1982).

Результаты ингибирования аромата- 20 зы плаценты человека in vitro приведены в таблице.

Н2 где символ — — — указывает на то,что

25 (Х) и (») независимо означают ординарную связь или двойную связь или их фармацевтически приемлемых солей, отличающийся тем, что соединение формулы

ИК (относи тельная активность in

vitro)>нМ

Соединение

8240

148

154

180

144

Данные, приведенные в таблице, 4р указывают на то, что соединения изоб-. ретения являются очень сильными ингибиторами ароматазы in vitro. Но1вые соединения, как установили, приблизительно в 55 раз действуют силь 45 нее, чем Ь -тестололактон.

Учитывая высокий терапевтический показатель этих соединений, они достаточно безопасны для использования в медицине. На ример, острая токсичность (ЛД <) соединений. изобретения

50 для мыши, определенная одним введеI 6, -Тестололактон

4-Аминоандрост-4,6-диен-3,17-дион (FGE 24210)

4-Аминоандрост.-4-ен-3,1 7-дион (FGE 24566)

4-Аминоандрост-1,4-диен-3,17-дион (FGE 24661)

4-Аминоандрост-1,4,6-триен-3,17-дион (FGE 24928),нием увеличивающихся доз и измерен ная на седьмой день после перораль ного введения, как оказывается, весь. ма незначительная.

В испытуемых дозах соединения по изобретению не проявляют признаков токсичности и их можно отнести к категории малотоксичных.

Формула изобретения

Способ получения производных

4-замещенного андростендиона общей формулы

Я) ..где (X) и (7) имен т указанные значения, подвергают восстановлению, получая соединение формулы I и,,если необходимо, соединение Формулы (I), где (Х) — ординарная связь, а (7) двойная связь, подвергают восстановлению, получая соответствующее соединение Формулы (I), где (Х) и (» ) оба ординарная связь, и, если необходимо, соединение формулы (I), где (Х) — ординарная связь, подвергают окислению; получая соответствующее соединение Формулы (I), где (Х) двойная связь, если необходимо, полученные соединения формулы (I) подвергак т солеобразованию.