Способ очистки 4 @ -дезоксидоксорубицина

 

Изобретение касается гликозидов, в частности очистки 4Ъ-дезоксидоксорубицина, используемого в качестве антибиотика в медицине. Цель - повышение качества целевого продукта. Для этого исходный сырой 4Ъ-дезоксидоксорубицин (полученный форматным гидролизом его 14-бромдаунорубицина производного) в виде 0,7%-ного водного раствора адсорбируют на колонке 300 мл из смолы СМ Сефадекс С12 (Фармация), элюируют 0,03%-ным водным раствором хлористоводородной кислоты. Реадсорбируют элюат при PH 3,8 на колонке 200 мл из смолы S112 Кастел (Монтэдисон), затем элюируют метанолом, подкисляют до PH 2 HCL-кислотой, концентрируют элюат в вакууме и добавляют ацетон для осаждения гидрохлорида целевого продукта. В этом случае последний имеет чистоту до 95,8%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 С 07 Н 15/252

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ н пдтенту

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4028858/23-04 (62) 3674607/23-04 (22) 23.01.87 (23) 16.12.83 (31) 24939 А/82 (32) 23.12.82 (33) IT (46) 30.06.90. Бюл. ¹ 24 (71) Фармиталия Карло Эрба С.п.А (IT) (72) Эрнесто Оппичи, Карло Варесио и Онорино Джиакома Роза (IT) (53) 547 ° 918.07(088.8) (54) СПОСОБ ОЧИСТКИ 4 -ДЕЗОКСИДОКСОРУБИЦИНА (57) Изобретение касается гликозидов, в частности очистки 4 - дезоксидоксорубицина, используемого в качестве

Изобретение относится к способу очистки антрациклиновых гликозидов, а именно 4 -дезоксидоксорубицина, селективной адсорбцией на смолах.

Цель изобретения — повышение качества выделяемого из реакционной массы 4 -дезоксидоксорубицина за счет снижения примесей органического или неорганического происхождения — достигается селективной адсорбцией на смоле.

Данное изобретение иллюстрирует следующие примеры.

Пример 1. Очистка 4 -дезоксидоксорубицина (прототип процесса) °

40 г 4-дезоксидоксорубицина (титр

657) суспендируют в смеси метиленхлорид-этанол в соотношении 9:i V/V

„„SU, 1575943 Д 3

2 антибиотика в медицине. Цель — повышение качества целевого продукта. Для этого исходный сырой 4 -дезокспдоксорубицин (полученный форматным гидролизом его 14-бромдаунорубицин производного) 8 виде 0,7%-ного водного раствора адсорбируют на колонке 300 мл из смолы СМ Сефадекс С12 (фармация), элюируют О,ОЗŠ— ным водным раствором хлористоводородной кислоты. Реадсорбируют элюат при рН 3,8 на колонке

200 мл из смолы S112 Кастел (Ионтэдисон), затем элюируют метанолом, подкисляют до рн 2 НС1 кислотой, концентрируют элюат в вакууме и добавляют ацетон для осаждения гидрохлорида целевого продукта. В этом случае последний имеет чистоту до 95,8Е. (1000 мл). Для более сильного перемешивания суспензии добавляют 50 r си.— ликагеля 60 (230-400 меш) и хроматографируют суспензию на колонке диаметром 10 см с 1,5 кг силикагеля 60 (260-400 меш).

Продукт первый раз элюируют смесью метиленхлорид-этанол в соотношении

9: 1 V/V (15/1), а затем смесью метиленхлорид — этанол — вода в соотношении

80: 19: 1 V/V (25, 1) ..

Элюат, содержащий продукт, концентрируют под вакуумом, подкнсляют до рН (,ф

4,5 0,1 н. соляной кислотой и осаждают диэтиловым эфиром (1500 мл). После фильтрации,. промывания диэтиловымэфиром и сушки под вакуумом получа|от

27 r 4 -дезоксидаунорубицина гидро1575943 (разл .) . Rf=O, 13 (ТСХ, буферная система с фосфатом М/15 рН 7, элюат метиленхлорид — метанол — вода 10:20:

:0,2:V/V).

Формула и з о б р е т е н и я

Составитель Г. Коннова

Техред М,Дидык Корректор O.Чипле

Редактор А.Маковская

Заказ 1793 Тираж 295 Подписное .

BHHHIIH Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101 клорида (выход 60 ); загрязненность

l0 титр 90 .

Пример 2, 15,0 r 4 -Дезокси оксорубицина, имеющего титр 69,2, Э с содержанием 12% органических примесей, а также примесей минеральных солей, растворяют в 2000 мл воды и адсорбируют на 300 мп смолы СМ Сефадекс

С12 при скорости потока 600 мл/ч. 11осле завершения адсорбции раствор элюируют 0,03%-ной соляной кислотой и по учают фракцию (6500 мл), содержащую

4 -дезоксидоксорубицин.

Указанный элюат„рН которого доводят до 3,8 путем добавления раствора гидроокиси натрия, адсорбируют на

200 мл смолы S112 Кастел при скорости потока 400 мл/ч. Продукт промывают

600 мп воды и затем элюируют метанолом, подкисленным до рН 2,0 соляной кислотой.

Получают 600 мл среднего элюата,, концентрируют под вакуумом до 60 мл.

Концентрированный раствор в условиях 25 перемешивания медленно вливают в

600 мп ацетона. Образованный осадок отфильтровывают, промывают ацетоном, высушивают и получают 4 -дезоксидоксорубицин гидрохлорида (выход 61 от теоретического) с титром 95,8% и содержанием примесей 4,2, т.пл. 163"С

Таким образом, способ позволяет

I выделять 4 -дезоксидоксорубицин в виде хлоргидрата с высоким содержанием (95,8 ) целевого продукта.!

Способ очистки 4 -дезоксидоксорубицина, полученного путем форматного гидролиза его 14-бромдаунорубицин производного, отличающийся тем, что, с целью повышения качества целевого продукта, 0,7%-ный водный раствор сырого 4 -дезоксидоксорубицина адсорбируют на колонке 300 мл из смолы СМ. Сефадекс С12 (Фармация), элюируют 0,03 -ным водным раствором хнористоводородной кислоты, реадсорбируют элюат при рН 3,8 на -колонке

200 мл из смолы 8112 Кастел (Монтэдисон), элюируют метанолом, подкисляют до рН 2,0 хлористоводородной кислотой, концентрируют элюат в вакууме и осаждают добавлением ацетона очищенный

4 -дезоксидоксорубицин в форме гидро-"

I хлорида.